一種苯醚甲環(huán)唑、丙環(huán)唑和吡唑醚菌酯復(fù)配懸浮劑及其制備方法
【專利摘要】一種苯醚甲環(huán)唑、丙環(huán)唑和吡唑醚菌酯復(fù)配懸浮劑及其制備方法，涉及農(nóng)作物殺菌組合物技術(shù)領(lǐng)域。至少由10份苯醚甲環(huán)唑、10份丙環(huán)唑、10份吡唑醚菌酯、3份脂肪醇聚氧乙烯醚、5份苯乙烯基苯酚聚氧乙烯醚、0.5份黃原膠、0.5份苯甲酸鈉、0.5份消泡劑以及補(bǔ)足至100份的去離子水制成。將原料抽入配制釜混合攪拌后經(jīng)膠體磨初研磨，再經(jīng)砂磨機(jī)細(xì)磨，取樣分析，合格后過濾、計量、包裝、入庫。本發(fā)明以10：10：10配比混用所復(fù)配的30％時的苯醚甲環(huán)唑、丙環(huán)唑和吡唑醚菌酯復(fù)配懸浮劑，可起到明顯增效作用范圍，而其它配比混用的制劑，均無法達(dá)到明顯增效作用范圍。
【專利說明】
一種苯醚甲環(huán)唑、丙環(huán)η坐和吡唑醚菌酯復(fù)配懸浮劑及其制備 方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明涉及農(nóng)作物殺菌組合物技術(shù)領(lǐng)域，具體是涉及一種苯醚甲環(huán)唑、丙環(huán)唑和 吡唑醚菌酯復(fù)配懸浮劑及其制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 目前，現(xiàn)有的用于水稻紋枯病、辣椒炭疽病以及小麥赤霉病防治的殺菌組合物，例 如中國專利"CN 103141484 Α"公開了一種"含有吡噻菌胺的殺菌組合物"，其中包括有效量 的A組分和B組分兩種活性成分，A組分是吡噻菌胺，B組分選自嘧菌酯、吡唑醚菌酯、啶氧菌 酯、烯肟菌胺、肟醚菌胺、苯醚菌酯、苯氧菌胺、丁香菌酯、唑菌酯、氰烯菌酯、丙環(huán)唑、戊唑 醇、苯醚甲環(huán)唑、腈菌唑、糠菌唑、己唑醇、葉菌唑、三唑醇、氟環(huán)唑、氟硅唑、滅菌唑、百菌清、 硫磺、多菌靈、代森錳鋅、丙森鋅、乙蒜素、甲基硫菌靈、福美雙、福美砷、克菌丹、滅菌丹、敵 銹鈉、敵磺鈉、嘧霉胺、腐霉利、異稻瘟凈、稻瘟靈、烯酰嗎啉、甲霜靈、高效苯霜靈、氟啶酰菌 胺、乙嘧酚、嘧菌環(huán)胺、氟嘧菌胺、嘧菌胺、井閃霉素、春雷霉素、多抗霉素、寡糖、寧南霉素、 咪鮮胺、惡霜靈、溴菌腈中的一種。另有中國專利"CN103548857A"公開了一種"含吡唑醚菌 酯的農(nóng)藥組合物"，其中有效活性成分包括吡唑醚菌酯和氟環(huán)唑，吡唑醚菌酯和氟環(huán)唑的質(zhì) 量比為80:1~1:80。
[0003] 發(fā)明人經(jīng)過長期試驗驗證，該上述幾種殺菌組合物主要存在如下缺陷：
[0004] 1)、通過對上述幾種殺菌組合物公開的幾種具體配比進(jìn)行試驗，發(fā)現(xiàn)對水稻紋枯 病、辣椒炭疽病以及小麥赤霉病無法起到良好的防治效果。
[0005] 2)、針對上述幾種殺菌組合物所公開的幾種劑型，經(jīng)過試驗驗證發(fā)現(xiàn)均存在不同 問題的缺陷。例如，制成的懸浮劑容易引起產(chǎn)品粘結(jié)，不易在水中分散懸浮，或堵塞噴頭，在 噴霧器中道理沉淀等現(xiàn)象，造成噴灑不勻，易使作物局部產(chǎn)生藥害，其主要原因在于助劑和 填料的選擇均存在不同的缺陷。
[0006] 3)、復(fù)配問題，通過對上述幾種殺菌組合物公開的幾種具體配比進(jìn)行毒力試驗、熱 貯穩(wěn)定性試驗以及共毒系數(shù)測定發(fā)現(xiàn)，均無法達(dá)到明顯的增效作用。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0007] 本發(fā)明的目的之一在于提供一種苯醚甲環(huán)唑、丙環(huán)唑和吡唑醚菌酯復(fù)配懸浮劑， 該懸浮劑設(shè)計合理，對如水稻紋枯病、辣椒炭疽病以及小麥赤霉病的防治效果佳，且可實現(xiàn) 苯醚甲環(huán)唑、丙環(huán)唑和吡唑醚菌酯的明顯增效作用。
[0008] 為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用了以下技術(shù)方案：
[0009] -種苯醚甲環(huán)唑、丙環(huán)唑和吡唑醚菌酯復(fù)配懸浮劑，至少由以下重量份的組分制 成： 苯醚甲環(huán)唑 10份； 丙環(huán)唑 10份； 吡唑醚菌酯 10份； 脂肪醇聚氧乙烯醚 3份；
[0010] 苯乙烯基苯酚聚氧乙烯醚 5份； 黃原膠 0.5份； 苯甲酸鈉 0.5份； 消泡劑 0,5份;： 去離子水 補(bǔ)足至100份》
[0011] 苯醚甲環(huán)唑是三唑類殺菌劑中安全性比較高的，廣泛應(yīng)用于果樹、蔬菜等作物，有 效防治黑星病，黑痘病、白腐病、斑點落葉病、白粉病、褐斑病、銹病、條銹病、赤霉病等。殺菌 譜廣，對子囊菌綱、擔(dān)子菌綱和包括鏈格孢屬、殼二孢屬、尾孢霉屬、刺盤孢屬、球痤菌屬、莖 點霉屬、柱隔孢屬、殼針孢屬、黑星菌屬在內(nèi)的半知病，白粉菌科、銹菌目及某些種傳病原菌 有持久的保護(hù)和治療作用。對葡萄炭疽病、白腐病效果也很好。葉面處理或種子處理可提高 作物的產(chǎn)量和保證品質(zhì)。
[0012] 丙環(huán)唑(propiconazole)是一種具有治療和保護(hù)雙重作用的內(nèi)吸性三唑類新型廣 譜性殺菌劑，可被根、莖、葉部吸收，并能很快地在植物株體內(nèi)向上傳導(dǎo)，防治子囊菌、擔(dān)子 菌和半知菌引起的病害，特別是對小麥全蝕病、白粉病、銹病、根腐病、水稻惡苗病、紋枯病、 香蕉葉斑病等病害具有特效，可有效地防治大多數(shù)高等真菌引起的病害，但對卵菌類病害 無效。
[0013] 吡唑醚菌酯為新型廣譜殺菌劑。作用機(jī)理:為線粒體呼吸抑制劑.即通過在細(xì)胞色 素合成中阻止電子轉(zhuǎn)移。具有保護(hù)、治療、葉片滲透傳導(dǎo)作用。吡唑醚菌酯乳油經(jīng)田間藥效 試驗結(jié)果表明對黃瓜白粉病、霜霉病和香蕉黑星病、葉斑病、菌核病等有較好的防治效果。
[0014] 本發(fā)明的苯醚甲環(huán)唑、丙環(huán)唑和吡唑醚菌酯復(fù)配懸浮劑，其有益效果表現(xiàn)在：
[0015] 1)、本發(fā)明制備的懸浮劑在懸浮率、濕篩試驗等以及熱貯穩(wěn)定性等方面均明顯優(yōu) 于其他配比所制備的產(chǎn)品。
[0016] 2)、通過實驗驗證，苯醚甲環(huán)唑、丙環(huán)唑和吡唑醚菌酯以10:10:10配比混用所復(fù)配 的30 %時的苯醚甲環(huán)唑、丙環(huán)唑和吡唑醚菌酯復(fù)配懸浮劑，可起到明顯增效作用范圍，而其 它配比混用的制劑，均無法達(dá)到明顯增效作用范圍。同時，不同配比的實際毒性并未隨著理 論毒性的增強(qiáng)而提升，實際毒性和理論毒性之間并無有規(guī)律性的變化。
[0017] 本發(fā)明的另一目的在于提供一種苯醚甲環(huán)唑、丙環(huán)唑和吡挫醚菌酯復(fù)配懸浮劑的 制備方法，將原料抽入配制釜混合攪拌后經(jīng)膠體磨初研磨，再經(jīng)砂磨機(jī)細(xì)磨，取樣分析，合 格后過濾、計量、包裝、入庫。
[0018] 本發(fā)明的苯醚甲環(huán)唑、丙環(huán)唑和吡唑醚菌酯復(fù)配懸浮劑的制備方法，制備工藝較 為簡便，易于工業(yè)化生產(chǎn)。
【具體實施方式】
[0019] 以下將結(jié)合實施例，對本發(fā)明進(jìn)行較為詳細(xì)的說明。但是，實施例內(nèi)容僅是對本發(fā) 明所作的舉例和說明，所屬本技術(shù)領(lǐng)域的技術(shù)人員對所描述的具體實施例做各種各樣的修 改或補(bǔ)充或采用類似的方式替代，只要不偏離發(fā)明的構(gòu)思或者超越本權(quán)利要求書所定義的 范圍，均應(yīng)屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍。
[0020] -、苯醚甲環(huán)唑、丙環(huán)唑和吡唑醚菌酯復(fù)配懸浮劑的制備，以及各實施例所制備的 懸浮劑的各項技術(shù)指標(biāo)的檢測結(jié)果、熱貯穩(wěn)定性試驗結(jié)果。
[0021] 實施例1
[0022] 30 %苯醚甲環(huán)唑、丙環(huán)唑和吡唑醚菌酯復(fù)配懸浮劑，各組分及其重量份如下：
L〇〇24」制備方法:將原料抽入配制釜混合攪拌后經(jīng)膠體磨初研磨，再經(jīng)砂磨機(jī)細(xì)磨，取樣 分析，合格后過濾、計量、包裝、入庫。
[0025] 實施例2
[0026] 29.5 %苯醚甲環(huán)唑、丙環(huán)唑和吡唑醚菌酯復(fù)配懸浮劑，各組分及其重量份如下：

[0029]制備方法同實施例1。
[0030] 實施例3
[0031] 29 %苯醚甲環(huán)唑、丙環(huán)唑和吡唑醚菌酯復(fù)配懸浮劑，各組分及其重量份如下：
[0033]制備方法同實施例1。
[0034] 實施例4
[0035] 30.5 %苯醚甲環(huán)唑、丙環(huán)唑和吡唑醚菌酯復(fù)配懸浮劑，各組分及其重量份如下：

[0038]制備方法同實施例1。
[0039] 實施例5
[0040] 31 %苯醚甲環(huán)唑、丙環(huán)唑和吡唑醚菌酯復(fù)配懸浮劑，各組分及其重量份如下：
[0042]制備方法同實施例1。
[0043] 實施例6
[0044] 30 %苯醚甲環(huán)唑、丙環(huán)唑和吡唑醚菌酯復(fù)配懸浮劑，各組分及其重量份如下：

[0047]制備方法同實施例1。
[0048] 實施例1~6所制備的苯醚甲環(huán)唑、丙環(huán)唑和吡唑醚菌酯復(fù)配懸浮劑，產(chǎn)品各項技 術(shù)指標(biāo)的檢測結(jié)果如表1所示，產(chǎn)品熱貯穩(wěn)定性試驗結(jié)果如表2所示。
[0049] 表1 6個實施例制備產(chǎn)品各煩桔術(shù)指標(biāo)的槍測結(jié)果

[0054] 通過表1和2可以看出，實施例1和6制備的產(chǎn)品在懸浮率、濕篩試驗等以及熱貯穩(wěn) 定性等方面均明顯優(yōu)于其他實施例所制備的產(chǎn)品。
[0055] 二、毒理學(xué)資料
[0056] 苯醚甲環(huán)唑：大鼠急性經(jīng)口 LD5Q > 5000mg/kg，大鼠急性經(jīng)皮LD5〇> 5000mg/kg，急 性毒性為低毒。
[0057] 丙環(huán)唑：大鼠急性經(jīng)口 ：雌雄LD5Q均大于5000mg/kg;大鼠急性經(jīng)皮:雌雄LD5Q均大 于5000mg/kg。
[0058] 吡唑醚菌酯：急性經(jīng)口 LD5q為> 5000mg/kg，急性經(jīng)皮LD5Q> 5000mg/kg，每日允許 攝入量:〇 · 〇4mg/kg · b · w/d。
[0059] 三、苯醚甲環(huán)唑、丙環(huán)唑和吡唑醚菌酯復(fù)配懸浮劑對水稻紋枯病的室內(nèi)生物活性 (毒力)測定。
[0060] 1、實驗?zāi)康?br>[0061] 旨在測定苯醚甲環(huán)唑、丙環(huán)唑和吡唑醚菌酯不同比例配比對水稻紋枯病的毒力， 以判斷三者不同配比對抑制水稻紋枯病是否有增效作用。
[0062] 2、試驗條件
[0063] 2.1供試靶標(biāo)
[0064]紋枯病菌試驗菌株，由安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)植病教研室提供。
[0065] 2.2培養(yǎng)條件
[0066]將室內(nèi)4 °C冰箱保存的紋枯病菌菌種轉(zhuǎn)接于PSA培養(yǎng)基上，于25 °C培養(yǎng)箱中培養(yǎng)使 其活化，經(jīng)過兩次轉(zhuǎn)接后備用。
[0067] 2.3儀器設(shè)備
[0068]電子天平(感量O.lmg)、試管、培養(yǎng)皿、壓力蒸汽滅菌器、超凈工作臺、生化培養(yǎng)箱、 移液器、接種器、打孔器（內(nèi)徑為5mm)等。
[0069] 3、試驗設(shè)計
[0070] 3.1試材準(zhǔn)備
[0071] 將紋枯病菌病原菌放在生化培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，備用。
[0072] 3.2藥劑
[0073] 95 %苯醚甲環(huán)唑(dif enoconazo Ie)原藥，創(chuàng)新美蘭(合肥)股份有限公司提供；
[0074] 95%丙環(huán)唑(propiconazole)原藥，創(chuàng)新美蘭(合肥)股份有限公司提供；
[0075] 95%吡唑醚菌酯化7瓜(：1〇81：1'〇13；[11)原藥，創(chuàng)新美蘭(合肥)股份有限公司提供；
[0076] 3.3藥劑配制
[0077] 用丙酮將實施例1-6制備的藥劑稀釋成5個系列質(zhì)量濃度。
[0078] 4、試驗方法
[0079] 參照《農(nóng)藥室內(nèi)生物測定試驗準(zhǔn)則--殺菌劑》(NY/T1156.6-2006)進(jìn)行。為了摸 索各藥劑對供試菌株的作用濃度，先進(jìn)行預(yù)備實驗。即將菌絲放置在含有較高和較低濃度 藥劑的培養(yǎng)基下進(jìn)行培養(yǎng)，估算出EC5Q，然后再根據(jù)估算的EC5Q值，將培養(yǎng)基配成其EC5Q左右 的不同濃度梯度的含藥培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。
[0080] 本試驗采用平皿菌絲生長速率法測定藥劑對紋枯病菌的毒力。具體方法如下：經(jīng) 轉(zhuǎn)接活化的紋枯病菌菌株用PSA培養(yǎng)基培養(yǎng)，待菌落長至培養(yǎng)皿四分之三大小時，用內(nèi)徑為 5mm的打孔器從邊緣打孔，打成的菌絲塊作為接種體。分別將藥劑母液加人滅菌融化的PSA 培養(yǎng)基中，充分搖勻，使藥劑最終濃度(按有效成分計算)達(dá)到不同濃度梯度。每皿倒入15mL 左右含藥培養(yǎng)基，設(shè)不加藥為對照，每處理4個重復(fù)。移接新生長的菌絲塊(直徑5mm)于平板 中央，后置于25°C溫箱內(nèi)培養(yǎng)2d(紋枯病菌）、7d(紋枯病菌)和15d(紋枯病菌）。用十字交叉 法測量菌落直徑，計算各處理凈生長量、菌絲生長抑制率。
[0081] (對照菌落直徑一菌碟直徑)一(處理菌落直徑一菌碟直徑） 菌絲生長抑制率= -----xlOO 對照菌落直徑一菌碟直徑
[0082] 式中：菌碟直徑為5mm。
[0083] 5、數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析
[0084] 將菌絲生長抑制率換算成機(jī)率值(y)，藥劑濃度(yg/mL)轉(zhuǎn)換成對數(shù)值(X)，以最小 二乘法求得毒力回歸方程(y = a+bx)。用DPS統(tǒng)計軟件對各單劑及不同混劑的濃度對數(shù)值和 相應(yīng)抑制率機(jī)率值進(jìn)行回歸分析，計算EC5q值及95 %置信限。
[0085]根據(jù)EC5q計算復(fù)配劑的實測毒力指數(shù)（ATI)、理論毒力指數(shù)（TTI)和共毒系數(shù) (CTC)O
[0086]復(fù)配劑實測毒力指數(shù)(ATI)=單劑ECW復(fù)配劑EC5q X 100
[0087]復(fù)配劑理論毒力指數(shù)(TTI) =A毒力指數(shù)XA在復(fù)配劑中含量（％ )+B毒力指數(shù)XB 在復(fù)配劑中含量（％ ) +C毒力指數(shù)X C在復(fù)配劑中含量（％ )
[0088]共毒系數(shù)（CTC)=ATI/TTIX100
[0089] 根據(jù)孫云沛法計算藥劑不同配比聯(lián)合增效比值(CTC)，CTC彡80為拮抗作用，80< CTC< 120為相加作用，CTC彡120為增效作用。
[0090] 6、結(jié)果與分析
[0091] 實施例1和6制備的懸浮劑對紋枯病的聯(lián)合毒力表現(xiàn)為明顯增效作用(共毒系數(shù)分 別達(dá)到274、277)，而實施例2-5制備的懸浮劑對紋枯病的聯(lián)合毒力僅表現(xiàn)為相加作用(共毒 系數(shù)依次為82、92、87、93)。同時，通過實施例6的實驗數(shù)據(jù)可以看出，在懸浮劑中添加了少 量的光葉花椒堿后，可使苯醚甲環(huán)唑、丙環(huán)唑和吡唑醚菌酯的復(fù)配聯(lián)合作用進(jìn)一步提升。
[0092] 四、苯醚甲環(huán)唑、丙環(huán)唑和吡唑醚菌酯復(fù)配懸浮劑對辣椒炭疽病的室內(nèi)生物活性 (毒力)測定。
[0093] 1、實驗?zāi)康?br>[0094]旨在測定苯醚甲環(huán)唑、丙環(huán)唑和吡唑醚菌酯不同比例配比對辣椒炭疽病的毒力， 以判斷三者不同配比對抑制辣椒炭疽病是否有增效作用。
[0095] 2、試驗條件
[0096] 2.1供試靶標(biāo)
[0097] 炭疽病菌試驗菌株，由安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)植病教研室提供。
[0098] 2.2培養(yǎng)條件
[0099] 將室內(nèi)4 °C冰箱保存的炭疽病菌菌種轉(zhuǎn)接于PSA培養(yǎng)基上，于25 °C培養(yǎng)箱中培養(yǎng)使 其活化，經(jīng)過兩次轉(zhuǎn)接后備用。
[0100] 2.3儀器設(shè)備
[0101 ]電子天平(感量0.1 mg)、試管、培養(yǎng)皿、壓力蒸汽滅菌器、超凈工作臺、生化培養(yǎng)箱、 移液器、接種器、打孔器（內(nèi)徑為5mm)等。
[0102] 3、試驗設(shè)計
[0103] 3.1試材準(zhǔn)備
[0104] 將炭疽病菌病原菌放在生化培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，備用。
[0105] 3.2藥劑
[0106] 95%苯醚甲環(huán)唑(difenoconazole)原藥，創(chuàng)新美蘭(合肥)股份有限公司提供。
[0107] 95%丙環(huán)唑(propiconazole)原藥，創(chuàng)新美蘭(合肥)股份有限公司提供。
[0108] 95%吡唑醚菌酯化7瓜〇1〇81：1'〇13；[11)原藥，創(chuàng)新美蘭(合肥)股份有限公司提供。
[0109] 3.3藥劑配制
[0110] 用丙酮將實施例1-6制備的藥劑稀釋成5個系列質(zhì)量濃度。
[0111] 4、試驗方法
[0112] 參照《農(nóng)藥室內(nèi)生物測定試驗準(zhǔn)則--殺菌劑》(NY/T1156.6-2006)進(jìn)行。為了摸 索各藥劑對供試菌株的作用濃度，先進(jìn)行預(yù)備實驗。即將菌絲放置在含有較高和較低濃度 藥劑的培養(yǎng)基下進(jìn)行培養(yǎng)，估算出EC5Q，然后再根據(jù)估算的EC5Q值，將培養(yǎng)基配成其EC5Q左右 的不同濃度梯度的含藥培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。
[0113] 本試驗采用平皿菌絲生長速率法測定藥劑對炭疽病菌的毒力。具體方法如下：經(jīng) 轉(zhuǎn)接活化的炭疽病菌菌株用PSA培養(yǎng)基培養(yǎng)，待菌落長至培養(yǎng)皿四分之三大小時，用內(nèi)徑為 5mm的打孔器從邊緣打孔，打成的菌絲塊作為接種體。分別將藥劑母液加人滅菌融化的PSA 培養(yǎng)基中，充分搖勻，使藥劑最終濃度(按有效成分計算)達(dá)到不同濃度梯度。每皿倒入15mL 左右含藥培養(yǎng)基，設(shè)不加藥為對照，每處理4個重復(fù)。移接新生長的菌絲塊(直徑5mm)于平板 中央，后置于25°C溫箱內(nèi)培養(yǎng)2d(炭疽病菌）、7d(炭疽病菌）和15d(炭疽病菌）。用十字交叉 法測量菌落直徑，計算各處理凈生長量、菌絲生長抑制率。
[0114] (對照菌落直徑一菌碟直徑)一(處理菌落直徑一菌碟直徑） 菌絲生長抑制率（％)= --XlOO 對照菌落直徑一菌碟直徑
[0115] 式中：菌碟直徑為5mm。
[0116] 5、數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析
[0117]將菌絲生長抑制率換算成機(jī)率值(y)，藥劑濃度(yg/mL)轉(zhuǎn)換成對數(shù)值(X)，以最小 二乘法求得毒力回歸方程(y = a+bx)。用DPS統(tǒng)計軟件對各單劑及不同混劑的濃度對數(shù)值和 相應(yīng)抑制率機(jī)率值進(jìn)行回歸分析，計算EC5q值及95 %置信限。
[0118]根據(jù)EC5O計算復(fù)配劑的實測毒力指數(shù)（ATI)、理論毒力指數(shù)（TTI)和共毒系數(shù) (CTC)O
[0119]復(fù)配劑實測毒力指數(shù)(ATI )=單劑EC5q/復(fù)配劑EC5O X 100
[0120]復(fù)配劑理論毒力指數(shù)(TTI) =A毒力指數(shù)XA在復(fù)配劑中含量（％ )+B毒力指數(shù)XB 在復(fù)配劑中含量（％ ) +C毒力指數(shù)X C在復(fù)配劑中含量（％ )
[0121] 共毒系數(shù)(CTC)=ATI/TTIX100
[0122] 根據(jù)孫云沛法計算藥劑不同配比聯(lián)合增效比值(CTC)，CTC彡80為拮抗作用，80< CTC< 120為相加作用，CTC彡120為增效作用。
[0123] 6、結(jié)果與分析
[0124] 實施例1和6制備的懸浮劑對炭疽病的聯(lián)合毒力表現(xiàn)為明顯增效作用(共毒系數(shù)分 別達(dá)到275、279)，而實施例2-5制備的懸浮劑對炭疽病的聯(lián)合毒力僅表現(xiàn)為相加作用(共毒 系數(shù)依次為81、90、88、95)。同時，通過實施例6的實驗數(shù)據(jù)可以看出，在懸浮劑中添加了少 量的光葉花椒堿后，可使苯醚甲環(huán)唑、丙環(huán)唑和吡唑醚菌酯的復(fù)配聯(lián)合作用進(jìn)一步提升。
[0125] 五、苯醚甲環(huán)唑、丙環(huán)唑和吡唑醚菌酯復(fù)配懸浮劑對小麥赤霉病的室內(nèi)生物活性 (毒力)測定。
[0126] 1、實驗?zāi)康?br>[0127] 旨在測定苯醚甲環(huán)唑、丙環(huán)唑和吡唑醚菌酯不同比例配比對小麥赤霉病的毒力， 以判斷三者不同配比對抑制小麥赤霉病是否有增效作用。
[0128] 2、試驗條件
[0129] 2.1供試靶標(biāo)
[0130] 赤霉病菌試驗菌株，由安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)植病教研室提供。
[0131] 2.2培養(yǎng)條件
[0132] 將室內(nèi)4 °C冰箱保存的赤霉病菌菌種轉(zhuǎn)接于PSA培養(yǎng)基上，于25 °C培養(yǎng)箱中培養(yǎng)使 其活化，經(jīng)過兩次轉(zhuǎn)接后備用。
[0133] 2.3儀器設(shè)備
[0134] 電子天平(感量0.1 mg)、試管、培養(yǎng)皿、壓力蒸汽滅菌器、超凈工作臺、生化培養(yǎng)箱、 移液器、接種器、打孔器（內(nèi)徑為5mm)等。
[0135] 3、試驗設(shè)計
[0136] 3.1試材準(zhǔn)備
[0137] 將赤霉病菌病原菌放在生化培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，備用。
[0138] 3.2 藥劑
[0139] 95%苯醚甲環(huán)唑(difenoconazole)原藥，創(chuàng)新美蘭(合肥)股份有限公司提供；
[0140] 95%丙環(huán)唑(propiconazole)原藥，創(chuàng)新美蘭(合肥)股份有限公司提供；
[0141 ] 95%啦唑醚菌酯(pyraclostrobin)原藥，創(chuàng)新美蘭(合肥)股份有限公司提供；
[0142] 3.3藥劑配制
[0143] 用丙酮將實施例1-6制備的藥劑稀釋成5個系列質(zhì)量濃度。
[0144] 4、試驗方法
[0145] 參照《農(nóng)藥室內(nèi)生物測定試驗準(zhǔn)則--殺菌劑》(NY/T1156.6-2006)進(jìn)行。為了摸 索各藥劑對供試菌株的作用濃度，先進(jìn)行預(yù)備實驗。即將菌絲放置在含有較高和較低濃度 藥劑的培養(yǎng)基下進(jìn)行培養(yǎng)，估算出EC5Q，然后再根據(jù)估算的EC5Q值，將培養(yǎng)基配成其EC5Q左右 的不同濃度梯度的含藥培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。
[0146] 本試驗采用平皿菌絲生長速率法測定藥劑對赤霉病菌的毒力。具體方法如下：經(jīng) 轉(zhuǎn)接活化的赤霉病菌菌株用PSA培養(yǎng)基培養(yǎng)，待菌落長至培養(yǎng)皿四分之三大小時，用內(nèi)徑為 5mm的打孔器從邊緣打孔，打成的菌絲塊作為接種體。分別將藥劑母液加人滅菌融化的PSA 培養(yǎng)基中，充分搖勻，使藥劑最終濃度(按有效成分計算)達(dá)到不同濃度梯度。每皿倒入15mL 左右含藥培養(yǎng)基，設(shè)不加藥為對照，每處理4個重復(fù)。移接新生長的菌絲塊(直徑5mm)于平板 中央，后置于25°C溫箱內(nèi)培養(yǎng)2d(赤霉病菌）、7d(赤霉病菌)和15d(赤霉病菌）。用十字交叉 法測量菌落直徑，計算各處理凈生長量、菌絲生長抑制率。
[0147] (對照菌落直徑一菌碟直徑)一(處理菌落直徑一菌碟直徑） 菌絲生長抑制率（％> = ---XlOO 對照菌落直徑一菌碟直徑
[0148] 式中：菌碟直徑為5mm。
[0149] 5、數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析
[0150] 將菌絲生長抑制率換算成機(jī)率值(y)，藥劑濃度(yg/mL)轉(zhuǎn)換成對數(shù)值(X)，以最小 二乘法求得毒力回歸方程(y = a+bx)。用DPS統(tǒng)計軟件對各單劑及不同混劑的濃度對數(shù)值和 相應(yīng)抑制率機(jī)率值進(jìn)行回歸分析，計算EC5q值及95 %置信限。
[0151]根據(jù)EC5O計算復(fù)配劑的實測毒力指數(shù)（ATI)、理論毒力指數(shù)（TTI)和共毒系數(shù) (CTC)O
[0152]復(fù)配劑實測毒力指數(shù)(ATI)=單劑ECW復(fù)配劑EC5qX 100
[0153]復(fù)配劑理論毒力指數(shù)(TTI) =A毒力指數(shù)XA在復(fù)配劑中含量（％ )+B毒力指數(shù)XB 在復(fù)配劑中含量（％ ) +C毒力指數(shù)X C在復(fù)配劑中含量（％ )
[0154] 共毒系數(shù)(CTC)=ATI/TTIX100
[0155] 根據(jù)孫云沛法計算藥劑不同配比聯(lián)合增效比值(CTC)，CTC彡80為拮抗作用，80< CTC< 120為相加作用，CTC彡120為增效作用。
[0156] 6、結(jié)果與分析
[0157] 實施例1和6制備的懸浮劑對赤霉病的聯(lián)合毒力表現(xiàn)為明顯增效作用(共毒系數(shù)分 別達(dá)到272、274)，而實施例2-5制備的懸浮劑對赤霉病的聯(lián)合毒力僅表現(xiàn)為相加作用(共毒 系數(shù)依次為81、92、88、94)。同時，通過實施例6的實驗數(shù)據(jù)可以看出，在懸浮劑中添加了少 量的光葉花椒堿后，可使苯醚甲環(huán)唑、丙環(huán)唑和吡唑醚菌酯的復(fù)配聯(lián)合作用進(jìn)一步提升。
【主權(quán)項】
1. 一種苯酸甲環(huán)挫、丙環(huán)挫和化挫酸菌醋復(fù)配懸浮劑，其特征在于:至少由W下重量份 的組分制成： 苯雕甲環(huán)座 10份. 丙環(huán)嗤 10份； B比嗤職菌醋 10份； 脂肪醇聚氧己嫌離 3份； 苯乙締基苯酷聚氧乙締酸 5份； 黃原膠 0.5份； 苯甲酸鋼 0.5份； 消泡劑 0.5份； 去離子水 補(bǔ)足至100份。2. -種制備如權(quán)利要求1所述苯酸甲環(huán)挫、丙環(huán)挫和化挫酸菌醋復(fù)配懸浮劑的方法，其 特征在于:將原料抽入配制蓋混合攬拌后經(jīng)膠體磨初研磨，再經(jīng)砂磨機(jī)細(xì)磨，取樣分析，合 格后過濾、計量、包裝、入庫。
【文檔編號】A01N25/04GK105961421SQ201610325185
【公開日】2016年9月28日
【申請日】2016年5月13日
【發(fā)明人】徐長才, 毛堂富
【申請人】創(chuàng)新美蘭（合肥）股份有限公司