一種平歐雜種榛組培快繁育苗的方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種平歐雜種榛組培快繁育苗的方法，屬于農(nóng)業(yè)技術領域。該育苗方法包括（1）外植體選擇及消毒、（2）誘導培養(yǎng)、（3）增殖組培快繁培養(yǎng)、（4）生根培養(yǎng)以及（5）馴化及移栽。本發(fā)明系統(tǒng)的進行了平歐雜種榛組培快繁育苗研究工作，并實現(xiàn)由實驗室規(guī)模向產(chǎn)業(yè)化規(guī)模的轉(zhuǎn)變；降低了育苗成本，豐富了榛子繁育理論，實現(xiàn)了高質(zhì)量快速繁育；使平歐雜種榛的生根率達到98%，移栽成活率可達到95%左右，具有良好的應用前景。
【專利說明】
一種平歐雜種榛組培快繁育苗的方法
技術領域
[0001] 本發(fā)明涉及農(nóng)業(yè)繁育技術領域，尤其涉及一種平歐雜種榛組培快繁育苗的方法。
【背景技術】
[0002] 榛子是重要的木本油料樹種，是世界四大干堅果之一，世界主要栽培品種來自歐 洲榛。榛子因營養(yǎng)價值豐富、經(jīng)濟價值高被稱為"堅果之王"。目前，中國推廣的榛子為平榛 與歐洲榛的雜交品種，稱為平歐雜種榛。平歐雜種榛具有果大、豐產(chǎn)、抗寒、耐旱等特點的優(yōu) 良棒子品種。
[0003] 據(jù)統(tǒng)計，我國榛子市場需求量有100多萬噸的缺口，大力發(fā)展榛子產(chǎn)業(yè)是解決供需 矛盾的突破點，有著廣闊的市場前景。優(yōu)質(zhì)苗木的供給是平歐雜種榛大規(guī)模推廣的基礎。目 前，我國榛子苗木生產(chǎn)以傳統(tǒng)的根蘗繁殖為主，苗木價格高，制約了榛子產(chǎn)業(yè)的發(fā)展。而組 培快繁育苗技術可以快速高效地繁育出適合當?shù)貧夂蛱攸c的優(yōu)良新品種，提升我國榛子繁 育技術能力，促進我國榛子產(chǎn)業(yè)發(fā)展，對當?shù)亟?jīng)濟社會發(fā)展以及農(nóng)民脫貧致富具有重要意 義。以組培快繁技術取代傳統(tǒng)繁殖是一種必然的發(fā)展趨勢。但是由于榛子樹體內(nèi)含有較多 單寧物，其組織培養(yǎng)很困難，培養(yǎng)過程中容易出現(xiàn)污染率高、易玻璃化、繁殖效率低、試管苗 生長慢等限制限制試管苗工廠化生產(chǎn)的問題，因而國內(nèi)外對榛子組織培養(yǎng)成功的報道較 少。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明的目的在于提供一種平歐雜種榛組培快繁育苗的方法。
[0005] 本發(fā)明采用以下技術方案： 一種平歐雜種榛組培快繁育苗的方法，其特征在于，它主要包括以下步驟： (1) 外植體選擇及消毒:選取大田一年生無病蟲害、無機械損傷的平歐雜種榛嫩枝條， 修剪成帶有1-2個腋芽的莖段，用流水沖洗干凈，然后在無菌條件下置于70%的酒精溶液中 浸泡30s，再用0.1%升萊滅菌8min，最后用無菌水浸洗6~7次，每次lmin，作為外植體待 用； (2) 誘導培養(yǎng):將外植體接種到誘導培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)，誘導培養(yǎng)基的配方組份為:MS+ 6-BA1.5mg/L、NAA0.15mg/L、ACl.Og/L、麥芽糖 12g/L、瓊脂 3g/L，pH為5.8，置于恒溫生化 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)； (3) 增殖組培快繁培養(yǎng):將步驟(2)誘導得到的叢生莖尖轉(zhuǎn)接到增殖培養(yǎng)基中進行增殖 培養(yǎng)，增殖培養(yǎng)基的配方組分為:WPM+ 6-BA 4.0mg/L、2,4-D 0.7mg/L、AC 1.0g/L、500 mg/ L水解酪蛋白、300mg/L氨基酸螯合鐵、蔗糖30 g/L、瓊脂6.0g/L，pH 5.8; (4) 生根培養(yǎng):將增殖培養(yǎng)基中長到5cm的芽苗轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)基中進行生根培養(yǎng)，生根 培養(yǎng)基的配方組分為：1/215+840.511^/1、熟40.1211^/1、144 0.311^/14!15.8; (5) 馴化及移栽:經(jīng)過生根培養(yǎng)的健壯大苗，待根系生長發(fā)達后，進行出瓶移栽；出瓶 前，將試管苗轉(zhuǎn)移到溫室大棚內(nèi)煉苗10-15天，初搬到大棚的第一天不能讓陽光直射幼苗， 2-3天后瓶蓋打開，每天保持光照時間不少于8小時，光照強度為1500LX，濕度保持在85%;待 10-15天后將試管苗從瓶中取出，小心地將根部附著的培養(yǎng)基洗凈，待植株表面水分稍干移 栽進種植基質(zhì)中進行種植，移栽后保持溫度為22~28°C，濕度為75%~80%，成活率達到98% 以上。
[0006] 所述步驟（2)中誘導培養(yǎng)條件為：溫度25±2°C，濕度60%-70%，光照時間12h/d，光 照強度1000LX培養(yǎng)15-25天。
[0007] 所述步驟(3)中增殖培養(yǎng)條件為:溫度23±2°C，濕度60%-70%，光照時間10-13 h/ d，光照強度1500~2000LX培養(yǎng)20-30天。
[0008] 所述步驟(4)中生根培養(yǎng)條件為:溫度25 ± 2°C，濕度為70%~75%，光照時間12~14 h/d，光照強度2000~3000 LX培養(yǎng)30天。
[0009]所述步驟(5)中種植基質(zhì)為泥炭土:腐殖土:花生殼粉按照重量比1:1:2的比例制 成。
[0010]本發(fā)明的有益效果是:本發(fā)明以平歐雜種榛"玉墜"、"達維"、"遼榛1號"等品種為 材料系統(tǒng)的進行了平歐雜種榛組培快繁育苗研究工作，并實現(xiàn)由實驗室規(guī)模向產(chǎn)業(yè)化規(guī)模 的轉(zhuǎn)變;本發(fā)明所用組培快繁技術縮短了平歐雜種榛育苗周期，降低了育苗成本，豐富了榛 子繁育理論，實現(xiàn)了高質(zhì)量快速繁育；組培步驟采用了適合平歐雜種榛快速繁殖的增殖培 養(yǎng)基和生根培養(yǎng)基，增殖和生根效果好，使平歐雜種榛的生根率達到98%，且根系粗壯整齊， 同時組培苗生長健壯，葉色濃綠，移栽成活率可達到95%左右，為工廠化生產(chǎn)奠定了基礎，本 發(fā)明方法簡便易行，生產(chǎn)效率高，可用于平歐雜種榛的快速繁殖，具有良好的應用前景。
【具體實施方式】
[0011]下面結(jié)合具體實施例對本發(fā)明做進一步的詳細說明。
[0012] 實施例1 平歐雜種榛組培快繁育苗的外植體選擇及消毒處理、誘導培養(yǎng) 選取大田一年生無病蟲害、無機械損傷的平歐雜種榛嫩枝條，修剪成帶有1-2個腋芽的 莖段，用流水沖洗干凈，然后在無菌條件下置于70%的酒精溶液中浸泡30s，再用0.1%升汞 滅菌8min，最后用無菌水浸洗6~7次，每次lmin，作為外植體待用； 將外植體接種到誘導培養(yǎng)基上置于恒溫生化培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng);培養(yǎng)的具體條件為： 溫度25 ± 2°C，濕度60%-70%，光照時間12h/d，光照強度1000LX培養(yǎng)15-25天。將選自同一品 種的平歐雜種榛外植體置于不同誘導培養(yǎng)基條件下對培養(yǎng)過程中的污染率和玻璃化率情 況進行了研究，具體結(jié)果如表1所示。
[0013]表1不同誘導培養(yǎng)基條件對同一平歐雜種榛的組織誘導培養(yǎng)的影響
' 從表1的數(shù)據(jù)中可以看出，在本發(fā)明的培養(yǎng)條件下，誘導培養(yǎng)基選用配方為MS+6-_ BA1 · 5mg/L+NAA0 · 15mg/L+ACl · 0g/L+麥芽糖 12g/L+瓊脂 3g/L，pH為5 · 8時，平歐雜種榛外 植體誘導培養(yǎng)中污染率較低，玻璃化率低，成活率較高，培育的平歐雜種榛子長勢良好，可 為后續(xù)的增殖培養(yǎng)階段提供良好的苗木。此外，本發(fā)明還將優(yōu)選出的培養(yǎng)基配方用于"達 維"、"遼榛1號"兩個品種的誘導培養(yǎng)過程，其污染率、玻璃化率和成活率也均取得了較滿意 的結(jié)果。
[0014] 實施例2 增殖培養(yǎng) 將從實施例1中優(yōu)化條件下誘導得到的叢生莖尖轉(zhuǎn)接到不同增殖培養(yǎng)基中進行增殖培 養(yǎng)，增殖培養(yǎng)條件為：溫度23 ± 2 °C，濕度60%-70%，光照時間10-13 h/d，光照強度1500~ 2000LX培養(yǎng)20-30天。具體培養(yǎng)情況如表2所示。
[0015] 表2不同增殖培養(yǎng)基配方對芽苗增殖生長情況的影響
從表2可以看出，平歐雜種榛子組培增值培養(yǎng)基配方為WPM+ 6-BA 4.0mg/L、2,4-D 0.7mg/L、AC 1.0g/L、500 mg/L水解酪蛋白、300mg/L氨基酸螯合鐵、蔗糖30 g/L、瓊脂 6.Og/L，pH 5.8時，其擴繁系數(shù)達到6.5,而其他培養(yǎng)基配方中擴繁系數(shù)均較低，這是由于 本發(fā)明優(yōu)選的增殖培養(yǎng)基配方中各不同濃度的植物生長調(diào)節(jié)劑與基本培養(yǎng)基協(xié)同作用，對 平歐雜種榛達到較好的增殖擴繁效果。此外，本發(fā)明還將優(yōu)選出的培養(yǎng)基配方用于"達維"、 "遼榛1號"兩個品種增殖培養(yǎng)，其擴繁系數(shù)也較高。
[0016] 實施例3 生根培養(yǎng) 將經(jīng)過實施例2優(yōu)選出的增殖培養(yǎng)基中長到5cm的芽苗轉(zhuǎn)入不同生根培養(yǎng)基中進行生 根培養(yǎng)，生根培養(yǎng)條件為:溫度25± 2°C，濕度為70%~75%，光照時間12~14 h/d，光照強度 2000~3000 LX培養(yǎng)30天。具體結(jié)果如表3所示。
[0017] 表3不同生根培養(yǎng)基配方對試管苗生根情況的影響
從表3中的數(shù)據(jù)可以看出，在基本培養(yǎng)基相同的情況下，加入的植物生長調(diào)節(jié)劑過高或 過低均不利于芽苗生根，因而本發(fā)明芽苗生根培養(yǎng)基最佳配方組成為：1/2MS+BA0.5mg/L+ ΝΑΑ0 · 12mg/L+IAA 0 · 3mg/L，pH 5 · 8。此外，本發(fā)明還將優(yōu)選出的培養(yǎng)基配方用于"達維"、 "遼榛1號"兩個品種生根培養(yǎng)過程，其生根率也均達到95%以上，具有較好的生根效果。
[0018] 實施例4 馴化及移栽 將經(jīng)過實施例3所述優(yōu)選培養(yǎng)基配方生根培養(yǎng)的健壯大苗，待根系生長發(fā)達后，進行出 瓶移栽；出瓶前，將試管苗轉(zhuǎn)移到溫室大棚內(nèi)煉苗10-15天，初搬到大棚的第一天不能讓陽 光直射幼苗，2-3天后瓶蓋打開，每天保持光照時間不少于8小時，光照強度為1500LX，濕度 保持在85%;待10-15天后將試管苗從瓶中取出，小心地將根部附著的培養(yǎng)基洗凈，待植株表 面水分稍干移栽進種植基質(zhì)中進行種植，移栽后保持溫度為22~28°C，濕度為75%~80%， 成活率達到95%以上。本發(fā)明還研究了馴化后的幼苗移栽入不同種植基質(zhì)中的成活率，具體 結(jié)果如下表4所示。
[0019] 表4不同種植基質(zhì)移栽幼苗的成活率結(jié)果_
從上表數(shù)據(jù)中可以看出，移栽基質(zhì)的配方比例選擇對幼苗移栽成活率具有重要影響， 這是由于不同基質(zhì)配方所含營養(yǎng)元素、保水性、耐寒性及酸堿性等均有較大差異，且還可能 對病蟲害具有一定的拮抗作用，因而經(jīng)過本實驗證明最適宜平歐雜種榛組培移栽的種植基 質(zhì)為泥炭土 :腐殖土:花生殼粉=1:1:2組成的。
[0020] 總之，經(jīng)過上述一系列【具體實施方式】的研究，本發(fā)明系統(tǒng)的進行了平歐雜種榛組 培快繁育苗研究工作，并實現(xiàn)由實驗室規(guī)模向產(chǎn)業(yè)化規(guī)模的轉(zhuǎn)變，移栽成活率可達到95%左 右，為工廠化生產(chǎn)奠定了基礎，具有廣泛的應用前景。
【主權項】
1. 一種平歐雜種榛組培快繁育苗的方法，其特征在于，它主要包括以下步驟： (1) 外植體選擇及消毒:選取大田一年生無病蟲害、無機械損傷的平歐雜種榛嫩枝條， 修剪成帶有1-2個腋芽的莖段，用流水沖洗干凈，然后在無菌條件下置于70%的酒精溶液中 浸泡30s，再用0.1%升萊滅菌8min，最后用無菌水浸洗6~7次，每次lmin，作為外植體待 用； (2) 誘導培養(yǎng):將外植體接種到誘導培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)，誘導培養(yǎng)基的配方組份為:MS+ 6-BA1.5mg/L、NAA0.15mg/L、ACl.Og/L、麥芽糖 12g/L、瓊脂 3g/L，pH為5.8，置于恒溫生化 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)； (3) 增殖組培快繁培養(yǎng):將步驟(2)誘導得到的叢生莖尖轉(zhuǎn)接到增殖培養(yǎng)基中進行增殖 培養(yǎng)，增殖培養(yǎng)基的配方組分為:WPM+ 6-BA 4.0mg/L、2,4-D 0.7mg/L、AC 1.0g/L、500 mg/ L水解酪蛋白、300mg/L氨基酸螯合鐵、蔗糖30 g/L、瓊脂6.0g/L，pH 5.8; (4) 生根培養(yǎng):將增殖培養(yǎng)基中長到5cm的芽苗轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)基中進行生根培養(yǎng)，生根 培養(yǎng)基的配方組分為：1/215+840.511^/1、熟40.1211^/1、144 0.311^/14!15.8; (5) 馴化及移栽：經(jīng)過生根培養(yǎng)的健壯大苗，待根系生長發(fā)達后，進行出瓶移栽；出瓶 前，將試管苗轉(zhuǎn)移到溫室大棚內(nèi)煉苗10-15天，初搬到大棚的第一天不能讓陽光直射幼苗， 2-3天后瓶蓋打開，每天保持光照時間不少于8小時，光照強度為1500LX，濕度保持在85%;待 10-15天后將試管苗從瓶中取出，小心地將根部附著的培養(yǎng)基洗凈，待植株表面水分稍干移 栽進種植基質(zhì)中進行種植，移栽后保持溫度為22~28°C，濕度為75%~80%，成活率達到98% 以上。2. 根據(jù)權利要求1所述的平歐雜種榛組培快繁育苗的方法，其特征在于，所述步驟(2) 中誘導培養(yǎng)條件為:溫度25 ± 2°C，濕度60%-70%，光照時間12h/d，光照強度1000LX培養(yǎng)15-25天。3. 根據(jù)權利要求1所述的平歐雜種榛組培快繁育苗的方法，其特征在于，所述步驟(3) 中增殖培養(yǎng)條件為：溫度23 ± 2 °C，濕度60%-70%，光照時間10-13 h/d，光照強度1500~ 2000LX 培養(yǎng)20-30天。4. 根據(jù)權利要求1所述的平歐雜種榛組培快繁育苗的方法，其特征在于，所述步驟(4) 中生根培養(yǎng)條件為:溫度25±2°C，濕度為70%~75%，光照時間12~14 h/d，光照強度2000~ 3000 LX培養(yǎng)30天。5. 根據(jù)權利要求1所述的平歐雜種榛組培快繁育苗的方法，其特征在于，所述步驟(5) 中種植基質(zhì)為泥炭土:腐殖土:花生殼粉按照重量比1:1:2的比例制成。
【文檔編號】A01H4/00GK106069746SQ201610385713
【公開日】2016年11月9日
【申請日】2016年6月3日 公開號201610385713.3, CN 106069746 A, CN 106069746A, CN 201610385713, CN-A-106069746, CN106069746 A, CN106069746A, CN201610385713, CN201610385713.3
【發(fā)明人】王宗嶺
【申請人】臨沂真源觀光農(nóng)業(yè)科技有限公司