一種具有滅螨和驅(qū)螨作用的活性物質(zhì)及其應(yīng)用
【專利摘要】本發(fā)明屬于生物活性物質(zhì)(包括藥物)與健康物質(zhì)及其制品研究開發(fā)領(lǐng)域，涉及一種生物活性物質(zhì)(包括藥物)與健康物質(zhì)，特別涉及一種具有滅螨和驅(qū)螨作用的生物活性物質(zhì)(包括藥物)與健康物質(zhì)及其應(yīng)用。本發(fā)明將青蒿和黃花蒿中各有效組分采用溶劑提取法、色譜法、結(jié)晶法、萃取法等合適的化學(xué)方法進行分離富集純化，并且將青蒿素及其衍生物和相關(guān)物(雙氫青蒿素、青蒿琥酯、蒿甲醚、蒿乙醚、青蒿素C12衍生物、青蒿素C4衍生物、甾類青蒿素、開環(huán)青蒿素，青蒿素結(jié)構(gòu)簡化物等)以單體化合物或組合物形式進行藥效學(xué)驗證，得到具有滅螨和驅(qū)螨作用的生物活性物質(zhì)和健康物質(zhì)，可應(yīng)用于藥品、保健品、健康品、個人護理品(嬰幼兒護理用品)、家居清潔品、寵物清潔品、農(nóng)業(yè)園藝用品等市場存在產(chǎn)品中。
【專利說明】
一種具有滅螨和驅(qū)螨作用的活性物質(zhì)及其應(yīng)用
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明屬于生物活性物質(zhì)(包括藥物)與健康物質(zhì)及其制品研究開發(fā)領(lǐng)域，涉及一 種生物活性物質(zhì)(包括藥物)與健康物質(zhì)，特別涉及一種具有滅螨和驅(qū)螨作用的生物活性物 質(zhì)(包括藥物)與健康物質(zhì)及其應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 螨類是隸屬于節(jié)肢動物門蛛形綱蜱螨亞綱的一類體型微小的動物，是蜱螨亞綱中 除蜱類以外所有種類的統(tǒng)稱。其中最常見也是對人類危害最大的主要為粉螨、塵螨和蠕形 螨。螨蟲不但會污染食物與居室衛(wèi)生，還可直接或間接的引發(fā)哮喘，過敏，痤瘡等多種疾病， 并會污染糧食，藥材，引起寵物疾病，因此對于螨蟲的殺滅與驅(qū)除十分必要。雖然目前市面 上的滅螨驅(qū)螨產(chǎn)品種類繁多，但大多毒性較強，對人體健康有著潛在危害，且有污染環(huán)境的 危險，故研制一種環(huán)境友好型，低毒高效的滅螨驅(qū)螨產(chǎn)品迫在眉睫。
[0003] 青蒿素來源于菊科植物青蒿和黃花蒿，具有藥理機制獨特的強效抗瘧活性，目前 青蒿素及其衍生物是當今世界的抗瘧一線用藥，并被廣泛開發(fā)利用，可用于治療自身免疫 疾病，控制水體藻類污染等。2015年屠呦呦研究員因青蒿素獲得諾貝爾生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎，更 表明了世界對青蒿素及其衍生物的認可，也是對中國傳統(tǒng)中醫(yī)藥文化的承認，是中國中醫(yī) 藥文化走出去的堅實有力的一步，具有里程碑式的意義。然而中藥不單具有一方面的作用， 中藥的開發(fā)也應(yīng)多元化、全面化、普用化，基于青蒿和黃花蒿中多種活性成分，尤其是青蒿 素類成分安全有效且具有抗多種寄生蟲作用的特點（如抗瘧原蟲，日本血吸蟲，華支睪吸蟲 等）以及現(xiàn)今螨類對人們生活的危害和困擾，本發(fā)明本著嚴謹求實的態(tài)度對此進行研究。本 發(fā)明將青蒿和黃花蒿中各有效組分采用溶劑提取法、色譜法、結(jié)晶法、萃取法等合適的化學(xué) 方法進行分離富集純化，并且將青蒿素及其衍生物和相關(guān)物以單體化合物或組合物形式進 行藥效學(xué)驗證，得到具有滅螨和驅(qū)螨作用的生物活性物質(zhì)和健康物質(zhì)，從而推進藥物和健 康產(chǎn)品的研發(fā)創(chuàng)新，并將對人們身體健康和日常生活產(chǎn)生深遠的影響。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明的第一個目的在于提供一種具有滅螨和驅(qū)螨作用的生物活性物質(zhì)(包括藥 物)與健康物質(zhì)，本發(fā)明的第二個目的在于提供青蒿素及其衍生物和相關(guān)物(雙氫青蒿素、 青蒿琥酯、蒿甲醚、蒿乙醚、青蒿素 C12衍生物、青蒿素 C4衍生物、留類青蒿素、開環(huán)青蒿素，青 蒿素結(jié)構(gòu)簡化物等)及青蒿、黃花蒿及其他含有青蒿素及其衍生物相關(guān)化合物的天然來源 (原料藥及制備物)的一種新用途，本發(fā)明的第三個目的在于提供這種具有滅螨和驅(qū)螨作用 的生物活性物質(zhì)(包括藥物)和健康物質(zhì)的來源和途徑，本發(fā)明的第四個目的在于提供其質(zhì) 量檢測及控制方法。
[0005] 本發(fā)明的活性物質(zhì)適用于所有種類的螨蟲及其造成的危害，包括螨蟲對人畜的感 染，螨蟲誘發(fā)的人畜過敏、哮喘，螨蟲對食物、織物、居室、糧食、藥材、農(nóng)作物，觀賞植物的啃 食污染等。
[0006] 本發(fā)明的目的是通過如下技術(shù)方案實現(xiàn)的：
[0007] 本發(fā)明生物活性物質(zhì)與健康物質(zhì)為組1中青蒿素及其衍生物和相關(guān)物某一單體活 性物質(zhì)或其組合物及單體活性物質(zhì)或組合物的制品。本發(fā)明使用的青蒿素及其衍生物和相 關(guān)物的制備方法是已知的，有關(guān)其制備方法已經(jīng)見諸于文獻和專利等。
[0008] 亦可為由如下組2藥用植物及其代用品種及其他含有青蒿素及其衍生物相關(guān)化合 物的天然來源，包括其藥用部位及非藥用部位，藥材及其飲片提取富集制成的制備物制成。
[0009] 組1青蒿素及其衍生物和相關(guān)物雙氫青蒿素、青蒿琥酯、蒿甲醚、蒿乙醚、青蒿素 C12 衍生物、青蒿素 C4衍生物、留類青蒿素、開環(huán)青蒿素，青蒿素結(jié)構(gòu)簡化物等現(xiàn)今通過各種途 徑(化學(xué)全合成，半合成，生物合成，組織細胞培養(yǎng)，真菌轉(zhuǎn)化，代謝通路等)合成得到的青蒿 素及其衍生物和相關(guān)物。
[0010] 組2青蒿(草蒿，廩蒿，茵陳蒿，邪蒿，香蒿，蘋蒿，黑蒿，白染艮，苦蒿，大頭青蒿）和 黃花蒿(草蒿，青蒿，臭蒿，犰蒿，黃蒿，臭黃蒿，茼蒿，黃香蒿、野茼蒿，秋蒿、香苦草、野苦草， 雞虱草，黃色土因呈，假香菜、香絲草、酒餅草，苦蒿，"沙拉翁"、"莫林一沙里爾日"，"好尼一 沙里勒吉"，"康帕"，"克朗"）同屬植物原植物(包括青蒿和黃花蒿的各部位)及其他含有青 蒿素及其衍生物相關(guān)化合物的天然來源和加工品的制備物等。
[0011] 本發(fā)明生物活性物質(zhì)優(yōu)選為以下原料藥制成：
[0012] 青蒿、黃花蒿(原料藥與制備物)及青蒿素及其衍生物和相關(guān)物(雙氫青蒿素、青蒿 琥酯、蒿甲醚、蒿乙醚、青蒿素 C12衍生物、青蒿素 C4衍生物、留類青蒿素、開環(huán)青蒿素，青蒿素 結(jié)構(gòu)簡化物等）。
[0013] 將上述原料藥(青蒿、黃花蒿等）用水或石油醚、乙醇等合適溶劑提取得到系列制 備物或?qū)⒁陨纤蒙锘钚晕镔|(zhì)混合應(yīng)用或?qū)⒔M1中某一單體活性物質(zhì)單獨應(yīng)用或其單體 活性物質(zhì)組合應(yīng)用，加入常規(guī)輔料，或作為添加物制備任意常規(guī)劑型，按常規(guī)的制劑工藝制 成藥劑學(xué)可接受的任意常規(guī)劑型，包括氣霧劑、噴射劑、水劑型、乳劑型、膏劑型、膠凍狀、錠 狀、氣溶膠型、固體型、膠囊劑、片劑、顆粒劑、凝膠劑、緩釋劑，懸浮劑、乳劑、乳油、毒粉、毒 筆、粉劑、噴灑劑等，可應(yīng)用于藥品、保健品、健康品、個人護理品（嬰幼兒護理用品）、家居清 潔品、寵物清潔品、農(nóng)業(yè)園藝用品等市場存在產(chǎn)品中。本發(fā)明的生物活性物質(zhì)，青蒿素及其 衍生物和相關(guān)物，青蒿、黃花蒿及其制備物，制備方式與制劑方式是本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員 所公知的。本發(fā)明所述的活性物質(zhì)安全可靠，無副作用，適用于家庭、學(xué)校、辦公室、幼兒園、 醫(yī)院、賓館、飯店、糧庫、藥庫、農(nóng)田及其他場所驅(qū)滅螨蟲。本發(fā)明的生物活性物質(zhì)及其制劑， 可為噴灑，涂布于環(huán)境或人畜外用，也可經(jīng)其他形式使用。本發(fā)明的生物活性物質(zhì)及其制 劑，可以單獨使用，也可和其他現(xiàn)有物質(zhì)組合使用，例如與其它滅螨驅(qū)螨產(chǎn)品同時使用以加 強效果，與緊致肌膚消除紅腫物質(zhì)同用以治療痤瘡等。
[0014] 以下對本發(fā)明的原理和特征進行描述，所舉實例只用于解釋本發(fā)明，并非用于限 定本發(fā)明的范圍。
[0015] 實驗例1:本發(fā)明滅螨作用
[0016] 1.實驗方法
[0017] 1.1供試革巴標
[0018] 采用標準試蟲：粉塵螨(Dermatophagoides farinae)，雌雄成蟲。
[0019] 1.2測試條件
[0020] 培養(yǎng)箱溫度為25°C ±2°C，相對濕度為75% ±5%
[0021] 1.3儀器與材料
[0022] 解剖鏡，培養(yǎng)皿（直徑60mm，高15mm)，有蓋白瓷盤（300mmX200mmX50mm)，白油凡 士林混合物(1:1 )，隔水式培養(yǎng)箱；
[0023] 1.4實驗步驟
[0024]取4個培養(yǎng)皿，其中3個按使用方法放入待測藥劑或用藥劑處理的載體。另一個培 養(yǎng)皿不放待測藥劑或放一塊未經(jīng)藥劑處理的載體(與處理載體面積相同）作為對照，每個培 養(yǎng)皿內(nèi)壁上緣均勻涂抹白油凡士林混合物。
[0025] 每個培養(yǎng)皿中心放入200只試蟲，30min時在培養(yǎng)皿中心放入螨蟲飼料0.05g，之后 將培養(yǎng)皿放入隔水式培養(yǎng)箱內(nèi)。
[0026] 48h檢查并記錄死亡螨蟲數(shù)。
[0027]當對照組螨蟲死亡率>20%，試驗需重新進行。
[0028] 1.5結(jié)果計算
[0029] 按如下公式計算滅螨率，以百分率（％ )表示：
[0030] P = R/NX100
[0031] 式中：P-滅螨率;R-死亡試蟲數(shù);N-試驗試蟲數(shù)；
[0032] 當對照組螨蟲死亡率<5%無需校正；
[0033] 2.實驗結(jié)果(見表1)
[0034] 表1活性物質(zhì)滅螨效果
[0035]
1234567891011 3.結(jié)論 2
[0037] 依照NY/T 1151.2-2006《農(nóng)藥登記衛(wèi)生用殺蟲劑室內(nèi)藥效試驗方法及評價第二 部分:滅螨和驅(qū)螨劑》進行評價，該組合物滅螨效果達到"B"級。 3
[0038]實驗例2:本發(fā)明驅(qū)螨作用 4
[0039] 1.實驗方法 5
[0040] 1.1供試靶標 6
[0041 ] 采用標準試蟲:粉塵螨(Dermatophagoides farinae)，雌雄成蟲。 7
[0042] 1.2測試條件 8
[0043] 培養(yǎng)箱溫度為25°C ±2°C，相對濕度為75% ±5% 9 1.3儀器與材料 10 解剖鏡，培養(yǎng)皿（直徑60mm，高15mm)，有蓋白瓷盤（300mmX200mmX50mm)，白油凡 士林混合物(1:1 )，隔水式培養(yǎng)箱； 11 1.4實驗步驟
[0047] 取7個培養(yǎng)皿，1個為中心培養(yǎng)皿，其余6個培養(yǎng)皿圍繞中心培養(yǎng)皿擺放并且與中心 培養(yǎng)皿兩兩接觸，接觸處用透明膠帶粘住，最后將7個培養(yǎng)皿粘在粘膠紙板上使其位置得以 固定。
[0048] 中心培養(yǎng)皿中放入試蟲不少于1000頭，周圍6個培養(yǎng)皿間隔放入面積與皿底一致 的待測物一塊或?qū)φ瘴镆粔K，在待測物和對照物上放螨蟲飼料〇. 〇5g，將實驗裝置放入有蓋 瓷盤中，最后放入隔水式培養(yǎng)箱內(nèi)。
[0049] 24h用解剖鏡觀察并記錄待測物和對照物上的螨蟲數(shù)。
[0050] 1.5結(jié)果計算
[00511按如下公式計算驅(qū)螨率，以百分率（％ )表示：
[0052] Pc = (l-Nt/No) X100
[0053] 式中：Pc-驅(qū)螨率;Nt-待測物試蟲數(shù);No-對照組試蟲數(shù)；
[0054] 2.實驗結(jié)果(見表2)
[0055]表2活性物質(zhì)驅(qū)螨效果
[0056]
[0057] 3.結(jié)論
[0058] 依照NY/T 1151.2-2006《農(nóng)藥登記衛(wèi)生用殺蟲劑室內(nèi)藥效試驗方法及評價第二 部分:滅螨和驅(qū)螨劑》進行評價，組合物驅(qū)螨效果達到"A"級。
[0059]下述實施例均能實現(xiàn)上述實驗例的效果。
[0060]實施例1:片劑
[0061] 青蒿、黃花蒿(原料藥與制備物)及青蒿素及其衍生物和相關(guān)物(雙氫青蒿素、青蒿 琥酯、蒿甲醚、蒿乙醚、青蒿素 C12衍生物、青蒿素 C4衍生物、留類青蒿素、開環(huán)青蒿素，青蒿素 結(jié)構(gòu)簡化物等）。
[0062] 取上述原料藥(青蒿、黃花蒿等）用水或石油醚、乙醇等溶劑提取得到系列制備物。 將以上所得生物活性物質(zhì)混合應(yīng)用或?qū)⒔M1中某一單體活性物質(zhì)單獨應(yīng)用或其單體活性物 質(zhì)組合應(yīng)用，加入常規(guī)輔料，按照常規(guī)工藝制成片劑。
[0063]青蒿素含量測定方法 [0064]對照品溶液的制備
[0065]精密稱取青蒿素對照品適量，置于100mL容量瓶中，加乙醇使溶解，并稀釋至刻度， 搖勻，即得。
[0066] 標準曲線的制備
[0067] 精密量取青蒿素對照品溶液0.5、1.0、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0 mL分別置于50mL容 量瓶中，補足10mL者，以乙醇補充至10mL，加入0.2 %氫氧化鈉溶液至刻度，搖勻，置于50 °C 水浴中反應(yīng)30min，冷卻至室溫，以相應(yīng)溶劑為空白，用紫外分光光度計在292nm波長處分別 測定吸光度，以對照品含量為橫坐標，吸光度為縱坐標繪制吸光度-含量標準曲線。
[0068]供試品溶液的制備
[0069]取樣品適量，精密稱定，置于50mL容量瓶中，加乙醇，振搖使溶解，并稀釋至刻度， 搖勻，靜置2h，濾過，棄去初濾液，取續(xù)濾液，即得。
[0070] 測定法
[0071] 精密量取供試品溶液1 _3mL，置于50mL容量瓶中，用乙醇補足至1 OmL，搖勻，加入 0.2%氫氧化鈉溶液至刻度，搖勻，置50°C恒溫水浴中反應(yīng)30min，冷卻至室溫，以相應(yīng)溶劑 為空白，用紫外-可見分光光度法，在292nm波長處測定吸光度，根據(jù)吸光度-含量標準曲線， 計算，即得。
[0072]雙氫青蒿素含量測定方法 [0073]對照品溶液的制備
[0074]精密稱取雙氫青蒿素對照品適量，置50mL容量瓶中，加乙醇溶液溶解并稀釋至刻 度，搖勻后，靜置2h，即得。
[0075] 標準曲線的制備
[0076] 精密量取雙氫青蒿素對照品溶液0.1、0.2、0.4、0.8、1.0、1.5、2. OmL分別置于1 OmL 容量瓶中，不足2mL者，用乙醇補充至2mL，搖勻，加入2 %氫氧化鈉溶液至刻度，搖勻，置60°C 恒溫水浴中反應(yīng)30min，取出冷卻至室溫，以2%氫氧化鈉-乙醇(4:1)為空白，用紫外-可見 分光光度法，在238nm波長處分別測定吸光度，以對照品含量為橫坐標，吸光度為縱坐標繪 制吸光度-含量標準曲線。
[0077]供試品溶液的制備
[0078]取樣品適量，精密稱定，置于50mL容量瓶中，加乙醇，振搖使溶解，并稀釋至刻度， 搖勻，靜置2h，濾過，棄去初濾液，取續(xù)濾液，即得。
[0079] 測定法
[0080] 精密量取供試品溶液lmL，置于10mL容量瓶中，精密加入乙醇lmL，搖勻，加入2 %氫 氧化鈉溶液至刻度，搖勻，置60°C恒溫水浴中反應(yīng)30min，取出冷卻至室溫，以2%氫氧化鈉-乙醇(4:1)為空白，用紫外-可見分光光度法，在238nm波長處測定吸光度，根據(jù)吸光度-含量 標準曲線，計算，即得。
[0081 ]青蒿琥酯含量測定方法 [0082]高效液相色譜法 [0083] 色譜條件
[0084]用十八烷基硅烷鍵和硅膠為色譜柱填充劑，以乙腈-磷酸鹽緩沖液(取磷酸二氫鉀 1.36g，加水lOOOmL使溶解，用磷酸調(diào)pH值至3.0) (42:58)為流動相，柱溫30°C，檢測波長為 219nm〇
[0085] 測定法
[0086] 取樣品適量，精密稱定，置于50mL容量瓶中，加甲醇適量，振搖使青蒿琥酯溶解，用 甲醇稀釋至刻度，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液20yL注入液相色譜儀，記錄色譜圖，另取青蒿 琥酯對照品適量，精密稱定，置于10mL容量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，同法測定。按照 外標法以峰面積計算，即得。
[0087]實施例2:乳劑
[0088] 青蒿、黃花蒿(原料藥與制備物)及青蒿素及其衍生物和相關(guān)物(雙氫青蒿素、青蒿 琥酯、蒿甲醚、蒿乙醚、青蒿素 C12衍生物、青蒿素 C4衍生物、留類青蒿素、開環(huán)青蒿素，青蒿素 結(jié)構(gòu)簡化物等）。
[0089] 取上述原料藥(青蒿、黃花蒿等）用水或石油醚、乙醇等溶劑提取得到系列制備物。 將以上所得生物活性物質(zhì)混合應(yīng)用或?qū)⒔M1中某一單體活性物質(zhì)單獨應(yīng)用或其單體活性物 質(zhì)組合應(yīng)用，加入常規(guī)輔料，按照常規(guī)工藝制成乳劑。
[0090] 青蒿素含量測定方法
[0091] 對照品溶液的制備
[0092] 精密稱取青蒿素對照品適量，置于100mL容量瓶中，加乙醇使溶解，并稀釋至刻度， 搖勻，即得。
[0093] 標準曲線的制備
[0094] 精密量取青蒿素對照品溶液0 ·5、1·0、2·0、4·0、6·0、8·0、10· OmL分別置于50mL容 量瓶中，補足10mL者，以乙醇補充至10mL，加入0.2 %氫氧化鈉溶液至刻度，搖勻，置于50 °C 水浴中反應(yīng)30min，冷卻至室溫，以相應(yīng)溶劑為空白，用紫外分光光度計在292nm波長處分別 測定吸光度，以對照品含量為橫坐標，吸光度為縱坐標繪制吸光度-含量標準曲線。
[0095]供試品溶液的制備
[0096]取樣品適量，精密稱定，置于50mL容量瓶中，加乙醇，振搖使溶解，并稀釋至刻度， 搖勻，靜置2h，濾過，棄去初濾液，取續(xù)濾液，即得。
[0097]測定法
[0098] 精密量取供試品溶液1 _3mL，置于50mL容量瓶中，用乙醇補足至1 OmL，搖勻，加入 0.2%氫氧化鈉溶液至刻度，搖勻，置50°C恒溫水浴中反應(yīng)30min，冷卻至室溫，以相應(yīng)溶劑 為空白，用紫外-可見分光光度法，在292nm波長處測定吸光度，根據(jù)吸光度-含量標準曲線， 計算，即得。
[0099]雙氫青蒿素含量測定方法
[0100]對照品溶液的制備
[0101]精密稱取雙氫青蒿素對照品適量，置50mL容量瓶中，加乙醇溶液溶解并稀釋至刻 度，搖勻后，靜置2h，即得。
[0102] 標準曲線的制備
[0103] 精密量取雙氫青蒿素對照品溶液0.1、0.2、0.4、0.8、1.0、1.5、2. OmL分別置于1 OmL 容量瓶中，不足2mL者，用乙醇補充至2mL，搖勻，加入2 %氫氧化鈉溶液至刻度，搖勻，置60°C 恒溫水浴中反應(yīng)30min，取出冷卻至室溫，以2%氫氧化鈉-乙醇(4:1)為空白，用紫外-可見 分光光度法，在238nm波長處分別測定吸光度，以對照品含量為橫坐標，吸光度為縱坐標繪 制吸光度-含量標準曲線。
[0104]供試品溶液的制備
[0105]取樣品適量，精密稱定，置于50mL容量瓶中，加乙醇，振搖使溶解，并稀釋至刻度， 搖勻，靜置2h，濾過，棄去初濾液，取續(xù)濾液，即得。
[0106]測定法
[0107] 精密量取供試品溶液lmL，置于1 OmL容量瓶中，精密加入乙醇lmL，搖勻，加入2 %氫 氧化鈉溶液至刻度，搖勻，置60°C恒溫水浴中反應(yīng)30min，取出冷卻至室溫，以2%氫氧化鈉-乙醇(4:1)為空白，用紫外-可見分光光度法，在238nm波長處測定吸光度，根據(jù)吸光度-含量 標準曲線，計算，即得。
[0108] 青蒿琥酯含量測定方法
[0109] 高效液相色譜法
[0110] 色譜條件
[0111]用十八烷基硅烷鍵和硅膠為色譜柱填充劑，以乙腈-磷酸鹽緩沖液(取磷酸二氫鉀 1.36g，加水1000mL使溶解，用磷酸調(diào)pH值至3.0) (42:58)為流動相，柱溫30°C，檢測波長為 219nm〇
[0112]測定法
[0113]取樣品適量，精密稱定，置于50mL容量瓶中，加甲醇適量，振搖使青蒿琥酯溶解，用 甲醇稀釋至刻度，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液20yL注入液相色譜儀，記錄色譜圖，另取青蒿 琥酯對照品適量，精密稱定，置于10mL容量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，同法測定。按照 外標法以峰面積計算，即得。
[0114] 實施例3:噴射劑
[0115] 青蒿、黃花蒿(原料藥與制備物)及青蒿素及其衍生物和相關(guān)物(雙氫青蒿素、青蒿 琥酯、蒿甲醚、蒿乙醚、青蒿素 C12衍生物、青蒿素 C4衍生物、留類青蒿素、開環(huán)青蒿素，青蒿素 結(jié)構(gòu)簡化物等）。
[0116] 取上述原料藥(青蒿、黃花蒿等）用水或石油醚、乙醇等溶劑提取得到系列制備物。 將以上所得生物活性物質(zhì)混合應(yīng)用或?qū)⒔M1中某一單體活性物質(zhì)單獨應(yīng)用或其單體活性物 質(zhì)組合應(yīng)用，加入常規(guī)輔料，按照常規(guī)工藝制成噴射劑。
[0117] 青蒿素含量測定方法
[0118] 對照品溶液的制備
[0119] 精密稱取青蒿素對照品適量，置于100mL容量瓶中，加乙醇使溶解，并稀釋至刻度， 搖勻，即得。
[0120] 標準曲線的制備
[0121] 精密量取青蒿素對照品溶液0.5、1.0、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0 mL分別置于50mL容 量瓶中，補足10mL者，以乙醇補充至10mL，加入0.2 %氫氧化鈉溶液至刻度，搖勻，置于50 °C 水浴中反應(yīng)30min，冷卻至室溫，以相應(yīng)溶劑為空白，用紫外分光光度計在292nm波長處分別 測定吸光度，以對照品含量為橫坐標，吸光度為縱坐標繪制吸光度-含量標準曲線。
[0122] 供試品溶液的制備
[0123] 取樣品適量，精密稱定，置于50mL容量瓶中，加乙醇，振搖使溶解，并稀釋至刻度， 搖勻，靜置2h，濾過，棄去初濾液，取續(xù)濾液，即得。
[0124] 測定法
[0125] 精密量取供試品溶液1 -3mL，置于50mL容量瓶中，用乙醇補足至1 OmL，搖勻，加入 0.2%氫氧化鈉溶液至刻度，搖勻，置50°C恒溫水浴中反應(yīng)30min，冷卻至室溫，以相應(yīng)溶劑 為空白，用紫外-可見分光光度法，在292nm波長處測定吸光度，根據(jù)吸光度-含量標準曲線， 計算，即得。
[0126] 雙氫青蒿素含量測定方法
[0127] 對照品溶液的制備
[0128] 精密稱取雙氫青蒿素對照品適量，置50mL容量瓶中，加乙醇溶液溶解并稀釋至刻 度，搖勻后，靜置2h，即得。
[0129] 標準曲線的制備
[0130] 精密量取雙氫青蒿素對照品溶液0.1、0.2、0.4、0.8、1.0、1.5、2. OmL分別置于1 OmL 容量瓶中，不足2mL者，用乙醇補充至2mL，搖勻，加入2 %氫氧化鈉溶液至刻度，搖勻，置60°C 恒溫水浴中反應(yīng)30min，取出冷卻至室溫，以2%氫氧化鈉-乙醇(4:1)為空白，用紫外-可見 分光光度法，在238nm波長處分別測定吸光度，以對照品含量為橫坐標，吸光度為縱坐標繪 制吸光度-含量標準曲線。
[0131] 供試品溶液的制備
[0132] 取樣品適量，精密稱定，置于50mL容量瓶中，加乙醇，振搖使溶解，并稀釋至刻度， 搖勻，靜置2h，濾過，棄去初濾液，取續(xù)濾液，即得。
[0133] 測定法
[0134] 精密量取供試品溶液lmL，置于1 OmL容量瓶中，精密加入乙醇lmL，搖勻，加入2 %氫 氧化鈉溶液至刻度，搖勻，置60°C恒溫水浴中反應(yīng)30min，取出冷卻至室溫，以2%氫氧化鈉-乙醇(4:1)為空白，用紫外-可見分光光度法，在238nm波長處測定吸光度，根據(jù)吸光度-含量 標準曲線，計算，即得。
[0135] 青蒿琥酯含量測定方法
[0136] 高效液相色譜法
[0137] 色譜條件
[0138] 用十八烷基硅烷鍵和硅膠為色譜柱填充劑，以乙腈-磷酸鹽緩沖液(取磷酸二氫鉀 1.36g，加水lOOOmL使溶解，用磷酸調(diào)pH值至3.0) (42:58)為流動相，柱溫30°C，檢測波長為 219nm〇
[0139] 測定法
[0140] 取樣品適量，精密稱定，置于50mL容量瓶中，加甲醇適量，振搖使青蒿琥酯溶解，用 甲醇稀釋至刻度，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液20yL注入液相色譜儀，記錄色譜圖，另取青蒿 琥酯對照品適量，精密稱定，置于10mL容量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，同法測定。按照 外標法以峰面積計算，即得。
[0141] 實施例4:水劑
[0142] 青蒿、黃花蒿(原料藥與制備物)及青蒿素及其衍生物和相關(guān)物(雙氫青蒿素、青蒿 琥酯、蒿甲醚、蒿乙醚、青蒿素 C12衍生物、青蒿素 C4衍生物、留類青蒿素、開環(huán)青蒿素，青蒿素 結(jié)構(gòu)簡化物等）。
[0143] 取上述原料藥(青蒿、黃花蒿等）用水或石油醚、乙醇等溶劑提取得到系列制備物。 將以上所得生物活性物質(zhì)混合應(yīng)用或?qū)⒔M1中某一單體活性物質(zhì)單獨應(yīng)用或其單體活性物 質(zhì)組合應(yīng)用，加入常規(guī)輔料，按照常規(guī)工藝制成水劑。
[0144] 青蒿素含量測定方法
[0145] 對照品溶液的制備
[0146] 精密稱取青蒿素對照品適量，置于100mL容量瓶中，加乙醇使溶解，并稀釋至刻度， 搖勻，即得。
[0147] 標準曲線的制備
[0148] 精密量取青蒿素對照品溶液0.5、1.0、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0 mL分別置于50mL容 量瓶中，補足10mL者，以乙醇補充至10mL，加入0.2 %氫氧化鈉溶液至刻度，搖勻，置于50 °C 水浴中反應(yīng)30min，冷卻至室溫，以相應(yīng)溶劑為空白，用紫外分光光度計在292nm波長處分別 測定吸光度，以對照品含量為橫坐標，吸光度為縱坐標繪制吸光度-含量標準曲線。
[0149]供試品溶液的制備
[0150]取樣品適量，精密稱定，置于50mL容量瓶中，加乙醇，振搖使溶解，并稀釋至刻度， 搖勻，靜置2h，濾過，棄去初濾液，取續(xù)濾液，即得。
[0151] 測定法
[0152] 精密量取供試品溶液1 -3mL，置于50mL容量瓶中，用乙醇補足至1 OmL，搖勻，加入 0.2%氫氧化鈉溶液至刻度，搖勻，置50°C恒溫水浴中反應(yīng)30min，冷卻至室溫，以相應(yīng)溶劑 為空白，用紫外-可見分光光度法，在292nm波長處測定吸光度，根據(jù)吸光度-含量標準曲線， 計算，即得。
[0153] 雙氫青蒿素含量測定方法
[0154] 對照品溶液的制備
[0155] 精密稱取雙氫青蒿素對照品適量，置50mL容量瓶中，加乙醇溶液溶解并稀釋至刻 度，搖勻后，靜置2h，即得。
[0156] 標準曲線的制備
[0157] 精密量取雙氫青蒿素對照品溶液0.1、0.2、0.4、0.8、1.0、1.5、2. OmL分別置于1 OmL 容量瓶中，不足2mL者，用乙醇補充至2mL，搖勻，加入2 %氫氧化鈉溶液至刻度，搖勻，置60°C 恒溫水浴中反應(yīng)30min，取出冷卻至室溫，以2%氫氧化鈉-乙醇(4:1)為空白，用紫外-可見 分光光度法，在238nm波長處分別測定吸光度，以對照品含量為橫坐標，吸光度為縱坐標繪 制吸光度-含量標準曲線。
[0158] 供試品溶液的制備
[0159]取樣品適量，精密稱定，置于50mL容量瓶中，加乙醇，振搖使溶解，并稀釋至刻度， 搖勻，靜置2h，濾過，棄去初濾液，取續(xù)濾液，即得。
[0160]測定法
[0161] 精密量取供試品溶液lmL，置于1 OmL容量瓶中，精密加入乙醇lmL，搖勻，加入2 %氫 氧化鈉溶液至刻度，搖勻，置60°C恒溫水浴中反應(yīng)30min，取出冷卻至室溫，以2%氫氧化鈉-乙醇(4:1)為空白，用紫外-可見分光光度法，在238nm波長處測定吸光度，根據(jù)吸光度-含量 標準曲線，計算，即得。
[0162] 青蒿琥酯含量測定方法
[0163] 高效液相色譜法
[0164] 色譜條件
[0165] 用十八烷基硅烷鍵和硅膠為色譜柱填充劑，以乙腈-磷酸鹽緩沖液(取磷酸二氫鉀 1.36g，加水lOOOmL使溶解，用磷酸調(diào)pH值至3.0) (42:58)為流動相，柱溫30°C，檢測波長為 219nm〇
[0166]測定法
[0167] 取樣品適量，精密稱定，置于50mL容量瓶中，加甲醇適量，振搖使青蒿琥酯溶解，用 甲醇稀釋至刻度，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液20yL注入液相色譜儀，記錄色譜圖，另取青蒿 琥酯對照品適量，精密稱定，置于10mL容量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，同法測定。按照 外標法以峰面積計算，即得。
[0168] 實施例5:清洗劑
[0169] 青蒿、黃花蒿(原料藥與制備物)及青蒿素及其衍生物和相關(guān)物(雙氫青蒿素、青蒿 琥酯、蒿甲醚、蒿乙醚、青蒿素 c12衍生物、青蒿素 C4衍生物、留類青蒿素、開環(huán)青蒿素，青蒿素 結(jié)構(gòu)簡化物等）。
[0170] 取上述原料藥(青蒿、黃花蒿等）用水或石油醚、乙醇等溶劑提取得到系列制備物。 將以上所得生物活性物質(zhì)混合應(yīng)用或?qū)⒔M1中某一單體活性物質(zhì)單獨應(yīng)用或其單體活性物 質(zhì)組合應(yīng)用，加入常規(guī)輔料，按照常規(guī)工藝制成清洗劑。
[0171] 青蒿素含量測定方法
[0172] 對照品溶液的制備
[0173] 精密稱取青蒿素對照品適量，置于100mL容量瓶中，加乙醇使溶解，并稀釋至刻度， 搖勻，即得。
[0174] 標準曲線的制備
[0175] 精密量取青蒿素對照品溶液0.5、1.0、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0 mL分別置于50mL容 量瓶中，補足10mL者，以乙醇補充至10mL，加入0.2 %氫氧化鈉溶液至刻度，搖勻，置于50 °C 水浴中反應(yīng)30min，冷卻至室溫，以相應(yīng)溶劑為空白，用紫外分光光度計在292nm波長處分別 測定吸光度，以對照品含量為橫坐標，吸光度為縱坐標繪制吸光度-含量標準曲線。
[0176] 供試品溶液的制備
[0177] 取樣品適量，精密稱定，置于50mL容量瓶中，加乙醇，振搖使溶解，并稀釋至刻度， 搖勻，靜置2h，濾過，棄去初濾液，取續(xù)濾液，即得。
[0178]測定法
[0179] 精密量取供試品溶液1 -3mL，置于50mL容量瓶中，用乙醇補足至1 OmL，搖勻，加入 0.2%氫氧化鈉溶液至刻度，搖勻，置50°C恒溫水浴中反應(yīng)30min，冷卻至室溫，以相應(yīng)溶劑 為空白，用紫外-可見分光光度法，在292nm波長處測定吸光度，根據(jù)吸光度-含量標準曲線， 計算，即得。
[0180] 雙氫青蒿素含量測定方法
[0181] 對照品溶液的制備
[0182]精密稱取雙氫青蒿素對照品適量，置50mL容量瓶中，加乙醇溶液溶解并稀釋至刻 度，搖勻后，靜置2h，即得。
[0183] 標準曲線的制備
[0184] 精密量取雙氫青蒿素對照品溶液0.1、0.2、0.4、0.8、1.0、1.5、2. OmL分別置于1 OmL 容量瓶中，不足2mL者，用乙醇補充至2mL，搖勻，加入2 %氫氧化鈉溶液至刻度，搖勻，置60°C 恒溫水浴中反應(yīng)30min，取出冷卻至室溫，以2%氫氧化鈉-乙醇(4:1)為空白，用紫外-可見 分光光度法，在238nm波長處分別測定吸光度，以對照品含量為橫坐標，吸光度為縱坐標繪 制吸光度-含量標準曲線。
[0185] 供試品溶液的制備
[0186]取樣品適量，精密稱定，置于50mL容量瓶中，加乙醇，振搖使溶解，并稀釋至刻度， 搖勻，靜置2h，濾過，棄去初濾液，取續(xù)濾液，即得。
[0187] 測定法
[0188] 精密量取供試品溶液lmL，置于1 OmL容量瓶中，精密加入乙醇lmL，搖勻，加入2 %氫 氧化鈉溶液至刻度，搖勻，置60°C恒溫水浴中反應(yīng)30min，取出冷卻至室溫，以2%氫氧化鈉-乙醇(4:1)為空白，用紫外-可見分光光度法，在238nm波長處測定吸光度，根據(jù)吸光度-含量 標準曲線，計算，即得。
[0189]青蒿琥酯含量測定方法 [0190]高效液相色譜法
[0191] 色譜條件
[0192] 用十八烷基硅烷鍵和硅膠為色譜柱填充劑，以乙腈-磷酸鹽緩沖液(取磷酸二氫鉀 1.36g，加水1000mL使溶解，用磷酸調(diào)pH值至3.0) (42:58)為流動相，柱溫30°C，檢測波長為 219nm〇
[0193] 測定法
[0194] 取樣品適量，精密稱定，置于50mL容量瓶中，加甲醇適量，振搖使青蒿琥酯溶解，用 甲醇稀釋至刻度，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液20yL注入液相色譜儀，記錄色譜圖，另取青蒿 琥酯對照品適量，精密稱定，置于10mL容量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，同法測定。按照 外標法以峰面積計算，即得。
[0195] 以上所述內(nèi)容僅為本發(fā)明構(gòu)思下的基本說明，其目的在于使本領(lǐng)域內(nèi)的技術(shù)人員 能夠理解本發(fā)明的內(nèi)容并據(jù)以實施，不能僅以本實施例來限定本發(fā)明的專利范圍，對依據(jù) 本發(fā)明技術(shù)方案的普通技術(shù)人員來說，依據(jù)本發(fā)明所揭示的精神實質(zhì)對本發(fā)明進行任何等 效變換或修飾，均應(yīng)屬于本發(fā)明的保護范圍。
【主權(quán)項】
1. 一種具有滅螨和驅(qū)螨作用的活性物質(zhì)(包括藥物），其特征在于該活性物質(zhì)含有有效 劑量青蒿素及其衍生物和相關(guān)化合物。 本發(fā)明生物活性物質(zhì)與健康物質(zhì)為組1中某單體活性物質(zhì)或其組合物及單體活性物質(zhì) 或組合物的制品，亦可為由如下組2藥用植物及其代用品種及其他含有青蒿素及其衍生物 相關(guān)化合物的天然來源，包括其藥用部位及非藥用部位，藥材及其飲片提取富集制成的制 備物制成。 組1青蒿素及其衍生物和相關(guān)物雙氫青蒿素、青蒿琥酯、蒿甲醚、蒿乙醚、青蒿素 c12衍 生物、青蒿素 C4衍生物、留類青蒿素、開環(huán)青蒿素，青蒿素結(jié)構(gòu)簡化物等現(xiàn)今通過各種途徑 (化學(xué)全合成，半合成，生物合成，組織細胞培養(yǎng)，真菌轉(zhuǎn)化，代謝通路等)合成得到的青蒿素 及其衍生物和相關(guān)物。 組2青蒿(草蒿，廩蒿，茵陳蒿，邪蒿，香蒿，蘋蒿，黑蒿，白染艮，苦蒿，大頭青蒿)和黃花 蒿(草蒿，青蒿，臭蒿，犰蒿，黃蒿，臭黃蒿，茼蒿，黃香蒿、野茼蒿，秋蒿、香苦草、野苦草，雞虱 草，黃色土因呈，假香菜、香絲草、酒餅草，苦蒿，"沙拉翁"、"莫林一沙里爾日"，"好尼一沙里 勒吉"，"康帕"，"克朗"）同屬植物原植物(包括青蒿和黃花蒿的各部位)及其他含有青蒿素 及其衍生物相關(guān)化合物的天然來源和加工品的制備物等。2. 如權(quán)利要求1所述的生物活性物質(zhì)，可作為滅螨和驅(qū)螨的一種應(yīng)用，其特征在于該生 物活性物質(zhì)的組成為： 青蒿素及其衍生物和相關(guān)物（雙氫青蒿素、青蒿琥酯、蒿甲醚、蒿乙醚、青蒿素 C12衍生 物、青蒿素 C4衍生物、留類青蒿素、開環(huán)青蒿素，青蒿素結(jié)構(gòu)簡化物等)及青蒿、黃花蒿及其 代用品種，及其他含有青蒿素及其衍生物相關(guān)化合物的天然來源。3. 將上述原料藥(青蒿、黃花蒿等）用水或石油醚、乙醇等合適溶劑提取得到系列制備 物或?qū)⒁陨纤蒙锘钚晕镔|(zhì)混合應(yīng)用或?qū)⒔M1中某一單體活性物質(zhì)單獨應(yīng)用或其單體活 性物質(zhì)組合應(yīng)用，加入常規(guī)輔料，或作為添加物制備任意常規(guī)劑型，按常規(guī)的制劑工藝制成 藥劑學(xué)可接受的任意常規(guī)劑型。4. 如權(quán)利要求1~3任一所述的活性物質(zhì)及其組合具有滅螨和驅(qū)螨作用，所述的制劑包 括氣霧劑、噴射劑、水劑型、乳劑型、膏劑型、膠凍狀、錠狀、氣溶膠型、固體型、膠囊劑、片劑、 顆粒劑、凝膠劑、緩釋劑，懸浮劑、乳劑、乳油、毒粉、毒筆、粉劑、噴灑劑等，可應(yīng)用于藥品、保 健品、健康品、個人護理品（嬰幼兒護理用品）、家居清潔品、寵物清潔品、農(nóng)業(yè)園藝用品等 市場存在產(chǎn)品中，適用于家庭、學(xué)校、辦公室、幼兒園、醫(yī)院、賓館、飯店、糧庫、藥庫，農(nóng)田及 其他場所驅(qū)滅螨蟲。5. 如權(quán)利要求1~3所述活性物質(zhì)及其組合，其特征在于上述原料藥(青蒿和黃花蒿）， 以水或乙醇、石油醚提取，可用提取法、色譜法、結(jié)晶法、萃取法等化學(xué)方法進行分離富集純 化，亦可為組2單體活性物質(zhì)或其組合物及單體活性物質(zhì)或組合物的制品。6. 如權(quán)利要求1~3所述活性物質(zhì)及其組合，其特征在于可經(jīng)化學(xué)合成或結(jié)構(gòu)修飾，生 物合成或生物轉(zhuǎn)化、組織細胞培養(yǎng)、真菌轉(zhuǎn)化、代謝通路等途徑獲得。7. 如權(quán)利要求1~6所述活性物質(zhì)及其組合，其特征在于可加入本領(lǐng)域公知的各種藥用 輔料或食品添加劑，按常規(guī)的制劑工藝制成藥劑學(xué)可接受的任意常規(guī)劑型，也可制成長效 和緩釋制劑、控釋制劑、靶向制劑等其他傳輸系統(tǒng)給藥制劑。所制得劑型可作為人藥、獸藥、 植物用藥使用或施用，亦可應(yīng)用于具有預(yù)防和保健作用的健康功能性產(chǎn)品中。8. 如權(quán)利要求1~6所述活性物質(zhì)及其組合，其特征在于可加入公知的化妝品基質(zhì)與輔 助原料和清潔護理品添加劑，如油質(zhì)、粉質(zhì)、膠質(zhì)、抗氧化劑、保濕劑、表面活性劑、防腐劑、 色素、香精、礦物油、芳香劑、營養(yǎng)添加劑、收斂劑、防曬劑、殺菌劑、止癢劑、成膜劑、增稠劑 等，制成具有滅螨和驅(qū)螨作用的健康功能性產(chǎn)品，可應(yīng)用于化妝護理用品。9. 如權(quán)利要求1~6所述活性物質(zhì)及其組合，其特征在于可加入公知的洗滌原料如表面 活性劑、軟水劑、抗再沉淀劑、漂白劑、增稠劑、防腐劑、吸附劑、酶、殺菌劑、氣霧推進劑等， 制成具有滅螨和驅(qū)螨作用的健康功能性產(chǎn)品，可應(yīng)用于洗滌清潔用品。10. 如權(quán)利要求1~6任一所述的活性物質(zhì)及其組合在制備具有滅螨和驅(qū)螨產(chǎn)品中的應(yīng) 用。
【文檔編號】A01N65/12GK106070346SQ201610373894
【公開日】2016年11月9日
【申請日】2016年5月31日
【發(fā)明人】何廣義, 苗艷, 辛成業(yè)
【申請人】何廣義, 苗艷, 辛成業(yè)