專利名稱：治療過敏性紊亂的組合物及方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及過敏性疾病的預(yù)防和/或治療領(lǐng)域，并且尤其涉及可預(yù)防和/或治療過敏性疾病的益生菌。
已有文獻(xiàn)描述了酸乳酪的用途，所述酸乳酪含有某些潛在的益生菌，但其中此類細(xì)菌含量相當(dāng)?shù)?通常為105至107個(gè)生物體)且很大程度上是未知的。進(jìn)一步地，許多研究表明市售的酸乳酪中含有大量的其它非必需益生菌，且往往只含死細(xì)菌。此類食物產(chǎn)品以特別的和不受控制的方式消費(fèi)。還沒有有關(guān)此類產(chǎn)品該如何或該以多少進(jìn)行消費(fèi)以達(dá)到有益效果的說明或建議。
本發(fā)明的一個(gè)目的是克服或改善現(xiàn)有技術(shù)的至少一個(gè)不足之處，或提供有用的替代方法。
第一方面，本發(fā)明提供了一種降低IgE水平的方法，其通過施與需要該方法的受試者治療有效量的活益生菌或含活益生菌的組合物而進(jìn)行。
第二方面，提供了過敏反應(yīng)的預(yù)防或治療方法，其通過施與需要此類治療之受試者治療有效量的活益生菌或含活益生菌的組合物而進(jìn)行。
優(yōu)選地，益生菌屬于乳桿菌屬(Lactobacillus)，或含益生菌的組合物包含乳桿菌屬細(xì)菌。最優(yōu)選地，乳桿菌屬細(xì)菌為嗜酸乳桿菌(Lactobacillus acidophilus)和/或干酪乳桿菌(Lactobacilluscasei)。
優(yōu)選地，IgE從高水平降低，其中所述IgE的高水平由過敏原引起或?yàn)檫^敏反應(yīng)性紊亂的后果。
優(yōu)選地，在暴露于過敏原時(shí)或此后的短時(shí)間內(nèi)施用益生菌或含益生菌的組合物。
在本發(fā)明的上下文中，提到抗原或過敏原時(shí)的術(shù)語“暴露”包括天然暴露(例如與日常的食物產(chǎn)品等的接觸或消化)，或季節(jié)性暴露或再次暴露于過敏原(例如花粉或其它空中漂浮的過敏原)，或與皮膚及其它體表接觸，其包括與合成材料或天然物質(zhì)接觸。在這些情況下，益生菌或含有此類菌的組合物優(yōu)選在暴露于抗原/過敏原時(shí)或此后的短時(shí)間內(nèi)施用。在季節(jié)性暴露或再次暴露于過敏原時(shí)，優(yōu)選在季節(jié)開始時(shí)或其后不久開始治療。但在提到抗原或過敏原時(shí)所用的術(shù)語“暴露”也包括在脫敏步驟中的人工暴露或施用(例如注射)抗原/過敏原，或舌下施用抗原/過敏原。在這些情況下，抗原/過敏原優(yōu)選地與益生菌或含它們的組合物共同施用(共同呈遞)。但益生菌也可在抗原/過敏原施用后不久施用。
優(yōu)選地，需要此類治療的受試者選自高危嬰兒；那些從事暴露于過敏原的高危職業(yè)的人群；那些暴露于高危過敏原的人群；那些對特異過敏原有可識(shí)別過敏反應(yīng)的人群；以及那些有過敏反應(yīng)傾向的人群。優(yōu)選地，高危嬰兒為其父母雙方均有過敏性疾病的兒童。優(yōu)選地，那些從事暴露于過敏原的高危職業(yè)的人群；選自鋁熔煉業(yè)者、木工、化工廠工人以及那些與含有乳膠的材料尤其是手套打交道的人群。優(yōu)選地，那些暴露于高危過敏原的人群暴露于蜜蜂毒液。優(yōu)選地，高危過敏原的暴露為腸胃外的暴露。優(yōu)選地，對那些對特異過敏原有可識(shí)別的過敏性疾病的人群，特異過敏原在前花粉季節(jié)、食物或含有乳膠的材料中存在。優(yōu)選地，對那些有過敏反應(yīng)傾向的人群，過敏反應(yīng)的觸發(fā)物為昆蟲的螫入毒液、食物和藥物敏感性。
優(yōu)選地，益生菌或含有益生菌的組合物為片劑或膠囊劑形式。但本領(lǐng)域技術(shù)人員清楚益生菌可在食物來源中存在，例如酸乳酪或其它牛奶產(chǎn)品。
優(yōu)選地，施與人類受試者的益生菌數(shù)量為至少1010個(gè)活菌。更優(yōu)選地，施用量為約1010至約1012個(gè)活菌。
所需劑量隨過敏反應(yīng)的嚴(yán)重性、過敏反應(yīng)的性質(zhì)、受試者年齡及其它標(biāo)準(zhǔn)臨床參數(shù)的不同而變化。本領(lǐng)域技術(shù)人員容易估計(jì)出這些參數(shù)及所需劑量。
在人類受試者中，益生菌或含有它們的組合物優(yōu)選每日施用。
第三方面，本發(fā)明提供了活益生菌的用途，其用于生產(chǎn)降低IgE水平的藥物。
第四方面，本發(fā)明提供了活益生菌的用途，其用于生產(chǎn)治療過敏反應(yīng)的藥物。
根據(jù)第四方面，本發(fā)明提供了鑒定可降低哺乳動(dòng)物IgE水平之細(xì)菌種類的方法，其包括a)將細(xì)菌種類施與哺乳動(dòng)物；b)將過敏原(抗原)施與哺乳動(dòng)物；以及c)用細(xì)菌種類治療后，測定哺乳動(dòng)物的IgE抗體水平，并與未施用細(xì)菌種類的對照哺乳動(dòng)物比較，其中步驟(a)和(b)可以任一順序連續(xù)地或同時(shí)進(jìn)行。
優(yōu)選地，細(xì)菌種類為乳桿菌屬并最優(yōu)選嗜酸乳桿菌或干酪乳桿菌。
鑒定有用的益生菌之動(dòng)物模型優(yōu)選地用小鼠。但可依據(jù)此處公開的同一原理開發(fā)其它的動(dòng)物模型。
在動(dòng)物模型中，優(yōu)選口服施用細(xì)菌種類，但也可腹膜內(nèi)及其它方式施用。最優(yōu)選地，細(xì)菌種類以108至1011個(gè)細(xì)菌數(shù)量施用，并且更優(yōu)選地，以0.6至1.0×1010個(gè)細(xì)菌數(shù)量施用。優(yōu)選地，在施用抗原前施用1至20個(gè)口服劑量，且最優(yōu)選地在施用抗原前施用1至8個(gè)口服劑量。優(yōu)選地口服劑量施用間隔為1至5天，且最優(yōu)選地間隔為2天。優(yōu)選地，施用1至3周以上，且最優(yōu)選地，施用1至2周以上。
用于動(dòng)物模型中的優(yōu)選抗原/過敏原為卵白蛋白(OVA)，但本領(lǐng)域技術(shù)人員清楚如果需要的話，在此模型中其它抗原可用作過敏原。優(yōu)選地，抗原以4至10μg的劑量施用，且最優(yōu)選地以8μg的劑量施用。優(yōu)選地，抗原為腹膜內(nèi)施用。優(yōu)選地，在施用抗原/過敏原的同一天或1天后施用細(xì)菌種類。但某些實(shí)施方案中可在施用細(xì)菌種類后，施用抗原/過敏原，且在此類情況下抗原/過敏原優(yōu)選地于施用4至8個(gè)口服劑量細(xì)菌1天后施用。
優(yōu)選地，施用抗原后繼續(xù)施用細(xì)菌種類。最優(yōu)選地，約施用8個(gè)口服劑量的細(xì)菌。優(yōu)選地，細(xì)菌施用間隔為2天。
優(yōu)選地，從血清獲取IgE抗體。優(yōu)選地，約在施用抗原后14天收集血清。最優(yōu)選地，用ELISA測定法測定IgE抗體水平。但技術(shù)人員知道也可用其它的IgE抗體測定法。
優(yōu)選地，過敏性疾病選自哮喘、濕疹、枯草熱和食物過敏反應(yīng)。
第五方面，本發(fā)明提供了用第四方面的方法鑒定的細(xì)菌種類。
第六方面，本發(fā)明提供了組合物，其包含第四方面的細(xì)菌種類。
優(yōu)選地組合物為膠囊或片劑或類似的制劑形式，但它也可為食物產(chǎn)品的形式。
第七方面，提供了藥物組合物，其包括根據(jù)第四方面的有效量的活菌種類及可作藥用的載體、佐劑、溶劑或賦形劑。
優(yōu)選地細(xì)菌種類為嗜酸乳桿菌。
第八方面，提供了用于評(píng)估用活的益生菌或含活的益生菌之組合物治療的有效性的方法，包括以下步驟a測定來自治療開始前所得樣品中唾液免疫球蛋白亞類的水平，b測定來自治療開始后所得樣品中唾液免疫球蛋白亞類的水平，c比較a)和b)中唾液免疫球蛋白亞類的水平，其中免疫球蛋白亞類水平的改變?yōu)橛行е委煹闹刚鳌?br> 優(yōu)選地免疫球蛋白亞類為IgG1或IgG2，但應(yīng)明白對不同種屬也可便利地使用等價(jià)亞類。
第九方面，提供了用于評(píng)估用活的益生菌或含活的益生菌之組合物治療的有效性的方法，包括以下步驟a測定來自治療開始前所得樣品中IL-4或IFN-γ水平，b測定來自治療開始后所得樣品中IL-4或IFN-γ水平，c比較a)和b)中IL-4或IFN-γ水平，其中IL-4或IFN-γ水平的改變?yōu)橛行е委煹闹刚鳌?br> 但應(yīng)明白任一已知的用于Th1或Th2反應(yīng)的細(xì)胞因子標(biāo)志物均適于代替IFN-γ或IL-4。
圖2在過敏原致敏前/后，嗜酸乳桿菌對針對OVA的IgE反應(yīng)的抑制。
圖3嗜酸乳桿菌對針對OVA的IgE反應(yīng)的抑制作用之劑量依賴性。
圖4活的或死的嗜酸乳桿菌對針對OVA之IgE反應(yīng)的抑制作用。
圖5嗜酸乳桿菌對針對OVA的IgE反應(yīng)的抑制，以及對細(xì)胞因子和IgG抗體亞類反應(yīng)的影響。
優(yōu)選的實(shí)施方案描述本發(fā)明之優(yōu)選的實(shí)施方案現(xiàn)在將僅以實(shí)例方式描述。
已研發(fā)了小鼠動(dòng)物模型，其可鑒定益生菌對針對抗原/過敏原之IgE反應(yīng)的下調(diào)作用。一般所用動(dòng)物為小鼠(如C57BL/6)。動(dòng)物用侯選細(xì)菌種類喂養(yǎng)(活的，劑量為108-1011，頻率為每次間隔1-5天，持續(xù)1-3周)。在某些便利的實(shí)施方案中，動(dòng)物在導(dǎo)入抗原的同時(shí)或其后不久(例如接下來的那天)喂細(xì)菌。小鼠腹膜內(nèi)免疫合適劑量(如4-10μg，優(yōu)選8μg)的抗原(如卵白蛋白)，測定血清(如免疫后第14天)中特異性IgE及總IgE。某些實(shí)例在整個(gè)實(shí)驗(yàn)中持續(xù)喂養(yǎng)受試細(xì)菌(見實(shí)施例)。在另外的實(shí)例中，與死的生物體進(jìn)行比較并估算劑量-反應(yīng)間的關(guān)系。仍在另外的實(shí)例中，檢驗(yàn)了與抗原/過敏原攻擊有關(guān)的益生菌之施用時(shí)間的選擇。實(shí)例顯示(i)適當(dāng)量的活益生菌的常見劑量可減少對抗原/過敏原的IgE反應(yīng)。
(ii)不是所有的益生菌均有相同的減少IgE反應(yīng)的能力-因此該模型可用于選擇人用侯選菌，用于治療或預(yù)防過敏性疾病。
(iii)嗜酸乳桿菌在鈍化IgE對新抗原的反應(yīng)方面尤其有效。
(iv)細(xì)菌種類的口服施用可影響全身的IgE抗體反應(yīng)(在注射抗原后)，因此對有過敏反應(yīng)的受試者(例如昆蟲的螫刺毒作用、食物和藥物過敏)是有價(jià)值的。
(v)益生菌可在施用抗原或暴露于抗原后，下調(diào)IgE的產(chǎn)生—因此通過此方法而選擇的合適劑量之活菌的持續(xù)經(jīng)口攝入對過敏性疾病正在進(jìn)行的治療是有價(jià)值的。
(vi)施用活的益生菌尤其有效。
(vii)共同施用益生菌與抗原/過敏反應(yīng)原，或在抗原/過敏反應(yīng)原攻擊后不久施用益生菌尤其有效。
(viii)為了有效，通常需要的益生菌劑量應(yīng)超過在常規(guī)的食物來源中益生菌的數(shù)量。以此方法鑒定的細(xì)菌種類用于(1)預(yù)防過敏性疾病，(a)高危嬰兒(例如其父母均有過敏反應(yīng))，(b)高危的職業(yè)性暴露的人群(例如鋁熔煉業(yè)者、木工、化工廠工人以及那些與含有乳膠的材料尤其是手套打交道的人群)，(c)腸胃外暴露于高危過敏原后，例如蜜蜂毒液，(d)對特定過敏原有可識(shí)別過敏反應(yīng)的受試者(例如前花粉季節(jié)、食物、乳膠等)，(2)用于抑制已產(chǎn)生的過敏性疾病，例如哮喘、濕疹、枯草熱和食物過敏反應(yīng)。
益生菌可配制成為多種組合物，并且優(yōu)選地組合物為膠囊、片劑、粉劑等形式的藥物組合物。此類制劑可用公知的方法制備，使用可作藥用的載體、賦形劑、溶劑或佐劑。此類步驟和組分公知，并在標(biāo)準(zhǔn)的課本和手冊中有詳細(xì)的描述，例如″雷明頓藥學(xué)科學(xué)和實(shí)踐(RemingtonTheScience and Practice of Pharmacy)″，1995，Mack Publishing Co.Easton，PA 18042，USA，其于此處引用作為參考。
益生菌也可用通常公知的方法配制成食物產(chǎn)品。
現(xiàn)在將以非限制性實(shí)施例的方式更具體地對本發(fā)明進(jìn)行描述。
細(xì)菌(嗜酸乳桿菌或干酪乳桿菌)生長于MRS瓊脂培養(yǎng)皿(3.8％w/v，Oxoid，Basingstoke，UK)。平板于含5％ CO2、多濕氣的環(huán)境中，37℃孵育48小時(shí)。
收獲細(xì)菌，用磷酸鹽緩沖的鹽水(PBS)洗兩次，然后于PBS中重懸至每毫升3-5×1010個(gè)細(xì)菌。
三十只雌性C57/B16 SPF小鼠(Animal Resource Centre，Perth，WA，澳大利亞)用在0.2mL PBS中的0.6-1.0×1010個(gè)嗜酸乳桿菌或干酪乳桿菌之4或8個(gè)口服劑量喂養(yǎng)或只用PBS喂養(yǎng)，間隔為2天。
在最后一劑口服劑量后一天，小鼠腹膜內(nèi)注射在0.2mL PBS中的7μg卵白蛋白(ovalbumin，OVA，Sigma-Aldrich，圣路易斯，密蘇里，美國)和4mg氫氧化鋁(Amphojel，Whitehall實(shí)驗(yàn)室，悉尼，澳大利亞)，或只注射PBS。
然后將已免疫小鼠和對照小鼠置于以下喂養(yǎng)方案用在PBS中的0.6-1.0×1010個(gè)細(xì)菌之8個(gè)口服劑量喂養(yǎng)或只用PBS喂養(yǎng)，間隔為2天。
在最后一劑后2天，小鼠隱靜脈放血并收集血清，用ELISA測定法測定IgE抗體。
結(jié)果如


圖1所示。與給予PBS的免疫小鼠相比較，給予口服劑量的嗜酸乳桿菌和干酪乳桿菌之小鼠可觀察到抑制了針對OVA的IgE抗體反應(yīng)。當(dāng)用嗜酸乳桿菌時(shí)，抑制水平具有統(tǒng)計(jì)顯著性。
實(shí)施例2過敏原致敏后，嗜酸乳桿菌抑制針對OVA的IgE反應(yīng)每只C57/B16小鼠用在明礬中的8μg卵白蛋白(OVA)致敏前或致敏后24小時(shí)，喂以1010個(gè)嗜酸乳桿菌。對照小鼠用生理鹽水喂養(yǎng)。每組小鼠共進(jìn)行10次喂養(yǎng)，然后評(píng)定血清中OVA-特異性IgE抗體和總IgE。在暴露于OVA時(shí)施用嗜酸乳桿菌(或共同施用)較在暴露于過敏原前施用嗜酸乳桿菌更有效，這一點(diǎn)通過對OVA-特異性IgE抗體和總IgE反應(yīng)的抑制而顯示(圖2)。數(shù)據(jù)為5-10只小鼠的均值±SEM。*，與鹽水喂養(yǎng)的致敏小鼠之對照值比較p＜0.05?；€的不同反映了不同的實(shí)驗(yàn)和條件。
實(shí)施例3嗜酸乳桿菌對針對OVA的IgE反應(yīng)的抑制為劑量依賴的小鼠用在明礬中的OVA致敏后24小時(shí)口服喂養(yǎng)108、109或1010個(gè)嗜酸乳桿菌。對照小鼠用PBS喂養(yǎng)。每一劑量施用10次，每2天一次，共21天。最后一劑后一周，測定血清IgE和OVA-特異性IgE抗體?？捎^察到IgE和OVA-特異性IgE抗體的劑量依賴性抑制，1010個(gè)細(xì)菌具有統(tǒng)計(jì)顯著性(圖3)。數(shù)據(jù)為10只小鼠的均值±SEM。*，與鹽水喂養(yǎng)的致敏小鼠之對照值比較p＜0.05。
外推法及至人類受試者表明一劑所需劑量范圍為每天約1010至1012個(gè)活嗜酸乳桿菌，以有效下調(diào)IgE抗體介導(dǎo)的過敏性疾病。這個(gè)量遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過目前市售的食物產(chǎn)品中實(shí)際導(dǎo)入的活乳桿菌屬量(通常為每份約105-107個(gè))。
實(shí)施例4針對OVA的IgE反應(yīng)的抑制取決于活的嗜酸乳桿菌培養(yǎng)物小鼠用活的或福爾馬林殺死的1010個(gè)嗜酸乳桿菌喂養(yǎng)，然后用如實(shí)施例3中所描述的標(biāo)準(zhǔn)方法用OVA致敏。圖4表明與被殺死的細(xì)菌相比，活細(xì)菌可更有效地抑制IgE反應(yīng)。數(shù)據(jù)為5只小鼠的均值±SEM。*，與鹽水喂養(yǎng)的致敏小鼠之值比較p＜0.05。
實(shí)施例5嗜酸乳桿菌對針對OVA的IgE反應(yīng)的抑制與細(xì)胞因子和IgG抗體亞類的反應(yīng)相關(guān)喂以1010個(gè)嗜酸乳桿菌之小鼠的脾中產(chǎn)生較高的IFN-γ和較低的IL-4，此發(fā)現(xiàn)與抑制IgE的反應(yīng)相一致。此外，對照的細(xì)胞因子模式分別與唾液IgG亞類抗體的產(chǎn)生有相關(guān)性，其中后者顯示了IgG2a抗體的上調(diào)和IgG1的下調(diào)(圖5)。數(shù)據(jù)為10只小鼠的均值±SEM。*，與鹽水喂養(yǎng)的致敏小鼠之值比較p＜0.05。
這些結(jié)果表明唾液中IgG亞類抗體為有效的代用標(biāo)志物，可用來監(jiān)測過敏性疾病對干預(yù)治療的反應(yīng)。因此對人類之等價(jià)亞類的測定為合適的實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)，用于檢驗(yàn)有效的脫敏治療，例如唾液(或其它分泌物)IgG2抗過敏原抗體的上升和/或IgGI抗體的下降為治療反應(yīng)的指征。
雖然參照特定的實(shí)施例描述了本發(fā)明，但它可以多種其它形式具體表達(dá)，這一點(diǎn)為本領(lǐng)域技術(shù)人員所明了。尤其是，技術(shù)人員清楚上述方法和組合物可用于任一可降低受試者IgE水平的益生菌。
權(quán)利要求
1.降低IgE水平的方法，其通過施與需要該治療的受試者治療有效量的活益生菌或含活益生菌的組合物而進(jìn)行。
2.過敏反應(yīng)的預(yù)防或治療方法，其通過施與需要此類治療之受試者治療有效量的活益生菌或含活益生菌的組合物而進(jìn)行。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或權(quán)利要求2的方法，其中益生菌為乳桿菌屬，或含益生菌的組合物包含乳桿菌屬細(xì)菌。
4.根據(jù)權(quán)利要求1至3中任意一項(xiàng)所述的方法，其中乳桿菌屬細(xì)菌為嗜酸乳桿菌和/或干酪乳桿菌。
5.根據(jù)權(quán)利要求1至4中任意一項(xiàng)所述的方法，其中益生菌或含益生菌的組合物在暴露于抗原/過敏原時(shí)或此后的短時(shí)間內(nèi)施用。
6.根據(jù)權(quán)利要求5的方法，其中暴露為天然暴露和/或季節(jié)性暴露或再次暴露于抗原/過敏原。
7.根據(jù)權(quán)利要求5的方法，其中暴露為人工暴露于抗原/過敏原。
8.根據(jù)權(quán)利要求7的方法，其中人工暴露為抗原/過敏原的注射。
9.根據(jù)權(quán)利要求7的方法，其中人工暴露為舌下施用抗原/過敏原。
10.根據(jù)權(quán)利要求1至9中任意一項(xiàng)所述的方法，其中所施用的益生菌數(shù)量為至少1010個(gè)活菌。
11.根據(jù)權(quán)利要求10的方法，其中所施用的益生菌數(shù)量為約1010至約1012個(gè)活菌。
12.根據(jù)權(quán)利要求1至11中任意一項(xiàng)所述的方法，其中益生菌或含益生菌的組合物為每日施用。
13.根據(jù)權(quán)利要求1至12中任意一項(xiàng)所述的方法，其中益生菌或含益生菌的組合物為固體劑型。
14.根據(jù)權(quán)利要求13的方法，其中益生菌或含益生菌的組合物為片劑或膠囊劑。
15.根據(jù)權(quán)利要求1至12中任意一項(xiàng)所述的方法，其中益生菌或含益生菌的組合物為食物產(chǎn)品形式。
16.根據(jù)權(quán)利要求1至15中任意一項(xiàng)所述的方法，其中受試者具有對特異過敏原可識(shí)別的過敏性疾病，且其中特異過敏原存在于花粉季節(jié)、食物或含乳膠的材料中。
17.根據(jù)權(quán)利要求1至16中任意一項(xiàng)所述的方法，其中受試者有發(fā)生過敏反應(yīng)的傾向，且其中過敏反應(yīng)的觸發(fā)物為昆蟲的螫刺毒作用、食物和藥物過敏。
18.根據(jù)權(quán)利要求1至17中任意一項(xiàng)所述的方法，其中受試者為腸胃外暴露于過敏原。
19.活益生菌的用途，其用于生產(chǎn)降低IgE水平的藥物。
20.活益生菌的用途，其用于生產(chǎn)治療過敏反應(yīng)的藥物。
21.鑒定可降低哺乳動(dòng)物IgE水平的細(xì)菌種類的方法，其包括a)將細(xì)菌種類施與哺乳動(dòng)物；b)將過敏原(抗原)施與哺乳動(dòng)物；以及c)用細(xì)菌種類治療后，測定哺乳動(dòng)物的IgE抗體水平和/或總IgE水平，并與未施用細(xì)菌種類的對照哺乳動(dòng)物比較，其中步驟(a)和(b)可以任一順序連續(xù)地或同時(shí)進(jìn)行。
22.根據(jù)權(quán)利要求21的方法，其中細(xì)菌種類為乳桿菌屬。
23.根據(jù)權(quán)利要求22的方法，其中細(xì)菌種類為嗜酸乳桿菌。
24.根據(jù)權(quán)利要求21至23中任意一項(xiàng)所述的方法，其中在施用抗原前施用1至20個(gè)口服劑量的細(xì)菌。
25.根據(jù)權(quán)利要求24的方法，其中施用4至8個(gè)口服劑量的細(xì)菌。
26.根據(jù)權(quán)利要求21至25中任意一項(xiàng)所述的方法，其中以口服劑量施用細(xì)菌的間隔為1至5天。
27.根據(jù)權(quán)利要求26的方法，其中以口服劑量施用細(xì)菌的間隔為2天。
28.根據(jù)權(quán)利要求21至27中任意一項(xiàng)所述的方法，其中施用為1至3周以上。
29.根據(jù)權(quán)利要求28的方法，其中施用為1至2周以上。
30.根據(jù)權(quán)利要求21至29中任意一項(xiàng)所述的方法，其中細(xì)菌種類以約108至約1011個(gè)活的細(xì)菌數(shù)量施用。
31.根據(jù)權(quán)利要求21至30中任意一項(xiàng)所述的方法，其中抗原以4至10μg的劑量施用。
32.根據(jù)權(quán)利要求31的方法，其中抗原以8μg的劑量施用。
33.根據(jù)權(quán)利要求21至32中任意一項(xiàng)所述的方法，其中抗原為腹膜內(nèi)施用。
34.根據(jù)權(quán)利要求21至33中任意一項(xiàng)所述的方法，其中在施用細(xì)菌種類的同時(shí)或其后不久施用抗原。
35.根據(jù)權(quán)利要求21至34中任意一項(xiàng)所述的方法，其中于施用4至8個(gè)口服劑量的細(xì)菌1天后施用抗原。
36.根據(jù)權(quán)利要求21至35中任意一項(xiàng)所述的方法，其中施用抗原后繼續(xù)施用細(xì)菌種類。
37.根據(jù)權(quán)利要求21至36中任意一項(xiàng)所述的方法，其中約施用8個(gè)口服劑量的細(xì)菌。
38.根據(jù)權(quán)利要求21至37中任意一項(xiàng)所述的方法，其中細(xì)菌的施用間隔為2天。
39.根據(jù)權(quán)利要求21至38中任意一項(xiàng)所述的方法，其中測定血清中的IgE，且其中約在施用抗原后14天收集血清。
40.根據(jù)權(quán)利要求21至39中任意一項(xiàng)所述的方法，其中用免疫分析法測定IgE抗體水平。
41.細(xì)菌種類，其為根據(jù)權(quán)利要求21至40中任意一項(xiàng)所述的方法而鑒定的。
42.組合物，其包含根據(jù)權(quán)利要求41的有效量的活細(xì)菌種類。
43.根據(jù)權(quán)利要求42的組合物，其為片劑或膠囊劑形式。
44.根據(jù)權(quán)利要求42的組合物，其為食物產(chǎn)品形式。
45.藥物組合物，其包含根據(jù)權(quán)利要求41的有效量的活細(xì)菌種類及可作藥用的載體、佐劑、溶劑或賦形劑。
46.根據(jù)權(quán)利要求41的細(xì)菌種類，其為嗜酸乳桿菌。
47.根據(jù)權(quán)利要求42至45中任意一項(xiàng)所述的組合物，其中細(xì)菌種類為嗜酸乳桿菌。
48.根據(jù)權(quán)利要求2至18中任意一項(xiàng)所述的方法，其中過敏反應(yīng)選自哮喘、濕疹、枯草熱和食物過敏反應(yīng)。
49.用于評(píng)估用活的益生菌或含活的益生菌之組合物治療的有效性的方法，包括以下步驟a測定來自治療開始前所得樣品中唾液免疫球蛋白亞類的水平，b測定來自治療開始后所得樣品中唾液免疫球蛋白亞類的水平，c比較a)和b)中唾液免疫球蛋白亞類的水平，其中免疫球蛋白亞類水平的改變?yōu)橛行е委煹闹刚鳌?br> 50.根據(jù)權(quán)利要求49的方法，其中免疫球蛋白亞類為IgG1或IgG2。
51.用于評(píng)估用活的益生菌或含活的益生菌之組合物治療的有效性的方法，包括以下步驟a測定來自治療開始前所得樣品中IL-4或IFN-γ水平，b測定來自治療開始后所得樣品中IL-4或IFN-γ水平，c比較a)和b)中IL-4或IFN-γ水平，其中IL-4或IFN-γ水平的改變?yōu)橛行е委煹闹刚鳌?br> 全文摘要
本發(fā)明涉及降低IgE水平的方法，并涉及治療過敏反應(yīng)的方法，其通過施用治療有效量的活益生菌或含活益生菌的組合物而進(jìn)行。本發(fā)明也涉及鑒定有用的益生菌之方法，并涉及含益生菌的組合物。
文檔編號(hào)C12N1/20GK1391480SQ00815855
公開日2003年1月15日 申請日期2000年11月20日 優(yōu)先權(quán)日1999年11月19日
發(fā)明者R·L·克闌希, G·派恩 申請人:普洛伯爾有限公司