專利名稱：微藻細胞溶劑化補碳與氣浮法采收相耦合的培養(yǎng)方法
技術領域：
本發(fā)明涉及微藻細胞的培養(yǎng)，特別涉及一種將溶劑化補碳與生物量采收進行耦合的微藻細胞溶劑化補碳與氣浮法采收相耦合的培養(yǎng)方法。
微藻如螺旋藻、鹽藻、小球藻等由于富含蛋白質、脂肪酸、碳水化合物以及其它生理活性物質，具有很高的營養(yǎng)和藥用價值，因而受到世界各國的重視，成為研究和開發(fā)的熱點。近幾年來，我國以螺旋藻為主的微藻產業(yè)得到了迅猛發(fā)展，遍布全國的100多個螺旋藻養(yǎng)殖廠，其生產已達到年產千噸干粉的規(guī)模。隨著微藻產業(yè)化開發(fā)進程的加快，作為生產過程兩個重要環(huán)節(jié)的培養(yǎng)與采收技術也得到了快速發(fā)展。其中，開放式培養(yǎng)生產(如跑道池)存在著工藝落后、產率低、成本高、易污染等缺點，人們已相繼研究并開發(fā)出形式多樣、結構新穎的密閉式光生物反應器，如管道式光生物反應器和板箱式光生物反應器等。在生產工藝方面也開展了許多有益的嘗試，如采用有機碳源進行異養(yǎng)或混合營養(yǎng)方式培養(yǎng)微藻細胞等。采收方面，在采用傳統(tǒng)固液分離技術如離心、絮凝、沉淀、過濾等的基礎上，根據培養(yǎng)體系中細胞生物量濃度通常較低、密度與水體相當?shù)忍攸c，研究人員已開發(fā)出諸如泡載、氣浮、等電聚焦等新穎采收與分離方法，并取得一定成效。
現(xiàn)有各種形式的微藻生產過程和工藝，普遍存在著以下幾個問題，即細胞濃度偏低，采收困難；碳源消耗量較大，利用效率低下，培養(yǎng)成本偏高；培養(yǎng)和采收過程分立，生產過程缺乏連續(xù)性，設備利用效率低。這些現(xiàn)象的產生主要有以下幾個原因①微藻細胞屬光能自養(yǎng)型生物，光照水平直接影響著藻細胞的生長，光強過弱，光通量不足，細胞增殖緩慢，培養(yǎng)周期長，細胞濃度低，給生物量的采收帶來困難；光照過強，不僅造成能源浪費，還將對細胞的正常生長產生抑制作用。而目前的絕大多數(shù)培養(yǎng)裝置都不能為藻細胞的生長提供適宜的光照；②作為光合作用的主要基質，培養(yǎng)液中的碳源水平同樣影響著藻細胞的生長。目前，微藻細胞生長的生產過程中，所需的碳源補給方式主要有兩種一種是直接向培養(yǎng)體系添加NaHCO3，其缺陷在于，NaHCO3的補碳效果不如CO2，而且培養(yǎng)成本較高；并且隨著細胞的生長，環(huán)境pH值將逐漸上升，會對細胞產生抑制和毒害作用；另一種方法則是定量補給CO2氣體，但由于CO2在藻液中的溶解度較低，氣/液傳質阻力較大，CO2氣體的利用效率低下，造成生產成本上升；③采收效率低下。由于現(xiàn)有微藻生產的細胞濃度普遍偏低，其密度與水體相當，傳統(tǒng)的固液分離手段如離心、絮凝、沉淀、過濾往往存在效率低下和成本偏高等問題。而為了提高采收效率，往往需要添加外源性物質如絮凝劑等，這一方面影響著細胞的后續(xù)濃縮過程和產品品質，另一方面改變了培養(yǎng)液組成，降低了培養(yǎng)液的再利用價值；④微藻細胞生產的目的主要不是追求細胞產率而是追求細胞濃度的最大化。而實際的生產情況往往是，當藻細胞生物量濃度積累到一定程度時，由于光通量降低，細胞生長速度將明顯減慢，形成反饋抑制現(xiàn)象。如不及時加以采收，細胞將會老化、沉淀、自溶、變質，甚至對整個培養(yǎng)體系造成破壞。
⑤生物量采收的非連續(xù)性及其與細胞培養(yǎng)過程的分立，導致生產過程缺乏連續(xù)性和統(tǒng)一性，大大降低了生產設備的綜合利用效率。
本發(fā)明的目的在于，克服上述微藻細胞生產工藝和生產設備存在的諸多缺陷，而提供一種簡易、經濟、高效的將藻液補碳和采收有機整合實現(xiàn)微藻細胞養(yǎng)殖工業(yè)化和資源合理利用的微藻細胞的溶劑化補碳與氣浮法采收耦合培養(yǎng)方法，以提高生產效率、降低生產成本，具有重要的實用價值。
本發(fā)明的實施方案如下本發(fā)明提供的微藻細胞溶劑化補碳與氣浮法采收相耦合的培養(yǎng)方法，其工藝步驟如下1)批式培養(yǎng)微藻細胞①在120-125℃溫度下對裝于培養(yǎng)裝置中的培養(yǎng)基進行滅菌處理25-35min；②按0.01-0.1g/L的接種濃度將藻種細胞接種于上述培養(yǎng)裝置中的培養(yǎng)基中，進行細胞培養(yǎng)；培養(yǎng)裝置中的光強為1.5-5.0mw/cm2，溫度為25-35℃，通氣量為5-10vvm；2)在溶劑化補碳/氣浮采收耦合池中對上述藻液進行溶劑化補碳與氣浮采收相耦合的連續(xù)培養(yǎng)
當上述步驟②中的微藻細胞的生長處于對數(shù)生長期至穩(wěn)定期時，將藻液泵入密閉的溶劑化補碳/氣浮采收耦合池中，并同時使用溶氣釋放器將溶氣罐中的富含CO2的溶氣水從耦合池底部通入，對藻液進行補碳，并在耦合池中完成藻液的溶劑化補碳與氣浮采收相耦合的連續(xù)培養(yǎng)；藻液在耦合池中，通過溶氣水氣化過程中釋放氣泡的浮力作用下上行，上行過程中，含水量為30-50％濃藻液自耦合池頂部流出，經3000-4000rpm離心脫水處理后，送入噴霧干燥器中進行干燥處理后制得微藻成品；再氣化的溶氣由耦合池頂部排出，當溶氣中所含CO2的濃度高于煙道氣中CO2的濃度時，將該再氣化溶氣返流至溶氣罐實現(xiàn)循環(huán)使用；所述耦合池中的部分稀藻液作為溶劑水返流至溶氣罐中；其余的稀藻液返流至培養(yǎng)裝置循環(huán)培養(yǎng)；所述富含CO2的溶氣水為富含CO2的稀藻液、培養(yǎng)基或稀藻液和培養(yǎng)基及水的混合物，溶氣水中CO2與溶劑水的體積比為1-10％；所述溶氣罐中富含CO2的溶氣水的制備方法為將稀藻液、培養(yǎng)基或稀藻液和培養(yǎng)基及水的混合物從溶氣罐頂部流入，并同時從溶氣罐底部通入經加壓內含1-10％ CO2的煙道氣或富含CO2的空氣，流入的溶劑水經過噴頭或溢流板被分散，并與溶氣快速混合而制成溶氣水；所述的溶氣罐、耦合池、培養(yǎng)裝置三者的體積比為1∶3-5∶10-15；所述的藻種為螺旋藻、小球藻、聚球藻或鹽藻；所述的培養(yǎng)裝置為鼓泡塔式反應器、板箱式反應器、管道式反應器或氣升式反應器；所述的溶氣釋放器為TS型溶氣釋放器、TJ型溶氣釋放器或針形閥。
本發(fā)明提供的微藻細胞的溶劑化補碳與氣浮法采收相耦合的培養(yǎng)方法，其發(fā)明效果如下與常規(guī)的在板箱式、管道式或氣升式反應器中的培養(yǎng)微藻細胞的培養(yǎng)技術相比，采用本發(fā)明的溶劑化補碳與細胞生物量氣浮采收相耦合的微藻細胞培養(yǎng)新方法，可明顯提高細胞產率，降低培養(yǎng)成本，穩(wěn)定細胞生長環(huán)境，提高設備利用效率①在板箱式、管道式或氣升式反應器中采用標準培養(yǎng)基連續(xù)培養(yǎng)螺旋藻、鹽藻、小球藻時，藻細胞生產率一般為0.2-0.8g干重/L/d，而本方法由于一方面可以為藻細胞的生長有效提供易于吸收的溶劑化的碳源，另一方面通過適量采收使體系的細胞濃度始終維持在一合理的水平，最大限度地發(fā)揮其生長潛力，因而可顯著提高生產效率(5-20倍)和細胞產率(1.0-2.8g干重/L/d)；②培養(yǎng)螺旋藻、鹽藻或小球藻時，傳統(tǒng)的標準培養(yǎng)基中的碳源主要為NaHCO3、葡萄糖或其它有機碳源，其缺點在于培養(yǎng)體系的pH波動較大，特別是有機碳源易造成培養(yǎng)過程的污染；而本方法由于以CO2作為碳源，能為細胞生長提供穩(wěn)定的pH環(huán)境(8.5-9.5)，且不存在污染問題；③傳統(tǒng)的以NaHCO3、葡萄糖或其它有機碳源作為碳源，成本較高；采收過程中所添加的一些外源性物質如絮凝劑，將降低培養(yǎng)液的后續(xù)利用價值，使培養(yǎng)成本上升；而本方法使用的碳源是煙道氣，一方面其來源廣泛、價格低廉，另一方面它是以溶劑化的方式進行碳源補給的，可反復循環(huán)利用，從而降低生產成本20-50％；④本方法簡單，工藝流程明晰、科學，操作方便，運行穩(wěn)定，放大容易，適宜于藻類及其它光合生物細胞的工業(yè)化高效培養(yǎng)；還由于該耦合培養(yǎng)將細胞培養(yǎng)與采收有機整合，增進培養(yǎng)過程的連續(xù)性，可降低能耗20-35％，并提高裝置的綜合利用效率30-48％。
實施例1.
螺旋藻細胞的溶劑化補碳與氣浮法采收相耦合的細胞培養(yǎng)，其步驟如下1.制作螺旋藻細胞光密度值ODλ與干重濃度x(g/L)關系的標準曲線取螺旋藻細胞培養(yǎng)液，在普通離心機上以3000-4000rpm的轉速離心處理10-20min；棄上清，再以蒸餾水清洗得到的細胞濃縮液，再離心；如此反復3-6次，取試管10支，各注入細胞濃縮液10，9，8，7，6，5，4，3，2，1ml，再分別往其中加入蒸餾水0，1，2，3，4，5，6，7，8，9ml；以培養(yǎng)基為對照，在721或752型分光光度計上，根據螺旋藻細胞的吸收波長λ，分別測定上述不同稀釋度藻液的光密度值ODλ；與此同時，取上述不同濃度的藻液各5ml，置于潔凈的稱量瓶中，在普通烘箱上烘干8-16hr至恒重(處理溫度為105-110℃)；通過稱量得到的細胞干重質量m和藻液體積v，再結合藻液光密度值，即可得到該藻液光密度值與細胞干重濃度的標準曲線；
2.批式培養(yǎng)螺旋藻細胞藻種為螺旋藻；培養(yǎng)裝置為內循環(huán)氣升式光反應器，其體積為10升；①在121℃溫度下對裝于內循環(huán)氣升式光反應器中的培養(yǎng)基進行滅菌處理30min；本實施例的培養(yǎng)基為不含碳源的Zarrouk培養(yǎng)基；②按0.1g/L的接種濃度將螺旋藻藻種接種于內循環(huán)氣升式光反應器中的培養(yǎng)基中，進行細胞培養(yǎng)，反應器中的光強為2.25mw/cm2，溫度為30℃，通氣量為7.5vvm；3.在溶劑化補碳/氣浮采收耦合池中對螺旋藻藻液進行溶劑化補碳與氣浮采收相耦合的連續(xù)培養(yǎng)當上述步驟②中的螺旋藻細胞的生長處于對數(shù)生長期至穩(wěn)定期時，將藻液泵入密閉的溶劑化補碳/氣浮采收耦合池中，并同時使用針形閥將溶氣罐中的富含CO2的溶氣水從耦合池底部通入，對藻液進行補碳，并在耦合池中完成藻液的溶劑化補碳與氣浮采收相耦合的連續(xù)培養(yǎng)，耦合池的體積為2.25升；其富含CO2的溶氣水為富含CO2的稀藻液，溶氣水中CO2與溶劑水的體積比為10％；藻液在耦合池中，通過溶氣水氣化過程中釋放氣泡的浮力作用下上行，上行過程中，含水量為30-50％濃藻液自耦合池頂部流出，經3200rpm離心脫水處理后，送入噴霧干燥器中進行干燥處理后制得微藻成品。
本實施例的溶氣罐中富含CO2的溶氣水的制備方法為將稀藻液從溶氣罐頂部流入，并同時從溶氣罐底部通入經加壓內含1％ CO2的煙道氣，流入的稀藻液經過噴頭或溢流板被分散，并與溶氣快速混合而制成溶氣水，溶氣罐的體積為0.75升；再氣化的溶氣由耦合池頂部排出，當溶氣中所含CO2的濃度高于煙道氣中CO2的濃度時，將該再氣化溶氣返流至溶氣罐實現(xiàn)循環(huán)使用；所述耦合池中的部分稀藻液作為溶劑水返流至溶氣罐中；其余的稀藻液返流至培養(yǎng)裝置循環(huán)培養(yǎng)。
本實施例螺旋藻細胞的采收率為0.05％時，耦合體系的藻細胞產率為2.1g/干重/L/d，比單立的氣升式反應器提高了7.2倍，培養(yǎng)成本下降了34％。設備的利用效率提高了40.5％。
實施例2.
小球藻細胞的溶劑化補碳與氣浮法采收相耦合的培養(yǎng)，其步驟如下1.制作小球藻細胞光密度值ODλ與干重濃度x(g/L)關系的標準曲線取小球藻細胞培養(yǎng)液，在普通離心機上以3000-4000rpm的轉速離心處理10-20min；棄上清，再以蒸餾水清洗得到的細胞濃縮液，再離心；如此反復3-6次，取試管10支，各注入細胞濃縮液10，9，8，7，6，5，4，3，2，1ml，再分別往其中加入蒸餾水0，1，2，3，4，5，6，7，8，9ml；以培養(yǎng)基為對照，在721或752型分光光度計上，根據小球藻細胞的吸收波長λ，分別測定上述不同稀釋度藻液的光密度值ODλ；與此同時，取上述不同濃度的藻液各5ml，置于潔凈的稱量瓶中，在普通烘箱上烘干8-16hr至恒重(處理溫度為105-110℃)；通過稱量得到的細胞干重質量m和藻液體積v，再結合藻液光密度值，即可得到該藻液光密度值與細胞干重濃度的標準曲線；2.批式培養(yǎng)小球藻細胞藻種為小球藻；培養(yǎng)裝置為鼓泡塔式光反應器，其體積為10升；③在121℃溫度下對裝于內循環(huán)氣升式光反應器中的培養(yǎng)基進行滅菌處理30min；本實施例的培養(yǎng)基為不含碳源的Zarrouk培養(yǎng)基；④按0.2g/L的接種濃度將小球藻藻種接種于內循環(huán)氣升式光反應器中的培養(yǎng)基中，進行細胞培養(yǎng)，反應器中的光強為2.4mw/cm2，溫度為30℃，通氣量為5.5vvm；3.在溶劑化補碳/氣浮采收耦合池中對小球藻藻液進行溶劑化補碳與氣浮采收相耦合的連續(xù)培養(yǎng)當上述步驟②中的小球藻細胞的生長處于對數(shù)生長期至穩(wěn)定期時，將藻液泵入密閉的溶劑化補碳/氣浮采收耦合池中，并同時使用針形閥將溶氣罐中的富含CO2的溶氣水從耦合池底部通入，對藻液進行補碳，并在耦合池中完成藻液的溶劑化補碳與氣浮采收相耦合的連續(xù)培養(yǎng)，耦合池的體積為5升；其富含CO2的溶氣水為富含CO2的稀藻液，溶氣水中CO2與溶劑水的體積比為8％；藻液在耦合池中，通過溶氣水氣化過程中釋放氣泡的浮力作用下上行，上行過程中，含水量為30-50％濃藻液自耦合池頂部流出，經3500rpm離心脫水處理后，送入噴霧干燥器中進行干燥處理后制得微藻成品。
本實施例的溶氣罐中富含CO2的溶氣水的制備方法為將稀藻液從溶氣罐頂部流入，并同時從溶氣罐底部通入經加壓內含1％ CO2的煙道氣，流入的稀藻液經過噴頭或溢流板被分散，并與溶氣快速混合而制成溶氣水，溶氣罐的體積為1升；再氣化的溶氣由耦合池頂部排出，當溶氣中所含CO2的濃度高于煙道氣中CO2的濃度時，將該再氣化溶氣返流至溶氣罐實現(xiàn)循環(huán)使用；所述耦合池中的部分稀藻液作為溶劑水返流至溶氣罐中；其余的稀藻液返流至培養(yǎng)裝置循環(huán)培養(yǎng)。
本實施例螺旋藻細胞的采收率為0.07％時，耦合體系的藻細胞產率為1.5g/干重/L/d，比單立的氣升式反應器提高了5.3倍，培養(yǎng)成本下降了28％。設備的利用效率提高了37％。
實施例3.
聚球藻細胞的溶劑化補碳與氣浮法采收相耦合的培養(yǎng)，其步驟如下1.制作聚球藻細胞光密度值ODλ與干重濃度x(g/L)關系的標準曲線取聚球藻細胞培養(yǎng)液，在普通離心機上以3000-4000rpm的轉速離心處理10-20min；棄上清，再以蒸餾水清洗得到的細胞濃縮液，再離心；如此反復3-6次，取試管10支，各注入細胞濃縮液10，9，8，7，6，5，4，3，2，1ml，再分別往其中加入蒸餾水0，1，2，3，4，5，6，7，8，9ml；以培養(yǎng)基為對照，在721或752型分光光度計上，根據聚球藻細胞的吸收波長λ，分別測定上述不同稀釋度藻液的光密度值ODλ；與此同時，取上述不同濃度的藻液各5ml，置于潔凈的稱量瓶中，在普通烘箱上烘干8-16hr至恒重(處理溫度為105-110℃)；通過稱量得到的細胞干重質量m和藻液體積v，再結合藻液光密度值，即可得到該藻液光密度值與細胞干重濃度的標準曲線；2.批式培養(yǎng)聚球藻細胞藻種為聚球藻；培養(yǎng)裝置為鼓泡塔式光反應器，其體積為4.8升；①在121℃溫度下對裝于內循環(huán)氣升式光反應器中的培養(yǎng)基進行滅菌處理30min；本實施例的培養(yǎng)基為不含碳源的Zarrouk培養(yǎng)基；②按0.12g/L的接種濃度將小球藻藻種接種于內循環(huán)氣升式光反應器中的培養(yǎng)基中，進行細胞培養(yǎng)，反應器中的光強為4.4mw/cm2，溫度為30℃，通氣量為4.5vvm；3.在溶劑化補碳/氣浮采收耦合池中對聚球藻藻液進行溶劑化補碳與氣浮采收相耦合的連續(xù)培養(yǎng)當上述步驟②中的聚球藻細胞的生長處于對數(shù)生長期至穩(wěn)定期時，將藻液泵入密閉的溶劑化補碳/氣浮采收耦合池中，并同時使用針形閥將溶氣罐中的富含CO2的溶氣水從耦合池底部通入，對藻液進行補碳，并在耦合池中完成藻液的溶劑化補碳與氣浮采收相耦合的連續(xù)培養(yǎng)，耦合池的體積為1.2升；其富含CO2的溶氣水為富含CO2的稀藻液，溶氣水中CO2與溶劑水的體積比為8％；藻液在耦合池中，通過溶氣水氣化過程中釋放氣泡的浮力作用下上行，上行過程中，含水量為30-50％濃藻液自耦合池頂部流出，經3500rpm離心脫水處理后，送入噴霧干燥器中進行干燥處理后制得微藻成品。
本實施例的溶氣罐中富含CO2的溶氣水的制備方法為將稀藻液從溶氣罐頂部流入，并同時從溶氣罐底部通入經加壓內含1％ CO2的煙道氣，流入的稀藻液經過噴頭或溢流板被分散，并與溶氣快速混合而制成溶氣水，溶氣罐的體積為0.32升；再氣化的溶氣由耦合池頂部排出，當溶氣中所含CO2的濃度高于煙道氣中CO2的濃度時，將該再氣化溶氣返流至溶氣罐實現(xiàn)循環(huán)使用；所述耦合池中的部分稀藻液作為溶劑水返流至溶氣罐中；其余的稀藻液返流至培養(yǎng)裝置循環(huán)培養(yǎng)。
本實施例螺旋藻細胞的采收率為0.032％時，耦合體系的藻細胞產率為1.42g/干重/L/d，比單立的氣升式反應器提高了3.3倍，培養(yǎng)成本下降了31％。設備的利用效率提高了42％。
權利要求
1.一種微藻細胞溶劑化補碳與氣浮法采收相耦合的培養(yǎng)方法，其工藝步驟如下1)批式培養(yǎng)微藻細胞③在120-125℃溫度下對裝于培養(yǎng)裝置中的培養(yǎng)基進行滅菌處理25-35min；④按0.01-0.1g/L的接種濃度將藻種細胞接種于上述培養(yǎng)裝置中的培養(yǎng)基中，進行細胞培養(yǎng)；培養(yǎng)裝置中的光強為1.5-5.0mw/cm2，溫度為25-35℃，通氣量為5-10vvm；2)在溶劑化補碳/氣浮采收耦合池中對上述藻液進行溶劑化補碳與氣浮采收相耦合的連續(xù)培養(yǎng)當上述步驟②中的微藻細胞的生長處于對數(shù)生長期至穩(wěn)定期時，將藻液泵入密閉的溶劑化補碳/氣浮采收耦合池中，并同時使用溶氣釋放器將溶氣罐中的富含CO2的溶氣水從耦合池底部通入，對藻液進行補碳，并在耦合池中完成藻液的溶劑化補碳與氣浮采收相耦合的連續(xù)培養(yǎng)；所述富含CO2的溶氣水為富含CO2的稀藻液、培養(yǎng)基或稀藻液和培養(yǎng)基及水的混合物，溶氣水中CO2與溶劑水的體積比為1-10％；所述的溶氣罐、耦合池、培養(yǎng)裝置三者的體積比為1∶3-5∶10-15；藻液在耦合池中，通過溶氣水氣化過程中釋放氣泡的浮力作用下上行，上行過程中，含水量為30-50％濃藻液自耦合池頂部流出，經3000-4000rpm離心脫水處理后，送入噴霧干燥器中進行干燥處理后制得微藻成品。
2.按權利要求1所述的微藻細胞溶劑化補碳與氣浮法采收相耦合的培養(yǎng)方法，其特征在于，所述溶氣罐中富含CO2的溶氣水的制備方法為將稀藻液、培養(yǎng)基或稀藻液和培養(yǎng)基及水的混合物從溶氣罐頂部流入，并同時從溶氣罐底部通入經加壓內含1-10％ CO2的煙道氣或富含CO2的空氣，流入的溶劑水經過噴頭或溢流板被分散，并與溶氣快速混合而制成溶氣水。
3.按權利要求1所述的微藻細胞溶劑化補碳與氣浮法采收相耦合的培養(yǎng)方法，其特征在于，再氣化的溶氣由耦合池頂部排出，當溶氣中所含CO2的濃度高于煙道氣中CO2的濃度時，將該再氣化溶氣返流至溶氣罐實現(xiàn)循環(huán)使用。
4.按權利要求1所述的微藻細胞溶劑化補碳與氣浮法采收相耦合的培養(yǎng)方法，其特征在于，所述耦合池中的部分稀藻液作為溶劑水返流至溶氣罐中；其余的稀藻液返流至培養(yǎng)裝置循環(huán)培養(yǎng)。
5.按權利要求1所述的微藻細胞溶劑化補碳與氣浮法采收相耦合的培養(yǎng)方法，其特征在于，所述的藻種為螺旋藻、小球藻、聚球藻或鹽藻。
6.按權利要求1所述的微藻細胞溶劑化補碳與氣浮法采收相耦合的培養(yǎng)方法，其特征在于，所述的培養(yǎng)裝置為鼓泡塔式反應器、板箱式反應器、管道式反應器或氣升式反應器。
7.按權利要求1所述的微藻細胞溶劑化補碳與氣浮法采收相耦合的培養(yǎng)方法，其特征在于，所述的溶氣釋放器為TS型溶氣釋放器、TJ型溶氣釋放器或針形閥。
全文摘要
本發(fā)明涉及微藻細胞溶劑化補碳與氣浮法采收相耦合的培養(yǎng)方法,其步驟為:首先對培養(yǎng)器中培養(yǎng)基進行滅菌處理;將藻種細胞接種于培養(yǎng)基中,進行批式培養(yǎng);在微藻細胞生長處于對數(shù)生長期至穩(wěn)定期時,將藻液泵入密閉的溶劑化補碳/氣浮采收耦合池中,并同時從耦合池底部通入富含CO
文檔編號C12N1/12GK1376777SQ0110993
公開日2002年10月30日 申請日期2001年3月26日 優(yōu)先權日2001年3月26日
發(fā)明者曾文爐, 李浩然, 石紅, 蔡昭鈴, 歐陽藩 申請人:中國科學院化工冶金研究所