專利名稱：具有抑制癌細(xì)胞生長功能的新的人蛋白及其編碼序列的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于生物技術(shù)領(lǐng)域，具體地說，本發(fā)明涉及新的編碼具有抑癌功能的人蛋白的多核苷酸和此多核苷酸編碼的多肽。本發(fā)明還涉及此多核苷酸和多肽的用途和制備。
背景技術(shù)：
人基因組學(xué)研究目前是國際上的熱點(diǎn)，除人染色體DNA大規(guī)模測(cè)序，表達(dá)序列測(cè)序(EST)的方法外，還缺少從功能開始的篩選具有功能基因的高通量的方法。
癌癥是危害人類健康的主要疾病之一。為了有效地治療和預(yù)防腫瘤，目前人們已越來越關(guān)注腫瘤的基因治療。因此，本領(lǐng)域迫切需要開發(fā)研究具有抑癌功能的人蛋白及其激動(dòng)劑/抑制劑。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一類新的具有抑癌功能的人蛋白多肽以及其片段、類似物和衍生物。
本發(fā)明的另一目的是提供編碼這些多肽的多核苷酸。
本發(fā)明的另一目的是提供生產(chǎn)這些多肽的方法以及該多肽和編碼序列的用途。
在本發(fā)明的第一方面，提供新穎的分離出的具有抑癌功能的蛋白多肽，它包含具有選自下組的氨基酸序列的多肽SEQ ID NO2、5、8、11、14、17、20、23、26、29、32、35；或其保守性變異多肽、或其活性片段、或其活性衍生物。
較佳地，該多肽是具有選自下組的氨基酸序列的多肽SEQ ID NO2、5、8、11、14、17、20、23、26、29、32、35。
在本發(fā)明的第二方面，提供了一種分離的多核苷酸，它包含一核苷酸序列，該核苷酸序列與選自下組的一種核苷酸序列有至少85％相同性(a)編碼上述的具有抑癌功能的蛋白多肽的多核苷酸；(b)與多核苷酸(a)互補(bǔ)的多核苷酸。較佳地，該多核苷酸編碼的多肽具有選自下組的氨基酸序列SEQ ID NO2、5、8、11、14、17、20、23、26、29、32、35。更佳地，該多核苷酸的序列選自下組SEQ ID NO3、6、9、12、15、18、21、24、27、30、33、36的編碼區(qū)序列或全長序列。
在本發(fā)明的第三方面，提供了含有上述多核苷酸的載體，以及被該載體轉(zhuǎn)化或轉(zhuǎn)導(dǎo)的宿主細(xì)胞或者被上述多核苷酸直接轉(zhuǎn)化或轉(zhuǎn)導(dǎo)的宿主細(xì)胞。
在本發(fā)明的第四方面，提供了制備具有抑癌功能的蛋白活性的多肽的制備方法，該方法包含(a)在適合表達(dá)具有抑癌功能的蛋白的條件下，培養(yǎng)上述被轉(zhuǎn)化或轉(zhuǎn)導(dǎo)的宿主細(xì)胞；(b)從培養(yǎng)物中分離出具有抑癌功能的蛋白活性的多肽。
在本發(fā)明的第五方面，提供了與上述的具有抑癌功能的蛋白多肽特異性結(jié)合的抗體。還提供了可用于檢測(cè)的核酸分子，它含有上述的多核苷酸中連續(xù)10個(gè)核苷酸至全長核苷酸，較佳地它含有連續(xù)的約10-800個(gè)核苷酸。
在本發(fā)明的第六方面，提供了一種藥物組合物，它含有安全有效量的本發(fā)明的具有抑癌功能的蛋白多肽以及藥學(xué)上可接受的載體。這些藥物組合物可治療癌癥以及細(xì)胞異常增殖等病癥。
本發(fā)明的其它方面由于本文的公開內(nèi)容，對(duì)本領(lǐng)域的技術(shù)人員而言是顯而易見的。
具體實(shí)施例方式
本發(fā)明采用大規(guī)模cDNA克隆轉(zhuǎn)染癌細(xì)胞，在獲得具有抑癌作用的基礎(chǔ)上，經(jīng)測(cè)序證明為新的基因，進(jìn)一步得到全長cDNA克隆。DNA轉(zhuǎn)染試驗(yàn)證明，本發(fā)明的具有抑癌功能的蛋白對(duì)癌細(xì)胞(肝癌細(xì)胞)具有抑制克隆形成的作用，其抑制率在50％或50％以上。
如本文所用，“分離的”是指物質(zhì)從其原始環(huán)境中分離出來(如果是天然的物質(zhì)，原始環(huán)境即是天然環(huán)境)。如活體細(xì)胞內(nèi)的天然狀態(tài)下的多聚核苷酸和多肽是沒有分離純化的，但同樣的多聚核苷酸或多肽如從天然狀態(tài)中同存在的其他物質(zhì)中分開，則為分離純化的。
如本文所用，“分離的具有抑癌功能的蛋白或多肽”是指具有抑癌功能的蛋白多肽基本上不含天然與其相關(guān)的其它蛋白、脂類、糖類或其它物質(zhì)。本領(lǐng)域的技術(shù)人員能用標(biāo)準(zhǔn)的蛋白質(zhì)純化技術(shù)純化具有抑癌功能的蛋白?；旧霞兊亩嚯脑诜沁€原聚丙烯酰胺凝膠上能產(chǎn)生單一的主帶。
本發(fā)明的多肽可以是重組多肽、天然多肽、合成多肽，優(yōu)選重組多肽。本發(fā)明的多肽可以是天然純化的產(chǎn)物，或是化學(xué)合成的產(chǎn)物，或使用重組技術(shù)從原核或真核宿主(例如，細(xì)菌、酵母、高等植物、昆蟲和哺乳動(dòng)物細(xì)胞)中產(chǎn)生。根據(jù)重組生產(chǎn)方案所用的宿主，本發(fā)明的多肽可以是糖基化的，或可以是非糖基化的。本發(fā)明的多肽還可包括或不包括起始的甲硫氨酸殘基。
本發(fā)明還包括具有抑癌功能的人蛋白的片段、衍生物和類似物。如本文所用，術(shù)語“片段”、“衍生物”和“類似物”是指基本上保持本發(fā)明的天然具有抑癌功能的人蛋白相同的生物學(xué)功能或活性的多肽。本發(fā)明的多肽片段、衍生物或類似物可以是(i)有一個(gè)或多個(gè)保守或非保守性氨基酸殘基(優(yōu)選保守性氨基酸殘基)被取代的多肽，而這樣的取代的氨基酸殘基可以是也可以不是由遺傳密碼編碼的，或(ii)在一個(gè)或多個(gè)氨基酸殘基中具有取代基團(tuán)的多肽，或(iii)成熟多肽與另一個(gè)化合物(比如延長多肽半衰期的化合物，例如聚乙二醇)融合所形成的多肽，或(iv)附加的氨基酸序列融合到此多肽序列而形成的多肽(如前導(dǎo)序列或分泌序列或用來純化此多肽的序列或蛋白原序列)。根據(jù)本文的教導(dǎo)，這些片段、衍生物和類似物屬于本領(lǐng)域熟練技術(shù)人員公知的范圍。
本發(fā)明的多核苷酸可以是DNA形式或RNA形式。DNA形式包括cDNA、基因組DNA或人工合成的DNA。DNA可以是單鏈的或是雙鏈的。DNA可以是編碼鏈或非編碼鏈。以FP977蛋白(在本申請(qǐng)中，蛋白質(zhì)的命名采用其克隆編號(hào))為例，編碼成熟多肽的編碼區(qū)序列可以與SEQ ID NO3所示的編碼區(qū)序列相同或者是簡(jiǎn)并的變異體。如本文所用，“簡(jiǎn)并的變異體”在本發(fā)明中是指編碼具有SEQ ID NO2的蛋白質(zhì)，但與SEQ IDNO3所示的編碼區(qū)序列有差別的核酸序列。再以FP1147蛋白(在本申請(qǐng)中，蛋白質(zhì)的命名采用其克隆編號(hào))為例，編碼成熟多肽的編碼區(qū)序列可以與SEQ ID NO6所示的編碼區(qū)序列相同或者是簡(jiǎn)并的變異體。如本文所用，“簡(jiǎn)并的變異體”在本發(fā)明中是指編碼具有SEQ ID NO5的蛋白質(zhì)，但與SEQ ID NO6所示的編碼區(qū)序列有差別的核酸序列。對(duì)于本發(fā)明的其他具有抑癌功能的蛋白，可依此類推。
編碼成熟多肽的多核苷酸包括只編碼成熟多肽的編碼序列；成熟多肽的編碼序列和各種附加編碼序列；成熟多肽的編碼序列(和任選的附加編碼序列)以及非編碼序列。
術(shù)語“編碼多肽的多核苷酸”可以是包括編碼此多肽的多核苷酸，也可以是還包括附加編碼和/或非編碼序列的多核苷酸。
本發(fā)明還涉及上述多核苷酸的變異體，其編碼與本發(fā)明有相同的氨基酸序列的多肽或多肽的片段、類似物和衍生物。此多核苷酸的變異體可以是天然發(fā)生的等位變異體或非天然發(fā)生的變異體。這些核苷酸變異體包括取代變異體、缺失變異體和插入變異體。如本領(lǐng)域所知的，等位變異體是一個(gè)多核苷酸的替換形式，它可能是一個(gè)或多個(gè)核苷酸的取代、缺失或插入，但不會(huì)從實(shí)質(zhì)上改變其編碼的多肽的功能。
本發(fā)明還涉及與上述的序列雜交且兩個(gè)序列之間具有至少50％，較佳地至少70％，更佳地至少80％相同性的多核苷酸。本發(fā)明特別涉及在嚴(yán)格條件下與本發(fā)明所述多核苷酸可雜交的多核苷酸。在本發(fā)明中，“嚴(yán)格條件”是指(1)在較低離子強(qiáng)度和較高溫度下的雜交和洗脫，如0.2×SSC，0.1％SDS，60℃；或(2)雜交時(shí)加有變性劑，如50％(v/v)甲酰胺，0.1％小牛血清/0.1％Ficoll，42℃等；或(3)僅在兩條序列之間的相同性至少在95％以上，更好是97％以上時(shí)才發(fā)生雜交。并且，可雜交的多核苷酸編碼的多肽與SEQ IDNO2所示的成熟多肽有相同的生物學(xué)功能(以FP977蛋白為例)和活性。
本發(fā)明還涉及與上述的序列雜交的核酸片段。如本文所用，“核酸片段”的長度至少含15個(gè)核苷酸，較好是至少30個(gè)核苷酸，更好是至少50個(gè)核苷酸，最好是至少100個(gè)核苷酸以上。核酸片段可用于核酸的擴(kuò)增技術(shù)(如PCR)以確定和/或分離編碼具有抑癌功能的蛋白的多聚核苷酸。
本發(fā)明中的多肽和多核苷酸優(yōu)選以分離的形式提供，更佳地被純化至均質(zhì)。
本發(fā)明的DNA序列能用幾種方法獲得。例如，用本領(lǐng)域熟知的雜交技術(shù)分離DNA。這些技術(shù)包括但不局限于1)用探針與基因組或cDNA文庫雜交以檢出同源性核苷酸序列，和2)表達(dá)文庫的抗體篩選以檢出具有共同結(jié)構(gòu)特征的克隆的DNA片段。
編碼具有抑癌功能的蛋白的特異DNA片段序列產(chǎn)生也能用下列方法獲得1)從基因組DNA分離雙鏈DNA序列；2)化學(xué)合成DNA序列以獲得所需多肽的雙鏈DNA。
上述提到的方法中，分離基因組DNA最不常用。當(dāng)需要的多肽產(chǎn)物的整個(gè)氨基酸序列已知時(shí)，DNA序列的直接化學(xué)合成是經(jīng)常選用的方法。如果所需的氨基酸的整個(gè)序列不清楚時(shí)，DNA序列的直接化學(xué)合成是不可能的，選用的方法是cDNA序列的分離。分離感興趣的cDNA的標(biāo)準(zhǔn)方法是從高表達(dá)該基因的供體細(xì)胞分離mRNA并進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄，形成質(zhì)?；蚴删wcDNA文庫。提取mRNA的方法已有多種成熟的技術(shù)，試劑盒也可從商業(yè)途徑獲得(Qiagene)。而構(gòu)建cDNA文庫也是通常的方法(Sambrook，et al.，Molecular Cloning，A Laboratory Manual，Cold Spring Harbor Laboratory.New York，1989)。還可得到商業(yè)供應(yīng)的cDNA文庫，如Clontech公司的不同cDNA文庫。當(dāng)結(jié)合使用聚合酶反應(yīng)技術(shù)時(shí)，即使極少的表達(dá)產(chǎn)物也能克隆。
可用常規(guī)方法從這些cDNA文庫中篩選本發(fā)明的基因。這些方法包括(但不限于)(1)DNA-DNA或DNA-RNA雜交；(2)標(biāo)志基因的功能出現(xiàn)或喪失；(3)測(cè)定具有抑癌功能的蛋白的轉(zhuǎn)錄本的水平；(4)通過免疫學(xué)技術(shù)或測(cè)定生物學(xué)活性，來檢測(cè)基因表達(dá)的蛋白產(chǎn)物。上述方法可單用，也可多種方法聯(lián)合應(yīng)用。
在第(1)種方法中，雜交所用的探針是與本發(fā)明的多核苷酸的任何一部分同源，其長度至少15個(gè)核苷酸，較好是至少30個(gè)核苷酸，更好是至少50個(gè)核苷酸，最好是至少100個(gè)核苷酸。此外，探針的長度通常在2kb之內(nèi)，較佳地為1kb之內(nèi)。此處所用的探針通常是在本發(fā)明的基因DNA序列信息的基礎(chǔ)上化學(xué)合成的DNA序列。本發(fā)明的基因本身或者片段當(dāng)然可以用作探針。DNA探針的標(biāo)記可用放射性同位素，熒光素或酶(如堿性磷酸酶)等。
在第(4)種方法中，檢測(cè)具有抑癌功能的蛋白基因表達(dá)的蛋白產(chǎn)物可用免疫學(xué)技術(shù)如Western印跡法，放射免疫沉淀法，酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)等。
應(yīng)用PCR技術(shù)擴(kuò)增DNA/RNA的方法(Saiki，et al.Science 1985；2301350-1354)被優(yōu)選用于獲得本發(fā)明的基因。特別是很難從文庫中得到全長的cDNA時(shí)，可優(yōu)選使用RACE法(RACE-cDNA末端快速擴(kuò)增法)，用于PCR的引物可根據(jù)本文所公開的本發(fā)明的序列信息適當(dāng)?shù)剡x擇，并可用常規(guī)方法合成?？捎贸Ｒ?guī)方法如通過凝膠電泳分離和純化擴(kuò)增的DNA/RNA片段。
如上所述得到的本發(fā)明的基因，或者各種DNA片段等的核苷酸序列的測(cè)定可用常規(guī)方法如雙脫氧鏈終止法(Sanger et al. PNAS，1977，745463-5467)。這類核苷酸序列測(cè)定也可用商業(yè)測(cè)序試劑盒等。為了獲得全長的cDNA序列，測(cè)序需反復(fù)進(jìn)行。有時(shí)需要測(cè)定多個(gè)克隆的cDNA序列，才能拼接成全長的cDNA序列。
本發(fā)明也涉及包含本發(fā)明的多核苷酸的載體，以及用本發(fā)明的載體或具有抑癌功能的蛋白編碼序列經(jīng)基因工程產(chǎn)生的宿主細(xì)胞，以及經(jīng)重組技術(shù)產(chǎn)生本發(fā)明所述多肽的方法。
通過常規(guī)的重組DNA技術(shù)(Science，1984；2241431)，可利用本發(fā)明的多聚核苷酸序列可用來表達(dá)或生產(chǎn)重組的具有抑癌功能的蛋白多肽。一般來說有以下步驟(1).用本發(fā)明的編碼具有抑癌功能的人蛋白的多核苷酸(或變異體)，或用含有該多核苷酸的重組表達(dá)載體轉(zhuǎn)化或轉(zhuǎn)導(dǎo)合適的宿主細(xì)胞；(2).在合適的培養(yǎng)基中培養(yǎng)的宿主細(xì)胞；(3).從培養(yǎng)基或細(xì)胞中分離、純化蛋白質(zhì)。
本發(fā)明中，具有抑癌功能的人蛋白多核苷酸序列可插入到重組表達(dá)載體中。術(shù)語“重組表達(dá)載體”指本領(lǐng)域熟知的細(xì)菌質(zhì)粒、噬菌體、酵母質(zhì)粒、植物細(xì)胞病毒、哺乳動(dòng)物細(xì)胞病毒如腺病毒、逆轉(zhuǎn)錄病毒或其他載體。在本發(fā)明中適用的載體包括但不限于在細(xì)菌中表達(dá)的基于T7的表達(dá)載體(Rosenberg，et al.Gene，1987，56125)；在哺乳動(dòng)物細(xì)胞中表達(dá)的pMSXND表達(dá)載體(Lee and Nathans，J Bio Chem.2633521，1988)和在昆蟲細(xì)胞中表達(dá)的來源于桿狀病毒的載體?？傊灰茉谒拗黧w內(nèi)復(fù)制和穩(wěn)定，任何質(zhì)粒和載體都可以用。表達(dá)載體的一個(gè)重要特征是通常含有復(fù)制起點(diǎn)、啟動(dòng)子、標(biāo)記基因和翻譯控制元件。
本領(lǐng)域的技術(shù)人員熟知的方法能用于構(gòu)建含具有抑癌功能的人蛋白編碼DNA序列和合適的轉(zhuǎn)錄/翻譯控制信號(hào)的表達(dá)載體。這些方法包括體外重組DNA技術(shù)、DNA合成技術(shù)、體內(nèi)重組技術(shù)等(Sambroook，et a1.)。所述的DNA序列可有效連接到表達(dá)載體中的適當(dāng)啟動(dòng)子上，以指導(dǎo)mRNA合成。這些啟動(dòng)子的代表性例子有大腸桿菌的lac或trp啟動(dòng)子；λ噬菌體PL啟動(dòng)子；真核啟動(dòng)子包括CMV立即早期啟動(dòng)子、早期和晚期SV40啟動(dòng)子、反轉(zhuǎn)錄病毒的LTRs和其他一些已知的可控制基因在原核或真核細(xì)胞或其病毒中表達(dá)的啟動(dòng)子。表達(dá)載體還包括翻譯起始用的核糖體結(jié)合位點(diǎn)和轉(zhuǎn)錄終止子。
此外，表達(dá)載體優(yōu)選地包含一個(gè)或多個(gè)選擇性標(biāo)記基因，以提供用于選擇轉(zhuǎn)化的宿主細(xì)胞的表型性狀，如真核細(xì)胞培養(yǎng)用的二氫葉酸還原酶、新霉素抗性以及綠色熒光蛋白(GFP)，或用于大腸桿菌的四環(huán)素或氨芐青霉素抗性。
包含上述的適當(dāng)DNA序列以及適當(dāng)啟動(dòng)子或者控制序列的載體，可以用于轉(zhuǎn)化適當(dāng)?shù)乃拗骷?xì)胞，以使其能夠表達(dá)蛋白質(zhì)。
宿主細(xì)胞可以是原核細(xì)胞，如細(xì)菌細(xì)胞；或是低等真核細(xì)胞，如酵母細(xì)胞；或是高等真核細(xì)胞，如哺乳動(dòng)物細(xì)胞。代表性例子有大腸桿菌，鏈霉菌屬；鼠傷寒沙門氏菌的細(xì)菌細(xì)胞；真菌細(xì)胞如酵母；植物細(xì)胞；果蠅S2或Sf9的昆蟲細(xì)胞；CHO、COS或Bowes黑素瘤細(xì)胞的動(dòng)物細(xì)胞等。
本發(fā)明的多核苷酸在高等真核細(xì)胞中表達(dá)時(shí)，如果在載體中插入增強(qiáng)子序列時(shí)將會(huì)使轉(zhuǎn)錄得到增強(qiáng)。增強(qiáng)子是DNA的順式作用因子，通常大約有10到300個(gè)堿基對(duì)，作用于啟動(dòng)子以增強(qiáng)基因的轉(zhuǎn)錄。可舉的例子包括在復(fù)制起始點(diǎn)晚期一側(cè)的100到270個(gè)堿基對(duì)的SV40增強(qiáng)子、在復(fù)制起始點(diǎn)晚期一側(cè)的多瘤增強(qiáng)子以及腺病毒增強(qiáng)子等。
本領(lǐng)域一般技術(shù)人員都清楚如何選擇適當(dāng)?shù)妮d體、啟動(dòng)子、增強(qiáng)子和宿主細(xì)胞。
用重組DNA轉(zhuǎn)化宿主細(xì)胞可用本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的常規(guī)技術(shù)進(jìn)行。當(dāng)宿主為原核生物如大腸桿菌時(shí)，能吸收DNA的感受態(tài)細(xì)胞可在指數(shù)生長期后收獲，用CaCl2法處理，所用的步驟在本領(lǐng)域眾所周知?？晒┻x擇的是用MgCl2。如果需要，轉(zhuǎn)化也可用電穿孔的方法進(jìn)行。當(dāng)宿主是真核生物，可選用如下的DNA轉(zhuǎn)染方法磷酸鈣共沉淀法，常規(guī)機(jī)械方法如顯微注射、電穿孔、脂質(zhì)體包裝等。
獲得的轉(zhuǎn)化子可以用常規(guī)方法培養(yǎng)，表達(dá)本發(fā)明的基因所編碼的多肽。根據(jù)所用的宿主細(xì)胞，培養(yǎng)中所用的培養(yǎng)基可選自各種常規(guī)培養(yǎng)基。在適于宿主細(xì)胞生長的條件下進(jìn)行培養(yǎng)。當(dāng)宿主細(xì)胞生長到適當(dāng)?shù)募?xì)胞密度后，用合適的方法(如溫度轉(zhuǎn)換或化學(xué)誘導(dǎo))誘導(dǎo)選擇的啟動(dòng)子，將細(xì)胞再培養(yǎng)一段時(shí)間。
在上面的方法中的重組多肽可包被于細(xì)胞內(nèi)、細(xì)胞外或在細(xì)胞膜上表達(dá)或分泌到細(xì)胞外。如果需要，可利用其物理的、化學(xué)的和其它特性通過各種分離方法分離和純化重組的蛋白。這些方法是本領(lǐng)域技術(shù)人員所熟知的。這些方法的例子包括但并不限于常規(guī)的復(fù)性處理、用蛋白沉淀劑處理(鹽析方法)、離心、滲透破菌、超處理、超離心、分子篩層析(凝膠過濾)、吸附層析、離子交換層析、高效液相層析(HPLC)和其它各種液相層析技術(shù)及這些方法的結(jié)合。
重組的具有抑癌功能的人蛋白或多肽有多方面的用途。這些用途包括(但不限于)直接做為藥物治療具有抑癌功能的蛋白功能低下或喪失所致的疾病(如癌癥)，和用于篩選促進(jìn)或?qū)咕哂幸职┕δ艿牡鞍坠δ艿目贵w、多肽或其它配體。例如，抗體可用于激活或抑制具有抑癌功能的人蛋白的功能。用表達(dá)的重組具有抑癌功能的人蛋白篩選多肽庫可用于尋找有治療價(jià)值的能抑制或刺激具有抑癌功能的人蛋白功能的多肽分子。
本發(fā)明也提供了篩選藥物以鑒定提高(激動(dòng)劑)或阻遏(拮抗劑)具有抑癌功能的人蛋白的藥劑的方法。激動(dòng)劑提高具有抑癌功能的人蛋白刺激細(xì)胞增殖等生物功能，而拮抗劑阻止和治療與細(xì)胞過度增殖有關(guān)的紊亂如各種癌癥。例如，能在藥物的存在下，將哺乳動(dòng)物細(xì)胞或表達(dá)具有抑癌功能的人蛋白的膜制劑與標(biāo)記的具有抑癌功能的人蛋白一起培養(yǎng)。然后測(cè)定藥物提高或阻遏此相互作用的能力。
具有抑癌功能的人蛋白的拮抗劑包括篩選出的抗體、化合物、受體缺失物和類似物等。所述的拮抗劑可以與具有抑癌功能的人蛋白結(jié)合并消除其功能，或是抑制具有抑癌功能的人蛋白的產(chǎn)生，或是與多肽的活性位點(diǎn)結(jié)合使多肽不能發(fā)揮生物學(xué)功能。具有抑癌功能的人蛋白的拮抗劑可用于治療用途。
在篩選作為拮抗劑的化合物時(shí)，可以將本發(fā)明蛋白加入生物分析測(cè)定中，通過測(cè)定化合物影響具有抑癌功能的蛋白和其受體之間的相互作用來確定化合物是否是拮抗劑。用上述篩選化合物的同樣方法，可以篩選出起拮抗劑作用的受體缺失物和類似物。
本發(fā)明的多肽可直接用于疾病治療，例如，各種惡性腫瘤、和細(xì)胞異常增殖等。
本發(fā)明的多肽，及其片段、衍生物、類似物或它們的細(xì)胞可以用來作為抗原以生產(chǎn)抗體。這些抗體可以是多克隆或單克隆抗體。多克隆抗體可以通過將此多肽直接注射動(dòng)物的方法得到。制備單克隆抗體的技術(shù)包括雜交瘤技術(shù)，三瘤技術(shù)，人B-細(xì)胞雜交瘤技術(shù)，EBV-雜交瘤技術(shù)等。
可以將本發(fā)明的多肽和拮抗劑與合適的藥物載體組合后使用。這些載體可以是水、葡萄糖、乙醇、鹽類、緩沖液、甘油以及它們的組合。組合物包含安全有效量的多肽或拮抗劑以及不影響藥物效果的載體和賦形劑。這些組合物可以作為藥物用于疾病治療。
本發(fā)明還提供含有一種或多種容器的藥盒或試劑盒，容器中裝有一種或多種本發(fā)明的藥用組合物成分。與這些容器一起，可以有由制造、使用或銷售藥品或生物制品的政府管理機(jī)構(gòu)所給出的指示性提示，該提示反映出生產(chǎn)、使用或銷售的政府管理機(jī)構(gòu)許可其在人體上施用。此外，本發(fā)明的多肽可以與其它的治療化合物結(jié)合使用。
藥物組合物可以以方便的方式給藥，如通過局部、靜脈內(nèi)、腹膜內(nèi)、肌內(nèi)、皮下、鼻內(nèi)或皮內(nèi)的給藥途徑。具有抑癌功能的蛋白以有效地治療和/或預(yù)防具體的適應(yīng)癥的量來給藥。施用于患者的具有抑癌功能的蛋白的量和劑量范圍將取決于許多因素，如給藥方式、待治療者的健康條件和診斷醫(yī)生的判斷。
具有抑癌功能的人蛋白的多聚核苷酸也可用于多種治療目的?；蛑委熂夹g(shù)可用于治療由于具有抑癌功能的蛋白的無表達(dá)或異常/無活性的具有抑癌功能的蛋白的表達(dá)所致的細(xì)胞增殖、發(fā)育或代謝異常。重組的基因治療載體可用于治療具有抑癌功能的蛋白表達(dá)或活性異常所致的疾病。來源于病毒的表達(dá)載體如逆轉(zhuǎn)錄病毒、腺病毒、腺病毒相關(guān)病毒、單純皰疹病毒、細(xì)小病毒等可用于將具有抑癌功能的蛋白基因轉(zhuǎn)移至細(xì)胞內(nèi)。構(gòu)建攜帶具有抑癌功能的蛋白基因的重組病毒載體的方法可見于已有文獻(xiàn)(Sambrook，etal.)。另外重組具有抑癌功能的人蛋白基因可包裝到脂質(zhì)體中轉(zhuǎn)移至細(xì)胞內(nèi)。
抑制具有抑癌功能的人蛋白mRNA的寡聚核苷酸(包括反義RNA和DNA)以及核酶也在本發(fā)明的范圍之內(nèi)。核酶是一種能特異性分解特定RNA的酶樣RNA分子，其作用機(jī)制是核酶分子與互補(bǔ)的靶RNA特異性雜交后進(jìn)行核酸內(nèi)切作用。反義的RNA和DNA及核酶可用已有的任何RNA或DNA合成技術(shù)獲得，如固相磷酸酰胺化學(xué)合成法合成寡核苷酸的技術(shù)已廣泛應(yīng)用。反義RNA分子可通過編碼該RNA的DNA序列在體外或體內(nèi)轉(zhuǎn)錄獲得。這種DNA序列已整合到載體的RNA聚合酶啟動(dòng)子的下游。為了增加核酸分子的穩(wěn)定性，可用多種方法對(duì)其進(jìn)行修飾，如增加兩側(cè)的序列長度，核糖核苷之間的連接應(yīng)用磷酸硫酯鍵或肽鍵而非磷酸二酯鍵。
多聚核苷酸導(dǎo)入組織或細(xì)胞內(nèi)的方法包括將多聚核苷酸直接注入到體內(nèi)組織中；或在體外通過載體(如病毒、噬菌體或質(zhì)粒等)先將多聚核苷酸導(dǎo)入細(xì)胞中，再將細(xì)胞移植到體內(nèi)等。
本發(fā)明的多肽還可用作肽譜分析，例如，多肽可用物理的、化學(xué)或酶進(jìn)行特異性切割，并進(jìn)行一維或二維或三維的凝膠電泳分析。
本發(fā)明還提供了針對(duì)具有抑癌功能的人蛋白抗原決定簇的抗體。這些抗體包括(但不限于)多克隆抗體、單克隆抗體、嵌合抗體、單鏈抗體、Fab片段和Fab表達(dá)文庫產(chǎn)生的片段。這些抗體可用常規(guī)方法制備?？咕哂幸职┕δ艿娜说鞍椎目贵w可用于免疫組織化學(xué)技術(shù)中，檢測(cè)活檢標(biāo)本中的具有抑癌功能的人蛋白。
與具有抑癌功能的人蛋白結(jié)合的單克隆抗體也可用放射性同位素標(biāo)記，注入體內(nèi)可跟蹤其位置和分布。本發(fā)明中的抗體可用于治療或預(yù)防與具有抑癌功能的人蛋白相關(guān)的疾病。給予適當(dāng)劑量的抗體可以刺激或阻斷具有抑癌功能的人蛋白的產(chǎn)生或活性。
抗體也可用于設(shè)計(jì)針對(duì)體內(nèi)某一特殊部位的免疫毒素。如具有抑癌功能的人蛋白高親和性的單克隆抗體可與細(xì)菌或植物毒素(如白喉毒素，蓖麻蛋白，紅豆堿等)共價(jià)結(jié)合。
多克隆抗體的生產(chǎn)可用具有抑癌功能的人蛋白或多肽免疫動(dòng)物，如家兔，小鼠，大鼠等。多種佐劑可用于增強(qiáng)免疫反應(yīng)，包括但不限于弗氏佐劑等。
具有抑癌功能的人蛋白單克隆抗體可用雜交瘤技術(shù)生產(chǎn)(Kohler and Milstein.Nature，1975，256495-497)。將人恒定區(qū)和非人源的可變區(qū)結(jié)合的嵌合抗體可用已有的技術(shù)生產(chǎn)(Morrison et al，PNAS，1985，816851)。而已有的生產(chǎn)單鏈抗體的技術(shù)(U.S.PatNo.4946778)也可用于生產(chǎn)抗具有抑癌功能的人蛋白的單鏈抗體。
能與本發(fā)明蛋白結(jié)合的多肽分子可通過篩選由各種可能組合的氨基酸結(jié)合于固相物組成的隨機(jī)多肽庫而獲得。篩選時(shí)，必須對(duì)具有抑癌功能的人蛋白分子進(jìn)行標(biāo)記。
本發(fā)明還涉及定量和定位檢測(cè)具有抑癌功能的人蛋白水平的診斷試驗(yàn)方法。這些試驗(yàn)是本領(lǐng)域所熟知的，且包括FISH測(cè)定和放射免疫測(cè)定。試驗(yàn)中所檢測(cè)的具有抑癌功能的人蛋白水平，可以用作解釋具有抑癌功能的人蛋白在各種疾病中的重要性和用于診斷具有抑癌功能的蛋白起作用的疾病。
具有抑癌功能的蛋白的多聚核苷酸可用于具有抑癌功能的蛋白相關(guān)疾病的診斷和治療。在診斷方面，具有抑癌功能的蛋白的多聚核苷酸可用于檢測(cè)具有抑癌功能的蛋白的表達(dá)與否或在疾病狀態(tài)下具有抑癌功能的蛋白的異常表達(dá)。如具有抑癌功能的蛋白DNA序列可用于對(duì)活檢標(biāo)本的雜交以判斷具有抑癌功能的蛋白的表達(dá)異常。雜交技術(shù)包括Southern印跡法，Northern印跡法、原位雜交等。這些技術(shù)方法都是公開的成熟技術(shù)，相關(guān)的試劑盒都可從商業(yè)途徑得到。本發(fā)明的多核苷酸的一部分或全部可作為探針固定在微陣列(Microarray)或DNA芯片(又稱為“基因芯片”)上，用于分析組織中基因的差異表達(dá)分析和基因診斷。用具有抑癌功能的蛋白特異的引物進(jìn)行RNA-聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)體外擴(kuò)增也可檢測(cè)具有抑癌功能的蛋白的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物。
檢測(cè)具有抑癌功能的蛋白基因的突變也可用于診斷具有抑癌功能的蛋白相關(guān)的疾病。具有抑癌功能的蛋白突變的形式包括與正常野生型具有抑癌功能的蛋白DNA序列相比的點(diǎn)突變、易位、缺失、重組和其它任何異常等?？捎靡延械募夹g(shù)如Southern印跡法、DNA序列分析、PCR和原位雜交檢測(cè)突變。另外，突變有可能影響蛋白的表達(dá)，因此用Northern印跡法、Western印跡法可間接判斷基因有無突變。
本發(fā)明的序列對(duì)染色體鑒定也是有價(jià)值的。這些序列會(huì)特異性地針對(duì)某條人染色體具體位置且并可以與其雜交。目前，需要鑒定染色體上的各基因的具體位點(diǎn)。然而現(xiàn)在只有很少的基于實(shí)際序列數(shù)據(jù)(重復(fù)多態(tài)性)的染色體標(biāo)記物可用于標(biāo)記染色體位置。為了將這些序列與疾病相關(guān)基因相關(guān)聯(lián)。第一步就是將本發(fā)明DNA序列定位于染色體上。
簡(jiǎn)而言之，根據(jù)cDNA制備PCR引物(優(yōu)選15-35bp)，可以將序列定位于染色體上。然后，將這些引物用于PCR篩選含各條人染色體的體細(xì)胞雜合細(xì)胞。只有那些含有相應(yīng)于引物的人基因的雜合細(xì)胞會(huì)產(chǎn)生擴(kuò)增的片段。
體細(xì)胞雜合細(xì)胞的PCR定位法，是將DNA定位到具體染色體的快捷方法。使用本發(fā)明的的寡核苷酸引物，通過類似方法，可利用一組來自特定染色體的片段或大量基因組克隆而實(shí)現(xiàn)亞定位?？捎糜谌旧w定位的其它類似策略包括原位雜交、用標(biāo)記的流式分選的染色體預(yù)篩選和雜交預(yù)選，從而構(gòu)建染色體特異的cDNA庫。
將cDNA克隆與中期染色體進(jìn)行熒光原位雜交(FISH)，可以在一個(gè)步驟中精確地進(jìn)行染色體定位。此技術(shù)的綜述，參見Verma等，Human Chromosomesa Manual of BasicTechniques，Pergamon Press，New York(1988)。
一旦序列被定位到準(zhǔn)確的染色體位置，此序列在染色體上的物理位置就可以與基因圖數(shù)據(jù)相關(guān)聯(lián)。這些數(shù)據(jù)可見于例如，V.Mckusick，Mendelian Inheritance in Man(可通過與Johns Hopkins University Welch Medical Library聯(lián)機(jī)獲得)。然后可通過連鎖分析，確定基因與業(yè)已定位到染色體區(qū)域上的疾病之間的關(guān)系。
接著，需要測(cè)定患病和未患病個(gè)體間的cDNA或基因組序列差異。如果在一些或所有的患病個(gè)體中觀察到某突變，而該突變?cè)谌魏握€(gè)體中未觀察到，則該突變可能是疾病的病因。比較患病和未患病個(gè)體，通常涉及首先尋找染色體中結(jié)構(gòu)的變化，如從染色體水平可見的或用基于cDNA序列的PCR可檢測(cè)的缺失或易位。
本發(fā)明的具有抑癌功能的蛋白核苷酸全長序列或其片段通常可以用PCR擴(kuò)增法、重組法或人工合成的方法獲得。對(duì)于PCR擴(kuò)增法，可根據(jù)本發(fā)明所公開的有關(guān)核苷酸序列，尤其是開放閱讀框序列來設(shè)計(jì)引物，并用市售的cDNA庫或按本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的常規(guī)方法所制備的cDNA庫作為模板，擴(kuò)增而得有關(guān)序列。當(dāng)序列較長時(shí)，常常需要進(jìn)行兩次或多次PCR擴(kuò)增，然后再將各次擴(kuò)增出的片段按正確次序拼接在一起。
一旦獲得了有關(guān)的序列，就可以用重組法來大批量地獲得有關(guān)序列。這通常是將其克隆入載體，再轉(zhuǎn)入細(xì)胞，然后通過常規(guī)方法從增殖后的宿主細(xì)胞中分離得到有關(guān)序列。
此外，還可用人工合成的方法來合成有關(guān)序列，尤其是片段長度較短時(shí)。通常，通過先合成多個(gè)小片段，然后再進(jìn)行連接可獲得序列很長的片段。
目前，已經(jīng)可以完全通過化學(xué)合成來編碼本發(fā)明蛋白(或其片段，或其衍生物)的DNA序列。然后可將該DNA序列引入本領(lǐng)域中的各種DNA分子(如載體)和細(xì)胞中。此外，還可通過化學(xué)合成將突變引入本發(fā)明蛋白序列中。
此外，由于本發(fā)明的具有抑癌功能的蛋白具有源自人的天然氨基酸序列，因此，與來源于其他物種的同族蛋白相比，預(yù)計(jì)在施用于人時(shí)將具有更高的活性和/或更低的副作用(例如在人體內(nèi)的免疫原性更低或沒有)。
下面結(jié)合具體實(shí)施例，進(jìn)一步闡述本發(fā)明。應(yīng)理解，這些實(shí)施例僅用于說明本發(fā)明而不用于限制本發(fā)明的范圍。下列實(shí)施例中未注明具體條件的實(shí)驗(yàn)方法，通常按照常規(guī)條件如Sambrook等人，分子克隆實(shí)驗(yàn)室手冊(cè)(New YorkCold Spring Harbor LaboratoryPress，1989)中所述的條件，或按照制造廠商所建議的條件。
實(shí)施例1cDNA基因的獲得及對(duì)癌細(xì)胞克隆形成的抑制作用FP977、FP1147、FP1188、FP1193、FP1477、FP1572、FP2568、FP2653、FP2823、FP2860、FP2926和FP3235來自于自建的人胎兒cDNA文庫。取3、6、9月齡的胎兒組織，用Trizol試劑(GIBCO BRL公司)按廠方說明書提取總RNA，用mRNA提純?cè)噭┖?Pharmacia公司)提取mRNA。用pCMV-script TMXR cDNA文庫構(gòu)建試劑盒(Stratagene公司)構(gòu)建上述mRNA的cDNA文庫。其中反轉(zhuǎn)錄酶改用MMLV-RT-Superscript II(GIBCO BRL)，反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)在42℃進(jìn)行。轉(zhuǎn)化XL 10-Gold感受細(xì)胞，獲得了1×106cfu/μg cDNA滴度的cDNA文庫。第一輪隨機(jī)挑取cDNA克隆，其后以高豐度cDNA克隆和已證明有抑癌細(xì)胞生長功能的cDNA克隆為探針，雜交篩選cDNA文庫，挑取弱陽性及陰性克隆。用Qiagen 96孔板質(zhì)粒抽提試劑盒，按廠家說明書進(jìn)行質(zhì)粒DNA的提取。質(zhì)粒DNA和空載體同時(shí)轉(zhuǎn)染肝癌細(xì)胞系7721。100ng DNA酒精沉淀干燥后，加6μl H2O溶解，待轉(zhuǎn)染。每份DNA樣品中加0.74μl脂質(zhì)體及9.3μl無血清培液，混勻后，室溫放置10分鐘。每管中加150μl無血清培液，均分加入3孔生長于96孔板的7721細(xì)胞中，37℃放置2小時(shí)，每孔再加50μl無血清培液，37℃24小時(shí)。每孔換100μl全培液，37℃24小時(shí)，換含G418的全培液100μl，37℃24-48小時(shí)，邊觀察，邊換G418濃度不等的培液。約2-3次后，直到鏡檢細(xì)胞有克隆形成，計(jì)數(shù)。發(fā)現(xiàn)上述克隆有抑制癌細(xì)胞克隆形成作用，結(jié)果如下表所示。
cDNA克隆轉(zhuǎn)染細(xì)胞(7721)克隆形成情況

對(duì)cDNA克隆采用雙脫氧終止法，在ABI377 DNA自動(dòng)測(cè)序儀上測(cè)定其一端近500bp的核苷酸序列。分析后，確定為新基因克隆，進(jìn)行另一端測(cè)序，仍未獲得全長cDNA序列，設(shè)計(jì)引物，再次進(jìn)行測(cè)序，直到獲得全長序列(SEQ ID NO1、4、7、10、13、16、19、22、25、28、31、34)。
實(shí)施例2PCR法獲得全長基因及重組蛋白的獲得取胎兒組織，用Trizol試劑(GIBCO BRL公司)按廠方說明書提取總RNA，用mRNA提純?cè)噭┖?Pharmacia公司)提取mRNA。用MMLV-RT-Superscript II(GIBCO BRL)，反轉(zhuǎn)錄酶在42℃進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)，獲得胎兒cDNA。利用各個(gè)基因的特異引物(如下表所示)，按97℃ 3′1個(gè)循環(huán)。94℃30″60℃30″72℃ 1′共35個(gè)循環(huán)，72℃ 10′，1個(gè)循環(huán)進(jìn)行PCR擴(kuò)增，獲得含有完整開放閱讀框序列的各蛋白基因的擴(kuò)增產(chǎn)物。擴(kuò)增產(chǎn)物經(jīng)測(cè)序驗(yàn)證，與實(shí)施例1測(cè)得的序列相符，隨后用常規(guī)技術(shù)將擴(kuò)增產(chǎn)物轉(zhuǎn)入宿主細(xì)胞，獲得重組蛋白(SEQ ID NO2、5、8、11、14、17、20、23、26、29、32、35)。
基因特異引物


實(shí)施例3cDNA克隆序列分析1.FP977A核苷酸序列(SEQ ID NO1)長度2657個(gè)堿基1 GGTAATTTGT CAAACTGATG TCTCAGGTAA GGTGCCACTC TACGCATTGC AGAGTTGTGG61 CAGATACCCC AGACCTGTTC TCTGTTTCAT TTTCAAAAAT GCTTTCCAAC ATTGAACTTC121 TCTCTCCTGC TAGCCCTAAA AGAAGATCCC CCTAGAAATC TCCTGGAAGA GAGGAAATCA181 GATCAACTGG GGCTGCCTCA GACCTTGCAG CAGGAATTCT CCCTGATCAA TGTGCAAATC241 CGGAATGTCA ATGTGGAGAT GGATGCGGCA GACAGGAGCT GCACAGTGTC TGTGCACTGC301 AGCAACCATC GTGTCAAGAT GCTGGTGAAG TTCCCTGCAC AGTACCCAAA CAACGCCGCC361 CCTTCCTTCC AGTTTATTAA CCCCACAACC ATCACATCCA CCATGAAAGC TAAGCTGCTG421 AAGATCCTGA AGGACACAGC CCTGCAGAAA GTGAAGCGTG GCCAGAGCTG CCTGGAGCCC481 TGCCTGCGCC AGCTCGTCTC CTGCCTTGAG TCCTTTGTGA ACCAGGAAGA CAGCGCTTCC541 AGCAACCCGT TTGCACTCCC CAACTCTGTC ACTCCCCCCT TACCGACGTT TGCGCGGGTG601 ACCACGGCTT ACGGGTCGTA CCAGGACGCC AACATTCCCT TTCCTAGGAC TTCTGGGGCC661 AGGTTCTGCG GAGCAGGTTA CCTGGTATAT TTCACAAGGC CCATGACAAT GCATCGGGCG721 GTGTCTCCCA CAGAGCCTAC TCCGAGATCT CTCTCAGCCT TGTCTGCTTA TCACACTGGC781 TTGATCGCGC CCATGAAGAT CCGCACAGAG GCCCCTGGGA ACCTTCGTTT ATACAGTGGG841 AGCCCCACTC GCAGCGAGAA AGAGCAGGTC TCCATCAGCT CCTTCTACTA CAAGGAGCGG901 AAATCAAGAC GATGGAAAAG TAAGCGTGAG GGATCAGACT CTGGCAATCG ACAGATCAAG951 GCTGCTGGGA AAGTCATCAT CCAGGATATT GCTTGCCTCC TGCCTGTTCA CAAATCGCTG1021 GGAGAGCTGT ACATATTGAA TGTGAATGAT ATTCAGGAAA CATGTCAGAA GAATGCCGCC1081 TCTGCCTTGC TCGTTGGAAG AAAGGATCTT GTCCAGGTTT GGTCGCTGGC TACGGTAGCT1141 ACAGATCTTT GCCTTGGTCC GAAATCTGAC CCAGATTTGG AAACACCCTG GGCTCGACAT1201 CCATTTGGGC GGCAGCTGCT GGAGTCCCTG TTGGCTCACT ATTGCCGGCT CCGGGATGTT1251 CAGACACTGG CGATGCTCTG TAGCGTGTTT GAAGCCCAGT CTCGGCCTCA GGGGCTACCA1321 AACCCCTTTG GGCCTTTTCC TAACCGTTCT TCTAATCTTG TGGTGTCCCA TAGTCGATAT1381 CCTAGCTTTA CCTCTTCTGG TTCCTGCTCC AGTATGTCAG ACCCAGGGCT CAACACTGGC1441 GGCTGGAACA TAGCGGGAAG AGAGGCAGAG CACTTGTCCT CCCCTTGGGG AGAATCCTCA1501 CCAGAAGAGC TCCGCTTTGG GAGTCTGACC TACAGTGATC CCCGTGAGCG AGAACGCGAC1561 CAGCATGATA AAAATAAAAG GCTCCTGGAC CCCGCCAATA CCCAGCAATT TGATGACTTT1621 AAGAAATGCT ATGGGGAAAT CCTCTACCGT TGGGGTCTGA GAGAGAAGCG AGCTGAAGTG1681 TTGAAGTTTG TCTCCTGTCC TCCTGACCCT CACAAAGGGA TCGAGTTCGG CGTGTACTGC1741 AGCCACTGCC GGAGTGAGGT CCGTGGCACG CAGTGTGCCA TCTGCAAAGG CTTCACGTTC1801 CAGTGTGCCA TCTGTCACGT GGCTGTGCGG GGATCGTCCA ATTTCTGCCT GACCTGTGGG1861 CACGGTGGCC ACACCAGCCA CATGATGGAG TGGTTTCGGA CCCAGGAGGT GTGTCCCACC1921 GGGTGTGGGT GCCACTGCCT GCTTGAAAGC ACTTTCTGAA CCTACAGAAG TTGGGTATTG1981 TCTGAAATCC CAGAGGACCC ATAAGTGCCG GTGACAAGCT GTCTGTCAGG GGAGAGGCTC2041 CAGAACCTGG GTTCGTCCCC AGTGAGACCG GAGGATGATC CCCCAAGGAC TGCGCAGCAT2101 CAGCTCTTGG TGGGCCTCTG CCTTCTCTTC TGTTTGGCCA CCTGGTGTGG ATGTCACTGT2161 GTGAAGATAA GGACAGAAGT GCAGAGCTGC GCTTTGTGTG TTGTCTATGT CGGCTGAGCT2221 ACCAAGGTGG AAGTTTTCAT GGAGAAAAGC ACCTGGCTCC AGGGCCAGTG TTACAGTGTT2281 ACCCTGTAAG GTGTTAGCCT TAAACCACCG AGCAGCGTTC TCTTGATGCC AGTGCAGAGA2341 CCAGAGTCAG ATGCCCGAGG ACAGTGGGTA GGAATTTCAT CAACAAATGG ACCTATGGCA2401 TCATGGCTTT AGAAGCTGGT ACATTTACTG AGCTGATGGA CAGTGGCCTT CTAAAATATG2461 ACACTTAAAT TGTAAATATG CACTGTACTT AAGGATTCTT AAGATGTATT TTTTTGTTAT2521 TTCTCCTCCA GCTGCTATCC CTTGGCTAAT AAAATTCTAG TAATTTGAAA AAAAAAAAAA2581 AGAGAGAAAG TTAAAAAAAA AAAAAAAAAA AAAAAAAAAA AAAAAAAAAA AAAAAAAAAA2641 AAAAAAAAAA AAAAAAAB核苷酸序列 (SEQ ID NO2) 長度566個(gè)氨基酸1 MDAADRSCTV SVHCSNHRVK MLVKFPAQYP NNAAPSFQFI NPTTITSTMK AKLLKILKDT61 ALQKVKRGQS CLEPCLRQLV SCLESFVNQE DSASSNPFAL PNSVTPPLPT FARVTTAYGS121 YQDANIPFPR TSGARFCGAG YLVYFTRPMT MHRAVSPTEP TPRSLSALSA YHTGLIAPMK181 IRTEAPGNLR LYSGSPTRSE KEQVSISSFY YKERKSRRWK SKREGSDSGN RQIKAAGKVI241 IQDIACLLPV HKSLGELYIL NVNDIQETCQ KNAASALLVG RKDLVQVWSL ATVATDLCLG301 PKSDPDLETP WARHPFGRQL LESLLAHYCR LRDVQTLAML CSVFEAQSRP QGLPNPFGPF361 PNRSSNLVVS HSRYPSFTSS GSCSSMSDPG LNTGGWNIAG REAEHLSSPW GESSPEELRF421 GSLTYSDPRE RERDQHDKNK RLLDPANTQQ FDDFKKCYGE ILYRWGLREK RAEVLKFVSC481 PPDPHKGIEF GVYCSHCRSE VRGTQCAICK GFTFQCAICH VAVRGSSNFC LTCGHGGHTS541 HMMEWFRTQE VCPTGCGCHC LLESTFC.核苷酸及氨基酸組合序列(SEQ ID NO3)克隆號(hào)FP977起始編碼子 259 ATG 終止編碼子1957 TGA 蛋白質(zhì)分子量62904.43(注(1)給出的是起始和終止編碼子第一個(gè)核苷酸的位置，(2)分子量單位是道爾頓)1 GGT AAT TTG TCA AAC TGA TGT CTC AGG TAA GGT GCC ACT CTA CGC ATT 4849 GCA GAG TTG TGG CAG ATA CCC CAG ACC TGT TCT CTG TTT CAT TTT CAA 9697 AAA TGC TTT CCA ACA TTG AAC TTC TCT CTC CTG CTA GCC CTA AAA GAA144145 GAT CCC CCT AGA AAT CTC CTG GAA GAG AGG AAA TCA GAT CAA CTG GGG192193 CTG CCT CAG ACC TTG CAG CAG GAA TTC TCC CTG ATC AAT GTG CAA ATC240241 CGG AAT GTC AAT GTG GAG ATG GAT GCG GCA GAC AGG AGC TGC ACA GTG2881 Met Asp Ala Ala Asp Arg Ser Cys Thr Val 1089 TCT GTG CAC TGC AGC AAC CAT CGT GTC AAG ATG CTG GTG AAG TTC CCT33611 Ser Val His Cys Ser Asn His Arg Val Lys Met Leu Val Lys Phe Pro 26337 GCA CAG TAC CCA AAC AAC GCC GCC CCT TCC TTC CAG TTT ATT AAC CCC38427 Ala Gln Tyr Pro Asn Asn Ala Ala Pro Ser Phe Gln Phe Ile Asn Pro 42385 ACA ACC ATC ACA TCC ACC ATG AAA GCT AAG CTG CTG AAG ATC CTG AAG43243 Thr Thr Ile Thr Ser Thr Met Lys Ala Lys Leu Leu Lys Ile Leu Lys 58433 GAC ACA GCC CTG CAG AAA GTG AAG CGT GGC CAG AGC TGC CTG GAG CCC48059 Asp Thr Ala Leu Gln Lys Val Lys Arg Gly Gln Ser Cys Leu Glu Pro 74481 TGC CTG CGC CAG CTC GTC TCC TGC CTT GAG TCC TTT GTG AAC CAG GAA52875 Cys Leu Arg Gln Leu Val Ser Cys Leu Glu Ser Phe Val Asn Gln Glu 90529 GAC AGC GCT TCC AGC AAC CCG TTT GCA CTC CCC AAC TCT GTC ACT CCC57691 Asp Ser Ala Ser Ser Asn Pro Phe Ala Leu Pro Asn Ser Val Thr Pro106577 CCC TTA CCG ACG TTT GCG CGG GTG ACC ACG GCT TAC GGG TCG TAC CAG624107 Pro Leu Pro Thr Phe Ala Arg Val Thr Thr Ala Tyr Gly Ser Tyr Gln122625 GAC GCC AAC ATT CCC TTT CCT AGG ACT TCT GGG GCC AGG TTC TGC GGA672123 Asp Ala Asn Ile Pro Phe Pro Arg Thr Ser Gly Ala Arg Phe Cys Gly138673 GCA GGT TAC CTG GTA TAT TTC ACA AGG CCC ATG ACA ATG CAT CGG GCG720139 Ala Gly Tyr Leu Val Tyr Phe Thr Arg Pro Met Thr Met His Arg Ala154721 GTG TCT CCC ACA GAG CCT ACT CCG AGA TCT CTC TCA GCC TTG TCT GCT 768155 Val Ser Pro Thr Glu Pro Thr Pro Arg Ser Leu Ser Ala Leu Ser Ala 170769 TAT CAC ACT GGC TTG ATC GCG CCC ATG AAG ATC CGC ACA GAG GCC CCT 816171 Tyr His Thr Gly Leu Ile Ala Pro Met Lys Ile Arg Thr Glu Ala Pro 186817 GGG AAC CTT CGT TTA TAC AGT GGG AGC CCC ACT CGC AGC GAG AAA GAG 864187 Gly Asn Leu Arg Leu Tyr Ser Gly Ser Pro Thr Arg Ser Glu Lys Glu 202865 CAG GTC TCC ATC AGC TCC TTC TAC TAC AAG GAG CGG AAA TCA AGA CGA 912203 Gln Val Ser Ile Ser Ser Phe Tyr Tyr Lys Glu Arg Lys Ser Arg Arg 218913 TGG AAA AGT AAG CGT GAG GGA TCA GAC TCT GGC AAT CGA CAG ATC AAG 960219 Trp Lys Ser Lys Arg Glu Gly Ser Asp Ser Gly Asn Arg Gln Ile Lys 234961 GCT GCT GGG AAA GTC ATC ATC CAG GAT ATT GCT TGC CTC CTG CCT GTT1008235 Ala Ala Gly Lys Val Ile Ile Gln Asp Ile Ala Cys Leu Leu Pro Val 2501009 CAC AAA TCG CTG GGA GAG CTG TAC ATA TTG AAT GTG AAT GAT ATT CAG1056251 His Lys Ser Leu Gly Glu Leu Tyr Ile Leu Asn Val Asn Asp Ile Gln 2661057 GAA ACA TGT CAG AAG AAT GCC GCC TCT GCC TTG CTC GTT GGA AGA AAG1104267 Glu Thr Cys Gln Lys Asn Ala Ala Ser Ala Leu Leu Val Gly Arg Lys 2821105 GAT CTT GTC CAG GTT TGG TCG CTG GCT ACG GTA GCT ACA GAT CTT TGC1152283 Asp Leu Val Gln Val Trp Ser Leu Ala Thr Val Ala Thr Asp Leu Cys 2981153 CTT GGT CCG AAA TCT GAC CCA GAT TTG GAA ACA CCC TGG GCT CGA CAT1200299 Leu Gly Pro Lys Ser Asp Pro Asp Leu Glu Thr Pro Trp Ala Arg His 3141201 CCA TTT GGG CGG CAG CTG CTG GAG TCC CTG TTG GCT CAC TAT TGC CGG1248315 Pro Phe Gly Arg Gln Leu Leu Glu Ser Leu Leu Ala His Tyr Cys Arg 3301249 CTC CGG GAT GTT CAG ACA CTG GCG ATG CTC TGT AGC GTG TTT GAA GCC1296331 Leu Arg Asp Val Gln Thr Leu Ala Met Leu Cys Ser Val Phe Glu Ala 3461297 CAG TCT CGG CCT CAG GGG CTA CCA AAC CCC TTT GGG CCT TTT CCT AAC1344347 Gln Ser Arg Pro Gln Gly Leu Pro Asn Pro Phe Gly Pro Phe Pro Asn 3621345 CGT TCT TCT AAT CTT GTG GTG TCC CAT AGT CGA TAT CCT AGC TTT ACC1392363 Arg Ser Ser Asn Leu Val Val Ser His Ser Arg Tyr Pro Ser Phe Thr 3781393 TCT TCT GGT TCC TGC TCC AGT ATG TCA GAC CCA GGG CTC AAC ACT GGC1440379 Ser Ser Gly Ser Cys Ser Ser Met Ser Asp Pro Gly Leu Asn Thr Gly 3941441 GGC TGG AAC ATA GCG GGA AGA GAG GCA GAG CAC TTG TCC TCC CCT TGG1488395 Gly Trp Asn Ile Ala Gly Arg Glu Ala Glu His Leu Ser Ser Pro Trp 4101489 GGA GAA TCC TCA CCA GAA GAG 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TGC CTG ACC TGT GGG CAC GGT GGC CAC1872523 Val Arg Gly Ser Ser Asn Phe Cys Leu Thr Cys Gly His Gly Gly His 5381873 ACC AGC CAC ATG ATG GAG TGG TTT CGG ACC CAG GAG GTG TGT CCC ACC1920539 Thr Ser His Met Met Glu Trp Phe Arg Thr Gln Glu Val Cys Pro Thr 5541921 GGG TGT GGG TGC CAC TGC CTG CTT GAA AGC ACT TTC TGA ACC TAC AGA1968555 Gly Cys Gly Cys His Cys Leu Leu Glu Ser Thr Phe *** 5671969 AGT TGG GTA TTG TCT GAA ATC CCA GAG GAC CCA TAA GTG CCG GTG ACA20162017 AGC TGT CTG TCA GGG GAG AGG CTC CAG AAC CTG GGT TCG TCC CCA GTG20642065 AGA CCG GAG GAT GAT CCC CCA AGG ACT GCG GAG CAT CAG CTC TTG GTG21122113 GGC CTC TGC CTT CTC TTC TGT TTG GCC ACC TGG TGT GGA TGT CAC TGT21602161 GTG AAG ATA AGG ACA GAA GTG CAG AGC TGC GCT TTG TGT GTT GTC TAT22082209 GTC GGC TGA GCT ACC AAG GTG GAA GTT TTC ATG GAG AAA AGC ACC TGG22562257 CTC CAG GGC CAG TGT TAC AGT GTT ACC CTG TAA GGT GTT AGC CTT AAA23042305 CCA CCG AGC AGC GTT CTC TTG ATG CCA GTG CAG AGA CCA GAG TCA GAT23522353 GCC CGA GGA CAG TGG GTA GGA ATT TCA TCA ACA AAT GGA CCT ATG GCA24002401 TCA TGG CTT TAG AAG CTG GTA CAT TTA CTG AGC TGA TGG ACA GTG GCC24482449 TTC TAA AAT ATG ACA CTT AAA TTG TAA ATA TGC ACT GTA CTT AAG GAT24962497 TCT TAA GAT GTA TTT TTT TGT TAT TTC TCC TCC AGC TGC TAT CCC TTG25442545 GCT AAT AAA ATT CTA GTA ATT TGA AAA AAA AAA AAA AGA GAG AAA GTT25922593 AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA26402641 AAA AAA AAA AAA AAA AA 26572.FP1147A核苷酸序列(SEQ ID NO4)長度2450個(gè)堿基1 GGGTATATAT AACTTTTAAA TTATGTCAAC TTTTCTGTTT GCCAACTAGT ATGTAAGTTC61 CACAAGGGCA ATGATTTTTT ATCTGTTCTC TAGTTATCCT AAGTAATTAG AATAGCGCCC121 AGCCCATAGC TGGAACTTAT GAGGAAATGA GGAAACGAGC TTCAGATAAT TTAAATAACT181 TCCCAAGACT AAGTTTTATA GTTAGTTGGT GGAGCTAGAA TGGAATCCCT GAAGAGTGGC241 TCAAAGGCCT TTCTCTTTAC CATGGCCTGT GCTGCCTTGC TATACTGATG CCATGAAGTT301 AGTCCATCCT GAGGTCTAAC CCCTTTTGAT GGTGTGGAAC TCACATGGGG AAGGCGGACA361 TTTGCCCACC TGGGCCTTCA ACTCCTTCAC TTGGAGCTGG CCTCTCCCCA TCATGCCAGC421 TTCCCTGTGT GTGAATGGGT GTGTGTGTGT GTGTGAATGG GGTGTGTGAA 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AAG GCC CTG CAG GCA CTG1968118 Ile Asp Glu Glu Arg Arg Arg Gln Asn Lys Lys Ala Leu Gln Ala Leu 1331969 AGG GAC GAG GCC AGC AGC TCT GGC TGC TCA GAA ACA GAC TCC ACA GAG2016134 Arg Asp Glu Ala Ser Ser Ser Gly Cys Ser Glu Thr Asp Ser Thr Glu 1492017 CTG GCT AGC ATC CTC TAG GGC CCG CCA CGT TGC CCG AAG CCA CCA TGC2064150 Leu Ala Ser Ile Leu *** 1552065 AGA AGG CCA CAG AAG GGA TCA GGA CCT GTC TGC CGG CTT GCT GAG CAG21122113 CTG GAC TGC AGG TGC TAG GAA GGG AAC TGA AGA CTC AAG GAG GTG GCC21602161 CAG GAC ACT TGC TGT GCT CAC TGT GGG GCC GGC TGC TCT GTG GCC TCC22082209 TGC CTC CCC TCT GCC TGC CTG TGG GGC CAA GCC CTG GGG CTG CCA CTG22562257 TGA ATA TGC CAA GGA CTG ATC GGG CCT AGC CCG GAA CAC TAA TGT AGA23042305 AAC CTT TTT TTA CAG AGC CTA ATT AAT AAC TTA ATG ACT GTG TAC ATA23522353 GCA ATG TGT GTG TAT GTA TAT GTC TGT GAG CTA TTA ATG TTA TTA ATT24002401 TTC ATA AAA GCT GGA AAG CAG CTG CCT GTT TCA AAA AAA AAA AAA AAA24482449 AA 24503.FP1188A核苷酸序列(SEQ ID NO7)長度1902個(gè)堿基1 GACCAAGCCA TCCCCTCTTT 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GCC TCC CTG CCC AAG TCC TGA GCC287288 ACC ATG CTG ACC CCG ATG GTG GCC GGG GGG GTG GTG TTC CCC GGA CTC3351 Met Leu Thr Pro Met Val Ala Gly Gly Val Val Phe Pro Gly Leu 15336 TTC CTC CTC TCC AAG AAC ACG CTC CAG CGG CTG CCC CAG CTA CGC TGG38316 Phe Leu Leu Ser Lys Asn Thr Leu Gln Arg Leu Pro Gln Leu Arg Trp 31384 GAG GAG GCC GAC GCA GTC ATT GTC TCA GCC AGG CTG GTG TCC TCT GTC43132 Glu Glu Ala Asp Ala Val Ile Val Ser Ala Arg Leu Val Ser Ser Val 47432 CAG GCC ATC ATG GCC TCC ACT GCC GGC TAC ATC GTC TCC ACC TCC TGC 47948 Gln Ala Ile Met Ala Ser Thr Ala Gly Tyr Ile Val Ser Thr Ser Cys 63480 AAG CAC ATC ATT GAT GAC CAA CAC TGG CTG TCC TCT GCC TAC ACG CAA 52764 Lys His Ile Ile Asp Asp Gln His Trp Leu Ser Ser Ala Tyr Thr Gln 79528 TTT GCT GTG CCC TAC TTC ATC TAC GAC ATC TAC GCC ATG TTC CTC TGT 57580 Phe Ala Val Pro Tyr Phe Ile Tyr Asp Ile Tyr Ala Met Phe Leu Cys 95576 CAC TGG CAC AAG CAC CAG GTC AAA GGG CAT GGA GGG GAC GAC GGA GCG 62396 His Trp His Lys His Gln Val Lys Gly His Gly Gly Asp Asp Gly Ala 111624 GCC AGA GCC CCG GGC AGC ACG TGG GCC ATA GCG CGT GGC TAC CTG CAC 671112 Ala Arg Ala Pro Gly Ser Thr Trp Ala Ile Ala Arg Gly Tyr Leu His 127672 AAG GAG TTC CTC ATG GTG CTC CAC CAT GCC GCC ATG GTG CTG GTG TGC 719128 Lys Glu Phe Leu Met Val Leu His His Ala Ala Met Val Leu Val Cys 143720 TTC CCA CTC TCA GTG GTG TGG CGA CAG GGG AAG GGA GAC TTC TTT CTG 767144 Phe Pro Leu Ser Val Val Trp Arg Gln Gly Lys Gly Asp Phe Phe Leu 159768 GGT TGC ATG TTG ATG GCA GAG GTC AGC ACG CCC TTC GTC TGC CTT GGC 815160 Gly Cys Met Leu Met Ala Glu Val Ser Thr Pro Phe Val Cys Leu Gly 175816 AAG ATC CTC ATC CAG TAC AAG CAG CAG CAC ACA CTG CTG CAC AAG GTG 863176 Lys Ile Leu Ile Gln Tyr Lys Gln Gln His Thr Leu Leu His Lys Val 191864 AAC GGG GCC CTG ATG CTG CTC AGC TTC CTC TGC TGC CGG GTG CTG CTC 911192 Asn Gly Ala Leu Met Leu Leu Ser Phe Leu Cys Cys Arg Val Leu Leu 207912 TTT CCC TAC CTG TAC TGG GCC TAC GGG CGC CAT GCC GGC CTG CCC CTG 959208 Phe Pro Tyr Leu Tyr Trp Ala Tyr Gly Arg His Ala Gly Leu Pro Leu 223960 CTG GCC GTG CCC CTG GCC ATC CCT GCC CAC GTC AAC CTG GGC GCT GCG1007224 Leu Ala Val Pro Leu Ala Ile Pro Ala His Val Asn Leu Gly Ala Ala 2391008 CTG CTC CTG GCC CCT CAG CTC TAC TGG TTC TTC CTC ATC TGC CGT GGG1055240 Leu Leu Leu Ala Pro Gln Leu Tyr Trp Phe Phe Leu Ile Cys Arg Gly 2551056 GCC TGC CGC CTC TTC TGG CCC CGC TCC CGG CCG CCC CCG GCC TGC CAG1103256 Ala Cys Arg Leu Phe Trp Pro Arg Ser Arg Pro Pro Pro Ala Cys Gln 2711104 GCC CAG GAC TGA GGC CGG GGG CCG GGA CCC TCC CCC TCC CCA CCC CCA1151272 Ala Gln Asp *** 2751152 CCC CCG TGG AGA CAG GGC TCT GGG GCT GAT GGC TGG GGT TGG GAG CCA11991200 GGG TCC TCT TGC CCG GAC AAC CCC AGG ACT GAC GAT GAC CCC GAA AGG12471248 GAA GAG GCC CCA TCT CTC GGG GAC TGA GGG GGT GGA GAG AGG GGA CCT12951296 CTT CCC CCT ACT CTG CCC CCT TCC TGC ACA CCC TTG CGC TGG AGG AGG13431344 GGA GGG GGC ACC GCC TCC CAC CCA CTG AGG GCA GGA GGG CTT GTG GGG13911392 AGG GAC ACC AAC AGG GTT TCA AGG GGA CCA GGA GTC AGA ATG TGG GGA14391440 GAC GCC TCT GCC AAG GCC ATC CCA GCC 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Pro Ala 851392 CTT CGG ACA TGG CCG AGG AAG GCA GAG TGG CCA GCG GGG GCC CCC CAG143986 Leu Arg Thr Trp Pro Arg Lys Ala Glu Trp Pro Ala Gly Ala Pro Gln 1011440 GGC TGG AGA CCT CGG AGT CTC TCA GTG ACT CAC TCT ACG ACT CGC TGT1487102 Gly Trp Arg Pro Arg Ser Leu Ser Val Thr His Ser Thr Thr Arg Cys 1171488 CCT CTT GTG GGA GTC AGG GCT GAG GGG CTG CGC CAC GCC ACG GCC CCG1535118 Pro Leu Val Gly Val Arg Ala Glu Gly Leu Arg His Ala Thr Ala Pro 1331536 CTG GAG CTG GGG ACC ACA GAC TGG ACC GGC TCT CTT CAT GCC CAG CCC1583134 Leu Glu Leu Gly Thr Thr Asp Trp Thr Gly Ser Leu His Ala Gln Pro 1491584 CCG GAG ACG GGG ACC CCT CCC TGA AGG GAC CAA GGA GGC AGG TGG ATA1631150 Pro Glu Thr Gly Thr Pro Pro *** 1571632 AGA AGG TGA AAA GGG GGT CCC TGG CAC ACC CCA CCA CCC ACT GCT TCG16791680 GCG GAT GAG ATG ACC GTG CTC AGC TCA GGG AGA GAC CCC GCC CTT GGT17271728 CCC TTC TCT CAC CCA GAG TAA GGC TCT TCC TGG AAG GGA CTG GGG GTT17751776 AAA GGC CAC TGT GTC GCA GCC CCC CAG TCC CTA CTT CAG GCT GAG CCA18231824 TCT TGT GGT GCT 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Met Tyr Asn Leu Ser Val 2181585 CAC CAG CAG CTG GGC AAG ATG GTG GGT GTC TCC GAT GAT GTC AAT GAA1632219 His Gln Gln Leu GIy Lys Met Val GIy Val Ser Asp Asp Val Asn Glu 2341633 TAC GCT ATG GCT CTG AGG GAC ACA GAG GAC AAG CTC CGC CGG TGC CCC1680235 Tyr Ala Met Ala Leu Arg Asp Thr Glu Asp Lys Leu Arg Arg Cys Pro 2501681 AAG AGG AGG AAG GAC ATC CTT GCA GAG TTG ACC AAG AGC CAG AAG GTT1728251 Lys Arg Arg Lys Asp Ile Leu Ala Glu Leu Thr Lys Ser Gln Lys Val 2661729 TTC TCA GAA AAG CTG GAC CAC CTG AGC CGC CGT CTT GCC TGG GTC CAT1776267 Phe Ser Glu Lys Leu Asp His Leu Ser Arg Arg Leu Ala Trp Val His 2821777 GCC ACT GTC TAC TCC CAG GAG AAG ATG CTG GAC ATC TAC TGG CTG CTG1824283 Ala Thr Val Tyr Ser Gln Glu Lys Met Leu Asp Ile Tyr Trp Leu Leu 2981825 CGC GTC TGC CTG CGG ACC ATT GAG CAC GGT GAT CGC ACA GGG TCT CTC1872299 Arg Val Cys Leu Arg Thr Ile Glu His Gly Asp Arg Thr Gly Ser Leu 3141873 TTT GCC TTC ATG CCC GAG TTC TAC CTG AGC GTG GCC ATC AAC AGC TAC1920315 Phe Ala Phe Met Pro Glu Phe Tyr Leu Ser Val Ala Ile Asn Ser Tyr 3301921 AGT GCT CTC AAG AAT TAC TTT GGT CCC GTG CAC AGC ATG GAG GAG CTC1968331 Ser Ala Leu Lys Asn Tyr Phe Gly Pro Val His Ser Met Glu Glu Leu 3461969 CCA GGC TAT GAA GAG ACC CTG ACC CGC CTG GCT GCC ATT CTC GCC AAA2016347 Pro Gly Tyr Glu Glu Thr Leu Thr Arg Leu Ala Ala Ile Leu Ala Lys 3622017 CAC TTT GCC GAC GCA CGC ATT GTG GGC ACT GAC ATC CGA GAC TCA CTG2064363 His Phe Ala Asp Ala Arg Ile Val Gly Thr Asp Ile Arg Asp Ser Leu 3782065 ATG CAG GCC CTG GCC AGC TAC GTG TGC TAC CCA CAC TCC CTG CGG GCT2112379 Met Gln Ala Leu Ala Ser Tyr Val Cys Tyr Pro His Ser Leu Arg Ala 3942113 GTG GAG CGA ATC CCC GAG GAG CAG CGT ATC GCC ATG GTG AGG AAC CTC2160395 Val Glu Arg Ile Pro Glu Glu Gln Arg Ile Ala Met Val Arg Asn Leu 4102161 CTG GCG CCC TAT GAG CAG CGG CCC TGG GCC CAG ACC AAC TGG ATC CTG2208411 Leu Ala Pro Tyr Glu Gln Arg Pro Trp Ala Gln Thr Asn Trp Ile Leu 4262209 GTG CGG CTC TGG AGG GGC TGT GGC TTC GGG TAC CGC TAT ACA CGG CTG2256427 Val Arg Leu Trp Arg Gly Cys Gly Phe Gly Tyr Arg Tyr Thr Arg Leu 4422257 CCA CAT CTG CTG AAA ACC AAA CTT GAG GAT GCC AAT TTG CCC AGC CTC2304443 Pro His Leu Leu Lys Thr Lys Leu Glu Asp Ala Asn Leu Pro Ser Leu 4582305 CAG AAG CCC TGC CCT TCC ACC CTG CTG CAG CAG CAC ATG GCG GAC CTC2352459 Gln Lys Pro Cys Pro Ser Thr Leu Leu Gln Gln His Met Ala Asp Leu 4742353 CTA CAG CAG GGT CCT GAT GTG GCA CCC AGC TTC CTC AAC AGC GTC CTC2400475 Leu Gln Gln Gly Pro Asp Val Ala Pro Ser Phe Leu Asn Ser Val Leu 4902401 AAT CAG CTC AAC TGG GCC TTC TCT GAA TTC ATT GGC ATG ATC CAA GAG2448491 Asn Gln Leu Asn Trp Ala Phe Ser Glu Phe Ile Gly Met Ile Gln Glu 5062449 ATC CAG CAG GCT GCT GAG CGC CTG GAG CGG AAC TTT GTG GAC AGC CGG2496507 Ile Gln Gln Ala Ala Glu Arg Leu Glu Arg Asn Phe Val Asp Ser Arg 5222497 CAG CTC AAG GTA TGT GCC ACC TGC TTT GAC CTC TCG GTC AGC CTG CTG2544523 Gln Leu Lys Val Cys Ala Thr Cys Phe Asp Leu Ser Val Ser Leu Leu 5382545 CGT GTC TTG GAG ATG ACT ATC ACA CTG GTG CCT GAG ATA TTC CTT GAC2592539 Arg Val Leu Glu Met Thr Ile Thr Leu Val Pro Glu Ile Phe Leu Asp 5542593 TGG ACC CGG CCT ACC TCT GAG ATG CTG CTG CGG CGT CTT GCA CAG CTG2640555 Trp Thr Arg Pro Thr Ser Glu Met Leu Leu Arg Arg Leu Ala Gln Leu 5702641 CTA AAC CAG GTG CTG AAC CGG GTG ACA GCT GAG AGG AAC CTG TTT GAT2688571 Leu Asn Gln Val Leu Asn Arg Val Thr Ala Glu Arg Asn Leu Phe Asp 5862689 CGT GTG GTC ACC CTA CGG CTG CCT GGC CTA GAG AGC GTG GAC CAC TAT2736587 Arg Val Val Thr Leu Arg Leu Pro Gly Leu Glu Ser Val Asp His Tyr 6022737 CCC ATT CTG GTG GCA GTG ACG GGC ATC CTG GTG CAG CTC CTG GTG CGT 2784603 Pro Ile Leu Val Ala Val Thr Gly Ile Leu Val Gln Leu Leu Val Arg6182785 GGC CCA GCC TCA GAG AGA GAG CAA GCC ACA TCA GTG CTC CTG GCA GAT 2832619 Gly Pro Ala Ser Glu Arg Glu Gln Ala Thr Ser Val Leu Leu Ala Asp6342833 CCC TGC TTC CAG CTA CGC TCA ATA TGC TAT CTC CTG GGA CAG CCA GAG 2880635 Pro Cys Phe Gln Leu Arg Ser Ile Cys Tyr Leu Leu Gly Gln Pro Glu6502881 CCC CCA GCA CCT GGC ACT GCT CTG CCA GCC CCT GAC CGG AAG CGC TTC 2928651 Pro Pro Ala Pro Gly Thr Ala Leu Pro Ala Pro Asp Arg Lys Arg Phe6662929 TCC CTG CAG AGC TAT GCG GAT TAT ATC AGT GCC GAT GAG CTG GCC CAA 2976667 Ser Leu Gln Ser Tyr Ala Asp Tyr Ile Ser Ala Asp Glu Leu Ala Gln6822977 GTG GAA CAG ATG CTG GCG CAC CTG ACC TCT GCA TCT GCC CAG GCA GCA 3024683 Val Glu Gln Met Leu Ala His Leu Thr Ser Ala Ser Ala Gln Ala Ala6983025 GCT GCC TCC CTG CCC ACC AGT GAG GAG GAC CTC TGC CCC ATT TGC TAT 3072699 Ala Ala Ser Leu Pro Thr Ser Glu Glu Asp Leu Cys Pro Ile Cys Tyr7143073 GCC CAC CCC ATC TCT GCT GTG TTC CAG CCC TGT GGC CAC AAG TCC TGC 3120715 Ala His Pro Ile Ser Ala Val Phe Gln Pro Cys Gly His Lys Ser Cys7303121 AAA GCC TGT ATC AAC CAG CAC CTG ATG AAC AAC AAG GAC TGC TTC TTC 3168731 Lys Ala Cys Ile Asn Gln His Leu Met Asn Asn Lys Asp Cys Phe Phe7463169 TGC AAA ACC ACC ATC GTG TCT GTA GAG GAC TGG GAG AAG GGA GCC AAT 3216747 Cys Lys Thr Thr Ile Val Ser Val Glu Asp Trp Glu Lys Gly Ala Asn7623217 ACG AGT ACT ACC TCC TCA GCT GCC TAG CCC TCA CAG CCT GTG CCA TCC 3264763 Thr Ser Thr Thr Ser Ser Ala Ala ***7713265 TGG AGC CTC CAC CTT TGA ACC CAG AGC CAG GCT GGG CCC TAT TTA TGA 33123313 GCT CCC TTT GCC CTT CTC CTG TAT CCC ACA CCA CCA CAT CCA ACC TCC 33603361 TTG CCT GCC TGT ATC CTC ATT GGT GGG AGG CCC AGC CAT GGC CCT AAT 34083409 TGT GCC TGA GCT TGA CTT TCA GTC AGG GCC ACA GTG AGC ATT AAA TTA 34563457 TTA TTC CAT ACA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA A 35026.FP1572A核苷酸序列(SEQ ID NO16)長度2445個(gè)堿基1 GCACAGGCTC CCCCAGATGC CCTGGCCAGG CCAGGCATGT GCCCACTTGC AAGTCTTTAT61 CCTTCTCTTA GGTTCCCTCT GGCATGCACT TTTCTCCTCC ACCTGCCCAA TCCCAGACAT121 CCTCAGAGTC TAGCATCTGG TGACACTTCT GTGACACTTT CCCTGATCCG CAGCCAGAGG181 GAACTGCTCC CCGCTCCTGA GCTCCCTGAG CCCCTTTCCA CACAGAACAC TTAGACTGTT241 GTATTGCCCC TGGTTGTGTT GGGCCCATGA CCCTCACTGG ACTGTGAGCT CCTTGAGGAC301 AGGGGCACCC ACTTTTTCAT CTTGGGGAAT CAGAGCCCAC ATGGTGCTGC GTGCGCTGTT361 GAGGCCTCTG TGCAGCCCGG GCCCATGTCT GCTGGGATGG GGGGAAAGGT AGGGAGGTAG421 GTGGGGAGGA GGCAGGGGGT CTGATGGAGT AGAATACAAC AGGCAGCTTT CACAGTGGAT481 TGAAGCTGTG CTTTCAGTTC AGCATATGCT 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TGAGAGGAGA1381 AGCTCACGAG TGGATGAAGC CCAGCTGCAA GTTACGGCTT TAGCCACAGA GAGGAGACAC1441 AGGAAGGCCA GTGGGCAGGG GGCAAAAATG CAGAACTTGG AGCAGGATAG TGTCTGAAAA1501 TTTCTCACAT GGGGTCATTA GCTGTGGTTG GGGGGAAGGA AATCTCCAGT TCATTTACTC1561 ACTGATTGAC TGATTGATTC ATTCATTGTT TCCATTTCCC GAGCACTCCC TTGCTCCTGC1621 TCACATTCCA GGCCCTTGTC CTGGCCTCAG GGTGATCCAG GAGCTGCAGG ACAGAAGGGC1681 CAGGCAGGAG AGAAGGGGAG AGCCGGCATG CCTGGTGGAC CTGGCAAGAG TGGTTCCATG1741 GGGCCTGTTG GGCCACCGGG CCCTGCAGGA GAGAGAGGCC ACCCTGGAGC TCCGGGGCCT1801 TCGGGGAGCC CTGGCTTGCC TGGTGTGCCT GGCTCCATGG GAGACATGGT GAATTATGAT1861 GAAATCAAGA GGTTCATCAG ACAAGAGATC ATTAAAATGT TTGATGAGAG AATGGCTTAC1921 TACACCTCCA GGATGCAGTT CCCCATGGAG ATGGCGGCAG CTCCGGGACG ACCAGGGCCT1981 CCAGGGAAGG ATGGTGCTCC GGGCAGGCCA GGTGCTCCAG GGTCACCTGG GCTCCCTGGT2041 CAGATTGGCA GAGAAGGACG GCAGGGCTTG CCAGGAGTAA GAGGATTGCC TGGTACCAAA2101 GGTGAAAAAG GGGACATTGG TATTGGCATT GCAGGAGAAA ATGGTCTTCC CGGCCCCCCA2161 GGTCCTCAAG GTCCTCCAGG CTATGGCAAG ATGGGTGCAA CAGGACCAAT GGGCCAGCAA2221 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GTG TTG GGC CCA TGA CCC TCA CTG GAC TGT GAG288289 CTC CTT GAG GAC AGG GGC ACC CAC TTT TTC ATC TTG GGG AAT CAG AGC336337 CCA CAT GGT GCT GCG TGC GCT GTT GAG GCC TCT GTG CAG CCC GGG CCC384385 ATG TCT GCT GGG ATG GGG GGA AAG GTA GGG AGG TAG GTG GGG AGG AGG432433 CAG GGG GTC TGA TGG AGT AGA ATA CAA CAG GCA GCT TTC ACA GTG GAT480481 TGA AGC TGT GCT TTC AGT TCA GCA TAT GCT ACT GAG CCC CTG CCA TGC528529 CAG CCC CTG GGT CAG CAC TGG AGA AGA TGC CCT GTC CCT TCC TCA TGG576577 GGC AGC AAG GAA AGG GGA TGC TTT GCA GAT GAA GAC AGA TCC TCC TGG624625 GGA GGC GAC GTG TGG CAC ATA TGC AGT TAG ACA GGG ACA GAT TGG GCC672673 CAG AAG CCA GCT GTC CTG TTT CCA GCA GTC ACC AGG ACC CTT GAC CCA720721 GGG CCT GGT CTC CAT GGG TGG GGC AAA GCC CTG CTG ACT TTA TTG TGG768769 GGC CGG GGG GGG GGG GGG CGG CGC TGG TTT CCA GGG CAG CGA AGG GAT816817 TCG AGG CCC ATC AGG CCT GCC TGG CTC CCC TGG GCC ACC GGG ACC TCC 864865 TGG GAT TCA GGG CCC CGC CGG TCT GGA TGG TTT GGA TGG GAA GGA CGG 912913 CAA GCC TGG CTT GAG GGG GGA CCC TGG TCC TGC TGG CCC CCC TGG ACT 960961 CAT GGG ACC ACC GGG CTT TAA GGG GAA AAC AGG ACA TCC TGG CCT CCC10081009 AGG ACC TAA GGG TGA CTG TGG CAA ACC AGG TCC CCC TGG CAG CAC TGG10561057 CCG GCC TGG CGC AGA GGG TGA ACC TGG TGC CAT GGG ACC CCA GGG AAG11041105 ACC CGG TCC CCC GGG ACA CGT TGG GCC ACC AGG GCC TCC AGG CCA GCC11521153 AGG ACC AGC TGG GAT CTC TGC AGT GGG TCT GAA AGG AGA CCG AGG AGC12001201 CAC CGG AGA AAG GGG CCT TGC AGG CCT CCC AGG CCA GCC CGG CCC CCC12481249 TGG ACA CCC TGG CCC CCC AGG CGA ACC TGG TAC GGA TGG TGC AGC TGG12961297 CAA AGA GGG ACC CCC TGG AAA GCA GGG ATT CTA TGG ACC TCC TGG TCC13441345 CAA GGT GAG TGG GCA CTG GCT GGG CTT GAG AGG AGA AGC TCA CGA GTG13921393 GAT GAA GCC CAG CTG CAA GTT ACG GCT TTA GCC ACA GAG AGG AGA CAC14401441 AGG AAG GCC AGT GGG CAG GGG GCA AAA ATG CAG AAC TTG GAG CAG GAT14881489 AGT GTC TGA AAA TTT CTC ACA TGG GGT CAT TAG CTG TGG TTG GGG GGA15361537 AGG AAA TCT CCA GTT CAT TTA CTC ACT GAT TGA CTG ATT GAT TCA TTC15841585 ATT GTT TCC ATT TCC CGA GCA 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Gly Pro Pro Gly Lys Asp Gly Ala Pro Gly Arg Pro Gly Ala 1032017 CCA GGG TCA CCT GGG CTC CCT GGT CAG ATT GGC AGA GAA GGA CGG CAG2064104 Pro Gly Ser Pro Gly Leu Pro Gly Gln Ile Gly Arg Glu Gly Arg Gln 1192065 GGC TTG CCA GGA GTA AGA GGA TTG CCT GGT ACC AAA GGT GAA AAA GGG2112120 Gly Leu Pro Gly Val Arg Gly Leu Pro Gly Thr Lys Gly Glu Lys Gly 1352113 GAC ATT GGT ATT GGC ATT GCA GGA GAA AAT GGT CTT CCC GGC CCC CCA2160136 Asp Ile Gly Ile Gly Ile Ala Gly Glu Asn Gly Leu Pro Gly Pro Pro 1512161 GGT CCT CAA GGT CCT CCA GGC TAT GGC AAG ATG GGT GCA ACA GGA CCA2208152 Gly Pro Gln Gly Pro Pro Gly Tyr Gly Lys Met Gly Ala Thr Gly Pro 1672209 ATG GGC CAG CAA GGC ATC CCT GGC ATC CCT GGG CCC CCG GGT CCC ATG2256168 Met Gly Gln Gln Gly Ile Pro Gly Ile Pro Gly Pro Pro Gly Pro Met 1832257 GGC CAG CCA GGC AAG GCT GGC CAC TGT AAT CCC TCT GAC TGC TTT GGG2304184 Gly Gln Pro Gly Lys Ala Gly His Cys Asn Pro Ser Asp Cys Phe Gly 1992305 GCC ATG CCG ATG GAG CAG CAG TAC CCA CCC ATG AAA ACC ATG AAG GGG2352200 Ala Met Pro Met Glu Gln Gln Tyr Pro Pro Met Lys Thr Met Lys Gly 2152353 CCT TTT GGC TGA AAT TCC CCA CCT GCC TTT GGA TGA AAG ACT CCG TTG2400216 Pro Phe Gly *** 2192401 GGA ATA AAT GGC CAA AGC TTA TAG GAC AAA AAA AAA AAA AAA AAA24457.FP2568A核苷酸序列(SEQ ID NO19)長度1987個(gè)堿基1 GTGCTGCGCC CGGATGCGTC TGTTACTAGA GTGGAGAGTC TACCTTCGTC TCACATGTGC61 CACAAAGGAT GGCATGGCCC GGGAGTGCCC CACCACGTGG CTTTCACCCC CTGCAAAGCC121 AGACTTCGCC CAGCGACACA GTGTCAAGCC CACAGCTCTC CAAGGAGGAA GATGGTCCAG181 GCTGGGAGCA TCCCCTTAGC AGCAGCCTCT GATCCCTTGG CCAAGCAGGA GGGAACCATT241 AGCAGCCTGA GGAGCTGGCT GGCTGGGAGC CTCGGGGACC GCCCAGCCTT GCTCCCAGCT301 CACCCACAAG ATGTGGACAG CTCTTGTGCT CATTTGGATT TTCTCCTTGT CCTTATCTGA361 AAGCCATGCG GCATCCAACG ATCCACGCAA CTTTGTGCCT AACAAAATGT GGAAGGGATT421 AGTCAAGAGG AATGCATCTG TGGAAACAGT TGATAATAAA ACGTCTGAGG ATGTAACCAT481 GGCAGCAGCT TCTCCTGTCA CATTGACCAA AGGGACTTCG GCAGCCCACC TCAACTCTAT541 GGAAGTCACA ACAGAGGACA CAAGCAGGAC AGATGTGAGT GAACCAGCAA CTTCAGGAGT601 TGCAGCTGAT GGTGTGACCT CCATTGCTCC CACGGCTGTG GCCTCCAGTA CGACTGCGGC661 CTCCATTACG ACTGCGGCCT CCAGTATGAC TGTGGCCTCC AGTGCTCCCA CGACTGCAGC721 CTCCAGTACA ACTGTGGCCT CCATTGCTCC CACGACTGCA GCCTCCAGTA TGACTGCGGC781 CTCCAGCACT CCCATGACAC TTGCACTCCC CGCGCCCACG TCCACTTCCA CAGGGCGGAC841 CCCGTCCACT ACCGCCACTG GGCATCCATC TCTCAGCACA GCCCTCGCAC AAGTGCCAAA901 GAGCAGCGCG TTGCCAAGAA CAGCAACCCT GGCCACATTG GCCACACGTG CTCAGACTGT961 AGCGACCACA GCAAACACAA GCAGCCCCAT GAGCACTCGT CCAAGTCCTT CCAAGCACAT1021 GCCCAGTGAC ACCGCGGCAA GCCCTGTACC CCCTATGCGT CCCCAAGCAC AAGGTCCCAT1081 TAGCCAGGTG TCAGTGGACC AGCCTGTGGT TAACACAACA AATAAATCCA CACCCATGCC1141 CTCAAACACA ACCCCAGAGC CCGCCCCCAC CCCCACAGTG GTGACCACCA CCAAGGCACA1201 AGCCAGGGAG CCAACTGCCA GCCCAGTGCC AGTACCTCAC ACCAGCCCAA TCCCTGAGAT1261 GGAGGCCATG TCCCCCACGA CACAGCCAAG CCCCATGCCA TATACCCAGA GGGCCGCTGG1321 GCCAGGCACA TCCCAGGCAC CGGAGCAGGT AGAGACTGAA GCCACACCAG GTACTGATTC1381 CACTGGGCCA ACACCCAGGA GCTCAGGGGG CACTAAGATG CCAGCCACGG ACTCGTGCCA1441 GCCCAGCACC CAAGGCCAGT ACATGGTGGT CACCACTGAG CCCCTCACCC AGGCCGTGGT1501 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ATPGTDSTGP361 TPRSSGGTKM PATDSCQPST QGQYMVVTTE PLTQAVVDKT LLLVVLLLGV TLFITVLVLF421 ALQAYESYKK KDYTQVDYLI NGMYADSEMC.核苷酸及氨基酸組合序列(SEQ ID N021)克隆號(hào)FP2568起始編碼子 311ATG 終止編碼子1658 TGA 蛋白質(zhì)分子量 46140.131G TGC TGC GCC CGG ATG CGT CTG TTA CTA GAG TGG AGA GTC TAC CTT 4647 CGT CTC ACA TGT GCC ACA AAG GAT GGC ATG GCC CGG GAG TGC CCC ACC 9495 ACG TGG CTT TCA CCC CCT GCA AAG CCA GAC TTC GCC CAG CGA CAC AGT142143 GTC AAG CCC ACA GCT CTC CAA GGA GGA AGA TGG TCC AGG CTG GGA GCA190191 TCC CCT TAG CAG CAG CCT CTG ATC CCT TGG CCA AGC AGG AGG GAA CCA238239 TTA GCA GCC TGA GGA GCT GGC TGG CTG GGA GCC TCG GGG ACC GCC CAG286287 CCT TGC TCC CAG CTC ACC CAC AAG ATG TGG ACA GCT CTT GTG CTC ATT3341 Met Trp Thr Ala Leu Val Leu Ile 8335 TGG ATT TTC TCC TTG TCC TTA TCT GAA AGC CAT GCG GCA TCC AAC GAT 3829 Trp Ile Phe Ser Leu Ser Leu Ser Glu Ser His Ala Ala Ser Asn Asp 24383 CCA CGC AAC TTT GTG CCT AAC AAA ATG TGG AAG GGA TTA GTC AAG AGG 43025 Pro Arg Asn Phe Val Pro Asn Lys Met Trp Lys Gly Leu Val Lys Arg 40431 AAT GCA TCT GTG GAA ACA GTT GAT AAT AAA ACG TCT GAG GAT GTA ACC 47841 Asn Ala Ser Val Glu Thr Val Asp Asn Lys Thr Ser Glu Asp Val Thr 56479 ATG GCA GCA GCT TCT CCT GTC ACA TTG ACC AAA GGG ACT TCG GCA GCC 52657 Met Ala Ala Ala Ser Pro Val Thr Leu Thr Lys Gly Thr Ser Ala Ala 72527 CAC CTC AAC TCT ATG GAA GTC ACA ACA GAG GAC ACA AGC AGG ACA GAT 57473 His Leu Asn Ser Met Glu Val Thr Thr Glu Asp Thr Ser Arg Thr Asp 88575 GTG AGT GAA CCA GCA ACT TCA GGA GTT GCA GCT GAT GGT GTG ACC TCC 62289 Val Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly Val Ala Ala Asp Gly Val Thr Ser 104623 ATT GCT CCC ACG GCT GTG GCC TCC AGT ACG ACT GCG GCC TCC ATT ACG 670105 Ile Ala Pro Thr Ala Val Ala Ser Ser Thr Thr Ala Ala Ser Ile Thr 120671 ACT GCG GCC TCC AGT ATG ACT GTG GCC TCC AGT GCT CCC ACG ACT GCA 718121 Thr Ala Ala Ser Ser Met Thr Val Ala Ser Ser Ala Pro Thr Thr Ala 136719 GCC TCC AGT ACA ACT GTG GCC TCC ATT GCT CCC ACG ACT GCA GCC TCC 766137 Ala Ser Ser Thr Thr Val Ala Ser Ile Ala Pro Thr Thr Ala Ala Ser 152767 AGT ATG ACT GCG GCC TCC AGC ACT CCC ATG ACA CTT GCA CTC CCC GCG 814153 Ser Met Thr Ala Ala Ser Ser Thr Pro Met Thr Leu Ala Leu Pro Ala 168815 CCC ACG TCC ACT TCC ACA GGG CGG ACC CCG TCC ACT ACC GCC ACT GGG 862169 Pro Thr Ser Thr Ser Thr Gly Arg Thr Pro Ser Thr Thr Ala Thr Gly 184863 CAT CCA TCT CTC AGC ACA GCC CTC GCA CAA GTG CCA AAG AGC AGC GCG 910185 His Pro Ser Leu Ser Thr Ala Leu Ala Gln Val Pro Lys Ser Ser Ala 200911 TTG CCA AGA ACA GCA ACC CTG GCC ACA TTG GCC ACA CGT GCT CAG ACT 958201 Leu Pro Arg Thr Ala Thr Leu Ala Thr Leu Ala Thr Arg Ala Gln Thr 216959 GTA GCG ACC ACA GCA AAC ACA AGC AGC CCC ATG AGC ACT CGT CCA AGT1006217 Val Ala Thr Thr Ala Asn Thr Ser Ser Pro Met Ser Thr Arg Pro Ser 2321007 CCT TCC AAG CAC ATG CCC AGT GAC ACC GCG GCA AGC CCT GTA CCC CCT1054233 Pro Ser Lys His Met Pro Ser Asp Thr Ala Ala Ser Pro Val Pro Pro 2481055 ATG CGT CCC CAA GCA CAA GGT CCC ATT AGC CAG GTG TCA GTG GAC CAG1102249 Met Arg Pro Gln Ala Gln Gly Pro Ile Ser Gln Val Ser Val Asp Gln 2641103 CCT GTG GTT AAC ACA ACA AAT AAA TCC ACA CCC ATG CCC TCA AAC ACA1150265 Pro Val Val Asn Thr Thr Asn Lys Ser Thr Pro Met Pro Ser Asn Thr 2801151 ACC CCA GAG CCC GCC CCC ACC CCC ACA GTG GTG ACC ACC ACC AAG GCA1198281 Thr Pro Glu Pro Ala Pro Thr Pro Thr Val Val Thr Thr Thr Lys Ala 2961199 CAA GCC AGG GAG CCA ACT GCC AGC CCA GTG CCA GTA CCT CAC ACC AGC1246297 Gln Ala Arg Glu Pro Thr Ala Ser Pro Val Pro Val Pro His Thr Ser 3121247 CCA ATC CCT GAG ATG GAG GCC ATG TCC CCC ACG ACA CAG CCA AGC CCC1294313 Pro Ile Pro Glu Met Glu Ala Met Ser Pro Thr Thr Gln Pro Ser Pro 3281295 ATG CCA TAT ACC CAG AGG GCC GCT GGG CCA GGC ACA TCC CAG GCA CCG1342329 Met Pro Tyr Thr Gln Arg Ala Ala Gly Pro Gly Thr Ser Gln Ala Pro 3441343 GAG CAG GTA GAG ACT GAA GCC ACA CCA GGT ACT GAT TCC ACT GGG CCA1390345 Glu Gln Val Glu Thr Glu Ala Thr Pro Gly Thr Asp Ser Thr Gly Pro 3601391 ACA CCC AGG AGC TCA GGG GGC ACT AAG ATG CCA GCC ACG GAC TCG TGC1438361 Thr Pro Arg Ser Ser Gly Gly Thr Lys Met Pro Ala Thr Asp Ser Cys 3761439 CAG CCC AGC ACC CAA GGC CAG TAC ATG GTG GTC ACC ACT GAG CCC CTC1486377 Gln Pro Ser Thr Gln Gly Gln Tyr Met Val Val Thr Thr Glu Pro Leu 3921487 ACC CAG GCC GTG GTA GAC AAA ACT CTC CTT CTG GTG GTG CTG TTA CTC1534393 Thr Gln Ala Val Val Asp Lys Thr Leu Leu Leu Val Val Leu Leu Leu 4081535 GGG GTG ACC CTT TTC ATC ACA GTC TTG GTT TTG TTT GCC CTG CAG GCC1582409 Gly Val Thr Leu Phe Ile Thr Val Leu Val Leu Phe Ala Leu Gln Ala 4241583 TAT GAG AGC TAC AAG AAG AAG GAC TAC ACC CAG GTG GAC TAC TTA ATC1630425 Tyr Glu Ser Tyr Lys Lys Lys Asp Tyr Thr Gln Val Asp Tyr Leu Ile 4401631 AAC GGG ATG TAT GCG GAC TCA GAA ATG TGA GGG GGG CGG GGG CCT GGC1678441 Asn Gly Met Tyr Ala Asp Ser Glu Met *** 4501679 GGG AGG CCT GGC CCC TTC CTC GTC CTT TCC TTT TGC CTT TGA GAC CAA17261727 ACC AAG TGC TTC CAA ATT CTT TTG GTG CAA TTG AGG AGA TAT GCC AGA17741775 TGC TTA AAC ACA TTT AAT TGC TGT CAG ATT AAT TCC ATG ATC ACT AAA18221823 GAG TTG CTG CTT TTT TCA TAT TTA TTT TTG TAA ATG ATT CTG TGC CCA18701871 GGA GCA GCT GGG GGT TCC ACC TCA GGG TGG GGC GGG CAG GAC CCC GTC19181919 TCC CCA GGT GTC GGA GCC TGA CCT GAA TTA AAG TAC TGA CTG CTC GCC19661967 AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA19878.FP2653A核苷酸序列(SEQ ID NO22)長度2437個(gè)堿基1 GGGACGGTTT GTGACCCCCT TAGCCGACCC TACTCCTCAC TGGCCGGGAC AACTGGTCTT61 ATCACGGAGG CTGGGGCCAG GCAGCCCTTC GGTTCGGGTG GGCCCATGGA CCCCAGTCCA121 ACGCCGAGGG AATAGGACCA TCCAAAAGCG GAACCTTCGC CTCAGAAAAA GGGTGCGGGA181 CCCCTCCTCA CCGTGCGGTC ACGGTACGGA CAGGGTAGAT CACAGGCTGA GGGACAGAGC241 AAAGACCCCT GAGGCCGGAC ACCTGGGGTC CTGCCGGGCC CCTCCCCACG AGAGTTCCCT301 GTGTCTGTGC CAATCGTTTT CGTCTTTCTT TGCCGCAGTT TCTTTTCCTG TAAATCATGG361 TTAATGACAT TAACCTTCTT ACCATCAGGG GTTAGTTGTG GTTGTGATAA ATAATTACTA421 CCGTTATTAA GCAATTGCAA TTTGCAGTGT GCCAGGCACT GTGCCAAGTA TTTTGCTTCG481 ATGATTTCAC GTCATCTTCA AAACAACCTC ATGAGGGCTG GGTCAGTTAG AACCTAAACA541 AACTAGAGAC CTGGTTGCAA CCCCTCAGGC TCTGCTGATG CTGTCCCCCT TTGTTCCTGC601 AGCGTGGACC CTGCCAGCAG CCAGGCCATG GAGCTCTCTG ATGTCACCCT CATTGAGGGT661 GTGGGTAATG AGGTGATGGT GGTGGCAGGT GTGGTGGTGC TGATTCTAGC 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AAAAAAAAAA AAAAAAAB核苷酸序列(SEQ ID NO23)長度301個(gè)氨基酸1 MELSDVTLIE GVGNEVMVVA GVVVLILALV LAWLSTYVAD SGSNQLLGAI VSAGDTSVLH61 LGHVDHLVAG QGNPEPTELP HPSEGNDEKA EEAGEGRGDS TGEAGAGGGV EPSLEHLLDI121 QGLPKRQAGA GSSSPEAPLR SEDSTCLPPS PGLITVRLKF LNDTEELAVA RPEDTVGALK181 SKYFPGQESQ MKLIYQGRLL QDPARTLRSL NITDNCVIHC HRSPPGSAVP GPSASLAPSA241 TEPPSLGVNV GSLMVPVFVV LLGVVWYFRI NYRQFFTAPA TVSLVGVTVF FSFLVFGMYG301 RC.核苷酸及氨基酸組合序列(SEQ ID NO24) 克隆號(hào)FP2653起始編碼子 628 ATG 終止編碼子1531 TAA 蛋白質(zhì)分子量 31605.191 GGG ACG GTT TGT GAC CCC CTT AGC CGA CCC TAC TCC TCA CTG GCC GGG 4849 ACA ACT GGT CTT ATC ACG GAG GCT GGG GCC AGG CAG CCC TTC GGT TCG 9697 GGT GGG CCC ATG GAC CCC AGT CCA ACG CCG AGG GAA TAG GAC CAT CCA144145 AAA GCG GAA CCT TCG CCT CAG AAA AAG GGT GCG GGA CCC CTC CTC ACC192193 GTG CGG TCA CGG TAC GGA CAG GGT AGA TCA CAG GCT GAG GGA CAG AGC240241 AAA GAC CCC TGA GGC CGG ACA CCT GGG GTC CTG CCG GGC CCC TCC CCA288289 CGA GAG TTC CCT GTG TCT GTG CCA ATC GTT TTC GTC TTT CTT TGC CGC336337 AGT TTC TTT TCC TGT AAA 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ACT GAA CTC86464 Val Asp His Leu Val Ala Gly Gln Gly Asn Pro Glu Pro Thr Glu Leu 79865 CCC CAT CCA TCA GAG GGT AAT GAT GAG AAG GCT GAA GAG GCG GGT GAA91280 Pro His Pro Ser Glu Gly Asn Asp Glu Lys Ala Glu Glu Ala Gly Glu 95913 GGT CGG GGA GAC TCC ACT GGG GAG GCT GGA GCT GGG GGT GGT GTT GAG96096 Gly Arg Gly Asp Ser Thr Gly Glu Ala Gly Ala Gly Gly Gly Val Glu111961 CCC AGC CTT GAG CAT CTC CTT GAC ATC CAA GGC CTG CCC AAA AGA CAA 1008112 Pro Ser Leu Glu His Leu Leu Asp Ile Gln Gly Leu Pro Lys Arg Gln1271009 GCA GGT GCA GGC AGC AGC AGT CCA GAG GCC CCC CTG AGA TCT GAG GAT 1056128 Ala Gly Ala Gly Ser Ser Ser Pro Glu Ala Pro Leu Arg Ser Glu Asp 1431057 AGC ACC TGC CTC CCT CCC AGC CCT GGC CTC ATC ACT GTG CGG CTC AAA 1104144 Ser Thr Cys Leu Pro Pro Ser Pro Gly Leu Ile Thr Val Arg Leu Lys 1591105 TTC CTC AAT GAT ACC GAG GAG CTG GCT GTG GCT AGG CCA GAG GAT ACC 1152160 Phe Leu Asn Asp Thr Glu Glu Leu Ala Val Ala Arg Pro Glu Asp Thr 1751153 GTG GGT GCC CTG AAG AGC AAA TAC TTC CCT GGA CAA GAA AGC CAG ATG 1200176 Val Gly Ala Leu Lys Ser Lys Tyr Phe Pro Gly Gln Glu Ser Gln Met 1911201 AAA CTG ATC TAC CAG GGC CGC CTG CTA CAA GAC CCA GCC CGC ACA CTG 1248192 Lys Leu Ile Tyr Gln Gly Arg Leu Leu Gln Asp Pro Ala Arg Thr Leu 2071249 CGT TCT CTG AAC ATT ACC GAC AAC TGT GTG ATT CAC TGC CAC CGC TCA 1296208 Arg Ser Leu Asn Ile Thr Asp Asn Cys Val Ile His Cys His Arg Ser 2231297 CCC CCA GGG TCA GCT GTT CCA GGC CCC TCA GCC TCC TTG GCC CCC TCG 1344224 Pro Pro Gly Ser Ala Val Pro Gly Pro Ser Ala Ser Leu Ala Pro Ser 2391345 GCC ACT GAG CCA CCC AGC CTT GGT GTC AAT GTG GGC AGC CTC ATG GTG 1392240 Ala Thr Glu Pro Pro Ser Leu Gly Val Asn Val Gly Ser Leu Met Val 2551393 CCT GTC TTT GTG GTG CTG TTG GGT GTG GTC TGG TAC TTC CGA ATC AAT 1440256 Pro Val Phe Val Val Leu Leu Gly Val Val Trp Tyr Phe Arg Ile Asn 2711441 TAC CGC CAA TTC TTC ACA GCA CCT GCC ACT GTC TCC CTG GTG GGA GTC 1488272 Tyr Arg Gln Phe Phe Thr Ala Pro Ala Thr Val Ser Leu Val Gly Val 2871489 ACC GTC TTC TTC AGC TTC CTA GTA TTT GGG ATG TAT GGA 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AGT CCT TCA TAG AGC21602161 TCA GTC AGG AAG GGG ATG GGG CAC CAA GCC AAG CCC CCA GCA TTG GGA22082209 GCG GCC AGG CCA CAG CTG CTG CTC CCG TAG TCC TCA GGC TGT AAG CAA22562257 GAG ACA GCA CTG GCC CTT GGC GAG CGT CCT ACC CTG CCC AAC TCC AAG23042305 GAC TGG GTA TGG ATC GCT GGG CCC TAG GCT CTT GCT TCT GGG GCT ATT23522353 GGA GGG TCA GTG TCT GTG ACT GAA TAA AGT TCC ATT TTG TGG TCC TGC24002401 AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA A 24379.FP2823A核苷酸序列(SEQ ID NO25)長度2643個(gè)堿基1 GGTTCCTAGT TGCCTTGTGC AATACTCTTG TGGCATGTTT GCTACACCTC CTGAACTTTG61 ATTTGTTTGC CTTTTACCAG CTATTATGAC TCAAAATTGT CCCCTAGAAC ATGGAATAAT121 GGCAGAAAGA AAGTGTGTGG TTGAATAAAC ACACAGATTG GCATCCACCG TTGAAACAGG181 AAAACATCTT ATGTTATGCT GCTGCTGTTG TGAGGGCTGA TGGGCCTTGA AATGTATTTC241 CTGCACTATG TGTGTGTGAG TGTGTGTGAT TATACTTTTT GGCCTCACAG CCCCATCATC301 CCTTTCTAAT AACGTCACGT CGATAAGGGG CTTAGGATTG CATCTGGCCT GTGTAAGCCC361 TCTGAGTTCT GCGGTTCTTA GAGTTCCCTT TTCAGCACTA TAGCTCTGCC TTGTTCCCTT421 GTTCCTCCTT CTGGCGCCCC GTGCTGTGCC 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ADELRRKLQQ361 RQPLPDSNPE ESSVC.核苷酸及氨基酸組合序列(SEQ ID NO27) 克隆號(hào)FP2823起始編碼子 612 ATG 終止編碼子1734 TGA 蛋白質(zhì)分子量40201.861 GG TTC CTA GTT GCC TTG TGC AAT ACT CTT GTG GCA TGT TTG CTA CAC 4748 CTC CTG AAC TTT GAT TTG TTT GCC TTT TAC CAG CTA TTA TGA CTC AAA 9596 ATT GTC CCC TAG AAC ATG GAA TAA TGG CAG AAA GAA AGT GTG TGG TTG143144 AAT AAA CAC ACA GAT TGG CAT CCA CCG TTG AAA CAG GAA AAC ATC TTA191192 TGT TAT GCT GCT GCT GTT GTG AGG GCT GAT GGG CCT TGA AAT GTA TTT239240 CCT GCA CTA TGT GTG TGT GAG TGT GTG TGA TTA TAC TTT TTG GCC TCA287288 CAG CCC CAT CAT CCC TTT CTA ATA ACG TCA CGT CGA TAA GGG GCT TAG335336 GAT TGC ATC TGG CCT GTG TAA GCC CTC TGA GTT CTG CGG TTC TTA GAG383384 TTC CCT TTT CAG CAC TAT AGC TCT GCC TTG TTC CCT TGT TCC TCC TTC431432 TGG CGC CCC GTG CTG TGC CCC CTG CAG GAG TCC AAG CTG TCC CCA TGC479480 TGC GTT CTG GTC CGG CCG CCC CTC CCG TGG TGT GGC CCT GGC CGA CCC527528 CCC TCC TGC GCC CCG CTT TTC TCG CAG AAG CTG CTC TTT GCC GGC TCC575576 CGC TCT CAG CTG GTG CAG CTG CCC GTG GCC GAC TGC ATG AAG TAT CGC6231 Met Lys Tyr Arg 4624 TCC TGT GCA GAC TGT GTC CTC GCC CGG GAC CCC TAT TGC GCC TGG AGC6715 Ser Cys Ala Asp Cys Val Leu Ala Arg Asp Pro Tyr Cys Ala Trp Ser 20672 GTC AAC ACC AGC CGC TGT GTG GCC GTG GGT GGC CAC TCT GGA TCT CTA71921 Val Asn Thr Ser Arg Cys Val Ala Val Gly Gly His Ser Gly Ser Leu 36720 CTG ATC CAG CAT GTG ATG ACC TCG GAC ACT TCA GGC ATC TGC AAC CTC76737 Leu Ile Gln His Val Met Thr Ser Asp Thr Ser Gly Ile Cys Asn Leu 52768 CGT GGC AGT AAG AAA GGT GAG CTT TTT CAT TCC CGT CGC ATC GGG CTG81553 Arg Gly Ser Lys Lys Gly Glu Leu Phe His Ser Arg Arg Ile Gly Leu 68816 AGC CCT GGA CCA GAG CTG GAG TTT CTG TTC TCC TCT TCC CCA GCC CTG86369 Ser Pro Gly Pro Glu Leu Glu Phe Leu Phe Ser Ser Ser Pro Ala Leu 84864 CTT TCC TGC ACT AAC ATG CAC TCT GTT TTC TCT GCC ACT ACA GTC AGG91185 Leu Ser Cys Thr Asn Met His Ser Val Phe Ser Ala Thr Thr Val Arg100912 CCC ACT CCC AAA AAC ATC ACG GTG GTG GCG GGC ACA GAC CTG GTG CTG959101 Pro Thr Pro Lys Asn Ile Thr Val Val Ala Gly Thr Asp Leu Val Leu116960 CCC TGC CAC CTC TCC TCC AAC TTG GCC CAT GCC CGC TGG ACC TTT GGG 1007117 Pro Cys His Leu Ser Ser Asn Leu Ala His Ala Arg Trp Thr Phe Gly1321008 GGC CGG GAC CTG CCT GCG GAA CAG CCC GGG TCC TTC CTC TAC GAT GCC 1055133 Gly Arg Asp Leu Pro Ala Glu Gln Pro Gly Ser Phe Leu Tyr Asp Ala1481056 CGG CTC CAG GCC CTG GTT GTG ATG GCT GCC CAG CCC CGC CAT GCC GGG 1103149 Arg Leu Gln Ala Leu Val Val Met Ala Ala Gln Pro Arg His Ala Gly1641104 GCC TAC CAC TGC TTT TCA GAG GAG CAG GGG GCG CGG CTG GCT GCT GAA 1151165 Ala Tyr His Cys Phe Ser Glu Glu Gln Gly Ala Arg Leu Ala Ala Glu1801152 GGC TAC CTT GTG GCT GTC GTG GCA GGC CCG TCG GTG ACC TTG GAG GCC 1199181 Gly Tyr Leu Val Ala Val Val Ala Gly Pro Ser Val Thr Leu Glu Ala1961200 CGG GCC CCC CTG GAA AAC CTG GGG CTG GTG TGG CTG GCG GTG GTG GCC 1247197 Arg Ala Pro Leu Glu Asn Leu Gly Leu Val Trp Leu Ala Val Val Ala2121248 CTG GGG GCT GTG TGC CTG GTG CTG CTG CTG CTG GTG CTG TCA TTG CGC 1295213 Leu Gly Ala Val Cys Leu Val Leu Leu Leu Leu Val Leu Ser Leu Arg2281296 CGG CGG CTG CGG GAA GAG CTG GAG AAA GGG GCC AAG GCT ACT GAG AGG 1343229 Arg Arg Leu Arg Glu Glu Leu Glu Lys Gly Ala Lys Ala Thr Glu Arg2441344 ACC TTG GTG TAC CCC CTG GAG CTG CCC AAG GAG CCC ACC AGT CCC CCC 1391245 Thr Leu Val Tyr Pro Leu Glu Leu Pro Lys Glu Pro Thr Ser Pro Pro2601392 TTC CGG CCC TGT CCT GAA CCA GAT GAG AAA CTT TGG GAT CCT GTC GGT 1439261 Phe Arg Pro Cys Pro Glu Pro Asp Glu Lys Leu Trp Asp Pro Val Gly2761440 TAC TAC TAT TCA GAT GGC TCC CTT AAG ATA GTA CCT GGG CAT GCC CGG 1487277 Tyr Tyr Tyr Ser Asp Gly Ser Leu Lys Ile Val Pro Gly His Ala Arg2921488 TGC CAG CCC GGT GGG GGG CCC CCT TCG CCA CCT CCA GGC ATC CCA GGC 1535293 Cys Gln Pro Gly Gly Gly Pro Pro Ser Pro Pro Pro Gly Ile Pro Gly3081536 CAG CCT CTG CCT TCT CCA ACT CGG CTT CAC CTG GGG GGT GGG CGG AAC 1583309 Gln Pro Leu Pro Ser Pro Thr Arg Leu His Leu Gly Gly Gly Arg Asn3241584 TCA AAT GCC AAT GGT TAC GTG CGC TTA CAA CTA GGA GGG GAG GAC CGG 1631325 Ser Asn Ala Asn Gly Tyr Val Arg Leu Gln Leu Gly Gly 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TAT CAC TTT GTC TCT CCT ACC CCC ACT GCC22072208 CCG AGT GTC GGG CAG CGA TGT ACA TAT GGA GGT GGG GTG GAC AGG GTG22552256 CTG TGC CCC TTC AGA GGG AGT GCA GGG CTT GGG GTG GGC CTA GTC CTG23032304 CTC CTA GGG CTG TGA ATG TTT TCA GGG TGG GGG GAG GGA GAT GGA GCC23512352 TCC TGT GTG TTT GGG GGG AAG GGT GGG TGG GGC CTC CCA CTT GGC CCC23992400 GGG GTT CAG TGG TAT TTT ATA CTT GCC TTC TTC CTG TAC AGG GCT GGG24472448 AAA GGC TGT GTG AGG GGA GAG AAG GGA GAG GGT GGG CCT GCT GTG GAC24952496 AAT GGC ATA CTC TCT TCC AGC CCT AGG AGG AGG GCT CCT AAC AGT GTA25432544 ACT TAT TGT GTC CCC GCG TAT TTA TTT GTT GTA AAT ATT TGA GTA TTT25912592 TTA TAT TGA CAA ATA AAA TGG AGA AAA TGA AAC GAA AAA AAA AAA AAA26392640 AAA A 264310.FP2860A核苷酸序列(SEQ ID NO28)長度1848個(gè)堿基1 GTTGATAAAT TTCACGTAAT TTACTCAACC GTTTCTCTAC TGTTGGATGT TTAGGTTGTT61 TCCAGTTTTT TGATATAATC ACAACCCATG TTTGTTGAGC ATGGACTGTG TGCTCAGCAC121 TGTCATGGAC ATTTCCCTTG CAGTAATTTG TTTACCCCTA AAAACATCCT GGTGGGAAAA181 GTGGTTTTAT TATCCCCATT TTACAGATGA AAAAACTGAG 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ATT ACT TTG TAT TAT TAA AAA ATA GTA AAA 12941295 CAA ACA AAA ATG GTG CAA AGG GCT TAG TAC TTG TCC CAC GAC CGG GGT 13421343 CTG ACT TTC CCC CTC ACG ATC CTG TGG TGC CCA CAG CGA ACC CAT CCT 13901391 ACG TGC CTC CAC CCC AGT GCC AGC CAG GCG AGT TTG CCT GTG CCA ACA 14381439 GCC GCT GCA TCC AGG AGC GCT GGA AGT GTG ACG GAG ACA ACG ATT GCC 14861487 TGG ACA ACA GTG ATG AGG CCC CAG CCC TCT GCC ATC AGC ACA CCT GCC 15341 Met Arg Pro Gln Pro Ser Ala Ile Ser Thr Pro Ala 121535 CCT CGG ACC GAT TCA AGT GCG AGA ACA ACC GGT GCA TCC CCA ACC GCT 158213 Pro Arg Thr Asp Ser Ser Ala Arg Thr Thr Gly Ala Ser Pro Thr Ala 281583 GGC TCT GCG ACG GGG ACA ATG ACT GTG GGA ACA GTG AAG ATG AGT CCA 163029 Gly Ser Ala Thr Gly Thr Met Thr Val Gly Thr Val Lys Met Ser Pro 441631 ATG CCA CTT GTT CAG GTG TGG AGC GGG GCT CAG ATC ACA CGA GGC ACC 167845 Met Pro Leu Val Gln Val Trp Ser Gly Ala Gln Ile Thr Arg Gly Thr 601679 CCT CAG TCA AGG AGG CAG GGG AGA CGA GGG GGC CAG GTT CAG TGG CTC 172661 Pro Gln Ser Arg Arg Gln Gly Arg Arg Gly Gly Gln Val Gln Trp Leu 761727 ATG CCT ATA ATC TCA GCA CTT TGG GAG GCC AAG GTG AGA GGA TCA CTT 177477 Met Pro Ile Ile Ser Ala Leu Trp Glu Ala Lys Val Arg Gly Ser Leu 921775 GAG CCC AGG AGC TCA AGA CCA GCC TGG CCA ACA TAG TGA GAC CTC CCA182293 Glu Pro Arg Ser Ser Arg Pro Ala Trp Pro Thr *** 1041823 CTC TTT ACA AAA AAA AAA AAA AAA AA 184811.FP2926A核苷酸序列(SEQ ID NO31)長度1921個(gè)堿基1 GCACGGTGAA ACCCCGTCTC TACTAAAAAT ACAAAAAATT AGCCGGGCAC GGTGGCGGGC61 ACCTGTAGTC CCAGCTACTC GGGAGGCTGA GGCAGGAGAA TGGCATGAAC CTGGGAGGCG121 GAGCTTGCAG TGAGCCGAGA TTGCGCCACT GCACTCCAGC CTGGGCCACA GAGCGAGACT181 CCATCTCAAA AAAAAAAAAA GAACCCTGGG GTTTGGGCAG AGAGAGTTGG AGCTGATGTG241 GCGCTGAGGG GGCTGCTCCC TCCCATCTGA GTCTCCCATC TCTGCCTGCA CTCTTCTGGC301 TGGCACTGTG CCAGCCTGCT AACCTCCCTG GGCCTCAGTT TCCTCCTCTG TCAAATGAGA361 GAGGATCTTC TCTGGGTGTA GAAAAGGACG AGGTGGTGAG TGGGTCTGAA GGCCTCTGGT421 GTCCCATAAA GCGACTCTCC TCACCATCTT TGCCACCCAT TGGGGTGTCC AGCACCCATG481 GAACTCTGTC TGTGCCTCTG TCCTGGAGGG AGACTTGACC TCCTGCTCAG 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GATCGAGACC ATCCTTGAAA CCCCGTCTCT ACTAAAAATA TAGAAAATTA1441 GCCGGGCGTG GTGGCGGGCG CGTGTAGTCC CAGCTACTCG GGAGGCTGAG GCAGGAGAAT1501 GGTGTGAACC CGGGAGGTGG AGTTTGCCGT GAGCCGAGAT CGCGCCACTG CACTCCAGCC1561 TGGGCCACAG AGCGAGACTG CGTCTCAAAA AAAAAAAAAG AAGAAAAGAA AAGAAAGAAA1621 TACCAGGCGC GGTGGCTCAC GCCTGGAATC CCAGCACTTT GGGAGGCCGA GGCGGGTGGA1681 TCACGAGGTC AGGAGATCGA GACCATCCTG GCTAATACGG CGAAACCCCA CCTCTACTAA1741 AAATACAAAA AAATTAGCCG GGCGCAGTGG TGGGCACCTG TAGTCCCAGC TACTGGGGAG1801 GCCGAGGCAG GAGAATCGCT TGAACCTGGG AGGTGGAGGT TGTAGTGAGC CAAGATCACG1861 CCATTGCACT CCAGCCTGGT TGACAGAACG AGACTCCATC TCAAAAAAAA AAAAAAAAAA1921 AB核苷酸序列 (SEQ ID NO32) 長度141個(gè)氨基酸1 MELCLCLCPG GRLDLLLRKG SPSPCCEIPA CCPELSLPIR GTKVSGREVD RKGSSSAVPP61 SSPSFALSRP EISEELKDLI LKMLDKNPET RIGVPDIKVG ELGVLGWAGT QKTGVTFPFW121 RDQHQDACVL GLSLWTLDPS RC.核苷酸及氨基酸組合序列(SEQ ID NO33)克隆號(hào)FP2926起始編碼子 478 ATG 終止編碼子901 TGA 蛋白質(zhì)分子量 15271.931 GCA CGG TGA AAC CCC GTC TCT ACT AAA AAT ACA AAA AAT TAG CCG GGC 4849 ACG GTG GCG GGC ACC TGT 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Thr Lys Val Ser Gly Arg Glu Val 49625 GAC AGG AAG GGG TCC TCA TCA GCG GTC CCA CCC TCC TCT CCT TCC TTC 67250 Asp Arg Lys Gly Ser Ser Ser Ala Val Pro Pro Ser Ser Pro Ser Phe 65673 GCC CTC TCC AGG CCA GAA ATC AGC GAG GAG CTC AAG GAC CTG ATC CTG 72066 Ala Leu Ser Arg Pro Glu Ile Ser Glu Glu Leu Lys Asp Leu Ile Leu 81721 AAG ATG TTA GAC AAG AAT CCC GAG ACG AGA ATT GGG GTG CCA GAC ATC 76882 Lys Met Leu Asp Lys Asn Pro Glu Thr Arg Ile Gly Val Pro Asp Ile 97769 AAG GTC GGG GAA CTG GGG GTC TTG GGC TGG GCT GGG ACA CAG AAA ACA 81698 Lys Val Gly Glu Leu Gly Val Leu Gly Trp Ala Gly Thr Gln Lys Thr 113817 GGA GTC ACT TTC CCT TTC TGG AGG GAT CAA CAC CAG GAT GCA TGT GTG 864114 Gly Val Thr Phe Pro Phe Trp Arg Asp Gln His Gln Asp Ala Cys Val 129865 TTG GGT TTG AGT CTG TGG ACT TTG GAC CCC TCC AGG TGA TTC TGG TAA 912130 Leu Gly Leu Ser Leu Trp Thr Leu Asp Pro Ser Arg *** 142913 TGG CCT GAC CTC TCC CCC TCT CCC TGC CCT CCC GGC CCC GAC AGT TGC 960961 ACC CTT GGG TGA CCA AGA ACG GGG AGG AGC CCC TTC CTT CGG AGG AGG10081009 AGC ACT GCA GCG TGG TGG AGG TGA CAG AGG AGG AGG TTA AGA ACT CAG10561057 TCA GGC TCA TCC CCA GCT GGA CCA CGG TGG TAA GAG AGC CGG GGT AGA11041105 TGC TCC CTT GTC CTG GAG GGC CTG GGG GAC CTG AGC CTT GCT CTG TGC11521153 CTG GCT CCT TGG GGG GAC AGA GGC CTG CCT GGC CAG CCA GCT GTG ATC12001201 CTG GGC CAC TGG AGC CAG CCA TTC TGA TGG AGG CCC ATG GAG AGG GAG12481249 GTC TTG TGG TCG GGA GAC CAG GAG GCT TGG TGA GGA GAG TGA CTG ATT12961297 TAA AGA AAT AGC GGG CGT GGG GCC GGG CGC GGT GGC TCA CGC CTG TAA13441345 TCC CAG CAC TTT GGG AGG CCA AGG CGG GCA GAT CAC GAG GTC AGG AGA13921393 TCG AGA CCA TCC TTG AAA CCC CGT GTC TAC TAA AAA TAT AGA AAA TTA14401441 GCC GGG CGT GGT GGC GGG CGC GTG TAG TCC CAG CTA CTC GGG AGG CTG14881489 AGG CAG GAG AAT GGT GTG AAC CCG GGA GGT GGA GTT TGC CGT GAG CCG15361537 AGA TCG CGC CAC TGC ACT CCA GCC TGG GCC ACA GAG CGA GAC TGC GTC15841585 TCA AAA AAA AAA AAA GAA GAA AAG AAA AGA AAG AAA TAC CAG GCG CGG16321633 TGG CTC ACG CCT GGA ATC CCA GCA CTT TGG GAG GCC GAG GCG GGT GGA16801681 TCA CGA GGT CAG GAG ATC GAG ACC ATC CTG GCT AAT ACG GCG AAA CCC17281729 CAC CTC TAC TAA AAA TAC AAA AAA ATT AGC CGG GCG CAG TGG TGG GCA17761777 CCT GTA GTC CCA GCT ACT GGG GAG GCC GAG GCA GGA GAA TCG CTT GAA18241825 CCT GGG AGG TGG AGG TTG TAG TGA GCC AAG ATC ACG CCA TTG CAC TCC18721873 AGC CTG GTT GAC AGA ACG AGA CTC CAT CTC AAA AAA AAA AAA AAA AAA19201921 A 192112.FP3235A核苷酸序列(SEQ ID NO34)長度1529個(gè)堿基1 GCGGCGAGGC TACCCAGGCT TCCCTGGAGT CGGCCCCACG GATCATGCGG CTGGTGGCCG61 AATGCAGCCG CTCCAGGGCC CGGGCAGGCG AGCTGTGGCT GCCGCATGGG ACAGTGGCCA121 CTCCTGTGTT CATGCCAGTG GGCACGCAGG CCACCATGAA GGGCATCACG ACCGAACAGC181 TGGACGCTCT GGGGACCCGA GCTGATCCAG AAAGCCAACG GTCTCCACGG CTTCATGAAT241 TGGCCTCATA ATCTGCTAAC GGACAGCGGC GGTTTCCAGA TGGTGTCGCT GGTGTCTCTG301 TCCGAGGTGA CGGAGGAGGG CGTCCGCTTC CGCTCCCCCT ACGACGGCAA TGAGACCCTG361 CTGAGCCCGG AGAAATCCGT GCAGATCCAG AATGCGCTGG GCTCGGACAT CATCATGCAG421 CTGGACGACG TGGTTAGCAG TACTGTGACT GGGCCACGTG TGGAGGAGGC CATGTACAGG481 TCAATCCGCT GGCTGGACCG GTGCATTGCA GCCCATCAGC GGCCGGACAA GCAGAACCTC541 TTCGCCATTA TCCAGGGTGG GCTGGACGCA GATCTCCGGG CCACCTGCCT TGAAGAGATG601 ACCAAGCGAG ACGTGCCTGG CTTCGCCATC GGGGGCCTGA GCGGGGGTGA GAGCAAGTCG661 CAGTTCTGGC GGATGGTGGC GCTGAGCACC TCTCGGCTGC CGAAGGACAA GCCCCGATAT721 CTGATGGGGG TTGGGTATGT TGTGGATAGG GAAGCCAGAG CCCTACCTGT GGGAAGTGGA781 TTCCTGGGGA CCCCCTACCC TGCTTGGGGA GGTGGCATTT GGGGGAAACG GACACAGGTC841 TGATCTGAGG AGACTAGGAA GACATGGCTG TCCCTTGGGG GCCATTCTGA GGGAATATGG901 CCCAGTCTGG GGCAGTGTGA GGGTTGGAAG GGGCCCTGGG AAGCCCCTGA GGTTCTCTGC961 CCCCTCCCGT CATGGCTGCA ACCCCAGCTA TGCCACTGAT CTGGTAGTCT GCGTGGCTCT1021 TGGATGTGAC ATGTTCGACT GCGTCTTCCC CACACGGACA GCGCGCTTTG GCTCTGCCCT1081 GGTGCCCACT GGGAACCTGC AGTTGAGGAA GAAGGTGTTT GAGAAGGACT TCGGCCCCAT1141 AGACCCGGAG TGCACCTGCC CCACGTGCCA AAAGCACAGC CGCGCCTTCC TGCACGCACT1201 GCTGCACAGT GACAACACGG CCGCGCTGCA CCACCTCACG GTCCACAACA TCGCCTACCA1261 GCTGCAGCTC ATGAGCGCCG TCCGCACCAG CATCGTGGAG AAGCGCTTCC CGGACTTCGT1321 GCGGGACTTC ATGGGCGCCA TGTACGGGGA TCCCACCCTC TGTCCCACCT GGGCCACTGA1381 CGCTCTGGCC TCTGTGGGAA TCACACTGGG CTGACCTGGC ATTGGGAGAG GGAGGGAGGA1441 AGGAAGGGAG GGAGGGGCTG GAAGATACTG AAGGATTCCT TTTTGAAAGG TTTTTTTTAT1501 TGTAACTTAC AAAAAAAAAA AAAAAAAAAB核苷酸序列(SEQ ID NO35)長度225個(gè)氨基酸1 MLWIGKPEPY LWEVDSWGPP TLLGEVAFGG NGHRSDLRRL GRHGCPLGAI LREYGPVWGS61 VRVGRGPGKP LRFSAPSRHG CNPSYATDLV VCVALGCDMF DCVFPTRTAR FGSALVPTGN121 LQLRKKVFEK DFGPIDPECT CPTCQKHSRA FLHALLHSDN TAALHHLTVH NIAYQLQLMS181 AVRTSIVEKR FPDFVRDFMG AMYGDPTLCP TWATDALASV GITLGC.核苷酸及氨基酸組合序列(SEQ ID NO36) 克隆號(hào)FP3235起始編碼子 737 ATG 終止編碼子1412 TGA 蛋白質(zhì)分子量 24675.171G CGG CGA GGC TAC CCA GGC TTC CCT GGA GTC GGC CCC ACG GAT CAT 4647 GCG GCT GGT GGC CGA ATG CAG CCG CTC CAG GGC CCG GGC AGG CGA GCT 9495 GTG GCT GCC GCA TGG GAC AGT GGC CAC TCC TGT GTT CAT GCC AGT GGG142143 CAC GCA GGC CAC CAT GAA GGG CAT CAC GAC CGA ACA GCT GGA CGC TCT190191 GGG GAC CCG AGC TGA TCC AGA AAG CCA ACG GTC TCC ACG GCT TCA TGA238239 ATT GGC CTC ATA ATC TGC TAA CGG ACA GCG GCG GTT TCC AGA TGG TGT286287 CGC TGG TGT CTC TGT CCG AGG TGA CGG AGG AGG GCG TCC GCT TCC GCT334335 CCC CCT ACG ACG GCA ATG AGA CCC TGC TGA GCC CGG AGA AAT CCG TGC382383 AGA TCC AGA ATG CGC TGG GCT CGG ACA TCA TCA TGC AGC TGG ACG ACG430431 TGG TTA GCA GTA CTG TGA CTG GGC CAC GTG TGG AGG AGG CCA TGT ACA478479 GGT CAA TCC GCT GGC TGG ACC GGT GCA TTG CAG CCC ATC AGC GGC CGG526527 ACA AGC AGA ACC TCT TCG CCA TTA TCC AGG GTG GGC TGG ACG CAG ATC 574575 TCC GGG CCA CCT GCC TTG AAG AGA TGA CCA AGC GAG ACG TGC CTG GCT 622623 TCG CCA TCG GGG GCC TGA GCG GGG GTG AGA GCA AGT CGC AGT TCT GGC 670671 GGA TGG TGG CGC TGA GCA CCT CTC GGC TGC CGA AGG ACA AGC CCC GAT 718719 ATC TGA TGG GGG TTG GGT ATG TTG TGG ATA GGG AAG CCA GAG CCC TAC 7661 Met Leu Trp Ile Gly Lys Pro Glu Pro Tyr 10767 CTG TGG GAA GTG GAT TCC TGG GGA CCC CCT ACC CTG CTT GGG GAG GTG 81411 Leu Trp Glu Val Asp Ser Trp Gly Pro Pro Thr Leu Leu Gly Glu Val 26815 GCA TTT GGG GGA AAC GGA CAC AGG TCT GAT CTG AGG AGA CTA GGA AGA 86227 Ala Phe Gly Gly Asn Gly His Arg Ser Asp Leu Arg Arg Leu Gly Arg 42863 CAT GGC TGT CCC TTG GGG GCC ATT CTG AGG GAA TAT GGC CCA GTC TGG 91043 His Gly Cys Pro Leu Gly Ala Ile Leu Arg Glu Tyr Gly Pro Val Trp 58911 GGC AGT GTG AGG GTT GGA AGG GGC CCT GGG AAG CCC CTG AGG TTC TCT 95859 Gly Ser Val Arg Val Gly Arg Gly Pro Gly Lys Pro Leu Arg Phe Ser 74959 GCC CCC TCC CGT CAT GGC TGC AAC CCC AGC TAT GCC ACT GAT CTG GTA100675 Ala Pro Ser Arg His Gly Cys Asn Pro Ser Tyr Ala Thr Asp Leu Val 901007 GTC TGC GTG GCT CTT GGA TGT GAC ATG TTC GAC TGC GTC TTC CCC ACA105491 Val Cys Val Ala Leu Gly Cys Asp Met Phe Asp Cys Val Phe Pro Thr 1061055 CGG ACA GCG CGC TTT GGC TCT GCC CTG GTG CCC ACT GGG AAC CTG CAG1102107 Arg Thr Ala Arg Phe Gly Ser Ala Leu Val Pro Thr Gly Asn Leu Gln 1221103 TTG AGG AAG AAG GTG TTT GAG AAG GAC TTC GGC CCC ATA GAC CCG GAG1150123 Leu Arg Lys Lys Val Phe Glu Lys Asp Phe Gly Pro Ile Asp Pro Glu 1381151 TGC ACC TGC CCC ACG TGC CAA AAG CAC AGC CGC GCC TTC CTG CAC GCA1198139 Cys Thr Cys Pro Thr Cys Gln Lys His Ser Arg Ala Phe Leu His Ala 1541199 CTG CTG CAC AGT GAC AAC ACG GCC GCG CTG CAC CAC CTC ACG GTC CAC1246155 Leu Leu His Ser Asp Asn Thr Ala Ala Leu His His Leu Thr Val His 1701247 AAC ATC GCC TAC CAG CTG CAG CTC ATG AGC GCC GTC CGC ACC AGC ATC1294171 Asn Ile Ala Tyr Gln Leu Gln Leu Met Ser Ala Val Arg Thr Ser Ile 1861295 GTG GAG AAG CGC TTC CCG GAC TTC GTG CGG GAC TTC ATG GGC GCC ATG1342187 Val Glu Lys Arg Phe Pro Asp Phe Val Arg Asp Phe Met Gly Ala Met 2021343 TAC GGG GAT CCC ACC CTC TGT CCC ACC TGG GCC ACT GAC GCT CTG GCC1390203 Tyr Gly Asp Pro Thr Leu Cys Pro Thr Trp Ala Thr Asp Ala Leu Ala 2181391 TCT GTG GGA ATC ACA CTG GGC TGACCT GGC ATT GGG AGA GGG AGG GAG 1438219 Ser Val Gly Ile Thr Leu Gly *** 2261439 GAA GGA AGG GAG GGA GGG GCT GGA AGA TAC TGA AGG ATT CCT TTT TGA14861487 AAG GTT TTT TTT ATT GTA ACT TAC AAA AAA AAA AAA AAA AAA A 1529
權(quán)利要求
1.一種分離的具有抑癌功能的人蛋白，其特征在于，它包含具有選自下組的氨基酸序列的多肽SEQ ID NO2、5、8、11、14、17、20、23、26、29、32、35；或其保守性變異多肽、或其活性片段、或其活性衍生物。
2.如權(quán)利要求1所述的多肽，其特征在于，該多肽是具有選自下組的氨基酸序列的多肽SEQ ID NO2、5、8、11、14、17、20、23、26、29、32、35。
3.一種分離的多核苷酸，其特征在于，它包含一核苷酸序列，該核苷酸序列與選自下組的一種核苷酸序列有至少85％相同性(a)編碼如權(quán)利要求1和2所述多肽的多核苷酸；(b)與多核苷酸(a)互補(bǔ)的多核苷酸。
4.如權(quán)利要求3所述的多核苷酸，其特征在于，該多核苷酸編碼的多肽具有選自下組的氨基酸序列SEQ ID NO2、5、8、11、14、17、20、23、26、29、32、35。
5.如權(quán)利要求3所述的多核苷酸，其特征在于，該多核苷酸的序列選自下組SEQ ID NO3、6、9、12、15、18、21、24、27、30、33、36的編碼區(qū)序列或全長序列。
6.一種載體，其特征在于，它含有權(quán)利要求3所述的多核苷酸。
7.一種遺傳工程化的宿主細(xì)胞，其特征在于，它是選自下組的一種宿主細(xì)胞(a)用權(quán)利要求6所述的載體轉(zhuǎn)化或轉(zhuǎn)導(dǎo)的宿主細(xì)胞；(b)用權(quán)利要求3所述的多核苷酸轉(zhuǎn)化或轉(zhuǎn)導(dǎo)的宿主細(xì)胞。
8.一種具有抑癌功能的人蛋白活性的多肽的制備方法，其特征在于，該方法包含(a)在適合表達(dá)具有抑癌功能的人蛋白的條件下，培養(yǎng)權(quán)利要求7所述的宿主細(xì)胞；(b)從培養(yǎng)物中分離出具有抑癌功能的人蛋白活性的多肽。
9.一種能與權(quán)利要求1所述的具有抑癌功能的人蛋白特異性結(jié)合的抗體。
10.一種藥物組合物，其特征在于，它含有安全有效量的權(quán)利要求1所述的蛋白以及藥學(xué)上可接受的載體。
全文摘要
本發(fā)明公開了一類新的具有抑癌功能的人蛋白，編碼此多肽的多核苷酸和經(jīng)重組技術(shù)產(chǎn)生該多肽的方法。本發(fā)明還公開了此多肽用于治療多種疾病如癌癥等的方法。本發(fā)明還公開了抗此多肽的拮抗劑及其治療作用。本發(fā)明還公開了編碼這類新的具有抑癌功能的人蛋白的多核苷酸的用途。
文檔編號(hào)C12N15/63GK1403478SQ0112672
公開日2003年3月19日 申請(qǐng)日期2001年9月12日 優(yōu)先權(quán)日2001年9月12日
發(fā)明者顧健人, 楊勝利 申請(qǐng)人:上海新世界基因技術(shù)開發(fā)有限公司