專利名稱：生殖道沙眼衣原體快速診斷試劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于診斷試劑技術(shù)領(lǐng)域，特別涉及一種生殖道沙眼衣原體快速診斷試劑。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明目的在于提供一種陽性檢出率高的生殖道沙眼衣原體快速診斷試劑。
為達上述目的，本發(fā)明采用如下技術(shù)方案生殖道沙眼衣原體快速診斷試劑，由分置的基礎(chǔ)液和顯色劑組成，基礎(chǔ)液為濃度0.5-10g/100ml的氯化鈉水溶液；顯色劑為蒽酮和硫酸的水溶液，蒽酮濃度為0.1-10g/100ml，硫酸濃度為10-100ml 98％硫酸/100ml。
顯色劑中含有抗氧化劑，抗氧化劑由硫脲和半胱氨酸組成，硫脲濃度為0.5-10g/100ml，半胱氨酸濃度為0.5-10g/100ml。
基礎(chǔ)液中氯化鈉濃度為0.5-1.5g/100ml，蒽酮濃度為0.1-2.0g/100ml，硫酸濃度為50-100ml 98％硫酸/100ml，硫脲濃度為0.5-5.0g/100ml，半胱氨酸0.5-5.0g/100ml。
本發(fā)明試劑可用如下方法配制基礎(chǔ)液—取氯化鈉直接溶于三蒸水中；顯色劑—先按配方取蒽酮和重量百分比濃度98％的硫酸，將蒽酮溶解于98％硫酸中，然后把上述溶液加入余量三蒸水中混勻。對于含抗氧化劑的顯色劑，可在配制好的蒽酮硫酸水溶液中攪拌加入抗氧化劑混勻。
本發(fā)明中基礎(chǔ)液可置于反應(yīng)管中，顯色劑置于密閉瓶中。使用時方法為取分泌物拭子加入盛有基礎(chǔ)液的反應(yīng)管中，攪拌幾下，棄拭子，3000rpm離心10分鐘，棄上清(可輕輕甩去，但勿把沉淀甩出)，倒置于吸水紙上空干；往反應(yīng)管內(nèi)的沉淀物中加10滴顯色劑，置80±5℃溫育10分鐘，觀察顏色變化。結(jié)果判斷對照比色卡，顏色由黃色變成綠色或蘭色，為陽性；顏色保持淺黃色不變或變成其他色如粉紅色等，為陰性。
本發(fā)明利用原理是沙眼衣原體侵入細胞后，在其生活周期的原體和始體階段均產(chǎn)生大量糖原，蒽酮在強酸性條件下與糖原反應(yīng)顏色由黃色變成綠色或蘭色。
本發(fā)明陽性檢出率高(21.8-34.5％)，與臨床發(fā)病率(30％左右)比較符合；操作簡單，兩步法完成，反應(yīng)條件溫和；易于判斷，與比色卡對比即一目了然；效期較長，加入抗氧化劑后4℃可保存6個月，利于產(chǎn)品化；直接查病原體成分，臨床意義大，符合率高。以細胞培養(yǎng)為金標(biāo)準(zhǔn)，本發(fā)明試劑敏感性約84.8-87.5％，特異性約96.5-98.6％，有較高臨床使用價值。
本發(fā)明在使用時應(yīng)注意(1)由于沙眼衣原體寄生于上皮細胞內(nèi)，故采樣時必須采到上皮細胞；(2)對于女性患者應(yīng)取宮頸分泌物，采樣時勿接觸陰道壁；(3)本試劑含有強酸，使用時注意其腐蝕性；(4)采到的拭子若當(dāng)天不檢測，可置于4℃放置一周；(5)顯色劑應(yīng)在2-8℃放置，有效期可達6個月。反應(yīng)管可室溫放置；(6)婦女感染衣原體一般在2-3周發(fā)病，出現(xiàn)輕微疼痛、墜脹、瘙癢或腰部酸疼不適、白帶增多等臨床癥狀，但也有約30％的患者無癥狀。
實施例2、本實施例中，基礎(chǔ)液為濃度0.9g/100ml的氯化鈉水溶液，顯色劑中蒽酮濃度為0.1g/100ml，硫酸濃度為70ml 98％硫酸/100ml。其他同實施例1。
實施例3、本實施例中，基礎(chǔ)液為濃度1.2g/100ml的氯化鈉水溶液，顯色劑中蒽酮濃度為0.15g/100ml，硫酸濃度為75ml 98％硫酸/100ml。其他同實施例1。
實施例4、本實施例中，基礎(chǔ)液為濃度0.8g/100ml的氯化鈉水溶液，盛裝于反應(yīng)管中；顯色劑為蒽酮和硫酸的水溶液，蒽酮濃度為0.2g/100ml，硫酸濃度為100ml 98％硫酸/100ml，盛裝于顯色劑瓶中。顯色劑中含有抗氧化劑，抗氧化劑由硫脲和半胱氨酸組成，硫脲濃度為1.0g/100ml，半胱氨酸濃度為0.5g/100ml。配制方法如上所述。
實施例5、本實施例中，基礎(chǔ)液為濃度0.9g/100ml的氯化鈉水溶液，顯色劑中蒽酮濃度為0.1g/100ml，硫酸濃度為70ml 98％硫酸/100ml，硫脲濃度為1.0g/100ml，半胱氨酸濃度為1.0g/100ml。其他同實施例4。
實施例6、本實施例中，基礎(chǔ)液為濃度0.9g/100ml的氯化鈉水溶液，顯色劑中蒽酮濃度為0.1g/100ml，硫酸濃度為70ml 98％硫酸/100ml，硫脲濃度為1.0g/100ml，半胱氨酸濃度為1.0g/100ml。其他同實施例4。
權(quán)利要求
1.生殖道沙眼衣原體快速診斷試劑，本發(fā)明特征在于，由分置的基礎(chǔ)液和顯色劑組成，基礎(chǔ)液為濃度0.5-10g/100ml的氯化鈉水溶液；顯色劑為蒽酮和硫酸的水溶液，蒽酮濃度為0.1-10g/100ml，硫酸濃度為10-100ml98％硫酸/100ml。
2.如權(quán)利要求1所述的診斷試劑，其特征在于，顯色劑中含有抗氧化劑，抗氧化劑由硫脲和半胱氨酸組成，硫脲濃度為0.5-10g/100ml，半胱氨酸濃度為0.5-10g/100ml。
3.如權(quán)利要求2所述的診斷試劑，其特征在于，基礎(chǔ)液中氯化鈉濃度為0.5-1.5g/100ml，蒽酮濃度為0.1-2.0g/100ml，硫酸濃度為50-100ml 98％硫酸/100ml，硫脲濃度為0.5-5.0g/100ml，半胱氨酸0.5-5.0g/100ml。
全文摘要
生殖道沙眼衣原體快速診斷試劑，屬于診斷試劑技術(shù)領(lǐng)域。由分置的基礎(chǔ)液和顯色劑組成，基礎(chǔ)液為濃度0.5－10g/100ml的氯化鈉水溶液；顯色劑為蒽酮和硫酸的水溶液，蒽酮濃度為0.1－10g/100ml，硫酸濃度為10－100ml98％硫酸/100ml。顯色劑中含有抗氧化劑，抗氧化劑由硫脲和半胱氨酸組成，硫脲濃度為0.5－10g/100ml，半胱氨酸濃度為0.5－10g/100ml。本發(fā)明試劑效期長，利于產(chǎn)品化。利用本發(fā)明進行檢測診斷簡便快速，符合率高。以細胞培養(yǎng)為金標(biāo)準(zhǔn)，本發(fā)明試劑敏感性約84.8－87.5％，特異性約96.5－98.6％，有較高臨床使用價值。
文檔編號C12Q1/25GK1417346SQ01133660
公開日2003年5月14日 申請日期2001年11月7日 優(yōu)先權(quán)日2001年11月7日
發(fā)明者王則宇, 付光宇, 陳睿鋒, 秦耘, 楊增利, 彭志剛, 苗蘭芳, 朱新朋 申請人:鄭州博賽生物工程有限責(zé)任公司