專利名稱：蘭花的培育方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種采用生物基因技術(shù)產(chǎn)業(yè)化培育名貴蘭花的方法。
背景技術(shù)：
近年來，國(guó)家產(chǎn)業(yè)政策和行業(yè)發(fā)展規(guī)劃花卉良種繁育及儲(chǔ)藏列為重點(diǎn)鼓勵(lì)和扶持發(fā)展的高效農(nóng)業(yè)和創(chuàng)匯農(nóng)業(yè)，花卉業(yè)進(jìn)入了快速發(fā)展的快車道，但以生物技術(shù)為核心的產(chǎn)業(yè)化開發(fā)還是停留在組織培養(yǎng)這項(xiàng)最下游的應(yīng)用技術(shù)階段，而以基因工程為主要標(biāo)志的生物工程開發(fā)基本還處于花卉生產(chǎn)中的空白。以蝴蝶蘭等高檔蘭花系列的商業(yè)化生產(chǎn)為例，除項(xiàng)目舉辦單位聯(lián)系有關(guān)科研單位進(jìn)行了前期的基本研究外，國(guó)內(nèi)只有北京、云南兩地蝴蝶蘭專業(yè)生產(chǎn)公司，但其生物技術(shù)的應(yīng)用仍是空白。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明利用生物技術(shù)，解決了現(xiàn)有名貴蘭花普遍共存的花色、花期、花形方面的缺陷，且實(shí)現(xiàn)蘭花的產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)。
本發(fā)明的技術(shù)方案如下一種蘭花的培育方法，它采用如下步驟1)、網(wǎng)絡(luò)引種；2)、通過生物學(xué)特性觀察和形態(tài)解剖學(xué)篩選出特有花種；3)、對(duì)原品種和芽變品種進(jìn)行分子遺傳標(biāo)記育種或者轉(zhuǎn)基因技術(shù)育種；A、分子遺傳標(biāo)記育種的步驟為取幼葉——細(xì)胞破碎——雙步CTAB提取 目標(biāo)基因——DNA重組——細(xì)胞融合——原生質(zhì)體培養(yǎng)——表型篩選B、轉(zhuǎn)基因技術(shù)育種的步驟為取幼葉——細(xì)胞破碎——核酸純化——核酸 ——導(dǎo)入感受細(xì)胞——原生質(zhì)體培養(yǎng)——表型選擇4)、種子苗生產(chǎn)；5)、組培苗生產(chǎn)；6)、成花生產(chǎn)。
采用如上技術(shù)方案，選擇適合氣候條件的花卉品種如蝴蝶蘭，卡特利亞蘭、文心蘭等，通過高新生物技術(shù)手段的運(yùn)用，逐步實(shí)現(xiàn)傳統(tǒng)大農(nóng)業(yè)的生物技術(shù)革命，真正實(shí)現(xiàn)農(nóng)業(yè)結(jié)構(gòu)的戰(zhàn)略性調(diào)整，促進(jìn)農(nóng)業(yè)結(jié)構(gòu)優(yōu)化、產(chǎn)業(yè)升級(jí)。
具體實(shí)施例方式
利用國(guó)際國(guó)內(nèi)間建立的良種交換網(wǎng)絡(luò)引種，根據(jù)分布情況，有目的地進(jìn)行引種，廣泛收集國(guó)內(nèi)外種質(zhì)資源；在建立專類收集中心的基礎(chǔ)上，對(duì)各引種材料播種、發(fā)芽、出苗、開花、結(jié)實(shí)進(jìn)行系統(tǒng)記載，了解各引種材料在本地的生產(chǎn)發(fā)育情況，同時(shí)對(duì)引種材料中分類上易混淆的種進(jìn)行形態(tài)解剖學(xué)研究，篩選出特有種隨機(jī)采種，分別直播，取幼葉進(jìn)行分子遺傳標(biāo)記育種或進(jìn)行轉(zhuǎn)基因技術(shù)育種。
A、分子遺傳標(biāo)記育種的步驟為取幼葉——細(xì)胞破碎——雙步CTAB提取 尋找目標(biāo)基因——DNA重組——細(xì)胞融合——原生質(zhì)體培養(yǎng)——表型篩選B、轉(zhuǎn)基因技術(shù)育種的步驟為取幼葉——細(xì)胞破碎——核酸純化——核酸 ——導(dǎo)入感受細(xì)胞——原生質(zhì)體培養(yǎng)——表型選擇細(xì)胞破碎用反復(fù)凍融法，并加入DFP、PMSF及碘乙酸，電泳緩沖液為0.5TBE，核酸純化在12000g室溫離心15秒，并加入鏈霉蛋白及蛋白酶K，濃縮采用乙醇沉淀法，DNA定量用紫外分光光度法，原生質(zhì)體培養(yǎng)采用淺層液體培養(yǎng)，用KM8P培養(yǎng)基。
種子苗生產(chǎn)采用雜交授粉，在植株授粉后，取出胚胎，在培養(yǎng)基內(nèi)接種后發(fā)芽。利用試管培育技術(shù)，短時(shí)間內(nèi)獲得大量雜交苗，經(jīng)過幾代純化，每株有些微差異。該工藝的優(yōu)點(diǎn)是一般品種授粉后，一個(gè)果莢含有約幾萬個(gè)種子，播種后可在短時(shí)間內(nèi)獲得大量小苗。
組培苗生產(chǎn)確定選育的系列優(yōu)良品種，采用莖尖和莖節(jié)外植體誘芽培養(yǎng)以及葉片愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)三種途徑。
成花生產(chǎn)對(duì)種子苗或組培苗進(jìn)行煉苗，然后上盆，再進(jìn)行分盆，經(jīng)催長(zhǎng)后即進(jìn)行成花期。小苗栽植采用無土栽培，苗在生長(zhǎng)過程中通過噴營(yíng)養(yǎng)液于葉片，供其生產(chǎn)所需養(yǎng)份，苗在培育過程中對(duì)光、溫、水進(jìn)行控制。
權(quán)利要求
1.一種蘭花的培育方法，它采用如下步驟1)、網(wǎng)絡(luò)引種；2)、通過生物學(xué)特性觀察和形態(tài)解剖學(xué)篩選出特有花種；3)、對(duì)原品種和芽變品種進(jìn)行分子遺傳標(biāo)記育種或者轉(zhuǎn)基因技術(shù)育種；A、分子遺傳標(biāo)記育種的步驟為取幼葉——細(xì)胞破碎——雙步CTAB —尋找目標(biāo)基因——DNA重組——細(xì)胞融合——原生質(zhì)體培養(yǎng)——表型篩選B、轉(zhuǎn)基因技術(shù)育種的步驟為取幼葉——細(xì)胞破碎——核酸純化—— 分子克隆——導(dǎo)入感受細(xì)胞——原生質(zhì)體培養(yǎng)——表型選擇4)、種子苗生產(chǎn)；5)、組培苗生產(chǎn)；6)、成花生產(chǎn)。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種采用生物基因技術(shù)產(chǎn)業(yè)化培育名貴蘭花的方法。它采用如下生產(chǎn)步驟1)、網(wǎng)絡(luò)引種；2)、通過生物學(xué)特性觀察和形態(tài)解剖學(xué)篩選出特有花種；3)、對(duì)原品種和芽變品種進(jìn)行分子遺傳標(biāo)記育種或者轉(zhuǎn)基因技術(shù)育種；4)、種子苗生產(chǎn)；5)、組培苗生產(chǎn)；6)、成花生產(chǎn)。本發(fā)明利用生物技術(shù)，解決了現(xiàn)有名貴蘭花普遍共存的花色、花期、花形方面的缺陷，且能實(shí)現(xiàn)蘭花的產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)。
文檔編號(hào)C12N15/05GK1414097SQ0113408
公開日2003年4月30日 申請(qǐng)日期2001年10月26日 優(yōu)先權(quán)日2001年10月26日
發(fā)明者蔡汝 申請(qǐng)人:蔡汝