專利名稱：人工培育無蟲體蟲草的新技術(shù)的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種人工培育無蟲體蟲草的新技術(shù)，屬于用雜交冬蟲夏草真菌感染大米固體培養(yǎng)基或瓊脂、葡萄糖半固體培養(yǎng)基進行人工培育生長蟲草的生物工程技術(shù)領(lǐng)域。
本發(fā)明解決其技術(shù)問題所采用的技術(shù)方案為(1)培育雜交冬蟲夏草真菌a.采集新鮮冬蟲夏草，分離得到優(yōu)良蟲草菌株，其菌號為蟲草擬青霉和蟲草頭孢霉；b.將蟲草擬青霉和蟲草頭孢霉兩個蟲草菌株進行篩選、訓(xùn)化、培養(yǎng)，使其改變生理性能；
c.將蟲草擬青霉和蟲草頭孢霉兩個蟲草菌株進行原生質(zhì)體融合即雜交；d.采用健康細胞繁殖法，將健康細胞導(dǎo)入循環(huán)育種過程中，剔劣留優(yōu)，培育出純壯的蟲草菌絲體備用；(2)將純壯的蟲草菌絲體接種感染大米固體培養(yǎng)基或瓊脂、葡萄糖半固體培養(yǎng)基上，并培育無蟲體蟲草。
蟲草的培育方法是模擬野生冬蟲夏草的生育條件，進行人工培育，在接種后的發(fā)菌期，室溫控制在20～28℃，室內(nèi)光線暗些，勤通風(fēng)換氣，發(fā)菌期為15～20天；當菌絲長滿培養(yǎng)基時，即改為在變溫條件下培養(yǎng)，白天室溫控制在26～28℃，夜間室溫控制在4～6℃，室內(nèi)光線為散射光，勤通風(fēng)保持空氣清新，培養(yǎng)5～7天即長出子座，10天后小草叢生，小草長半寸高時，其色澤由乳白色變?yōu)辄S褐色，開始散發(fā)孢子即成熟，從接種到蟲草成熟共40天即可采收。
所述的大米固體培養(yǎng)基各組分的重量份數(shù)比為大米1000，蠶蛹粉≥2；大米固體培養(yǎng)基的制作方法為將大米煮熟，瀝凈水份，拌入蠶蛹粉，然后分裝在容器內(nèi)，容器內(nèi)培養(yǎng)基的厚度為3～4厘米，用聚丙烯塑料布將容器口封住，進行消毒。
所述的瓊脂、葡萄糖半固體培養(yǎng)基各組分的重量份數(shù)比為瓊脂20，蠶蛹粉2，葡萄糖30，蛋白胨3，酵母浸膏1，磷酸二氫鉀1，硫酸鎂0.5，生長素1，無菌水1000；PH值自然；瓊脂、葡萄糖半固體培養(yǎng)基的制作方法同常規(guī)制菌法中的制作方法。
本發(fā)明的有益效果如下(1)擺脫了蟲源，便于在蟲源較少的地區(qū)推廣應(yīng)用。
(2)生長周期短，從接種發(fā)菌到蟲草成熟，共培育40天即可采收。(3)培育工藝簡單、成本較低，效益高。
二、配制大米固體培養(yǎng)基及瓊脂、葡萄糖半固體培養(yǎng)基按下列配比稱取大米固體培養(yǎng)基各組分大米1000g，蠶蛹粉2g或3g；大米固體培養(yǎng)基的制作方法為將大米煮熟，瀝凈水份，拌入蠶蛹粉，然后分裝在容器內(nèi)，容器內(nèi)培養(yǎng)基的厚度為3～4厘米，用聚丙烯塑料布將容器口封住，進行消毒。
按下列配比稱取瓊脂、葡萄糖半固體培養(yǎng)基各組分瓊脂20g，蠶蛹粉2g，葡萄糖30g，蛋白胨3g，酵母浸膏1g，磷酸二氫鉀1g，硫酸鎂0.5g，生長素1g，無菌水1000ml；PH值自然；瓊脂、葡萄糖半固體培養(yǎng)基的制作方法同常規(guī)制菌法中的制作方法。
三、將純壯的蟲草菌絲體接種感染大米固體培養(yǎng)基或瓊脂、葡萄糖半固體培養(yǎng)基上，并培育無蟲體蟲草。
蟲草的培育方法是模擬野生冬蟲夏草的生育條件，進行人工培育，在接種后的發(fā)菌期，室溫控制在20～28℃，室內(nèi)光線暗些，勤通風(fēng)換氣，發(fā)菌期為15～20天；當菌絲長滿培養(yǎng)基時，即改為在變溫條件下培養(yǎng)，白天室溫控制在26～28℃，夜間室溫控制在4～6℃，室內(nèi)光線為散射光，勤通風(fēng)保持空氣清新，培養(yǎng)5～7天即長出子座，10天后小草叢生，小草長半寸高時，其色澤由乳白色變?yōu)辄S褐色，開始散發(fā)孢子即成熟，從接種到蟲草成熟共40天即可采收。
利用本發(fā)明培育出的無蟲體蟲草經(jīng)國家食品質(zhì)量監(jiān)督檢驗中心檢測，檢測結(jié)果表明其營養(yǎng)成份與野生冬蟲夏草基本相同，有些營養(yǎng)成份還高于野生冬蟲夏草的含量，例如維生素E高于野生冬蟲夏草的10倍，蟲草素高于野生冬蟲夏草的60倍。這給生產(chǎn)蟲草藥品及蟲草保健品的廠家提供了豐富的蟲草原料來源，從而緩解了蟲草市場貨源奇缺的矛盾。
權(quán)利要求
1.一種人工培育無蟲體蟲草的新技術(shù)，其特征在于(1)培育雜交冬蟲夏草真菌a.采集新鮮冬蟲夏草，分離得到優(yōu)良蟲草菌株，其菌號為蟲草擬青霉和蟲草頭孢霉；b.將蟲草擬青霉和蟲草頭孢霉兩個蟲草菌株進行篩選、訓(xùn)化、培養(yǎng)，使其改變生理性能；c.將蟲草擬青霉和蟲草頭孢霉兩個蟲草菌株進行原生質(zhì)體融合即雜交；d.采用健康細胞繁殖法，將健康細胞導(dǎo)入循環(huán)育種過程中，剔劣留優(yōu)，培育出純壯的蟲草菌絲體備用；(2)將純壯的蟲草菌絲體接種感染大米固體培養(yǎng)基或瓊脂、葡萄糖半固體培養(yǎng)基上，并培育無蟲體蟲草蟲草的培育方法是模擬野生冬蟲夏草的生育條件，進行人工培育，在接種后的發(fā)菌期，室溫控制在20～28℃，室內(nèi)光線暗些，勤通風(fēng)換氣，發(fā)菌期為15～20天；當菌絲長滿培養(yǎng)基時，即改為在變溫條件下培養(yǎng)，白天室溫控制在26～28℃，夜間室溫控制在4～6℃，室內(nèi)光線為散射光，勤通風(fēng)保持空氣清新，培養(yǎng)5～7天即長出子座，10天后小草叢生，小草長半寸高時，其色澤由乳白色變?yōu)辄S褐色，開始散發(fā)孢子即成熟，從接種到蟲草成熟共40天即可采收。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的人工培育無蟲體蟲草的新技術(shù)，其特征在于大米固體培養(yǎng)基各組分的重量份數(shù)比為大米1000，蠶蛹粉≥2；大米固體培養(yǎng)基的制作方法為將大米煮熟，瀝凈水份，拌入蠶蛹粉，然后分裝在容器內(nèi)，容器內(nèi)培養(yǎng)基的厚度為3～4厘米，用聚丙烯塑料布將容器口封住，進行消毒。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的人工培育無蟲體蟲草的新技術(shù)，其特征在于瓊脂、葡萄糖半固體培養(yǎng)基各組分的重量份數(shù)比為瓊脂20，蠶蛹粉2，葡萄糖30，蛋白胨3，酵母浸膏1，磷酸二氫鉀1，硫酸鎂0.5，生長素1，無菌水.1000；PH值自然；瓊脂、葡萄糖半固體培養(yǎng)基的制作方法同常規(guī)制菌法中的制作方法。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種人工培育無蟲體蟲草的新技術(shù)。其技術(shù)要點是用雜交冬蟲夏草真菌感染大米固體培養(yǎng)基或瓊脂、葡萄糖半固體培養(yǎng)基，模擬野生冬蟲夏草的生育條件，進行人工培育，在發(fā)菌期控制室溫在20～28℃，當菌絲長滿培養(yǎng)基時在變溫條件下培養(yǎng)，白天控制室溫在26～28℃，夜間控制室溫在4～6℃，培養(yǎng)5～7天即長出子座，10天后小草叢生，小草半寸高時，其色澤由乳白色變?yōu)辄S褐色，開始散發(fā)孢子即成熟。本發(fā)明的有益效果為(1)擺脫了蟲源，便于在蟲源較少的地區(qū)推廣應(yīng)用。(2)生長周期短，從接種發(fā)菌到蟲草成熟，共培育40天即可采收。(3)培育工藝簡單、成本較低，效益高。
文檔編號C12N1/14GK1445359SQ0210416
公開日2003年10月1日 申請日期2002年3月14日 優(yōu)先權(quán)日2002年3月14日
發(fā)明者李健 申請人:李健