專(zhuān)利名稱(chēng)：小球藻生長(zhǎng)因子(小球藻精、cgf)提取方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種營(yíng)養(yǎng)保健品原料的提取方法，尤其是小球藻生長(zhǎng)因子(又稱(chēng)小球藻精，英文Chlorella Growth Factor，簡(jiǎn)稱(chēng)CGF)的提取方法，屬于高科技生物技術(shù)領(lǐng)域。
國(guó)際市場(chǎng)上，小球藻生長(zhǎng)因子的年需要量為(CGF)200-300噸，但目前CGF的產(chǎn)量只能滿足40-50％市場(chǎng)需要。國(guó)內(nèi)許多食品、乳酸制品、啤酒廠家擬利用小球藻生長(zhǎng)因子開(kāi)發(fā)功能食品、保健品、藥物前體、綠色酸奶、綠色啤酒等，因此大量需要CGF，其市場(chǎng)潛力巨大。
然而，目前只有少數(shù)發(fā)達(dá)國(guó)家掌握小球藻生長(zhǎng)因子(小球藻精，CGF)提取技術(shù)，國(guó)內(nèi)尚屬空白。據(jù)申請(qǐng)人了解，國(guó)外主要采用水提或堿性溶液提取的方法，提取過(guò)程中破壞了部分功能成分，導(dǎo)致功能成分活性差，并且存在產(chǎn)出率低、成本高、殘?jiān)鳛閺U物不能有效利用等問(wèn)題。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于針對(duì)目前小球藻生長(zhǎng)因子(小球藻精，CGF)提取方法存在的問(wèn)題，給出一種可以避免活性成分被破壞、并且產(chǎn)出率高、成本經(jīng)濟(jì)、殘?jiān)寐矢叩男∏蛟迳L(zhǎng)因子(小球藻精)提取方法。
為了達(dá)到以上目的，本發(fā)明的小球藻生長(zhǎng)因子(小球藻精)采用多種酶聯(lián)合提取，該提取方法包括以下步驟A. 溫浴——將小球藻粉或小球藻泥放入50℃～70℃的溫水中浸泡，使小球藻細(xì)胞壁擴(kuò)張、軟化；B 破壁——在溫浴后的小球藻漿中加入果膠酶，溫度控制在30℃～50℃，使小球藻細(xì)胞壁發(fā)生水解反應(yīng)，形成破壁藻泥；C. 酶解——在破壁后的小球藻漿中加入核酸酶和蛋白酶，溫度控制在30℃～70℃，使其水解為小球藻精的混合物；C.′分離——用離心設(shè)備將水解混合物離心分離得到小球藻生長(zhǎng)因子(小球藻精)的液體；D. 殘?jiān)谩獙⒎蛛x殘?jiān)鼑婌F干燥，加工成食品級(jí)破壁藻粉。
此后，以分離提取的小球藻生長(zhǎng)因子(小球藻精)液體為主要原料，可以制成多種營(yíng)養(yǎng)保健品。E.制成——在分離提取后的小球藻精液中加蜜制成口服液，或干燥后制成小球藻精干粉，再輻照后制成膠囊或片劑。
由于本發(fā)明采用加酶水解的方法提取小球藻精，溫度要求低、溶液中性，因此避免了國(guó)外水提或堿性溶液提取時(shí)溫度高、強(qiáng)堿性對(duì)活性成分有破壞的缺陷。此外，由于本方法提取工藝中首先對(duì)小球藻進(jìn)行破壁，并且充分水解了細(xì)胞內(nèi)容物的氨基酸、核苷酸等，所以產(chǎn)出率、成本經(jīng)濟(jì)、殘?jiān)寐矢摺?br> 與現(xiàn)有的水提或堿性溶液提取方法相比，本發(fā)明顯然有所突破，更為科學(xué)合理，不僅填補(bǔ)了國(guó)內(nèi)空白，而且走出了自己的路，可以形成自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)。
以上步驟中的溫度控制在40℃～50℃，將獲得更佳的破壁和酶解效果。實(shí)驗(yàn)表明，本實(shí)施例的方法從根本上解決了現(xiàn)有CGF提取過(guò)程中存在的問(wèn)題，避免了活性成分的破壞，生理活性比國(guó)外高50％；國(guó)外產(chǎn)出率為4-5％，而本實(shí)施例的產(chǎn)出率超過(guò)10％；國(guó)外的殘?jiān)粧仐?，而本方法中殘?jiān)寐蔬_(dá)95％，其銷(xiāo)售價(jià)格甚至比原材料藻粉還高；經(jīng)濟(jì)效益將比國(guó)外高40-50％，比直接出口藻粉高1倍以上。
制在40℃～50℃，使其水解為小球藻精的混合物；C.′分離——用離心設(shè)備將水解混合物離心分離得到小球藻生長(zhǎng)因子(小球藻精)的液體；D.殘?jiān)谩獙⒎蛛x殘?jiān)鼑婌F干燥，加工成食品級(jí)破壁藻粉；E.制成——將分離提取后的小球藻精液干燥后制成小球藻精干粉，再輻照后制成膠囊或片劑。
以上步驟B中在加入果膠酶的同時(shí)還加入纖維素酶，可以使破壁的水解反應(yīng)更順利。本實(shí)施例的小球藻生長(zhǎng)因子(小球藻精)提取方法的衛(wèi)生學(xué)指標(biāo)經(jīng)江蘇省衛(wèi)生防疫站分析測(cè)定，結(jié)果為小球藻生長(zhǎng)因子(小球藻精)的微生物，重金屬鉛、砷、汞的含量都比國(guó)家保健食品標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的含量還低；在促進(jìn)生長(zhǎng)發(fā)育方面，喂養(yǎng)CGF的老鼠比對(duì)照體重、身長(zhǎng)分別高20％、21％；免疫調(diào)節(jié)功能效果試驗(yàn)表明，喂養(yǎng)CGF的老鼠比對(duì)照增強(qiáng)30％；毒理試驗(yàn)(小鼠急性神經(jīng)毒性、AMES試驗(yàn)、小鼠微核、染色體畸變分析等試驗(yàn))完全符合國(guó)家保健食品指標(biāo)。
權(quán)利要求
1.一種小球藻生長(zhǎng)因子(小球藻精)提取方法，其特征在于包括以下步驟A. 溫浴——將小球藻粉或小球藻泥放入50℃～70℃的溫水中浸泡，使小球藻細(xì)胞壁擴(kuò)張、軟化；B、 破壁——在溫浴后的小球藻漿中加入果膠酶，溫度控制在30℃～50℃，使小球藻細(xì)胞壁發(fā)生水解反應(yīng)，形成破壁藻泥；C. 酶解——在破壁后的小球藻漿中加入核酸酶和蛋白酶，溫度控制在30℃～70℃，使其水解為小球藻精的混合物；C.′分離——用離心設(shè)備將水解混合物離心分離得到小球藻生長(zhǎng)因子(小球藻精)的液體。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述小球藻生長(zhǎng)因子(小球藻精)提取方法，其特征在于在步驟C之后還包括步驟D.殘?jiān)谩獙⒎蛛x殘?jiān)鼑婌F干燥，加工成食品級(jí)破壁藻粉。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述小球藻生長(zhǎng)因子(小球藻精)提取方法，其特征在于在步驟D之后還包括步驟E.制成——在分離提取后的小球藻精液中加蜜制成口服液。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述小球藻生長(zhǎng)因子(小球藻精)提取方法，其特征在于在步驟D之后還包括步驟E.制成——將分離提取后的小球藻精液干燥后制成小球藻精干粉，再輻照后制成膠囊或片劑。
5.根據(jù)權(quán)利要求3或4所述小球藻生長(zhǎng)因子(小球藻精)提取方法，其特征在于破壁和酶解時(shí)的溫度均控制在在40℃～50℃。
6.根據(jù)權(quán)利要求4所述小球藻生長(zhǎng)因子(小球藻精)提取方法，其特征在于在破壁步驟中還加入纖維素酶。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種小球藻生長(zhǎng)因子(小球藻精)提取方法,屬于生物技術(shù)領(lǐng)域。包括溫浴、破壁、酶解、分離、殘?jiān)玫炔襟E。由于本發(fā)明采用加酶水解的方法提取小球藻精,溫度要求低、溶液中性,因此避免了國(guó)外水提或堿性溶液提取時(shí)溫度高、強(qiáng)堿性對(duì)活性成分有破壞的缺陷。此外,由于本方法提取工藝中首先對(duì)小球藻進(jìn)行破壁,并且充分水解了細(xì)胞內(nèi)容物的氨基酸、核苷酸等,所以產(chǎn)出率、成本經(jīng)濟(jì)、殘?jiān)寐矢摺?br> 文檔編號(hào)C12P21/02GK1367257SQ0211265
公開(kāi)日2002年9月4日 申請(qǐng)日期2002年2月8日 優(yōu)先權(quán)日2002年2月8日
發(fā)明者韓士群 申請(qǐng)人:江蘇省農(nóng)業(yè)科學(xué)院土壤肥料研究所