專(zhuān)利名稱(chēng)：蒺藜螺甾皂苷類(lèi)化合物用于制備抗真菌藥物的用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，是蒺藜螺甾皂苷類(lèi)化合物用于制備抗真菌藥物的用途。
17種螺甾皂苷的名稱(chēng)及其R1、R2、R3基團(tuán)見(jiàn)表1。據(jù)報(bào)道，其中的TTS-8、TT-16、TTS-17具有抗真菌活性(Bedir，A.Khan，et al.Biologically Active Steroidal Glycosides fromTriblus terrestris.Pharmazie 2002；57(7)491～493)，但未見(jiàn)系統(tǒng)的藥理實(shí)驗(yàn)報(bào)道，也未見(jiàn)其他14種化合物有抗真菌活性的報(bào)道。表1.17種螺甾皂苷類(lèi)化合物及其化學(xué)結(jié)構(gòu)通式中的R基團(tuán)

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明對(duì)上述17種化合物作了抗真菌活性檢測(cè)，所用的真菌包括白色念株菌(Candidaalbicans)、新生隱球菌(Cryptococcus neoformans)、熱帶念球菌(Candida tropicalis)和近平滑念珠菌(Candida parapsilosis)，采用的檢測(cè)方法為微量液基稀釋法(美國(guó)國(guó)家臨床試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)NCCLS推薦方法)，其MIC80值(真菌生長(zhǎng)80％被抑制時(shí)的藥物濃度)作為評(píng)價(jià)化合物體外抗真菌活性的標(biāo)準(zhǔn)，MIC80為0～32μg/ml時(shí)，表示該化合物的抗真菌活性強(qiáng)，MIC80為33～64μg/ml時(shí)，表示該化合物的抗真菌活性較強(qiáng)，MIC80為64～128μg/ml時(shí)，表示該化合物的抗真菌活性中等，MIC80為128～256μg/ml時(shí)，表示該化合物的抗真菌活性弱，若MIC80大于256μg/ml時(shí)，則抗真菌活性可以忽略。本發(fā)明17種化合物檢測(cè)結(jié)果MIC80的范圍在1.0～256μg/mL之間，說(shuō)明它們都有抗真菌活性，特別是TTS-12和TTS-15抗真菌活性很強(qiáng)，TTS-12用白色念株菌和新生隱球菌作檢測(cè)試驗(yàn)，結(jié)果MIC80值分別為1.0μg/ml和2.0μg/ml，TTS-15用白色念株菌、新生隱球菌、熱帶念球菌和近平滑念株菌作檢測(cè)試驗(yàn)，MIC80值分別為4.0μg/ml，2.0μg/ml，16.0μg/ml，8.0μg/ml。因此，本發(fā)明化合物可用于制備抗真菌藥物。也可用于制備食品、果品保鮮劑或衛(wèi)生用品。
(2).藥液制備受試藥物分別用DMSO配成6.4mg/ml溶液，-20℃保存，實(shí)驗(yàn)前，將6.4mg/ml藥物貯存液取出置35℃溫箱融化，各取10μl用RPMI 1640培養(yǎng)液稀釋10倍，充分混勻，使成640μg/ml，備用。
(3).藥敏板制備取無(wú)菌96孔板，于每排1號(hào)孔加RPMI 1640 100μl作空白對(duì)照；3～12號(hào)孔各加新鮮配制的菌液100μl；2號(hào)孔分別加菌液180μl和受試化合物溶液20μl。2～11號(hào)孔10級(jí)倍比稀釋?zhuān)垢骺椎淖罱K藥物濃度分別為64、32、16、8、4、2、1、0.5、0.25、和0.125μg/ml，各孔中DMSO含量均低于1％；12號(hào)孔不含藥物，作陽(yáng)性對(duì)照。各藥敏板于35℃培養(yǎng)。
(4).MIC80值判定白色念株菌、新生隱球菌、熱帶念球菌和近平滑念珠菌分別于35℃培養(yǎng)24小時(shí)、72小時(shí)和一周后，用酶標(biāo)分析儀于620nm測(cè)各孔OD值。與陽(yáng)性對(duì)照孔比，以O(shè)D值下降80％以上的最低濃度孔中的藥物濃度為MIC80(真菌生長(zhǎng)80％被抑制時(shí)的藥物濃度)。
權(quán)利要求
1.蒺藜螺甾皂苷類(lèi)化合物，化學(xué)結(jié)構(gòu)通式為 其中R1表示O或2H；R2表示H或OH；R3表示由β-D-葡萄糖(β-D-glc)、β-D-半乳糖(β-D-gal)、β-D-木糖(β-D-xyl)或α-L-鼠李糖(α-L-rha)以不同數(shù)量和方式組合構(gòu)成的寡糖，該化合物用于制備抗真菌藥物的用途。
2.按權(quán)利要求1所述的蒺藜螺甾皂苷類(lèi)化合物，它們是海柯皂苷元-3-β-D-吡喃葡萄糖(1→4)-β-D-吡喃半乳糖苷、?？略碥赵?3-β-D-吡喃葡萄糖(1→2)β-D-吡喃葡萄糖(1→4)-β-D-吡喃半乳糖苷、?？略碥赵?O-3-β-D-吡喃木糖(1→3)-β-D-吡喃葡萄糖(1→4)-β-D-吡喃半乳糖苷、?？略碥赵?O-3-β-D-吡喃半乳糖(1→2)-β-D-吡喃葡萄糖(1→4)-β-D-吡喃半乳糖苷、?？略碥赵?O-3-β-D-吡喃半乳糖(1→2)-[β-D-吡喃木糖(1→3)]-β-D-吡喃葡萄糖(1→4)-β-D-吡喃半乳糖苷、替告皂苷元-O-3-β-D-吡喃葡萄糖(1→4)-β-D-吡喃半乳糖苷、替告皂苷元-O-3-β-D-吡喃鼠李糖(1→2)-[β-D-吡喃葡萄糖(1→4)]-β-D-吡喃半乳糖苷、吉托皂苷元-O-3-β-D-吡喃半乳糖(1→2)-β-D-吡喃葡萄糖(1→4)-β-D-吡喃半乳糖苷、替告皂苷元-O-3-β-D-吡喃半乳糖(1→2)-[β-D-吡喃木糖(1→3)]-β-D-吡喃葡萄糖(1→4)-β-D-吡喃半乳糖苷、替告皂苷元-O-3-β-D-吡喃半乳糖(1→2)-β-D-吡喃葡萄糖(1→4)-β-D-吡喃半乳糖苷、替告皂苷元-O-3-β-D-吡喃木糖(1→2)-[β-D-吡喃木糖(1→3)]-β-D-吡喃葡萄糖(1→4)-[α-L-吡喃鼠李糖(1→2)]-β-D-吡喃半乳糖苷、吉托皂苷元-O-3-β-D-吡喃半乳糖(1→2)-[β-D-吡喃木糖(1→3)]-β-D-吡喃葡萄糖(1→4)-β-D-吡喃半乳糖苷、吉托皂苷元-O-3-β-D-吡喃半乳糖(1→2)-[β-D-吡喃木糖(1→3)]-β-D-吡喃葡萄糖(1→4)-β-D-吡喃半乳糖苷、替告皂苷元-O-3-β-D-吡喃葡萄糖(1→2)-[β-D-吡喃木糖(1→3)]-β-D-吡喃葡萄糖(1→4)-β-D-吡喃半乳糖苷。
3.權(quán)利要求1或2所述蒺藜螺甾皂苷類(lèi)化合物用于制備食品、果品保鮮劑或衛(wèi)生用品的用途。
全文摘要
本發(fā)明涉及醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，是蒺藜螺甾皂苷類(lèi)化合物用于制備抗真菌藥物的用途。中藥蒺藜的粗提物在臨床上主要用于治療心血管疾病，目前已報(bào)道過(guò)17種蒺藜螺甾皂苷成分，它們的化學(xué)結(jié)構(gòu)通式為右式,其中R
文檔編號(hào)A23L1/30GK1428349SQ0215123
公開(kāi)日2003年7月9日 申請(qǐng)日期2002年12月12日 優(yōu)先權(quán)日2002年12月12日
發(fā)明者陳海生, 徐一新, 姜遠(yuǎn)英, 溫海, 曹永兵, 劉文庸, 張軍東 申請(qǐng)人:中國(guó)人民解放軍第二軍醫(yī)大學(xué)