專(zhuān)利名稱(chēng)：光合細(xì)菌的純化和穩(wěn)定工藝的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種工藝，特別是一種光合細(xì)菌的純化和穩(wěn)定工藝。產(chǎn)品為主要用于改良養(yǎng)殖水環(huán)境和景觀水環(huán)境的微生物制劑(液體)。
背景技術(shù)：
光合細(xì)菌(PSB，Photosynthetic Bacteria)是一類(lèi)細(xì)菌的總稱(chēng)，共有23屬、80余種，分屬于4科紅螺菌科(Rhodospirillaceae)、著色菌科(Chromatiaceae)、綠桿菌科(Chlorobiaceae)和綠絲菌科(Chloroflexaceae)。其中，著色菌科和綠桿菌科的細(xì)菌為光能自養(yǎng)營(yíng)養(yǎng)型，培養(yǎng)基中需要二氧化碳(作為碳源)和硫化氫(作為光合作用的供氫體)；紅螺菌科的細(xì)菌為光能異養(yǎng)營(yíng)養(yǎng)型，培養(yǎng)基中需要低分子有機(jī)物(作為碳源和供氫體)；綠絲菌科的細(xì)菌為兼性營(yíng)養(yǎng)型，二氧化碳和有機(jī)物都可以作為它的碳源。在自然的水環(huán)境條件中，光合細(xì)菌與生態(tài)系統(tǒng)的物質(zhì)循環(huán)(碳、氮、硫、磷等)有密切關(guān)系，在水環(huán)境自?xún)簟⑺|(zhì)改良過(guò)程中起重要作用。另外，常作為魚(yú)、蝦、貝、浮游動(dòng)物的餌料，或飼料添加劑。當(dāng)前，被廣泛應(yīng)用的是紅螺菌科的一些種類(lèi)，特別是紅假單胞屬的種類(lèi)。在影響光合細(xì)菌產(chǎn)品質(zhì)量的因素中，紅螺菌的純度是一個(gè)關(guān)鍵性的指標(biāo)；因?yàn)樗粌H關(guān)系到產(chǎn)品的功效，還關(guān)系到產(chǎn)品的保存期長(zhǎng)短。由于紅螺菌的純度不夠(現(xiàn)有產(chǎn)品的純度一般低于70％)，導(dǎo)致產(chǎn)品短時(shí)間后“發(fā)黑、發(fā)臭”，所以高純度的紅螺菌是保證產(chǎn)品質(zhì)量的關(guān)鍵。很多人認(rèn)為，紅螺菌的純度高低取決于綠藻的數(shù)量，所以采用濾光措施，仍然難以解決問(wèn)題。我們的研究結(jié)果認(rèn)為，紅螺菌的純度高低主要取決于產(chǎn)品中綠絲菌的數(shù)量，而不是綠藻數(shù)量。但是，現(xiàn)有的培養(yǎng)工藝難以排除紅螺菌和綠絲菌的共同生長(zhǎng)，因?yàn)檫@兩種類(lèi)型的細(xì)菌利用同樣的培養(yǎng)基。我們進(jìn)一步的研究有2個(gè)重要發(fā)現(xiàn)第一，雖然紅螺菌和綠絲菌都具有運(yùn)動(dòng)能力，但是紅螺菌是依靠鞭毛游動(dòng)的方式運(yùn)動(dòng)，綠絲菌采用滑走和痙攣方式運(yùn)動(dòng)；第二，綠絲菌在強(qiáng)光照(＞6000lux)、高水溫(＞35℃)的環(huán)境中優(yōu)勢(shì)生長(zhǎng)。針對(duì)上述不同的生態(tài)特點(diǎn)，我們?cè)诔Ｒ?guī)的光合細(xì)菌生產(chǎn)工藝后增加一個(gè)純化和穩(wěn)定工藝，采取相應(yīng)的措施使培養(yǎng)液中的綠絲菌富集到固體材料上，很好的解決了紅螺菌的純度低的生產(chǎn)難題，提高了光合細(xì)菌產(chǎn)品的質(zhì)量水平。
發(fā)明目的本發(fā)明的目的在于提供一種可大大減少培養(yǎng)液中的綠絲菌，提高紅螺菌的純度和濃度，從而提高了光合細(xì)菌產(chǎn)品質(zhì)量水平的光合細(xì)菌的純化和穩(wěn)定工藝。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的可以通過(guò)以下措施來(lái)達(dá)到一種光合細(xì)菌的純化和穩(wěn)定工藝，其特征在于包括以下步驟(a)建立一個(gè)可以控制光照強(qiáng)度和氣溫的光合細(xì)菌純化和穩(wěn)定車(chē)間；(b)安裝光合細(xì)菌純化和穩(wěn)定容器，容器內(nèi)布置有一定數(shù)量的PVC塑料片；(c)采用已有的方法和工藝培養(yǎng)光合細(xì)菌，當(dāng)培養(yǎng)液的光密度OD660達(dá)到1.0～1.2時(shí)，把培養(yǎng)液泵到純化和穩(wěn)定池；(d)純化和穩(wěn)定車(chē)間的氣溫保持在25～30℃，光照強(qiáng)度2000～3000lux；(e)2～3天后，檢測(cè)指標(biāo)，當(dāng)光密度OD660大于2.0，pH值在7.0～7.5間時(shí)，檢測(cè)活菌含量，計(jì)算紅螺菌純度；(f)當(dāng)紅螺菌數(shù)量達(dá)到109CFU/ml、純度達(dá)到95％，培養(yǎng)液可以作為成品包裝保存。
本發(fā)明的目的還可以通過(guò)以下措施來(lái)達(dá)到光合細(xì)菌純化和穩(wěn)定車(chē)間面積不低于50m2、高度為2.5～3m。光合細(xì)菌純化和穩(wěn)定容器為正方體形狀的水泥池，規(guī)格為長(zhǎng)2m×寬2m×高0.6m，水泥池中布置的PVC塑料片的間距為15～20cm，PVC塑料片接觸池底，并垂直于池底。PVC塑料片為長(zhǎng)方形，長(zhǎng)2m、寬0.4m、厚度為2～5mm。
本發(fā)明相比現(xiàn)有技術(shù)具有如下優(yōu)點(diǎn)增加了一個(gè)純化和穩(wěn)定工藝，并在純化和穩(wěn)定容器中布置有PVC塑料片，把培養(yǎng)液進(jìn)入純化和穩(wěn)定容器中，通過(guò)控制光照和氣溫，使紅螺菌繼續(xù)生長(zhǎng)，而綠絲菌被富集到PVC塑料片上，大大減少了培養(yǎng)液中的綠絲菌，提高了紅螺菌的純度和濃度，從而提高光合細(xì)菌的質(zhì)量水平，獲得活高純度(＞95％)、高濃度(OD660＞2.0)的光合細(xì)菌產(chǎn)品，延長(zhǎng)了產(chǎn)品的保存時(shí)間，達(dá)到120天。
具體實(shí)施例方式
本發(fā)明下面將結(jié)合實(shí)施例作進(jìn)一步詳述本發(fā)明的具體操作工藝如下(1)建筑光合細(xì)菌純化和穩(wěn)定車(chē)間。車(chē)間面積一般不低于50m2、高度在2.5～3m，可以調(diào)控室內(nèi)氣溫與光照強(qiáng)度。
(2)構(gòu)建多個(gè)光合細(xì)菌純化和穩(wěn)定容器。容器為正方體形狀的水泥池，規(guī)格為2×2×0.6m(長(zhǎng)×寬×高)。水泥池中布置PVC塑料片，塑料片間的相間距離為15～20cm，塑料片接觸池底、垂直于池底。PVC塑料片為2×0.4m(長(zhǎng)×寬)的長(zhǎng)方形，厚度為2～5mm。
(3)采用已有的方法和工藝培養(yǎng)光合細(xì)菌。當(dāng)培養(yǎng)液的光密度(OD660)達(dá)到1.0～1.2時(shí)，把培養(yǎng)液泵到純化和穩(wěn)定池。
(4)純化和穩(wěn)定車(chē)間的氣溫保持在25～30℃左右，光照強(qiáng)度在2000～3000lux。
(5)大約2-3天后，檢測(cè)指標(biāo)。當(dāng)光密度(OD660)大于2.0、pH在7.0～7.5間時(shí)，檢測(cè)活菌含量，計(jì)算紅螺菌純度。
(6)如果紅螺菌數(shù)量達(dá)到109CFU/ml、純度達(dá)到95％，培養(yǎng)液可以作為成品包裝保存。
權(quán)利要求
1.一種光合細(xì)菌的純化和穩(wěn)定工藝，其特征在于包括以下步驟(a)建立一個(gè)可以控制光照強(qiáng)度和氣溫的光合細(xì)菌純化和穩(wěn)定車(chē)間；(b)安裝光合細(xì)菌純化和穩(wěn)定容器，容器內(nèi)布置有一定數(shù)量的PVC塑料片；(c)采用已有的方法和工藝培養(yǎng)光合細(xì)菌，當(dāng)培養(yǎng)液的光密度OD660達(dá)到1.0～1.2時(shí)，把培養(yǎng)液泵到純化和穩(wěn)定池；(d)純化和穩(wěn)定車(chē)間的氣溫保持在25～30℃，光照強(qiáng)度2000～3000lux；(e)2～3天后，檢測(cè)指標(biāo)，當(dāng)光密度OD660大天2.0，pH值在7.0～7.5間時(shí)，檢測(cè)活菌含量，計(jì)算紅螺菌純度；(f)當(dāng)紅螺菌數(shù)量達(dá)到109CFU/ml、純度達(dá)到95％，培養(yǎng)液可以作為成品包裝保存。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的工藝，其特征在于光合細(xì)菌純化和穩(wěn)定車(chē)間面積不低于50m2、高度為2.5～3m。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的工藝，其特征在于光合細(xì)菌純化和穩(wěn)定容器為正方體形狀的水泥池，規(guī)格為長(zhǎng)2m×寬2m×高0.6m，水泥池中布置的PVC塑料片的間距為15～20cm，PVC塑料片接觸池底，并垂直于池底。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的工藝，其特征在于PVC塑料片為長(zhǎng)方形，長(zhǎng)2m、寬0.4m、厚度為2～5mm。
全文摘要
一種光合細(xì)菌的純化和穩(wěn)定工藝，其特征在于包括以下步驟建立一個(gè)可以控制光照強(qiáng)度和氣溫的光合細(xì)菌純化和穩(wěn)定車(chē)間；安裝光合細(xì)菌純化和穩(wěn)定容器，容器內(nèi)布置有一定數(shù)量的PVC塑料片；采用已有的方法和工藝培養(yǎng)光合細(xì)菌，當(dāng)培養(yǎng)液的光密度OD
文檔編號(hào)C12M1/00GK1546649SQ20031011248
公開(kāi)日2004年11月17日 申請(qǐng)日期2003年12月8日 優(yōu)先權(quán)日2003年12月8日
發(fā)明者劉飛, 韓舞鷹, 劉 飛 申請(qǐng)人:劉飛, 劉 飛