專利名稱：一種能提高免疫功能獸藥的生產(chǎn)工藝的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種獸藥，特別是一種關(guān)于能提高免疫功能獸藥的生產(chǎn)工藝。
背景技術(shù)：
隨著我國畜牧養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展，畜禽傳染病已成為困擾畜牧業(yè)的一大難題。因此生產(chǎn)和制備治療畜禽傳染病的獸藥就顯得尤為重要，而生產(chǎn)和制備獸藥的生產(chǎn)工藝就成為必不可少的重要環(huán)節(jié)，目前，市場上已有不少獸藥，但一般通常是公知的抗菌素和抗病毒類的藥，此類獸藥只能“頭疼醫(yī)頭，腳疼醫(yī)腳”通常不能解決畜禽免疫力低下導(dǎo)致的畜禽疾病復(fù)雜多變性。因此，尋找和制備具有提高免疫功能的獸藥及生產(chǎn)工藝十分必要。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種能提高免疫功能獸藥的生產(chǎn)工藝，它不僅治愈率高還能提高免疫功能，它采用特殊的生產(chǎn)工藝，產(chǎn)量高，發(fā)酵周期大大縮短。
本發(fā)明的技術(shù)方案是提供一種能提高免疫功能獸藥的生產(chǎn)工藝，其特征是優(yōu)選α-溶血性鏈球菌33#菌種作為生產(chǎn)菌種，經(jīng)一級發(fā)酵和二級發(fā)酵，生產(chǎn)甘露聚糖肽發(fā)酵液，將發(fā)酵后的甘露聚糖肽發(fā)酵液用濃縮器進(jìn)行濃縮，使?jié)饪s液體積與發(fā)酵液體積比控制在1∶15-30，控制pH 7.0-7.4制成甘露聚糖肽發(fā)酵濃縮液；濃縮液按珍珠巖1-2.0％及活性炭2-4.0％加入進(jìn)行精制提純，攪拌10-20分鐘，過濾后再抽濾提純，制成甘露聚糖肽發(fā)酵精制液；加香精、矯味劑溶解配制，攪拌均勻后再過濾，配制成含量是每1000ml含α-甘露聚糖肽500-5000mg、pH 4.0-6.0的配制液，灌裝封口，熱壓滅菌105-121℃，20-30分鐘，經(jīng)燈檢合格后包裝入庫，最終生產(chǎn)出太空誘變菌種生產(chǎn)的α-甘露聚糖肽。
所述的菌種是α-溶血性鏈球菌33#經(jīng)過空間誘變育種精心選育的誘變菌作為生產(chǎn)菌種；它經(jīng)航天搭載誘變后選育出的菌種已經(jīng)在2003年12月29日由中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心保藏，編號為CGMCCNo.1082。
所述的濃縮過程發(fā)酵后的甘露聚糖肽發(fā)酵液用濃縮器進(jìn)行濃縮，使?jié)饪s液體積與發(fā)酵液體積比控制在1∶20，控制pH 7.2制成甘露聚糖肽發(fā)酵濃縮液；濃縮液按珍珠巖1.5％及活性炭3％加入進(jìn)行精制提純，攪拌15分鐘，過濾后再抽濾提純，制成甘露聚糖肽發(fā)酵精制液。
所述的發(fā)酵后的甘露聚糖肽發(fā)酵液用濃縮器進(jìn)行濃縮，使?jié)饪s液體積與發(fā)酵液體積比控制在1∶30，控制pH 7.3制成甘露聚糖肽發(fā)酵濃縮液；濃縮液按珍珠巖1.7％及活性炭3.5％加入進(jìn)行精制提純，攪拌17分鐘，過濾后再抽濾提純，制成甘露聚糖肽發(fā)酵精制液。
所述的配制過程經(jīng)提純后的甘露聚糖肽發(fā)酵液加0.01-0.015％香精、0.01-0.08％矯味劑溶解攪勻，加純化水配制成含量是每1000ml含α-甘露聚糖肽500-5000mg，pH 4.0-6.0的配制液。
所述的甘露聚糖肽發(fā)酵精制液含有甘露聚糖肽、多肽、蛋白、多種氨基酸、維生素。
本發(fā)明的特點(diǎn)是由于本發(fā)明采用的是優(yōu)選α-溶血鏈球菌菌種發(fā)酵生產(chǎn)的甘露聚糖肽發(fā)酵液直接濃縮提純精制而成的溶液，與甘露聚糖肽提純制成原料粉藥稀釋而成的溶液比可保留許多的有效成分，含有比甘露聚糖肽更多的成分如多肽、蛋白、多種氨基酸、維生素。
本發(fā)明還在α-溶血鏈球菌生長規(guī)律的基礎(chǔ)上，選定較合適生長時期的菌種，采用平皿生長的菌落、浸入其它物質(zhì)中的菌懸液、帶菌的砂土等方法，于2002年3月25日搭載“神舟三號”宇宙飛船在太空軌道(近地點(diǎn)高度200公里、遠(yuǎn)地點(diǎn)高度350公里)進(jìn)行了6天零18小時的在軌飛行。太空的特殊條件主要體現(xiàn)為微重力、高真空、高輻射、交變磁場等特殊環(huán)境。在外層空間飛行的菌種被置于一個與地球上的生態(tài)環(huán)境完全不同的環(huán)境中，主要包括來自磁場俘獲的電子、質(zhì)子及低能重粒子；來自銀河系的宇宙射線如質(zhì)子、粒子及更重的高能重粒子；來自太陽磁暴的質(zhì)子及重粒子等。這些粒子作用于微生物細(xì)胞核中的DNA雙鏈結(jié)構(gòu)，可導(dǎo)致雙鏈斷裂。微重力、高真空環(huán)境可使DNA的堿基序列發(fā)生重組，即基因組的重組和變異。變異后產(chǎn)生的新菌株，其形態(tài)特征、培養(yǎng)特征、生理生化反應(yīng)、代謝產(chǎn)物、遺傳性狀及蛋白表達(dá)、中試生產(chǎn)指標(biāo)等均會發(fā)生不同程度的變化。在宇宙飛船返回地面后，經(jīng)過進(jìn)一步篩選，僅優(yōu)選出其中0.2％的正變異且遺傳特性穩(wěn)定的菌株，經(jīng)培育制成生產(chǎn)菌種。這種經(jīng)航天搭載誘變后選育出的菌種已經(jīng)在2003年12月29日由中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心保藏，編號為CGMCCNo.1082。(見附頁)特別是α-溶血鏈球菌33#菌株經(jīng)太空搭載誘變、地面上的篩選、分離和純化后，選育出發(fā)酵單位更高、所分泌的甘露聚糖肽含量更高的高產(chǎn)、優(yōu)質(zhì)菌株T33株。實(shí)驗及中試生產(chǎn)結(jié)果表明，經(jīng)空間誘變后的新型太空菌種在遺傳特性上穩(wěn)定，有較強(qiáng)的生產(chǎn)適應(yīng)性，尤其發(fā)酵產(chǎn)生的甘露聚糖肽含量提高，發(fā)酵含量比對照組產(chǎn)物含量平均高出三倍以上，發(fā)酵周期大大縮短；發(fā)酵過程的工藝控制點(diǎn)比原工藝更適宜發(fā)酵的控制；根據(jù)獸藥的特性，本工藝采用了濃縮提純后再脫色過濾的方法，合理的控制工藝參數(shù)。將發(fā)酵后的甘露聚糖肽發(fā)酵液用濃縮器進(jìn)行濃縮，使?jié)饪s液體積與發(fā)酵液體積比控制在1∶15-30，通過控制pH 7.0-7.4制成甘露聚糖肽發(fā)酵濃縮液；濃縮液按珍珠巖1-2.0％及活性炭2-4.0％加入進(jìn)行精制提純，攪拌10-20分鐘，過濾后再抽濾提純，制成甘露聚糖肽發(fā)酵精制液。這樣可保留發(fā)酵液中有效成分去除大部分無用成分和雜質(zhì)，提高藥液的百分含量，可使療效大大增強(qiáng)，更能提高產(chǎn)品質(zhì)量及澄清度。
具體實(shí)施例方式
優(yōu)選α-溶血性鏈球菌33#菌種進(jìn)行太空搭載，經(jīng)過太空誘變精心選育的α-溶血性鏈球菌33#菌珠作為生產(chǎn)菌種，經(jīng)一級發(fā)酵和二級發(fā)酵，生產(chǎn)甘露聚糖肽發(fā)酵液，將發(fā)酵液濃縮、精制、提純、過濾后，加適量香精、矯味劑溶解配制，攪拌均勻后再過濾，灌裝封口，熱壓滅菌105-121℃，20-30分鐘，經(jīng)燈檢合格后包裝入庫，檢驗合格后最終生產(chǎn)出太空誘變菌種生產(chǎn)的α-甘露聚糖肽獸藥。
①太空菌種制備以經(jīng)過空間誘變育種精心選育的α-溶血鏈球菌作為生產(chǎn)菌種。
A.斜面種子制備按配比配制斜面培養(yǎng)基牛肉膏0.2-0.8％，酵母膏0.2-0.8％，蛋白胨0.3-0.8％，葡萄糖0.1-0.8％，氯化鈉0.2-0.6％，瓊脂1-5％，綿羊血5-10％；pH 7.0-7.4；斜面種子培養(yǎng)基經(jīng)在溫度105-125℃，時間20-30分鐘，蒸汽壓力0.11-0.13Mpa滅菌；啟封菌種冷凍管，在無菌條件下接入血斜面，接種后置30℃恒溫培養(yǎng)24-30小時；B.搖瓶種子液制備按配比配制搖瓶培養(yǎng)基牛肉膏0.2-0.8％，酵母膏0.2-0.8％，蛋白胨0.3-0.8％，葡萄糖0.1-0.8％，氯化鈉0.2-0.6％；pH 7.0-7.4；搖瓶種 子培養(yǎng)基經(jīng)在溫度105-125℃，時間30分鐘，蒸汽壓力0.11-0.13Mpa滅菌；將培養(yǎng)好的斜面菌種在無菌條件下按1-9％接種量接入搖瓶種子培養(yǎng)基內(nèi)，25-40℃恒溫培養(yǎng)10-30小時。
②發(fā)酵過程所述發(fā)酵過程用發(fā)酵培養(yǎng)基；牛肉膏0.2-0.8％，酵母膏0.2-0.8％，蛋白胨0.3-0.8％，葡萄糖0.1-0.9％，氯化鈉0.2-0.6％；發(fā)酵培養(yǎng)基滅菌溫度105-125℃，時間30分鐘，蒸汽壓力0.11-0.13Mpa；A.一級發(fā)酵罐將優(yōu)良的搖瓶菌種在無菌條件下按1-10％接種量接入滅菌后的一級發(fā)酵罐，罐壓不超過0.02Mpa，通氣量以能翻動培養(yǎng)液為宜，在25-40℃恒溫培養(yǎng)10-50小時；B.二級發(fā)酵罐將一級發(fā)酵培養(yǎng)液在無菌條件下按2-20％接種量接入滅菌后二級發(fā)酵罐，罐壓不超過0.02Mpa，通氣量以能翻動培養(yǎng)液為宜；在25-40℃恒溫培養(yǎng)50-100小時，滅活放罐，滅活采用加溫使發(fā)酵液溫度達(dá)到70-120℃，保溫20-60分鐘，冷卻靜置。
③提純過程將發(fā)酵后的甘露聚糖肽發(fā)酵液用濃縮器進(jìn)行濃縮，使?jié)饪s液體積與發(fā)酵液體積比控制在1∶15-25，控制pH 7.0-7.4制成甘露聚糖肽發(fā)酵濃縮液；濃縮液按珍珠巖1-2.0％及活性炭2-4.0％加入進(jìn)行精制提純，攪拌10-20分鐘，過濾后再抽濾提純，制成甘露聚糖肽發(fā)酵精制液。
④配制經(jīng)提純后的甘露聚糖肽發(fā)酵精制液加0.01-0.015％香精(桔子香精、檸檬香精)、0.01-0.08％矯味劑(糖精鈉、蛋白糖)溶解攪勻，加純化水配制成含量是每1000ml含α-甘露聚糖肽500-5000mg，pH 4.0-6.0的配制液。
⑤灌裝封口、滅菌將配制液按100ml/瓶、250ml/瓶、500ml/瓶、1000ml/瓶、2000ml/瓶、5000ml/瓶、10000ml/瓶、20000ml/瓶的不同包裝規(guī)格進(jìn)行灌裝，封口，熱壓滅菌105-121℃，20-30分鐘后，用亮蘭色液抽真空檢漏，真空壓力-0.078-0.08Mpa。
⑥燈檢、包裝對滅菌后的α-甘露聚糖肽進(jìn)行燈檢，檢查每瓶內(nèi)不得有異物并挑凈蘭瓶。貼標(biāo)簽、裝箱入庫。
⑦檢驗按α-甘露聚糖肽獸藥的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行檢驗，合格后投入市場。
實(shí)施例1將優(yōu)選α-溶血性鏈球菌33#菌種作為生產(chǎn)菌種，經(jīng)上述一級發(fā)酵和二級發(fā)酵，生產(chǎn)甘露聚糖肽發(fā)酵液；發(fā)酵后的甘露聚糖肽發(fā)酵液用濃縮器進(jìn)行濃縮，使?jié)饪s液體積與發(fā)酵液體積比控制在1∶15，控制pH 7.0制成甘露聚糖肽發(fā)酵濃縮液；濃縮液按珍珠巖1％及活性炭2％加入進(jìn)行精制提純，攪拌10分鐘，過濾后再抽濾提純，制成甘露聚糖肽發(fā)酵精制液；加入矯味劑糖精鈉0.1g，加入香精0.1ml，攪勻，過濾，最后配制成含量為0.5mg/ml、pH 4.0的甘露聚糖肽提純?nèi)芤?000ml，灌裝封口制成分別為100ml/瓶、250ml/瓶、500ml/瓶、1000ml/瓶、2000ml/瓶、5000ml/瓶、10000ml/瓶、20000ml/瓶的不同包裝規(guī)格的α-甘露聚糖肽獸藥，經(jīng)流通蒸汽滅菌105℃，20分鐘，燈檢，包裝，檢驗合格后投入市場。
實(shí)施例2將上述優(yōu)選α-溶血性鏈球菌33#菌種進(jìn)行太空搭載，經(jīng)過太空誘變精心選育的α-溶血性鏈球菌33#菌珠作為生產(chǎn)菌種，經(jīng)上述一級發(fā)酵和二級發(fā)酵，生產(chǎn)甘露聚糖肽發(fā)酵液；發(fā)酵后的甘露聚糖肽發(fā)酵液用濃縮器進(jìn)行濃縮，使?jié)饪s液體積與發(fā)酵液體積比控制在1∶20，控制pH 7.2制成甘露聚糖肽發(fā)酵濃縮液；濃縮液按珍珠巖1.5％及活性炭3％加入進(jìn)行精制藥，提純，攪拌15分鐘，過濾后再抽濾提純，制成甘露聚糖肽發(fā)酵精制液；加入矯味劑蛋白糖0.5g，加入香精0.15ml，攪勻，過濾，最后配制成含量為3mg/ml、pH 4.0-6.0的甘露聚糖肽提純?nèi)芤?000ml，灌裝封口制成分別為100ml/瓶、250ml/瓶、500ml/瓶、1000ml/瓶、2000ml/瓶、5000ml/瓶、10000ml/瓶、20000ml/瓶的不同包裝規(guī)格的α-甘露聚糖肽獸藥，經(jīng)流通蒸汽滅菌121℃，30分鐘，燈檢，包裝，檢驗合格后投入市場。
實(shí)施例3將上述優(yōu)選α-溶血性鏈球菌33#菌種進(jìn)行太空搭載，經(jīng)過太空誘變精心選育的α-溶血性鏈球菌33#菌珠作為生產(chǎn)菌種，經(jīng)上述一級發(fā)酵和二級發(fā)酵，生產(chǎn)甘露聚糖肽發(fā)酵液；發(fā)酵后的甘露聚糖肽發(fā)酵液用濃縮器進(jìn)行濃縮，使?jié)饪s液體積與發(fā)酵液體積比控制在1∶25，控制pH 7.4制成甘露聚糖肽發(fā)酵濃縮液；濃縮液按珍珠巖2％及活性炭4％加入進(jìn)行精制提純，攪拌20分鐘，過濾后再抽濾提純，制成甘露聚糖肽發(fā)酵精制液。加入蛋白糖0.8g，攪勻，過濾，最后配制成含量為5mg/ml、pH 4.0-6.0的甘露聚糖肽提純?nèi)芤?000ml，灌裝封口制成分別為100ml/瓶、250ml/瓶、500ml/瓶、1000ml/瓶、2000ml/瓶、5000ml/瓶、10000ml/瓶、20000ml/瓶的不同包裝規(guī)格的α-甘露聚糖肽獸藥，經(jīng)流通蒸汽滅菌111℃，25分鐘，燈檢，包裝，檢驗合格后投入市場。
實(shí)施例4將上述優(yōu)選α-溶血性鏈球菌33#菌種進(jìn)行太空搭載，經(jīng)過太空誘變精心選育的α-溶血性鏈球菌33#菌珠作為生產(chǎn)菌種，經(jīng)上述一級發(fā)酵和二級發(fā)酵，生產(chǎn)甘露聚糖肽發(fā)酵液；發(fā)酵后的甘露聚糖肽發(fā)酵液用濃縮器進(jìn)行濃縮，使?jié)饪s液體積與發(fā)酵液體積比控制在1∶30，控制pH 7.3制成甘露聚糖肽發(fā)酵濃縮液；濃縮液按珍珠巖1.7％及活性炭3.5％加入進(jìn)行精制提純，攪拌17分鐘，過濾后再抽濾提純，制成甘露聚糖肽發(fā)酵精制液；加入蛋白糖0.5g，攪勻，過濾，最后配制成含量為5mg/ml、pH 4.0-6.0的甘露聚糖肽提純?nèi)芤?000ml，灌裝封口制成分別為100ml/瓶、250ml/瓶、500ml/瓶、1000ml/瓶、2000ml/瓶、5000ml/瓶、10000ml/瓶、20000ml/瓶的不同包裝規(guī)格的α-甘露聚糖肽獸藥，經(jīng)流通蒸汽滅菌121℃，30分鐘，燈檢，包裝，檢驗合格后投入市場。
權(quán)利要求
1.一種能提高免疫功能獸藥的生產(chǎn)工藝，其特征是優(yōu)選α-溶血性鏈球菌33#菌種作為生產(chǎn)菌種，經(jīng)一級發(fā)酵和二級發(fā)酵，生產(chǎn)甘露聚糖肽發(fā)酵液，將發(fā)酵后的甘露聚糖肽發(fā)酵液用濃縮器進(jìn)行濃縮，使?jié)饪s液體積與發(fā)酵液體積比控制在1∶15-30，控制pH7.0-7.4制成甘露聚糖肽發(fā)酵濃縮液；濃縮液按珍珠巖1-2.0％及活性炭2-4.0％加入進(jìn)行精制提純，攪拌10-20分鐘，過濾后再抽濾提純，制成甘露聚糖肽發(fā)酵精制液；加香精、矯味劑溶解配制，攪拌均勻后再過濾，配制成含量是每1000ml含α-甘露聚糖肽500-5000mg、pH4.0-6.0的配制液，灌裝封口，熱壓滅菌105-121℃，20-30分鐘，經(jīng)燈檢合格后包裝入庫，最終生產(chǎn)出太空誘變菌種生產(chǎn)的α-甘露聚糖肽。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種能提高免疫功能獸藥的生產(chǎn)工藝，其特征是所述的菌種是α-溶血性鏈球菌33#經(jīng)過空間誘變育種精心選育的誘變菌作為生產(chǎn)菌種；它經(jīng)航天搭載誘變后選育出的菌種已經(jīng)在2003年12月29日由中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心保藏，編號為CGMCCNo.1082。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種能提高免疫功能獸藥的生產(chǎn)工藝，其特征是所述的濃縮過程發(fā)酵后的甘露聚糖肽發(fā)酵液用濃縮器進(jìn)行濃縮，使?jié)饪s液體積與發(fā)酵液體積比控制在1∶20，控制pH7.2制成甘露聚糖肽發(fā)酵濃縮液；濃縮液按珍珠巖1.5％及活性炭3％加入進(jìn)行精制提純，攪拌15分鐘，過濾后再抽濾提純，制成甘露聚糖肽發(fā)酵精制液。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種能提高免疫功能獸藥的生產(chǎn)工藝，其特征是所述的發(fā)酵后的甘露聚糖肽發(fā)酵液用濃縮器進(jìn)行濃縮，使?jié)饪s液體積與發(fā)酵液體積比控制在1∶30，控制pH7.3制成甘露聚糖肽發(fā)酵濃縮液；濃縮液按珍珠巖1.7％及活性炭3.5％加入進(jìn)行精制提純，攪拌17分鐘，過濾后再抽濾提純，制成甘露聚糖肽發(fā)酵精制液。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種能提高免疫功能獸藥的生產(chǎn)工藝，其特征是所述的配制過程經(jīng)提純后的甘露聚糖肽發(fā)酵液加0.01-0.015％香精、0.01-0.08％矯味劑溶解攪勻，加純化水配制成含量是每1000ml含α-甘露聚糖肽500-5000mg，pH4.0-6.0的配制液。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種能提高免疫功能獸藥的生產(chǎn)工藝，其特征是所述的甘露聚糖肽發(fā)酵精制液含有甘露聚糖肽、多肽、蛋白、多種氨基酸、維生素。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種獸藥，特別是一種關(guān)于能提高免疫功能獸藥的生產(chǎn)工藝，其特征是優(yōu)選α－溶血性鏈球菌33#菌種作為生產(chǎn)菌種，經(jīng)—級發(fā)酵和二級發(fā)酵，生產(chǎn)甘露聚糖肽發(fā)酵液，用濃縮器進(jìn)行濃縮，使?jié)饪s液體積與發(fā)酵液體積比控制在1∶15－30，控制pH7.0－7.4即為發(fā)酵濃縮液；加入珍珠巖1－2.0％及活性炭2－4.0％進(jìn)行精制提純，攪拌，過濾，再抽濾提純，制成發(fā)酵精制液，加適量香精、矯味劑溶解配制，得到含量是每1000ml含α－甘露聚糖肽50－5000mg，pH4.0－6.0的配制液，灌裝封口，熱壓滅菌105－121℃，20－30分鐘，經(jīng)燈檢合格后包裝入庫，最終生產(chǎn)出太空誘變菌種生產(chǎn)的α－甘露聚糖肽。它不僅治愈率高還能提高免疫功能，它采用特殊的生產(chǎn)工藝，產(chǎn)量高，發(fā)酵周期大大縮短。
文檔編號C12R1/46GK1827163SQ200510022780
公開日2006年9月6日 申請日期2005年12月31日 優(yōu)先權(quán)日2005年12月31日
發(fā)明者趙恒 申請人:趙恒