專(zhuān)利名稱(chēng)：新疆雪蓮冷調(diào)節(jié)蛋白及其編碼基因與應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及植物冷調(diào)節(jié)蛋白及其編碼基因與應(yīng)用，特別是源于新疆雪蓮中冷調(diào)節(jié)蛋白編碼基因、冷調(diào)節(jié)蛋白及其應(yīng)用。
背景技術(shù)：
低溫是農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中一種主要的環(huán)境限制因素，低溫災(zāi)害引起農(nóng)作物大幅度減產(chǎn)是世界范圍內(nèi)普遍存在的問(wèn)題，每年全世界僅用于減輕霜凍的危害應(yīng)需要花費(fèi)1億多美元(Pearce，1999)。然而有些植物能夠長(zhǎng)期耐受住低于冰點(diǎn)的溫度。在1970年Weiser提出低溫鍛煉可能會(huì)引起基因表達(dá)改變的設(shè)想。隨后發(fā)現(xiàn)大多數(shù)植物在低溫鍛煉過(guò)程中均有冷調(diào)節(jié)物質(zhì)的存在。Guy等研究發(fā)現(xiàn)冷訓(xùn)化能誘導(dǎo)和增加一些基因的表達(dá)，使多種基因表達(dá)發(fā)生改變。Mohapatra等、Houde等在苜蓿中已分離到多種冷馴化特異的cDNA，cf對(duì)脫落酸誘導(dǎo)、脫水或熱休克處理誘導(dǎo)的轉(zhuǎn)錄累積與冰凍耐受性明顯正相關(guān)。Artus N.N.等，使擬南芥抗凍相關(guān)基因cor15am轉(zhuǎn)入擬南芥中大量表達(dá)后，與野生型相比轉(zhuǎn)基因植物分別提高葉綠體和原生質(zhì)體的耐寒性，并增強(qiáng)原生質(zhì)膜穩(wěn)定性。
新疆雪蓮(Sasussured involucrata Kar.et Kir.)屬菊科風(fēng)毛菊屬，僅存在于中國(guó)新疆，為多年生一次性開(kāi)花結(jié)實(shí)的高山草本植物，一般生長(zhǎng)在海拔2400-4100米的高山上，研究表明雪蓮的抗寒性能極為突出，冬季-30℃甚至更低的嚴(yán)寒能順利越冬，其體內(nèi)存在著在豐富的抗寒資源。通過(guò)分離及克隆新疆雪蓮中與抗凍相關(guān)的基因，利用基因工程技術(shù)可以把對(duì)霜凍敏感的農(nóng)作物改造成耐霜凍的農(nóng)作物，并延長(zhǎng)作物的生長(zhǎng)期，可以給農(nóng)業(yè)生產(chǎn)帶來(lái)巨大收益。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供新疆雪蓮的一個(gè)冷調(diào)節(jié)蛋白XLCOR及其編碼基因，該蛋白對(duì)雪蓮的抗寒有調(diào)節(jié)作用。
本發(fā)明提供的一種新疆雪蓮冷調(diào)節(jié)蛋白XLCOR編碼基因，是下列核苷酸序列之一1)、SEQ ID NO1的DNA序列；或與2)、SEQ ID NO1限定的DNA序列具有90％以上同源性，且編碼相同功能蛋白質(zhì)的DNA序列。
本發(fā)明所提供的新疆雪蓮的冷調(diào)節(jié)蛋白XLCOR具有SEQ ID NO1編碼新疆雪蓮冷調(diào)節(jié)蛋白的基因由650個(gè)堿基組成，該基因的讀碼框?yàn)樽?’端第65到第571位堿基。
本發(fā)明提供了新疆雪蓮的冷調(diào)節(jié)蛋白XLCOR具有SEQ ID NO2的氨基酸殘基序列。
本發(fā)明所提供的新疆雪蓮冷調(diào)節(jié)蛋白XLCOR序列SEQ ID NO2由170個(gè)氨基酸殘基組成。
本發(fā)明同時(shí)提供了新疆雪蓮的冷調(diào)節(jié)蛋白XLCOR由SEQ ID NO2衍生的蛋白質(zhì)，其特征在于將SEQ ID NO2中的氨基酸殘基序列經(jīng)過(guò)一個(gè)或幾個(gè)氨基酸殘基的取代具有與SEQ ID NO2中氨基酸序列相同活性。
本發(fā)明同時(shí)提供了新疆雪蓮的冷調(diào)節(jié)蛋白XLCOR由SEQ ID NO2衍生的蛋白質(zhì)，其特征在于將SEQ ID NO2中的氨基酸殘基序列經(jīng)過(guò)一個(gè)或幾個(gè)氨基酸殘基的缺失具有與SEQ ID NO2中氨基酸序列相同活性。
本發(fā)明同時(shí)提供了新疆雪蓮的冷調(diào)節(jié)蛋白XLCOR由SEQ ID NO2衍生的蛋白質(zhì)，其特征在于將SEQ ID NO2中的氨基酸殘基序列經(jīng)過(guò)一個(gè)或幾個(gè)氨基酸殘基的添加具有與SEQ ID NO2中氨基酸序列相同活性。
本發(fā)明還提供新疆雪蓮冷調(diào)節(jié)蛋白XLCOR編碼基因的表達(dá)載體，其特征在于可使用任何一種可以轉(zhuǎn)導(dǎo)外源基因在植物中表達(dá)的表達(dá)載體轉(zhuǎn)化植株，都可獲得對(duì)低溫脅迫耐受力得到增強(qiáng)的轉(zhuǎn)基因植株。
本發(fā)明還提供新疆雪蓮冷調(diào)節(jié)蛋白XLCOR編碼基因的表達(dá)載體可包括雙元農(nóng)桿菌載體以及用于單子葉植物微彈轟擊的載體。
本發(fā)明還提供新疆雪蓮冷調(diào)節(jié)蛋白XLCOR編碼基因的表達(dá)載體還可包括3’非翻譯區(qū)域，即包含聚腺苷酸信號(hào)和任何其它的可效應(yīng)mRNA加工或基因表達(dá)的DNA片斷。
本發(fā)明提供的新疆雪蓮冷調(diào)節(jié)蛋白XLCOR編碼基因在構(gòu)建到植物表達(dá)載體中，在其轉(zhuǎn)錄起始核苷酸前可加上任何一種強(qiáng)啟動(dòng)子或誘導(dǎo)型啟動(dòng)子，其特征在于可單獨(dú)使用或與其它的植物啟動(dòng)子結(jié)合使用。
本發(fā)明提供的新疆雪蓮冷調(diào)節(jié)蛋白XLCOR編碼基因在構(gòu)建到植物表達(dá)載體中，在其轉(zhuǎn)錄起始核苷酸前也可使用增強(qiáng)子，包括翻譯增強(qiáng)子或轉(zhuǎn)錄增強(qiáng)子，其特征在于增強(qiáng)子區(qū)域可以是ATG起始密碼子和鄰接區(qū)域起始密碼子，但必需與編碼序列的閱讀框相同，以保證序列的翻譯。
本發(fā)明所提供的新疆雪蓮冷調(diào)節(jié)蛋白XLCOR編碼基因在應(yīng)用在轉(zhuǎn)基因植物中，如需要對(duì)轉(zhuǎn)基因植物或植物進(jìn)行鑒定及篩選時(shí)，可對(duì)所使用的載體進(jìn)行加工，包括加入植物可選擇性標(biāo)記，也可不用任何篩選標(biāo)記。
本發(fā)明所提供的新疆雪蓮冷調(diào)節(jié)蛋白XLCOR編碼基因在抗寒植物品種中具有廣泛的的應(yīng)用，其特征在于包括本發(fā)明的冷調(diào)節(jié)蛋白XLCOR編碼基因的植物表達(dá)載體轉(zhuǎn)化植物宿主既可以是單子葉植物，也可以是雙子葉植物，可培育出抗寒的植物品種。
本發(fā)明所提供的編碼冷調(diào)節(jié)蛋白XLCOR的基因，可使用任何一種可以轉(zhuǎn)導(dǎo)外源基因在植物中表達(dá)的表達(dá)載體(這些植物表達(dá)載體包括雙元農(nóng)桿菌載體以及用于單子葉植物微彈轟擊的載體)轉(zhuǎn)化植株，都可獲得對(duì)低溫脅耐受力得到增強(qiáng)的轉(zhuǎn)基因植株。載體還可包括3’非翻譯區(qū)域，包含聚腺苷酸信號(hào)和任何其它的可效應(yīng)mRNA加工或基因表達(dá)的DNA片斷。聚腺苷酸信號(hào)引導(dǎo)聚腺苷酸加入到mRNA前體的3’端。3’區(qū)域的例子有農(nóng)桿菌冠癭瘤誘導(dǎo)(Ti)質(zhì)?；?如胭脂合成酶Nos基因)、植物基因(如大事貯存蛋白基因)3’轉(zhuǎn)錄的非翻譯區(qū)等。本發(fā)明的XLCOR基因的3’非翻譯區(qū)域可被用于在植物中表達(dá)。本發(fā)明的基因在構(gòu)建到植物表達(dá)載體中時(shí)，在其轉(zhuǎn)錄起始核苷酸前可加上任何一種強(qiáng)啟動(dòng)子或誘導(dǎo)型啟動(dòng)子。這些啟動(dòng)子很多，如花椰菜花葉病毒(CAMV 35S)和Ubiqutin啟動(dòng)子等，它們可單獨(dú)使用或與其它的植物啟動(dòng)子結(jié)合使用。本發(fā)明的1個(gè)基因在構(gòu)建到植物表達(dá)載體中時(shí)，也可使用增強(qiáng)子，包括翻譯增強(qiáng)子或轉(zhuǎn)錄增強(qiáng)子。這些增強(qiáng)子區(qū)域可以是ATG起始密碼子和鄰接區(qū)域起始密碼子等，但必需與編碼序列的閱讀框相同，以保證整修序列的翻譯。翻譯控制信號(hào)和起始密碼子可以是天然或合成等多種不同來(lái)源的。翻譯起始區(qū)域可以來(lái)自起始區(qū)域或結(jié)構(gòu)基因。
為了便于對(duì)轉(zhuǎn)基因植物或植物進(jìn)行鑒定及篩選，可對(duì)所使用的載體進(jìn)行加工，包括加入植物可選擇性標(biāo)記。使用的選擇性標(biāo)記可以是編碼對(duì)抗生素抗性酶的基因，抗生素包括慶大霉素、潮霉素、卡那霉素等。也可以是產(chǎn)生顏色變化的酶或發(fā)光化合物的茵，如GUS、熒光酶，還可以是抗化學(xué)試劑(例如除莠劑)的基因。當(dāng)然，也可以不用任何篩選標(biāo)記。
攜帶本發(fā)明XLCOR基因的表達(dá)載體可通過(guò)使用Ti質(zhì)粒、Ri質(zhì)粒、植物病毒載體、直接DNA轉(zhuǎn)化、微注射、電穿孔等常規(guī)生物技術(shù)方法導(dǎo)入植物(Weissbach，1998，method for Plant Molecular Biology VIII，Academy Press，Now York，pp 421-463；Geiserson and Corey，1998，plant MolecularBiolory(2nd Editon)。
可使用包括本發(fā)明的冷調(diào)節(jié)蛋白基因的植物表達(dá)載體轉(zhuǎn)化植物宿主，既可以是單子葉植物，也可以是雙子葉植物，如水稻、小麥、棉花、玉米、黃瓜、番茄、楊樹(shù)、草坪草、苜蓿等，可培育抗寒的植物品種。


圖1基因文庫(kù)雜交結(jié)果。
圖中前一個(gè)圖為正向差減文庫(kù)雜交結(jié)果；后一個(gè)圖為反向差減文庫(kù)雜交結(jié)果。
圖2基因文庫(kù)雜交結(jié)果。
圖中A點(diǎn)為探針與20℃培養(yǎng)的新疆雪蓮組織培養(yǎng)幼苗的總RNA的雜交結(jié)果，B點(diǎn)為為陽(yáng)性對(duì)照，C點(diǎn)為探針與4℃培養(yǎng)的新疆雪蓮組織培養(yǎng)幼苗的總RNA的雜交結(jié)果。
具體實(shí)施例實(shí)施例1、新疆雪蓮cDNA文庫(kù)的構(gòu)建采集生長(zhǎng)于天山海拔4000米的新疆雪蓮葉片，稱(chēng)取0.1g在液氮中研碎，加入1mlTRIZOL試劑，充分混勻，加入200ul氯仿，混勻，離心取上清，加入250ul異丙醇，離心去上清，經(jīng)75％乙醇洗滌后，在室溫干燥，沉淀用15ulDEPC水溶解。嚴(yán)格按照BD Biosciences公司“SMART cDNA Library Contruction Kit”使用手冊(cè)，取1ug總RNA，在PowerScript反轉(zhuǎn)錄酶的作用下合成雙鏈cDNA，經(jīng)蛋白酶K及限制性?xún)?nèi)切酶Sfi I處理后，用CHROMA SPIN-400柱子進(jìn)行分級(jí)分離，與載體λTrip1EX2連接，連接產(chǎn)物用λ噬菌體包裝蛋白進(jìn)行包裝，所獲得文庫(kù)經(jīng)滴度測(cè)定后，保存于-70℃。
實(shí)施例2、新疆雪蓮cDNA差減文庫(kù)的構(gòu)建將新疆雪蓮組織培養(yǎng)苗在0℃-2℃處理兩星期，用未經(jīng)低溫處理的新疆雪蓮組織培養(yǎng)苗作為對(duì)照，按照BDBioxciences公司的“Clontech PCR-Select cDNASubtraction Kit”使用使用手冊(cè)，分別提取兩種組織培養(yǎng)苗總RNA，分離其PolyA+RNA，合成雙鏈cDNA。對(duì)低溫處理的組織培養(yǎng)苗分別加上不同的接頭，作為“測(cè)試cDNA”(Tester cDNA)，未經(jīng)低溫處理的組織培養(yǎng)苗作為“驅(qū)動(dòng)cDNA”(DrivercDNA)，經(jīng)過(guò)兩次雜交后，對(duì)雜交產(chǎn)物進(jìn)行PCR反應(yīng)，獲得新疆雪蓮在低溫下特異表達(dá)的cDNA，將這些cDNA與T-載體進(jìn)行連接，構(gòu)建得到新疆雪蓮cDNA低溫正向差減文庫(kù)；同時(shí)對(duì)常溫生長(zhǎng)的組織培養(yǎng)苗cDNA分別加上不同的接頭，作為“測(cè)試cDNA”(Tester cDNA)，低溫誘導(dǎo)的組織培養(yǎng)苗作為“驅(qū)動(dòng)cDNA”(DrivercDNA)，經(jīng)過(guò)兩次雜交后，對(duì)雜交產(chǎn)物進(jìn)行PCR反應(yīng)，，將這些cDNA與T-載體進(jìn)行連接，構(gòu)建得到新疆雪蓮cDNA低溫反向差減文庫(kù)。
實(shí)施例3、新疆雪蓮冷調(diào)節(jié)基因XLCOR的克隆從新疆雪蓮cDNA低溫正向差減文庫(kù)和反向差減文庫(kù)中各挑取300個(gè)克隆，提取質(zhì)粒后，進(jìn)行PCR反應(yīng)，獲得全長(zhǎng)cDNA，將其點(diǎn)于尼龍膜上；對(duì)制備的低溫正向差減cDNA用地高辛(可通過(guò)市場(chǎng)購(gòu)買(mǎi))進(jìn)行標(biāo)記后作為探針，與點(diǎn)好的cDNA進(jìn)行雜交。雜交結(jié)果參見(jiàn)圖1所示。圖中A為正向差減文庫(kù)雜交結(jié)果，圖中B為反向差減文庫(kù)雜交結(jié)果。將兩張膜進(jìn)行比較，挑選在正向差減文庫(kù)中有雜交信號(hào)，而在反向雜交庫(kù)中沒(méi)有雜交信號(hào)的的cDNA進(jìn)行序列測(cè)定。測(cè)序結(jié)果在GENEBANK中進(jìn)行序列比較后，得到新疆雪蓮冷調(diào)節(jié)基因XLCOR。
實(shí)施例4、新疆雪蓮冷調(diào)節(jié)基因XLCOR與低溫脅迫的關(guān)系將新疆雪蓮組織培養(yǎng)幼苗在2℃培養(yǎng)14天，稱(chēng)取0.1g葉片在液氮中研碎，加入1mlTRIZOL試劑，充分混勻，加入200ul氯仿，混勻，離心取上清，加入250ul異丙醇，離心去上清，經(jīng)75％乙醇洗滌后，在室溫干燥，沉淀用15ul DEPC水溶解，得到其總RNA。按同樣的方法提取20℃培養(yǎng)的新疆雪蓮組織培養(yǎng)幼苗的總RNA，以冷調(diào)節(jié)基因XLCOR為探針，分別與上述兩個(gè)RNA樣品進(jìn)行Northern雜交，雜交結(jié)果參見(jiàn)圖2所示。圖中A點(diǎn)為探針與20℃培養(yǎng)的新疆雪蓮組織培養(yǎng)幼苗的總RNA的雜交結(jié)果，B點(diǎn)為陽(yáng)性對(duì)照，C點(diǎn)為探針與4℃培養(yǎng)的新疆雪蓮組織培養(yǎng)幼苗的總RNA的雜交結(jié)果。結(jié)果表明，該冷調(diào)節(jié)基因受低溫誘導(dǎo)，在常溫培養(yǎng)下不表達(dá)。
序列表<110>新疆農(nóng)業(yè)科學(xué)院微生物應(yīng)用研究所<120>新疆雪蓮冷調(diào)節(jié)蛋白及其編碼基因與應(yīng)用<130>111<160>2<170>Patent In version 3.3<210>1<211>650<212>DNA<213>新疆雪蓮Sasussured involucrata Kar.et Kir.
<220>
<221>5′UTR<222>(1)..(64)<220>
<221>CDS<222>(65)..(571)<220>
<221>3′UTR<222>(572)..(650)<400>1atctccaaca acccaaatta aaaagaagaa taaaaacaag attgtgaaag ttgaaggtct60aaca atg gcg aat gca agt gat gag ttc agg gtg gca tct tcc ggc atc109Met Ala Asn Ala Ser Asp Glu Phe Arg Val Ala Ser Ser Gly Ile1 5 10 15gat cat gaa ggc cgt ctt cca cga aaa tac acc gcc gaa ggt caa ggt 157Asp His Glu Gly Arg Leu Pro Arg Lys Tyr Thr Ala Glu Gly Gln Gly20 25 30aca aag aaa gac ata tcg cca cca ata gaa tgg cac aat gtt ccc gat 205Thr Lys Lys Asp Ile Ser Pro Pro Ile Glu Trp His Asn Val Pro Asp35 40 45gag acg aaa aca tta gca cta gtg gtc gag gat atc aac gaa gca gac 253Glu Thr Lys Thr Leu Ala Leu Val Val Glu Asp Ile Asn Glu Ala Asp50 55 60ccc agt ggt atg ctc gtt cct tgg aca ttg tgg gtg gtg atc aat ata 301
Pro Ser Gly Met Leu Val Pro Trp Thr Leu Trp Val Val Ile Asn Ile65 70 75cca ccc acc tta aaa ggg ttg ccg gag ggg ttt tcc ggc aaa gaa gag349Pro Pro Thr Leu Lys Gly Leu Pro Glu Gly Phe Ser Gly Lys Glu Glu80 85 90 95gac aac ggt gag gct tcc gct aac att aaa gaa ggg aac aat gat ttt397Asp Asn Gly Glu Ala Ser Ala Asn Ile Lys Glu Gly Asn Asn Asp Phe100 105 110aag gtg ccg gga tgg agc ggc cca aag atg ccg tca ccg gga cat aga445Lys Val Pro Gly Trp Ser Gly Pro Lys Met Pro Ser Pro Gly His Arg115 120 125ttt gag ttc aag ctt tat gcg ttg gat act gaa att gat ttg gga aat493Phe Glu Phe Lys Leu Tyr Ala Leu Asp Thr Glu Ile Asp Leu Gly Asn130 135 140aag gtg aca aag gaa aag cta cta gat gca att gat ggg cat gtg ctt541Lys Val Thr Lys Glu Lys Leu Leu Asp Ala Ile Asp Gly His Val Leu145 150 155gag gaa gcc gtt cta acg gca tta tat gaa tagcgttgtt ttggttgggt 591Glu Glu Ala Val Leu Thr Ala Leu Tyr Glu160 165cgagaatagt gcgttagtgc tatacttcta tgtaaggttt aattttgatt ttgtactcg 650<210>2<211>169<212>PRT<213>新疆雪蓮Sasussured involucrata Kar.et Kir.
<400>2Met Ala Asn Ala Ser Asp Glu Phe Arg Val Ala Ser Ser Gly Ile Asp1 5 10 15His Glu Gly Arg Leu Pro Arg Lys Tyr Thr Ala Glu Gly Gln Gly Thr20 25 30Lys Lys Asp Ile Ser Pro Pro Ile Glu Trp His Asn Val Pro Asp Glu35 40 45Thr Lys Thr Leu Ala Leu Val Val Glu Asp Ile Asn Glu Ala Asp Pro50 55 60
Ser Gly Met Leu Val Pro Trp Thr Leu Trp Val Val Ile Asn Ile Pro65 70 75 80Pro Thr Leu Lys Gly Leu Pro Glu Gly Phe Ser Gly Lys Glu Glu Asp85 90 95Asn Gly Glu Ala Ser Ala Asn Ile Lys Glu Gly Asn Asn Asp Phe Lys100 105 110Val Pro Gly Trp Ser Gly Pro Lys Met Pro Ser Pro Gly His Arg Phe115 120 125Glu Phe Lys Leu Tyr Ala Leu Asp Thr Glu Ile Asp Leu Gly Asn Lys130 135 140Val Thr Lys Glu Lys Leu Leu Asp Ala Ile Asp Gly His Val Leu Glu145 150 155 160Glu Ala Val Leu Thr Ala Leu Tyr Glu16權(quán)利要求
1.一種雪蓮冷調(diào)節(jié)蛋白XLCOR編碼基因，該蛋白基因包含SEQ ID NO2所示的核苷酸序列；
2.一種編碼SEQ ID NO2所示的氨基酸序列的核苷酸序列；
3.如權(quán)利要求2所述的核苷酸序列，該序列如SEQ ID NO1所示；
4.一種如權(quán)利要求2所述的SEQ ID NO2序列洐生的蛋白質(zhì)，其特征在于將SEQ ID NO2中的氨基酸殘基序列經(jīng)過(guò)一個(gè)或幾個(gè)氨基酸殘基的取代具有與SEQ ID NO2中氨基酸序列相同活性；
5.一種如權(quán)利要求2所述的SEQ ID NO2序列洐生的蛋白質(zhì)，其特征在于將SEQ ID NO2中的氨基酸殘基序列經(jīng)過(guò)一個(gè)或幾個(gè)氨基酸殘基的缺失具有與SEQ ID NO2中氨基酸序列相同活性；
6.一種如權(quán)利要求2所述的SEQ ID NO2洐生的蛋白質(zhì)，其特征在于將SEQ ID NO2中的氨基酸殘基序列經(jīng)過(guò)一個(gè)或幾個(gè)氨基酸殘基的添加具有與SEQ ID NO2中氨基酸序列相同活性；
7.一種如權(quán)利要求3所述的SEQ ID NO1序列，其特征在于與SEQ IDNO1限定的DNA序列具有90％以上同源性，且編碼相同功能蛋白質(zhì)的DNA序列；
8.一種表達(dá)載體，其含有如權(quán)利要求2至7任一項(xiàng)所述的新疆雪蓮冷調(diào)節(jié)蛋白XLCOR編碼基因的表達(dá)載體；
9.如權(quán)利要求8所述的表達(dá)載體，其特征在于可使用任何一種可以轉(zhuǎn)導(dǎo)外源基因在植物中表達(dá)的表達(dá)載體轉(zhuǎn)化植株，都可獲得對(duì)低溫脅耐受力得到增強(qiáng)的轉(zhuǎn)基因植株；
10.一種權(quán)利要求2至7任一種新疆雪蓮冷調(diào)節(jié)蛋白XLCOR編碼基因在抗寒植物品種中的應(yīng)用，其特征在于，包括本發(fā)明的冷調(diào)節(jié)蛋白XLCOR編碼基因的植物表達(dá)載體轉(zhuǎn)化植物宿主既可以是單子葉植物，也可以是雙子葉植物，可培育出抗寒的植物品種。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了來(lái)源于新疆雪蓮的冷調(diào)節(jié)蛋白及基編碼基因與應(yīng)用，目的是提供具有較強(qiáng)抗寒性能的冷調(diào)節(jié)蛋白及其編碼基因。本發(fā)明所提供的冷調(diào)節(jié)蛋白名稱(chēng)是XLCOR，是具有序列表中序列2氨基酸殘基序列的蛋白質(zhì)，或者是將序列2中的氨基酸殘基序列經(jīng)過(guò)一個(gè)或幾個(gè)氨基酸殘基的取代、缺失或添加且具有與序列2中氨基酸序列相同活性由序列2衍生的蛋白質(zhì)。冷調(diào)節(jié)蛋白XLCOR的編碼基因，是下列核苷酸序列之一1)序列表中序列1的DNA序列；2)與序列表中序列1限定的序列有90％以上的同源性，且編碼相同功能蛋白質(zhì)的DNA序列。本發(fā)明的基因?qū)ε嘤购参锲贩N，提高農(nóng)作物產(chǎn)量具有重要意義。
文檔編號(hào)C12N15/63GK1821405SQ200510053240
公開(kāi)日2006年8月23日 申請(qǐng)日期2005年2月17日 優(yōu)先權(quán)日2005年2月17日
發(fā)明者王志方, 王博, 艾秀蓮 申請(qǐng)人:新疆農(nóng)業(yè)科學(xué)院微生物應(yīng)用研究所