專利名稱：伴隨肝功能障礙的肝臟疾病的預(yù)防劑或改善劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及以ω-9不飽和脂肪酸為活性成分或以ω-9不飽和脂肪酸為組成脂肪酸的化合物為活性成分的針對伴隨肝功能障礙的肝臟疾病的預(yù)防劑或改善劑、涉及對伴隨肝功能障礙的肝臟疾病具有預(yù)防或改善作用的組合物或飲食，并涉及其制備方法。更具體地，本發(fā)明涉及以選自ω-9不飽和脂肪酸、ω-9不飽和脂肪酸的醇酯、以ω-9不飽和脂肪酸為組成脂肪酸的單酰甘油酯、二酰甘油酯、三酰甘油酯和磷脂中的至少之一為活性成分的針對伴隨肝功能障礙的急性或慢性肝炎、急性肝功能衰竭、肝硬變和/或肝細(xì)胞癌的預(yù)防劑或改善劑、涉及具有預(yù)防或改善作用的組合物或飲食，并涉及其制備方法。
背景技術(shù)：
由于病毒或多種毒性物質(zhì)等造成的肝細(xì)胞破壞發(fā)展而來的肝功能障礙為引起急性或慢性肝炎、進(jìn)一步地為引起肝硬變、肝細(xì)胞癌等的原因。尤其是急性肝炎與普通肝炎相比，前者存在自覺癥狀如惡心、嘔吐、倦怠感等劇烈、高燒、白細(xì)胞數(shù)增多、CRP強(qiáng)陽性、黃疸也急劇變壞，已知有時(shí)導(dǎo)致成年前死亡。另外，即使沒有成年前死亡，從慢性肝炎到肝硬變、肝細(xì)胞癌的病例極多，形成了極多的社會(huì)問題。
從肝炎的原因來看，特異性感染肝細(xì)胞的病毒(甲型肝炎病毒、乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒、丁型肝炎病毒、戊型肝炎病毒)為主要引起急性肝炎的原因，其中丙型病毒性肝炎占日本慢性肝病原因的大半，實(shí)際上占肝細(xì)胞癌原因的90％。由于自身免疫機(jī)制引起的肝功能障礙稱為自身免疫性肝病，其除了自身免疫性肝炎外，還包括原發(fā)性膽汁性肝硬變(PBC)、原發(fā)性硬化性膽管炎(PSC)及其相關(guān)疾病。
醇類主要經(jīng)肝臟代謝，慢性攝入醇類對肝臟的多種代謝系統(tǒng)產(chǎn)生影響，從而引起高尿酸血癥、高脂血癥、高乳酸血癥等。脂肪酸的代謝障礙引起中性脂肪的蓄積、刺激炎性細(xì)胞并引發(fā)肝炎，有時(shí)大量飲酒導(dǎo)致稱為重癥醇性肝炎的預(yù)后不良的急性肝功能衰竭。肝細(xì)胞中脂肪的蓄積起因于飲酒而產(chǎn)生的醇性或肥胖引起的營養(yǎng)過剩，這通常不會(huì)導(dǎo)致肝炎，但據(jù)報(bào)道有時(shí)伴隨著類似醇性肝炎的炎癥，偶爾最終引起肝硬變的例子。
肝硬變?yōu)樗新愿喂δ苷系K的最終結(jié)果。在肝細(xì)胞障礙與再生的長期重復(fù)過程中，形成了肝臟的纖維化和再生結(jié)節(jié)。因此，表現(xiàn)出慢性肝功能障礙的所有肝臟疾病顯示出肝細(xì)胞功能不全和門脈壓亢進(jìn)。在日本約40萬肝硬變患者的病因幾乎都是病毒性的，特別是由丙型肝炎病毒引起的為62％，由乙型肝炎病毒引起的為15％。病毒性肝硬變中肝細(xì)胞癌的發(fā)生率高，這極大影響肝硬變的預(yù)后。其他的病因有醇、藥物及毒性物質(zhì)、自身免疫、膽汁郁滯、循環(huán)障礙、代謝異常、寄生蟲等。
作為治療方法，對于可避免的病因(醇性、藥劑型)避免病因是最重要的，對于病毒性(HBV、HCV)而言目前的治療法僅為干擾素，其對HBV的效果幾乎不可期待，對HCV的效果僅為30％至50％。最近，新研發(fā)出對于慢性乙型肝炎可與拉米夫定(lamivudine)(抗病毒劑)聯(lián)用，對于慢性丙型肝炎可與利巴韋林(ribavirin)(抗病毒劑)聯(lián)用。另一方面，對于不能清除病毒的病例，為了減緩肝損壞并抑制向肝硬變的發(fā)展，作為癌的二次或一次預(yù)防目的，可施與糖皮質(zhì)激素、甘草皂甙制品、熊去氧膽酸等(藥局Vol.54，增刊號，2003)。因此，當(dāng)前以輔助治療的肝保護(hù)療法為主體，尚無無副作用的有效肝炎治療劑和肝炎誘發(fā)抑制劑(Medical Digest；卷39(4)1990)。
發(fā)明公開因此，非常希望研發(fā)出可預(yù)防或改善伴隨肝功能障礙的肝臟疾病并與食物很好適應(yīng)的副作用小的化合物。
本發(fā)明者們?yōu)榱私鉀Q上述課題進(jìn)行了大量研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)了顯示極好的抑制肝功能障礙作用、預(yù)防或改善伴隨肝功能障礙的肝臟疾病、顯示極好的食品適應(yīng)的ω-9不飽和脂肪酸或以ω-9不飽和脂肪酸為組成脂肪酸的化合物，從而完成了本發(fā)明。因此，本發(fā)明者們提供了以ω-9不飽和脂肪酸為活性成分或以ω-9不飽和脂肪酸為組成脂肪酸的化合物為活性成分的針對伴隨肝功能障礙的肝臟疾病的預(yù)防劑或改善劑、提供了對伴隨肝功能障礙的肝臟疾病具有預(yù)防或改善作用的組合物或飲食，并提供了其制備方法。
更具體地，本發(fā)明提供了以選自ω-9不飽和脂肪酸、ω-9不飽和脂肪酸的醇酯、以ω-9不飽和脂肪酸為組成脂肪酸的單酰甘油酯、二酰甘油酯、三酰甘油酯和磷脂中的至少之一為活性成分的、針對伴隨肝功能障礙的急性或慢性肝炎、急性肝功能衰竭、肝硬變和/或肝細(xì)胞癌的預(yù)防劑或改善劑；提供了具有預(yù)防或改善作用的組合物或飲食，并提供了其制備方法。
附圖簡述

圖1為顯示蜜酸(mead acid)對半乳糖胺肝功能障礙中肝功能標(biāo)志物的效果圖。圖中對照代表對照食物組，N-3代表DHA食物組，N-9代表蜜酸食物組。施用GalN/LPS的組為每組15只小鼠，施用生理鹽水的組為每組3只小鼠。
圖2為顯示蜜酸對半乳糖胺肝功能障礙中生存率的效果圖。圖中對照代表對照食物組，N-3代表DHA食物組，N-9代表蜜酸食物組。每組各使用10只小鼠。
實(shí)施發(fā)明的最佳實(shí)施方式本發(fā)明涉及以ω-9不飽和脂肪酸為活性成分或以ω-9不飽和脂肪酸為組成脂肪酸的化合物為活性成分的針對伴隨肝功能障礙的肝臟疾病的預(yù)防劑或改善劑、涉及對伴隨肝功能障礙的肝臟疾病具有預(yù)防或改善作用的組合物或飲食，并涉及其制備方法。本發(fā)明的活性成分ω-9不飽和脂肪酸是指與脂肪酸的甲基端最接近的雙鍵位于自甲基開始數(shù)的第9位碳和第10位碳之間，具有2個(gè)或以上雙鍵，優(yōu)選地具有18至22個(gè)碳原子數(shù)，可包括例如6，9-十八碳二烯酸(18:2 ω9)、8，11-二十碳二烯酸(20:2 ω9)和5，8，11-二十碳三烯酸(20:3 ω9)等，它們可分別單獨(dú)使用或組合使用。
另外，由于天然存在的ω-9不飽和脂肪酸均為順式，本發(fā)明優(yōu)選使用順式的ω-9不飽和脂肪酸。
已知ω-9不飽和脂肪酸中如5，8，11-二十碳三烯酸(20:3 ω9，也稱為蜜酸(mead acid))和8，11-二十碳二烯酸(20:2 ω9)可作為缺乏必需脂肪酸的動(dòng)物組織的組成脂肪酸之一而存在。
這些不飽和脂肪酸在體內(nèi)可成為白三烯3類的前體，其生理活性是很有前景的，已發(fā)明了“用白三烯B4(LTB4)作為醫(yī)學(xué)疾病的預(yù)防劑和改善劑”(特開平07-041421)、“介導(dǎo)遲發(fā)型超敏反應(yīng)的醫(yī)學(xué)疾病的預(yù)防劑和改善劑”(特開平08-053349)、“引起軟骨組織異常的疾病的預(yù)防藥或治療藥”(WO97-05863)，報(bào)道了其適用于抗炎、抗過敏、抗關(guān)節(jié)炎和變形性關(guān)節(jié)病。然而，根據(jù)現(xiàn)有技術(shù)，不能預(yù)見其對伴隨肝功能障礙的肝臟疾病的預(yù)防作用，而本發(fā)明首次使用本發(fā)明的肝功能障礙模型動(dòng)物評估而明確。
本發(fā)明的活性成分為ω-9不飽和脂肪酸，并且可使用以ω-9不飽和脂肪酸為組成脂肪酸的所有化合物。對于以ω-9不飽和脂肪酸為組成脂肪酸的化合物，可以游離脂肪酸形式使用，也可包括可藥用的ω-9不飽和脂肪酸鹽，如鈉鹽、鉀鹽、鋰鹽或其它的堿金屬鹽、鋅鹽、鈣鹽、鎂鹽等。另外，可例舉ω-9不飽和脂肪酸的低級醇酯如ω-9不飽和脂肪酸甲酯、ω-9不飽和脂肪酸乙酯等。此外，可使用以ω-9不飽和脂肪酸為組成脂肪酸的單酰甘油酯、二酰甘油酯、三酰甘油酯、磷脂和糖酯等。另外，本發(fā)明不限于上述，可利用以ω-9不飽和脂肪酸為組成脂肪酸的所有化合物。
本發(fā)明使用的ω-9不飽和脂肪酸或以ω-9不飽和脂肪酸為組成脂肪酸的化合物可為任何來源。即，它們可來自能產(chǎn)生ω-9不飽和脂肪酸或以ω-9不飽和脂肪酸為組成脂肪酸的化合物的微生物，其也可由缺乏必需脂肪酸的動(dòng)物組織、缺乏必需脂肪酸的動(dòng)物培養(yǎng)細(xì)胞產(chǎn)生，也可通過化學(xué)或酶法合成，另外也可從天然物質(zhì)如自動(dòng)物軟骨提取、分離和純化而產(chǎn)生。
但是，考慮到應(yīng)用于食品時(shí)，ω-9不飽和脂肪酸優(yōu)選地為單酰甘油酯、二酰甘油酯、三酰甘油酯或磷脂的形式，特別優(yōu)選地為三酰甘油酯的形式。雖然不存在包含ω-9不飽和脂肪酸的三酰甘油酯(與含有的部分或全部組成脂肪酸為ω-9不飽和脂肪酸的三酰甘油酯同義)的豐富來源，本發(fā)明者們使得以ω-9不飽和脂肪酸為組成脂肪酸的三酰甘油酯可工業(yè)應(yīng)用。通過提供肝功能障礙模型動(dòng)物，首次闡明了本發(fā)明活性成分的效果，明確了對伴隨肝功能障礙的肝臟疾病具有預(yù)防或改善效果。
可產(chǎn)生包含ω-9不飽和脂肪酸的油脂(三酰甘油酯)的微生物例如為通過對屬于被孢霉屬(Mortierella)、耳霉屬(Conidiobolus)、腐霉屬(Pythium)、疫霉屬(Phytophthora)、青霉屬(Penicillium)、枝孢屬(Cladosporium)、毛霉屬(Mucor)、鐮孢屬(Fusarium)、曲霉屬(Aspergillus)、紅酵母屬(Rhodotorula)、蟲霉屬(Entomophthora)、刺孢囊霉屬(Echinosporangium)、水霉屬(Saprolegnia)的并可產(chǎn)生花生四烯酸的微生物進(jìn)行突變處理而得到的Δ12去飽和活性低下或缺乏的微生物。
可產(chǎn)生花生四烯酸的微生物能從作為培養(yǎng)基成分的碳源生物合成硬脂酸(18:0)，硬脂酸在Δ9去飽和酶的作用下轉(zhuǎn)化為油酸(18:1 ω9)，油酸在Δ12去飽和酶的作用下轉(zhuǎn)化為亞油酸(18:2 ω6)，亞油酸在Δ6去飽和酶的作用下轉(zhuǎn)化為γ-亞麻酸(18:3 ω6)，γ-亞麻酸在延伸酶的作用下轉(zhuǎn)化為二高γ-亞麻酸(20:3 ω6)，二高γ-亞麻酸在Δ5去飽和酶的作用下轉(zhuǎn)化為花生四烯酸(20:4 ω6)。但是，當(dāng)阻斷Δ12去飽和酶時(shí)，由Δ6去飽和酶自油酸生物合成產(chǎn)生6，9-十八碳二烯酸(18:2 ω9)，在延伸酶的作用下自6，9-十八碳二烯酸生物合成產(chǎn)生8，11-二十碳二烯酸(20:2 ω9)，然后在Δ5去飽和酶的作用下自8，11-二十碳二烯酸生物合成產(chǎn)生5，8，11-二十碳三烯酸(20:3 ω9)。
具體地，作為可產(chǎn)生包含ω-9不飽和脂肪酸的油脂(三酰甘油酯)的微生物，包括但不限于通過對特開平5-91888號所述的可產(chǎn)生花生四烯酸的微生物進(jìn)行突變處理而得到的、具有Δ5去飽和酶活性和Δ6去飽和酶活性且Δ12去飽和酶活性低下或缺乏的微生物，例如高山被孢霉(Mortierellaalpina)SAM1861(FERM BP-3590)(根據(jù)布達(dá)佩斯條約進(jìn)行的國際保藏，于1991年9月30日保藏于獨(dú)立行政法人產(chǎn)業(yè)技術(shù)綜合研究所專利生物保藏中心(茨城縣筑波市東1丁目1號1中央第6))；進(jìn)一步地，對可產(chǎn)生花生四烯酸的微生物進(jìn)行突變處理而得到的、Δ12去飽和酶活性低下或缺乏且在具有Δ5去飽和活性、Δ6去飽和活性和/或鏈延伸活性中的至少之一得以提高的微生物，例如高山被孢霉SAM2086(FERM BP-6032)(根據(jù)布達(dá)佩斯條約進(jìn)行的國際保藏，于1996年8月5日保藏于獨(dú)立行政法人產(chǎn)業(yè)技術(shù)綜合研究所專利生物保藏中心(茨城縣筑波市東1丁目1號1中央第6))(自1996年8月5日保藏的國內(nèi)保藏FERM P-15766于1997年7月30日轉(zhuǎn)移為國際保藏)。
為了培養(yǎng)用于本發(fā)明的菌株，將所述菌株的胞子、菌絲或預(yù)培養(yǎng)得到的預(yù)培養(yǎng)液接種至液體培養(yǎng)基或固體培養(yǎng)基并培養(yǎng)。當(dāng)為液體培養(yǎng)基時(shí)，作為碳源可使用通常使用的任一碳源，包括但不限于葡萄糖、果糖、鼠李糖、蔗糖、麥芽糖、可溶性淀粉、糖蜜、甘油和甘露糖醇等。
作為氮源，可使用蛋白胨、酵母提取物、麥芽提取物、肉膏、酪蛋白氨基酸、玉米漿、大豆蛋白、脫脂大豆、棉籽碾碎物等天然氮源、尿素等有機(jī)氮源、以及硝酸鈉、硝酸銨、硫酸銨等無機(jī)氮源。此外，根據(jù)需要，可將磷酸鹽、硫酸鎂、硫酸鐵、硫酸銅等無機(jī)鹽和維生素等作為微量營養(yǎng)源使用。對這些培養(yǎng)基成分只要不為損害微生物生長的濃度，并無特定的限制。實(shí)踐中，碳源的總添加量通常為0.1至40重量％，優(yōu)選地為1至25重量％，氮源的總添加量通常為0.1至20重量％，優(yōu)選地為1至10重量％，可在培養(yǎng)開始時(shí)或在培養(yǎng)過程中為了達(dá)到總碳源量和總氮源量而添加碳源及氮源。
ω-9不飽和脂肪酸產(chǎn)生菌的培養(yǎng)溫度雖然取決于所使用的微生物，但可在5至40℃，優(yōu)選地在20至30℃，或在20至30℃培養(yǎng)使菌體增殖然后在5至20℃繼續(xù)培養(yǎng)，從而產(chǎn)生不飽和脂肪酸。通過這樣的溫度管理，所產(chǎn)生的脂肪酸中高度不飽和脂肪酸的比例可上升。培養(yǎng)基的pH為4至10，優(yōu)選地為5至9，通過通氣攪拌培養(yǎng)、振蕩培養(yǎng)或靜置培養(yǎng)進(jìn)行。培養(yǎng)通常進(jìn)行2至30天，優(yōu)選地為5至20天，更優(yōu)選地進(jìn)行5至15天。
進(jìn)一步地，作為提高含有ω-9不飽和脂肪酸的油脂(三酰甘油酯)中ω-9不飽和脂肪酸比例的方法，可對含有ω-9不飽和脂肪酸的油脂進(jìn)行選擇性加水分解而得到高含有ω-9不飽和脂肪酸的油脂。所述選擇性加水分解所使用的脂肪酶對三酰甘油酯不具有位置特異性，由于加水分解活性與雙鍵數(shù)成反比，不為高度不飽和脂肪酸的脂肪酸酯鍵被加水分解。這樣，所產(chǎn)生的PUFA部分甘油酯間的酯交換反應(yīng)等產(chǎn)生高度不飽和脂肪酸提高的三酰甘油酯(Enzymatic Fractionation and Enrichment of n-9 PUFA，J.Am.Oil Chem.Soc.，80，37-42(2003))。
因此，可將對含有ω-9不飽和脂肪酸的油脂(三酰甘油酯)進(jìn)行選擇性加水分解而得到的高含有ω-9不飽和脂肪酸的油脂(三酰甘油酯)作為本發(fā)明的活性成分。相對于含有本發(fā)明ω-9不飽和脂肪酸的油脂(三酰甘油酯)的總脂肪酸，ω-9不飽和脂肪酸的比率優(yōu)選地高，以排除其他脂肪酸的影響，其中所述ω-9不飽和脂肪酸具體而言為至少一種或一種以上選自6，9-十八碳二烯酸(18:2 ω9)、8，11-二十碳二烯酸(20:2 ω9)及5，8，11-二十碳三烯酸(20:3 ω9)的ω-9不飽和脂肪酸。
然而，本發(fā)明不限于高比率，在實(shí)際中，當(dāng)應(yīng)用于食品時(shí)有時(shí)會(huì)碰上ω-9不飽和脂肪酸的絕對量，基本上可使用含有ω-9不飽和脂肪酸20％重量或以上，優(yōu)選地30％重量或以上，更優(yōu)選地40％重量或以上的油脂(三酰甘油酯)。進(jìn)一步地，基本上可使用含有5，8，11-二十碳三烯酸(20:3 ω9)10％重量或以上，優(yōu)選地20％重量或以上，更優(yōu)選地30％重量或以上的油脂(三酰甘油酯)。
自可產(chǎn)生ω-9不飽和脂肪酸的微生物的培養(yǎng)菌體開始，通過菌體破壞，根據(jù)需要使干燥，用有機(jī)溶劑例如正己烷等進(jìn)行提取處理或通過用超臨界碳酸氣提取處理可獲得含有ω-9不飽和脂肪酸的油脂。另外，對上述油脂進(jìn)行加水分解和酯化操作可獲得含有ω-9不飽和脂肪酸的游離脂肪酸混合物或脂肪酸酯混合物。接下來，對上述游離脂肪酸混合物或脂肪酸酯混合物通過常規(guī)的尿素分級法、液液分配色譜、柱層析等，可獲得純度80％或以上的游離脂肪酸6，9-十八碳二烯酸、8，11-二十碳二烯酸及5，8，11-二十碳三烯酸以及脂肪酸酯。
另外，本發(fā)明的活性成分ω-9不飽和脂肪酸不必限于高純度的純化品，也可使用以ω-9不飽和脂肪酸為組成脂肪酸的化合物，具體而言為含有ω-9不飽和脂肪酸的單酰甘油酯、二酰甘油酯、三酰甘油酯、磷脂和糖脂。此外，可將以ω-9不飽和脂肪酸為組成脂肪酸的化合物單獨(dú)使用或與含有ω-9不飽和脂肪酸的游離脂肪酸混合物或脂肪酸酯混合物組合使用。
本發(fā)明涉及以ω-9不飽和脂肪酸為活性成分或以ω-9不飽和脂肪酸為組成脂肪酸的化合物為活性成分的針對伴隨肝功能障礙的肝臟疾病的預(yù)防劑或改善劑、涉及對伴隨肝功能障礙的肝臟疾病具有預(yù)防或改善作用的組合物或飲食，并涉及其制備方法。作為本發(fā)明對象的伴隨肝功能障礙的肝臟疾病，可列舉如病毒性肝炎、藥物性肝炎、醇性肝炎或脂肪型肝炎等引起的急性肝炎或慢性肝炎等。進(jìn)一步地，作為考慮了這些肝炎發(fā)展而發(fā)病的疾病，可列舉急性肝功能衰竭、肝硬變、肝細(xì)胞癌等。
對伴隨肝功能障礙的肝臟疾病具有預(yù)防或改善作用的飲食的制備方法中，可將ω-9不飽和脂肪酸和/或以ω-9不飽和脂肪酸為組成脂肪酸的化合物單獨(dú)使用，或與基本上不含有ω-9不飽和脂肪酸的飲食原料或與既使含有也僅含有少量ω-9不飽和脂肪酸的飲食原料組合使用。
特別地，在組成脂肪酸的部分或全部為ω-9不飽和脂肪酸的三酰甘油酯的情況下，油脂(三酰甘油酯)可用于無數(shù)種用途，可作為食品、飲料、化妝品、醫(yī)藥品的原料和添加物。因此，對其使用目的、使用量無任何限制。
例如，作為食品組合物，除了一般食品外，可例舉功能性食品、營養(yǎng)品、補(bǔ)助食品、早產(chǎn)兒配方奶、嬰幼兒配方奶、嬰幼兒食品、孕產(chǎn)婦食品或老人用食品等。此外，根據(jù)醫(yī)生的處方在營養(yǎng)師的管理下，在醫(yī)院調(diào)配飯食時(shí)可向任一食品中加入本發(fā)明的ω-9不飽和脂肪酸和/或以ω-9不飽和脂肪酸為組成脂肪酸的化合物，以當(dāng)場制備好的食品形式施與患者。
作為含油脂的食品例如有肉、魚和堅(jiān)果等本身含有油脂的天然食品、湯等在烹調(diào)時(shí)加入了油脂的食品、油炸圈餅(donut)等作為熱介質(zhì)而使用油脂的食品、奶油等油脂食品、小甜餅干等加工時(shí)加入油脂的加工食品、或硬餅干等加工結(jié)束時(shí)噴或涂上油脂的食品。進(jìn)一步地，可將油脂添加至不含油脂的農(nóng)產(chǎn)品、發(fā)酵食品、畜產(chǎn)品、水產(chǎn)品或飲料中。進(jìn)一步地，它們可為功能性產(chǎn)品或藥品的形式，例如可為經(jīng)腸營養(yǎng)劑、粉末劑、顆粒劑、片劑、內(nèi)服液、懸液、乳液、糖漿等加工形式。
另外，本發(fā)明的組合物除了含有本發(fā)明的活性成分外，還可含有通常在飲食品、藥品或準(zhǔn)藥品中使用的多種載體或添加物。特別優(yōu)選地含有防止本發(fā)明的活性成分氧化的抗氧化劑?？寡趸瘎┌ɡ缟印ⅫS酮衍生物、葉甜素、曲酸、沒食子酸衍生物、兒茶酸、款冬酸、棉酚、吡嗪衍生物、芝麻酚、愈創(chuàng)木酚、愈創(chuàng)木酸、對香豆酸、去甲二氫愈創(chuàng)木酸、固醇類、萜類、核酸堿基類、類胡蘿卜素類和木素類等天然抗氧化劑、以及以抗壞血酸-棕櫚酸酯、抗壞血酸-硬脂酸酯、丁基羥基苯甲醚(BHA)、丁基羥基甲苯(BHT)、單-叔丁基羥基醌(TBHQ)和4-羥甲基-2，6-二叔丁基酚(HMBP)為代表的合成抗氧化劑。
在生育酚中，作為相關(guān)化合物，可提及α-生育酚、β-生育酚、γ-生育酚、δ-生育酚、ε-生育酚、ξ-生育酚、η-生育酚和生育酚酯(生育酚乙酸酯等)以及生育三烯酚。在類胡蘿卜素中可提及例如β-胡蘿卜素、角黃素、蝦青素等。
本發(fā)明的組合物除了包含本發(fā)明的活性成分外，還可包含作為載體的多種載體、補(bǔ)充劑、稀釋劑、填充劑、分散劑、賦形劑、結(jié)合劑溶劑(如水、乙醇、植物油)、助溶劑、緩沖劑、溶解促進(jìn)劑、膠凝劑、混懸劑、小麥粉、米粉、淀粉、玉米淀粉、多糖、乳蛋白、膠原、米油、卵磷脂等。作為添加劑，包括但不限于例如維生素類、甜味劑、有機(jī)酸、著色劑、香料、防濕劑、纖維、電解質(zhì)、礦物質(zhì)、營養(yǎng)素、抗氧化劑、防腐劑、芳香劑、濕潤劑、天然食物提取物、蔬菜提取物等。
當(dāng)本發(fā)明的活性成分實(shí)際應(yīng)用于飲食品時(shí)，食品中混合的ω-9不飽和脂肪酸的絕對量也變得重要。但是，在食品中混合的絕對量也隨所混合的飲食品的攝取量而變化，因此當(dāng)將含有組成脂肪酸的一部分或全部為ω-9不飽和脂肪酸的三酰甘油酯的三酰甘油酯與食品混合時(shí)，以ω-9不飽和脂肪酸的量為0.001重量％或以上、優(yōu)選地0.01重量％或以上、更優(yōu)選地0.1重量％或以上進(jìn)行混合。進(jìn)一步地，對5，8，11-二十碳三烯酸，可使用0.0003重量％或以上、優(yōu)選地0.003重量％或以上、更優(yōu)選地0.03重量％或以上，并且根據(jù)常規(guī)的制備法進(jìn)行加工制備。
以對伴隨肝功能障礙的疾病的預(yù)防改善或健康維持為目的，作為標(biāo)準(zhǔn)，將含有本發(fā)明的脂肪酸的飲食品以每天經(jīng)口攝入本發(fā)明的脂肪酸0.001g至10g，優(yōu)選地0.001g至5g，更優(yōu)選地0.001g至2g。
本發(fā)明的組合物作為藥品使用時(shí)，可按照制劑技術(shù)領(lǐng)域慣用的方法如日本藥典中所記載的方法或根據(jù)所述方法的方法制造。
本發(fā)明的組合物作為藥品使用時(shí)，對組合物中的活性成分的混合量沒有特別的限制，只要能達(dá)到本發(fā)明的目的即可，可使用合適的混合比例。
本發(fā)明的組合物作為藥品使用時(shí)，可以為任何劑型，只要經(jīng)口施與或非經(jīng)口施與可行即可，例如可列舉注射劑、輸注液、散劑、顆粒劑、錠劑、膠囊劑、腸溶劑、片劑、內(nèi)用液劑、懸浮劑、乳劑、糖漿劑、外用液劑、濕布劑、滴鼻劑、滴耳劑、滴眼劑、吸入劑、軟膏劑、洗劑、坐劑等，它們可根據(jù)相應(yīng)的癥狀分別使用，特別地，優(yōu)選經(jīng)口施與。這些制劑可按照常規(guī)方法根據(jù)目的在主要成分中使用已知的輔助劑進(jìn)行制劑，其中所述已知的輔助劑為穩(wěn)定劑、防氧化劑、賦形劑、結(jié)合劑、崩解劑、潤滑劑、矯味劑等在藥物的制劑技術(shù)領(lǐng)域通?？墒褂玫妮o助劑。
本發(fā)明的組合物的施與量根據(jù)年齡、體重、癥狀、施與次數(shù)等而不同，例如成人(約60kg)一天施用本發(fā)明的ω-9不飽和脂肪酸和/或以ω-9不飽和脂肪酸為組成脂肪酸的化合物以ω-9不飽和脂肪酸換算通常約0.001g至20g，優(yōu)選地0.01g至10g，更優(yōu)選地0.05g至5g，最優(yōu)選地0.1g至2g，一日1次-3次施與。進(jìn)一步地，以5，8，11-二十碳三烯酸換算通常約0.0001g至10g，優(yōu)選地0.001g至5g，更優(yōu)選地0.01g至2g，最優(yōu)選地0.05g至2g，一日1次-3次施與。
知道了本發(fā)明的活性成分脂肪酸為在生物體內(nèi)缺乏必需脂肪酸的狀態(tài)下被生物合成的生物體組分。通過對7周齡的ICR雄性小鼠以2g/kg/天連續(xù)施與(經(jīng)口施與)2周，沒有觀察到任何異常的癥狀，可見在安全性方面也是良好的。
實(shí)施例下面通過實(shí)施例對本發(fā)明進(jìn)一步具體地說明。但是，本發(fā)明不限于這些實(shí)施例。
參考例1以ω-9不飽和脂肪酸為組成脂肪酸的三酰甘油酯的制備方法將含有4％葡萄糖和1％酵母提取物的培養(yǎng)基(pH6.0)5L置于10L發(fā)酵罐中，于120℃滅菌30分鐘。接種高山被孢霉(Mortierella alpina)的突變株SAM1861或SAM2086的100ml預(yù)培養(yǎng)液，通氣量1vvm，攪拌數(shù)為300轉(zhuǎn)/分鐘，進(jìn)行8天的通氣攪拌培養(yǎng)。培養(yǎng)溫度為培養(yǎng)開始時(shí)為28℃，自培養(yǎng)第2天下降至20℃。培養(yǎng)的第1至4天，每天添加1％的葡萄糖。
培養(yǎng)結(jié)束后，通過過濾、干燥回收具有以ω-9不飽和脂肪酸為組成脂肪酸的菌體，自得到的菌體通過己烷提取獲得油脂，經(jīng)過食用油脂的純化步驟(脫膠、脫酸、脫味、脫色)得到含有ω-9不飽和脂肪酸的三酰甘油酯(ω-9不飽和脂肪酸在三酰甘油酯的任一位置處結(jié)合)。
將得到的油脂(三酰甘油酯)甲酯化，對得到的脂肪酸甲酯氣相色譜分析時(shí)，培養(yǎng)SAM1861株可得到6，9-十八碳二烯酸(18:2 ω9)、8，11-二十碳二烯酸(20:2 ω9)和5，8，11-二十碳三烯酸(20:3 ω9)占總脂肪酸比例分別為12.94％、3.29％、16.38％；培養(yǎng)SAM2086株可得到6，9-十八碳二烯酸(18:2 ω9)、8，11-二十碳二烯酸(20:2 ω9)和5，8，11-二十碳三烯酸(20:3 ω9)占總脂肪酸比例分別為12.41％、3.58％、20.87％。
進(jìn)一步地，將上述含有ω-9不飽和脂肪酸的油脂(三酰甘油酯)乙酯化，因?yàn)闉楹?0％5，8，11-二十碳三烯酸乙酯的脂肪酸乙酯混合物，通過常規(guī)的高效液相色譜，可以分離純化98％純度的5，8，11-二十碳三烯酸乙酯。
實(shí)施例1通過肝功能障礙模型動(dòng)物評價(jià)含有ω-9不飽和脂肪酸的油脂1將8％棕櫚油(對照食物)添加至市售飼料、將參考例1制備的6，9-十八碳二烯酸(18:2 ω9)、8，11-二十碳二烯酸(20:2 ω9)和5，8，11-二十碳三烯酸(20:3 ω9)占總脂肪酸比例分別為12.94％、3.29％、16.38％的比例形成組成脂肪酸的油脂SUNTGM178％(蜜酸食物)添加至市售飼料、以及將含有22％DHA的魚油5％和三油精甘油酯3％的混合物(DHA食物)添加至市售飼料，施與4周齡雄性ddY品系小鼠3周后，使用生理鹽水溶解D-半乳糖胺和脂多糖分別至800mg/kg和25μg/kg，將它們混合(GalN/LPS)并腹膜內(nèi)施用。施用GalN/LPS 6周后取血，分離血清，測定血清中GPT、GOT活性，確認(rèn)了雖然施用GalN/LPS使得誘發(fā)了肝功能障礙，GPT、GOT活性上升，但蜜酸食物組與對照食物組和DHA食物組相比GPT、GOT活性顯著性降低，蜜酸明顯地可抑制肝功能障礙，該抑制效果較DHA強(qiáng)(圖1)。
實(shí)施例2通過肝功能障礙模型動(dòng)物評價(jià)含有ω-9不飽和脂肪酸的油脂2將8％棕櫚油(對照食物)添加至市售飼料、與實(shí)施例1同樣的SUNTGM17 8％(蜜酸食物)添加至市售飼料、以及將含有22％DHA的魚油5％和三油精甘油酯3％的混合物(DHA食物)添加至市售飼料，施與4周齡雄性ddY品系小鼠3周后，使用生理鹽水溶解D-半乳糖胺和脂多糖分別至800mg/kg和75μg/kg，將它們混合(GalN/LPS)并腹膜內(nèi)施用。施用GalN/LPS后，每隔1小時(shí)調(diào)查生存數(shù)，直至24小時(shí)后。計(jì)算生存率時(shí)，蜜酸食物組的生存率明顯高于對照組和DHA食物組(圖2)。
實(shí)施例3通過肝功能障礙模型動(dòng)物評價(jià)5，8，11-二十碳三烯酸乙酯自參考例1制備的油脂SUNTGM17純化的5，8，11-二十碳三烯酸乙酯(蜜酸)10mg/kg經(jīng)口施用1周后，使用生理鹽水溶解D-半乳糖胺和脂多糖分別至800mg/kg和25μg/kg，將它們混合(GalN/LPS)并腹膜內(nèi)施用。施用GalN/LPS 6周后取血，分離血清，測定血清中GPT、GOT活性，在對照食物組中GOT活性為1024±94IU/L，與之相比蜜酸施與組為413±37IU/L，認(rèn)為其可顯著性抑制肝功能障礙。
實(shí)施例4制備膠囊向明膠100重量份和食品添加劑甘油35重量份中加水，50至60℃溶解，制備粘度2000cp的明膠包衣。接下來，向自參考例1制備的以ω-9不飽和脂肪酸為組成脂肪酸的油脂(三酰甘油酯)混合0.05重量％的維生素E油，制備內(nèi)容物1。然后向參考例1獲得的98％5，8，11-二十碳三烯酸乙酯混合維生素E油0.05重量％，制備內(nèi)容物2。使用這些內(nèi)容物1和2，通過常規(guī)方法進(jìn)行膠囊化和干燥，制備1粒中含有200mg內(nèi)容物的軟膠囊。
實(shí)施例5用于脂肪輸注液中加入?yún)⒖祭?獲得的以ω-9不飽和脂肪酸為組成脂肪酸的油脂(三酰甘油酯)400g、純化的卵黃卵磷脂48g、油酸20g、甘油100g和0.1N氫氧化鈉40ml，使用勻漿器分散后，加入注射用蒸餾水至4L。將其使用高壓噴霧式乳化器進(jìn)行乳化，制備脂質(zhì)乳液。將每200ml該脂質(zhì)乳液分注入塑料袋中后，于121℃20分鐘進(jìn)行高壓蒸汽滅菌處理，成為脂肪輸注液。
實(shí)施例6用于汁液中將2gβ-環(huán)糊精添加至20％的乙醇水溶液20ml中，邊用攪拌器攪拌邊向其中加入?yún)⒖祭?獲得的以ω-9不飽和脂肪酸為組成脂肪酸的油脂(三酰甘油酯)(混合有0.05重量％的維生素E)100mg，50℃孵育2小時(shí)。室溫冷卻(約1小時(shí))后，接下來于攪拌的同時(shí)在4℃孵育10小時(shí)。通過離心回收所產(chǎn)生的沉淀，用正己烷洗凈后，進(jìn)行冷凍干燥，獲得含有以ω-9不飽和脂肪酸為組成脂肪酸的油脂(三酰甘油酯)的環(huán)糊精包接物1.8g。將該粉末1g均勻混合至10L汁液中，制備了含有以ω-9不飽和脂肪酸為組成脂肪酸的油脂(三酰甘油酯)的汁液。
權(quán)利要求
1.伴隨肝功能障礙的肝臟疾病的預(yù)防劑或改善劑，其包含ω-9不飽和脂肪酸或以ω-9不飽和脂肪酸為組成脂肪酸的化合物。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的伴隨肝功能障礙的肝臟疾病的預(yù)防劑或改善劑，其中所述以ω-9不飽和脂肪酸為組成脂肪酸的化合物是ω-9不飽和脂肪酸的醇酯、以ω-9不飽和脂肪酸為組成脂肪酸的單酰甘油酯、二酰甘油酯和/或三酰甘油酯、或者磷脂。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的伴隨肝功能障礙的肝臟疾病的預(yù)防劑或改善劑，其中所述以ω-9不飽和脂肪酸為組成脂肪酸的三酰甘油酯是ω-9不飽和脂肪酸相對于組成所述三酰甘油酯的總脂肪酸含有20％或以上。
4.根據(jù)權(quán)利要求1-3中任意一項(xiàng)所述的伴隨肝功能障礙的肝臟疾病的預(yù)防劑或改善劑，其中所述ω-9不飽和脂肪酸為至少一種選自6，9-十八碳二烯酸(18:2 ω9)、8，11-二十碳二烯酸(20:2 ω9)及5，8，11-二十碳三烯酸(20:3 ω9)的ω-9不飽和脂肪酸。
5.根據(jù)權(quán)利要求1-4中任意一項(xiàng)所述的伴隨肝功能障礙的肝臟疾病的預(yù)防劑或改善劑，其中所述以ω-9不飽和脂肪酸為組成脂肪酸的三酰甘油酯是通過對屬于被孢霉屬(Mortierella)、耳霉屬(Conidiobolus)、腐霉屬(Pythium)、疫霉屬(Phytophthora)、青霉屬(Penicillium)、枝孢屬(Cladosporium)、毛霉屬(Mucor)、鐮孢屬(Fusarium)、曲霉屬(Aspergillus)、紅酵母屬(Rhodotorula)、蟲霉屬(Entomophthora)、刺孢囊霉屬(Echinosporangium)、水霉屬(Saprolegnia)的并可產(chǎn)生花生四烯酸的微生物進(jìn)行突變處理而得到的Δ12去飽和活性低下或缺乏的微生物在培養(yǎng)基中培養(yǎng)，并自培養(yǎng)物提取而得到的。
6.根據(jù)權(quán)利要求1-5中任意一項(xiàng)所述的預(yù)防劑或改善劑，其中所述伴隨肝功能障礙的肝臟疾病為急性或慢性肝炎。
7.根據(jù)權(quán)利要求1-5中任意一項(xiàng)所述的預(yù)防劑或改善劑，其中所述伴隨肝功能障礙的肝臟疾病為急性肝功能衰竭、肝硬變和/或肝細(xì)胞癌。
8.對伴隨肝功能障礙的肝臟疾病具有預(yù)防或改善作用的組合物或飲食，其包含ω-9不飽和脂肪酸或以ω-9不飽和脂肪酸為組成脂肪酸的化合物。
9.權(quán)利要求8所述的對伴隨肝功能障礙的肝臟疾病具有預(yù)防或改善作用的組合物或飲食，其中所述以ω-9不飽和脂肪酸為組成脂肪酸的化合物是ω-9不飽和脂肪酸的醇酯、以ω-9不飽和脂肪酸為組成脂肪酸的單酰甘油酯、二酰甘油酯和/或三酰甘油酯、或者磷脂。
10.權(quán)利要求9所述的對伴隨肝功能障礙的肝臟疾病具有預(yù)防或改善作用的組合物或飲食，其中所述以ω-9不飽和脂肪酸為組成脂肪酸的三酰甘油酯為ω-9不飽和脂肪酸相對于構(gòu)成所述三酰甘油酯的總脂肪酸含有20％或以上。
11.根據(jù)權(quán)利要求8-10中任意一項(xiàng)所述的對伴隨肝功能障礙的肝臟疾病具有預(yù)防或改善作用的組合物或飲食，其中所述ω-9不飽和脂肪酸為至少一種選自6，9-十八碳二烯酸(18:2 ω9)、8，11-二十碳二烯酸(20:2 ω9)及5，8，11-二十碳三烯酸(20:3 ω9)的ω-9不飽和脂肪酸。
12.根據(jù)權(quán)利要求8-11中任意一項(xiàng)所述的對伴隨肝功能障礙的肝臟疾病具有預(yù)防或改善作用的組合物或飲食，其中所述以ω-9不飽和脂肪酸為組成脂肪酸的三酰甘油酯是通過對屬于被孢霉屬、耳霉屬、腐霉屬、疫霉屬、青霉屬、枝孢屬、毛霉屬、鐮孢屬、曲霉屬、紅酵母屬、蟲霉屬、刺孢囊霉屬、水霉屬的并可產(chǎn)生花生四烯酸的微生物進(jìn)行突變處理而得到的Δ12去飽和活性低下或缺乏的微生物在培養(yǎng)基中培養(yǎng)，并自培養(yǎng)物提取而得到的。
13.根據(jù)權(quán)利要求8-12中任意一項(xiàng)所述的具有預(yù)防或改善作用的組合物或飲食，其中所述伴隨肝功能障礙的肝臟疾病為急性或慢性肝炎。
14.根據(jù)權(quán)利要求8-12中任意一項(xiàng)所述的具有預(yù)防或改善作用的組合物或飲食，其中所述伴隨肝功能障礙的肝臟疾病為急性肝功能衰竭、肝硬變和/或肝細(xì)胞癌。
15.根據(jù)權(quán)利要求8-14中任意一項(xiàng)所述的對伴隨肝功能障礙的肝臟疾病具有預(yù)防或改善作用的組合物或飲食，其中所述飲食為功能性食品、營養(yǎng)補(bǔ)助食品、特定的保健用食品或老人用食品。
16.制備對伴隨肝功能障礙的肝臟疾病具有預(yù)防或改善作用的飲食的方法，其特征在于將ω-9不飽和脂肪酸和/或以ω-9不飽和脂肪酸為組成脂肪酸的化合物與基本上不含有或僅含有少量ω-9不飽和脂肪酸的飲食原料混合。
17.對伴隨肝功能障礙的肝臟疾病的預(yù)防方法或改善方法，其包括將ω-9不飽和脂肪酸或以ω-9不飽和脂肪酸為組成脂肪酸的化合物施與受試對象。
18.權(quán)利要求17所述的方法，其中所述以ω-9不飽和脂肪酸為組成脂肪酸的化合物是ω-9不飽和脂肪酸的醇酯、以ω-9不飽和脂肪酸為組成脂肪酸的單酰甘油酯、二酰甘油酯和/或三酰甘油酯、或者磷脂。
19.權(quán)利要求18所述的方法，其中所述以ω-9不飽和脂肪酸為組成脂肪酸的三酰甘油酯是ω-9不飽和脂肪酸相對于組成所述三酰甘油酯的總脂肪酸含有20％或以上。
20.權(quán)利要求17-19中任意一項(xiàng)所述的方法，其中所述ω-9不飽和脂肪酸為至少一種選自6，9-十八碳二烯酸(18:2 ω9)、8，11-二十碳二烯酸(20:2 ω9)及5，8，11-二十碳三烯酸(20:3 ω9)的ω-9不飽和脂肪酸。
21.權(quán)利要求17-20中任意一項(xiàng)所述的方法，其中所述以ω-9不飽和脂肪酸為組成脂肪酸的三酰甘油酯是通過對屬于被孢霉屬、耳霉屬、腐霉屬、疫霉屬、青霉屬、枝孢屬、毛霉屬、鐮孢屬、曲霉屬、紅酵母屬、蟲霉屬、刺孢囊霉屬、水霉屬的并可產(chǎn)生花生四烯酸的微生物進(jìn)行突變處理而得到的Δ12去飽和活性低下或缺乏的微生物在培養(yǎng)基中培養(yǎng)，并自培養(yǎng)物提取而得到的。
22.權(quán)利要求17-21中任意一項(xiàng)所述的方法，其中所述伴隨肝功能障礙的肝臟疾病為急性或慢性肝炎。
23.權(quán)利要求17-21中任意一項(xiàng)所述的方法，其中所述伴隨肝功能障礙的肝臟疾病為急性肝功能衰竭、肝硬變和/或肝細(xì)胞癌。
24.對伴隨肝功能障礙的肝臟疾病的預(yù)防方法或改善方法，其包括施與包含ω-9不飽和脂肪酸或以ω-9不飽和脂肪酸為組成脂肪酸的化合物的組合物或飲食。
25.權(quán)利要求24所述的方法，其中所述以ω-9不飽和脂肪酸為組成脂肪酸的化合物是ω-9不飽和脂肪酸的醇酯、以ω-9不飽和脂肪酸為組成脂肪酸的單酰甘油酯、二酰甘油酯和/或三酰甘油酯、或者磷脂。
26.權(quán)利要求25所述的方法，其中所述以ω-9不飽和脂肪酸為組成脂肪酸的三酰甘油酯是ω-9不飽和脂肪酸相對于組成所述三酰甘油酯的總脂肪酸含有20％或以上。
27.權(quán)利要求24-26中任意一項(xiàng)所述的方法，其中所述ω-9不飽和脂肪酸為至少一種選自6，9-十八碳二烯酸(18:2 ω9)、8，11-二十碳二烯酸(20:2 ω9)及5，8，11-二十碳三烯酸(20:3 ω9)的ω-9不飽和脂肪酸。
28.權(quán)利要求24-27中任意一項(xiàng)所述的方法，其中所述以ω-9不飽和脂肪酸為組成脂肪酸的三酰甘油酯是通過對屬于被孢霉屬、耳霉屬、腐霉屬、疫霉屬、青霉屬、枝孢屬、毛霉屬、鐮孢屬、曲霉屬、紅酵母屬、蟲霉屬、刺孢囊霉屬、水霉屬的并可產(chǎn)生花生四烯酸的微生物進(jìn)行突變處理而得到的Δ12去飽和活性低下或缺乏的微生物在培養(yǎng)基中培養(yǎng)，并自培養(yǎng)物提取而得到的。
29.權(quán)利要求24-28中任意一項(xiàng)所述的方法，其中所述伴隨肝功能障礙的肝臟疾病為急性或慢性肝炎。
30.權(quán)利要求24-28中任意一項(xiàng)所述的方法，其中所述伴隨肝功能障礙的肝臟疾病為急性肝功能衰竭、肝硬變和/或肝細(xì)胞癌。
31.權(quán)利要求24-30中任意一項(xiàng)所述的方法，其中所述飲食為功能性食品、營養(yǎng)補(bǔ)助食品、特定的保健用食品或老人用食品。
32.ω-9不飽和脂肪酸或以ω-9不飽和脂肪酸為組成脂肪酸的化合物的用途，用于制備對伴隨肝功能障礙的肝臟疾病的預(yù)防劑或改善劑。
33.權(quán)利要求32所述的用途，其中所述以ω-9不飽和脂肪酸為組成脂肪酸的化合物是ω-9不飽和脂肪酸的醇酯、以ω-9不飽和脂肪酸為組成脂肪酸的單酰甘油酯、二酰甘油酯和/或三酰甘油酯、或者磷脂。
34.權(quán)利要求33所述的用途，其中所述以ω-9不飽和脂肪酸為組成脂肪酸的三酰甘油酯是ω-9不飽和脂肪酸相對于組成所述三酰甘油酯的總脂肪酸含有20％或以上。
35.權(quán)利要求32-34中任意一項(xiàng)所述的用途，其中所述ω-9不飽和脂肪酸為至少一種選自6，9-十八碳二烯酸(18:2 ω9)、8，11-二十碳二烯酸(20:2 ω9)及5，8，11-二十碳三烯酸(20:3 ω9)的ω-9不飽和脂肪酸。
36.權(quán)利要求32-35中任意一項(xiàng)所述的用途，其中所述以ω-9不飽和脂肪酸為組成脂肪酸的三酰甘油酯是通過對屬于被孢霉屬、耳霉屬、腐霉屬、疫霉屬、青霉屬、枝孢屬、毛霉屬、鐮孢屬、曲霉屬、紅酵母屬、蟲霉屬、刺孢囊霉屬、水霉屬的并可產(chǎn)生花生四烯酸的微生物進(jìn)行突變處理而得到的Δ12去飽和活性低下或缺乏的微生物在培養(yǎng)基中培養(yǎng)，并自培養(yǎng)物提取而得到的。
37.權(quán)利要求32-36中任意一項(xiàng)所述的用途，其中所述伴隨肝功能障礙的肝臟疾病為急性或慢性肝炎。
38.權(quán)利要求32-36中任意一項(xiàng)所述的用途，其中所述伴隨肝功能障礙的肝臟疾病為急性肝功能衰竭、肝硬變和/或肝細(xì)胞癌。
39.ω-9不飽和脂肪酸或以ω-9不飽和脂肪酸為組成脂肪酸的化合物的用途，用于制備對伴隨肝功能障礙的肝臟疾病具有預(yù)防或改善作用的組合物或飲食。
40.權(quán)利要求39所述的用途，其中所述以ω-9不飽和脂肪酸為組成脂肪酸的化合物是ω-9不飽和脂肪酸的醇酯、以ω-9不飽和脂肪酸為組成脂肪酸的單酰甘油酯、二酰甘油酯和/或三酰甘油酯、或者磷脂。
41.權(quán)利要求40所述的用途，其中所述以ω-9不飽和脂肪酸為組成脂肪酸的三酰甘油酯是ω-9不飽和脂肪酸相對于組成所述三酰甘油酯的總脂肪酸含有20％或以上。
42.權(quán)利要求39-41中任意一項(xiàng)所述的用途，其中所述ω-9不飽和脂肪酸為至少一種選自6，9-十八碳二烯酸(18:2 ω9)、8，11-二十碳二烯酸(20:2 ω9)及5，8，11-二十碳三烯酸(20:3 ω9)的ω-9不飽和脂肪酸。
43.權(quán)利要求39-42中任意一項(xiàng)所述的用途，其中所述以ω-9不飽和脂肪酸為組成脂肪酸的三酰甘油酯是通過對屬于被孢霉屬、耳霉屬、腐霉屬、疫霉屬、青霉屬、枝孢屬、毛霉屬、鐮孢屬、曲霉屬、紅酵母屬、蟲霉屬、刺孢囊霉屬、水霉屬的并可產(chǎn)生花生四烯酸的微生物進(jìn)行突變處理而得到的Δ12去飽和活性低下或缺乏的微生物在培養(yǎng)基中培養(yǎng)，并自培養(yǎng)物提取而得到的。
44.權(quán)利要求39-43中任意一項(xiàng)所述的用途，其中所述伴隨肝功能障礙的肝臟疾病為急性或慢性肝炎。
45.權(quán)利要求39-43中任意一項(xiàng)所述的用途，其中所述伴隨肝功能障礙的肝臟疾病為急性肝功能衰竭、肝硬變和/或肝細(xì)胞癌。
46.權(quán)利要求39-45中任意一項(xiàng)所述的用途，其中所述飲食為功能性食品、營養(yǎng)補(bǔ)助食品、特定的保健用食品或老人用食品。
全文摘要
提供了以ω－9不飽和脂肪酸為活性成分的用于伴隨肝功能障礙的肝臟疾病的預(yù)防劑或改善劑。
文檔編號A23L1/30GK1842329SQ200580000860
公開日2006年10月4日 申請日期2005年1月19日 優(yōu)先權(quán)日2004年1月20日
發(fā)明者石倉義之, 河島洋, 濱崎智仁, 渡邊志朗 申請人:三得利株式會(huì)社