專利名稱：甜瓜雜交種的鑒定方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本項(xiàng)發(fā)明涉及甜瓜雜交種的鑒定方法，尤其是利用白莖性狀鑒定甜瓜雜交種的方法。
背景技術(shù)：
目前，甜瓜雜種一代品種已廣泛用于生產(chǎn)，但在人工制種過(guò)程中，由于隔離不嚴(yán)或人工去雄不及時(shí)、不徹底等原因，常混有母本自交系的種子而給生產(chǎn)造成損失，因此，雜交種在包裝銷售前，必須通過(guò)純度檢測(cè)。當(dāng)前，國(guó)內(nèi)外種子生產(chǎn)和經(jīng)營(yíng)部門對(duì)甜瓜雜交種純度的檢測(cè)主要采用的有以下三種方法1、種植法將當(dāng)年采收的甜瓜雜交種，取樣在適宜種植的環(huán)境里(溫室內(nèi)或異地)種植栽培，根據(jù)父母本植物學(xué)性狀的差異和性狀的遺傳規(guī)律，對(duì)雜交種的純度進(jìn)行鑒定。主要有葉緣的形狀(如葉緣無(wú)齒做母本，葉緣銳齒做父本，F(xiàn)1代呈父本性狀)，莖蔓的特征(如莖蔓光滑無(wú)毛做母本，有剛毛做父本，F(xiàn)1代呈父本性狀)，幼瓜的皮色(如淺色做母本，深色或帶花條做父本，F(xiàn)1代呈父本性狀)等。優(yōu)點(diǎn)該方法雖比較直觀可靠，技術(shù)簡(jiǎn)便，可大量操作，但不易早期識(shí)別，占地面積大，時(shí)間長(zhǎng)，且受環(huán)境氣候條件限制，成本也較高。
2、同工酶或蛋白質(zhì)法主要是利用聚丙稀酰胺凝膠或淀粉凝膠電泳技術(shù)，通過(guò)分析作為基因產(chǎn)物的蛋白質(zhì)和同工酶來(lái)鑒定甜瓜雜交種的純度。該方法先通過(guò)分析建立甜瓜雜交種及父母本標(biāo)準(zhǔn)的同工酶譜或蛋白譜帶，再以此為對(duì)照，對(duì)雜交種樣本進(jìn)行分析。該方法的優(yōu)點(diǎn)是可在室內(nèi)進(jìn)行，可早期識(shí)別，比較準(zhǔn)確。但技術(shù)操作要求嚴(yán)格，程序復(fù)雜，識(shí)別不直觀，有時(shí)重復(fù)性不夠好，要求一定的實(shí)驗(yàn)室條件，不易對(duì)大量樣本進(jìn)行分析。
3、DNA分析法根據(jù)分子生物學(xué)的原理，直接在DNA水平上對(duì)甜瓜雜種一代和其父母本進(jìn)行基因組差異分析，目前采用的技術(shù)手段主要有RAPD、RFLP、SSR等。與蛋白質(zhì)和同工酶分析相比，DNA分析的方法更能反映品種間基因組DNA的差異。該方法的優(yōu)點(diǎn)是可在室內(nèi)進(jìn)行，可早期識(shí)別，準(zhǔn)確性高，直觀性強(qiáng)，重復(fù)性好。但該技術(shù)同樣操作要求嚴(yán)格，程序復(fù)雜，需要較好的實(shí)驗(yàn)室條件，成本也相對(duì)較高，也不易對(duì)大量樣本分析，目前還無(wú)法在生產(chǎn)中廣泛應(yīng)用。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的技術(shù)問(wèn)題是簡(jiǎn)化甜瓜雜交種鑒定的方法，縮短鑒定所需時(shí)間，提高鑒定準(zhǔn)確性和及時(shí)性。
為了解決上述技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明采用的技術(shù)方案利用了甜瓜的白莖性狀，在幼苗期對(duì)甜瓜雜交種進(jìn)行鑒定。具體步驟是先將甜瓜白莖性狀轉(zhuǎn)入雜交組合的母本，使母本表現(xiàn)白莖性狀，再與具有綠莖性狀的父本進(jìn)行雜交得到雜種一代種子，然后將雜種一代種子播種，出苗后進(jìn)行觀察，出苗2～4天后，下胚軸為白色的單株不是雜交種，下胚軸為綠色的單株是雜交種。
所述的將甜瓜白莖性狀轉(zhuǎn)入雜交組合母本的方法，可以采用雜交方法，也可以采用基因工程的方法。
本發(fā)明的有益效果在于可早期直觀識(shí)別，在甜瓜幼苗期即可識(shí)別出雜種株和非雜種株，可使種子早期進(jìn)入流通。該方法簡(jiǎn)便易行，快速準(zhǔn)確，易于普及推廣，種子投入生產(chǎn)后，瓜農(nóng)也可在育苗時(shí)就能準(zhǔn)確識(shí)別并剔除非雜種苗，避免因?yàn)榉N子雜交率不夠給生產(chǎn)帶來(lái)經(jīng)濟(jì)損失；該方法不易受環(huán)境和條件限制，在室內(nèi)外均可進(jìn)行鑒定，而且設(shè)備簡(jiǎn)單，利用育苗盤和簡(jiǎn)單設(shè)施就可完成，成本費(fèi)用低廉，也易于對(duì)大量樣本進(jìn)行鑒定；該方法準(zhǔn)確可靠，甜瓜白莖性狀為質(zhì)量性狀，在幼苗期及以后整個(gè)生長(zhǎng)期內(nèi)，雜種苗與非雜種苗均有穩(wěn)定的明顯區(qū)別，可隨時(shí)鑒定；該方法適用范圍廣，不受品種局限，對(duì)品種的產(chǎn)量、品質(zhì)等無(wú)任何不良影響。


圖1是本發(fā)明甜瓜雜交種鑒定方法中甜瓜雜交過(guò)程的示意圖。
具體實(shí)施例方式
下面結(jié)合附圖對(duì)本發(fā)明中的具體實(shí)施例作進(jìn)一步說(shuō)明。
發(fā)明人從收集的甜瓜種質(zhì)資源中發(fā)現(xiàn)了具有白莖性狀的單株，進(jìn)行了自交留種，并對(duì)該性狀進(jìn)行連續(xù)觀察和遺傳特性研究。研究表明，甜瓜白莖性狀是由一對(duì)等位基因控制遺傳的隱性性狀，具有一定的遺傳規(guī)律，易于通過(guò)雜交轉(zhuǎn)育的方法將白莖性狀轉(zhuǎn)入甜瓜母本材料進(jìn)行利用。而且具備白莖性狀的甜瓜材料，自出苗起就與一般甜瓜材料有明顯的區(qū)別，其下胚軸呈白色，而一般甜瓜材料的下胚軸在出土當(dāng)天內(nèi)即轉(zhuǎn)為綠色，這種差別一直保持到植株?duì)I養(yǎng)生長(zhǎng)的停止，因此白莖也適于作為標(biāo)記性狀。
如圖1所示，把具有白莖性狀的親本作為母本，把具有正常綠莖的親本作為父本進(jìn)行雜交得到雜交一代(F1)，把F1再自交得到第二代(F2)，F(xiàn)2中白莖和正常綠莖的單株分離比率為1∶3；F1與白莖親本回交后代中，白莖和正常綠莖的單株分離比率為1∶1，以此可進(jìn)行白莖性狀的雜交轉(zhuǎn)移，選育新的白莖甜瓜品系。把具有白莖性狀的親本與具有正常綠莖性狀的親本雜交后，雜交一代(F1)單株中白莖性狀消失，植株表現(xiàn)為正常綠莖，非雜交種單株的莖呈白色，以此可檢測(cè)甜瓜種子純度或雜交率。
具體計(jì)算公式如下
采用具備甜瓜白莖性狀的優(yōu)良品種做母本進(jìn)行雜交組合的選配，或把甜瓜白莖性狀通過(guò)一般雜交或基因工程技術(shù)方法轉(zhuǎn)移到某成功雜交組合的母本上，這樣的雜種一代雜種單株在幼苗期(出苗后2～4天內(nèi))即可實(shí)現(xiàn)準(zhǔn)確鑒定。非雜交種單株從出苗開(kāi)始就與雜交種單株有明顯區(qū)別，非雜交種幼苗下胚軸呈白色性狀，而雜交種幼苗下胚軸呈綠色性狀，這種差別一直保持到植株?duì)I養(yǎng)生長(zhǎng)的停止。
選育并利用優(yōu)良甜瓜白莖品系M55-3，其果實(shí)橢圓型，白色光皮，在大棚立架栽培條件下，平均單果重2kg左右，果肉淡橘紅色，肉質(zhì)松脆細(xì)膩，中心折光糖16度以上，具有較強(qiáng)的配合力。利用它選配的新雜交種組合FM541，果實(shí)橢圓型，白色光皮，在大棚立架栽培條件下，平均單果重1.5kg左右，果肉橘紅色，肉質(zhì)松脆細(xì)膩，中心折光糖17度以上，田間抗性表現(xiàn)優(yōu)良，具有廣闊的市場(chǎng)前景。
權(quán)利要求
1.一種鑒定甜瓜雜交種的方法，其特征在于將甜瓜的白莖性狀轉(zhuǎn)入雜交組合的母本，使母本表現(xiàn)出白莖性狀，將母本與具有綠莖性狀的父本雜交得到雜種一代，播種雜種一代出苗后，對(duì)雜種一代進(jìn)行觀察，出苗2～4天后莖呈白色的單株不是雜交種，莖呈綠色的單株是雜交種。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種鑒定甜瓜雜交種的方法，其特征在于利用雜交或基因工程的方法把白莖性狀轉(zhuǎn)入母本中。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種鑒定甜瓜雜交種的方法，其特征在于所述白莖性狀是由一對(duì)等位基因控制遺傳的隱性性狀。
4.根據(jù)權(quán)利要求1、2或3所述的一種鑒定甜瓜雜交種的方法，其特征在于所述白莖性狀為在幼苗期下胚軸呈白色的性狀。
全文摘要
本發(fā)明要解決的技術(shù)問(wèn)題是，簡(jiǎn)化甜瓜雜交種鑒定的方法，縮短鑒定所需時(shí)間，提高鑒定準(zhǔn)確性和及時(shí)性。解決該技術(shù)問(wèn)題采取的技術(shù)方案是利用甜瓜的白莖性狀，對(duì)甜瓜雜交種進(jìn)行鑒定。其步驟是先將甜瓜的白莖性狀轉(zhuǎn)入雜交組合的母本，使母本表現(xiàn)出白莖性狀，再與具有綠莖性狀的父本進(jìn)行雜交得到雜種一代，然后將雜種一代播種，出苗后進(jìn)行觀察，出苗2～4天后下胚軸呈白色的單株不是雜交種，下胚軸呈綠色的單株是雜交種。該方法的優(yōu)點(diǎn)是可早期直觀識(shí)別、不易受環(huán)境條件和設(shè)備條件的限制、準(zhǔn)確可靠、簡(jiǎn)單易行、適用范圍廣。
文檔編號(hào)C12N15/00GK101027963SQ200610024240
公開(kāi)日2007年9月5日 申請(qǐng)日期2006年2月28日 優(yōu)先權(quán)日2006年2月28日
發(fā)明者馬國(guó)斌 申請(qǐng)人:上海市農(nóng)業(yè)科學(xué)院園藝研究所