專(zhuān)利名稱(chēng)：一種海參用海洋膠紅酵母的生產(chǎn)方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及海洋微生物應(yīng)用技術(shù)及海參養(yǎng)殖，具體的說(shuō)是一種海參用海洋 膠紅酵母的生產(chǎn)方法。
技術(shù)背景海洋紅酵母(及/zo必tora/a g/M""/s //fl^^o")是真菌界、真菌門(mén)、粘菌亞 門(mén)、隱球酵母科，繁殖方式為無(wú)性芽殖。其生態(tài)分布廣泛，主要分布在海水、 海泥、海珍品養(yǎng)殖池中。其碳源氮源利用廣泛，能利用葡萄糖、麥芽糖、蔗糖、 半乳糖、阿拉伯糖、甘露醇、琥珀酸、檸檬酸、木糖、山梨醇、果糖、乙醇和 甘油；不能利用鼠李糖、淀粉、纖維二糖、海藻糖、核糖醇、肌醇、赤蘚醇、 蜜二糖。并具有生長(zhǎng)繁殖速度快、容易培養(yǎng)、菌體及代謝產(chǎn)物營(yíng)養(yǎng)豐富等特點(diǎn)， 其產(chǎn)品能廣泛用于食品工業(yè)、詞料工業(yè)、水產(chǎn)養(yǎng)殖、環(huán)境保護(hù)和保健醫(yī)藥等諸 多方面；因此，愈來(lái)愈受到科技工作者和企業(yè)界人士重視。在以往研究中，人們對(duì)海洋紅酵母的分類(lèi)學(xué)地位、生理生化特征、發(fā)酵條 件及其調(diào)控等方面均有較深入的研究。對(duì)海洋紅酵母的應(yīng)用研究也獲得很大的 進(jìn)展。但對(duì)海洋膠紅酵母(T^^foton^ mwc//ag/"osfl)的研究報(bào)道不多。海 洋膠紅酵母在分類(lèi)學(xué)上屬于海洋紅酵母中的一種，其菌體及其分泌物中含有豐 富的蛋白質(zhì)、氨基酸、維生素，不飽和脂肪酸、類(lèi)胡蘿卜素和蝦青素等生物活 性物質(zhì)。經(jīng)測(cè)定海洋膠紅酵母中所含的蝦青素(類(lèi)胡蘿卜素)^8000ppm，蛋 白質(zhì)250%,賴(lài)氨酸100ppm,精氨酸100ppm，蛋氨酸100ppm，在農(nóng)業(yè)環(huán)保、保健醫(yī) 藥、尤其是在水產(chǎn)養(yǎng)殖中均有較高的應(yīng)用價(jià)值。目前，在海參養(yǎng)殖中,經(jīng)常使用的海參幼體餌料有雞蛋黃、豆?jié){、食用酵母、 釀酒酵母和單細(xì)胞藻類(lèi)等代用餌料。雞蛋黃、豆?jié){,容易造成水質(zhì)污染，食用 酵母和釀酒酵母在海水中不能存活且分散性、懸浮性不好，也容易造成水質(zhì)污 染。單細(xì)胞等藻類(lèi)應(yīng)用效果好，但大量培養(yǎng)時(shí)需要大量占用育苗場(chǎng)地和設(shè)施并 受氣候環(huán)境影響和制約,常常影響育苗。而低溫型海參用海洋膠紅酵母的營(yíng)養(yǎng) 成分好、在高滲透壓的海水中能存活繁殖且懸浮性好，活性物質(zhì)穩(wěn)定、不造成水質(zhì)污染?？梢岳冒l(fā)酵罐工廠化生產(chǎn),不受場(chǎng)地、設(shè)施、環(huán)境的影響和制約。 海洋紅酵母在海參育苗中的應(yīng)用國(guó)內(nèi)外報(bào)導(dǎo)很多,但低溫型海參用海洋膠紅酵母的分離、生產(chǎn)及應(yīng)用未見(jiàn)報(bào)導(dǎo)。海洋膠紅酵母在海參育苗和養(yǎng)成中應(yīng)用, 可以提高種苗繁殖能力和存活能力，可以促進(jìn)個(gè)體生長(zhǎng)、增強(qiáng)免疫力、抗病力 和皮膚肌肉色澤，可以促進(jìn)營(yíng)養(yǎng)消化吸收。并且可以?xún)艋|(zhì)、分解水中有機(jī) 物、硫化氫、氨化物等對(duì)海參不利的污染物，無(wú)毒、無(wú)害、無(wú)任何副作用，正
常使用不會(huì)導(dǎo)致海參產(chǎn)生耐受性，是一種綠色的生物餌料添加劑。具有廣闊的 市場(chǎng)前景。近年來(lái)，人們非常重視海洋資源的開(kāi)發(fā)和利用，尤其是在海珍品的育苗 和養(yǎng)殖上應(yīng)用海洋酵母取得了非常理想的結(jié)果，現(xiàn)在存在的主要問(wèn)題是①常 規(guī)的培養(yǎng)方法菌株生長(zhǎng)繁殖速度慢、培養(yǎng)時(shí)間長(zhǎng)，含菌濃度低。②菌株特性不 明顯，營(yíng)養(yǎng)中的蝦青素和賴(lài)氨酸含畺不高，菌種不純、易退化，不能滿足生產(chǎn) 應(yīng)用的需求。國(guó)內(nèi)科研單位正在篩選含有蝦青素和賴(lài)氨酸、精氨酸、蛋氨酸含 量高的紅酵母菌種。根據(jù)蝦青素、賴(lài)氨酸、精氨酸、蛋氨酸的特性和在諸多方 面的功能,我們已經(jīng)分離、純化、鑒定出多株海洋紅酵母，經(jīng)過(guò)馴化、培育、 提高得到一株含有蝦青素、賴(lài)氨酸、精氨酸、蛋氨酸含量高、活性好、生長(zhǎng)速度快的低溫型海參用的海洋膠紅酵母(朋o&ton^ mwa7Gg/"oraMY96)，其應(yīng)用效果非常好,已在大連地區(qū)的旅順、長(zhǎng)興島、交流島等沿海地區(qū)廣泛應(yīng) 用,并且實(shí)現(xiàn)產(chǎn)品的商品化生產(chǎn)。發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明目的在于提供一種生產(chǎn)方法簡(jiǎn)單、生產(chǎn)周期短成本低、產(chǎn)品質(zhì)量高、 應(yīng)用效果好的海參用海洋膠紅酵母生物餌料的生產(chǎn)方法。其特點(diǎn)是:所采用菌 種是已知的，采用微生物兩級(jí)發(fā)酵技術(shù),原料來(lái)源廣泛,價(jià)格低廉，發(fā)酵過(guò)程中菌 體生長(zhǎng)繁殖速度快，后處理工藝簡(jiǎn)單,產(chǎn)品濃度高、活性高、應(yīng)用范圍廣、效果 好。為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案為以陳海水、葡萄糖和無(wú)機(jī)鹽為發(fā)酵原料,采用低溫型海參用海洋膠紅酵母 菌種,經(jīng)過(guò)兩級(jí)微生物發(fā)酵，離心濃縮，生產(chǎn)制造低溫型海參用海洋膠紅酵母生 物餌料。具體為:一種海參用海洋膠紅酵母的生產(chǎn)方法，所采用菌種為常規(guī)的海洋膠 紅酵母菌種，以陳海水為原料，其中添加有占總重量1.0-3.8%葡萄糖及l(fā)-3ml EDTA-Fe/每升陳海水,培養(yǎng)溫度為15°C 25。C;經(jīng)工廠化兩級(jí)液體發(fā)酵生產(chǎn)種 子液和發(fā)酵液;發(fā)酵液經(jīng)離心濃縮制成高濃度高活性海參用海洋膠紅酵母生物 餌料。海洋膠紅酵母液體生物餌料每毫升活菌數(shù)210億個(gè)。所述陳海水為天然 海水放置到暗處儲(chǔ)放2-3周，雜質(zhì)沉淀后過(guò)濾而成，鹽濃度為2.8-3.0%。所述EDTA-Fe即為乙二銨四乙酸二鈉與硫酸亞鐵螯合而成，螯合液中二 價(jià)鐵濃度為O.IM。所述海洋膠紅酵母菌種液體種子罐發(fā)酵培養(yǎng)，其培養(yǎng)基的重 量組成為:葡萄糖1.0-3.8%、蛋白胨0.5-1.2%、酵母膏0.2-1.0%、硫酸銨0.5-1.0%、 磷酸氫二鉀0.1-0.3%、磷酸二氫鉀0.1-0.3%、硫酸鎂0.1-0.5%、余量為陳海水、 l-3mffiDTA- Fe/每升陳海水、pH 3.8-8.8;種子罐發(fā)酵培養(yǎng)條件為罐壓 0.01-0.10Mpa、風(fēng)量100:10 120 (vvm為每分鐘單位體積發(fā)酵液，通過(guò)壓縮 空氣的體積)、轉(zhuǎn)速220-260rpm,培養(yǎng)溫度為15r 25。C,時(shí)間為48 72h。 所述海洋膠紅酵母生產(chǎn)罐發(fā)酵培養(yǎng)基的重量組成為葡萄糖1.0-3.8%、蛋 白胨0.6-1.5%、酵母膏0.3-1.0%、硫酸銨0.5-1.0%、磷酸氫二鉀0.1-0.5%、磷 酸二氫鉀0.1-0.5%、硫酸鎂0.1-0.5%、余量為陳海水、l-3mlEDTA-Fe/每升陳 海水、pH3.8-8.8;生產(chǎn)罐發(fā)酵培養(yǎng)條件為:罐壓0.05-0.06Mpa、風(fēng)量100:10 100:150wm、轉(zhuǎn)速200-230rpm,培養(yǎng)溫度為15。C 20。C，時(shí)間為48 96h。較好的生產(chǎn)罐發(fā)酵培養(yǎng)基重量組成為:葡萄糖3.6%、蛋白胨1.0%、酵母膏 0.5%、硫酸銨0.5%、磷酸氫二鉀0.1%、磷酸二氫鉀0.1%、硫酸鎂0.1%、余 量為陳海水、2mlEDTA-Fe/每升陳海水、pH5.8;生產(chǎn)罐發(fā)酵培養(yǎng)條件為:罐壓 0.06Mpa、風(fēng)量100:120vvm、轉(zhuǎn)速200rpm，最適培養(yǎng)溫度為22'C,時(shí)間為72h。本發(fā)明具有如下優(yōu)點(diǎn)1. 生產(chǎn)周期短，發(fā)酵工藝成熟,易于生產(chǎn)推廣。本發(fā)明吸取有關(guān)海洋微生物 生物制劑生產(chǎn)方法的優(yōu)點(diǎn),采用已知的海參用海洋膠紅酵母為菌種,以陳海水、 葡萄糖和無(wú)機(jī)鹽為原料，生產(chǎn)原料來(lái)源廣泛、價(jià)格低廉。經(jīng)種子罐、發(fā)酵罐兩 級(jí)發(fā)酵培養(yǎng)，并將發(fā)酵液離心濃縮制成高濃度高活性生物餌料，生產(chǎn)工藝過(guò)程簡(jiǎn) 單，兩級(jí)發(fā)酵是在低溫酸性條件下，對(duì)發(fā)酵過(guò)程進(jìn)行全程控制,抗污染能力強(qiáng),種 子罐微生物繁殖速度快,生產(chǎn)罐發(fā)酵菌數(shù)高,生產(chǎn)周期從常規(guī)的120h縮短到72h. 節(jié)省能源，降低成本。易于進(jìn)行生產(chǎn)推廣。2. 產(chǎn)品質(zhì)量高，營(yíng)養(yǎng)價(jià)值高，應(yīng)用效果好，對(duì)環(huán)境友好。本發(fā)明采用海參 用海洋膠紅酵母菌種，采用兩級(jí)微生物發(fā)酵技術(shù)，發(fā)酵得到的產(chǎn)品每毫升菌懸液 含海洋膠紅酵母活菌數(shù)210億個(gè)。生產(chǎn)的海洋膠紅酵母中所含的奸青素(類(lèi)胡 蘿卜素)^000ppm，蛋白質(zhì)250n/。,賴(lài)氨酸100ppm,精氨酸100ppm，蛋氨酸100ppm， 不飽和脂肪酸215%等生物活性物質(zhì)產(chǎn)品質(zhì)量好。在海參育苗中應(yīng)用,可使參苗 存活率提高20%，在稚參和幼參養(yǎng)殖中應(yīng)用可以提高抗病力、海參肌肉色澤 鮮艷，個(gè)體生長(zhǎng)加快、營(yíng)養(yǎng)價(jià)值均衡和適口性、營(yíng)養(yǎng)消化吸收和飼料的消化利 用率等方面均有很好的效果。不污染水質(zhì)，對(duì)環(huán)境友好，深受用戶歡迎，易于生 產(chǎn)和推廣應(yīng)用。
具體實(shí)施方式
本發(fā)明獲得的海參用海洋膠紅酵母含有豐富的蛋白質(zhì)、氨基酸、維生素， 不飽和脂肪酸、類(lèi)胡蘿卜素、蝦青素等生物活性物質(zhì)。蟲(chóng)下青素化學(xué)名稱(chēng)為3，3'-二羥基-4，4'-二酮基-卩-胡蘿卜素，是脂溶性艷麗紅色色素，具有促生長(zhǎng)、抗病、增 色作用，具有促進(jìn)營(yíng)養(yǎng)消化吸收和對(duì)飼料的消化利用作用。海洋膠紅酵母生產(chǎn)發(fā)酵步驟如下1 .種母活化將海參用海洋膠紅酵母(/^odotonz/a mwcz'/a^VKwa MY96)等種母，分別 移接至新配制的裝有海洋膠紅酵母培養(yǎng)基的克氏瓶斜面上，活化培養(yǎng)72-96h，溫 度25'C，活化成熟后的克氏瓶中的菌體稱(chēng)為種子。種母活化用斜面培養(yǎng)基組成 為葡萄糖30g、蛋白胨10g、酵母膏5g、硫酸銨5g、磷酸氫二鉀lg、磷酸二 氫鉀lg、硫酸鎂lg、 lmlEDTA-Fe/每升陳海水、陳海水1000mL、瓊脂25g、pH6.0;0.8個(gè)大氣壓18分鐘滅菌。最適培養(yǎng)溫度為22'C，時(shí)間為72h。 2種子罐接種與培養(yǎng)條件將活化好的克氏瓶中的海參用海洋膠紅酵母的種子1瓶,再無(wú)菌室內(nèi)用 200mL無(wú)菌水洗入至500mL無(wú)菌的三角瓶中,用火焰接種法或壓差法接種到50 立升的種子罐(或100立升的種子罐)中,裝液量不超過(guò)70%，進(jìn)行培養(yǎng)，種子罐 培養(yǎng)條件為罐壓0.05 Mpa、風(fēng)量100:50wm、轉(zhuǎn)速230rpm,最適培養(yǎng)溫度為 22。C，時(shí)間為48h。在顯微鏡下鏡檢菌體運(yùn)動(dòng)活潑,整齊，葡萄串狀和分散狀各占 50%時(shí),無(wú)污染，供種子發(fā)酵罐進(jìn)一步擴(kuò)大繁殖用。3 .生產(chǎn)罐接種與培養(yǎng)條件將成熟的種子罐中的種子液，用壓差法接種到500立升的生產(chǎn)罐(或1000 立升的生產(chǎn)罐)中,裝液量不超過(guò)70%，進(jìn)行培養(yǎng)，生產(chǎn)罐發(fā)酵培養(yǎng)條件為:罐壓 0.06Mpa、風(fēng)量100:120vvm、轉(zhuǎn)速200rpm，最適培養(yǎng)溫度為2(TC，時(shí)間為72h。4. ^產(chǎn)罐發(fā)酵與觀察如采用海洋膠紅酵母(及/zocfotora/a mM"7ag/"o^ MY96)菌種發(fā)酵,則出 現(xiàn)脂溶性艷麗紅色素，可為放罐標(biāo)志。采樣時(shí)用三角瓶裝入200/500ml發(fā)酵液， 靜置觀察,發(fā)酵液呈粉紅色、橙色和艷麗紅色,液體表面有一個(gè)環(huán),環(huán)越薄越清晰 越好，嗅覺(jué)感微酸、無(wú)異味。顯微鏡下鏡檢菌體整齊,健壯，無(wú)污染，呈簇狀、葡 萄串狀消失，分散狀占100%，含活菌可達(dá)到10億/ ml以上。此發(fā)酵液含海洋膠 紅酵母每毫升的活菌數(shù)ao億個(gè)以上，可供離心用。本實(shí)施例采用的海參用海洋膠紅酵母菌種發(fā)酵，最佳培養(yǎng)基配方及發(fā)酵 條件為:葡萄糖3.0%、蛋白胨1.0%、酵母膏0.5%、硫酸銨0.5%、磷酸氫二鉀 0.3%、磷酸二氫鉀0.3%、硫酸鎂0.5%、 lmlEDTA-Fe/每升陳海水、余量為陳 海水、pH5.6;風(fēng)量100:50wm、轉(zhuǎn)速200rpm、培養(yǎng)溫度為22。C,時(shí)間為48h。5. 發(fā)酵液離心濃縮與產(chǎn)品配制發(fā)酵結(jié)束后，將發(fā)酵液在離心機(jī)上進(jìn)行4000 rpm,10分鐘離心,離心后用無(wú) 菌的陳海水將海參用海洋膠紅酵母菌體稀釋至所要求的標(biāo)準(zhǔn)。產(chǎn)品為液體菌懸 液，標(biāo)準(zhǔn)分別為含海洋膠紅酵母100、 150、 200億個(gè)活菌數(shù)/每毫升菌懸液。6. 產(chǎn)品儲(chǔ)存和使用方法將產(chǎn)品速凍后冷藏冷凍存放，-l(TC -2(TC冷凍可保存12個(gè)月，0°C 4°C 冷藏可保存30天，15"C 25t:常溫下可保存7天。為保持海洋膠紅酵母的生物 活性，盡量不要在常溫下保藏。使用時(shí)在冷水中緩慢溶解溶化，溶化時(shí)蓋緊瓶 蓋防止污染,然后將容器中的海洋膠紅酵母搖勻，根據(jù)計(jì)算的用量，用海水進(jìn)行 定量稀釋?zhuān)稚姙⒌胶⒂绯刂羞M(jìn)行應(yīng)用。申請(qǐng)者們采用了中國(guó)科學(xué)院沈陽(yáng)應(yīng)用生態(tài)研究所分離、純化、鑒定的海洋 膠紅酵母(i^ofifotorw/a mw"7ag/"asaMY96)，在大連五島海珍品公司養(yǎng)殖基 地的生產(chǎn)實(shí)踐中進(jìn)行馴化、培育、提高,獲得了高濃度高活性的低溫型海參用 海洋膠紅酵母。其應(yīng)用效果非常好，己在大連地區(qū)的旅順、長(zhǎng)興島、交流島等
沿海地區(qū)廣泛應(yīng)用，并且實(shí)現(xiàn)產(chǎn)品的商品化生產(chǎn)。經(jīng)馴化、培育、提高，獲得高濃度高活性的低溫型海參用海洋膠紅酵母(/^odotorw/a /m/c//ag/wo^ MY96)，在顯微鏡下觀察,細(xì)胞形態(tài)為:球狀或卵圓 狀，球狀直徑為2.3-4.3(im,卵圓狀直徑大小為2.3 3.5^mx3.5 5.0nm，細(xì)胞大多呈簇狀、葡萄狀或單個(gè)狀排列,繁殖方式是芽殖，多端出芽,好氧。在平皿培養(yǎng)基 上觀察，菌落形態(tài)為:圓形，菌落隆起,邊緣圓整，表面濕潤(rùn)、光滑、粘稠、容易挑 起，質(zhì)地均勻,正面與反面以及中央部位顏色一致，無(wú)假菌絲,直徑為21.2 33.5拜。在麥芽汁或土豆瓊脂培養(yǎng)基上可分離純化出單菌落，呈紅色或橙紅色， 凸起，粘，挑起時(shí)感到粘而有彈性。海參用海洋膠紅酵母(/ / ocfoton^a wwcz7ag/wwaMY96)，在海參育苗中 應(yīng)用，可使海參成活率提高20%;在幼稚參養(yǎng)殖中應(yīng)用,可加快生長(zhǎng)發(fā)育增強(qiáng)免 疫功能，提高抗病能力,促進(jìn)消化吸收，能明顯增加海參的皮膚色澤，使艷麗紅著 色率達(dá)到30%,從試驗(yàn)結(jié)果可以看出,海參用海洋膠紅酵母對(duì)海參變態(tài)、稚參和 幼參養(yǎng)殖中的應(yīng)用均具非常理想的結(jié)果。
權(quán)利要求
1.一種海參用海洋膠紅酵母的生產(chǎn)方法，所采用菌種為常規(guī)的海洋膠紅酵母菌種，其特征在于以陳海水為原料，其中添加有占總重量1.0-3.8％葡萄糖及1-3ml EDTA-Fe/每升陳海水，培養(yǎng)溫度為15℃～25℃。經(jīng)工廠化兩級(jí)液體發(fā)酵生產(chǎn)種子液和發(fā)酵液；發(fā)酵液經(jīng)離心濃縮制成高濃度高活性海參用海洋膠紅酵母生物餌料。
2. 按照權(quán)利要求1所述的生產(chǎn)方法，其特征在于:所述陳海水為天然海水放 置到暗處儲(chǔ)放2-3周，雜質(zhì)沉淀后過(guò)濾而成，鹽濃度為2.8-3.0 %。
3. 按照權(quán)利要求1所述的生產(chǎn)方法，其特征在于:所述EDTA-Fe即為乙二 銨四乙酸二鈉與硫酸亞鐵螯合而成，螯合液中二價(jià)鐵濃度為O.IM。
4. 按照權(quán)利要求1所述的生產(chǎn)方法,其特征在于:所述海洋膠紅酵母菌液體 種子罐發(fā)酵培養(yǎng),其種子發(fā)酵培養(yǎng)基的重量組成為:葡萄糖1.0-3.8%、蛋白胨 0.5-1.2%、酵母膏0.2-1.0°/。、硫酸銨0.5-1.0°/。、磷酸氫二鉀0.1-0.3%、磷酸二 氫鉀0.1-0.3%、硫酸鎂0.1-0.5%、余量為陳海水、l-3m正DTA-Fe/每升陳海水、 pH 3.8-8.8;種子罐發(fā)酵培養(yǎng)條件為:罐壓0.01-0.10Mpa、風(fēng)量100:10 120wm、 轉(zhuǎn)速220-260rpm，培養(yǎng)溫度為15'C 25t:,時(shí)間為48 72h。
5. 按照權(quán)利要求4所述的生產(chǎn)方法，其特征在于:所述液體種子罐發(fā)酵培養(yǎng), 其種子發(fā)酵培養(yǎng)基的重量組成為:葡萄糖3.0%、蛋白胨1.0%、酵母膏0.5%、 硫酸銨0.5%、磷酸氫二鉀0.1%、磷酸二氫鉀0.1%、硫酸鎂0.1%、余量為陳 海水、lml EDTA- Fe /每升陳海水、pH6.0;種子罐發(fā)酵培養(yǎng)條件為:罐壓0.05 Mpa、風(fēng)量10(h50wm、轉(zhuǎn)速230rpm,最適培養(yǎng)溫度為22"C，時(shí)間為48h。
6. 按照權(quán)利要求1所述的生產(chǎn)方法,其特征在于:所述海洋膠紅酵母菌液體 生產(chǎn)罐發(fā)酵培養(yǎng),其發(fā)酵培養(yǎng)基的重量組成為:葡萄糖1.0-3.8%、蛋白胨 0.6-1.5%、酵母膏0.3-1.0%、硫酸銨0.5-1.0%、磷酸氫二鉀0.1-0.5%、磷酸二 氫鉀0.1-0.5%、硫酸鎂0.1-0.5%、余量為陳海水、l-3mlEDTA-Fe/每升陳海水、 pH3.8-8.8;生產(chǎn)罐發(fā)酵培養(yǎng)條件為罐壓0.05-0.06Mpa 、風(fēng)量100:10 100:150wm、轉(zhuǎn)速200-230rpm，培養(yǎng)溫度為15。C 20。C，時(shí)間為48 96h。
7. 按照權(quán)利要求6所述的生產(chǎn)方法,其特征在于:所述液體生產(chǎn)罐發(fā)酵培養(yǎng)， 其發(fā)酵培養(yǎng)基的重量組成為:葡萄糖3.6%、蛋白胨1.0%、酵母膏0.5%、硫酸 銨0.5%、磷酸氫二鉀0.1%、磷酸二氫鉀0.1%、硫酸鎂0.1%、余量為陳海水、 2mlEDTA-Fe/每升陳海水、pH5.5;生產(chǎn)罐發(fā)酵培養(yǎng)條件為:罐壓0.06Mpa、風(fēng)量 100:120vvm、轉(zhuǎn)速200rpm，最適培養(yǎng)溫度為20。C，時(shí)間為72h。
全文摘要
本發(fā)明涉及海洋微生物應(yīng)用技術(shù)及海參養(yǎng)殖，具體的說(shuō)是一種海參用海洋膠紅酵母的生產(chǎn)方法，所采用菌種為常規(guī)的海洋膠紅酵母菌種，以陳海水為原料，其中添加有占總重量1.0-3.8％葡萄糖及1-3mlEDTA-Fe/每升陳海水，培養(yǎng)溫度為15℃～25℃。本發(fā)明所采用的發(fā)酵培養(yǎng)基，兩級(jí)發(fā)酵過(guò)程和離心濃縮等工藝，操作簡(jiǎn)單，生產(chǎn)周期短，成本低；生產(chǎn)的產(chǎn)品質(zhì)量高，在海參育苗中應(yīng)用可以提高幼體各階段變態(tài)率、成活率；可以加快幼體生長(zhǎng)發(fā)育，可以改善養(yǎng)殖池水體的生態(tài)環(huán)境，凈化水質(zhì)，深受用戶歡迎，易于推廣應(yīng)用。
文檔編號(hào)C12N1/16GK101148643SQ200610047848
公開(kāi)日2008年3月26日 申請(qǐng)日期2006年9月22日 優(yōu)先權(quán)日2006年9月22日
發(fā)明者麗 劉, 王書(shū)錦, 王向陽(yáng), 王國(guó)安, 胡江春, 薛德林, 馬成新 申請(qǐng)人:中國(guó)科學(xué)院沈陽(yáng)應(yīng)用生態(tài)研究所