專利名稱：從酶組合物中除去亞硫酸氫鹽副產(chǎn)物的方法
從酶組合物中除去亞硫M鹽副產(chǎn)物的方法 5 背景技術(shù)[oooi]在起治療劑作用的口月蹄躋U中可包括不同類型的酶。例如，包括水 解口服多聚糖或抑制細(xì)菌生長(zhǎng)的酶。更具體地說(shuō)，例如，己報(bào)道為了除去血小板沉淀，在口月蹄躋仲可采用諸如變聚糖斷mutanase)、葡聚糖酶、木瓜蛋白酶 和1,3-葡聚糖等酶。io
通常，由其性質(zhì)而言，酶對(duì)環(huán)境諸如pH、溫駄離子濃度的改變是敏感的，因ltbil常有必要采取措施保護(hù)酶以維持所述酶的預(yù)期口腔護(hù)理功效。 為了改善酶的性能，己建議使用酶穩(wěn)定劑，諸如螯合劑和抗氧化劑。這樣酶穩(wěn) 定劑的實(shí)例是EDTA、葡萄糖酸鈉、亞硫M鈉、金屬?zèng)]食子酸鹽、錫酸鈉和 抗壞血酸。15
然而，在酶穩(wěn)定劑中，亞硫酸氫鹽物質(zhì)(bisulfitematerials),即含有亞硫,鹽離子的化合物，顯示對(duì)一齡體有毒，和/或往往改變口腔護(hù)理制劑的 感官性質(zhì)。因此，在所述組合物進(jìn)一步加工和提供給消費(fèi)者之前，希望能除去 或降低酶組合物中的亞硫酸氫鹽物質(zhì)。雖然亞^1M鹽物質(zhì)可通過(guò)常規(guī)技術(shù)諸 如堿性提取和氧化劑中和除去，但這些技術(shù)往往對(duì)口腔組合物中酶的催化活性20產(chǎn)生不利影響。因此，希望引入對(duì)治療組合物中酶活性沒(méi)有負(fù)面影響的的除去 亞硫,鹽物質(zhì)的替代性方法。迄今為止， 一直沒(méi)有可在中性非氧化條件下實(shí) 施的從酶組合物中除去亞硫酸氫鹽物質(zhì)的常規(guī)方法。發(fā)明內(nèi)容25
根據(jù)本發(fā)明，提供一種從包含亞硫酸氫鹽物質(zhì)和一種或多種酶的組合物中除去亞硫酸氫鹽物質(zhì)的方法。所述方法包括將組合物與包含至少一個(gè)醛 官能團(tuán)的化合物接觸以形成醛-亞硫酸氫鹽復(fù)合物；由此可/Ai^述組合物中分離 所述醛-亞硫,鹽復(fù)合物。
在一個(gè)實(shí)施方式中，所述方法包括將組合物與包含至少一個(gè)醛官能30團(tuán)諸如醛糖的化合物接觸以形成醛-亞硫酸氫鹽復(fù)合物，然后從組合物中分離該醛-亞硫酸驢復(fù)合物，其中所述酶選自木瓜蛋白酶、菠蘿蛋白酶、絲氨酸蛋白 酶、膨疑乳蛋白酶、無(wú)花果蛋白酶、葡萄糖氧化酶、半乳糖氧化酶乳糖過(guò)氧化物酶、乳鐵傳遞蛋白、溶菌酶、脂肪分解酶、堿性蛋白酶(alcalase)、糖酶0 cait)ohydrase)、葡萄糖淀粉斷glucoamylasae)、葡聚糖酶、變位斷mutase)、丹寧 5 ，率^(tannase:)和脂肪酶。
在另一個(gè)實(shí)施方式中，提供一種從包含亞硫酸氫鹽物質(zhì)和酶的組合 物中除去亞硫酸氫鹽物質(zhì)的方法，其中所述方^^括將組合物與具有至少一個(gè) 醛官能團(tuán)的基質(zhì)接觸以形成醛-亞硫酸氫鹽復(fù)合物，然后從所述組合物中分離結(jié) 合了基質(zhì)的亞硫酸氫鹽。 io
在又一個(gè)實(shí)施方式中，進(jìn)一步提供一種基本上不含亞硫酸氫鹽物質(zhì)的酶組合物。所述酶組合物通過(guò)將組合物與含有至少一個(gè)醛官能團(tuán)的化合物接 觸以形成醛-亞硫酸氫鹽復(fù)合物然后從所述組合物中分離所述醛-亞硫酸氫鹽復(fù) 合物獲得。1具體實(shí)施方式
本發(fā)明涉及一種從包含一種或多種酶的組合物中除去亞硫酸氫鹽物 質(zhì)的方法。更具體而言，發(fā)明涉及一種通過(guò)將酶組合物與含有至少一個(gè)酸官能 團(tuán)的化合物接觸以形成醛-亞硫M鹽復(fù)合物然后從所述組合物中分離所^IE硫 M鹽復(fù)合物的方法。本發(fā)明也涉及一種不含亞硫M鹽的酶組合物，所述組20合物fflii將酶組合物與含有至少一個(gè)醛官能團(tuán)的化合物接觸以形成醛-亞硫,M鹽復(fù)合物然后從所述組合物分離所述亞硫酸氫鹽復(fù)合物而制備。
本發(fā)明提供一種從酶組合物中除去亞硫酸氫鹽物質(zhì)的方法，所述方 法通過(guò)使用具有至少一個(gè)與亞硫酸氫鹽物質(zhì)形成復(fù)合物的醛官能團(tuán)的化合物， 然后從所述組合物中分離所述醛-亞硫&複鹽復(fù)合物。4腿為，所述方法在基本 25中性非氧化條件下進(jìn)行，從而獲得基本上不含亞硫酸氫鹽的包含基本上未卩絲軍 的酶的組合物。[OOIO]本文使用的術(shù)語(yǔ)"卩絲牟"表示相對(duì)于未提取亞硫酸氫鹽物質(zhì)的酶組合 物而言酶活性的降低。根據(jù)本發(fā)明，在亞硫酸氫鹽接觸醛的步驟以及其后分離 亞硫Jt^鹽-醛復(fù)合物的歩驟之后，或在這兩個(gè)步驟之后，{ 保持酶活性的50% 30 以上，80%以卜-或90%以上。
術(shù)語(yǔ)"亞硫酸氫鹽物質(zhì)'表示包含化學(xué)鍵合的亞硫酸氫根離子或者包 含亞硫酸氫根離子作為化學(xué)復(fù)合物組分的化合物，諸如亞硫酸氫鈉或其他亞硫 ,鹽。
為了從酶組合物中除去亞硫酸氫鹽，本發(fā)明4OT包含至少一個(gè)醛官 5育姻的化合物。 "麼'定義為一類具有R-CHO結(jié)構(gòu)的羰基化合物，其中R基可以 是芳f^團(tuán)或者脂肪族基團(tuán)。為了獲得基本上不含亞硫L酸氫鹽的包含基本上未 ,率酶的組合物，可希望選擇在中性非氧化條件下能與亞硫酸氫鹽物質(zhì)形成復(fù) 合物的醛。本發(fā)明的,以是具剤氐^T量例如小于約1000道爾頓的單官能醛。 所述醛可以是醛糖。io
M31/A^述組合物分離亞硫酸氫鹽-醛復(fù)合物獲得基本上不含亞硫酸 氫鹽的組合物。這樣的分離可通過(guò)本領(lǐng)域已知的任何分離方法諸如化學(xué)或者物 理方法、或者化學(xué)及物理方法的結(jié)合完成。適合于本發(fā)明的分離方法的實(shí)例包 括但不限于過(guò)濾、差異擴(kuò)散、柱分離和珠子分離和通過(guò)局部化或鰲合分離。
另外，所述分離可通過(guò)將所述組合物與結(jié)合有醛的物體或物品相接15觸，形成復(fù)合物，并除去結(jié)合有醛-亞硫酸氫鹽復(fù)合物的物體或物品實(shí)現(xiàn)。作為 另外一種選擇，為了獲得具有基本上未P絲軍酶的組合物，希望在^h亞^l酸氫 鹽物質(zhì)與酶組合物接觸以及其后分離亞硫酸氫鹽-醛復(fù)合物的步驟中都基本維持 中性非氧化劍牛。例如，酶溶液的pH可保持在約5到約8的范圍內(nèi)，并且保持 離子濃度。20
本發(fā)明的除去亞硫酸氫鹽的方法可適用于包含任何類型酶的組合 物。有利的是，本發(fā)明可用于處理最終接觸人或動(dòng)物皮膚或者粘膜的酶組合物。 例如，酶組合物可以是任何一種能包含在口腔護(hù)理或者個(gè)人護(hù)理產(chǎn)品中的酶組 合物。這種酶的實(shí)例包括但不限于糖酶諸如葡糖淀粉酶；從天然果品中提取的 酶諸如蛋白酶，糖酶諸如a-淀粉酶、|3-淀粉酶和丹寧^*軍酶，和脂肪酶諸如植25物脂肪酶、胃脂肪酶和胰脂肪酶。,為，經(jīng)本發(fā)明處理的組合物中的酶可由 植物來(lái)源獲得。在本發(fā)明的實(shí)踐中可用的酶可以選自由a和P-淀粉酶、葡聚糖 酶、變聚糖斷mutanase)、天然酶諸如木瓜蛋白酶(來(lái)自木瓜)和菠蘿蛋白酶(來(lái) 自菠蘿)、絲氨酸蛋白酶諸如胰凝乳蛋白酶、無(wú)花果蛋白酶、堿性蛋白瞰alcalase)、 溶菌酶、果膠酶和葡聚糖酶組成的組。30
根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方式，提供一種禾,包含至少一個(gè)醛官能團(tuán)的基質(zhì)以實(shí)現(xiàn)方便地除去亞硫酸氫鹽-醛復(fù)合物的方法。所,用包含至少一個(gè)醛官 能團(tuán)的基質(zhì)的方法可與不采用基質(zhì)除去亞硫酸氫鹽的方法在相同的條件下實(shí)施。具有醛官能團(tuán)的基質(zhì)可以是常規(guī)的基質(zhì)，例如選自多孑L和無(wú)孔珠子(porous and non-porous beads)、薄膜、微粒禾口顆粒(specks,andpaiticles)組成的組。在另一5實(shí)施方式中，包含至少一個(gè)醛官能團(tuán)的基質(zhì)可分散在載體上以助于分離亞硫酸 誠(chéng)-醛復(fù)合物。本領(lǐng)域已知的粗可類型的載體都可用于本發(fā)明。載體的實(shí)例包 括但不限于柱、容器、過(guò)濾器、海綿和;疑膠。
在又一實(shí)施方式中，提供一種基本上不含亞硫酸氫鹽物質(zhì)的酶組合 物，該酶組合物根據(jù)本發(fā)明的除去亞硫酸氫鹽物質(zhì)的方法制備，其中通過(guò)與包 io含至少一個(gè)醛官能團(tuán)的化合物接觸以形成醛-亞硫,鹽復(fù)合物并從所述組合物 中分離該醛-亞硫M鹽復(fù)合物以制得所述酶組合物。因?yàn)楸景l(fā)明的酶組合物是 在中性非氧化條件下制備的，所以組合物中酶的活性基本上沒(méi)有卩絲軍。雌為， 酶活性的約90%保持未卩絲軍。由本發(fā)明方法生產(chǎn)的酶組合物基本上不含亞硫酸 氫鹽物質(zhì)，因此可以有利地用于口腔護(hù)理或個(gè)人護(hù)理產(chǎn)品，諸如潔齒劑、皮膚 15護(hù)理產(chǎn)品及頭發(fā)和指甲護(hù)理產(chǎn)品。
雖然提及的具體實(shí)例已經(jīng)對(duì)本發(fā)明進(jìn)行了描述，但對(duì)本領(lǐng)域技術(shù)人 員來(lái)說(shuō)顯而易見(jiàn)的各種修改都屬于本發(fā)明的范圍。
權(quán)利要求
1.一種從包含亞硫酸氫鹽物質(zhì)和酶的組合物中除去亞硫酸氫鹽物質(zhì)的方法，所述方法包括將組合物與包含至少一個(gè)醛官能團(tuán)的化合物接觸以形成醛-亞硫酸氫鹽復(fù)合物，由此可從組合物中分離所述醛-亞硫酸氫鹽復(fù)合物。
2. 權(quán)利要求1的方法，其中所述方法進(jìn)一步包括從組合物中分離所述醛-亞硫,鹽復(fù)合物。
3. 權(quán)利要求2的方法，其中包含至少一個(gè)醛官能團(tuán)的化合物是具剤氏^T 量的單官能醛。
4.權(quán)利要求3的方法，其中單官能醛是調(diào)味劑或者香料。
5. 權(quán)利要求3的方法，其中單官能醛是醛糖。
6. 權(quán)利要求2的方法，其中所述分離選自過(guò)濾、差異擴(kuò)散、柱分離和珠子分離。
7. 權(quán)利要求l的方法，其中包含至少一個(gè)醛官能團(tuán)的化合物在pH約5到 15約8的范圍內(nèi)與所述組合物結(jié)合。
8. 權(quán)利要求2的方法，其中在形成醛-亞^lM鹽復(fù)合物的步驟之后所述 一種或多種,本上不P絲軍。
9. 權(quán)利要求2的方法，其中在分離醛-亞硫,鹽復(fù)合物的步驟之后所述 ltt本上不,率。
10. ;R利要求l的方法，其中所述酶來(lái)自植物來(lái)源。
11.權(quán)利要求1的方法，其中酶選自木瓜蛋白酶、菠蘿蛋白酶、絲氨酸蛋 白酶、胰凝乳蛋白酶、無(wú)花果蛋白酶、葡萄糖氧化酶、半乳糖氧化酶乳糖過(guò)氧 化物酶、乳鐵傳遞蛋白、溶菌酶、脂肪懶軍酶、堿性蛋白酶、糖酶、葡萄糖淀 粉酶、葡聚糖酶、變位酶、丹寧分解酶和脂肪酶。
12.權(quán)利要求2的方法，其中在分離歩驟后酶活性的90%以上未卩絲牟。
13. —種從包含亞硫酸氫鹽和酶的組合物中除去亞硫酸氫鹽的方法，所述 方法包括將組合物與具有至少一個(gè)醛官能團(tuán)的基質(zhì)接觸以形成醛-亞硫酸氫鹽復(fù) 合物，由此可從組合物分離結(jié)合基質(zhì)的亞硫酉 鹽。
14. 權(quán)利要求13的方法，其中所述方法進(jìn)一歩包括從組合物中分離結(jié)合基 30質(zhì)的亞硫,鹽。
15. 權(quán)利要求13的方法，其中所述基質(zhì)選自多孑L和無(wú)孔珠子、薄膜、微粒 和顆粒。
16. 權(quán)利要求13的方法，其中所述基質(zhì)分散在載體上。
17. 權(quán)利要求16的方法，其中所述載體選自柱、容器、過(guò)濾器、海綿和凝5膠。
18. 權(quán)利要求13的方法，其中醛是醛糖。
19. 一種基本上不含亞硫酸氫鹽物質(zhì)的酶組合物，所述酶組合物通過(guò)以下 步驟獲得(a) 將組合物與含有至少一個(gè)醛官能團(tuán)的化合物接觸以形成醛-亞硫酸氫鹽 io復(fù)合物；禾口(b) /A^述組合物中分離該醛-亞硫麟鹽復(fù)合物。
20. 權(quán)利要求19的酶組合物，其中酶活性的約90%保持未糊率。
全文摘要
本發(fā)明提供的是從包含亞硫酸氫鹽物質(zhì)和酶的組合物中除去亞硫酸氫鹽物質(zhì)的方法。該方法包括將組合物與包含至少一個(gè)醛官能團(tuán)的化合物接觸以形成醛-亞硫酸氫鹽復(fù)合物，由此可從所述組合物中分離該醛-亞硫酸氫鹽復(fù)合物。
文檔編號(hào)C12N9/00GK101243180SQ200680029963
公開(kāi)日2008年8月13日 申請(qǐng)日期2006年8月16日 優(yōu)先權(quán)日2005年8月17日
發(fā)明者J·G·馬斯特斯, J·布拉姆斯 申請(qǐng)人:高露潔-棕欖公司