專利名稱：乳酸菌的一種高密度培養(yǎng)方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及乳酸菌的一種高密度培養(yǎng)方法，屬于微生物發(fā)酵工程領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
乳酸菌是人和動物正常微生物群或區(qū)系的組成部分。由于其特殊的 生理功能被廣泛應(yīng)用于食品、醫(yī)藥及飼料等許多行業(yè)上。乳酸菌是生產(chǎn) 發(fā)酵乳制品、泡菜、干酪、發(fā)酵香腸等傳統(tǒng)發(fā)酵食品，賦予其特殊質(zhì)地、 風味和口感的重要微生物菌群；乳酸菌在家畜飼養(yǎng)和飼料中有重要的 作用，特別是在青貯飼料的發(fā)酵過程中起主導(dǎo)作用，能夠有效地改善青 貯飼料的發(fā)酵品質(zhì)，提高動物的生產(chǎn)性能。乳酸菌菌劑的活性與其數(shù)量密切相關(guān)，因此為推進其應(yīng)用，最關(guān)鍵 的是解決菌劑的高密度培養(yǎng)問題。由于乳酸菌生長的營養(yǎng)要求較高，需要一些特殊的營養(yǎng)組分；同時，乳酸菌在生長過程中分泌有機酸類代謝產(chǎn)物，使培養(yǎng)液中的pH值不斷下降，當pH值降至4.10以下時，菌體的生 長繁殖就會受到抑制，因此采用傳統(tǒng)的菌種生產(chǎn)工藝，菌種質(zhì)量得不到 保證，而且生產(chǎn)成本高。高密度培養(yǎng)技術(shù)廣泛地應(yīng)用于各種微生物的生 產(chǎn)中，它是指采用一定的工藝技術(shù)，保證微生物生長的適宜條件，延長 微生物的指數(shù)增殖過程，從而得到高濃度的細胞。乳酸菌的高密度培養(yǎng)增加了單位體積培養(yǎng)液中的菌體數(shù)量，降低了生產(chǎn)成本，從而提高產(chǎn) 品在市場上的競爭力。對于加速乳酸菌制劑的商品化進程，更好地滿足 市場需求，具有重要的意義。 發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明提供了乳酸菌的一種高密度培養(yǎng)技術(shù)，通過使用專門的培養(yǎng) 基(以下稱乳酸菌培養(yǎng)基)，其基礎(chǔ)配方包括3%大豆蛋白胨、2%酵母浸提粉、0.5%乙酸鈉、復(fù)合微量元素液、復(fù)合維生素液等，并在培養(yǎng)過 程中流加堿以調(diào)節(jié)培養(yǎng)液的pH值，延長乳酸菌對數(shù)生長期，獲得高活 性、高濃度的培養(yǎng)液，培養(yǎng)液中乳酸菌活菌數(shù)達到 9.0xl09-1.0xl01()cfo/ml。培養(yǎng)的乳酸菌可應(yīng)用于飼料青貯、乳制品接種、 其它食品添加劑(如奶酪制作、葡萄酒脫酸)及醫(yī)用等。
具體實施方式
本發(fā)明以植物乳桿菌、保加利亞乳桿菌、乳酸片球菌為菌種，經(jīng)常 規(guī)方法活化后、接種于乳酸菌培養(yǎng)基，調(diào)節(jié)起始pH值為7.0-7.2;在培 養(yǎng)過程中流加堿使培養(yǎng)液的pH值穩(wěn)定在6.0-6.8。實施例1:挑取活化的植物乳桿菌于MRS液體培養(yǎng)基中，37。C培養(yǎng)12h，以 6%的接種量接種到含乳酸菌培養(yǎng)基的發(fā)酵罐中，培養(yǎng)基起始pH值為 7.0，當pH值低于6.6時流加30%Na2CO3溶液，保持培養(yǎng)液pH值穩(wěn)定 在6.7土0.1， 37。C培養(yǎng)30h。 實施例2:挑取活化的植物乳桿菌于MRS液體培養(yǎng)基中，37。C培養(yǎng)12h，以 6%的接種量接種到含乳酸菌培養(yǎng)基的發(fā)酵罐中，培養(yǎng)液起始pH值為 7.0，當pH值低于6.6時流加20%NaOH溶液，保持培養(yǎng)液pH值穩(wěn)定 在6.7±0.1， 37。C培養(yǎng)30h。實施例3:挑取活化的保加利亞乳桿菌于MRS液體培養(yǎng)基中，37。C培養(yǎng)12h， 以10%的接種量接種到含乳酸菌培養(yǎng)基的發(fā)酵罐中，培養(yǎng)液起始pH值 為7.2，當pH值低于6.0時流加20WKOH溶液，保持培養(yǎng)液pH值穩(wěn)定 在6.2 ±0.2。 42。C培養(yǎng)24h。 實施例4:挑取活化的保加利亞乳桿菌于MRS液體培養(yǎng)基中，37。C培養(yǎng)12h， 以10%的接種量接種到含乳酸菌培養(yǎng)基的發(fā)酵罐中，培養(yǎng)液起始pH值 為7.2，當pH值低于6.0時流加氨水，保持培養(yǎng)液pH值穩(wěn)定在6.2 ±0.2。 42。C培養(yǎng)24h。 實施例5:挑取活化的乳酸片球菌于MRS液體培養(yǎng)基中，32"C培養(yǎng)12h，以 6%的接種量接種到含乳酸菌培養(yǎng)基的發(fā)酵罐中，培養(yǎng)液起始pH值為 7.2，當pH值低于6.4時流加30。/。Na2CO3溶液，保持培養(yǎng)液pH值穩(wěn)定 在6.5±0.1， 32。C培養(yǎng)30h。
權(quán)利要求
1. 乳酸菌的一種高密度培養(yǎng)方法，以植物乳桿菌、保加利亞乳桿菌、乳酸片球菌為菌種，采用乳酸菌培養(yǎng)基，調(diào)節(jié)起始pH值為7.0-7.2；并在培養(yǎng)過程中流加堿使培養(yǎng)液的pH值穩(wěn)定在6.0-6.8。
2、 根據(jù)權(quán)利要求1所述的乳酸菌的一種高密度培養(yǎng)方法，其特征 在于乳酸菌培養(yǎng)基的基礎(chǔ)配方包括3%大豆蛋白胨、2%酵母浸提粉、 0.5%乙酸鈉、復(fù)合微量元素液、復(fù)合維生素液等。
3、 根據(jù)權(quán)利要求1所述的乳酸菌的一種高密度培養(yǎng)方法，其特征 在于在培養(yǎng)過程中流加的堿為30%Na2CO3、 20%KOH、 20%NaOH或氨 水。
全文摘要
本發(fā)明涉及乳酸菌的一種高密度培養(yǎng)方法，以植物乳桿菌、保加利亞乳桿菌和乳酸片球菌為菌種，使用專門的乳酸菌培養(yǎng)基，其基礎(chǔ)配方包括3％大豆蛋白胨、2％酵母浸提粉、0.5％乙酸鈉、復(fù)合微量元素液、復(fù)合維生素液等，調(diào)節(jié)起始pH值為7.0-7.2；并在培養(yǎng)過程中流加Na₂CO₃、KOH、NaOH或氨水使培養(yǎng)液的pH值穩(wěn)定在6.0-6.8。解除了自身代謝產(chǎn)物對其生長的抑制，獲得高活性、高濃度的乳酸菌培養(yǎng)液，培養(yǎng)液中乳酸菌活菌數(shù)達到9.0×10⁹-1.0×10¹⁰cfu/ml。
文檔編號C12N1/20GK101245324SQ20071000494
公開日2008年8月20日 申請日期2007年2月13日 優(yōu)先權(quán)日2007年2月13日
發(fā)明者丁之銓, 林愛玉 申請人:丁之銓;林愛玉