專利名稱：：發(fā)酵制備l-氨基酸的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及生物工程
技術(shù)領(lǐng)域：
。具體涉及一種發(fā)酵制備L-氨基酸的方法。
背景技術(shù)：
：L-氨基酸廣泛應(yīng)用于飼料工業(yè)、保健食品和醫(yī)藥工業(yè)。自1956年日本協(xié)和發(fā)酵公司用發(fā)酵法生產(chǎn)谷氨酸以后，氨基酸的發(fā)酵生產(chǎn)發(fā)展很快，到目前為止，絕大多數(shù)氨基酸已能用發(fā)酵法和酶法生產(chǎn)。近年來，隨著經(jīng)濟(jì)的發(fā)展，人民生活水平的逐步提高，人們對健康方面給于越來越多的關(guān)注，L-氨基酸的需求量也在逐年上升。但是大多數(shù)L-氨基酸的發(fā)酵產(chǎn)酸水平較低，生產(chǎn)成本較高，抑制了L-氨基酸的應(yīng)用。因此，提高L-氨基酸的產(chǎn)酸率具有非常重要的現(xiàn)實意義。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題在于克服上述不足之處，研究設(shè)計一種生產(chǎn)成本較低的發(fā)酵制備L-氨基酸的方法。本發(fā)明提供了一種發(fā)酵制備L-氨基酸的方法。為達(dá)到本發(fā)明的目的，本發(fā)明采用了下列技術(shù)方案本發(fā)明使用了發(fā)酵助劑甜菜堿磷酸鹽。甜菜堿磷酸鹽具有下列結(jié)構(gòu)和性能0分子式C5H14N06P分子量215.14物理性能白色至微黃色結(jié)晶性粉末，無氣味，味酸澀，具吸潮性，極易溶于水，溶于乙醇。發(fā)酵助劑甜菜堿磷酸鹽的使用，可以明顯提高L-氨基酸的收率，降低生產(chǎn)成本。本發(fā)明提供的發(fā)酵制備L-氨基酸方法具體包括下列步驟(1)種子培養(yǎng)種子培養(yǎng)基g/dl:葡萄糖3，玉米漿3，豆?jié)?，K2HP040.15，MgS047H200.04,尿素0.2，pH7.0-7.2;將一定量的種子培養(yǎng)基放入種子罐中，在115。C下滅菌15分鐘。降溫后接入黃色短桿菌ATCC14067，于32'C下通氣培養(yǎng)9小時；(2)發(fā)酵培養(yǎng)發(fā)酵培養(yǎng)基g/dl:葡萄糖14，糖蜜0.1，Na2HP040-0.l，KCl0.12,MgS047H200.08，F(xiàn)eS044H200.0002，MnS040.0002，維生素B,20mug/1;在上述發(fā)酵培養(yǎng)基中添加0.05-0.3g/dl的甜菜堿磷酸鹽，調(diào)節(jié)pH為7.0-7.2，該培養(yǎng)基放于發(fā)酵罐中，于U5'C加熱15分鐘滅菌后備用；將步驟(1)得到的種子接于發(fā)酵罐中，34'C通氣發(fā)酵培養(yǎng)；在培養(yǎng)過程中，采用氨水調(diào)節(jié)pH維持在7.0-7.2，同時，持續(xù)補(bǔ)加70%的葡萄糖水溶液，使糖濃度控制在1-2g/dl;在發(fā)酵結(jié)束前的2小時，停止持續(xù)補(bǔ)加葡萄糖。分別在發(fā)酵培養(yǎng)0、3、8、14和18小時時，添加0.15g/dl的甜菜堿磷酸鹽，進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng)。培養(yǎng)l-7天后，停止加入葡萄糖，再繼續(xù)發(fā)酵2小時后，發(fā)酵完畢。本發(fā)明中L-氨基酸的發(fā)酵條件采用特定底物的傳統(tǒng)生產(chǎn)方法，根據(jù)底物的不同，條件也可改變。發(fā)酵溫度在20-40'C的范圍，尤其是28-40'C的范圍。pH值控制在中性7-7.2。發(fā)酵助劑甜菜堿磷酸鹽在發(fā)酵液中的濃度丸0.01%-5.0%，優(yōu)選范圍為0.05%-1.0%。發(fā)酵在有氧條件下，需要攪拌或振蕩。發(fā)酵時間范圍在l-7天。對于發(fā)酵后氨基酸的分離純化，可采用常規(guī)的離子交換及其他方法。本發(fā)明方法適用的L-氨基酸包括L-谷氨酸，L-賴氨酸，L-精氨酸，L-異亮氨酸，L-纈氨酸，L-蘇氨酸，L-組氨酸，L-苯基丙氨酸，L-色氨酸，L-絲氨酸，L-鳥氨酸，L-瓜氨酸，L-酪氨酸和L-亮氨酸。本發(fā)明方法適用的碳源包括糖類如葡萄糖，蔗糖，果糖，麥芽糖，糖蜜，粗糖，糖化的淀粉液；脂肪酸類如乙酸，丙酸，苯甲酸；有機(jī)酸類如丙酮酸，檸檬酸，琥珀酸，富馬酸，蘋果酸；醇類如乙醇，丁醇。本發(fā)明方法適用的氮源包括有機(jī)氮源如豆?jié)?，玉米漿，尿素，酵母粉，豆餅水解液；無機(jī)氮源如硫酸銨，氯化銨，硝酸銨，醋酸銨，液氨，氨水。本發(fā)明方法發(fā)酵培養(yǎng)基可以使用以下各種無機(jī)鹽磷酸鹽、鎂鹽、鈣鹽、鉀鹽、鈉鹽、鐵鹽、錳鹽以及其他微量金屬鹽。本發(fā)明方法發(fā)酵培養(yǎng)基可以使用以下各種維生素生物素、硫胺素、煙酰胺等。本發(fā)明方法適用于以下各種相應(yīng)氨基酸的發(fā)酵菌(短桿菌屬，棒桿菌屬，芽孢桿菌或大腸桿菌屬等)L-谷氨酸發(fā)酵菌如雙歧桿菌ATCC14020，黃色短桿菌ATCC14067，乳酸發(fā)酵短桿菌ATCC13869，乳酸發(fā)酵短桿菌FERM-P5012，嗜乙酰乙酸棒桿菌ATCC13870，谷氨酸棒桿菌ATCC13032等；L-賴氨酸發(fā)酵菌如黃色短桿菌ATCC14067，黃色短桿菌FERM-P1708，谷氨酸棒桿菌FERM-P1709，乳酸發(fā)酵短桿菌FERM-P1712，乳酸發(fā)酵短桿菌FERM-P1711，黃色短桿菌ATCC21475,谷氨酸棒桿菌ATCC12416，乳酸發(fā)酵短桿菌ATCC1470，醋麩酸棒狀桿菌ATCC11472等；L-谷氨酸鹽發(fā)酵菌如黃色短桿菌FERM-P4272，嗜乙酰乙酸棒桿菌ATCC13870，黃色短桿菌FERM-BP662，醋麩酸棒狀桿菌ATCC13870，谷氨酸棒桿菌FERM-BP663等；L-精氨酸發(fā)酵菌如黃色短桿菌FERM-P4948，谷氨酸棒桿菌FERM-P7274，黃色短桿菌NRRL12235，醋麩酸棒狀桿菌NRRL12239等；L-苯基丙氨酸發(fā)酵菌如乳酸發(fā)酵短桿菌FERM-P5417，黃色短桿菌FERM-P1916，谷氨酸棒桿菌ATCC21670，檸檬酸節(jié)桿菌ATCC21422，乳酸發(fā)酵短桿菌ATCC21420，嗜乙酰乙酸棒桿菌ATCC21421，黃色短桿菌NRRL12269，谷氨酸棒桿菌ATCC21670;L-蘇氨酸發(fā)酵菌如大腸埃希氏菌FERM-P4900，谷氨酸棒桿菌FERM-P5835，黃色短桿菌FERM-P4164，乳酸發(fā)酵短桿菌FERM-P4180，黃色短桿菌ATCC21269，嗜乙酰乙酸棒桿菌ATCC21270等；L-異亮氨酸發(fā)酵菌如黃色短桿菌FERM-P3672，乳酸發(fā)酵短桿菌FERM-P4192，谷氨酸棒桿菌FERM-P756，谷氨酸棒桿菌FERM-P757，谷氨酸棒桿菌FERM-P758，黃色短桿菌FERM-BP759，黃色短桿菌FERM-BP760等；L-組氨酸發(fā)酵菌如黃色短桿菌FERM-P2317，乳酸發(fā)酵短桿菌FERM-P1565，谷氨酸棒桿菌ATCC14297，乳酸發(fā)酵短桿菌ATCC21086，嗜乙酰乙酸棒桿菌ATCC21407,黃色短桿菌ATCC21406，枯草芽孢桿菌FERM-BP217，檸檬酸節(jié)桿菌ATCC21412等；L-纈氨酸發(fā)酵菌如乳酸發(fā)酵短桿菌FERM-P1845，黃色短桿菌FERM-P512，乳酸發(fā)酵短桿菌FERM-P1968，大腸桿菌NRRL12285等；L-絲氨酸發(fā)酵菌如乳酸發(fā)酵短桿菌FERM-P1371;L-鳥氨酸發(fā)酵菌如乳酸發(fā)酵短桿菌FERM-P5936，谷氨酸棒桿菌FERM-P5644，檸檬酸節(jié)桿菌ATCC21040，谷氨酸棒桿菌ATCC13232等；L-瓜氨酸發(fā)酵菌如谷氨酸棒桿菌FERM-P5643，黃色短桿菌FERM-P1645等；L-酪氨酸發(fā)酵菌如谷氨酸棒桿菌FERM-P5836，黃色短桿菌FERM-P7914，枯草芽孢桿菌FERM-P6758等；L-色氨酸發(fā)酵菌如枯草芽孢桿菌FERM-P5286，乳酸發(fā)酵短桿菌FERM-P7127，黃色短桿菌FERM-P2551，谷氨酸棒桿菌FERM-P7128，黃色短桿菌ATCC21427，黃色短桿菌FERM-BP114，枯草芽孢桿菌FERM-BP208，黃色短桿菌FERM-BP475，谷氨酸棒桿菌，枯草芽孢桿菌FERM-BP200等；L-亮氨酸發(fā)酵菌如乳酸發(fā)酵短桿菌FERM-P1769，黃色短桿菌FERM-P420，谷氨酸棒桿菌FERM-P1966，黃色短桿菌FERM-BP755，谷氨酸棒桿菌FERM-BP756，谷氨酸棒桿菌FERM-P757，黃色短桿菌FERM-BP759等。本發(fā)明方法可以明顯提高L-氨基酸的產(chǎn)酸率，降低生產(chǎn)成本，有利于規(guī)模型的工業(yè)化生產(chǎn)。具體實施方式實施例實施例1:種子培養(yǎng)基(g/dl):葡萄糖3,玉米漿3，豆?jié)?,K2HP040.15，MgSO4'7H2O0.04，尿素0.2，pH調(diào)至7.0-7.2，在115。C下，加熱15分鐘進(jìn)行滅菌。將黃色短桿菌ATCC14067接種于5L種子罐中，在32。C下，振蕩培養(yǎng)9h。另外，谷氨酸發(fā)酵培養(yǎng)基(g/dl)為葡萄糖14，糖蜜0.1，Na2HP040~0丄KC10.12，MgS04'7H200.08,FeS04*4H200.0002,MnS040.0002，維生素B,20mug/l。培養(yǎng)基中分別添加0.05~0.3g/dl的甜菜堿磷酸鹽，調(diào)整pH至7.0。將3L培養(yǎng)基放入5升的發(fā)酵罐，在115'C下，加熱15分鐘進(jìn)行滅菌。在每個發(fā)酵罐中接入300ml按上述培養(yǎng)得到的種子，通氣培養(yǎng)，溫度為34°C。在培養(yǎng)過程中，采用氨水調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH，使其維持在7.2，同時，持續(xù)補(bǔ)加70%的葡萄糖水溶液，使糖濃度控制在l-2g/dl(按葡萄糖計算)。發(fā)酵培養(yǎng)30小時后，停止加入葡萄糖，再過2小時后，發(fā)酵完畢。測定培養(yǎng)基中積累的谷氨酸含量，結(jié)果見表表1.<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>實施例2:種子培養(yǎng)基(g/dl):葡萄糖3,玉米槳3，豆?jié)?，K2HP040.15，MgS04*7H200.04，尿素0.2，pH調(diào)至7.0-7.2，在115。C下，加熱15分鐘進(jìn)行滅菌。將黃色短桿菌ATCC14067接種于5L種子罐中，在32。C下，振蕩培養(yǎng)9h。另外，L-谷氨酸發(fā)酵培養(yǎng)基(g/dl)為葡萄糖14，糖蜜0丄Na2HPO40~0.1，KC10.10，MgS04'7H200.08，F(xiàn)eS04*4H200.0002，MnS040.0002，維生素20mug/l，調(diào)整pH至7.0。將3L培養(yǎng)基放入5升的發(fā)酵罐，在115'C下，加熱15分鐘進(jìn)行滅菌。在每個發(fā)酵罐中接入300ml按上述培養(yǎng)得到的種子，通氣培養(yǎng)，溫度為34°C。在培養(yǎng)過程中，采用氨水調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH，使其維持在7.2，同時，持續(xù)補(bǔ)加70%的葡萄糖水溶液，使糖濃度控制在l-2g/dl(按葡萄糖計算)。分別在發(fā)酵培養(yǎng)0，3，8，14，18小時，添加0.15g/dl的甜菜堿磷酸鹽，培養(yǎng)30小時后，停止加入葡萄糖，再過2小時后，發(fā)酵完畢。測定培養(yǎng)基中積累的谷氨酸含量，結(jié)果見表2。表2.<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>實施例3:種子培養(yǎng)基(g/dl):葡萄糖2.5,(NH4)2SO40.5，KH2PO40.1，MgS047H2O0.05，玉米槳3.5-4.0，CaC031.0，pH調(diào)至7.0-7.2，O.lMpa壓力下滅菌20分鐘。將黃色短桿菌ATCC14067接種于5L種子罐中，在31'C下，振蕩培養(yǎng)12h。L-賴氨酸的發(fā)酵培養(yǎng)基(g/dl)為葡萄糖18，(NH4)2S0450，KH2P041，KC10.12，MgS04*7H200.5，玉米漿0.5-1.5，L-蘇氨酸0.4，CaC034.0,培養(yǎng)基中分別添加0.05-0.3g/dl的甜菜堿磷酸鹽，調(diào)整pH至7.0-7.2。將3.6L培養(yǎng)基放入7升的發(fā)酵罐，0.07Mpa壓力下滅菌8分鐘。在每個發(fā)酵罐中接入360ml按上述培養(yǎng)得到的種子，通氣培養(yǎng)，溫度為30°C。在培養(yǎng)過程中，采用氨水調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH，使其維持在6.7，同時，持續(xù)補(bǔ)加70%的葡萄糖水溶液，使糖濃度控制在3-4g/dl(按葡萄糖計算)。發(fā)酵培養(yǎng)72小時，L-賴氨酸的產(chǎn)量見表3。表3.<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>實施例4:種子培養(yǎng)基(g/dl):葡萄糖2.5，(NH4)2SO40.2，尿素0.2,KH2P040.15，MgS04'7H200.04，F(xiàn)eS04.7H200.001，MnS04'4H200.001，維生素B,lOOmug/l，生物素300mug/l，調(diào)整pH至7.0，滅菌。將黃色短桿菌FERM-P4164接種于5L種子罐中培養(yǎng)12h。L-蘇氨酸的發(fā)酵培養(yǎng)基(g/dl)為葡萄糖8，KH2PO40.25，MgS04*7H200.04，(NH4)2S042.0，MnS04'4H200.001,FeS04'4H200.001，生物素50mug/1,維生素5mug/l。培養(yǎng)基中分別添加0.05-0.3g/dl的甜菜堿磷酸鹽，調(diào)整pH至7.0。在114°C下，蒸汽滅菌15分鐘。按1。/。的接種量將上述培養(yǎng)好的種子液接入10L發(fā)酵罐中，發(fā)酵培養(yǎng)36h，L-蘇氨酸的產(chǎn)量見表4。表4<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>實施例5:種子培養(yǎng)基(g/dl):葡萄糖2.5，(NH4)2S040.5,玉米漿3，KH2P040.1,MgS04*7H200.05，CaC03l，調(diào)整pH至7.0,滅菌。將谷氨酸棒桿菌FERM-P7274接種于5L種子罐中，在30'C下培養(yǎng)24h。L-精氨酸的發(fā)酵培養(yǎng)基(g/dl)為葡萄糖12.5，(NH4)2S043.0，KH2PO40.15，MgS04'7H200.05，玉米漿1，CaCO33.0。培養(yǎng)基中分別添加0.05-0,3g/dl的甜菜堿磷酸鹽，調(diào)整pH至7.0。在114'C下，蒸汽滅菌15分鐘。按10%的接種量將上述培養(yǎng)好的種子液接入10L發(fā)酵罐中，發(fā)酵培養(yǎng)96h，L-精氨酸的產(chǎn)量見表5。表5<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>實施例6:種子培養(yǎng)基(g/dl):蔗糖3.0，KH2PO40.15，MgS04'7H200.04，F(xiàn)eS047H200.001，MnS04'4H200.001，醋酸銨0.3，尿素0.2,豆餅水解液0.2，VH0.2mg，VB,0.3mg，調(diào)整pH至7.0,在每個500ml的三角瓶中裝入55ml培養(yǎng)基，0.075Mpa壓力下滅菌20min。將黃色短桿菌FERM-P3672接種于三角瓶中，在31。C下振蕩培養(yǎng)45h。L-異亮氨酸的發(fā)酵培養(yǎng)基(g/dl)為葡萄糖14.5，(NH4)2S042.5，KH2PO40.22，K2HPO40.1，MgSO4'7H2O0.04，F(xiàn)eS04'7H200.0015，MnS04'4H200.0015，豆餅水解液0.2，VHO.Olmg，VB,0.25mg，Met3mg，培養(yǎng)基中分別添加0.05-0.3g/dl的甜菜堿磷酸鹽，調(diào)整pH至7.1。在0.075Mpa壓力下，蒸汽滅菌20分鐘。按10%的接種量將上述培養(yǎng)好的種子液接入5L發(fā)酵罐中，發(fā)酵培養(yǎng)80h，L-異亮氨酸的產(chǎn)量見表6。表6<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>實施例7:種子培養(yǎng)基(g/dl):葡萄糖3.0，玉米漿3，酵母粉0.5，KH2PO40.1，MgSO4*7H2O0.04，MnS04'4H200.001，VH0.01mg，VB!0.02mg，調(diào)整pH至7.0,在每個500ml的三角瓶中裝入30ml培養(yǎng)基，O.lMpa壓力下滅菌15min。將黃色短桿菌FERM-P512接種于三角瓶中，在32。C下振蕩培養(yǎng)16h。L-纈氨酸的發(fā)酵培養(yǎng)基(g/dl)為葡萄糖8，(NH4)2S040.6，KH2P040.12，MgS047H200.04，MnS04*4H200.001，蛋氨酸0.05，豆餅水解液2，玉米漿2.5，VHO.Olmg，VB!0.02mg，培養(yǎng)基中分別添加0.05-0.3g/dl的甜菜堿磷酸鹽，調(diào)整pH至7.0。在0.075Mpa壓力下，蒸汽滅菌15分鐘。按10%的接種量將上述培養(yǎng)好的種子液接入10L發(fā)酵罐中，發(fā)酵培養(yǎng)72h，L-纈氨酸的產(chǎn)量見表7。表7<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>實施例8:種子培養(yǎng)基(g/dl):葡萄糖3.0，(NH4)2S040.5，玉米漿4.0，豆餅水解液2.0，KH2P040.1，MgS04'7H200.04，F(xiàn)eS(V7H200.001，MnS04*4H200.001，VH0.02mg，VB!0.03mg，調(diào)整pH至7.0，0.075Mpa壓力下滅菌15min。將谷氨酸棒桿菌FERM-P7128接種于500ml三角瓶中，在32'C下振蕩培養(yǎng)16h。L-色氨酸的發(fā)酵培養(yǎng)基(g/dl)為葡萄糖13，(NH4)2S044，KH2P041.0，MgS047H2O0.04，MnS04'4H200.001，F(xiàn)eS04*7H200.001，豆餅水解液2.5，玉米漿2.2，VH0.005mg，VB!0.01mg，培養(yǎng)基中分別添加0.05-0.3g/dl的甜菜堿磷酸鹽，調(diào)整pH至7.0。在0.075Mpa壓力下，蒸汽滅菌15分鐘。按10%的接種量將上述培養(yǎng)好的種子液接入5L發(fā)酵罐中，發(fā)酵培養(yǎng)，L-色氨酸的產(chǎn)量見表8。表8<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>權(quán)利要求1.一種發(fā)酵制備L-氨基酸的方法，其特征在于該方法包括下列步驟(1)種子培養(yǎng)種子培養(yǎng)基g/dl葡萄糖3，玉米漿3，豆?jié)?，K2HPO40.15，MgSO4·7H2O0.04，尿素0.2，pH7.0-7.2；將種子培養(yǎng)基放入種子罐中，在115℃下滅菌15分鐘，降溫后接入黃色短桿菌ATCC14067，于32℃下通氣培養(yǎng)9小時；(2)發(fā)酵培養(yǎng)發(fā)酵培養(yǎng)基g/dl葡萄糖14，糖蜜0.1，Na2HPO40-0.1，KCl0.12，MgSO47H2O0.08，F(xiàn)eSO44H2O0.0002，MnSO40.0002，維生素B120mug/l；在上述發(fā)酵培養(yǎng)基中添加0.05-0.3g/dl的甜菜堿磷酸鹽，調(diào)節(jié)pH為7.0-7.2，該培養(yǎng)基放于發(fā)酵罐中，于115℃加熱15分鐘滅菌后備用；將步驟(1)得到的種子接于發(fā)酵罐中，34℃通氣發(fā)酵培養(yǎng)；在培養(yǎng)過程中，采用氨水調(diào)節(jié)pH維持在7.0-7.2，同時，持續(xù)補(bǔ)加70％的葡萄糖水溶液，使糖濃度控制在1-2g/dl；在發(fā)酵結(jié)束前的2小時，停止持續(xù)補(bǔ)加葡萄糖，并且分別在發(fā)酵培養(yǎng)0、3、8、14和18小時時，添加0.15g/dl的甜菜堿磷酸鹽，進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng)。2.3、根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種發(fā)酵制備L-氨基酸的方法，其特征在于其中所述發(fā)酵助劑甜菜堿磷酸鹽在發(fā)酵液中的濃度為0.01%-5%，優(yōu)選范圍為0.05%-1.0%。4、一種如權(quán)利要求1所述的一種發(fā)酵制備L-氨基酸的方法，其特征在于發(fā)酵在有氧條件下，進(jìn)行攪拌或振蕩，發(fā)酵時間范圍在l-7天。5、根據(jù)權(quán)利要求l所述的一種發(fā)酵制備L-氨基酸的方法，其特征在于所述L-氨基酸為L-谷氨酸，L-賴氨酸，L-精氨酸，L-異亮氨酸，L-纈氨酸，L-蘇氨酸，L-組氨酸，L-苯基丙氨酸，L-色氨酸，L-絲氨酸，L-鳥氨酸，L-瓜氨酸，L-酪氨酸或L-亮氨酸。6、根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種發(fā)酵制備L-氨基酸的方法，其特征在于該方法中使用的碳源糖類為葡萄糖、蔗糖、果糖、麥芽糖、糖蜜、粗糖或糖化的淀粉液；脂肪酸為乙酸、丙酸、苯甲酸；有機(jī)酸，丙酮酸、擰檬酸、琥珀酸、富馬酸或蘋果酸；醇為乙醇或丁醇。7、根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種發(fā)酵制備L-氨基酸的方法，其特征在于該方法中培養(yǎng)基的氮源為有機(jī)氮源豆?jié)狻⒂衩诐{、尿素、酵母粉或豆餅水解液或無機(jī)氮源為硫酸銨、氯化銨、硝酸銨、醋酸銨、液氨或氨水。8、根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種發(fā)酵制備L-氨基酸的方法，其特征在于該方法中的發(fā)酵培養(yǎng)基使用的無機(jī)鹽為磷酸鹽、鎂鹽、鈣鹽、鉀鹽、鈉鹽、鐵鹽、錳鹽或微量金屬鹽。9、根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種發(fā)酵制備L-氨基酸的方法，其特征在于該方法中的發(fā)酵培養(yǎng)基使用的維生素為生物素、硫胺素或煙酰胺。10、根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種發(fā)酵制備L-氨基酸的方法，其特征在于該方法使用相應(yīng)于氨基酸的發(fā)酵菌為L-谷氨酸發(fā)酵菌為雙歧桿菌ATCC14020、黃色短桿菌ATCC14067、乳酸發(fā)酵短桿菌ATCC13869、乳酸發(fā)酵短桿菌FERM-P5012、嗜乙酰乙酸棒桿菌ATCC13870或谷氨酸棒桿菌ATCC13032;L-賴氨酸發(fā)酵菌黃色短桿菌ATCC14067、黃色短桿菌FERM-P1708、谷氨酸棒桿菌FERM-P1709、乳酸發(fā)酵短桿菌FERM-P1712、乳酸發(fā)酵短桿菌FERM-P1711、黃色短桿菌ATCC21475、谷氨酸棒桿菌ATCC12416、乳酸發(fā)酵短桿菌ATCC1470或醋麩酸棒狀桿菌ATCC11472;L-谷氨酸鹽發(fā)酵菌為黃色短桿菌FERM-P4272、嗜乙酰乙酸棒桿菌ATCC13870、黃色短桿菌FERM-BP662、醋麩酸棒狀桿菌ATCC13870或谷氨酸棒桿菌FERM-BP663;L-精氨酸發(fā)酵菌為黃色短桿菌FERM-P4948、谷氨酸棒桿菌FERM-P7274、黃色短桿菌NRRL12235或醋麩酸棒狀桿菌NRRL12239;L-苯基丙氨酸發(fā)酵菌為乳酸發(fā)酵短桿菌FERM-P5417、黃色短桿菌FERM-P1916、谷氨酸棒桿菌ATCC21670、檸檬酸節(jié)桿菌ATCC21422、乳酸發(fā)酵短桿菌ATCC21420、嗜乙酰乙酸棒桿菌ATCC21421、黃色短桿菌NRRL12269或谷氨酸棒桿菌ATCC21670;L-蘇氨酸發(fā)酵菌為大腸埃希氏菌FERM-P4900、谷氨酸棒桿菌FERM-P5835、黃色短桿菌FERM-P4164、乳酸發(fā)酵短桿菌FERM-P4180、黃色短桿菌ATCC21269或嗜乙酰乙酸棒桿菌ATCC21270;L-異亮氨酸發(fā)酵菌為黃色短桿菌FERM-P3672、乳酸發(fā)酵短桿菌FERM-P4192、谷氨酸棒桿菌FERM-P756、谷氨酸棒桿菌FERM-P757、谷氨酸棒桿菌FERM-P758、黃色短桿菌FERM-BP759或黃色短桿菌FERM-BP760;L-組氨酸發(fā)酵菌為黃色短桿菌FERM-P2317、乳酸發(fā)酵短桿菌FERM-P1565、谷氨酸棒桿菌ATCC14297、乳酸發(fā)酵短桿菌ATCC21086、嗜乙酰乙酸棒桿菌ATCC21407、黃色短桿菌ATCC21406、枯草芽孢桿菌FERM-BP217或檸檬酸節(jié)桿菌ATCC21412;L-纈氨酸發(fā)酵菌為乳酸發(fā)酵短桿菌FERM-P1845、黃色短桿菌FERM-P512、乳酸發(fā)酵短桿菌FERM-P1968或大腸桿菌NRRL12285;L-絲氨酸發(fā)酵菌為乳酸發(fā)酵短桿菌FERM-P1371;L-鳥氨酸發(fā)酵菌為乳酸發(fā)酵短桿菌FERM-P5936、谷氨酸棒桿菌FERM-P5644、檸檬酸節(jié)桿菌ATCC21040或谷氨酸棒桿菌ATCC13232;L-瓜氨酸發(fā)酵菌為谷氨酸棒桿菌FERM-P5643或黃色短桿菌FERM-P1645;L-酪氨酸發(fā)酵萆為谷氨酸棒桿菌FERM-P5836、黃色短桿菌FERM-P7914或枯草芽孢桿菌FERM-P6758;L-色氨酸發(fā)酵菌枯草芽孢桿菌FERM-P5286、乳酸發(fā)酵短桿菌FERM-P7127、黃色短桿菌FERM-P2551、谷氨酸棒桿菌FERM-P7128、黃色短桿菌ATCC21427、黃色短桿菌FERM-BP114、枯草芽孢桿菌FERM-BP208、黃色短桿菌FERM-BP475、谷氨酸棒桿菌或枯草芽孢桿菌FERM-BP200;L-亮氨酸發(fā)酵菌為乳酸發(fā)酵短桿菌FERM-P1769、黃色短桿菌FERM-P420、谷氨酸棒桿菌FERM-P1966、黃色短桿菌FERM-BP755、谷氨酸棒桿菌FERM-BP756、谷氨酸棒桿菌FERM-P757或黃色短桿菌FERM-BP759。全文摘要本發(fā)明涉及一種發(fā)酵制備L-氨基酸的方法。本發(fā)明方法使用了發(fā)酵助劑甜菜堿磷酸鹽。采用本發(fā)明的方法，可以明顯提高L-氨基酸的產(chǎn)酸率，降低生產(chǎn)成本，宜于規(guī)模型的工業(yè)化生產(chǎn)。文檔編號C12R1/125GK101235401SQ200710037090公開日2008年8月6日申請日期2007年2月2日優(yōu)先權(quán)日2007年2月2日發(fā)明者吳品芳,雷耀輝,馬興群申請人:上海祥韋思化學(xué)品有限公司