專利名稱：：利用烏飯樹(shù)葉制備天然防腐劑中間體的方法及其用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種利用烏飯樹(shù)葉制備天然防腐劑中間體的方法及其用途。技術(shù)背景食品的腐敗變質(zhì)是指在微生物為主的各種因素作用下，食品的成分與感官性質(zhì)發(fā)生變化而導(dǎo)致食品質(zhì)量下降或失去食用價(jià)值，甚至造成食物中毒。近年來(lái)，全世界農(nóng)副產(chǎn)品、水產(chǎn)品、果蔬等食品腐爛變質(zhì)而引起的經(jīng)濟(jì)損失十分巨大，因而食品的防腐保鮮始終是食品工業(yè)中一個(gè)亟待解決的重要問(wèn)題。長(zhǎng)期的研究發(fā)現(xiàn)現(xiàn)在普遍使用的化學(xué)防腐劑對(duì)人體有誘癌性、致畸性等或多或少的毒害作用，并且對(duì)自然界的生態(tài)環(huán)境也會(huì)造成不利的影響，例如亞硝酸鹽和硝酸鹽可能會(huì)生成致癌的亞硝胺等，因而必須嚴(yán)格限制其在食品中的用量。比較而言，天然防腐劑具有抗菌性強(qiáng)、安全無(wú)毒、水溶性好、熱穩(wěn)定性好、作用范圍廣等化學(xué)防腐劑所無(wú)法比擬的優(yōu)點(diǎn)。但是，天然防腐劑往往由于生產(chǎn)成本較高，品種較少而限制了其廣泛應(yīng)用。烏飯樹(shù)(Kzcc/w'wm6racto3/wwThunb.)為杜昌粵花禾斗(Ericaceae)越桔屬(VacciniumLinn.)的常綠灌木或小喬木，主產(chǎn)于我國(guó)華東、華中、華南至西南地區(qū)，常分布在丘陵地帶或海拔4001400米的山地，常見(jiàn)于山坡林內(nèi)或灌叢中。在我國(guó)江浙一帶民間每年農(nóng)歷四月初八素有以烏飯樹(shù)的嫩莖葉浸汁后染米加工烏飯食用的習(xí)慣，做成的烏飯不僅具有很高的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值，并且暴露在空氣中數(shù)日不變色、不變味、不變質(zhì)，顯示出極好的抑菌防腐作用。本發(fā)明正是利用烏飯樹(shù)葉優(yōu)良的防腐作用，針對(duì)目前天然防腐劑成本高、品種少的缺點(diǎn)，
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的是提供一種利用烏飯樹(shù)葉制備天然防腐劑中間體的方法及其用途。它是烏飯樹(shù)葉加612倍體積百分比濃度為20%95%乙醇，冷浸或加熱回流提取14次，每次0.512小時(shí)，提取液過(guò)濾，合并，濃縮至0.25-1.0g生藥/mL，過(guò)濾或離心分離后通過(guò)AB-8或Du),大孔樹(shù)脂柱，烏飯樹(shù)葉與大孔樹(shù)脂的重量比為1:15，上柱流速14BV/h，樹(shù)脂柱徑高比為1:31:9;用水洗滌樹(shù)脂38BV，洗脫流速為24BV/h，水洗脫液棄去；用體積百分比濃度為20%95%乙醇洗脫，流速為24BV/h，收集乙醇洗脫液；乙醇液減壓濃縮，減壓或噴霧干燥，烏飯樹(shù)葉提取物粉碎后，即得天然防腐劑中間體。所述的提取所用乙醇的體積百分比濃度優(yōu)選30%95%。所述的洗脫樹(shù)脂所用乙醇的體積百分比濃度優(yōu)選30%95%。利用烏飯樹(shù)葉制備天然防腐劑的中間體用于制備牛奶制品、罐頭食品的防腐劑。本發(fā)明采用的原材料屬于可再生資源，取材容易，成本低；生產(chǎn)工藝簡(jiǎn)單、可行。由該方法制備的防腐劑中間體對(duì)細(xì)菌[金黃色葡萄球菌(Sto;/^/ococc^做rem0、大腸桿菌(^c/zm-c/n'"co/f)、枯草芽抱桿菌(5a"7/wssw6"7/51)、蘇z金芽包桿菌(5ac/〃MJ2Mn'wg/e"s&)]、霉菌[黑曲霉(^s/erg/〃a黃曲霉(y^/erg/腸y7av"s)、根霉(監(jiān)zo/ms"jfgn'ctms)]、真菌[白色念珠菌(Ca"d/<iaa/Z/c<ms)、酵母菌(Sacc/2araw;/cescereWw'aei/a""")、]的生長(zhǎng)均有良好的抑帝!j作用。通過(guò)該方法制備的中間體可與多種輔料配伍，制成天然防腐劑，用于面包、牛奶制品、罐頭食品等的防腐。具體實(shí)施方式烏飯樹(shù)葉加612倍體積百分比濃度為20%95%乙醇，冷浸或加熱回流提取14次，每次0.512小時(shí)，提取液過(guò)濾，合并，濃縮至0.251.0g生藥/mL，過(guò)濾或離心分離后通過(guò)AB-8或Dun大孔樹(shù)脂柱，烏飯樹(shù)葉與大孔樹(shù)脂的重量比為1:15，上柱流速14BV/h，樹(shù)脂柱徑高比為1:31:9;用水洗滌樹(shù)脂38BV，洗脫流速為2-4BV/h，水洗脫液棄去；用濃度為20%95%水乙醇洗脫，流速為24BV/h，收集乙醇洗脫液；乙醇液減壓濃縮，減壓或噴霧干燥，得烏飯樹(shù)葉提取物。該提取物粉碎后，即得天然防腐劑中間體。所制備的天然防腐劑中間體總黃酮含量不低于20%(UV法，以葒草素或異葒草素計(jì)，重量百分比)；葒草素不低于1%(HPLC法、重量百分比)；異葒草素不低于1%(HPLC法、重量百分比)。實(shí)施例1烏飯樹(shù)葉加6倍30%乙醇，加熱回流提取l次，每次0.5小時(shí)，提取液過(guò)濾，合并，濃縮至0.25g生藥/mL，過(guò)濾后通過(guò)AB-8大孔樹(shù)脂柱，烏飯樹(shù)葉與AB-8大孔樹(shù)脂的重量比為1:1，上柱流速lBV/h，樹(shù)脂柱徑高比為1:3;用水洗滌樹(shù)脂3BV，洗脫流速為2BV/h，水洗脫液棄去；用30%乙醇洗脫，流速為2BV/h，收集乙醇洗脫液；乙醇液減壓濃縮，減壓干燥，得烏飯樹(shù)葉提取物，該提取物粉碎，得天然防腐劑中間體。該中間體總黃酮含量為20%(UV法，以葒草素或異葒草素計(jì)，重量百分比)；葒草素含量為1%(HPLC法、重量百分比)；異葒草素含量為1%(HPLC法、重量百分比)。實(shí)施例2烏飯樹(shù)葉加12倍95%乙醇，冷浸4次，每次12小時(shí)，提取液過(guò)濾，合并，濃縮至l.Og生藥/mL，離心分離后通過(guò)Dw大孔樹(shù)脂柱，烏飯樹(shù)葉與Dnn大孔樹(shù)脂的重量比為1:5，上柱流速4BV/h,樹(shù)脂柱徑高比為1:9;用水洗滌樹(shù)脂8BV，洗脫流速為4BV/h，水洗脫液棄去；用95%乙醇洗脫，流速為4BV/h，收集乙醇洗脫液；乙醇液減壓濃縮，減壓或噴霧干燥，得烏飯樹(shù)葉提取物，該提取物粉碎，得天然防腐劑中間體。該中間體總黃酮含量為90%(UV法，以葒草素或異葒草素計(jì)，重量百分比)；葒草素含量為12%(HPLC法、重量百分比)；異葒草素含量為11%(HPLC法、重量百分比)。實(shí)施例3烏飯樹(shù)葉加8倍70%乙醇，冷浸3次，每次8小時(shí)，提取液過(guò)濾，合并，濃縮至0.5g生藥/mL，離心分離后通過(guò)D^大孔樹(shù)脂柱，烏飯樹(shù)葉與D朋大孔樹(shù)脂的重量比為1:3，上柱流速2BV/h，樹(shù)脂柱徑高比為1:5;用水洗滌樹(shù)脂5BV，洗脫流速為3BV/h，水洗脫液棄去；用70%乙醇洗脫，流速為3BV/h，收集乙醇洗脫液；乙醇液減壓濃縮，減壓或噴霧干燥，得烏飯樹(shù)葉提取物該提取物粉碎，得天然防腐劑中間體。該中間體總黃酮含量為50%(UV法，以葒草素或異葒草素計(jì)，重量百分比)；葒草素含量為8%(HPLC法、重量百分比)；異葒草素含量7%(HPLC法、重量百分比)。所制備的天然防腐劑中間體的抑菌試驗(yàn)結(jié)果1、烏飯樹(shù)葉乙醇提取物抑菌試驗(yàn)烏飯樹(shù)葉用10倍量70%乙醇冷浸3次，每次12小時(shí)，冷浸提取液合并，過(guò)濾，濃縮，干燥，得烏飯樹(shù)葉乙醇提取物。表l烏飯樹(shù)葉乙醇提取物抑菌試驗(yàn)結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>("+"表示該樣品濃度下指示菌生長(zhǎng)呈陽(yáng)性，"一"表示指示菌生長(zhǎng)呈陰性)"提取物"在1.25%的濃度下，對(duì)金黃色葡萄球菌有抑制作用"提取物"在0.625%的濃度下，對(duì)金黃色葡萄球菌失去抑制作用"提取物"在1.25%的濃度下，對(duì)枯草芽孢桿菌有抑制作用"提取物"在0.625%的濃度下，對(duì)枯草芽孢桿菌失去抑制作用"提取物"在1.25%的濃度下，對(duì)大腸桿菌有抑制作用"提取物"在0.625%的濃度下，對(duì)大腸桿菌失去抑制作用"提取物"在1.25。％的濃度下，對(duì)蘇云金芽孢桿菌有抑制作用"提取物"在0.625%的濃度下，對(duì)蘇云金芽孢桿菌失去抑制作用"提取物"在1.25%的濃度下，對(duì)黑曲霉有抑制作用"提取物"在0.625%的濃度下，對(duì)黑曲霉失去抑制作用"提取物"在1.25%的濃度下，對(duì)黃曲霉有抑制作用"提取物"在0.625%的濃度下，對(duì)黃曲霉失去抑制作用"提取物"在1.25°%的濃度下，對(duì)根霉有抑制作用"提取物"在0.625Q/^的濃度下，對(duì)根霉失去抑制作用"提取物"在1.25%的濃度下，對(duì)白色念珠菌有抑制作用"提取物"在0.625%的濃度下，對(duì)白色念珠菌失去抑制作用"提取斷'在1.25%的濃度下，對(duì)酵母菌有抑制作用"提取物"在0.625%的濃度下，對(duì)酵母菌失去抑制作用2、由烏飯樹(shù)葉制備的天然防腐劑中間體的抑菌試驗(yàn)表2試驗(yàn)結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>枯草芽孢桿菌+++大腸桿菌一——+++++_蘇云金芽孢桿菌—一——++++一黑曲霉菌+++_黃曲霉菌+++一根霉一—_+++++.—白色念珠菌一__—++++—酵母菌++—("+"表示該樣品濃度下指示菌生長(zhǎng)呈陽(yáng)性，"_"表示指示菌生長(zhǎng)呈陰性)"提取物"在0.3125。％的濃度下，對(duì)金黃色葡萄球菌有抑制作用"提取物"在0.15625%的濃度下，對(duì)金黃色葡萄球菌失去抑制作用"提取物"在0.3125%的濃度下，對(duì)枯草芽孢桿菌有抑制作用"提取物"在0.15625%的濃度下，對(duì)枯草芽孢桿菌失去抑制作用"提取物"在1.25%的濃度下，對(duì)大腸桿菌有抑制作用"提取物"在0.625%的濃度下，對(duì)大腸桿菌失去抑制作用"提取物"在0.625%的濃度下，對(duì)蘇云金芽孢桿菌有抑制作用"提取物"在0.3125%的濃度下，對(duì)蘇云金芽孢桿菌失去抑制作用"提取物"在0.3125%的濃度下，對(duì)黑曲霉有抑制作用"提取物"在0.15625%的濃度下，對(duì)黑曲霉失去抑制作用"提取物"在0.325%的濃度下，對(duì)黃曲霉有抑制作用"提取物"在0.15625%的濃度下，對(duì)黃曲霉失去抑制作用"提取物"在1.25%的濃度下，對(duì)根霉有抑制作用"提取物"在0.625%的濃度下，對(duì)根霉失去抑制作用"提取物"在0.625%的濃度下，對(duì)白色念珠菌有抑制作用"提取物"在0.3125%的濃度下，對(duì)白色念珠菌失去抑制作用"提取物"在0.15625%的濃度下，對(duì)酵母菌有抑制作用"提取物"在0.078125%的濃度下，對(duì)酵母菌失去抑制作用權(quán)利要求1、一種利用烏飯樹(shù)葉制備天然防腐劑中間體的方法，其特征在于烏飯樹(shù)葉加6～12倍體積百分比濃度為20％～95％乙醇，冷浸或加熱回流提取1～4次，每次0.5～12小時(shí)，提取液過(guò)濾，合并，濃縮至0.25～1.0g生藥/mL，過(guò)濾或離心分離后通過(guò)AB-8或D101大孔樹(shù)脂柱，烏飯樹(shù)葉與大孔樹(shù)脂的重量比為1∶1～5，上柱流速1～4BV/h，樹(shù)脂柱徑高比為1∶3～1∶9；用水洗滌樹(shù)脂柱3～8BV，洗脫流速為2～4BV/h，水洗脫液棄去；用體積百分比濃度為20％～95％乙醇洗脫，流速為2～4BV/h，收集乙醇洗脫液；乙醇液減壓濃縮，減壓或噴霧干燥，烏飯樹(shù)葉提取物粉碎后，即得天然防腐劑中間體。2、根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種利用烏飯樹(shù)葉制備天然防腐劑中間體的方法，其特征在于提取所用乙醇的體積百分比濃度30%95%。3、根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種利用烏飯樹(shù)葉制備天然防腐劑中間體的方法，其特征在于洗脫樹(shù)脂所用乙醇的體積百分比濃度30%95%。4、一種如權(quán)利要求1所述的利用烏飯樹(shù)葉制備天然防腐劑中間體的用途，其特征在于用于制備牛奶制品、罐頭食品的防腐劑。全文摘要本發(fā)明公開(kāi)了一種利用烏飯樹(shù)葉制備天然防腐劑中間體的方法及其用途。它是將烏飯樹(shù)葉加乙醇，冷浸或加熱回流提取，提取液過(guò)濾，合并，濃縮，過(guò)濾或離心后通過(guò)大孔樹(shù)脂，先用水洗滌樹(shù)脂，水洗脫液棄去；再用乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液；乙醇液減壓濃縮，干燥，得烏飯樹(shù)葉提取物。該提取物粉碎后，即得天然防腐劑中間體。本發(fā)明所用資源具有再生性，生產(chǎn)成本低，制備的防腐劑中間體防腐作用強(qiáng)，安全無(wú)毒，可與多種輔料配伍制成天然防腐劑，用于面包、牛奶制品、罐頭食品等的防腐。文檔編號(hào)A23L3/3463GK101152018SQ20071007062公開(kāi)日2008年4月2日申請(qǐng)日期2007年8月31日優(yōu)先權(quán)日2007年8月31日發(fā)明者劉洪梅,劉洪輝,亮增,琳張,張紅偉,田富饒,田景奎,鐳羅,谷希達(dá),波陳申請(qǐng)人:浙江大學(xué)