專利名稱：：抗過敏的乳酸菌的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及應(yīng)用在食品或醫(yī)藥中的抗過敏乳酸菌菌株組合物，及其在提高抗過敏能力中的用途。
背景技術(shù)：
：近幾年來，過敏疾病有逐年增加的趨勢，不論是在異位性皮膚炎、過敏性鼻炎和支氣管性氣喘的發(fā)生率都有增加的情形。目前認為過敏疾病的發(fā)生可能與文明的進步有關(guān)，包括空氣的污染和感染的減少都是導(dǎo)致過敏疾病增加的一些可能原因。而目前氣喘的治療主要依靠藥物治療如使用類固醇和抑制肥大細胞釋放發(fā)炎物質(zhì)的藥物、氣管擴張劑和免疫療法等。但是，包括抗發(fā)炎藥物和氣管擴張劑在內(nèi)的藥物治療還是無法真正的改變過敏免疫反應(yīng)，所以只能說是治標的方法。而唯一能夠說是改變過敏免疫體質(zhì)的治療方式，便是所謂的減敏療法，但是減敏治療通常需要較長的一段時間，而且有時會出現(xiàn)一些副作用，因此也不能用于所有的病人。有關(guān)過敏疾病的增加，目前認為跟大環(huán)境的變化有密切關(guān)系，特別是在環(huán)境方面有更明顯的關(guān)系。人體腸道中的益生菌會刺激免疫系統(tǒng)作用，但如果在日常生活中食品所含抗生素或是類固醇的含量太高的話，都會導(dǎo)致腸道內(nèi)的益生菌降低，因而無法有效地刺激免疫細胞中輔助型T細胞l(Thl)的生成，而這些輔助型T細胞1的生成與輔助型T細胞2(Th2)相關(guān)過敏疾病的發(fā)生有著密切聯(lián)系。因此，如果能利用保健食品刺激免疫系統(tǒng)，激發(fā)可以調(diào)節(jié)過敏免疫反應(yīng)中的Thl型免疫反應(yīng)來平衡過敏所引發(fā)的Th2型免疫反應(yīng)，將可達到改善過敏體質(zhì)的效果。在人類應(yīng)用微生物的歷史上，乳酸菌的應(yīng)用起源相當(dāng)早。從早期乳制品的加工上發(fā)現(xiàn)，食用以乳酸菌發(fā)酵的食品，有助于改善人類腸胃道疾病的發(fā)生率以及延長平均壽命。由此，引發(fā)許多學(xué)者開始研究探討乳酸菌在促進人體健康中所起的作用。1954年提出功能性乳酸菌之后，在幾年間不斷掀起研究的熱潮，并于1965年由LillyDM等人正式提出Probiotic—益生菌的概念，使之成為功能性乳酸菌的統(tǒng)稱。一般食用含乳酸菌(LAB)的產(chǎn)品僅具有調(diào)整腸道的健康效果，雖然有數(shù)以萬計的乳酸菌菌株存在于自然界，但僅有少數(shù)乳酸菌株具有抗過敏的特質(zhì)。少數(shù)這些細菌株所具有的耐酸與耐膽鹽能力、吸附粘膜表皮細胞的能力及在通過腸胃道后仍可存活的能力等特性，是篩選具有促進健康效果的菌株時的重要依據(jù)。時至今日，僅有少數(shù)幾株乳酸菌菌株經(jīng)證明具有抗過敏的健康效果，而乳酸菌對身體健康的功能在于菌株(strain)的特異性而非菌種(species)，這種對人類身體健康具有特殊功效的菌株被稱為功能性益生菌(Guidelinesfortheevaluationofprobioticsinfood;ReportofjointFAO/WHOworkinggroupondraftingguidelinesfortheevaluationofprobioticsinfood;"食品益生菌評估指南"，F(xiàn)AO/WHO聯(lián)合工作組關(guān)于起草食品益生菌評估指南的報告，LondonOntario,Canada,2002年4月30日和5月1日1-7)。過敏疾病，例如過敏性濕疹、蕁麻疹、反復(fù)發(fā)作的過敏性鼻炎及過敏性氣喘，在臺灣及其它發(fā)達國家中已成為嚴重的社會問題。導(dǎo)致過敏疾病流行程度的上升是有原因的，眾所皆知的衛(wèi)生學(xué)假說為嬰幼兒接觸免疫刺激病原體的機會愈少，愈容易引發(fā)過敏相關(guān)疾病(Strachan，1989)。過敏疾病發(fā)生時，人體內(nèi)的免疫反應(yīng)會使Thl細胞數(shù)量下降，連續(xù)產(chǎn)生多種細胞激素促使免疫反應(yīng)朝向Th2途徑，形成體液免疫反應(yīng)，例如IgE的產(chǎn)生及嗜伊紅細胞過多等(Romagnani,1994;Holt,1995)。在愛沙尼亞及瑞典這兩個國家的兒童人口中發(fā)現(xiàn)，患過敏疾病的兒童腸道內(nèi)的乳酸桿菌比無過敏疾病的孩童要少(Bjo"rksten等，1999)。乳酸桿菌被認為可促進Thl的免疫反應(yīng)進而改善過敏癥狀(Cross等,2001)。再者，在以卵白蛋白誘發(fā)小鼠過敏的動物實驗?zāi)Ｐ椭邪l(fā)現(xiàn)，讓小鼠以口服方式食用熱處理后的干酪乳酸菌Shitota株(丄a"o6ac/〃wca"/strainShitota)，可抑制小鼠血清中IgE的含量(Matsuzaki等,1998)。此外，在以酪蛋白誘發(fā)小鼠過敏的動物實驗?zāi)Ｐ椭凶C明，腹腔注射熱處理后的胚芽乳酸桿菌L-137(丄actotoc/〃ws//a"Zan/m￡-737)，也可抑制IgE的產(chǎn)生(Murosaki等，1998)。在由豕草花粉過敏引起的過敏癥狀中，口服糞腸球菌(五"terococc^/aeca&)FK-23萃取物，可使腹膜內(nèi)聚集的嗜伊紅細胞細胞量減少(Shimada等,2003)。人體的臨床試驗中，于孕婦待產(chǎn)期間服用糖和鼠李糖乳桿菌菌株GG(Zacto6ac/〃wsr/wm"omsWra/"GG)，發(fā)現(xiàn)在嬰兒出生后兩年(Kallioma"ki等，2001)及嬰兒期后(Kallioma"ki等,2003)，可降低嬰幼兒發(fā)生過敏性濕疹的風(fēng)險及發(fā)生率。鼠李糖乳桿菌19070-2及羅伊氏乳桿菌(丄a"o6ac/〃wreWeW)DSM122460也可以適度地改善患有異位性皮膚炎的兒童的嚴重濕疹過敏癥狀(Rosenfeldt等，2003)。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明一方面廣義上包括由下列任一種生物性純培養(yǎng)物與生理上可接受的賦形劑或稀釋劑組成的組合物嗜酸乳桿菌(L""0&C///^acWo/^//w)PM-A0002菌株，二OO七年四月六日保藏于中國典型培養(yǎng)物保藏中心，保藏號M207038;力卩氏乳酸桿菌(丄a"o6ac/〃wga^eW)PM-A0005菌株，二OO七年四月六日保藏于中國典型培養(yǎng)物保藏中心，保藏號M207039;唾液乳酸桿菌(丄fl"o6flc/〃wssa/hw/ws)PM-A0006菌株，二〇〇七年四月六日保藏于中國典型培養(yǎng)物保藏中心，保藏號M207040;約氏乳酸桿菌(丄a"o^c///^yO/mwm7)PM-A0009菌株，二〇O七年四月六日保藏于中國典型培養(yǎng)物保藏中心，保藏號M207041;嗜酸乳桿菌(丄a"o6a"7/wa"Wop/n7""PM-A0013菌株，二OO七年四月六日保藏于中國典型培養(yǎng)物保藏中心，保藏號M207042。在本發(fā)明的一項具體實施方式中，該組合物含有一種或一種以上所述菌株，優(yōu)選的生理上可接受的賦形劑或稀釋劑是一種食品，該食品可以是釀酵乳、酸乳酪(yogurt)、乳酪、乳制飲品、乳粉、茶飲料或咖啡中的任何一種。或者，該組合物是藥物組合物，且其賦形劑或稀釋劑應(yīng)為藥學(xué)上可接受的賦形劑或稀釋劑。在另一項具體實施方式中，采用了具有增強抗過敏能力的、生理上可接受的下列任一種菌株的同種或突變種的生物性純培養(yǎng)物嗜酸乳桿菌PM-A0002菌株、加氏乳酸桿菌PM-A0005菌株、唾液乳酸桿菌PM-A0006菌株、約氏乳酸桿菌PM-A0009菌株或嗜酸乳桿菌PM-A0013菌株。此外，在另一項具體實施方式中，本發(fā)明可廣義包括通過促進白介素-12(11^-12)或干擾素7調(diào)控丁111型免疫反應(yīng)而抑制免疫球蛋白IgE，改善Th2型免疫反應(yīng)過度的過敏現(xiàn)象的方法，所述方法包括給予哺乳動物可達到刺激Thl型免疫效果劑量的任一種前述生物性純培養(yǎng)物。再者，在另一項具體實施方式中，采用了前述所定義菌株中一種以上生物性純培養(yǎng)物，優(yōu)選以組合物的形式給予該培養(yǎng)物與生理上可接受的賦形劑或稀釋劑，其中所述生理上可接受的賦形劑或稀釋劑優(yōu)選為食品，該食品優(yōu)選是酸酵乳、酸乳酪、乳酪、乳制飲品、乳粉、茶飲料或咖啡中的任一種?；蛘?，該組合物是藥物組合物，且其賦形劑或稀釋劑應(yīng)為藥學(xué)上可接受的賦形劑或稀釋劑。在另一項具體實施方式中，提供了上述任一或多種生物性純培養(yǎng)物在制備用于刺激免疫細胞分泌抗過敏相關(guān)細胞激素的藥物中的用途。本發(fā)明亦可廣義的包括本申請說明書中單獨或總合說明的部分、其構(gòu)成要件與特征，及任何包含這些部分、構(gòu)成要件與特征中任何一種或多種的任何組合或其全部的組合，且若本文所述及的明確完整事物已在與本發(fā)明有關(guān)之相關(guān)技術(shù)中出現(xiàn)已知的同等物時，這些已知的同等物將視為獨立事項并入本文中。圖1顯示分別將106至108個Cfll嗜酸乳桿菌(丄fl"0^c/〃MacWop/z/Zw^PM-AOOOS菌株、力[]氏乳酸桿菌(丄a"oZa"7/wga^e〃')PM-A0005菌株、唾液學(xué)L酸桿菌(丄g"o6ac〃/w"a〃暫/w"w鄉(xiāng).滅"'"^)>4-八0006菌株、約氏乳酸桿菌(丄a"o6ac/〃wyo/msom7)PM-A0009菌株或嗜酸乳桿菌(丄a"oZ^c/〃wsflcWo/7/z//w)PM-A0013菌株與105至1(^個人類外周血單核細胞(PBMC)共同培養(yǎng)48小時后，收取細胞上清液，以酶聯(lián)免疫分析法檢測干擾素Y(IFN-gamma)在上清液中的含量。其中，以無抗過敏功能的乳酸菌(干酪乳酸菌BCRC12249，Z""o6gc/〃wcase/BCRC12249-臺灣食品工業(yè)發(fā)展研究所)為陰性對照組，PHA為陽性對照組，檢測干擾素Y的受刺激濃度。結(jié)果顯示試驗組可以顯著的刺激人類外周血單核細胞(PBMC)分泌干擾素Y，與陰性對照組有顯著性差異。圖2顯示分別將熱滅活的106至108個cfu嗜酸乳桿菌(丄a"o^c/〃wa"Wo//n7w)PM-A0002菌株、力H氏乳酸桿菌(丄a"o6ac〃/wsga^en〕PM陽A0005菌株、唾液乳酸桿菌(Zcr"o6ac〃/w"(3〃vfln'w"w—sa〃c/m,w"PM-A0006菌株、約氏乳酸桿菌(丄fl"o6ac〃/w乂o/z似om7)PM-A0009菌株或嗜酸乳桿菌(丄a"o6ac〃/wsa"Wo;/n7w"PM-A0013菌株與105至1()7個人類樹突狀細胞(dendriticcell)共同培養(yǎng)48小時，收取細胞上清液，以酶聯(lián)免疫分析法檢測白介素IL-12在上清液中的含量。其中，以無抗過敏功能的乳酸菌(干酪乳酸菌BCRC12249-臺灣食品工業(yè)發(fā)展研究所)為陰性對照組，PHA為陽性對照組，檢測白介素-12(IL-12)的受刺激濃度。結(jié)果顯示試驗組可以顯著的刺激人類樹突狀細胞分泌白介素-12(IL-12)，與陰性對照組有顯著性差異。圖3顯示試驗結(jié)果顯示市售抗過敏乳酸菌在培養(yǎng)基的活化后，經(jīng)由酸性緩沖溶液及膽鹽處理后，菌數(shù)明顯下降；而本發(fā)明具有調(diào)節(jié)過敏作用的保藏乳酸菌株在培養(yǎng)基活化后，用酸性緩沖溶液及膽鹽處理，PM-A0006、PM-A0009、PM-A0013菌數(shù)并不受胃酸膽堿改變影響而急劇下降，PM-A0002及PM-A0005不受胃酸影響(菌數(shù)證明其對胃酸具有耐受性)，而將菌株經(jīng)由膽鹽處理時，雖然菌數(shù)有些許的下降，但對膽鹽仍有耐受性，證明這五株抗過敏的乳酸菌株可以通過人體消化系統(tǒng)嚴格環(huán)境的考驗。圖4顯示依據(jù)Jacobsen等學(xué)者(1999)的分析方法，當(dāng)每個視野的平均菌數(shù)少于40個時，判定為"不附著(nonadhesive)";當(dāng)每個視野的平均菌數(shù)介于41個至100個時，判定為"附著(adhesive)";當(dāng)每個視野的平均菌數(shù)大于100個時，判定為"強烈附著(stronglyadhesive)"。結(jié)果顯示嗜酸乳桿菌(Z^cto6"c/〃wac^/o/A//wj)PM-A0002菌株、力卩氏乳酸桿菌(丄a"o6ac〃/wsgowen')PM陽A0005菌株、唾液乳酸桿菌(丄a"oZa"7/w51^//vaWwsw&;.fl/Zc/w/wjOPM-AOOOG菌株、約氏乳酸桿菌(丄fl"o6ac/〃wyo/mso"z7)PM-A0009菌株等四株抗過敏菌株均判定"強烈附著"，而嗜酸乳桿菌(丄a"o6ac/〃"sa"Wo;Mw)PM-A0013菌株則判定為"附著"。圖5顯示抗過敏乳酸菌改善過敏實驗的設(shè)計流程，將管飼抗過敏乳酸菌的階段分為四期第一期為022天；第二期為2336天；第三期為3750天；第四期為5153天。其間以腹腔注射卵白蛋白(OVA)致敏小鼠，分四次致敏，第一次為開始管飼的第2天；第二次為開始管飼的第16天；第三次為開始管飼的第30天；第四次為開始管飼的第44天。對通過腹腔注射卵白蛋白(ovalbumin;OVA)致敏的小鼠進行隔周抽血，檢查小鼠體內(nèi)IgE含量的變化。于處死小鼠前4天(第54天)以鼻粘膜吸入方式致敏小鼠連續(xù)2天后，檢測小鼠的肺呼吸阻力反應(yīng)，隔天處死小鼠進行其它生化值的檢測。圖6顯示為小白鼠補充唾液乳酸桿菌PM-A0006乳酸菌株時，以卵白蛋白致敏的小白鼠血清中卵白蛋白(OVA)特異性抗體效價部分，隨著喂食劑量增加，卵白蛋白(OVA)致敏小鼠血清中的卵白蛋白(OVA)特異性IgE抗體有減少的趨勢。圖7顯示為小白鼠補充唾液乳酸桿菌PM-A0006乳酸菌株時，以卵白蛋白致敏的小白鼠肺呼吸阻力部分，相對于對照組，均可在高濃度乙酰甲膽堿(methacholine)刺激下顯著減低小鼠Penh值。圖8顯示為小白鼠補充唾液乳酸桿菌PM-A0006乳酸菌株時，以卵白蛋白致敏的小白鼠肺沖洗液中細胞組成部分，相對于對照組，有顯著較低的嗜伊紅細胞(eosinophil)浸潤比例。圖9顯示相對于對照組，喂食PM-A0006乳酸菌可顯著降低肺沖洗中嗜酸粒細胞趨化因子(eotaxin)的分泌量。圖IO顯示相對于對照組，喂食PM-A0006乳酸菌可顯著降低肺沖洗中PGE2分泌量。圖ll顯示脾臟細胞經(jīng)ConA或卵白蛋白(OVA)刺激培養(yǎng)48小時后，在ConA刺激下，喂食PM-A0006乳酸菌組的脾臟細胞分泌的干擾素Y顯著高于對照組。具體實施方式本發(fā)明可廣義的包括下列任一種生物性純培養(yǎng)物嗜酸乳桿菌(丄fl"o6"c/〃wac/flbp/n7w力PM-A0002菌株，二〇〇七年四月六日保藏于中國典型培養(yǎng)物保藏中心，保藏號M207038;加氏乳酸桿菌(丄fl"o6flc///^ga"en')PM-A0005菌株，二〇O七年四月六日保藏于中國典型培養(yǎng)物保藏中心，保藏號M207039;唾液乳酸桿菌(丄flco6ac/〃wsa//va〃^)PM-A0006菌株，二OO七年四月六日保藏于中國典型培養(yǎng)物保藏中心，保藏號M207040;約氏乳酸桿菌(丄fl"o6ac"/wyo/msom7)PM-A0009菌株，二OO七年四月六日保藏于中國典型培養(yǎng)物保藏中心，保藏號M207041;嗜酸乳桿菌(丄a"o6flc/〃Ma"Wo;/n7w)PM-A0013菌株，二〇O七年四月六日保藏于中國典型培養(yǎng)物保藏中心，保藏號M207042。許多文獻指出增加輔助型T細胞1的細胞激素包括白介素-12(IL-12)、干擾素y(IFN-gamma)的分泌增加，可以有效改善過敏癥狀；進一步的研究也指出特定的乳酸菌株和樹突狀細胞上Toll樣受體(Toll-likereceptor)結(jié)合，活化細胞內(nèi)的轉(zhuǎn)譯蛋白移至核內(nèi)而釋放大量細胞激素，屬于先天免疫的一個環(huán)節(jié)，因此某些特定的乳酸菌菌種借由其細胞壁多糖類物質(zhì)如肽聚糖(peptidoglycan)、脂多糖(lipopolysaccharide)、多糖(polysaccharide)等，經(jīng)先天免疫系統(tǒng)，確實能活化T細胞的發(fā)育。該五株細菌菌株的冷凍干燥培養(yǎng)物已保藏在中國典型培養(yǎng)物保藏中心，地址為中國武漢市武漢大學(xué)。保藏的詳細資料如表l所示表l<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>已發(fā)現(xiàn)如上所列保藏的這五株乳酸菌具有抗過敏的能力，包括對于異位性皮膚炎、蕁麻疹、過敏性鼻炎、食物過敏及氣喘的癥狀有減緩及治療的功能。實施例實施例1:五株抗過敏乳酸菌的形態(tài)學(xué)及一般性質(zhì)根據(jù)16SrDNA序列分析及API細菌鑒定系統(tǒng)分析結(jié)果來確認菌株在分類學(xué)上的特征。發(fā)現(xiàn)，東宇菌株編號PM-A0002為嗜酸乳桿菌；東宇菌株編號PM-A0005為加式乳酸桿菌；東宇菌株編號PM-A0006為唾液乳酸桿菌；東宇菌株編號PM-A0009為約式乳酸桿菌；及東宇菌株編號PM-A0013為嗜酸乳桿菌。此五株菌株在形態(tài)學(xué)及一般性質(zhì)上的特征詳細列于表2:表2_嗜酸乳桿菌PM-A0002:于常規(guī)MRS培養(yǎng)液培養(yǎng)時，菌體呈短桿狀或稍長，二端呈圓形，通常單獨出現(xiàn)、成對或成短鏈狀。革蘭氏染色陽性桿菌，不生成孢子，不具觸酶、氧化酶及運動性，在好氧及厭氧環(huán)境均能生長，最適宜的生長溫度為37±1QC，屬于兼性異質(zhì)酸酵性菌株，葡糖代謝時不產(chǎn)生氣體。_加氏乳酸桿菌PM-A0005:于MRS培養(yǎng)液培養(yǎng)時，菌體呈短桿狀或稍長，二端呈圓形，通常<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>于MRS培養(yǎng)液培養(yǎng)時，呈短或稍長的桿狀，二端呈方形，成鏈狀。革蘭氏染色陽性桿菌，不生成孢子，不具觸酶、氧化酶及運動性，在好氧及厭氧環(huán)境均能生長，最適宜的生長溫度為37±1QC，屬于兼性異質(zhì)酸酵性菌株，葡糖代謝時不產(chǎn)生氣體。實施例2:抗過敏乳酸菌對通過促進干擾素Y的分泌來調(diào)控Thl型免疫能力的作用(以外周血單核細胞為體外功效驗證平臺)檢測五株抗過敏乳酸菌株嗜酸乳桿菌PM-A0002菌株、加氏乳酸桿菌PM-A0005菌株、唾液乳酸桿菌PM-A0006菌株、約氏乳酸桿菌PM-A0009菌株或嗜酸乳桿菌PM-A0013菌株對Thl型免疫能力的增進效果，通過測定人類外圍血液單核細胞與抗過敏乳酸菌共同培養(yǎng)后干擾素7的分泌量，來篩選具有抗過敏能力的菌株。使用如下的實驗步驟l.抽取適量人類血液，每次約200ml。2.取等比例的血球分離液(Ficoll-p叫ue)與血液在18-2(TC下以400g離心30-40分鐘。3.取人類外周血單核細胞(Peripheralbloodmononuclearcell,PBMC)層，用緩沖溶液清洗細胞2-3次后，以適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基(例如RPMI-1640)懸浮細胞。4.將細胞與已活化3天的乳酸菌株以1:10比例共同培養(yǎng)48小時。5.收取細胞培養(yǎng)之上清液。利用酶聯(lián)免疫分析法(ELISA)檢測干擾素Y(IFN-gamma)在上清液中的含量。數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析如表3及圖l所示，以平均值士SD表示。圖l所示為分別以106至108個cfu嗜酸乳桿菌(Z^"o6flcz'〃wflcWo;/n7w"PM-A0002菌株、加氏乳酸桿菌(la"o6ac/〃wgawen')PM-A0005菌株、唾液乳酸桿菌(丄a"o6a"'〃ws■sa/Zv^/i^PM-A0006菌株、約氏乳酸桿菌(￡a"o6ac/〃"s^o/wsom'OPM-A0009菌株或嗜酸乳桿菌aa"o6flc/〃"sa"Wo/Mw)PM-A0013菌株與105至107個人類外周血單核細胞(PBMC)共同培養(yǎng)48小時，收取細胞上清液，以酶聯(lián)免疫分析法檢測干擾素7(IFN-gamma)在上清液中的含量。其中，以無抗過敏功能的乳酸菌(干酪乳酸菌BCRC12249)為陰性對照組，PHA(phyohenagglutimin)為陽性對照組，檢測干擾素y受刺激濃度。結(jié)果顯示試驗組可以顯著的刺激人類外周血單核細胞(PBMC)分泌干擾素y，與陰性對照組有顯著性差異。表3為分別以五株抗過敏菌株與人類外周血單核細胞一起培養(yǎng)，刺激干擾素y的分泌量(平均值±SD):表3<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>實施例3:抗過敏乳酸菌對白介素(IL-12)的分泌調(diào)控的Thl型免疫能力的作用1(以樹突狀細胞為體外功效驗證平臺)檢測五株抗過敏乳酸菌株嗜酸乳桿菌PM-A0002菌株、加氏乳酸桿菌PM-A0005菌株、唾液乳酸桿菌PM-A0006菌株、約氏乳酸桿菌PM-A0009菌株或嗜酸乳桿菌PM-A0013菌株對Thl型免疫能力的增進效果，通過測定人類樹突狀細胞與抗過敏乳酸菌共同培養(yǎng)后白介素-12(IL-12)的分泌量，來篩選具有抗過敏能力的菌株。使用如下的實驗步驟1.抽取適量人類血液，每次約200ml。2.取等比例的血球分離液(Ficoll-paque)與血液在18-20。C下以400g離心30-40分鐘。3.取人類外周血單核細胞(PBMC)層，用緩沖溶液清洗細胞2-3次后，以適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基(例如RPMI-1640)懸浮細胞。4.以CD14+微球(MiniMACSsystem)純化人類外周血單核細胞(PBMC)中的CD14+單核細胞。5.以細胞激素(IL-4)及生長激素GM-CSF刺激細胞分化成樹突狀細胞，6-7天的培養(yǎng)時間后，收集已分化的樹突狀細胞。6.將抗過敏乳酸菌株在共同培養(yǎng)之前3天活化，之后以IO(TC熱滅活乳酸菌株30分鐘。7.將樹突狀細胞與已熱滅活的乳酸菌株以1:10比例共同培養(yǎng)48小時。8.收集細胞培養(yǎng)上清液。利用酶聯(lián)免疫分析法(ELISA)檢測白介素(IL-12)在上清液中的含量。數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析如表4及圖2所示，以平均值iSD表示。圖2所示為分別以熱滅活106至1()8個cfu嗜酸乳桿菌(丄ac/o6ac/〃^a"Wo/7/n7"力PM-A0002菌株、加氏乳酸桿菌(丄fl"o6ac/〃wsgaweh)PM-A0005菌株、唾液乳酸桿菌(Z^c/o6ac〃/MSsa〃vfl"'z^)PM-A0006菌株、約氏乳酸桿菌(丄a"o6ac〃/ws乂o/msom7)PM-A0009菌株或嗜酸乳桿菌(丄fl"o6ac〃/wsacWo;/n7w)PM-A0013菌株與105至10"個人類樹突狀細胞(dentriticcell)共同培養(yǎng)48小時，收取細胞上清液，以酶聯(lián)免疫分析法檢測白介素(IL-12)在上清液中的含量。其中，以無抗過敏功能乳酸菌(干酪乳酸菌BCRC12249)為陰性對照組，PHA為陽性對照組，檢測白介素(IL-12)受刺激濃度。結(jié)果顯示試驗組可以顯著的刺激人類樹突狀細胞分泌白介素-12(IL-12)，與陰性對照組有顯著性差異。表<table>tableseeoriginaldocumentpage208</column></row><table>檢測五株抗過敏乳酸菌株嗜酸乳桿菌PM-A0002菌株、加氏乳酸桿菌PM-A0005菌株、唾液乳酸桿菌PM-A0006菌株、約氏乳酸桿菌PM-A0009菌株或嗜酸乳桿菌PM-A0013菌株，是否具有通過胃酸膽鹽考驗的能力，從而得以順利地在腸道發(fā)揮其抗過敏的功能，試驗流程如下1.將五株抗過敏乳酸菌活化3天。2.取1mL菌液計算原始菌數(shù)，剩余的乳酸菌以500g離心IO分鐘，加入去離子水清洗乳酸菌2-3次。3.加入以鹽酸調(diào)配成pH2.5的模擬胃酸溶液中，乳酸菌與pH2.5的培養(yǎng)基充分混合后，置于37"C培養(yǎng)箱。4.每小時取出1mL菌液以去離子水清洗2-3次后，計算存活細胞數(shù)，至3小時培養(yǎng)時間為止。5.剩余菌液離心后沉淀物再以含1.5y。(w/V)牛膽汁(oxga11，Sigma)的模擬膽堿溶液中回溶，充分混合后，于37"C培養(yǎng)。6.每小時取出1mL之菌液以去離子水清洗2-3次后，計算存活細胞數(shù)，至4小時培養(yǎng)時間為止。7.記錄乳酸菌生長速率，計算乳酸菌對胃酸與膽鹽的耐受力，以比較樣品中乳酸菌在胃酸及膽鹽存在下，菌株生長是否受到抑制。耐胃酸的能力結(jié)果與分析整理于表5及圖3中，圖3所示為試驗結(jié)果顯示市售抗過敏乳酸菌在培養(yǎng)基的活化后，經(jīng)由酸性緩沖溶液及膽鹽處理，菌數(shù)明顯下降；調(diào)節(jié)過敏的本發(fā)明保藏乳酸菌株在培養(yǎng)基活化后，用酸性緩沖溶液及膽鹽處理菌株，PM-A0006、PM-A0009、PM-A0013菌數(shù)并不受胃酸膽堿改變影響而急劇下降，PM-A0002及PM-A0005不受胃酸影響(菌數(shù)證明其對胃酸具有耐受性)，而將菌株經(jīng)由膽鹽處理時，雖然菌株有些許的下降，但對膽鹽仍有耐受性，證明抗過敏的這五株乳酸菌株可以通過人體消化系統(tǒng)嚴格環(huán)境的考驗。表5為以pH值2.5的鹽酸與抗過敏乳酸菌混合測驗其耐胃酸能力的結(jié)果表5:<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>耐膽鹽的能力結(jié)果與分析整理于表6及圖3中，表6為以1.5%的膽汁與抗過敏乳酸菌混合測驗其耐膽鹽能力的結(jié)果。表6<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>實施例5:抗過敏乳酸菌對人類腸道表皮細胞(CaCo-2)的吸附能力試驗在活體外采用已分化的細胞株分析五株抗過敏乳酸菌菌株吸附人類腸道表皮細胞(CaCo-2)的能力。先將人類腸道表皮細胞(CaCo-2)單層細胞接種于蓋玻片上，生長至單層細胞后，置入多孔細胞培養(yǎng)盤中。然后將細胞乳酸菌以1:200的比例，共同培養(yǎng)l-3小時，以lxPBS清洗并用甲醇固定細胞和剩余的附著菌數(shù)后，進行格蘭氏染色并確定所附著的菌數(shù)。參考Jacobsen等學(xué)者(1999)的分析方法，在1000倍顯微鏡下計數(shù)20個視野，當(dāng)每個視野的平均菌數(shù)少于40個時，判定為"不附著(nonadhesive)";當(dāng)每個視野的平均菌數(shù)介于41個至IOO個時，判定為"附著(adhesive)";當(dāng)每個視野的平均菌數(shù)大于100個時，判定為"強烈附著(stronglyadhesive)"。數(shù)據(jù)的統(tǒng)計分析以平均值±SD表示。平均來說，取四十五個視野的計算值.其結(jié)果整理于表7及圖4中。圖4顯示依據(jù)Jacobsen等學(xué)者(1999)的分析方法，當(dāng)每個視野的平均菌數(shù)少于40個時，判定為"不附著(nonadhesive)";當(dāng)每個視野的平均菌數(shù)介于41個至100個時，判定為"附著(adhesive)";當(dāng)每個視野的平均菌數(shù)大于100個時，判定為"強烈附著(stronglyadhesive)"。結(jié)果顯示嗜酸乳桿菌(丄fl"o6ac/〃wfl"Wo;/n7w)PM-A0002菌株、加氏乳酸桿菌(丄flc/o6fl"7/wsga^en')PM-A0005菌株、唾液乳酸桿菌(丄a"okc/〃ws^//vflWw^PM-AOOt^菌株、約氏乳酸桿菌(丄a"o^"7/w7oA似o""')PM-A0009菌株等四株抗過敏菌株均被判定為"強烈附著"，而嗜酸乳桿菌(丄a"o^c///^ac/t/o//n7w)PM-A0013菌株則被判定為"附著"。表7為五株抗過敏乳酸菌對人類腸道表皮細胞(CaCo-2)細胞株的吸附能力的試驗結(jié)果表7<table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table>實施例6:以給卵白蛋白(ovalbumin;OVA)致氣喘的小白鼠喂食唾液乳酸桿菌PM-A0006為例，藉由如下實驗進行過敏改善評估。A.實驗設(shè)計1.實驗動物使用BALB/c小鼠，6-8周大的雌鼠喂食六周，對照組與實驗組每組14只。自臺大動物中心購進SPF級，六周大的BALB/c雌鼠，每只小鼠分別飼養(yǎng)于不銹鋼籠中，室溫控制于22±2°C，光暗循環(huán)時間各為12小時(早上六點亮，下午六點暗)，自由攝食、飲水及飼料，小鼠八周大時以體重隨機分組，開始以管飼方式給予受測乳酸菌(2.6xl(^至2.6xl0、fu/天)同時進行致敏。2.建立呼吸道發(fā)炎動物模式小鼠致敏步驟簡述如下實驗開始第2天以50|ig卵白蛋白(OVA)與佐劑Alum4mg腹腔注射至小鼠體內(nèi)，于實驗第16、30、44天再以25pg卵白蛋白(OVA)與4mgAlum重復(fù)注射老鼠。致敏后，在實驗第54、55天，將小鼠麻醉，以鼻腔內(nèi)(intra-nasal,i.n.)滴入IOO嗎卵白蛋白(OVA)的方式誘發(fā)呼吸道炎反應(yīng)。3.實驗流程為如圖5所示的抗過敏乳酸菌改善過敏實驗的設(shè)計流程將管飼抗過敏乳酸菌的階段分為四期第一期為022天；第二期為2336天；第三期為3750天；第四期為51-53天。其間以腹腔注射卵白蛋白(OVA)的方式致敏小鼠，分四次致敏，第一次為開始管飼的第2天；第二次為開始管飼的第16天；第三次為開始管飼的第30天；第四次為開始管飼的第44天。對腹腔注射卵白蛋白(OVA)致敏的全部小鼠隔周進行抽血，檢査小鼠體內(nèi)IgE的含量變化。于處死小鼠前4天(第54天)以鼻粘膜吸入的方式致敏小鼠連續(xù)2天后，檢測小鼠的肺呼吸阻力反應(yīng)，隔天處死小鼠進行其它生化值的檢測。B.實驗方法1.動物的處死和實驗材料的收集與分析a.血清樣品的收集于實驗進行第0、23、37、51天及處死時對小鼠進行逆眼眶采血(retro-orbital),收集血樣。將小鼠麻醉后，迅速以微量毛細管自眼眶靜脈竇采血，約取200-250nL血液，4°C靜置2—4小時后，以12000rpm轉(zhuǎn)速離心20分鐘，收集血清，于-80°C保存。b.測定卵白蛋白(OVA)特異性抗體的酶聯(lián)免疫分析(ELISA)將0.5mg抗原溶于lOOpL碳酸鹽包被緩沖液(carbonatecoatingbuffer,0.1MNaHC03)加入微量培養(yǎng)板，于4。C靜置過夜。第2天以含有0.05%Tween20的IXPBS緩沖液清洗微量培養(yǎng)板。然后以封閉溶液(含有1%BSA的IXPBS緩沖液)進行兩小時以上的封閉，清洗3次后，接著加入lOOpL待測樣本，反應(yīng)于4。C靜置過夜，清洗4次后，加入100pL抗小鼠IgE抗體，于室溫下反應(yīng)一至兩小時，再清洗5次。加入100|iL經(jīng)適當(dāng)稀釋的抗生物素蛋白-HRP(avidin-horseradishperoxidaseconjugated,辣根過氧化物酶結(jié)合的抗生物素蛋白)反應(yīng)一小時，清洗6次，最后加入100|iLABTS(2.2'-Azino-bis-3-Ethylbenzthiazoline-6-SulfonicAcid,2，2'-連氮-雙-(3-乙基苯并噻唑啉磺酸)底物溶液，于室溫顯色約30分鐘后，以100pL的5MSDS終止反應(yīng)，并用全自動定量繪圖酶標儀(microplatereader)讀取吸光值。測定結(jié)果以酶聯(lián)免疫分析(ELISA)單位的方式表示如下ELISA二(A樣品一A空白)/(A陽性對照—A空白)c.氣道高反應(yīng)性(airwayhyperresponsiveness,AHR)測定為研究口服抗過敏乳酸菌是否能減緩致敏小鼠的過敏反應(yīng)，在兩次氣管內(nèi)過敏原刺激后，隔天接受呼吸道阻力的測試。測試系統(tǒng)為Buxcosystem(BiosystemXA,BuxcoElectronicsInc.Sharon,CT，USA)。利用系統(tǒng)中的傳感器(壓差傳感器，differentialpressuretransducer,Buxco)及前置放大器(preamplifier)(MAXII，Buxco)收集小鼠呼吸道的變化信號，從而計算出Penh值。Penh值的計算方式為間歇xPIF/PEF;間歇=(Te—Tr)/Tr,(PIF:吸氣量峰值(peakinspiratoryflow);PEF:呼氣量峰值(peakexpiratoryflow);Te:呼氣時間(expiratorytime);Tr:舒張時間(relaxationtime))。將小鼠在意識清醒的狀態(tài)下置于全身體積掃描儀(wholebodyplethysmograph)腔室內(nèi)，將超音波震蕩氣化的生理鹽水導(dǎo)入腔室(chamber)三分鐘，然后記錄小鼠三分鐘內(nèi)每分鐘平均肺呼吸阻力值Penh，再以漸增濃度的乙酰甲膽堿(Methacholine，6.25、12.5、25、50mg/mL)噴霧化給予小鼠刺激，各濃度都在刺激三分鐘后，記錄三分鐘內(nèi)呼吸道的生理變化。記錄三分鐘內(nèi)各分鐘的平均Penh值。d.肺沖洗液及肺部細胞分析測試完肺呼吸阻力的隔天，處死小鼠，剪開頸部皮肉使氣管露出，以靜脈置留管插入氣管，第一次先以lmL無菌HBSS緩沖液沖洗肺部，第二及第三次則以含有2%BSA的HBSS(Hanks'balancedsaltsolution)緩沖液沖洗肺部，首次得到的肺沖洗液經(jīng)1500rpm離心5分鐘后，分離上清液保存于-80°C，待后續(xù)分析。將細胞部分并入后兩次肺沖洗液中，以1500rpm離心5分鐘，棄置上清液后，以lmL含有2。/。BSA的HBSS緩沖液懸浮細胞，并以臺盼藍(trypanblue)染色計數(shù)，取約1x105個細胞以細胞離心涂片機(cytospin)500rpm離心3分鐘制作細胞涂片，待其自然風(fēng)干后，依次以LiuA及LiuB染色，以少量阿拉伯膠封片，使用油鏡(lOOOx)讀取至少五個視野中的細胞或總數(shù)300個以上的細胞，計算其中淋巴細胞及多核細胞的比例。e.脾臟細胞的培養(yǎng)在無菌條件下，打開小鼠腹腔取出脾臟，置于已加入3mLHBSS緩沖液的20mm培養(yǎng)皿(petridish)內(nèi)，以無菌針筒尾端將脾臟磨碎，使其中淋巴細胞釋出，將細胞懸浮液吸入15mL離心管中，靜置5分鐘后，取上清液以1500rpm離心5分鐘，吸除上清液后，加入1mLRBC裂解緩沖液(lysisbuffer),靜置1分鐘使紅血球溶解，加入5mLHBSS緩，液，以1500rpm離心5分鐘，吸除上清液；以HBSS緩沖液重復(fù)洗兩次后，再加入5mL含5%FBS的RPMI-1640完全培養(yǎng)基使細胞懸浮。以臺盼藍染色法計算細胞總數(shù)，調(diào)整細胞數(shù)至1x107個細胞/mL培養(yǎng)基。取細胞液0.5mL加入48孔培養(yǎng)板(48-wellplate)中，再加入等體積培養(yǎng)液、含裂殖素或卵白蛋白(OVA)的培養(yǎng)液，使細胞最終濃度為5xl06個細胞/mL培養(yǎng)基。置于恒溫培養(yǎng)箱37°C、5%C02培養(yǎng)48小時，收取上清液保存于-8(TC待日后分析其中各細胞激素的分泌f.細胞激素的測定以夾心酶聯(lián)免疫分析法(ELISA)測定脾臟細胞所分泌的細胞激素的含量。簡述如下先將抗細胞激素抗體以NaHC03緩沖液(pH9.6)稀釋后加入96孔微量培養(yǎng)板，于4。C靜置過夜。第二天將培養(yǎng)板清洗3次后，以含1。/。BSA的PBS在室溫下反應(yīng)至少1小時進行封閉(blocking)。加入待測樣本后可于37°C反應(yīng)2小時或置于4。C反應(yīng)過夜。清洗4次后加入以1%BSA-PBS緩沖液稀釋的生物素接合(biotin-conjugated)的抗細胞激素抗體于室溫反應(yīng)1小時，清洗5次，接著加入抗生物素蛋白鏈菌素接合的過氧化物酶(streptavidin-conjugatedperoxidase)再反應(yīng)1小時。最后在清洗后，向每孔加入100pL的酶底物溶液四甲基聯(lián)苯胺(TMB)底物(Tetramethylbenzidinesubstrate),于室溫避光反應(yīng)約20分鐘。以全自動定量繪圖酶標儀(microplateautoreader)讀取波長450nm的吸光值。2.統(tǒng)計方法實驗結(jié)果以平均值±標準誤差表示(Means±SEMs)。各組間差異以StudentT檢驗(t-test)分析，p<0.05視為有顯著差異(*,p<0.05;**,p<0.001)。另外將p〈0.1視為有差異。實驗結(jié)果分析A.測定卵白蛋白(OVA)特異性抗體的酶聯(lián)免疫分析(ELISA)的結(jié)果血清中卵白蛋白(OVA)特異性抗體效價部分，喂食PM-A0006乳酸菌的對照組，卵白蛋白(OVA)致敏小鼠血清中的卵白蛋白(OVA)特異性IgE抗體有減少的趨勢，結(jié)果于表8，圖示于圖6。表8顯示卵白蛋白(OVA)特異性抗體IgE的測定結(jié)果(平均值士SEM，N=14，P值=)表8<table>tableseeoriginaldocumentpage20</column></row><table>B.氣道高反應(yīng)性(airwayhyperresponsiveness,AHR)測定結(jié)果肺呼吸阻力部分，相對于對照組，喂食PM-A0006乳酸菌在高濃度乙酰甲膽堿(Methacholine)刺激下顯著減低小鼠Penh值。結(jié)果示于表9，圖示于圖7中。表9顯示氣道高反應(yīng)性測定結(jié)果(平均值iSEM,N44,P值-P)表9<table>tableseeoriginaldocumentpage20</column></row><table>C.肺沖洗液及肺部細胞分析結(jié)果肺沖洗液中細胞組成部分，相對于對照組，喂食PM-A0006乳酸菌的實驗組有顯著較低的嗜伊紅細胞(eosinophil)浸潤比例。結(jié)果總結(jié)于表IO，圖示于圖8。表10顯示肺沖洗液分析結(jié)果(平均值iSEM，N44,P值=)表10<table>tableseeoriginaldocumentpage21</column></row><table>D.肺沖洗液細胞激素分析結(jié)果相對于對照組，喂食PM-A0006乳酸菌的實驗組可顯著降低肺沖洗中嗜酸粒細胞趨化因子分泌量且PGE2也有減少的趨勢。結(jié)果總結(jié)于表ll，圖示于圖9及圖10。表11顯示肺沖洗細胞激素分析結(jié)果(平均值士SEM,N44,P值P)表11<table>tableseeoriginaldocumentpage21</column></row><table>*:P<0.05#:P<0.1E.脾臟細胞培養(yǎng)的上清液細胞激素分析結(jié)果脾臟細胞經(jīng)ConA或卵白蛋白(OVA)刺激培養(yǎng)48小時后，在ConA刺激下，喂食PM-A0006乳酸菌的實驗組的脾臟細胞分泌的IFN-Y顯著高于對照組。結(jié)果總結(jié)于表12，圖示于圖ll。表12顯示檢測脾臟細胞培養(yǎng)的上清液，分析不同刺激物質(zhì)對脾臟細胞的細胞激素分泌的影響(平均值士SEM,N=14，P表12<table>tableseeoriginaldocumentpage21</column></row><table>本發(fā)明的食品組合物，含有以上所述的任意一種或一種以上菌株所組合而成的各種組合物，例如發(fā)酵乳、酸乳酪、乳酪、乳制飲品乳粉、茶或咖啡等等，且菌株可以活菌或死菌的形式存在于組合物中。由于乳酸菌要發(fā)揮抗過敏的效果，除了要找出具有特定功能的菌株外，更要確認該菌株能否通過人體胃酸膽鹽的環(huán)境，還要求該菌株能對小腸粘膜表皮細胞具有良好吸附能力。也正是因為這種特性，使得本發(fā)明的抗過敏乳酸菌才可以提供治療或舒緩過敏癥狀的醫(yī)療用途。本發(fā)明所描述的抗過敏乳酸菌可同時增強Thl途徑和調(diào)控Th2過盛的過敏反應(yīng)。本發(fā)明的一個目標就是繼續(xù)朝向達成這些目標或至少為大眾在過敏治療上提供除類固醇或抗組胺的新選擇，本發(fā)明找出對人體無副作用且有益健康的抗過敏乳酸菌來作為過敏治療的新選擇。以上所述是通過實施例說明本發(fā)明的特點，其目的在于使本領(lǐng)域技術(shù)人員能了解本發(fā)明的內(nèi)容并據(jù)以實施，而非限定本發(fā)明的專利范圍。因此，凡其它未脫離本發(fā)明所揭示的精神而完成的等效修飾或修改，仍應(yīng)包含在以下所述之權(quán)利要求范圍中。菌種保藏本發(fā)明的五株乳酸菌菌株于2007年4月6日保藏于中國典型培養(yǎng)物保藏中心(CCTCC，中國，武漢市)，保藏號及信息見表13。這五種培養(yǎng)物的存活性由保藏中心于2007年4月27日檢測完畢，結(jié)果均為存活。此外，本發(fā)明的五株細菌菌株的冷凍干燥培養(yǎng)物曾保藏在臺灣食品工業(yè)發(fā)展研究所，地址為臺灣新竹市食品路331號。臺灣保藏的詳細資料如表13所示。<table>tableseeoriginaldocumentpage23</column></row><table>權(quán)利要求1.一種食品組合物，其包含刺激免疫細胞分泌抗過敏相關(guān)細胞激素濃度的下列任一或多種生物性純培養(yǎng)物嗜酸乳桿菌(Lactobacillusacidophilus)PM-A0002CCTCCNOM207038；加氏乳酸桿菌(Lactobacillusgasseri)PM-A0005CCTCCNOM207039；唾液乳酸桿菌(Lactobacillussalivarius)PM-A0006CCTCCNOM207040；約氏乳酸桿菌(Lactobacillusjohnsonii)PM-A0009CCTCCNOM207041或嗜酸乳桿菌(Lactobacillusacidophilus)PM-A0013CCTCCNOM207042，及生理上可接受的賦形劑與稀釋劑中的任何一種。2.如權(quán)利要求1所述的食品組合物，其特征在于，其含有所述菌株中的任意一種或一種以上。3.如權(quán)利要求2所述的食品組合物，其特征在于，所述菌株是活菌或死菌。4.如權(quán)利要求1所述的食品組合物，其特征在于，所述的生理上可接受的賦形劑或稀釋劑為一種食品。5.如權(quán)利要求1所述的食品組合物，其特征在于，所述的食品為釀酵乳、酸乳酪、乳酪、乳制飲品、乳粉、茶或咖啡中的任一種。6.—種用于抗過敏的藥物組合物，其包含刺激免疫細胞分泌抗過敏相關(guān)細胞激素濃度的下列任一或多種生物性純培養(yǎng)物嗜酸乳桿菌(Aa"o6ac/〃wa"Wo/7/7//w"PM-A0002:CCTCCNO:M207038;加氏乳酸桿菌(丄a"o6ac/〃wga^m〕PM-A0005:CCTCCNO:M207039;唾液乳酸桿菌(丄a"o6ac/〃w^"vaWw"PM-A0006:CCTCCNO:M207040;約氏乳酸桿菌(Aac/o^c/〃M乂o/msom7)PM-A0009:CCTCCNO:M207041或嗜酸乳桿菌(Z^"o6。c/〃^a"Wo;^7w力PM-A0013:CCTCCNO:M207042，及藥學(xué)上可接受的賦形劑或稀釋劑。7.如權(quán)利要求6所述的藥物組合物，其特征在于，其含有上述菌株中的任意一種或一種以上。8.如權(quán)利要求6所述的藥物組合物，其特征在于，所述菌株是活菌或死菌。9.如權(quán)利要求6所述的藥物組合物，其特征在于，其含有一生物性純培養(yǎng)物，其中該生物性純培養(yǎng)物是嗜酸乳桿菌PM-A0002:CCTCCNO:M207038。10.如權(quán)利要求6所述的藥物組合物，其特征在于，其含有一生物性純培養(yǎng)物，其中該生物性純培養(yǎng)物是加氏乳酸桿菌PM-A0005:CCTCCNO:M207039。11.如權(quán)利要求6所述的藥物組合物，其特征在于，其含有一生物性純培養(yǎng)物，其中該生物性純培養(yǎng)物是唾液乳酸桿菌PM-A0006:CCTCCNO:M207040。12.如權(quán)利要求6所述的藥物組合物，其特征在于，其含有一生物性純培養(yǎng)物，其中該生物性純培養(yǎng)物是約氏乳酸桿菌PM-A0009:CCTCCNO:M207041。13.如權(quán)利要求6所述的藥物組合物，其特征在于，其含有一生物性純培養(yǎng)物，其中該生物性純培養(yǎng)物是嗜酸乳桿菌PM-A0013:CCTCCNO:M207042。14.下列任一或多種生物性純培養(yǎng)物在制備用于刺激免疫細胞分泌抗過敏相關(guān)細胞激素的藥物中的用途嗜酸乳桿菌(La"o^c〃/twacWo;/n7iw)PM-A0002:CCTCCNO:M207038;加氏乳酸桿菌(丄fl"o6acz'〃wsgowen')PM-A0005:CCTCCNO:M207039;唾液乳酸桿菌(丄a"o6a"7/ws^//van^)PM-A0006:CCTCCNO:M207040;約氏乳酸桿菌CLa"o6a"7/ws7'o/mso"〃)PM-A0009:CCTCCNO:M207041;或嗜酸乳桿菌(Aa"o6flc/〃"sac/c/op/z//w;)PM-A0013:CCTCCNO:M207042。全文摘要本發(fā)明涉及新的乳酸菌菌株，及含一種或多種所述菌株的組合物，其中所述菌株具有現(xiàn)有技術(shù)中未知的可用于增進抗過敏的能力，且該組合物為食品或藥物組合物形式。本發(fā)明還公開了篩選測定乳酸菌菌株的方法，以及通過增進Th1型免疫反應(yīng)來調(diào)控因過敏而反應(yīng)過度的Th2型免疫反應(yīng)的方法。文檔編號C12N1/20GK101328468SQ200710128018公開日2008年12月24日申請日期2007年6月21日優(yōu)先權(quán)日2007年6月21日發(fā)明者吳奇璋,楊瓊英,蘇偉志,蔡宜鈞,謝佩珊,郭仲偉,陳怡君申請人:東宇生物科技股份有限公司