專利名稱：：海洋低溫纖維素酶與產(chǎn)酶方法及其產(chǎn)生菌交替假單胞菌的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種微生物，特別是一種分離自連云港海域的交替假單胞菌Z6(尸^W(ioa/ferawo"assp.Z6)CGMCCNO.2155(已于2007年9月26日保藏在中國微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心CGMCC，保藏編號(hào)為CGMCCNO.2155);本發(fā)明還涉及該菌株產(chǎn)低溫纖維素酶的方法及其產(chǎn)品。
背景技術(shù)：
：纖維素酶(EC3.2.1)是一類可廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥、食品、棉紡、環(huán)保及可再生資源利用等領(lǐng)域的酶制劑。普通纖維素酶的最適作用溫度多為4565°C。低溫纖維素酶最適作用溫度可低至20。C。由于反應(yīng)溫度較低，不但在低溫條件下可以高效反應(yīng)，而且在生產(chǎn)工藝中可以通過較低溫度的熱處理使酶失活，節(jié)約能量與費(fèi)用，成為人們研究開發(fā)的熱點(diǎn)。在過去的半個(gè)多世紀(jì)里，人們主要從寒帶和冰川等不同環(huán)境的陸地開發(fā)和獲得低溫纖維素酶。但是，隨著研究的不斷深入，從陸地生物開發(fā)低溫纖維素酶的機(jī)會(huì)大大減小，滿足不了人們的需要。因此，科學(xué)工作者們將眼光投向占地球表面積3/4的資源豐富的海洋。海洋環(huán)境十分獨(dú)特，并包羅了低溫環(huán)境，分布著數(shù)量極其龐大、種類繁多的低溫微生物，有利于獲得新的低溫纖維素酶及其產(chǎn)生菌。新型海洋低溫酶研究不但為生物起源及進(jìn)化、微生物的分類、酶催化機(jī)制等基礎(chǔ)研究提供新的依據(jù)，而且推動(dòng)酶在工業(yè)中的廣泛應(yīng)用。目前，己報(bào)道的交替假單胞菌產(chǎn)生的適冷纖維素酶的最適溫度分別為4(TC和35"C。其它篩選獲得的海洋嗜冷菌所產(chǎn)低溫纖維素酶最適溫度為40°C。菌株Z6所產(chǎn)纖維素酶最適作用溫度更低，在常溫下催化活性高，更適于工業(yè)生產(chǎn)。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種新的能產(chǎn)低溫纖維素酶的交替假單胞菌。本發(fā)明所要解決的另一個(gè)技術(shù)問題是研究交替假單胞菌菌株的生長特性，及其產(chǎn)低溫纖維素酶的方法及產(chǎn)品。本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是通過以下的技術(shù)方案來實(shí)現(xiàn)的。本發(fā)明的特征包括交替假單胞菌Z6(/^ewcfea/feramomwsp.Z6)菌株本身，以及利用該菌株產(chǎn)低溫纖維素酶的方法，以及利用該菌株所產(chǎn)的低溫纖維素酶產(chǎn)品。本發(fā)明所涉及的菌株是在中國黃海連云港海域的海水中分離到的交替假單胞菌Z6(尸"j^oateramo"ossp.Z6)，該交替假單胞菌Z6于2007年9月26日保藏在中國微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心CGMCC，保藏編號(hào)為CGMCCN0.2155。一、本發(fā)明菌株的形態(tài)特征與生理生化特征U形態(tài)特征菌株為革蘭氏陰性桿狀細(xì)菌、有莢膜、無芽孢，大小約為11.8timx0.50.8nm(圖l、圖2)。菌株在纖維素固體培養(yǎng)基25"C培養(yǎng)2d后，菌落直徑3mm-4mm，圓形白色、濕潤、邊緣光滑、中間隆起、半透明、易挑取，能產(chǎn)生明顯的纖維素透明圈(圖3)。1.2菌株的生理生化特征菌株Z6的生理生化特征見表1，菌株Z6能水解淀粉，不產(chǎn)生硫化氫，液化明膠，不產(chǎn)生色素，不能利用檸檬酸鹽，吲哚試驗(yàn)、觸酶試驗(yàn)和V-P試驗(yàn)陽性，MR試驗(yàn)陰性，能利用乳糖、麥芽糖、果糖、半乳糖、甘露糖、鼠李糖、糖原、木糖和淀粉為碳源，不能利用蔗糖、纖維二糖、D-葡萄糖、甘油和乙酸鈉，能利用硫酸銨和酪氨酸、丙氨酸、甘氨酸、丙酮酸鈉、甲硫氨酸。通過Bergey，sManualofSystematicBacteriology(secondedition)分析比較，初步判定該菌株為尸sez^oa/teramo"os屬。表l菌株Z6的生理生化特征<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>注"+":陽性結(jié)果；陰性結(jié)果1.3菌株Z6的分子生物學(xué)鑒定PCR擴(kuò)增和序列分析采用Takam試劑盒提出高純度細(xì)菌的基因組DNA。正向引物P1:5'-GAGAGTTTGATCCTGGCTCAG-3'，反向引物P2:5'-CGGCTACCTTGTTACGAC-3'。反應(yīng)體系50iil，Taq酶2U。反應(yīng)條件為94。C預(yù)變性5min，94。C變性30s，54。C退火40s，72。C延伸lmin，循環(huán)35次，72。C延伸7min。PCR產(chǎn)物的純化、克隆、測序由上海生工生物工程技術(shù)服務(wù)有限公司完成，所測序列提交GenBank進(jìn)行同源性比較，采用鄰接法構(gòu)建出進(jìn)化樹(圖4)，進(jìn)化樹表明菌株Z6與尸^Moba/feramo"ascwrageewovora(AM69100800)親緣關(guān)系最近，同源性在99%以上。該菌株16SrRNA序列見說明書最后部分。二、本發(fā)明菌株的生長特性本發(fā)明提供的交替假單胞菌Z6，對(duì)其生長特性進(jìn)行了細(xì)致的研究，基本摸清不同條件下該菌的生長情況。2.1關(guān)于本發(fā)明中的培養(yǎng)基2216E培養(yǎng)基(g/L):蛋白胨5，酵母粉l，海水配制，pH7.2;纖維素固體培養(yǎng)基(g/L):羧甲基纖維素鈉鹽(CMC-Na)10，蛋白胨10，酵母膏5,KH2P041，瓊脂20，陳海水配制，pH8.0。發(fā)酵培養(yǎng)基(g/L):羧甲基纖維素鈉鹽(CMC-Na)10，蛋白胨IO，酵母膏5，KH2P041，陳海水配制，pH8.0。微量礦物鹽(每升》CuS04'5H20，O.Olg;ZnS04'7H20，O.lg;CoCl2'6H20，0.005g;MnCl2.4H20,0.2g;Na2Mo04.2H20,O.lg;KBr，0.05g;KI，0.05g;H3B03,O.lg;NaF，0.05g;LiCl,0.05g;A12(S04)3,0.05g;NiCl2'6H20,O.Olg;VoS04.2H20,0.005g;H2W04'2H20，0.002g;Na2Se04,0.005g;SrC1.6H20,0.005g;BaCl2,O扁g.2.2種子液的制備將保藏在2216E培養(yǎng)基的斜面菌株接種到發(fā)酵培養(yǎng)基中，轉(zhuǎn)速180r/min，裝液量20%，25"C培養(yǎng)16h。2.3溫度對(duì)生長的影響種子液2%接種于發(fā)酵培養(yǎng)基，pH自然，轉(zhuǎn)速180r/min，裝液量20%，分別在不同溫度下培養(yǎng)，測定細(xì)胞濃度。結(jié)果見圖5，菌的生長溫度范圍為0-35"C，最適生長溫度為25"C。2.4pH對(duì)生長的影響在發(fā)酵培養(yǎng)基中加入終濃度為10mmd/L的磷酸醋酸硼酸(1:1:1)作為緩沖液，使發(fā)酵培養(yǎng)基的pH分別為3.0-11.0之間，在25T:培養(yǎng)24小時(shí)，其他條件同2.2，測定細(xì)胞濃度。結(jié)果見圖6，生長pH范圍為4-11，最適生長pH為8。2.5NaCl對(duì)生長的影響在發(fā)酵培養(yǎng)基(將用海水配制改用微量礦物鹽溶液代替，每升培養(yǎng)基加入10ml)中加入NaCl，使之為0Q/。到15。/。的NaCl，在25。C培養(yǎng)24小時(shí)，其他條件同2.2，測定細(xì)胞濃度。結(jié)果見圖7，生長的NaCl濃度范圍為0—llX，最適NaCl濃度為3X。2.6細(xì)胞濃度的測定選擇在600nm波長下測定吸光值。三、菌株產(chǎn)低溫纖維素酶的方法將種子液按2%接種量接入發(fā)酵培養(yǎng)基中，180r/min，20°C，培養(yǎng)24h;將培養(yǎng)好的發(fā)酵液10000r/min，離心10min，取上清液，加入65%硫酸銨，靜置2h后，10000r/min離心25min，用適量25mM，pH為8.0的Tris-HCL緩沖液溶解沉淀，然后4。C透析12h，再經(jīng)過DEAE-sepharoseFlatFlow和SephacrylS-200方法得到低溫纖維素酶。四、低溫纖維素酶的性質(zhì)4.1酶作用溫度對(duì)酶活性的影響將粗酶液分別在4T:、15°C、20°C、25°C、30°C、35°C、40°C、5(TC條件下測定方法酶活，結(jié)果見圖8，纖維素酶的最適作用溫度為30°C，在4。C仍有22。/。的殘余酶活，2(TC仍有80。/o的殘余酶活，是一種低溫纖維素酶。4.2酶的熱穩(wěn)定性粗酶液在4°C、25°C、30°C、5(TC條件下分別保溫0.5h、lh、1.5h、2h、2.5h后，在30。C測定剩余酶活力。該酶在4"C時(shí)穩(wěn)定性最好，隨著溫度升高，穩(wěn)定性下降，25'C的半衰期為1.5h，3(TC的半衰期為lh。(見圖9)。4.3酶作用pH對(duì)酶活性的影響配制不同的pH緩沖液Na2HP04-NaH2P04(pH6-8)、Tris-HCl(pH8-9)、Gly—NaOH(pH9-11)。在不同pH條件下測定酶活力。纖維素酶的最適作用pH為89，該酶在pH10仍有68Q/。的殘余酶活，該酶在pHll仍有41M的殘余酶活，是堿性的低溫纖維素酶(見圖10)。4.4酶pH穩(wěn)定性將酶在3(TC不同pH下保溫lh后在最適作用溫度下測定剩余酶活力，該酶在pH710時(shí)穩(wěn)定性較好，具有耐堿性能。(見圖ll)。5、纖維素酶活測定。5.1纖維素酶活測定方法纖維素酶活性采用CMC為底物測定。5.2酶活力單位定義在3(TC、pH8.0的條件下每分鐘水解纖維素產(chǎn)生1昭葡萄糖所需要的酶量定義為1個(gè)酶活力單位(U)。五、低溫纖維素酶產(chǎn)品的應(yīng)用。本發(fā)明所述的低溫纖維素酶可用于洗滌、醫(yī)藥、食品、棉紡、環(huán)保及可再生資源利用等領(lǐng)域。圖1為菌株革蘭氏染色的光學(xué)顯微鏡鏡檢圖。圖2為菌株的莢膜染色的光學(xué)顯微鏡鏡檢圖。圖3為菌株在纖維素固體培養(yǎng)基上的透明圈圖。圖4為菌株16SrRNA進(jìn)化樹分析圖。圖5為培養(yǎng)溫度對(duì)菌株生長的影響圖，l(TC(令)，15°C—)，20°C(A)，25。C(O),30。C(口)，35。C(A)。圖6為pH對(duì)菌株生長的影響圖。圖7為NaCl對(duì)菌株生長的影響圖。圖8為溫度對(duì)纖維素酶活力的影響圖。圖9為溫度對(duì)纖維素酶穩(wěn)定性的影響圖，4°C(),25°CO),3(TC(A)，50°CO)。圖10為pH對(duì)纖維素酶活力的影響圖，pH6.0-8.0(令)，pH8.0-9.0—)，pH9.0-1l.O(A)。圖11為pH對(duì)纖維素酶穩(wěn)定性的影響圖，pH6.0-8.0(令)，pH8.0-9.0(翻))，pH9.0-ll.0O)。具體實(shí)施例方式實(shí)施例1。一種交替假單胞菌Z6(尸化wfoa/feramomwsp.Z6)CGMCCN0.2155。該菌株具有以下特征菌株為革蘭氏陰性桿狀細(xì)菌、有莢膜、無芽孢，大小約為11.8pmx0.50.8^im;菌株在纖維素固體培養(yǎng)基25"C培養(yǎng)2d后，菌落直徑3mm-4mm，圓形白色、濕潤、邊緣光滑、中間隆起、半透明、易挑取，能產(chǎn)生明顯的纖維素透明圈；菌株能水解淀粉，不產(chǎn)生硫化氫，液化明膠，不產(chǎn)生色素，不能利用檸檬酸鹽，吲哚試驗(yàn)、過氧化氫酶試驗(yàn)和V-P試驗(yàn)陽性，MR試驗(yàn)陰性，能利用乳糖、麥芽糖、果糖、半乳糖、甘露糖、鼠李糖、糖原、木糖和淀粉為碳源，不能利用蔗糖、纖維二糖、D-葡萄糖、甘油和乙酸鈉，能利用硫酸銨、酪氨酸、丙氨酸、甘氨酸、丙酮酸鈉和甲硫氨酸。實(shí)施例2。實(shí)施例1所述的一種交替假單胞菌Z6(尸^woba/feramo"wsp.Z6)CGMCCN0.2155。其生長特性為該菌的生長溫度范圍為0-35°C;生長pH范圍為4-lh生長NaCl濃度范圍為0—llX。實(shí)施例3。實(shí)施例1所述的一種交替假單胞菌Z6(/^e^foa/^ramo"cwsp.Z6)CGMCCN0.2155。其生長特性為菌株的適合生長溫度為25°C;適合生長pH為8;適合生長NaCl濃度為3X。實(shí)施例4。一種實(shí)施例1或2或3任何一項(xiàng)所述的交替假單胞菌Z6CGMCCN0.2155產(chǎn)低溫纖維素酶的方法，其步驟如下(1)將種子液按2%接種量接入發(fā)酵培養(yǎng)基中，180r/min，2(TC，培養(yǎng)24h;(2)將培養(yǎng)好的發(fā)酵液10000r/min，離心10min，取上清液，加入65%硫酸銨，靜置2h后，10000r/min離心25min，用適量25mM，pH為8.0的Tris-HCL緩沖液溶解沉淀，然后4。C透析12h，再經(jīng)過DEAE-sepharoseFlatFlow和SephacrylS-200方法得到低溫纖維素酶。實(shí)施例5。一種實(shí)施例4所述的方法所產(chǎn)低溫纖維素酶，該低溫纖維素酶具有以下特征(1)纖維素酶的適合作用溫度為30。C，在4。C有22。/。的殘余酶活，2(TC有80%的殘余酶活，是一種低溫纖維素酶；該酶在4。C時(shí)穩(wěn)定，隨著溫度升高，穩(wěn)定性下降，25。C的半衰期為1.5h，30。C的半衰期為lh;(2)纖維素酶的適合作用pH為8~9，該酶在pH10有68%的殘余酶活，該酶在pHll有41%的殘余酶活，是堿性的低溫纖維素酶；該酶在pH710時(shí)穩(wěn)定，具有耐堿性能。<110>淮海工學(xué)院<120>海洋低溫纖維素酶與產(chǎn)酶方法及其產(chǎn)生菌交替假單胞菌<160>1〈210>1<211〉1439〈212〉咖A〈213〉交替假單胞菌Z6(Pseudoalteromonassp.Z6)〈400〉1t3gCt3gt3gttgacccccggttggaaacgcctttagattgatccctagcccaacgggagcgcgtgtgtgagttaataccgcagccgcgggcaggcggttaactggcaaatagagatctggtacgaaagcgtctactagacctggggagtgtggagcatgagaacttacctcgtcagctctagttgctagggtggggacgggcgcatacatccggattgggaatgacgcgaggttgcccccgatgagagtgaggacgggtactgctaataggcccaagtgtggtttgagagC3gC3gtggaagaaggccttgctagctgttaatacggagtgttaagcgact卿gtgtg33gg33t3CCgtggggagcaagctcggagcacggccgcaatggtttaattElg卿tggttgtgttgtgagcaggtaatgcacgtcaagtcgagtgctgcgagtctgcaacgtgaatacgttgaagtttttttgatcctgggagtaatgctccgcataatgggattagctaggatgatcagggaatattgctcgggttgtagacgttactgggtgcgagcggatgtgaaagat卿gggtggatggcgaagaacgggattaCtCggttCtgggttaaaactcgatgcaacgtggtgccttc3tgttgggtttgagaactctatcatggcccaactcgcgagtcgactccattcccgggccttcctggcccactccggtcgatgggaacatgtctacggaccgttggtgaggccacactggg織atgggcgaagcactttcacagaagaagttaatcggaaccccgggctcgt聊atttcgcagccacctgataccccggtttttcaaa_gcaaatgaattcgaagaacctgggaactctgaagtcccgcaaagg卿ctgttacgtgtagagtaagcgaagaagtcggaatgtacactccggtcgtaacaaaaaggtagcccttgaggtgaaagggggcttaatggctcaactgagacacC33gCCtg3tagtcaggaggcaccggctaattactgggcg肪cctgggaaaggtgtagcggggtcaacactagtccacgcctaacgcattgacgggggcctacctacact3t3C3ggtgCacgagcgcaaccggtgataaggctacacactcacttaaagtcgct3gtaatcccttcccaaggagccgggcgaaggaaatggggac幼catcggctctcgccaaggcgacggcccacactgcagccatgcaaaggttagtctccgtgccataaagcgtacctgcatttcggtg認(rèn)tgcgtgacgctcatcgtaaacgataagtagaccgcgcacaagcgtgacatacagtgcatggctgcccctatcctaccggaggaagtgctacaattgcgtcgtagtcgcgtatcagttggggccaagsgtagca6012018024030036042048054060066072078084090096010201080114012001260132013801439權(quán)利要求1、一種交替假單胞菌Z6(Pseudoalteromonassp.Z6)CGMCCNO.2155。2、根據(jù)權(quán)利要求1所述交替假單胞菌Z6CGMCCN0.2155，其特征在于，該菌株具有以下特征菌株為革蘭氏陰性桿狀細(xì)菌、有莢膜、無芽孢，大小約為11.8μm×0.50.8μm;菌株在纖維素固體培養(yǎng)基25°培養(yǎng)2d后，菌落直徑3mm-4mm，圓形白色、濕潤、邊緣光滑、中間隆起、半透明、易挑取，能產(chǎn)生明顯的纖維素透明圈；菌株能水解淀粉，不產(chǎn)生硫化氫，液化明膠，不產(chǎn)生色素，不能利用檸檬酸鹽，B引哚試驗(yàn)、過氧化氫酶試驗(yàn)和V-P試驗(yàn)陽性，MR試驗(yàn)陰性，能利用乳糖、麥芽糖、果糖、半乳糖、甘露糖、鼠李糖、糖原、木糖和淀粉為碳源，不能利用蔗糖、纖維二糖、D-葡萄糖、甘油和乙酸鈉，能利用硫酸銨、酪氨酸、丙氨酸、甘氨酸、丙酮酸鈉和甲硫氨酸。3、根據(jù)權(quán)利要求1所述交替假單胞菌Z6CGMCCN0.2155，其特征在于，其生長特性為該菌的生長溫度范圍為0-35°;生長pH范圍為4-ll;生長NaCl濃度范圍為0—11%。4、根據(jù)權(quán)利要求1所述交替假單胞菌Z6CGMCCN0.2155，其特征在于，其生長特性為菌株的適合生長溫度為25";適合生長pH為8;適合生長NaCl濃度為3%。5、根據(jù)權(quán)利要求1所述交替假單胞菌Z6CGMCCN0.2155，其特征在于，該菌株16SrRNA序列如下tagctagtagcgatgagagtttgatcctggctccggtcgaaaaaggtagccgaaggaaat60ttgacccccggaggacgggtgagtaatgcttgggaacatgccttgaggtgggggacaaca120gttggaaacgactgctaataccgcataatgtctacggaccaaagggggcttcggctctcg180cctttagattggcccaagtgggattagctagttggtgaggtaatggctcaccaaggcgac240gatccctagctggtttgagaggatgatcagccacactgggactgagacacggcccacact300ccaacgggaggcagcagtggggaatattgcacaatgggcgcaagcctgatgcagccatgc360cgcgtgtgtgaagaaggccttcgggttgtaaagcactttcagtcaggaggaaaggttagt420agttaatacctgctagctgtgacgttactgacagaagaagcaccggctaactccgtgcca480gcagccgcggtaatacggagggtgcgagcgttaatcggaattactgggcgtaaagcgtac540gcaggcggtttgttaagcgagatgtgaaagccccgggctcaacctgggaactgcatttcg600aactggcaaactagagtgtgatagagggtggtagaatttcaggtgtagcggtgaaatgcg660tagagatctgaaggaataccgatggcgaaggcagccacctgggtcaacactgacgctcat720gtacgaaagcgtggggagcaaacgggattagataccccggtagtccacgccgtaaacgat780gtctactagaagctcggagcctcggttctgtttttcaaagctaacgcattaagtagaccg840cctggggagtacggccgcaaggttaaaactcaaatgaattgacgggggcccgcacaagcg900gtggagcatgtggtttaattcgatgcaacgcgaagaaccttacctacacttgacatacag960agaacttaccagagatggtttggtgccttcgggaactctgatacaggtgctgcatggctg1020tcgtcagctcgtgttgtgagatgttgggttaagtcccgcaacgagcgcaacccctatcct1080tagttgctagcaggtaatgctgagaactctaaggagactgccggtgataaaccggaggaa1140ggtggggacgacgtcaagtcatcatggcccttacgtgtagggctacacacgtgctacaat1200ggcgcatacagagtgctgcgaactcgcgagagtaagcgaatcacttaaagtgcgtcgtag1260tccggattggagtctgcaactcgactccatgaagtcggaatcgctagtaatcgcgtatca1320gaatgacgcggtgaatacgttcccgggccttgtacactcctcccttcccagttggggcca1380aggttgcccctgaagttttttcctggcccaggtcgtaacaaggagccgggagagtagca14396、一種如權(quán)利要求1-5中任何一項(xiàng)所述的交替假單胞菌Z6CGMCCN0.2155產(chǎn)低溫纖維素酶的方法，其特征在于，其步驟如下(1)將種子液按2%接種量接入發(fā)酵培養(yǎng)基中，180r/min，20°C，培養(yǎng)24h;(2)將培養(yǎng)好的發(fā)酵液10000r/min，離心10min，取上清液，加入65%硫酸銨，靜置2h后，10000r/min離心25min，用適量25mM，pH為8.0的Tris-HCL緩沖液溶解沉淀，然后4'C透析12h，再經(jīng)過DEAE-s印haroseFlatFlow和SephacrylS-200方法得到低溫纖維素酶。7、一種如權(quán)利要求6所述方法所產(chǎn)低溫纖維素酶，其特征在于，該低溫纖維素酶具有以下特征(1)纖維素酶的適合作用溫度為3(TC，在4'C有22。/。的殘余酶活，2(TC有80%的殘余酶活，是一種低溫纖維素酶；該酶在4T:時(shí)穩(wěn)定，隨著溫度升高，穩(wěn)定性下降，25。C的半衰期為1.5h，30。C的半衰期為lh;(2)纖維素酶的適合作用pH為8~9，該酶在pH10有68°/。的殘余酶活，該酶在pHll有41%的殘余酶活，是堿性的低溫纖維素酶；該酶在pH710時(shí)穩(wěn)定，具有耐堿性能。全文摘要本發(fā)明涉及一種交替假單胞菌Z6(Pseudoalteromonassp.Z6)CGMCCNO.2155。該菌的生長溫度范圍為0-35℃，最適生長溫度為25℃；生長pH范圍為4-11，最適生長pH為8；生長NaCl濃度范圍為0-11％，最適NaCl濃度為3％。本發(fā)明還公開了一種利用交替假單胞菌產(chǎn)低溫纖維素酶的方法及按該方法得到的低溫纖維素酶，該低溫纖維素酶由于反應(yīng)最適溫度較低，不但在低溫條件下可以高效反應(yīng)，而且在生產(chǎn)工藝中可以通過較低溫度的熱處理使酶失活，節(jié)約能量與費(fèi)用，在醫(yī)藥、食品、棉紡、環(huán)保及可再生資源利用等領(lǐng)域具有廣泛的應(yīng)用前景。文檔編號(hào)C12N1/20GK101200700SQ20071019040公開日2008年6月18日申請(qǐng)日期2007年11月21日優(yōu)先權(quán)日2007年11月21日發(fā)明者殊劉,呂明生,房耀維,王淑軍,麗陳申請(qǐng)人:淮海工學(xué)院