專利名稱：靈芝紅景天口服液的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明主要涉及生物領(lǐng)域中保健口服液的制備方法，尤其涉及含有靈芝菌絲體紅景 天口服液的制備方法。
背景技術(shù)：
-隨著現(xiàn)代生活節(jié)奏的加快，社會競爭的加劇，再加之工作學習的壓力和環(huán)境污染的 影響，疲勞和缺氧已成為威脅人們健康的重要問題，為了提高機體抗疲勞、耐缺氧和免 疫的能力，保持健康體魄，延緩衰老，延長生命，于是追求一些保健食品和保健藥品， 己成為時尚，特別是以靈芝為主要原料所制備的保健品更是受到青睞。因為靈芝有仙草 之譽有"安驚魂，補肝益氣，堅筋骨，好顏色，利關(guān)節(jié)，祛痰健脾，活血"等功效，臨 床實驗證明，靈芝對人體有"扶正固本，滋補強壯，延年益壽"和有病治病，無病防病 的雙向調(diào)節(jié)作用，現(xiàn)在靈芝已作為藥物正式被國家藥典收載，同時又是被國家批準的新 資源食品，可藥食兩用，被譽為中藥圣品。它的主要有效成分是高分子靈芝多糖，三萜， 靈芝酸及脲嘌呤核苷等生物活性物質(zhì)，存在于天然靈芝子實體和菌絲體中。由于子實體 生長周期長，所需勞動力強度大，受自然氣候條件的影響大，產(chǎn)量和質(zhì)量不穩(wěn)定，子實 體木質(zhì)化程度高，多糖和其它生物活性物質(zhì)含量低等原因，不適應工業(yè)化生產(chǎn)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于避免現(xiàn)有技術(shù)的不足之處而提供一種靈芝紅景天口服液的制備 方法。采用液態(tài)深層微生物發(fā)酵技術(shù)生產(chǎn)靈芝菌絲體和發(fā)酵液，質(zhì)量穩(wěn)定，生產(chǎn)周期短， 成本低，產(chǎn)量大，并且具有工業(yè)化生產(chǎn)前景。本發(fā)明的另一個目的在于將紅景天作為配伍，以增強口服液的耐缺氧，抗疲勞和抗 輻射的保健作用。本發(fā)明的目的可以通過采用以下技術(shù)方案來實現(xiàn) 一種靈芝紅景天口服液的制備方 法，其主要特點在于原料包括有靈芝菌濾液體積比為60-90%，紅景天浸出液的體積比為10-40%,其中紅景天為紅景天浸出液的重量比為1-2%;其制備步驟如下將液態(tài)發(fā)酵的靈
芝菌絲體和靈芝發(fā)酵液一起放在搗碎機中制漿，調(diào)節(jié)pH值4-5，升溫到40"6(TC，保持 時間12—24小時，利用活菌自身產(chǎn)生的溶解酶使其菌絲體和菌細胞壁溶解，過濾并收集 濾液，濾渣重復處理一次，合并兩次濾液，盛于容器內(nèi)備用；按得到的靈芝菌濾液體積 加入紅景天的浸出液，充分混合，在溫度40—6(TC，保持12—24小時，過濾。
所述的紅景天的浸出液的制備方法是:稱取紅景天10~20重量份,按500-1000倍加 水進行煎煮三次，第一次煎煮l小時，冷卻后收集濾液；將濾渣加水第二次煎煮45分鐘 冷卻過濾，收集濾液，將濾渣加水第三次煎煮30分鐘，冷卻后過濾、棄渣，三次濾液合 并定容，使其每lOOml含藥量為l-2g。
所述的靈芝紅景天口服液的制備方法，還包括有加入白砂糖2—6%或甜蜜素0. 02— 0.06%,檸檬酸O. 3~0. 7%，蜂蜜0.5—1.5%，穩(wěn)定劑D"抗壞血酸鈉0. 01~0. 03％，充分 混合溶解后，過濾，滅菌，裝瓶，冷藏。
所述的發(fā)酵的靈芝菌絲體和靈芝發(fā)酵液的制備步驟為
(1) 首先進行靈芝菌斜面菌種的制備其培養(yǎng)基為，去皮馬鈴薯18—22重量份，葡 萄糖1-3重量份，磷酸二氫鉀0. 10- 0. 20重量份，硫酸鎂0. 065- 0. 085重量 份，VBi 0. 010-0. 025重量份，瓊脂粉1. 5-3重量份，水80-100重量份，PH自然； 經(jīng)115-12(TC、 25-30分鐘高壓滅菌后，冷卻至45-48°C，擺成斜面，待凝固后， 冷藏備用；取天然靈芝菌柄與菌蓋連接處的小組織塊，放入0.2%的汞水或75%的 乙醇內(nèi)浸泡l分鐘，取出用無菌水沖洗1-2次，用無菌紗布吸干水漬，放入清潔 的培養(yǎng)皿中，用消毒過的小刀切取3-5mm3的組織菌肉，移接在固體斜面培養(yǎng)基中 心，在26-3(TC恒溫下，培養(yǎng)8-10天，待菌絲長滿培養(yǎng)基斜面，再移接到新的瓊 脂斜面培養(yǎng)基上，培養(yǎng)成固體斜面菌種；
(2) 液體菌種的制備其培養(yǎng)液以重量千分比組成為葡萄糖26_30%。，豆面粉8—12 %。，玉米粉2~6%。，磷酸二氫鉀1. 0~2. 5%。，硫酸鎂0. 55-0. 95%。, VB, 0. 10-0. 25 %。，水為無菌水或滅菌自來水，PH自然，取上述培養(yǎng)液分裝于500ml的三角燒瓶 中，分裝量為瓶容量的四分之一，經(jīng)115-120°C， 25-30分鐘滅菌后，冷卻至32-36 'C，將步驟(1)的l-3cm2多塊靈芝菌斜面菌種在無菌條件接入盛有培養(yǎng)液的500ml 的三角燒瓶中，在120-125r/min搖床上于溫度26-30。C培養(yǎng)4-6天，成為菌懸液 并顯示菌絲片斷和大量的菌絲球充滿發(fā)酵液，發(fā)酵液變清液，為液體菌種；
(3) 深層液態(tài)發(fā)酵擴大培養(yǎng)將液沐菌種在無菌條件下接入一級深層發(fā)酵培養(yǎng)容器 中，接入量為培養(yǎng)液的5-10%，培養(yǎng)液的制備方法與步驟(2)相同，培養(yǎng)液經(jīng)滅菌后冷卻至32-36°C，在無菌條件下接入液體菌種，進行恒溫通氣液態(tài)發(fā)酵培 養(yǎng)；當培養(yǎng)液變清并有大量菌絲片斷和菌絲球出現(xiàn)時終止；而后的二級三級深層 發(fā)酵培養(yǎng)依此類推。 靈芝發(fā)酵液的成熟標準為 ，1. 菌體形態(tài)觀察，靈芝菌絲壁上無明顯的"芽頭與銷狀聯(lián)合"，菌絲變細，菌絲原 生質(zhì)凝集，少數(shù)菌絲有自溶現(xiàn)象。2. 靈芝菌絲重量(濕重)為15-20%或黏度不增加。3. 靈芝發(fā)酵液pH值下降到2. 5-3. 0。配伍原料紅景天，是珍稀藥用植物之一，被譽為"高原人參"，是我國批準的新食品 資源。制備本口服液是選用西藏品種中唯一收載于《中國藥典》中的大花紅景天品種， 其生長在海拔4000m以上的高寒地帶，由于缺氧、低溫、干燥、狂風、強紫外線照射、 晝夜溫差大等惡劣環(huán)境，形成了獨特的生命活動機制和生物活性成分。它的主要化學成 分是紅景天苷、黃酮類、有機酸類、香豆素類和多種微量元素。具有氣味芳香、味微苦 澀，后甜，性甘苦平，歸肺、心經(jīng)。具有益氣活血、通脈平喘等功能；是輔助緩解體力 疲勞、耐缺氧等功能的常用原料。靈芝紅景天口服液是基于傳統(tǒng)中醫(yī)藥，現(xiàn)代營養(yǎng)學和生命科學等綜合科學，將藥食 兩用靈芝大型擔子菌通過生物發(fā)酵所產(chǎn)生的靈芝多糖等多種活性成分與紅景天藥用植物 的活性成分配伍，制備出具有增強機體免疫力、抗疲勞、耐缺氧的復合性保健口服液， 克服了大多數(shù)以單一的靈芝液態(tài)深層發(fā)酵培養(yǎng)制備的靈芝口服液或飲料和利用以干燥的 靈芝子實體粉碎浸提而生產(chǎn)的口服液，這些口服液一方面所用原料單一，另一方面營養(yǎng) 成分也不全，而干靈芝子實體生產(chǎn)的口服液生物活性物質(zhì)少，其中的有效成分不易被人 們吸收。我們研制的口服液是以靈芝為主料，重在扶正固本，強壯機體，提高機體免疫力， 配以紅景天以發(fā)揮抗疲勞耐缺氧、抗輻射的作用，為了增強口服液的感官質(zhì)量，使之口 服液，色、香、味更能體現(xiàn)靈芝紅景天口服液的天然風味，配方又選擇了輔料甜味素， 酸味劑和穩(wěn)定劑，不添加防腐劑。調(diào)配出的口服液具有棕黃色、透明，具有紅景天天然 清香氣，口感酸甜柔和。具有調(diào)節(jié)機體功能，緩解機體疲勞的保健作用。本發(fā)明取得的效果是利用本發(fā)明制得的靈芝紅景天口服液具有棕黃色，透明具有 紅景天天然清香氣，口感酸甜柔和。本口服液風味獨特，清新爽口，營養(yǎng)豐富，藥效穩(wěn) 定，易于吸收，服用安全，具有很高的醫(yī)療保健作用，對于開拓保健食品，進一步開發(fā) 利用靈芝紅景天等藥材資源具有一定的實際意義。本發(fā)明制備方法簡單，易于工業(yè)化生在對50人的應用試驗時，以每人每天早晚各服用一次，每次服用量為20-30ml，每 人服用總量為2000-3000 ml后，結(jié)果證明有40人感覺對睡眠有明顯的改善；有42 人感覺機體免疫力明顯增強，冬天不感冒或感冒癥狀不明顯；有38人感覺對腸胃功能有 明顯改善，食欲增加，精神狀況較好；有32人感覺對心腦血管疾病有明顯好轉(zhuǎn)；有38 人感覺對調(diào)節(jié)大小便明顯；有26例的氣管炎和哮喘病人明顯好轉(zhuǎn)；有10例舌裂病人得 到治愈；有2例胃癌和2例肺癌病人手術(shù)后經(jīng)放療和化療，服用該口服液后能增加食欲 恢復虛弱的身體，精神狀況有明顯的改善。同時對口腔潰瘍、咽炎、前列腺炎、過敏癥 也有較好的治療作用。
具體實施方式
實施例l: 一種靈芝紅景天口服液的制備方法。(1) 首先進行靈芝菌斜面菌種的制備其培養(yǎng)基為，去皮馬鈴薯20g，葡萄糖2g，磷 酸二氫鉀0. 15 g，硫酸鎂0.075 g,VBi 0.015 g，瓊脂粉2 g，無菌水或滅菌自 來水100ral， PH自然；經(jīng)120'C、 25分鐘高壓滅菌后，冷卻至45"C，擺成斜面， 待凝固后，冷藏備用；取天然靈芝菌柄與菌蓋連接處的小組織塊，放入0.2%的汞 水或75%的乙醇內(nèi)浸泡1分鐘，取出用無菌水沖洗1-2次，用無菌紗布吸干水漬， 放入清潔的培養(yǎng)皿中，用消毒過的小刀切取3-5irai3的組織菌肉，移接在固體斜面 培養(yǎng)基中心，在26-3(TC恒溫下，培養(yǎng)8-IO天，待菌絲長滿培養(yǎng)基斜面，再移接 到新的瓊脂斜面培養(yǎng)基上，培養(yǎng)成固體斜面菌種。(2) 液體菌種的制備按培養(yǎng)液總質(zhì)量為l公斤，培養(yǎng)液組成為葡萄糖30g，豆面粉 10 g，玉米粉4 g，磷酸二氫鉀1.5 g，硫酸鎂0.75 g,VB, 0.15 g，水為無菌水 或滅菌自來水，PH自然，取上述培養(yǎng)液分裝于500ml的三角燒瓶中，分裝量為瓶 容量的四分之一，經(jīng)120'C， 30分鐘滅菌后，冷卻至32t:，將步驟(1)的lcm2 多塊靈芝菌斜面菌種在無菌條件接入盛有培養(yǎng)液的500ml的三角燒瓶中，在 120r/min搖床上于溫度28。C培養(yǎng)5天，成為菌懸液并顯示菌絲片斷和大量的菌 絲球充滿發(fā)酵液，發(fā)酵液變清液，為液體菌種。(3) 深層液態(tài)發(fā)酵擴大培養(yǎng)將液體菌種在無菌條件下接入一級深層發(fā)酵培養(yǎng)容器 中，接入量為培養(yǎng)液的6%，培養(yǎng)液的制備方法與步驟(2)相同，培養(yǎng)液經(jīng)滅菌 后冷卻至32-36°C，在無菌條件下接入液體菌種，進行恒溫通氣液態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)； 當培養(yǎng)液變清并有大量菌絲片斷和菌絲球出現(xiàn)時終止；而后的二級三級深層發(fā)酵培養(yǎng)依此類推。
(4) 將液態(tài)發(fā)酵的靈芝菌絲體和靈芝發(fā)酵液一起放在搗碎機中制漿，調(diào)節(jié)pH值4.0， 升溫40。C，保持時間24小時，利用活菌自身產(chǎn)生的溶解酶使其菌絲體和菌細胞 壁溶解，過濾并收集濾液，濾渣重復處理一次，合并兩次濾液，盛于容器內(nèi)備用。
(5) 紅景天的浸出液的制備方法是選取符合質(zhì)量的大花紅景天10g，加水1000ml進 行煎煮三次，第一次煎煮1小時，冷卻后收集濾液；將濾渣加水第二次煎煮45 分鐘冷卻過濾，收集濾液，將濾渣加水第三次煎煮30分鐘，冷卻后過濾、棄渣， 三次濾液合并定容1000ml，使其每100ml含藥量為lg。
(6) 取步驟4得到的靈芝菌濾液600ml，加入400ml紅景天的浸出液，充分混合，在 溫度40。C，保持24小時，過濾后，再加入白砂糖3%，檸檬酸0.3%，蜂蜜1.5%， 穩(wěn)定劑D—抗壞血酸鈉0. 02%，充分混合溶解后，過濾，滅菌，裝瓶，冷藏。
實施例2: —種靈芝紅景天口服液的制備方法。 步驟(1)至步驟(3)與實施例l相同。
(4) 將液態(tài)發(fā)酵的靈芝菌絲體和靈芝發(fā)酵液一起放在搗碎機中制漿，調(diào)節(jié)pH值4.5， 升溫50。C，保持時間18小時，利用活菌自身產(chǎn)生的溶解酶使其菌絲體和菌細胞 壁溶解，過濾并收集濾液，濾渣重復處理一次，合并兩次濾液，盛于容器內(nèi)備用。
(5) 紅景天的浸出液的制備方法是選取符合質(zhì)量的大花紅景天15g,加水1000ml進 行煎煮三次，第一次煎煮1小時，冷卻后收集濾液；將濾渣加水第二次煎煮45 分鐘冷卻過濾，收集濾液，將濾渣加水第三次煎煮30分鐘，冷卻后過濾、棄渣， 三次濾液合并定容1000ml，使其每100ml含藥量為1. 5g。
(6) 取步驟4得到的靈芝菌濾液700ml，加入300ml紅景天的浸出液，充分混合，在 溫度50'C，保持18小時，過濾后，再加入甜蜜素0.03%，檸檬酸0.3%，蜂蜜3%， 穩(wěn)定劑D"抗壞血酸鈉0.02%,充分混合溶解后，過濾，滅菌，裝瓶，冷藏。
實施例3:—種靈芝紅景天口服液的制備方法。 步驟(1)至步驟(3)與實施例l相同。
(4) 將液態(tài)發(fā)酵的靈芝菌絲體和靈芝發(fā)酵液一起放在搗碎機中制漿，調(diào)節(jié)pH值5. 0，
升溫6(TC，保持時間12小時，利用活菌自身產(chǎn)生的溶解酶使其菌絲體和菌細胞 壁溶解，過濾并收集濾液，濾渣重復處理一次，合并兩次濾液，盛于容器內(nèi)備用。
(5) 紅景天的浸出液的制備方法是選取符合質(zhì)量的大花紅景天20g,加水1000ml進 行煎煮三次，第一次煎煮1小時，冷卻后收集濾液；將濾渣加水第二次煎煮45 分鐘冷卻過濾，收集濾液，將濾渣加水第三次煎煮30分鐘，冷卻后過濾、棄渣，三次濾液合并定容1000ml,使其每100ml含藥量為2g。 (6)取步驟4得到的靈芝菌濾液800ml，加入200ml紅景天的浸出液，充分混合，在 溫度40。C，保持12小時，過濾后，再加入加入白砂糖6%，檸檬酸0.7%，蜂蜜 5%，穩(wěn)定劑1^抗壞血酸鈉0.03%，充分混合溶解后，過濾，滅菌，裝瓶，冷藏。 實施例4:一種靈芝紅景天口服液的制備方法。步驟(1)至步驟(3)與實施例l相同。步驟(4)至步驟(5)與實施例3相同。 (6)取步驟4得到的靈芝菌濾液900ml，加入100ml紅景天的浸出液，充分混合，在溫度 6CTC，保持12小時，過濾后，再加入白砂糖6%，檸檬酸0.7%，蜂蜜1.5%，穩(wěn)定劑 D—抗壞血酸鈉0. 03%，充分混合溶解后，過濾，滅菌，裝瓶，冷藏。
權(quán)利要求
1. 一種靈芝紅景天口服液的制備方法，其特征在于原料包括有靈芝菌濾液體積比為60-90％，紅景天浸出液的體積比為10-40％，其中紅景天為紅景天浸出液的重量比為1-2％；其制備步驟如下將液態(tài)發(fā)酵的靈芝菌絲體和靈芝發(fā)酵液一起放在搗碎機中制漿，調(diào)節(jié)pH值4-5，升溫到40-60℃，保持時間12-24小時，過濾并收集濾液，濾渣重復處理一次，合并兩次濾液，盛于容器內(nèi)備用；按得到的靈芝菌濾液體積加入紅景天的浸出液，充分混合，在溫度40-60℃，保持12-24小時，過濾。
2. 如權(quán)利要求1所述的靈芝紅景天口服液的制備方法，其特征在于所述的紅景天的 浸出液的制備方法是:稱取紅景天1Q—20重量份,按500-1000倍加水進行煎煮三次， 第一次煎煮l小時，冷卻后收集濾液；將濾渣加水第二次煎煮45分鐘冷卻過濾，收 集濾液，將濾渣加水第三次煎煮30分鐘，冷卻后過濾、棄渣，三次濾液合并定容， 使其每100ml含藥量為1-2g。
3. 如權(quán)利要求1或2所述的靈芝紅景天口服液的制備方法，其特征在于還包括有加 入白砂糖2"~6%或甜蜜素0. 02~0. 06%，檸檬酸0. 3~0. 7%，蜂蜜0. 5—1. 5%，穩(wěn)定 劑D—抗壞血酸鈉0. 01—0. 03%,充分混合溶解后，過濾，滅菌，裝瓶，冷藏。
4. 如權(quán)利要求l所述的靈芝紅景天口服液的制備方法，其特征在于所述的發(fā)酵的靈 芝菌絲體和靈芝發(fā)酵液的制備步驟為(1) 首先進行靈芝菌斜面菌種的制備其培養(yǎng)基為，去皮馬鈴薯18—22重量 份，葡萄糖1-3重量份，'磷酸二氫鉀0.10-0.20重量份，硫酸鎂0.065-0. 085重量份，VB, 0. 010-0. 025重量份，瓊脂粉1. 5-3重量份，水80-100 重量份，PH自然；經(jīng)115-120。C 25-30分鐘高壓滅菌后，冷卻至45-48 °C，擺成斜面，待凝固后，冷藏備用；取天然靈芝菌柄與菌蓋連接處的 小組織塊，放入0.2%的汞水或75%的乙醇內(nèi)浸泡1分鐘，取出用無菌水 沖洗l-2次，用無菌紗布吸干水漬，放入清潔的培養(yǎng)皿中，用消毒過的 小刀切取3-5mm3的組織菌肉，移接在固體斜面培養(yǎng)基中心，在26-3CTC 恒溫下，培養(yǎng)8-10天，待菌絲長滿培養(yǎng)基斜面，再移接到新的瓊脂斜面 培養(yǎng)基上，培養(yǎng)成固體斜面菌種；(2) 液體菌種的制備其培養(yǎng)液以重量千分比組成為葡萄糖26—30%。，豆面 粉8—12%。，玉米粉2H，磷酸二氫鉀1. 0~2. 5%。，硫酸鎂0. 55-0. 95X。,VB, 0.10-0.25%。，水為無菌水或滅菌自來水，PH自然，取上述培養(yǎng) 液分裝于500ml的三角燒瓶中，分裝量為瓶容量的四分之一，經(jīng)115-120 。C， 25-30分鐘滅菌后，冷卻至32-36r，將步驟(1)的1-3crf多塊靈 芝菌斜面菌種在無菌條f牛接入盛有培養(yǎng)液的500ml的三角燒瓶中，在 120-125r/min搖床上于溫度26-3CTC培養(yǎng)4-6天，成為菌懸液并顯示菌 絲片斷和大量的菌絲球充滿發(fā)酵液，發(fā)酵液變清液，為液體菌種； (3)深層液態(tài)發(fā)酵擴大培養(yǎng)將液體菌種在無菌條件下接入一級深層發(fā)酵培 養(yǎng)容器中，接入量為培養(yǎng)液的5-10%，培養(yǎng)液的制備方法與步驟(2) 相同，培養(yǎng)液經(jīng)滅菌后冷卻至32-36°C，在無菌條件下接入液體菌種， 進行恒溫通氣液態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)；當培養(yǎng)液變清并有大量菌絲片斷和菌絲球 出現(xiàn)時終止；而后的二級三級深層發(fā)酵培養(yǎng)依此類推。
全文摘要
本發(fā)明主要涉及生物領(lǐng)域中保健口服液的制備方法。一種靈芝紅景天口服液的制備方法，其主要特點在于原料包括有靈芝菌濾液體積比為60-90％，紅景天浸出液的體積比為10-40％，其中紅景天為紅景天浸出液的重量比為1-2％；其制備步驟如下將液態(tài)發(fā)酵的靈芝菌絲體和靈芝發(fā)酵液一起放在搗碎機中制漿，調(diào)節(jié)pH值4-5，升溫40-60℃，保持時間12-24小時，利用活菌自身產(chǎn)生的溶解酶使其菌絲體和菌細胞壁溶解，過濾并收集濾液，濾渣重復處理一次，合并兩次濾液，盛于容器內(nèi)備用；按得到的靈芝菌濾液體積加入紅景天的浸出液，充分混合，在溫度40-60℃，保持12-24小時，過濾。本發(fā)明制備方法簡單，易于工業(yè)化生產(chǎn)應用。本口服液風味獨特，藥效穩(wěn)定，具有很高的醫(yī)療保健作用。
文檔編號A23L2/38GK101278730SQ200810017958
公開日2008年10月8日 申請日期2008年4月7日 優(yōu)先權(quán)日2008年4月7日
發(fā)明者孫榮高 申請人:孫榮高