專利名稱：一種vmp1基因的原位雜交檢測試劑盒及其檢測方法和應用的制作方法
一種VMP1基因的原位雜交檢測試劑盒及其檢測方法和應用技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種試劑盒，具體地說關(guān)于一種VMP1基因的原位雜交檢測試 劑盒及其檢測方法和應用。
背景技術(shù)：
根據(jù)國內(nèi)外權(quán)威機構(gòu)提供的資料，我國每年癌癥的新增人數(shù)170萬，死亡 人數(shù)近160萬，患者600萬，全球每年新增癌癥患者800萬，死亡人數(shù)接近800 萬，患者約有8400萬人，到2020年以上人數(shù)將翻一番，這是一組可怕的數(shù)字。
2005年美國衛(wèi)生研究院、癌癥研究院、疾控中心等多家單位做了一個年度 報告，"認為人類在抗癌大戰(zhàn)中是失敗"，也就是說癌癥死亡率沒有降低，其列 舉出造成抗癌大戰(zhàn)失敗的幾個因素是1.腫瘤細胞異質(zhì)性；2.腫瘤細胞耐藥性； 3.抗癌藥物設(shè)計思路不完善等。同時，該報告中亦提出應重新審視現(xiàn)有診治癌 癥的措施。
本發(fā)明人在研究中發(fā)現(xiàn)，導致癌癥死亡率不降的另二個重要原因是l.不 能做到真正的早期診斷;2.轉(zhuǎn)移的病理機制不清楚。依照傳統(tǒng)的醫(yī)學影像及和 其它生化(如蛋白標記物)指標來診斷癌癥，認為占位性癌塊在2公分下是屬 于早期癌癥的診斷(更小些有時無癥狀體征)，這一概念值得認真討論。影像 醫(yī)學的2公分以下癌塊屬早期這一界定科學性是不夠嚴謹?shù)?，從細胞學角度， 1公分的腫塊約有一億個腫瘤細胞，2公分的腫塊其三維空間的細胞疊加數(shù)遠 不止2億個腫瘤細胞，從癌變前期到單克隆癌細胞產(chǎn)生及形成2公分的癌塊， 其病理演變過程相當長，可能是一年或兩年、甚至三年以上，很難證實的是在這個過程中，腫塊是癌癥唯一的發(fā)生地和單獨的病灶。臨床上已證實 一旦形 成腫塊的同時，其他癌細胞通過不同途徑遷移到其他部位克隆生長； 一旦切除 原發(fā)灶后，其他器官復發(fā)灶或多發(fā)癌塊灶先后形成或轉(zhuǎn)移。因此，在臨床上以 2公分以下的腫塊大小來界定早期與否，不夠嚴謹(有些病例，在發(fā)現(xiàn)原發(fā)病 灶時，同時發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)移病灶，不在我們表述的內(nèi)容中)，這時已經(jīng)是晚期了，這 是導致癌癥死亡率不降的真正原因。
隨著分子生物技術(shù)日益完善，功能基因組學，癌癥基因組學等研究的深入 展開，至今，我們已有可能在基因水平上做更精確的早期診斷，在癌變前期或 癌細胞形成(單克隆)時或腫瘤干細胞的存在及突破血管壁早期轉(zhuǎn)移時，就能 做到早期預測診斷。
德國研究人員發(fā)現(xiàn)，缺少一種VMP1蛋白會使癌細胞失去與鄰居建立聯(lián)系的
能力，癌細胞將因此更容易從腫瘤組織中分離并通過血液、淋巴液及組織間隙 等通路在體內(nèi)轉(zhuǎn)移。德國癌癥研究中心的研究人員對腎細胞癌組織進行的研究
顯示，與原發(fā)腫瘤相比，轉(zhuǎn)移腫瘤中編碼VMP1蛋白的基因數(shù)目要少很多。他 們在隨后乳腺癌組織的研究中得到了類似研究結(jié)果。研究中進一步發(fā)現(xiàn)，VMP1 蛋白負責在細胞表面形成特定的接觸點，以便于相鄰細胞彼此建立起聯(lián)系，防 御腫瘤細胞突破免疫防疫機制，逃竄轉(zhuǎn)移至它處，形成新的腫瘤。 一旦細胞缺 少這種蛋白，相鄰細胞之間將無法形成聯(lián)系。研究結(jié)果表明，相鄰細胞之間的 聯(lián)系形成機制被破壞是導致癌細胞在體內(nèi)轉(zhuǎn)移的原因之一。VMP1在許多癌癥中
表達過低。它作于癌癥轉(zhuǎn)移的抑制基因診斷早期指標有非常重要的臨床意義。 目前對VMP1基因的檢測技術(shù)用于科研方面，不適應臨床應用，特別是個性 化的應用未見報道，根據(jù)現(xiàn)有的文獻資料VMP1基因的檢測技術(shù)及檢測試劑盒未 見報道。原位雜交技術(shù)(in situ hybridization)是將分子生物學與細胞化學技術(shù) 結(jié)合起來，以標記的核酸分子為探針，在組織細胞原位檢測特異性核酸分子的 技術(shù)。其原理是使含有特異序列、經(jīng)過標記的核酸單鏈(即探針)，在適宜條 件下與組織細胞中的互補核酸單鏈即靶核酸發(fā)生雜交，再以放射自顯影或免疫 細胞化學方法對標記探針進行探測，從而在細胞原位顯示特異的DNA或RNA分 子。
中國專利文獻CN1556221公開了"IC53基因及其相關(guān)產(chǎn)物診斷和治療結(jié)腸 癌的用途及一種診斷結(jié)腸癌的試劑盒"。中國專利文獻CN1769485公開了 "櫛 孔扇貝病原類立克次氏體的原位雜交檢測方法及其試劑盒"。中國專利文 獻CN1556410公開了 "一種魚類病毒的檢測試劑盒及其檢測方法"。中國專利 文獻CN1680597公開了"一種用于定量檢測丙型肝炎病毒(HCV)的熒光定量PCR 試劑盒"。中國專利文獻CN2918435，公開了 "一種檢測肥胖相關(guān)基因SNP的寡 核苷酸芯片及試劑盒"。但是，關(guān)于VMP1基因的原位雜交檢測試劑盒及其檢測 技術(shù)未見報道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是，提供一種VMP1基因的原位雜交檢測試劑 盒及其檢測方法和應用。
為了解決上述問題，本發(fā)明提供了一種VMP1基因的原位雜交檢測試劑盒 在制備檢測癌癥的早期轉(zhuǎn)移疾病藥物中的應用，所述的癌癥是肝癌、 肺癌、胃癌、乳腺癌、結(jié)腸癌、前列腺癌、子宮癌、胰腺癌或膀胱癌， 所述的試劑盒包括雜交探針、標記物，其中所述的雜交探針序列如SEQ ID NO.l所示。VMP1基因序列見SEQIDNO.l， VMP1基因的核苷酸序列長度是2197bp， CDS是274.…1494bp。
作為可選的技術(shù)方案，所述的雜交探針序列如SEQ ID NO.l所示的RNA序列。
作為可選的技術(shù)方案，所述的標記物選自放射性核素或非放射性標記物。 作為可選的技術(shù)方案，所述的放射性核素選自311、 35S、 1251或3￥中的一種。
作為可選的技術(shù)方案，所述的非放射性標記物選自生物素、地高辛、堿性
磷酸酶、辣根過氧化酶或熒光素中的一種。
作為可選的技術(shù)方案，所述的非放射性標記物優(yōu)選自地高辛。 作為可選的技術(shù)方案，還包括增效劑，所述的增效劑是堿性磷酸酶抗體。 本發(fā)明還提供了一種VMP1基因的原位雜交檢測試劑盒，包括雜交探針、
標記物，所述的雜交探針序列如SEQ IDNO. 1所示，所述的標記物選
自放射性核素或非放射性標記物。
本發(fā)明還提供了 VMP1基因的原位雜交檢測方法，該方法包括以下步驟
a、 將試劑盒中的雜交探針與底物中待測RNA接觸，形成雜交復合體；
b、 檢測a步驟得到的雜交復合體。
作為可選的技術(shù)方案，所述a步驟中形成雜交復合體的條件為核酸雜交 的溫度為42。C;核酸雜交的時間為16—24小時，所述的底物選用血液細胞標 本或組織細胞標本。
本發(fā)明的檢測試劑盒是采用核酸雜交技術(shù)和組化免疫方法相結(jié)合，以VMP1 基因為檢測對象，合成探針是VMP1基因的DNA或RNA序列，檢測的底物是人 體血液標本白細胞或組織細胞的RNA的表達量。原位雜交技術(shù)的顯示方法能提 供VMP1基因的半定量或定量表達程度判定。根據(jù)雜交后免疫組化顯色判定以上基因的表達量，正常人VMP1基因表達高，即深顯色，VMP1基因在癌癥病人 和正常人有顯著差異，癌癥病人拌有轉(zhuǎn)移表達量是零或很低。
本發(fā)明的診斷試劑盒的組份是由雜交探針，雜交液，顯色劑，增效劑等組 成。本試劑盒的核酸雜交原理是分子生物學業(yè)內(nèi)人士均熟知，具體操作步驟是 標本處理、預雜交、雜交、免疫組化染色、鏡下進行定量分析、結(jié)果報告，其 中雜交的具體步驟包括 儀器操作
1) .將待測標本放入反應槽中；
2) .儀器自動棄去液體，自動加消化液；
3) .儀器自動棄去液體
4) .儀器自動棄去液體
5) .儀器自動棄去液體
6) .儀器自動棄去液體
7) .儀器自動棄去液體
8) .儀器自動棄去液體
9) .儀器自動棄去液體
10) .取出封片鏡檢。
自動后固定； 自動預雜交(42°C); 自動清洗； 自動雜交(42°C); 自動清洗；
自動與DIG抗體培養(yǎng)(室溫); 自動清洗，顯色；
本發(fā)明優(yōu)點在于
1、 本發(fā)明提供的試劑盒具有靈敏度高、特異性強的特點。
2、 本發(fā)明的檢測方法操作方便、簡單，能在區(qū)級以上醫(yī)院普遍使用和推
3、本發(fā)明的臨床意義是更早期跟蹤檢測癌癥發(fā)生和病理演變中發(fā)展趨勢。 本發(fā)明的診斷試劑盒與臨床上其它檢測癌庇蛋白標志物，以及影像醫(yī)學檢査有顯著不同。本發(fā)明可以在基因水平上檢測VMP1基因異常表達，在影像醫(yī)學檢 査未發(fā)現(xiàn)占位性癌病灶復發(fā)之前，癌癥生化指標未產(chǎn)生異常之前，亦未形成腫 瘤之前，能及早做到以上基因表達異常的信息采集，給臨床癌癥病患一個真正 的早期診斷以及治療后轉(zhuǎn)移復發(fā)及早預測。這樣才有可能實施癌癥的早期診 斷、早期預防、早期治療，有可能從源頭上徹底根治癌癥惡疾。

圖1是是本發(fā)明實施例中癌癥病人VMP1過量表達圖片。 圖2是本發(fā)明實施例中正常人VMP1表達圖片。
具體實施方式
下面結(jié)合圖對本發(fā)明提供的一種VMP1基因的原位雜交檢測試劑盒及其 檢測方法和應用的具體實施方式
做詳細說明。 實施例1
一種VMP1基因的原位雜交檢測試劑盒，包括雜交探針、標記物、增 效劑，其中，所述的雜交探針序列如SEQ IDNO. 1所示。雜交探針用 地高辛標記。試劑盒中的其它液體和標本組成如下
消化液100u 1/管l管/盒無色透明液體
保護液100iil/管l管/盒無色透明液體
預雜交液1300 u 1/管2管/盒無色透明液體
正義雜交液10y 1/管l管/盒無色透明液體
反義雜交液10u 1/管l管/盒無色透明液體
封閉液1000 p 1/管l管/盒無色透明液體
堿性磷酸酶抗體l管/盒無色透明液體顯色劑A175u 1/管l管/盒黃色液體
顯色劑B320u 1/管l管/盒無色透明液體
緩沖液I 10x90ral/瓶l瓶/盒淺黃色或無色透明液體
緩沖液n iox80ml/瓶l瓶/盒淺黃色或無色透明液體
緩沖液m iox20ra/瓶3瓶/盒淺黃色或無色透明液體
緩沖液IV 10x90ml/瓶l瓶/盒淺黃色或無色透明液體
固定液90ml/瓶l瓶/盒無色透明液體
陽性對照標本6片/盒
上述試劑成分說明(所有試劑購自SIGMA)
1、 消化液20mg/ml蛋白酶K, 100mg蛋白酶K，加DEPC- H20 5ml;
2、 保護液0.2g的glycine加入lml的1X緩沖液I;
3、 預雜交液IX緩沖液II 7.5ml 50XD 3ml
10mg/ml yest t-RNA 750ul llmg/ml SALMON TESTES DNA 682ul 0,04M EDTA 3ml 50% formamide 15ml
4、 封閉液0. 03g的bloking (購買自羅氏公司)加入lmllX緩沖液
in;
5、 lOx緩沖液I: (PH7. 1-7.4) NaCl 80g
Na2HP04. 12H20 360g KC1 2gKH2P04 2g
加三蒸水至11，并高壓滅菌；
6、 10x緩沖液II: (PH7.0) NaCl 175.3g
檸檬酸鈉88.2g HC1 幾滴
加三蒸水至ll，并高壓滅菌；
7、 緩沖液in: (PH7.9) Tris 121. lg
NaCl 87.66g HCl60ml左右 加三蒸水至ll，并高壓滅菌；
8、 緩沖液IV:
1M Tris-HC1(PH9. 5): Tirs 121. lg加HC1 3ml左右，加水900ml，調(diào)PH 至9.5，加水至ll，并高壓滅菌；
1M NaCl: NaCl 58. 44加水至11，并高壓滅菌；
0. 5MMgCl2: 101.65g MgCl2.6H20加水至11，并高壓滅菌；
9、 固定液多聚甲醛40g加1X緩沖液I至11，稍加熱(約50-60度)攪 拌至溶解；
10、 顯色劑A: NBT lg加70%DMF11.44ml;
11、 顯色劑B: BCIP lg加100%DMF30ml。 本發(fā)明的試劑盒可以多人份使用或一人份使用。 實施例2一種VMP1基因的原位雜交檢測方法及試劑盒應用 一、標本處理
1、用10ml的離心管，裝4. 5ml淋巴細胞分離液，再將3 ml抗凝血緩慢 加入含有淋巴細胞分離液(血淋巴細胞分離液=1:1.5)的離心管 中，2000r/min離心10 min;
2、 吸取中間層白細胞至另一離心管中，再在此管中加入約兩倍的1X緩沖液 I,混勻，1500g/min離心10 min;
3、 棄上清.沉淀加入約兩倍的1X緩沖液I，混勻，1500g/min離心10 min;
4、 棄上清，并把試管口多余的液體用擦手紙吸去。再將沉淀制成懸液，滴 在玻片上推片，自然干燥。(有條件的醫(yī)院可以用制片機制片。)3 ml血，可以 做4張片子；
5、 用40ml 4%固定液，在玻璃缸中，固定30min，再用1 X緩沖液I洗5min。 每缸可以放16片；
6、 標本可保存在-20°C，或繼續(xù)做實驗。
二、 將試劑盒中試劑配制成使用濃度
1、 將10X緩沖液I用三蒸水按1:10稀釋成1X緩沖液I ;
2、 將20 X緩沖液II用三蒸水按1:10稀釋成2 X緩沖液II;
按1:100稀釋成0. 2 X緩沖液II ;按1:200稀釋成0. 1 X緩沖液II;
3、 將IOX緩沖液III用三蒸水按1:10稀釋成1X緩沖液III;
4、 IOX緩沖液IV用三蒸水按1:10稀釋成X緩沖液IV (取ltt， 2#， 3#各 10ml，加水至100ml既可)。
三、 實驗步驟
1、取每位待檢者標本兩張，(另外兩張留作復査用)及陽性對照標本兩張(每次實驗做一對陽性對照)；
2、 在玻璃缸里加消化液(消化液100ul加1 X緩沖液199. 9ml，即為使用濃 度)20ml。 37r水浴預熱IO分鐘。放進16張玻片，37"處理12 min，再用1 X緩沖液I洗5min;
3、 用0. 2%的保護液(保護液lml加1 X緩沖液199ml即為使用濃度)洗10min， 三蒸水洗5min，以上過程都在玻璃缸進行。玻片自然干燥；
4、 將玻片放入保濕盒內(nèi)，加預雜交液20ul/片.蓋上蓋玻片，蓋緊保濕盒，放 在42。C恒溫水浴箱中3h以上；
5、 取出玻片，棄去蓋玻片，將玻片放入玻璃缸內(nèi)，用70%， 90%， 95%的乙醇各洗 2min ，自然干燥；
6、 將玻片放入保濕盒內(nèi)，每位病人標本兩張， 一張加正義雜交液20ul/片， 另一張加反義雜交液20ul/片.蓋上蓋玻片，蓋緊保濕盒，放在42。C恒溫水浴 箱中16-24h;
7、 取出玻片，棄去蓋玻片，將玻片放入玻璃缸內(nèi)
在42"C恒溫水浴箱中用2X緩沖液II洗兩次，每次15min 在42。C恒溫水浴箱中用0. 2X緩沖液II洗一次，每次15min 在42。C恒溫水浴箱中用0. 1 X緩沖液II洗兩次，每次15min;
8、 用IX緩沖液III洗30s，取出玻片，自然干燥；
9、 將玻片放入保濕盒內(nèi)，加0. 5%1封閉液(lml封閉液加5mllX緩沖液III) 100ul/片，蓋緊保濕盒，在室溫下作用30min;
10、 取出玻片，用IX緩沖液III洗30s，自然干燥；
11、 將玻片放入保濕盒內(nèi)，加堿性磷酸酶抗體(加入1.8mllX緩沖液 in)100ul/片，蓋緊保濕盒在室溫下作用30min;12、 取出玻片，用IX緩沖液III洗3次，每次15min;
13、 1 X緩沖液IV洗2min，加顯色劑(顯色劑A73. 3ul，顯色劑B157. 5ul加 到30mll X緩沖液IV中，混勻)，室溫避光12h以上；
14、 用三蒸水洗5min，自然干燥，(用甘油加10%的1 X緩沖液I混勻)封片 鏡檢。
四、結(jié)果判斷
在光鏡下計數(shù)100-300個細胞，計算染上紫色細胞的百分比。 陽性對照標本加反義雜交液的應該80%以上染上紫色。 所有加正義雜交液的陰性內(nèi)對照應無色。
實施例中癌癥病人VMP1過量表達圖片見圖1。正常人VMP1表達圖片見圖2。 地高辛標記的cDNA、 RNA和寡核苷酸探針，不但探針的具有生物素標記優(yōu) 點，還克服了生物素標記的探針在原位雜交過程中受組織內(nèi)源性生物素干憂等 缺點)，將該雜交探針與人體血液白細胞的待測RNA核酸進行雜交，再用免疫 組化的方法顯色，在光鏡下觀察mRNA的存在和定位，根據(jù)染色的細胞數(shù)，判斷 目的基因的表達量。
本發(fā)明方法是目前常用的核酸原位雜交技術(shù)，該方法通過檢測底物細胞中 的VMP1基因表達量，用來確定癌癥是否發(fā)生轉(zhuǎn)移，臨床研究表明，VMP1基因 是癌癥轉(zhuǎn)移的抑制基因，因為VMP1基因在正常人中高表達，在癌癥病人伴有 轉(zhuǎn)移是低表達， 一旦VMP1基因表達低，說明癌癥已經(jīng)發(fā)生轉(zhuǎn)移，從而獲得癌 癥的診斷信息。
以上所述僅是本發(fā)明的優(yōu)選實施方式，應當指出，對于本技術(shù)領(lǐng)域的普通 技術(shù)人員，在不脫離本發(fā)明原理的前提下，還可以做出若干改進和潤飾，這些 改進和潤飾也應視為本發(fā)明的保護范圍。SEQUENCE LISTING . 〈110〉芮屈生物技術(shù)(上海)有限公司
〈120〉 一種VMPl基因的原位雜交檢測試劑盒及其檢測方法和應用 <130〉 / <160〉 1
〈170〉 Patentln version 3. 1 〈210〉 1 〈211〉 2197 〈212〉 DNA
〈213〉 智人(Homo sapiens) 〈400〉 1
attcttcctc ttgccacacc cacagggccc gcactaagag cct肌ctgaa atcccgcgag
60
gatc肌ccga gctcgccgaa aggagggagg aacgtatccc ttctggaggc tgtctcaggg 120
ggc卿ggga ccggaccgga agtgacgtga gcgggttccg gttgtctgga gcccagcggc 180
gggtgtg卿gtccgtaagg agcagcttcc aggatcctga gatccggagc agccggggtc 240
ggagcggctc ctc肌g兆tt actgatctat gaaatggcag agaBtgg肌3 aa3ttgtgax: 300
cagagacgtg tagcaatgaa caaggaacat cataatggaa atttcacaga cccctcttca 360
gtg33tgaaB 3gaagaggag ggagcggg肌ga^ggcags atattgtcct gtggagscag 420
ccgctcatta ccttgcagta tttttctctg gaaa/tccttg taatcttgaa ggaatggacc 480
tcaaaattat ggcatcgtca aagcattgtg gtgtcttttt tactgctgct tgctgtgctt 540
a^togctacgt attatgttga 3ggagtgcat caacagtetg tgc犯cgtet兆兆肌ac3g 600
tttcttttgt atgcctactg gataggctta ggaattttgt cttctgttgg gcttggaaca 660
gggctgcaca cctttctgct ttatctgggt ccacatatag cctcagttac attagctgct 720
tatgaatgca attcagttaa ttttcccgaa ccaccctatc ctgatcagat tatttgtcca 了80
gatgaagagg gcactgaagg aaccatttct ttgtggagta tcatctcaaa agttaggatt 840
gaagcctgca tgtggggtat cggtacagca atcggagagc tgcctccata tttcatggcc 900
服agcagctc gcctctragg tgctg犯cca g3tgatgaag agtatcagga atttgaagag 960
atgctggaac atgcagagtc tgcacaagac tttgcctccc gggccaaact ggcagttcaa 1020<formula>formula see original document page 16</formula>
權(quán)利要求
1. 一種VMP1基因的原位雜交檢測試劑盒在制備檢測癌癥的早期轉(zhuǎn)移疾病藥物中的應用，所述的癌癥是肝癌、肺癌、胃癌、乳腺癌、結(jié)腸癌、前列腺癌、子宮癌、胰腺癌或膀胱癌，所述的試劑盒包括雜交探針、標記物，所述的雜交探針序列如SEQ ID NO.1所示。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的應用，其特征在于所述的雜交探針 序列如SEQ ID NO. 1所示的RNA序列。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的應用，其特征在于所述的標記 物選自放射性核素或非放射性標記物。
4. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的應用，其特征在于所述的放射性核 素選自3H、 35S、 1251或32P中的一種。
5. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的應用，其特征在于所述的非放射性 標記物選自生物素、地高辛、堿性磷酸酶、辣根過氧化酶或熒光素中的 一種。
6. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的應用，其特征在于所述的非放射性標記物優(yōu)選自地高辛。
7. 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的應用，其特征在于所述的試劑盒還包括增效劑，所述的增效劑是堿性磷酸酶抗體。
8. —種VMP1基因的原位雜交檢測試劑盒，包括雜交探針、標記物， 其特征在于，所述的雜交探針序列如SEQ IDNO. 1所示，所述的標記 物選自放射性核素或非放射性標記物。
9. 一種VMP1基因的原位雜交檢測方法，其特征在于，該方法包括 以下步驟a、將權(quán)利要求8所述試劑盒中的雜交探針與底物中待測RNA接 觸，形成雜交復合體；b、檢測a步驟得到的雜交復合體。
10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的檢測方法，其特征在于a步驟中形 成雜交復合體的條件為核酸雜交的溫度為42°C;核酸雜交的時間 為16 — 24小時，所述的底物選用血液細胞標本或組織細胞標本。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種VMP1基因的原位雜交檢測試劑盒，包括雜交探針、標記物，所述的雜交探針序列如SEQ ID NO.1所示。本發(fā)明還提供了一種VMP1基因的原位雜交檢測方法。另外，本發(fā)明還提供了試劑盒在制備檢測癌癥的早期轉(zhuǎn)移疾病藥物中的應用，所述的癌癥是肝癌、肺癌、胃癌、乳腺癌、結(jié)腸癌、前列腺癌、子宮癌、胰腺癌或膀胱癌。本發(fā)明優(yōu)點在于本發(fā)明提供的試劑盒具有靈敏度高、特異性強的特點。本發(fā)明的檢測方法操作方便、簡單，能在區(qū)級以上醫(yī)院普遍使用和推廣。
文檔編號C12Q1/68GK101429542SQ200810042260
公開日2009年5月13日 申請日期2008年8月29日 優(yōu)先權(quán)日2008年8月29日 公開號200810042260.X
發(fā)明者張云福, 裘建英 申請人:芮屈生物技術(shù)(上海)有限公司