專利名稱：心腦浸液中和營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種心腦浸液中和營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基，其主要成分是牛心浸液、犢牛腦浸 液、胰蛋白胨、葡萄糖、氯化鈉、磷酸氫二鈉、對(duì)氨基苯甲酸溶液、硫酸鎂溶液經(jīng)一定的工 藝制成。臨床對(duì)已治療的患者的標(biāo)本需經(jīng)培養(yǎng)才能證實(shí)是否痊愈。心腦浸液中和營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基 能夠檢測(cè)臨床大量使用抗生素后的不同菌屬陽(yáng)性結(jié)果，此培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)豐富，常用于營(yíng)養(yǎng)要求 較高的細(xì)菌分離培養(yǎng)。細(xì)菌接種分離培養(yǎng)好壞，會(huì)直接影響檢測(cè)結(jié)果。往往需要將樣本通過(guò) 不同方法進(jìn)行分離培養(yǎng)，來(lái)進(jìn)行細(xì)菌種類(lèi)的鑒別，這是目前微生物實(shí)驗(yàn)室最常用的手段。由 于目前培養(yǎng)條件的應(yīng)用范圍所限，供一般標(biāo)本的分離培養(yǎng)用的培養(yǎng)基沒(méi)有特效的，存在所分 離培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)不足、培養(yǎng)時(shí)間長(zhǎng)、易出現(xiàn)假陽(yáng)性或假陰性等問(wèn)題。隨著生物研究的進(jìn)展，國(guó) 內(nèi)外對(duì)細(xì)菌鑒別的培養(yǎng)基研究也在不斷的發(fā)展。傳統(tǒng)常規(guī)檢測(cè)診斷方法是先將樣本進(jìn)行細(xì)菌 培養(yǎng)分離，選擇標(biāo)準(zhǔn)典型菌株再進(jìn)行血清學(xué)鑒定檢測(cè)。整個(gè)檢測(cè)確診過(guò)程耗時(shí)長(zhǎng)、治療的患 者臨床又使用了抗生素，操作繁瑣，試劑質(zhì)量無(wú)法保證，嚴(yán)重影響了致病菌確認(rèn)工作、對(duì)快 速準(zhǔn)確診斷，搶救病人帶來(lái)極大的困難。本發(fā)明打破傳統(tǒng)常規(guī)分步檢測(cè)手段，特別是針對(duì)臨 床大量使用抗生素或大量使用消毒液的樣本，在培養(yǎng)基中增加中和劑，從而減少由于檢測(cè)手 段落后而造成對(duì)人體健康的危害，較傳統(tǒng)方法具有明顯的應(yīng)用價(jià)值，對(duì)指導(dǎo)臨床診斷和治療， 防止濫用抗菌藥物具有重要意義。
背景技術(shù)：
本發(fā)明的目的在于提供一種能克服已有培養(yǎng)基不足的心腦浸液中和營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng) 基。與其它同類(lèi)培養(yǎng)基相比具備下列特點(diǎn)營(yíng)養(yǎng)豐富，用于臨床標(biāo)本營(yíng)養(yǎng)要求較高的細(xì)菌， 中和營(yíng)養(yǎng)要求高的細(xì)菌增菌的規(guī)范鑒定。在培養(yǎng)基中增加中和劑，能夠檢測(cè)臨床大量使用抗 生素后的不同菌屬陽(yáng)性結(jié)果，靈敏度高
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的要點(diǎn)在于選擇合適的組分，并進(jìn)行合理混配，經(jīng)混合、溶解、高溫滅 菌、冷卻、分裝等工藝而成一種心腦浸液中和營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基。
本發(fā)明選擇的配方如下(組分及其重量百分比％):犢牛腦浸液200-220mL;牛心浸液 220-250mL;胰蛋白胨10.0-12.0;葡萄糖2.0-2.2;氯化鈉5.0-5.5;磷酸氫二鈉 2.5-3.0; 5g/L對(duì)氨基苯甲酸溶液4.0-5.0mL; lmol/L硫酸鎂溶液18. 0-20. OmL;蒸餾水加至 1000ml。
本培養(yǎng)基含有豐富的營(yíng)養(yǎng)成分，如犢牛腦浸液、牛心浸液、胰蛋白胨是培養(yǎng)基中的主要 營(yíng)養(yǎng)成分，可供營(yíng)養(yǎng)要求較高的細(xì)菌生長(zhǎng)，常用于純種分離培養(yǎng)，在通常室溫下或37i:培養(yǎng)， 培養(yǎng)24小時(shí)后，即可純種分離，或移種到選擇性培養(yǎng)基上以分離致病菌。氯化鈉用于調(diào)整滲 透壓；磷酸鹽為細(xì)菌提供良好的磷源，兼有緩沖作用。對(duì)氨基苯甲酸中和血液中磺胺類(lèi)藥物 的抑菌作用；硫酸鎂破壞血液中存在的四環(huán)素、金霉素、新霉素、多黏菌素及鏈霉素的抑菌 作用。配成的培養(yǎng)基呈淡黃色透明液體。質(zhì)控菌株為腦膜炎奈瑟氏菌(ATCC3090)、肺炎鏈球 菌(ATCC19615)、化膿性鏈球菌(ATCC6303)，質(zhì)控菌株接種于此培養(yǎng)基后，經(jīng)35士2。C培養(yǎng) 18 24h，生長(zhǎng)情況良好。
本發(fā)明產(chǎn)品的制備方法是1) 、將胰蛋白胨、葡萄糖、氯化鈉、磷酸氫二鈉、對(duì)氨基苯甲酸溶液、硫酸鎂溶液、蒸餾水
置于三角燒瓶?jī)?nèi)，混合；
2) 、加熱溶解，調(diào)pH7.3 7.5,以絨布過(guò)濾燒瓶?jī)?nèi),后置于壓力蒸氣滅菌器內(nèi)，12rC15min高
壓滅菌；
3) 、取出后冷至5(TC左右，加無(wú)菌的牛心浸液、犢牛腦浸液，輕輕搖勻，分裝于試管，抽樣
于37。C培養(yǎng)18-24小時(shí)，如無(wú)細(xì)菌生長(zhǎng)，冷藏備用。
本發(fā)明具有以下優(yōu)點(diǎn)(1)心腦浸液中和營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基，營(yíng)養(yǎng)豐富、配制簡(jiǎn)單，可用于各 種營(yíng)養(yǎng)要求較高的細(xì)菌增菌培養(yǎng)；(2)選擇性強(qiáng)、檢出率高，臨床應(yīng)用效果滿意，尤其是對(duì)排 除大量使用抗生素的影響有顯著作用；(3)較傳統(tǒng)的培養(yǎng)基檢測(cè)耗時(shí)短、特異性強(qiáng)、穩(wěn)定性好。
具體實(shí)施例方式
按照下表所列數(shù)據(jù)(重量百分比％)進(jìn)行配置 配方一
犢牛腦浸液 牛心浸液 胰蛋白胨 葡萄糖 氯化鈉 磷酸氫二鈉
5g/L對(duì)氨基苯甲酸溶液 lmol/L硫酸鎂溶液 蒸餾水
200-220mL 220-250mL 10. 0-12. 0
2. 0-2. 2
5. 0-5. 5
2. 5-3. 0
4. 0—5. 0mL 18. 0-20. 0mL 加至1000ml
配方二
犢牛腦浸液
牛心浸液
胰蛋白胨
葡萄糖
氯化鈉
磷酸氫二鈉
5g/L對(duì)氨基苯甲酸溶液 lmol/L硫酸鎂溶液 蒸餾水
210-220mL 218-250mL 10. 5-12.0 2. 0-2. 2 5. 0-5. 5 2. 5-3. 0 4. 0-5. 0mL 18. 5-20. 0mL 加至1000ml
配方三
犢牛腦浸液 200-210mL
牛心浸液 220-245mL胰蛋白胨 葡萄糖. 氯化鈉 磷酸氫二鈉
5g/L對(duì)氨基苯甲酸溶液 lmol/L硫酸鎂溶液 蒸餾水
配方四
犢牛腦浸液
牛心浸液
胰蛋白胨
葡萄糖
氯化鈉
磷酸氫二鈉
5g/L對(duì)氨基苯甲酸溶液 lmol/L硫酸鎂溶液 蒸餾水
10. 0-11. 5
2. 0-2. 2
5. 0-5. 5
2. 5-3. 0 4. 0-5. 0mL
18. 0-19. 8mL 加至1000ml
205-218mL 225-245mL 10.0-12.0 2. 0-2. 2 5. 0-5. 5 2. 5-3. 0 4, 0-5. 0mL 18. 2-19. 8mL 加至1000ml
權(quán)利要求
1、本發(fā)明涉及一種心腦浸液中和營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基，其特征在于具有如下的配方(組分及其重量百分比％)犢牛腦浸液200-220mL；牛心浸液220-250mL；胰蛋白胨10.0-12.0；葡萄糖2.0-2.2；氯化鈉5.0-5.5；磷酸氫二鈉2.5-3.0；5g/L對(duì)氨基苯甲酸溶液4.0-5.0mL；1mol/L硫酸鎂溶液18.0-20.0mL；蒸餾水550mL。
2、 一種權(quán)利要求1所述心腦浸液中和營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基的制備方法，其特征在于具有如下的 歩驟1) 、將胰蛋白胨、葡萄糖、氯化鈉、磷酸氫二鈉、對(duì)氨基苯甲酸溶液、硫酸鎂溶液、蒸餾水置于三角燒瓶?jī)?nèi)，混合；2) 、加熱溶解，調(diào)pH7.3、.5，以絨布過(guò)濾燒瓶?jī)?nèi),后置于壓力蒸氣滅菌器內(nèi)，12rC15min高壓滅菌；3) 、取出后冷至5(TC左右，加無(wú)菌的牛心浸液、犢牛腦浸液，輕輕搖勻，分裝于試管，抽樣于37'C培養(yǎng)18-24小時(shí)，如無(wú)細(xì)菌生長(zhǎng)，冷藏備用。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種心腦浸液中和營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基，其主要成分是犢牛腦浸液、牛心浸液、胰蛋白胨、葡萄糖、氯化鈉、磷酸氫二鈉、對(duì)氨基苯甲酸溶液、硫酸鎂溶液經(jīng)一定的工藝制成。常用于營(yíng)養(yǎng)要求較高的細(xì)菌分離培養(yǎng)。本發(fā)明具有以下優(yōu)點(diǎn)(1)心腦浸液中和營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基，營(yíng)養(yǎng)豐富、配制簡(jiǎn)單，可用于各種營(yíng)養(yǎng)要求較高的細(xì)菌增菌培養(yǎng)；(2)選擇性強(qiáng)、檢出率高，臨床應(yīng)用效果滿意，尤其是對(duì)排除大量使用抗生素的影響有顯著作用；(3)較傳統(tǒng)的培養(yǎng)基檢測(cè)耗時(shí)短、特異性強(qiáng)、穩(wěn)定性好。
文檔編號(hào)C12Q1/04GK101659979SQ20081014719
公開(kāi)日2010年3月3日 申請(qǐng)日期2008年8月25日 優(yōu)先權(quán)日2008年8月25日
發(fā)明者濤 薄 申請(qǐng)人:濤 薄