專利名稱：水溶性聚乙烯醇纖維的生物制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于生物技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種水溶性水溶性聚乙烯醇纖維的生物制備方法。
背景技術(shù)：
水溶性聚乙烯醇纖維在加熱后溶于水，在其水溶液中加入添加劑后發(fā)生凝膠化， 或在低溫下(-l(TC )冷凍形成凝膠，從而將微生物包埋固定在凝膠網(wǎng)絡(luò)中。常用的添加劑
有硼酸和硼砂，在水溶性聚乙烯醇纖維水溶液中加入硼酸或硼砂，通過化學(xué)反應(yīng)形成凝膠，
其制作步驟為(i)將水溶性聚乙烯醇纖維與水以i : 5 i : io比例相混合，水浴加熱至
水溶性聚乙烯醇纖維溶化，然后靜置降至常溫。(2)將離心后酶/微生物懸浮于0.9^NaCl 溶液中，酶/微生物濕重與NaCl溶液的重量比為1 : 1 1 : 2。將此酶/微生物懸浮液 與水溶性聚乙烯醇纖維溶液以一定比例相混合。(3)用注射器將混合溶液滴加到冷卻的飽 和硼酸溶液中，形成直徑幾毫米的白色球型顆粒。(4)將顆粒在飽和硼酸溶液中浸泡一段時 間，然后用生理鹽水洗滌。 但目前這種水溶性聚乙烯醇纖維固定化方法中存在的主要問題是其一，水溶性 聚乙烯醇纖維是一種高粘性物質(zhì)，并且水溶性聚乙烯醇纖維與硼酸反應(yīng)較慢，滴下時間相 差不大的兩液滴相碰時會粘結(jié)在一起，并逐步溶合成一團，即水溶性聚乙烯醇纖維顆粒有 非常強的附聚傾向，使水溶性聚乙烯醇纖維凝膠成球困難；其二，水溶性聚乙烯醇纖維與硼 酸進行反應(yīng)固定時，硼酸上的三個經(jīng)基只部分地進行了反應(yīng)，反應(yīng)后形成的高聚物凝膠上 還殘留有親水性的輕基，使得固定化顆粒在應(yīng)用中存在很大的水溶膨脹性，隨著使用時間 的增長，強度大大減弱，在實際應(yīng)用中極為不利。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的就在于克服現(xiàn)有技術(shù)存在的上述不足，而提供一種制備簡單、產(chǎn)品 質(zhì)量高、方法實用的水溶性聚乙烯醇纖維的生物制備方法。 為了實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明是采用如下技術(shù)方案，本發(fā)明包括以下步驟
(1)將水溶性聚乙烯醇纖維、海藻酸鈉、丙烯酞胺與水相混合，水浴加熱至溶化，然 后靜置降至常溫成為水溶性聚乙烯醇纖維溶液；其中，水溶性聚乙烯醇纖維加入量為15 30% ;海藻酸鈉加入量為0. 1 3. 0% ;丙烯酞胺加入量為0. 2 10% ;其余量為水；
(2)將酶/微生物懸浮液與所述的水溶性聚乙烯醇纖維溶液以一定比例相混合；
(3)將飽和硼酸溶液加入1 3%氯化鈣和0. 1 2. 0%的N，N' —亞甲基雙丙烯 酞胺制備交聯(lián)劑溶液； (4)用注射器或滴管將第3步制備的混合溶液滴加到冷卻的交聯(lián)劑溶液中，使其 形成白色球型顆粒，并在其中浸泡若干小時，然后用生理鹽水洗滌。
本發(fā)明的有益效果 本發(fā)明的水溶性聚乙烯醇纖維的生物制備技術(shù)，可以使固定化顆粒制備簡單，顆粒的機械強度明顯提高，使用壽命延長。
具體實施例方式
實施例1 本發(fā)明包括以下步驟 (1)將15g水溶性聚乙烯醇纖維、1. Og海藻酸鈉、5. Og丙烯酞胺與lOOmL水相混 合，水浴加熱至溶化，然后靜置降至常溫； (2)纖維素酶濕重5g，懸浮于10mL 0. 9% NaCl中，與12. 5mL上述溶液相混合。
(3)將飽和硼酸溶液加入1% CaCl2和0. 5%的N， N' —亞甲基雙丙烯酞胺制備成 都交聯(lián)劑溶液； (4)用0. 40mm ID的注射器將(2)中的混合液滴加到冷卻的交聯(lián)劑溶液中，使其形 成2mm直徑的白色球型小珠，并在其中浸泡20h，然后用生理鹽水洗滌。
實施例2
制備步驟 (1)將20g水溶性聚乙烯醇纖維、1. 0海藻酸鈉、4. 0丙烯酞胺與lOOmL水相混合， 水浴加熱至溶化，然后靜置降至常溫； (2)絲抱酵母細(xì)胞濕重5g，懸浮于12mL 0. 9% NaCl中，與10mL上述溶液相混合。
(3)將飽和硼酸溶液加入2% CaCl2和0. 8%的N， N' —亞甲基雙丙烯酞胺制備成 都交聯(lián)劑溶液； (4)用膠皮吸管將(2)中的混合液滴加到冷卻的交聯(lián)劑溶液中，使其形成3mm直徑 的白色球型小珠，并在其中浸泡24h，然后用生理鹽水洗滌。
權(quán)利要求
水溶性聚乙烯醇纖維的生物制備方法，其特征在于，包括以下步驟(1)將水溶性聚乙烯醇纖維、海藻酸鈉、丙烯酞胺與水相混合，水浴加熱至溶化，然后靜置降至常溫成為水溶性聚乙烯醇纖維溶液；其中，水溶性聚乙烯醇纖維加入量為15～30％；海藻酸鈉加入量為0.1～3.0％；丙烯酞胺加入量為0.2～10％；其余量為水；(2)將酶/微生物懸浮液與所述的水溶性聚乙烯醇纖維溶液以一定比例相混合；(3)將飽和硼酸溶液加入1～3％氯化鈣和0.1～2.0％的N，N’一亞甲基雙丙烯酞胺制備交聯(lián)劑溶液；(4)用注射器或滴管將第3步制備的混合溶液滴加到冷卻的交聯(lián)劑溶液中，使其形成白色球型顆粒，并在其中浸泡若干小時，然后用生理鹽水洗滌。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的水溶性聚乙烯醇纖維的生物制備方法，其特征在于，包括以 下步驟(1) 將15g水溶性聚乙烯醇纖維、1.0g海藻酸鈉、5. Og丙烯酞胺與100mL水相混合，水 浴加熱至溶化，然后靜置降至常溫；(2) 纖維素酶濕重5g，懸浮于10mL 0. 9% NaCl中，與12. 5mL上述溶液相混合；(3) 將飽和硼酸溶液加入1% CaCl2和0. 5%的N， N' —亞甲基雙丙烯酞胺制備成都交 聯(lián)劑溶液。
全文摘要
水溶性聚乙烯醇纖維的生物制備方法屬于生物化學(xué)領(lǐng)域，尤其涉及一種水溶性水溶性聚乙烯醇纖維的生物制備方法。本發(fā)明提供一種制備簡單、產(chǎn)品質(zhì)量高、方法實用的水溶性聚乙烯醇纖維的生物制備方法。本發(fā)明是采用如下技術(shù)方案，本發(fā)明包括以下步驟(1)將水溶性聚乙烯醇纖維、海藻酸鈉、丙烯酞胺與水相混合，水浴加熱至溶化，然后靜置降至常溫成為水溶性聚乙烯醇纖維溶液；(2)將酶/微生物懸浮液與所述的水溶性聚乙烯醇纖維溶液以一定比例相混合；(3)將飽和硼酸溶液加入氯化鈣和N，N’－亞甲基雙丙烯酞胺制備交聯(lián)劑溶液；(4)將第3步制備的混合溶液滴加到冷卻的交聯(lián)劑溶液中，使其形成白色球型顆粒，然后用生理鹽水洗滌。
文檔編號C12N11/00GK101735998SQ20081017915
公開日2010年6月16日 申請日期2008年11月27日 優(yōu)先權(quán)日2008年11月27日
發(fā)明者田開 申請人:田開