專利名稱：一種兒童逆商基因檢測(cè)評(píng)估試劑盒的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種易感基因檢測(cè)產(chǎn)品，具體的說(shuō)，涉及一種有關(guān)兒童逆商基因檢測(cè)
評(píng)估的試劑盒。
背景技術(shù)：
除了智商、情商外，近年來(lái)又流行一個(gè)新概念挫折商(逆商)。每個(gè)人在生活中 都不同程度地受到挫折，人們?cè)谑艽煺酆蠡謴?fù)的能力卻各不相同，有些人彈性實(shí)足，有些人 受挫后一蹶不振，而大多數(shù)人則介于兩者之間。保羅.斯托茨在20世紀(jì)90年代中期率先 提出了"逆境商數(shù)"(Adversity Quotient,縮寫(xiě)為"AQ")，用于衡量一個(gè)人應(yīng)對(duì)挫折、逆境 的能力。 俗語(yǔ)說(shuō)不如意事常八九。人生前進(jìn)的路沒(méi)有一帆風(fēng)順的，而一個(gè)人在逆境中的表 現(xiàn)往往決定了個(gè)體的人生走向。從個(gè)體角度看，有相似智商、情商和教育背景的同學(xué)，數(shù)年 之后，成功的程度往往會(huì)有天壤之別。究其原因，排除機(jī)遇的因素，往往取決于一個(gè)人逆商 的高低。 智商、情商、逆商這三個(gè)心商的主要組成要素相互影響、相互作用，共同決定了一 個(gè)人的成功與否。人們認(rèn)為在生活中這三者的作用是這樣分配的能使一個(gè)人被企業(yè)錄用 的往往是智商，而真正能使他在職業(yè)道路發(fā)展構(gòu)成中得到晉升的往往是情商，而面對(duì)逆境 使他/她披荊斬棘，勇往直前，最終達(dá)到目標(biāo)的卻靠的是逆商。
目前人們對(duì)逆商的測(cè)試主要是心理測(cè)試。保羅，史托茲教授將逆商劃分為四個(gè)部 分，用來(lái)測(cè)量每個(gè)人面對(duì)逆境時(shí)的應(yīng)變和適應(yīng)能力的大小。即
—、控制感 表現(xiàn)為一個(gè)人認(rèn)為能否改善這種情況？認(rèn)為自身有多少控制力？ 在面對(duì)逆境時(shí)，AQ較高的人比AQ較低的人認(rèn)為自己能表現(xiàn)出更多的控制力和影
響力，即使當(dāng)情況顯得無(wú)法抵抗，或者超出他們的控制范圍時(shí)，擁有較高AQ的人總是能夠
找到一些他們能夠控制的方面。而AQ較低的人則傾向于作出很少或根本無(wú)法控制的反應(yīng)，
然后放棄。 二、起因和責(zé)任歸屬 表現(xiàn)為一個(gè)人認(rèn)為自己應(yīng)為改善這種狀況承擔(dān)多少責(zé)任？
自身在多大程度上起到了使?fàn)顩r變好的作用？ 承擔(dān)責(zé)任是行事的關(guān)鍵部分。具有較高AQ的人會(huì)主動(dòng)負(fù)責(zé)處理事務(wù)，而不管這件 事是否和他們有關(guān)。相反，AQ較低的人會(huì)避開(kāi)承擔(dān)責(zé)任，并常常感到無(wú)奈和受傷害。
三、影響范圍 這種境況是否會(huì)影響到個(gè)體的生活或工作的的其他領(lǐng)域？
所處的逆境會(huì)在多大程度上波及其他事情？ 有效解決問(wèn)題的基本條件之一是把逆境控制在一定的范圍之內(nèi)。具有較高AQ的 人將挫折和挑戰(zhàn)控制在一定范圍之內(nèi)，不讓它們干擾到自己工作、生活的其他領(lǐng)域。而AQ較低的人則傾向于將逆境認(rèn)定為災(zāi)難性的失敗，并將這種挫折遷移至其他無(wú)關(guān)領(lǐng)域，構(gòu)成 破壞。 四、持續(xù)時(shí)間 個(gè)體認(rèn)為逆境會(huì)持續(xù)多久？ 能夠超越當(dāng)前的困難看待問(wèn)題是維持希望的一項(xiàng)重要能力。具有較高AQ的人擁 有不可思議的能力，既能夠留心過(guò)去的接踵而至的困難，又能夠擁有希望、保持樂(lè)觀。而AQ 較低的人則認(rèn)為逆境會(huì)無(wú)休止的延續(xù)下去，即便事實(shí)并非如此。 通過(guò)對(duì)上述四個(gè)方面的進(jìn)行設(shè)計(jì)測(cè)試，心理醫(yī)生會(huì)大致得出一個(gè)人的逆商值。
現(xiàn)在人們發(fā)現(xiàn)影響逆商的因素主要有兩個(gè)方面先天的遺傳因素和后天的環(huán)境因 素。從后天環(huán)境因素的影響來(lái)講，對(duì)一個(gè)人逆商的培養(yǎng)是累積和持續(xù)的。并且象很多技能 一樣，從小培養(yǎng)會(huì)起到事半功倍的效果。 另外最新的生物學(xué)研究已經(jīng)發(fā)現(xiàn)數(shù)個(gè)可能與逆商有關(guān)的基因，這些基因構(gòu)成了個(gè) 人逆商的先天因素。其中比較明確且重要的一個(gè)基因是NPY基因。該基因編碼的蛋白NPY 是一類重要的神經(jīng)肽，有神經(jīng)遞質(zhì)及神經(jīng)調(diào)節(jié)劑作用，是參與抗壓的一類重要物質(zhì)。NPY能 作用于心腦血管系統(tǒng)，且能增強(qiáng)其它內(nèi)源性血管物質(zhì)及抑制舒血管物質(zhì)的效應(yīng)。其含量與 應(yīng)激反應(yīng)程度有關(guān)，且直接關(guān)系到機(jī)體抵抗外部壓力程度。如果該基因發(fā)生突變，會(huì)影響到 個(gè)人的逆商天賦。對(duì)有基因缺陷的人而言，早期發(fā)現(xiàn)和積極培訓(xùn)對(duì)他的一生尤其重要。
盡管逆商對(duì)于一個(gè)人的發(fā)展很重要，但目前而言，人們很少做這方面的測(cè)試。 一方 面心理測(cè)試在我國(guó)的推廣度偏低。除非在孩子性格出現(xiàn)極端問(wèn)題之后，或者在企業(yè)招聘需 要測(cè)試時(shí)才會(huì)有進(jìn)行針對(duì)逆商的測(cè)試。另外，心理學(xué)測(cè)試一方面對(duì)測(cè)試者要求高，另一方面 對(duì)被測(cè)者的配合程度，精神狀態(tài)有嚴(yán)格要求，否則容易得出錯(cuò)誤結(jié)論。即心理測(cè)試的準(zhǔn)確性 受外界環(huán)境影響較大。孩童的心智尚未發(fā)育成熟，做這類測(cè)試是不可靠的。
在目前社會(huì)普遍注重早教，甚至胎教的情況下，提供一種簡(jiǎn)便而客觀的方法，進(jìn)行 兒童先天逆商遺傳學(xué)特性的測(cè)試是順應(yīng)潮流，很有必要的。

發(fā)明內(nèi)容
為了可以簡(jiǎn)便而客觀地對(duì)兒童逆商進(jìn)行測(cè)試，本發(fā)明提供一種兒童逆商基因檢測(cè) 評(píng)估試劑盒，可以以兒童DNA樣本為測(cè)試樣本，對(duì)兒童逆商的基因進(jìn)行檢測(cè)，從而簡(jiǎn)便快捷 地測(cè)試其逆商遺傳特性。 該試劑盒由DNA抽提試劑，預(yù)混PCR反應(yīng)液，標(biāo)準(zhǔn)陽(yáng)性對(duì)照品，標(biāo)準(zhǔn)陰性對(duì)照品組 成。使用時(shí)以被測(cè)兒童的DNA樣本為檢測(cè)對(duì)象，經(jīng)過(guò)樣本DNA抽提后，使用試劑盒在熒光定 量PCR儀上進(jìn)行反應(yīng)，結(jié)合反應(yīng)結(jié)果進(jìn)行診斷。 上述的預(yù)混PCR反應(yīng)液含有SYBR green I，以及與兒童逆商相關(guān)的NPY基因突變 位點(diǎn)的擴(kuò)增引物；擴(kuò)增NPY基因的引物為正常型的上游引物和包含突變位點(diǎn)下游引物，序 列如下 上游引物F 5-GAT AGG AGC AGC CCA GAC GA-3 20bp，
下游引物RT 5-ACT CCG GCA CCC AGT GTG T-3 19bp，
下游引物RC 5-TCC GGC ACC CAG TGT GC-3 17bp。 上述的兒童逆商基因檢測(cè)評(píng)估試劑盒，所述的陽(yáng)性對(duì)照品有2個(gè)，分別包含如下
4的序列
SEQ1 :GGATTCAGGT GCTTCCTACT CCGGCACCCA GTGGGTTGGT AGTCCTGTTG
GCAGGAGACA AGAATCGTCT GGGCTGCTCC TATCTCTGGC AGGACTAGAC
GGGGCG，
SEQ2 : GGATTCAGGT GCTTCCTACT CCGGCACCCA GTGGGCTGGT AGTCCTGTTG
GCAGGAGACA AGAATCGTCT GGGCTGCTCC TATCTCTGGC AGGACTAGAC
GGGGCG 。
上述的兒童逆商基因檢測(cè)評(píng)估試劑盒，所述的陰性對(duì)照品包含的序列為
SEQ3 : TTCGTTATTG AATCTTGTTT TGGTTCTCTT GTGTGGAATG CATTGTTCTT
GCTTCTCTGG AACTTGGGAT ATGATGACAA AAATACGATA TCTCTAAGGC
TAATTGCTGT GCGGATGAAA TATATTTGCA CGTCAGTCTG ATCCCATTAT
GTATATAACA TTAGGAGTTG GTGCATGCTC。 本發(fā)明的使用方便快捷，不需要兒童本人到場(chǎng)，只需取其DNA樣本，比如口腔樣 本，更有效保護(hù)對(duì)方隱私。不用問(wèn)答形式，減少人為因素對(duì)診斷結(jié)果的影響。可以對(duì)兒童逆 商遺傳特性進(jìn)行簡(jiǎn)便而客觀地檢測(cè)，便于推廣應(yīng)用，有助于在兒童發(fā)育早期輔助判斷其逆 商基因的遺傳特性。


圖1，圖2，圖3，圖4，圖5，圖6為熒光定量PCR儀上的擴(kuò)增曲線圖。各圖上方的 DeltaRnvs Cycle,是指A Rn隨循環(huán)變化的對(duì)數(shù)擴(kuò)增圖譜；A Rn (Delta Rn)是指在給定的 一組PCR條件下所生成熒光信號(hào)的對(duì)數(shù)值。該圖的橫坐標(biāo)表示循環(huán)數(shù)(Cycle Number)，縱 坐標(biāo)表示熒光值(Delta Rn)。橫線表示熒光域值，曲線與熒光域值線的交叉點(diǎn)所對(duì)應(yīng)的循 環(huán)數(shù)即為Ct值。 圖1、圖2、圖3中橫線3表示熒光域值；曲線1表示為擴(kuò)增NPY基因的引物對(duì)F+RT， 擴(kuò)增樣本所生成的擴(kuò)增曲線；曲線2為擴(kuò)增NPY基因的引物對(duì)F+RC，這對(duì)引物擴(kuò)增樣本所 生成的擴(kuò)增曲線。 圖1表示NPY基因TT純合型樣本的產(chǎn)物擴(kuò)增曲線圖曲線1與熒光域值線的交叉 點(diǎn)表示達(dá)到域值的Ct循環(huán)數(shù)值為Cl，曲線2與熒光域值線的交叉點(diǎn)表示達(dá)到域值的Ct循 環(huán)數(shù)值為C2。 圖2表示NPY基因TC雜合型樣本的產(chǎn)物擴(kuò)增曲線圖曲線1與熒光域值線的交叉 點(diǎn)表示達(dá)到域值的Ct循環(huán)數(shù)值為C3，曲線2與熒光域值線的交叉點(diǎn)表示達(dá)到域值的Ct循 環(huán)數(shù)值為C4。 圖3表示NPY基因CC純合型樣本的產(chǎn)物擴(kuò)增曲線圖曲線2與熒光域值線的交叉 點(diǎn)表示達(dá)到域值的Ct循環(huán)數(shù)值為C5，曲線1與熒光域值線的交叉點(diǎn)表示達(dá)到域值的Ct循 環(huán)數(shù)值為C6。具體實(shí)施例 下面結(jié)合具體實(shí)施例，進(jìn)一步闡述本發(fā)明。 應(yīng)當(dāng)理解，下面實(shí)施例中未說(shuō)明的常規(guī)條件和方法，通常按照所屬領(lǐng)域?qū)嶒?yàn)人員 常規(guī)采用方法如薩姆布魯克和拉塞爾主編的《分子克隆實(shí)驗(yàn)指南》第三版，或按照制造廠 商所建議的步驟和條件。
實(shí)施例1 : 試劑盒的制備。包括(1)探針的準(zhǔn)備；(2)DNA抽提試劑；(3)預(yù)混反應(yīng)液；(4)標(biāo) 準(zhǔn)陽(yáng)性對(duì)照；(5)標(biāo)準(zhǔn)陰性對(duì)照。
(1)探針的準(zhǔn)備； 由通常的核苷酸引物合成儀合成。序列如下
上游引物F 5-GAT AGG AGC AGC CCA GAC GA-3 20bp，
下游引物RT 5-ACT CCG GCA CCC AGT GTG T-3 19bp，
下游引物RC 5-TCC GGC ACC CAG TGT GC-3 17bp。 使用前按每OD引物稀釋為10Oiimol/L(即lOOpmol/iU)濃度的加水量，開(kāi)啟瓶 蓋溶解之前最好在3000-4000轉(zhuǎn)/分鐘的轉(zhuǎn)速下離心1分鐘，防止開(kāi)蓋時(shí)引物散失。使用 前，將濃溶液稀釋成工作液10pmol/ml后進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。
(2)DNA抽提試劑
試劑名稱成分體積濃度
緩沖液GASDS100 ml0.5 mmol/L
緩沖液GBNAOH100 ml50 mmol/L
緩沖液GD碳酸鈉-丙酮畫(huà)ml1 mmol/L
緩沖液GW無(wú)水乙醇謂ml原液
洗脫液Tris鹽50 ml10 mmol/L (3)預(yù)混PCR反應(yīng)液 預(yù)混反應(yīng)液包括2種，每種內(nèi)含一對(duì)上下游擴(kuò)增引物，各對(duì)應(yīng)一個(gè)基因型。 按lml配比量計(jì)算，共同的成分配制為100 ii M的dNTP， 20 ii 1 ;500U/ ii 1 Taq DNA Polymerase20ii 1 ;2XQuant One St印SYBR 1300 ii 1 ;10 ii M的上游弓l物50 ii 1 ;10 ii M的 下游引物50 ii 1 ;RNase-free ddH20 860 ii 1。
管l的l對(duì)引物為 上游引物F 5-GAT AGG AGC AGC CCA GAC GA-3 20bp，
下游引物RT 5-ACT CCG GCA CCC AGT GTG T-3 19bp。
管2的1對(duì)引物為 上游引物F 5-GAT AGG AGC AGC CCA GAC GA-3 20bp，
下游引物RC 5-TCC GGC ACC CAG TGT GC-3 17bp。 [OO72] (4)標(biāo)準(zhǔn)陽(yáng)性對(duì)照
6
標(biāo)準(zhǔn)陽(yáng)性模板是含有C0MT和MCPH1基因中含突變核苷酸片段構(gòu)成的Pucl8_T重 組質(zhì)粒，該重組質(zhì)料轉(zhuǎn)化大腸桿菌DH5 a增殖后用堿裂解法提取，經(jīng)DNA純化試劑盒純化， 用分光光度計(jì)測(cè)A260定量并稀釋到1(fCopy/ia，-2(TC保存。貯存存為109Copy/yl，使用 濃度為105COpy/iil。 標(biāo)準(zhǔn)陽(yáng)性模板提供2種，每種濃度為105Copy/ia。序列如下
SEQ1 :GGATTCAGGT GCTTCCTACT CCGGCACCCA GTGGGTTGGT AGTCCTGTTG
GCAGGAGACA AGAATCGTCT GGGCTGCTCC TATCTCTGGC AGGACTAGAC
GGGGCG，
SEQ2 :GGATTCAGGT GCTTCCTACT CCGGCACCCA GTGGGCTGGT AGTCCTGTTG
GCAGGAGACA AGAATCGTCT GGGCTGCTCC TATCTCTGGC AGGACTAGAC
GGGGCG 。
(5)標(biāo)準(zhǔn)陰性對(duì)照 標(biāo)準(zhǔn)陰性模板是含有擬南芥基因片斷180個(gè)核苷酸構(gòu)成的Pucl8-T重組質(zhì)粒。該 重組質(zhì)料轉(zhuǎn)化大腸桿菌DH5 a增殖后用堿裂解法提取，經(jīng)DNA純化試劑盒純化，用分光光 度計(jì)測(cè)A260定量并稀釋到109Copy/ia， -2(rC保存。貯存存為109Copy/yl，使用濃度為 105Copy/iil。序列如下
SEQ3 :TTCGTTATTG AATCTTGTTT TGGTTCTCTT GTGTGGAATG CATTGTTCTT
GCTTCTCTGG AACTTGGGAT ATGATGACAA AAATACGATA TCTCTAAGGC
TAATTGCTGT GCGGATGAAA TATATTTGCA CGTCAGTCTG ATCCCATTAT
GTATATAACA TTAGGAGTTG GTGCATGCTC。
實(shí)施例2 :試劑盒的使用
(1)樣本的制備 取樣方式使用棉簽在面頰內(nèi)擦拭10次。
注意為了保證樣本不被食物或者飲料污染，取樣前30分鐘內(nèi)請(qǐng)勿進(jìn)食和飲水。
a)處理材料將在面頰內(nèi)擦拭過(guò)的棉簽轉(zhuǎn)置于2ml離心管中，用剪刀將棉簽部分 從其桿上剪下，加入400 ii 1緩沖液GA。 b)加入20 ill蛋白酶K溶液，渦旋10秒混勻，56t:放置60分鐘，其間每15分鐘渦
旋混勻數(shù)次。 c)加入400 ii 1緩沖液GB，充分顛倒混勻，7(TC放置10分鐘，此時(shí)溶液應(yīng)變清亮， 簡(jiǎn)短離心以去除管蓋內(nèi)壁的液滴。 d)加200 1無(wú)水乙醇，充分顛倒混勻，簡(jiǎn)短離心以去除管蓋內(nèi)壁的液滴。
e)將上一步所得溶液和絮狀沉淀都加入一個(gè)吸附柱CR中(吸附柱CR放入收集管 中)，12， OOOrpm( 13， 400 Xg)離心30秒，倒掉收集管中的廢液，將吸附柱CR放回收集管 中。 f)向吸附柱CR中加入500 ii 1緩沖液GD， 12， OOOrpm( 13， 400Xg)離心30秒， 倒掉收集管中的廢液，將吸附柱CR放回收集管中。
7
g)向吸附柱CR中加入700 ii 1漂洗液PW， 12， OOOrpm( 13， 400Xg)離心30秒， 倒掉收集管中的廢液，將吸附柱CR放回收集管。h)向吸附柱CR中加入500iil漂洗液PW，12，000rpm( 13，400Xg)離心30秒，
倒掉收集管中的廢液。 i)將吸附柱CR放回收集管中，12，000rpm( 13，400Xg)離心2分鐘，倒掉廢液。 將吸附柱CR室溫放置數(shù)分鐘，以徹底晾干吸附材料中殘余的漂洗。 j)將吸附柱CR轉(zhuǎn)入一個(gè)干凈的離心管中，向吸附膜中間位置懸空滴加20-50 1 洗脫緩沖液TB，室溫放置2-5分鐘，12， OOOrpm( 13， 400Xg)離心2分鐘。重復(fù)一次。 [O104] (2)實(shí)驗(yàn)過(guò)程 a)按樣品數(shù)11(樣品數(shù)=待測(cè)樣本數(shù)+陰性對(duì)照1個(gè)+陽(yáng)性對(duì)照1個(gè))取預(yù)混PCR 反應(yīng)液每管23 1分裝于反應(yīng)管中。 b)將上述處理好的待測(cè)樣本和陰性、陽(yáng)性對(duì)照(務(wù)必振蕩混勻數(shù)秒)各取2ul分 別加入反應(yīng)管中，混勻，低速離心數(shù)秒，立即進(jìn)行PCR擴(kuò)增反應(yīng)。
c)PCR條件
95°C lOsec (95°C 15sec，60。C 60sec) X40個(gè)循環(huán) (3)結(jié)果分析與判斷 a)定量檢測(cè)SNP的判斷標(biāo)準(zhǔn) 兩曲線的Ct值之差的絕對(duì)值記為I ACtl，當(dāng)I ACt|《l，判斷為雜合型；當(dāng)
ACt I > 5，判斷為純合型。
如圖，圖1中I ACt| > 5，表示該樣本為NPY基因TT純合型樣本。圖2中，
ACt|《l，表示該樣本為NPY基因TC雜合型樣本。圖3中，I ACt| > 5，表示該樣本為 NPY基因CC純合型樣本。
b)結(jié)果分析
基因型診斷結(jié)果
NPY CC基因檢測(cè)結(jié)果顯示兒童逆商低發(fā)生的機(jī)率比較大。
NPY TT/TC基因檢測(cè)結(jié)果顯示兒童逆商低發(fā)生的機(jī)率較小。序列表一〈110〉上海裕隆生物科技有限公司
〈120〉 一種兒童逆商基因檢測(cè)評(píng)估試劑盒〈160>6〈210>1〈211>20〈212>DNA〈213〉人工序列
8
〈220〉 〈223〉根據(jù)核酸堿基配對(duì)原理和基因芯片雜交條件設(shè)計(jì)，以用作兒童逆商基因檢 測(cè)評(píng)估試劑盒中檢測(cè)NPY基因序列相關(guān)突變的DNA引物，命名為上游引物F。
〈400>1 gataggagca gcccagacga 20 〈210>2 〈211>19 〈212>DNA 〈213>人工序列 〈220〉 〈223〉根據(jù)核酸堿基配對(duì)原理和基因芯片雜交條件設(shè)計(jì)，以用作兒童逆商基因檢 測(cè)評(píng)估試劑盒中檢測(cè)NPY基因序列相關(guān)突變的DNA引物，命名為下游引物RT。
〈400>2 actccggcac ccagtgtgt 19 〈210>3 〈211>17 〈212>DNA 〈213>人工序列 〈220〉 〈223〉根據(jù)核酸堿基配對(duì)原理和基因芯片雜交條件設(shè)計(jì)，以用作兒童逆商基因檢 測(cè)評(píng)估試劑盒中檢測(cè)NPY基因序列相關(guān)突變的DNA引物，命名為下游引物RC?！?00>3tccggcacccagtgtgc17〈210>4〈211>106〈212>DNA〈213〉人屬(Homo)〈400>4ggattcaggtgcttcctectccggcacccagtgggttggtagtcctgttg gcaggagaca60agaatcgtctgggctgctcctetctctggcaggactegacggggcg106〈210>5〈211>106〈212>DNA〈213〉人屬(Homo)〈400>5ggattcaggtgcttcctectccggcacccagtgggctggtagtcctgttg gcaggagaca60agaatcgtctgggctgctcctetctctggcaggactegacggggcg106〈210>6〈211>180
〈212>DNA 〈213>擬南芥(Arabidopsis thaliana) 〈400>6 ttcgttattg aatcttgttt tggttctctt gtgtggaatg cattgttctt gcttctctgg 60 朋cttgggat 3tgatgac朋3朋tecgate tctcteaggc teattgctgt gcggatga朋 120 tetetttgca cgtcagtctg atcccattet gteteteaca tteggagttg gtgcatgctc 180
權(quán)利要求
一種兒童逆商基因檢測(cè)評(píng)估試劑盒，其特征在于由DNA抽提試劑，預(yù)混PCR反應(yīng)液，標(biāo)準(zhǔn)陽(yáng)性對(duì)照品，標(biāo)準(zhǔn)陰性對(duì)照品組成；所述的預(yù)混PCR反應(yīng)液含有SYBR green I，以及擴(kuò)增與兒童逆商相關(guān)的NPY基因突變位點(diǎn)的擴(kuò)增引物；擴(kuò)增引物為正常的上游引物和包含突變位點(diǎn)下游引物，序列如下上游引物F 5-GAT AGG AGC AGC CCA GAC GA-320bp，下游引物RT 5-ACT CCG GCA CCC AGT GTG T-3 19bp，下游引物RC 5-TCC GGC ACC CAG TGT GC-317bp。
2. 如權(quán)利要求1所述的兒童逆商基因檢測(cè)評(píng)估試劑盒，其特征在于所述的陽(yáng)性對(duì)照 品有2個(gè)，分別包含如下的序列SEQ1 :GGATTCAGGT GCTTCCTACT CCGGCACCCA GTGGGTTGGT AGTCCTGTTG GCAGGAGACA AGAATCGTCT GGGCTGCTCC TATCTCTGGC AGGACTAGAC GGGGCG ; SEQ2 :GGATTCAGGT GCTTCCTACT CCGGCACCCA GTGGGCTGGT AGTCCTGTTG GCAGGAGACAAGAATCGTCT GGGCTGCTCC TATCTCTGGC AGGACTAGAC GGGGCG。
3. 如權(quán)利要求1或2所述的兒童逆商基因檢測(cè)評(píng)估試劑盒，其特征在于所述的陰性對(duì)照品包含的序列為SEQ3 :TTCGTTATTG AATCTTGTTTGCTTCTCTGG AACTTGGGATTAATTGCTGT GCGGATGAAAGTATATAACA TTAGGAGTTGTGGTTCTCTT GTGTGGAATG CATTGTTCTTATGATGACAA AAATACGATA TCTCTAAGGCTATATTTGCA CGTCAGTCTG ATCCCATTAT GTGCATGCTC。
全文摘要
一種用于兒童逆商基因檢測(cè)評(píng)估試劑盒，可以克服傳統(tǒng)兒童逆商檢測(cè)方法在原理和操作上的局限性。本試劑盒由DNA抽提試劑，預(yù)混PCR反應(yīng)液，標(biāo)準(zhǔn)陽(yáng)性對(duì)照品，標(biāo)準(zhǔn)陰性對(duì)照品組成。使用時(shí)以被測(cè)兒童的DNA樣本為檢測(cè)對(duì)象，經(jīng)過(guò)樣本DNA抽提后，使用試劑盒在熒光定量PCR儀上進(jìn)行反應(yīng)，結(jié)合反應(yīng)結(jié)果進(jìn)行診斷。本發(fā)明提供的測(cè)試方法方便快捷，只需采用DNA樣本，更有效保護(hù)對(duì)方隱私。避免心理測(cè)試中人為因素對(duì)診斷結(jié)果的影響?？梢詫?duì)兒童逆商遺傳特性進(jìn)行簡(jiǎn)便而客觀地檢測(cè)，便于推廣應(yīng)用，有助于在兒童發(fā)育早期輔助判斷其逆商相關(guān)的特性。
文檔編號(hào)C12Q1/68GK101724688SQ20081020122
公開(kāi)日2010年6月9日 申請(qǐng)日期2008年10月15日 優(yōu)先權(quán)日2008年10月15日
發(fā)明者汪寧梅, 穆宇豪, 穆海東, 黎颯 申請(qǐng)人:上海裕隆生物科技有限公司