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      計測具有核酸的微粒的方法和裝置的制作方法

      文檔序號:570426閱讀:242來源:國知局
      專利名稱:計測具有核酸的微粒的方法和裝置的制作方法
      技術(shù)領(lǐng)域
      本發(fā)明涉及用于掌握醫(yī)院、食品廠的空氣、墻面、地面、或者手術(shù)、食品制造中使用
      的器具 衣服因微生物產(chǎn)生的污染狀況等的計測具有核酸的微粒的方法和裝置。
      背景技術(shù)
      —直以來,需要調(diào)查如醫(yī)院、食品廠等,特別是在衛(wèi)生方面需要注意的場所的空氣 中、墻面和地面因微生物產(chǎn)生的污染狀況,以及手術(shù)和食品制造中使用的器具和衣服因微 生物產(chǎn)生的污染狀況(非專利文獻l)。在現(xiàn)有的方法中,在固定有大量培養(yǎng)基和細胞的膜 上涂布試樣溶液,微生物形成菌落,另外使病毒產(chǎn)生展開為膜狀的細胞的缺損,對菌落數(shù)或 缺損數(shù)進行計數(shù)來評價(非專利文獻2)。 另一方面,由于近年來的技術(shù)開發(fā)的進步,一個分子DNA的操作和計測技術(shù)在發(fā) 展,對一個分子DNA進行熒光染色,就能夠明顯地觀察(非專利文獻3)。使用該技術(shù),來自 細胞的DNA分子的取出,DNA分子向基板展開固定,再使熒光染色的限制酶附著在展開固定 的DNA上,由熒光顯微鏡制成限制酶酶切圖等都成為可能(專利文獻1、非專利文獻4)。
      專利文獻1 :特開2003-200400號公報 非專利文獻1 :柳宇事務(wù)所匕'& (二扭(j" 3 "、才工7 口 '/ A O舉動i子O制御 方法,夕'J一^于夕乂口夕一 vol 17, No. 5, 44-47, 2007 非專利文獻2 :石松維世浮游微生物粒子^捕集i検出,夕'J 一 >于夕爿口 - 一 vol 17, No.5,48-51,2007 非專利文獻3 :Morikawa K. ,and Yanagida M. , J. Biochem. ,89, pp. 693-696, 1981
      非專利文獻4 :A. Bensimon, A. Simon, A. Chiffaudel, V. Croquette, F. Heslot, D.Bensimon,"Alignment and sensitive detection of DNA by amoving interface", Science, Vol.265(5181) , pp2096_2098, 199
      發(fā)明內(nèi)容
      本發(fā)明通過將可視化一分子的方法應(yīng)用于檢測具有核酸的顆粒,能夠迅速且準確 地對環(huán)境中的微生物進行計數(shù)。 現(xiàn)有技術(shù)中,通過由培養(yǎng)產(chǎn)生的菌落或細胞缺損,進行因環(huán)境中的微生物產(chǎn)生的 污染狀況的評價。但是,細胞的培養(yǎng)、和使細胞感染病毒引起細胞缺損都需要數(shù)天的時間。 使用熒光色素,將細胞內(nèi)的DNA染色而進行觀察的方法,其細胞膜的色素透過性不高,需要 10小時左右以上的染色處理時間(非專利文獻2)。此時,細胞內(nèi)小器官大多同時被熒光染 色、成為誤差的原因。另外,如果為了縮短處理時間、破壞細胞膜進行熒光染色,則核酸以外 的生物體高分子也被染色、成為誤差的原因。 鑒于上述情況,本發(fā)明人反復深入研究,結(jié)果完成以下的發(fā)明。 第一發(fā)明涉及的計測具有核酸的微粒的方法,其特征在于,包括下述工序(l)使
      具有核酸的微粒附著在微粒附著用部件的微粒附著工序;(2)通過放電,破壞已附著的微粒的膜的膜破壞工序;(3)使上述微粒在凝膠厚度方向進行電泳,使微粒中的核酸從負極 側(cè)移到正極側(cè),并使核酸附著在核酸檢測用部件表面的電泳工序;(4)對上述核酸檢測用 部件的表面進行熒光染色,計測核酸的濃度的核酸計測工序。 在本發(fā)明中,在上述微粒附著工序中,優(yōu)選在電暈放電電極的光滑的電極側(cè)表面 放置上述微粒附著用部件,使在空中浮游的具有核酸的微粒附著在上述微粒附著用部件的 表面。 另外,在上述膜破壞工序中,優(yōu)選使用在相對電極間插入有絕緣板的電極系,在上 述電極的間隙插入上述微粒附著用部件,向上述電極間施加交變電壓,由此破壞微粒的膜。
      另外,在上述核酸檢測用部件中,優(yōu)選核酸進行電泳的面具有正的表面電荷。
      第二發(fā)明涉及的計測具有核酸的微粒的系統(tǒng),其特征在于,具有使具有核酸的微 粒的附著微粒附著用部件;使具有核酸的微粒附著在該微粒附著用部件的表面的微粒附著 裝置;膜破壞裝置,通過放電,破壞附著在上述微粒附著用部件上的上述微粒的膜;核酸檢 測用部件,具有電荷中和劑的帶和在該帶的一面?zhèn)仍O(shè)置的凝膠;電泳裝置,使附著在上述微 粒附著用部件表面的核酸,通過上述核酸檢測用部件的凝膠進行電泳,向上述帶側(cè)移動;和 核酸檢出裝置,在除去上述核酸檢測用部件的凝膠的狀態(tài)下,檢測上述帶表面的核酸。
      在本發(fā)明中,優(yōu)選上述微粒附著裝置具有設(shè)置有針電極和平板電極的電暈放電電 極,在上述平板電極上載置有上述微粒附著用部件的狀態(tài)下,使上述微粒附著在表面。
      另外,優(yōu)選上述膜破壞裝置具有相對的電極、插在該電極之間的絕緣板、和用于插 入上述微粒附著用部件的部件安裝空間,向上述電極間施加交變電壓,由此破壞上述膜。
      另外,優(yōu)選上述核酸檢測用部件的帶具有正的表面電荷。 另外,優(yōu)選上述核酸檢測用部件兼用作上述微粒附著用部件,在使具有核酸的微 粒附著在上述凝膠表面的狀態(tài)下,進行微粒的膜破壞操作。 所謂核酸包括RNA或DNA中的任意一個。另外,可以是一根鏈或二根鏈中的任意 一種,也包括環(huán)狀或直鏈狀中的任意一種。 所謂具有核酸的微粒,意指具有核酸的物質(zhì),例如,包括微生物(包括細菌、菌類、
      酵母、霉菌等)、病毒、類病毒等。 發(fā)明效果 為了調(diào)查具有核酸的細菌和病毒顆粒等微粒的濃度,必須有效地破壞細胞膜和蛋 白質(zhì)的包膜,取出內(nèi)部所含的核酸(DNA、RNA),只對該核酸進行熒光染色、并計數(shù)。為了從 細菌和病毒中迅速取出核酸,在本發(fā)明中使用放電。特別是使用在相對電極間插入有絕緣 板的電極系進行放電破壞,由此可以在數(shù)分鐘以內(nèi)破壞細胞、取出核酸。相比于破壞細胞膜 的酶反應(yīng)等,能夠在極短時間內(nèi)進行。 另外,本發(fā)明的目的在于以短時間進行具有核酸的微粒的濃度計測。如果使用上
      述放電破壞,就可以將附著在微粒附著用部件上的微粒在其場所破壞?,F(xiàn)有技術(shù)中,具有核
      酸的微粒一旦移到溶液中,為了進行核酸提取操作,就需要相當量的試樣。因此,為了收集
      大量的試樣,就需要長時間的微粒捕集操作,不能迅速地進行濃度計數(shù)。 另一方面,根據(jù)本發(fā)明,從在微粒附著用部件表面被破壞的細胞和病毒等擴散到
      表面的核酸,通過涂布在微粒附著用部件表面的表面活性劑等電荷中和劑,與組蛋白等蛋
      白質(zhì)分離。S卩,為了通過放電破壞從微粒取出核酸后、與其它構(gòu)成分子區(qū)別,通過凝膠電泳分離核酸。為了縮短電泳時間,需要盡量縮短泳動距離。在本發(fā)明的核酸檢測用部件中,在 帶的表面使用具有薄凝膠層的膜,在凝膠層的厚度方向使核酸進行電泳,由此從其它生物 體高分子分離。通過凝膠層電泳到帶上的核酸附著在帶表面。此時,因為核酸帶有負電荷, 所以,如果使用具有正極性表面電荷的帶,就使分離的核酸確實地附著在帶上、并保持。
      進行電泳后,從帶上剝離凝膠。接著,對附著在帶上的核酸進行熒光染色。在熒光 染色中,可以使用用于對Y0Y0和溴化乙錠、DAPI等、DNA和RNA進行熒光染色的一般色素。 為了將電泳后的核酸確實地保持在表面上,希望使用具有正表面電荷的材料作為帶。大多 數(shù)情況下,從一個具有核酸的微粒提取的核酸數(shù)量為多個,但因為其分布范圍大致成為微 粒直徑的數(shù)倍以內(nèi),所以通過圖像處理鑒定該群,能夠作為一個微粒的核酸群進行計數(shù)。
      為了使微粒附著在微粒附著用部件的表面,對空氣中浮游的微粒使用電暈放電。 由此,可以使微粒高效地電集塵在膜表面。另外,根據(jù)需要、調(diào)節(jié)電暈放電電壓或?qū)腚姇?放電場的包括微粒的空氣流量,控制具有核酸的微粒的附著密度,由此能夠提高微粒的計 數(shù)精度。 另外,成為使微粒附著用部件和核酸檢測用部件兼用的構(gòu)成,如果由帶和設(shè)置在 該帶的一面?zhèn)壬系哪z構(gòu)成核酸檢測用部件, 一邊連續(xù)供給核酸檢測用部件, 一邊進行微 粒附著工序、膜破壞工序、電泳工序和核酸計測工序,因此可以成為非常迅速進行測定的系 統(tǒng)。


      圖1是用于說明本實施方式的概要的工序圖。 圖2是捕捉含有核酸的微粒的核酸檢測用部件的側(cè)截面圖。 圖3是電暈放電裝置的概略圖。 圖4是用于破壞微粒膜的膜破壞裝置的概略圖。 圖5是用于使核酸從凝膠表面移到帶上的電泳裝置的概略圖。 圖6是通過電暈放電、捕集具有核酸的微粒的微粒附著裝置的概略圖。 圖7是表示通過電暈放電捕集的微粒中所含的活菌數(shù)的測定結(jié)果圖表。圖中的白
      色圖形表示將培養(yǎng)基作為正極側(cè)(positive)時的結(jié)果,黑色圖形表示將培養(yǎng)基作為負極
      側(cè)(negative)時的結(jié)果。 圖8是表示對體內(nèi)含有熒光蛋白質(zhì)GFP的大腸菌進行無聲放電處理時的結(jié)果的照 片。通過實施放電處理,可知大腸菌的膜被破壞,細胞內(nèi)所含的GFP擴散、熒光強度極大衰 減。 圖9是涂布在各種過濾器表面的DNA的熒光照片。 圖10是模式地表示使微粒附著用部件和核酸檢測用部件粘合,使DNA進行電泳時 的狀態(tài)的側(cè)截面圖。 圖11是在電泳處理后、被轉(zhuǎn)送到核酸檢測用部件的帶上的DNA的照片。虛線四角 T表示滴加標準量DNA的區(qū)域,虛線圓S表示進行電泳的DNA的區(qū)域。另外,T和S內(nèi)部的 數(shù)值表示DNA量。 圖12是附著在過濾器上的DNA的熒光顯微鏡照片圖像。
      圖13是表示計數(shù)具有核酸的微粒的系統(tǒng)的概要圖。
      5
      符號說明 1...瓊脂糖凝膠、2...具有正電荷的塑料膜、3,3'...針電極、5...放電電極、 6.絕緣板、9, 19.接地電極、13.培養(yǎng)基(平板狀接地電極)、20.核酸、21.微粒、 22...微粒附著用部件、23...核酸檢測用部件、24...微粒附著裝置、25...膜破壞裝置、 26...部件安裝空間、27...電泳裝置、28...核酸檢測裝置
      具體實施例方式
      圖l是表示用于說明本實施方式的概要的工序圖。在該工序圖中,微粒附著用部 件22和核酸檢測用部件23為不同的構(gòu)成。具有核酸20的微粒21從圖示左上側(cè)沿著箭頭 方向進行工序,從右上側(cè)至右下側(cè)、再至左下側(cè)的工序,計測核酸20。 首先,在左上的微粒附著工序中,使具有核酸的微粒21附著在微粒附著用部件22 的表面。這樣,附著了微粒21的微粒附著用部件22進入下面的膜破壞工序(圖示右上)。
      接著,關(guān)于破壞了膜的微粒,使用凝膠1,在其厚度方向進行電泳工序,使核酸20 從負極側(cè)移到正極側(cè)。這樣,核酸20移到核酸檢測用部件23的帶2的表面(圖示右下)。
      最后,除去核酸檢測用部件23的凝膠l,對附著在帶2表面的核酸進行熒光染色、 計測核酸20的濃度(核酸計測工序)。 接著,說明各工序的詳細情況。在圖2中表示用于使微粒21進行電泳的核酸檢測 用部件23的側(cè)截面圖。在核酸檢測用部件23中,以氨基(NH2+)進行表面處理、使得具有正 極性表面電荷的無紡布制成的塑料帶2作為基板,在其表面具有以lmm左右以下的厚度涂 布瓊脂糖凝膠l而形成的膜。使用該凝膠1,使具有核酸的微粒21進行電泳。事先將形成 該帶狀膜的核酸檢測用部件23放入卡盤中保管,可以連續(xù)供給。例如,帶的寬度可以為lmm 至5mm左右。該核酸檢測用部件23可以兼用作微粒附著用部件22。 S卩,使微粒21附著在 瓊脂糖凝膠1的表面上后,使微粒21的膜破壞,接著進行電泳,由此使核酸20在帶2的方 向移動,附著在其表面上。 為了使空氣中浮游的具有核酸的微粒附著在帶狀膜上,可以使用圖3所示的電暈 放電裝置(微粒附著裝置)24。在電暈放電裝置24中設(shè)置有針狀的高電壓電極3和平板狀 接地電極9。以約5mm至10mm左右的間隔設(shè)置兩個電極3、9的距離,向平板狀接地電極9 的表面供給微粒附著用部件22。 為了使附著在墻壁和衣服等上的具有核酸的微粒附著,使用帶狀的核酸檢測用部
      件23,從卡盤拉出核酸檢測用部件23,使凝膠1的表面直接接觸墻壁和衣服等?;蛘?,另外
      準備直徑數(shù)mm左右的膜狀微粒附著用部件22 (或兼用作微粒附著用部件22的核酸檢測用
      部件23),使其與墻壁和衣服等接觸,此后進行核酸提取和熒光染色等的后處理。 在圖4中表示可以在膜破壞工序中使用的膜破壞裝置25。膜破壞裝置25具有相
      對的無聲放電電極5、19、插在兩電極間的絕緣板6、以及用于插入微粒附著用部件22的部
      件安裝空間26。兩放電電極5、19制成平行平板電極,通過在電極的一側(cè)設(shè)置絕緣板6,使
      部件安裝空間26的空隙為2mm左右以下。上側(cè)電極5由不銹鋼篩網(wǎng)構(gòu)成,下側(cè)電極19是
      接地電極。電極5與高壓交變電源4連接。另外,在絕緣板6和電極9之間夾持安裝有規(guī)
      定厚度的隔板7。在其上施加例如30kHz、10kV左右的交變電壓,發(fā)生無聲放電。 使具有核酸20的微粒21附著在微粒附著用部件22上后,在部件安裝空間26中插入微粒附著用部件22,通過無聲放電破壞微粒21的膜。 接著,在破壞附著在微粒附著用部件22表面的具有核酸20的微粒21的膜表面, 加入SDS等表面活性劑,提取核酸20。此后,使用圖5所示的電泳裝置27,進行核酸20的 電泳。在電泳裝置27中設(shè)置有加入具有導電性的水溶液(電解質(zhì)液10)的容器30 ;以及 在該容器30底面和上面設(shè)置的一對正負電極28、29。在兩電極28、29之間插入核酸檢測用 部件23,進行核酸20的電泳。以核酸檢測用部件23的凝膠1側(cè)成為負、帶2側(cè)成為正的方 式,在凝膠1的厚度方向進行電泳,使核酸20從凝膠1表面電泳到帶2上。電泳需要的時 間通常為數(shù)分鐘左右。 進行電泳后,從電泳裝置27取出核酸檢測用部件23,用刮刀剝?nèi)∧z1,作成附著 有核酸20的帶2。此后,在加入了熒光染色液的容器中通過帶2,對附著的核酸20進行熒 光染色。 此后,發(fā)出熒光地向帶2照射激發(fā)光,對發(fā)出熒光的核酸20進行計數(shù)。
      實施例(通過電暈放電進行具有核酸的微粒的捕集) 使用具有圖6所示的電暈放電電極的微粒附著裝置,捕集空氣中浮游的細菌。該 裝置設(shè)置有電暈放電用針狀高壓電極3'、作為平板狀接地電極(集塵電極)的培養(yǎng)基13和 高壓直流電源15。另外,符號13A是用于將培養(yǎng)基13接地的電極。在裝置的上面?zhèn)仍O(shè)置有 風扇12。通過該風扇12的驅(qū)動,室內(nèi)的空氣從上面?zhèn)葘?符號11)、從下面?zhèn)扰懦?符 號14)。在空氣通過兩電極3'、13之間時,具有核酸的微粒被培養(yǎng)基13捕集。
      圖7表示使用該裝置捕集微粒時的菌落數(shù)的計數(shù)結(jié)果。用風扇12向下方以每秒 18升送入室內(nèi)空氣,在銀制的針電極3'和培養(yǎng)基13之間發(fā)生電暈放電。使培養(yǎng)基13側(cè)成 為正極(positive)或負極(negative),使電壓從0kV變化到30kV,進行10分鐘電暈放電 后,計數(shù)將培養(yǎng)基13培養(yǎng)2天時所確認的菌落數(shù)。 其結(jié)果,(1)通過10分鐘的電暈放電,無論使用正極或負極哪一種時,被捕集的菌 數(shù)都增加到IO倍以上(負極是22倍、正極是47倍),和(2)相比于使用負極電暈放電時, 使用正極電暈放電,能夠確認提高了活菌的捕集效率。可以認為正極的電暈放電的菌落數(shù) 多的情形,是因為銀制的正極中大氣壓電暈放電能夠抑制對細菌有害的臭氧發(fā)生。
      (通過無聲放電破壞菌) 圖8表示破壞膜后的大腸菌照片。為了發(fā)出熒光,使用導入了形成來自水母的熒 光蛋白質(zhì)GFP的基因的大腸菌。在圖4所示的具有無聲放電電極5、19的膜破壞裝置25中, 安置涂布了該大腸菌的微粒附著用部件22,施加30kHz、25kVpp的交流電壓。如果大腸菌的 細胞膜被破壞,細胞內(nèi)所含的GFP發(fā)生擴散,所以可以確認熒光強度大大衰減。從將用于比 較的未進行無聲放電處理的大腸菌與以無聲放電破壞的大腸菌混合的樣品的熒光照片,也 可以確認通過無聲放電處理,熒光強度大大衰減。通常,在大腸菌的細胞膜的破壞中使用酶 反應(yīng),但因為該處理需要幾小時,所以通過無聲放電破壞菌具有能夠在極短時間內(nèi)進行的 優(yōu)點。 (DNA的電泳) 圖9是在微粒附著用部件22的表面涂布DNA分子群時的熒光照片。如圖10模式 地表示,在該微粒附著用部件22中涂布DNA分子的面一側(cè)(圖示下面?zhèn)?,使核酸檢測用部件23粘合,通過電泳裝置27進行DNA的電泳。 圖11是電泳后對核酸檢測用部件23的帶2進行熒光染色的結(jié)果。從由染色產(chǎn)生 的DNA量的測定,可以確認約30至50%的DNA分子從微粒附著用部件22通過電泳移到帶 2上并附著。圖12是附著在帶2上的DNA的熒光顯微鏡照片。表示能夠識別各個DNA分 子。另外,電泳時間是幾分鐘左右,表示能夠通過薄凝膠、取樣DNA。
      (計數(shù)具有核酸的微粒的系統(tǒng)) 圖13表示本實施方式的計數(shù)系統(tǒng)的概要。在該系統(tǒng)中,微粒附著用部件和核酸檢 測用部件23成為兼用的構(gòu)成。核酸檢測用部件23連續(xù)成帶狀而制造,從圖示左側(cè)向右側(cè) 以規(guī)定速度移動,由此經(jīng)過微粒附著工序(A)、膜破壞工序(B)、電泳工序(C)和核酸計測工 序(D)。 S卩,核酸檢測用部件23在凝膠1向上的狀態(tài)下通過電暈放電裝置24。此時,在凝 膠1的表面附著具有核酸的微粒21。接著,核酸檢測用部件23如果通過膜破壞裝置25的 部件安裝空間26內(nèi),通過無聲放電,破壞微粒21的膜。 接著,在核酸檢測用部件23通過電泳裝置27時,核酸20從負極側(cè)向正極側(cè)進行 電泳、并在凝膠1的內(nèi)部移動,附著在帶2的表面。 在通過電泳裝置27后,核酸檢測用部件23的凝膠1被剝離、只為帶2后,通過發(fā) 生激發(fā)光的核酸檢出裝置28的照射,對核酸20進行計測。 這樣,根據(jù)本發(fā)明,能夠在10分鐘以內(nèi)進行從具有核酸20的微粒21的捕集到微 粒21的破壞、核酸20的提取、通過電泳向帶2表面的固定、熒光染色和計數(shù)。
      產(chǎn)業(yè)上的可利用性 通過該發(fā)明,可以在10分鐘以內(nèi)進行醫(yī)院、食品廠的空氣和墻面、地面、或在手術(shù) 和食品制造中使用的器具和衣服因微生物和病毒等產(chǎn)生的污染狀況的評價,所以可以幾乎 實時地進行感染危險性的掌握或防止感染所需要的處置,并可以期待衛(wèi)生管理方面的應(yīng) 用。
      8
      權(quán)利要求
      一種計測具有核酸的微粒的方法,其特征在于,包括下述工序(1)使具有核酸的微粒附著在微粒附著用部件的微粒附著工序;(2)通過放電,破壞已附著的微粒的膜的膜破壞工序;(3)使所述微粒在凝膠厚度方向進行電泳,使微粒中的核酸從負極側(cè)移到正極側(cè),并使核酸附著在核酸檢測用部件表面的電泳工序;和(4)對所述核酸檢測用部件的表面進行熒光染色,計測核酸的濃度的核酸計測工序。
      2. 如權(quán)利要求1所述的計測具有核酸的微粒的方法,其特征在于在所述微粒附著工序中,在電暈放電電極的光滑的電極側(cè)表面放置所述微粒附著用部 件,使在空中浮游的具有核酸的微粒附著在所述微粒附著用部件的表面。
      3. 如權(quán)利要求1或2所述的計測具有核酸的微粒的方法,其特征在于在所述膜破壞 工序中,使用在相對電極間插入有絕緣板的電極系,在所述電極的間隙插入所述微粒附著 用部件,向所述電極間施加交變電壓,由此破壞微粒的膜。
      4. 如權(quán)利要求1 3中任一項所述的計測具有核酸的微粒的方法,其特征在于在所 述核酸檢測用部件中,核酸進行電泳的面具有正的表面電荷。
      5. —種計測具有核酸的微粒的系統(tǒng),其特征在于,具有 使具有核酸的微粒附著的微粒附著用部件;使具有核酸的微粒附著在該微粒附著用部件的表面的微粒附著裝置; 膜破壞裝置,通過放電,破壞附著在所述微粒附著用部件上的所述微粒的膜; 核酸檢測用部件,包括具有電荷中和劑的帶和在該帶的一面?zhèn)仍O(shè)置的凝膠; 電泳裝置,使附著在所述微粒附著用部件表面的核酸,通過所述核酸檢測用部件的凝 膠進行電泳,向所述帶側(cè)移動;禾口核酸檢測裝置,在除去所述核酸檢測用部件的凝膠的狀態(tài)下,檢測所述帶表面的核酸。
      6. 如權(quán)利要求5所述的計測具有核酸的微粒的系統(tǒng),其特征在于所述微粒附著裝置具有設(shè)置有針電極和平板電極的電暈放電電極,在所述平板電極上 載置有所述微粒附著用部件的狀態(tài)下,使所述微粒附著在表面。
      7. 如權(quán)利要求5或6所述的計測具有核酸的微粒的系統(tǒng),其特征在于所述膜破壞裝 置具有相對的電極、插在該電極間的絕緣板、和用于插入所述微粒附著用部件的部件安裝 空間,向所述電極間施加交變電壓,由此破壞所述膜。
      8. 如權(quán)利要求5 7中任一項所述的計測具有核酸的微粒的系統(tǒng),其特征在于所述 核酸檢測用部件的帶具有正的表面電荷。
      9. 如權(quán)利要求5 8中任一項所述的計測具有核酸的微粒的系統(tǒng),其特征在于所述 核酸檢測用部件兼用作所述微粒附著用部件,在使具有核酸的微粒附著在所述凝膠表面的 狀態(tài)下,進行微粒的膜破壞操作。
      全文摘要
      本發(fā)明提供能夠迅速且準確地評價由具有核酸的微粒產(chǎn)生的污染狀況的系統(tǒng)。通過具有下述工序的微粒的計測系統(tǒng)而完成,即,(1)使具有核酸的微粒附著在微粒附著用部件的微粒附著工序;(2)通過放電,破壞已附著的微粒的膜的膜破壞工序;(3)使上述微粒在凝膠厚度方向進行電泳,使微粒中的核酸從負極側(cè)移到正極側(cè),并使核酸附著在核酸檢測用部件表面的電泳工序;(4)對上述核酸檢測用部件的表面進行熒光染色,計測核酸濃度的核酸計測工序。
      文檔編號C12Q1/68GK101715557SQ20088002099
      公開日2010年5月26日 申請日期2008年6月19日 優(yōu)先權(quán)日2007年6月20日
      發(fā)明者安田八郎, 水野彰, 馬蘇朵·拉赫曼·默罕默德, 高島和則 申請人:國立大學法人豐橋技術(shù)科學大學
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