專利名稱：：用于肝癌治療的靶向微小rna的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本文提供用于治療肝癌、包括但不限于肝細(xì)胞癌的方法和組合物。本文還提供用于治療二惡英誘發(fā)的肝癌、包括但不限于二惡英誘發(fā)的肝細(xì)胞癌的方法和組合物。這類方法包括給予包含靶向miRNA的修飾寡核苷酸的化合物。相關(guān)技術(shù)的描述微小RNA(miRNA)，亦稱“成熟miRNA”，是在植物和動物基因組中編碼的小的(長度約18-24個核苷酸)非編碼RNA分子。在某些情況下，高度保守、內(nèi)源性表達(dá)的miRNA通過與特定mRNA的3'-非翻譯區(qū)(3'-UTR)結(jié)合，來調(diào)節(jié)基因表達(dá)。已經(jīng)在植物和動物中鑒定出1000多種不同的miRNA。某些成熟miRNA似乎源于長的內(nèi)源性初級miRNA轉(zhuǎn)錄物(亦稱pri-miRNA、pri_mirs、pri_miR或pri-pre-miRNA)，長度常常為幾百個核苷酸(Lee等，EMBOJ.，2002，21(17)，4663-4670)。miRNA的功能分析表明，這些非編碼小RNA對動物體中不同的生理學(xué)過程產(chǎn)生影響，包括發(fā)育時機(jī)、器官發(fā)生、分化、圖式發(fā)育、胚胎發(fā)生、生長控制和程序性細(xì)胞死亡。其中miRNA參與的具體過程的實(shí)例包括干細(xì)胞分化、神經(jīng)發(fā)生、血管生成、血細(xì)胞生成和胞吐作用(有關(guān)綜述見Alvarez-Garcia和Miska，Development，2005，132，4653-4662)。在一些情況下，miRNA被認(rèn)為在大多數(shù)真核生物中行使轉(zhuǎn)錄后調(diào)控，并且已在植物和動物以及某些病毒檢出miRNA。miRNA家族可以miRNA第2_8位的核苷酸為特征，這是一個被稱為種子序列(seedsequence)的區(qū)域。Lewis等披露了若干個miRNA家族，以及特征在于相關(guān)種子序列的miRNA超家族(Lewis等，Cell.2005，120(1)15-20)。發(fā)明概述在某些實(shí)施方案中，本發(fā)明提供用于治療肝癌的方法，所述方法包括給予有需要的對象包含由15-30個連接核苷(linkednucleoside)組成的修飾寡核苷酸的化合物，其中所述修飾寡核苷酸具有的核堿序列與選自SEQIDN0:l、2、3、4、5、6、7和8的核堿序列(Nucleobasesequence)互補(bǔ)；或與同其有至少80%同一性的序列互補(bǔ)。在某些實(shí)施方案中，本發(fā)明提供用于治療肝癌的方法，所述方法包括給予有需要的對象包含修飾寡核苷酸的化合物，所述修飾寡核苷酸由15-30個連接核苷組成并且具有的核堿序列與選自SEQIDNO:9、10、11、12、13、14、15和16的核堿序列互補(bǔ)；或與同其有至少80%同一性的核堿序列互補(bǔ)。在某些實(shí)施方案中，本發(fā)明提供用于治療肝癌的方法，所述方法包括給予有需要的對象包含由15-30個連接核苷組成的修飾寡核苷酸的化合物，其中修飾寡核苷酸具有的核堿序列包含選自SEQIDN017、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29和30中所記載的核堿序列中的核堿序列的至少15個連續(xù)核堿(Contiguousnucleobase)；或與之有至少80%同一性的序列。在某些實(shí)施方案中，本發(fā)明提供用于治療肝癌的方法，所述方法包括給予有需要的對象包含由15-30個連接核苷組成的修飾寡核苷酸的藥物組合物，其中修飾寡核苷酸具有的核堿序列與選自SEQIDN0:l、2、3、4、5、6、7和8的核堿序列互補(bǔ)；或與同其有至少80%同一性的序列互補(bǔ)。在某些實(shí)施方案中，本發(fā)明提供用于治療肝癌的方法，所述方法包括給予有需要的對象包含修飾寡核苷酸的藥物組合物，所述修飾寡核苷酸由15-30個連接核苷組成，并且具有的核堿序列與選自SEQIDNO:9、10、11、12、13、14、15和16的核堿序列互補(bǔ)；或與同其有至少80%同一性的核堿序列互補(bǔ)。在某些實(shí)施方案中，本發(fā)明提供用于治療肝癌的方法，所述方法包括給予有需要的對象包含由15-30個連接核苷組成的修飾寡核苷酸的藥物組合物，其中修飾寡核苷酸具有的核堿序列包含選自SEQIDNO17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29和30中所記載的核堿序列中的核堿序列的至少15個連續(xù)核堿；或與之有至少80%同一性的序列。在某些實(shí)施方案中，本發(fā)明提供包含由15-30個連接核苷組成的修飾寡核苷酸的化合物，其中修飾寡核苷酸具有的核堿序列與選自SEQIDN0:l、2、3、4、5、6、7和8的核堿序列互補(bǔ)；或與同其有至少80%同一性的序列，用于治療肝癌互補(bǔ)。在某些實(shí)施方案中，本發(fā)明提供包含由15-30個連接核苷組成的修飾寡核苷酸的化合物，其中修飾寡核苷酸具有的核堿序列與選自SEQIDNO:9、10、11、12、13、14、15和16的核堿序列互補(bǔ)；或與同其有至少80%同一性的序列互補(bǔ)，用于治療肝癌。在某些實(shí)施方案中，本發(fā)明提供包含由15-30個連接核苷組成的修飾寡核苷酸的化合物，其中修飾寡核苷酸具有的核堿序列包含選自SEQIDNO17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29和30中所記載的核堿序列中的核堿序列的至少15個連續(xù)核堿；或與之有至少80%同一性的序列，用于治療肝癌。在某些實(shí)施方案中，本發(fā)明提供用于治療二惡英誘發(fā)的肝癌的方法，所述方法包括給予有需要的對象包含由15-30個連接核苷組成的修飾寡核苷酸的化合物，其中修飾寡核苷酸具有的核堿序列與選自SEQIDN0:31、32、33、34、35、36和37的序列互補(bǔ)；或與同其有至少約80%同一性的序列互補(bǔ)。在某些實(shí)施方案中，本發(fā)明提供包含由15-30個連接核苷組成的修飾寡核苷酸的化合物，其中修飾寡核苷酸具有的核堿序列與選自SEQIDNO:31、32、33、34、35、36和37的序列互補(bǔ)；或與同其有至少約80%同一性的序列互補(bǔ)，用于治療二惡英誘發(fā)的肝癌。在某些實(shí)施方案中，本發(fā)明提供用于治療二惡英誘發(fā)的肝癌的方法，所述方法包括給予有需要的對象包含由15-30個連接核苷組成的修飾寡核苷酸的化合物，其中修飾寡核苷酸具有的核堿序列包含選自SEQIDNO38、39和40中所記載的核堿序列中的核堿序列的至少15個連續(xù)核堿；或與之有至少約80%同一性的序列。在某些實(shí)施方案中，本發(fā)明提供包含由15-30個連接核苷組成的修飾寡核苷酸的化合物，其中修飾寡核苷酸具有的核堿序列包含選自SEQIDNO38、39和40中所記載的核堿序列中的核堿序列的至少15個連續(xù)核堿；或與之有至少約80%同一性的序列，用于治療二惡英誘發(fā)的肝癌。在某些實(shí)施方案中，二惡英誘發(fā)的肝癌是肝細(xì)胞癌。在某些實(shí)施方案中，本發(fā)明提供包含修飾寡核苷酸的化合物，所述修飾寡核苷酸由15-30個連接核苷組成并且具有的核堿序列與選自SEQIDNO:1、2、3、4、5、6、7和8的核堿序列互補(bǔ)；或與同其有至少約80%同一性的序列互補(bǔ)。在某些實(shí)施方案中，本發(fā)明提供包含修飾寡核苷酸的化合物，所述修飾寡核苷酸由15-30個連接核苷組成并且具有的核堿序列與選自SEQIDNO:1、2、3、4、5、6、7和8的核堿序列互補(bǔ)；或與同其有至少約80%同一性的序列互補(bǔ)，用于治療肝癌。在某些實(shí)施方案中，本發(fā)明提供包含修飾寡核苷酸的化合物，所述修飾寡核苷酸由15-30個連接核苷組成并且具有的核堿序列與選自SEQIDNO:9、10、11、12、13、14、15和16的核堿序列互補(bǔ)；或與同其有至少約80%同一性的序列互補(bǔ)。在某些實(shí)施方案中，本發(fā)明提供包含修飾寡核苷酸的化合物，所述修飾寡核苷酸由15-30個連接核苷組成并且具有的核堿序列與選自SEQIDNO:9、10、11、12、13、14、15和16的核堿序列互補(bǔ)；或與同其有至少約80%同一性的序列互補(bǔ)，用于治療肝癌。在某些實(shí)施方案中，本發(fā)明提供包含修飾寡核苷酸的化合物，所述修飾寡核苷酸由15-30個連接核苷組成，并且具有的核堿序列包含選自SEQIDNO17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29和30中所記載的核堿序列中的核堿序列的至少15個連續(xù)核堿。在某些實(shí)施方案中，本發(fā)明提供包含修飾寡核苷酸的化合物，所述修飾寡核苷酸由15-30個連接核苷組成，并且具有的核堿序列包含選自SEQIDNO17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29和30中所記載的核堿序列中的核堿序列的至少15個連續(xù)核堿，用于治療肝癌。在某些實(shí)施方案中，本發(fā)明提供包含修飾寡核苷酸的化合物，所述修飾寡核苷酸由15-30個連接核苷組成，并且具有的核堿序列包含選自SEQIDNO38、39和40中所記載的核堿序列中的核堿序列的至少15個連續(xù)核堿，用于治療肝癌。在某些實(shí)施方案中，本發(fā)明提供包含本發(fā)明的修飾寡核苷酸或其鹽和藥學(xué)上可接受的載體或稀釋劑的藥物組合物。在某些實(shí)施方案中，所述化合物由修飾寡核苷酸組成。在某些實(shí)施方案中，所述修飾寡核苷酸由15、16、17、18、19、20、21、22、23、24或25個連接核苷組成。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸的核堿序列與選自SEQIDNO:1、2、3、4、5、6、7和8的核堿序列的錯配不超過兩個。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸的核堿序列與選自SEQIDN0:l、2、3、4、5、6、7和8的核堿序列的錯配不超過一個。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸的核堿序列與選自SEQIDN0:l、2、3、4、5、6、7和8的核堿序列有一個錯配。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸的核堿序列與選自SEQIDN0:l、2、3、4、5、6、7和8的核堿序列沒有錯配。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸的核堿序列與選自SEQIDNO:9、10、11、12、13、1214、15和16的核堿序列的錯配不超過兩個。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸的核堿序列與選自SEQIDNO:9、10、11、12、13、14、15和16的核堿序列的錯配不超過一個。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸的核堿序列與選自SEQIDNO:9、10、11、12、13、14、15和16的核堿序列有一個錯配。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸的核堿序列選自SEQIDN0:9、10、ll、12、13、14、15和16的核堿序列沒有錯配。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸的核堿序列與選自SEQIDNO:31、32、33、34、35、36和37的核堿序列的錯配不超過兩個。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸的核堿序列與選自SEQIDN0:31、32、33、34、35、36和37的核堿序列的錯配不超過一個。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸的核堿序列與選自SEQIDNO:31、32、33、34、35、36和37的核堿序列有一個錯配。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸的核堿序列選自SEQIDN0:31、32、33、34、35,36和37的核堿序列沒有錯配。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸具有的核堿序列包含選自以下核堿序列中所記載的核堿序列的至少16個連續(xù)核堿SEQIDNO17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29和30。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸具有的核堿序列包含選自以下核堿序列所記載的核堿序列的至少17個連續(xù)核堿SEQIDNO17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29和30。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸具有的核堿序列包含選自以下核堿序列所記載的核堿序列的至少18個連續(xù)核堿SEQIDNO17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29和30。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸具有的核堿序列包含選自以下核堿序列所記載的核堿序列的至少19個連續(xù)核堿SEQIDNO17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29和30。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸具有的核堿序列包含選自以下核堿序列所記載的核堿序列的至少20個連續(xù)核堿SEQIDNO17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29和30。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸具有的核堿序列包含選自以下核堿序列所記載的核堿序列的至少21個連續(xù)核堿SEQIDNO17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29和30。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸具有的核堿序列包含選自以下核堿序列所記載的核堿序列的至少22個連續(xù)核堿SEQIDNO17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29和30。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸具有的核堿序列包含選自以下核堿序列所記載的核堿序列的至少23個連續(xù)核堿SEQIDNO17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29和30。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸具有的核堿序列由選自以下核堿序列中所記載的核堿序列的核堿序列組成SEQIDNO17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29和30。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸具有的核堿序列包含選自SEQIDNO38、39和40中所記載的核堿序列的核堿序列的至少16個、至少17個、至少18個、至少19個、至少20個、至少21個、至少22個或至少23個連續(xù)核堿。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸包含一個或多個修飾糖、核苷間鍵或核堿。在某些實(shí)施方案中，至少一個核苷間鍵是修飾核苷間鍵。例如，至少一個核苷間鍵可以是硫代磷酸酯核苷間鍵(phosphorothioateinternucleosidelinkage)。在某些實(shí)施方案中，每個核苷間鍵是修飾核苷間鍵。例如，每個核苷間鍵可以是硫代磷酸酯核苷間鍵。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸的至少一個核苷包含修飾糖。在某些實(shí)施方案中，多個核苷中的每一個都包含修飾糖。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸的每個核苷都包含修飾糖。在這些實(shí)施方案的每一個中，修飾糖可以是2’-0-甲氧基乙基糖、2’-氟糖、2’-0-甲基糖或雙環(huán)糖部分。在某些實(shí)施方案中，多個核苷中的每一個都包含2’-0-甲氧基乙基糖且多個核苷中的每一個都包含2’-氟糖。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸包含至少一個修飾核堿。在某些這類的實(shí)施方案中，修飾核堿是5-甲基胞嘧啶。在某些實(shí)施方案中，至少一個核苷包含胞嘧啶，其中所述胞嘧啶是5-甲基胞嘧啶。在某些這類的實(shí)施方案中，每個胞嘧啶都是5-甲基胞嘧啶。在某些實(shí)施方案中，肝癌是肝細(xì)胞癌。在某些實(shí)施方案中，對象是人。在某些實(shí)施方案中，肝細(xì)胞癌是二惡英誘發(fā)的。在某些實(shí)施方案中，本發(fā)明的化合物的給藥包含靜脈內(nèi)給藥、皮下給藥、腫瘤內(nèi)給藥或化療栓塞(chemoembolization)ο在某些實(shí)施方案中，本發(fā)明的方法還包括給予至少一種另外的療法。另外的療法可以是化療藥物。所述化療藥物可以選自5-氟尿嘧啶、吉西他濱、多柔比星、絲裂霉素C、索拉非尼、依托泊苷、卡鉬、表柔比星、伊立替康和奧沙利鉬。另外的療法可與本發(fā)明的化合物或藥物組合物同時給予、可比本發(fā)明的化合物或藥物組合物的給藥較不頻繁或更頻繁。在某些實(shí)施方案中，按選自以下的劑量給予修飾寡核苷酸50mg、75mg、100mg、125mg、150mg、175mg、200mg、225mg、250mg、275mg、300mg、325mg、350mg、375mg、400mg、425mg、450mg、475mg、500mg、525mg、550mg、575mg、600mg、625mg、650mg、675mg、700mg、725mg、750mg、775mg和800mg?？梢悦刻煲淮?、每周一次、每兩周一次、每三周一次或每四周一次給予修飾寡核苷酸。在某些實(shí)施方案中，給予本發(fā)明的化合物導(dǎo)致肝腫瘤大小減小和/或肝腫瘤數(shù)減少。在某些實(shí)施方案中，給予本發(fā)明的化合物防止腫瘤大小增大和/或腫瘤數(shù)增加。在某些實(shí)施方案中，給予本發(fā)明的化合物防止、減慢和/或阻止轉(zhuǎn)移進(jìn)程。在某些實(shí)施方案中，給予本發(fā)明的化合物延長對象的總體生存時間。在某些實(shí)施方案中，給予本發(fā)明的化合物延長對象的無進(jìn)展生存期。在某些實(shí)施方案中，給予本發(fā)明的化合物防止肝腫瘤的復(fù)發(fā)。在某些實(shí)施方案中，給予本發(fā)明的化合物防止肝腫瘤轉(zhuǎn)移的復(fù)發(fā)。在某些實(shí)施方案中，給予本發(fā)明的化合物防止HCC衍生腫瘤的復(fù)發(fā)。在某些實(shí)施方案中，給予本發(fā)明的化合物防止HCC衍生腫瘤轉(zhuǎn)移的復(fù)發(fā)。在某些實(shí)施方案中，為治療肝癌選出的對象患有肝病變。在某些實(shí)施方案中，為治療肝癌選出的對象的血清甲胎蛋白升高和/或血清脫-Y-羧基凝血酶原(des-gamma-carboxyprothrombin)升高。在某些實(shí)施方案中，為治療肝癌選出的對象的肝功能異常。14在某些實(shí)施方案中，給予本發(fā)明的化合物降低患有肝癌的對象的血清甲胎蛋白和/或血清脫-Y-羧基凝血酶原。在某些實(shí)施方案中，測定血清甲胎蛋白和/或血清脫_Y_羧基凝血酶原的水平以評價治療功效。在某些實(shí)施方案中，給予本發(fā)明的化合物改善對象的肝功能。結(jié)合下面的附圖、
發(fā)明內(nèi)容和權(quán)利要求書，本發(fā)明的這些實(shí)施方案和其它實(shí)施方案將是顯而易見的。附圖簡述圖1.與正常肝組織樣品相比，肝腫瘤樣品中miRNA的差異表達(dá)分析。具有顯著性P值的數(shù)據(jù)點(diǎn)用紅色圓圈包圍。稍后選用于進(jìn)一步研究的某些miRNA靶用實(shí)心黃色圓圈表示。這些miRNA靶包括miR-21、miR-125a-5p(標(biāo)為miR-125a)、miR-191、miR-210、miR_222、miR-378(標(biāo)為miR_422b)、miR-423_3p和miR-638。圖2.用靶向miRNA的修飾寡核苷酸處理后肝癌細(xì)胞系中的細(xì)胞增殖抑制。在用修飾寡核苷酸轉(zhuǎn)染后，測定了SNU423(圖2A)和H印3B(圖2B)兩個細(xì)胞系的增殖。在轉(zhuǎn)染后72小時進(jìn)行了增殖實(shí)驗。測定了增殖并與用陰性對照寡核苷酸處理的細(xì)胞的增殖和未轉(zhuǎn)染細(xì)胞的增殖進(jìn)行了比較。與時1-21、1^1-1253、1^1-191、1^1-210、1^1-222、1^1-378(標(biāo)為miR-422b)、miR-423和miR-638互補(bǔ)的修飾寡核苷酸產(chǎn)生抗增殖活性。圖3.用靶向miRNA的修飾寡核苷酸處理后肝癌細(xì)胞中的細(xì)胞凋亡誘導(dǎo)。Hep3B細(xì)胞用修飾寡核苷酸轉(zhuǎn)染。轉(zhuǎn)染后24小時，通過測定胱天蛋白酶3/7活化，測定了誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡。使用與miR-21、miR-125a、miR-191、miR-210、miR-378(標(biāo)為miR_422b)、miR-423和miR-638互補(bǔ)的修飾寡核苷酸的細(xì)胞處理導(dǎo)致胱天蛋白酶3/7活性顯著升高，這就表示誘導(dǎo)了細(xì)胞凋亡。圖4.用修飾寡核苷酸治療的小鼠中皮下腫瘤體積減小。給裸小鼠注射HepG2細(xì)胞誘導(dǎo)皮下腫瘤。相對于鹽水對照處理，用與miR-21(圖4a)和miR_210(圖4b)互補(bǔ)的MOE-修飾寡核苷酸治療顯示腫瘤體積減小。圖5.H印G2細(xì)胞中miRNA的表達(dá)中位值(單位log(熒光))，其中X軸表示TCDD處理后48小時的細(xì)胞，Y軸表示未處理細(xì)胞。星散的平行線描繪了兩者在任一方向上的倍數(shù)改變。中線描繪了兩組細(xì)胞中相同的表達(dá)中位值。處理細(xì)胞中具有相對高表達(dá)值的miRNA包括hsa_miR-191、hsa_miR-181a、hsa-miR-181b禾口hsa_miR-181a*。圖6.雙重螢光素酶報導(dǎo)分子測定(Dual-LuciferaseReporterAssay)的結(jié)果用直方圖表示，其中Y軸表示對照載體的R/F%比率。各條形柱如下表示歸一化發(fā)光條形柱a-pl91(僅在海腎螢光素酶(renillaluciferase)的3'UTR攜帶miR-191的反向互補(bǔ)序列而無修飾寡核苷酸的質(zhì)粒)，條形柱b-pl91AS0-miR-NC；條形柱c-ρ對照(對照質(zhì)粒)ASO-miR-191；條形柱d-pl91AS0_miR-191；條形柱e-ρ對照(無修飾寡核苷酸)。圖7.使用AhR的特異性抗體的ChIP(染色質(zhì)免疫沉淀)測定。Y軸表示每1，000個細(xì)胞的結(jié)合事件，其中有斜線的條形柱代表用TCDD處理的細(xì)胞，有點(diǎn)的條形柱代表未處理細(xì)胞。左邊的一對條形柱代表陰性對照。右邊的兩對條形柱代表CYPlAl上AhR/ArntTF的兩個結(jié)合部位。發(fā)明詳述除非另有說明，否則本文所使用的所有科技術(shù)語都具有本發(fā)明所屬領(lǐng)域?qū)I(yè)人員通常所理解的含義。除非給出具體的定義，否則與本文所述的分析化學(xué)、合成有機(jī)化學(xué)及醫(yī)學(xué)和藥學(xué)化學(xué)的方法和技術(shù)聯(lián)合使用的術(shù)語是本領(lǐng)域眾所周知并且是經(jīng)常使用的術(shù)語。在本文的術(shù)語存在多種定義的情況下，以本節(jié)的定義優(yōu)先。對于化學(xué)合成、化學(xué)分析、藥物制劑、劑型和遞送以及對象的治療可采用標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)。某些這類技術(shù)和方法可參見例如“CarbohydrateModificationsinAntisenseResearch，，，Sangvi禾口Cook編輯，AmericanChemicalSociety,WashingtonD.C.,1994；以及"Remington'sPharmaceuticalSciences”，MackPublishingCo.，Easton,Pa.，第18版，1990；所述文獻(xiàn)特此引用予以結(jié)合以用于任何目的。當(dāng)允許時，貫穿本文整個公開內(nèi)容所提及的所有專利、專利申請、已公開的申請和出版物、GENBANK序列、網(wǎng)站和其它已發(fā)表的材料，都通過引用其全部結(jié)合，除非另有說明。要理解的是，當(dāng)參考內(nèi)容涉及URL或其它這類標(biāo)識符或地址時，這類標(biāo)識符可能發(fā)生改變，互聯(lián)網(wǎng)的特定信息可能是指令運(yùn)行的，但是通過搜索互聯(lián)網(wǎng)可以找到等同信息。此處的參考內(nèi)容表明這類信息的可利用性和公共傳播程度。要理解的是，在公開和描述本發(fā)明的組合物和方法前，本文所使用的術(shù)語僅用于描述具體的實(shí)施方案，而且并不是限制性的。必須注意，如所本說明書和隨附權(quán)利要求書中所使用的一樣，未使用數(shù)詞的單數(shù)形式包括了復(fù)數(shù)，除非在上下文中有明確規(guī)定。定義“肝癌”是指肝臟惡變，或為原發(fā)癌或轉(zhuǎn)移癌。在某些實(shí)施方案中，肝癌包括但不限于產(chǎn)生于肝細(xì)胞的癌，例如肝細(xì)胞瘤和肝細(xì)胞癌；纖維層癌；以及膽管細(xì)胞癌(或膽管癌)?！案渭?xì)胞癌”是指產(chǎn)生于肝細(xì)胞的肝臟的原發(fā)癌。“二惡英誘發(fā)的肝癌”是指由二惡英暴露引起的肝癌。在某些實(shí)施方案中，二惡英誘發(fā)的肝癌是二惡英誘發(fā)的肝細(xì)胞癌。“對象”是指人或者為了治療或療法而選出的人或非人類動物。“有需要的對象”是指確定為需要療法或治療的對象。在某些實(shí)施方案中，對象患有肝癌。在這類實(shí)施方案中，對象有肝癌的一種或多種臨床表現(xiàn)或有發(fā)生肝癌的風(fēng)險?！敖o藥/給予”是指向?qū)ο筇峁┧幬锘蚪M合物，包括但不限于由醫(yī)學(xué)專業(yè)人員給藥和自我給藥。“胃腸外給藥”是指通過注射或輸注給藥。胃腸外給藥包括但不限于皮下給藥、靜脈內(nèi)給藥或肌內(nèi)給藥?！捌は陆o藥”是指正好在皮膚下給藥?！办o脈內(nèi)給藥”是指給入靜脈中?！澳[瘤內(nèi)給藥”是指在腫瘤內(nèi)部給藥?！盎熕ㄈ笔侵钙渲幸酝饪剖中g(shù)、機(jī)械方法或化學(xué)方法阻斷向腫瘤供應(yīng)血液的方法，并將化療藥物直接給入腫瘤內(nèi)?！俺掷m(xù)時間”是指活性或事件持續(xù)的一段時間。在某些實(shí)施方案中，治療的持續(xù)時間是給予各劑藥物或藥物組合物的一段時間?！隘煼ā笔侵讣膊≈委煼椒?。在某些實(shí)施方案中，療法包括但不限于化學(xué)療法、外科切除術(shù)、肝臟移植和/或化療栓塞。“治療”是指一種或多種用于治愈或改善疾病的具體方法的應(yīng)用。在某些實(shí)施方案16中，具體方法是給予一種或多種藥物。“改善”是指降低病癥或疾病的至少一項指標(biāo)的嚴(yán)重程度。在某些實(shí)施方案中，改善包括延緩或減慢病癥或疾病的一項或多項指標(biāo)的發(fā)展。指標(biāo)的嚴(yán)重程度可通過本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的主觀或客觀測定法確定。“預(yù)防”是指延遲或預(yù)先阻止病癥或疾病的發(fā)生或發(fā)展或進(jìn)程達(dá)到一段時間，包括數(shù)周、數(shù)月或數(shù)年?！爸委焺笔侵赣糜谥斡?、改善或預(yù)防疾病的藥物?！盎熕幬铩笔侵赣糜谥委煱┌Y的藥物?！盎瘜W(xué)療法”是指用一種或多種殺死癌細(xì)胞和/或減慢癌細(xì)胞生長的藥物治療對象?！皠┝俊笔侵冈趩未谓o藥時提供的藥物的規(guī)定量。在某些實(shí)施方案中，劑量可以兩次或更多次大丸劑(bolus)、片劑或注射劑給予。例如，在某些實(shí)施方案中，如果需要皮下給藥，所需劑量需要單次注射不易容納的體積。在這類實(shí)施方案中，可采用兩次或更多次注射劑實(shí)現(xiàn)所需要的劑量。在某些實(shí)施方案中，劑量可以兩次或更多次注射劑給予以使個體的注射部位反應(yīng)降到最低?！皠┝繂挝弧笔侵钙渲刑峁┧幬锏男问?。在某些實(shí)施方案中，劑量單位是裝有凍干寡核苷酸的小瓶。在某些實(shí)施方案中，劑量單位是裝有重配寡核苷酸的小瓶。“治療有效量”是指為動物提供有治療益處的藥物的量?！八幬锝M合物”是指適于給予個體的包括藥物在內(nèi)的物質(zhì)的混合物。例如，藥物組合物可包含修飾寡核苷酸和無菌水溶液?！八幬铩笔侵府?dāng)給予對象時提供治療效果的物質(zhì)?！盎钚运幬锍煞帧笔侵杆幬锝M合物中提供所需效果的物質(zhì)?！稗D(zhuǎn)移”是指癌從其最初發(fā)生原發(fā)性腫瘤的部位擴(kuò)散到機(jī)體其它位置的過程。原發(fā)性腫瘤的轉(zhuǎn)移進(jìn)程反映出多個階段，包括從鄰近原發(fā)性腫瘤細(xì)胞中解離，在循環(huán)中存活，并在繼發(fā)位置生長?！翱傮w生存時間”是指在診斷或治療疾病后對象生存的時限。在某些實(shí)施方案中，所述疾病是癌癥?！盁o進(jìn)展生存期”是指患病的對象在疾病不惡化的情況下生存的時限。在某些實(shí)施方案中，通過對疾病分期或評分來評價無進(jìn)展生存期。在某些實(shí)施方案中，通過評價腫瘤大小、腫瘤數(shù)和/或轉(zhuǎn)移，來評價患有肝癌的對象的無進(jìn)展生存期。“血液腫瘤標(biāo)記”是指在患有癌癥的對象的血液中升高或降低的生物標(biāo)記。“改善肝功能”是指肝功能朝正常極限值的改變。在某些實(shí)施方案中，通過測定于對象血液中發(fā)現(xiàn)的分子來評價肝功能。例如，在某些實(shí)施方案中，通過血液中肝轉(zhuǎn)氨酶水平的降低來測定肝功能的改善?！翱山邮艿陌踩卣?Acc印tablesafetyprofile)”是指副作用的方式在臨床可接受的極限值范圍內(nèi)?！案弊饔谩笔侵杆栊Ч酝饪蓺w于治療的生理反應(yīng)。在某些實(shí)施方案中，副作用包括而不限于注射部位反應(yīng)、肝功能化驗異常、腎功能異常、肝毒性、腎毒性、中樞神經(jīng)系統(tǒng)異常和肌病?？梢灾苯踊蜷g接檢測這類副作用。例如，血清中轉(zhuǎn)氨酶水平升高可指示肝毒17性或肝功能異常。例如，膽紅素升高可指示肝毒性或肝功能異常?！白⑸洳课环磻?yīng)”是指個體注射部位的炎癥或皮膚異常發(fā)紅。“對象順應(yīng)性”是指對象對推薦療法或處方療法的服從性?！胺摹笔侵笇ο笞袷赝扑]療法?！巴扑]療法”是指由醫(yī)學(xué)專業(yè)人員推薦的用于治療、改善或預(yù)防疾病的治療?！鞍泻怂帷?、“靶RNA”、“靶RNA轉(zhuǎn)錄物”和“核酸靶”全都指能夠被反義化合物靶向的任何核酸。“尋靶”是指設(shè)計和選擇可與靶核酸雜交并引起所需效果的核堿序列的過程。“被靶向(Targetedto)”是指具有可供與靶核酸雜交以引起所需效果的核堿序列。在某些實(shí)施方案中，所需效果是減少靶核酸?！罢{(diào)節(jié)”是指對功能或活性的干擾。在某些實(shí)施方案中，調(diào)節(jié)是指提高基因表達(dá)。在某些實(shí)施方案中，調(diào)節(jié)是指降低基因表達(dá)?！氨磉_(dá)”是指基因編碼的信息被轉(zhuǎn)換成在細(xì)胞中存在并起作用的結(jié)構(gòu)的任何功能和步驟?！?’靶位”是指與特定寡核苷酸最5’端的核堿互補(bǔ)的靶核酸的核堿?！?’靶位”是指與特定寡核苷酸最3’端的核堿互補(bǔ)的靶核酸的核堿?！皡^(qū)域/區(qū)”是指核酸內(nèi)的一部分連接核苷。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸具有與靶核酸區(qū)互補(bǔ)的核堿序列。例如，在某些這類的實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸與miRNA莖_環(huán)序列區(qū)互補(bǔ)。在某些這類的實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸與miRNA莖-環(huán)序列區(qū)完全互補(bǔ)?！皡^(qū)段(Segment)”是指較小的區(qū)域或區(qū)域的亞部分。“核堿序列”是指連續(xù)核堿自5’至3’方向的順序，不依賴于任何糖、鍵和/或核堿修飾。“連續(xù)核堿”是指核酸中彼此直接鄰接的核堿?！昂藟A互補(bǔ)性”是指兩個核堿通過氫鍵結(jié)合進(jìn)行非共價配對的能力。“互補(bǔ)”是指第一核堿序列在8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、30、35、40、45、50、55、60、65、70、75、80、85、90、95、100個或更多個核堿的區(qū)域內(nèi)與第二核堿序列的互補(bǔ)序列有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少97%、至少98%、至少99%或100%同一性，或者兩個序列在嚴(yán)格雜交條件下雜交?！盎パa(bǔ)性”是指第一核酸和第二核酸之間的核堿配對能力。“完全互補(bǔ)”是指第一核酸的每個核堿能夠與第二核酸每個相應(yīng)位置上的核堿配對。例如，在某些實(shí)施方案中，其中每個核堿與miRNA莖-環(huán)序列區(qū)內(nèi)的核堿具有互補(bǔ)性的修飾寡核苷酸與該miRNA莖-環(huán)序列完全互補(bǔ)。在某些實(shí)施方案中，與miRNA或其前體完全互補(bǔ)的修飾寡核苷酸在8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、30、35、40、45、50、55、60、65、70、75、80、85、90、95、100個或更多個核堿的區(qū)域內(nèi)具有與miRNA或其前體的互補(bǔ)序列相同的核堿序列?！盎パa(bǔ)性百分比”是指核酸中互補(bǔ)的核堿數(shù)除以核酸的長度。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸的互補(bǔ)性百分比是指與靶核酸互補(bǔ)的核堿數(shù)除以修飾寡核苷酸的長度?！巴恍园俜直取笔侵概c第二核酸相應(yīng)位置上的核堿相同的第一核酸的核堿數(shù)除以第一核酸中的核堿數(shù)。本文所使用的“基本上相同”可指第一核堿序列和第二核堿序列在8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、30、35、40、45、50、55、60、65、70、75、80、85、90、95、100個或更多個核堿的區(qū)域內(nèi)有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少97%、至少98%、至少99%或100%的同一性。雜交”是指通過核堿互補(bǔ)性產(chǎn)生的互補(bǔ)核酸的退火反應(yīng)。錯配”是指第一核酸的核堿不能夠與第二核酸相應(yīng)位置上的核堿配對。非互補(bǔ)核堿”是指兩個不能夠通過氫鍵結(jié)合進(jìn)行配對的核堿。相同/同一性”是指具有相同的核堿序列。miR-21”是指具有SEQIDNO:9所示核堿序列的成熟miRNA。miR-21莖-環(huán)序列”是指具有SEQIDNO=I所示核堿序列的莖-環(huán)序列。miR-125a-5p”是指具有SEQIDNO10所示核堿序列的成熟miRNA。miR-125a莖-環(huán)序列”是指具有SEQIDNO:2所示核堿序列的莖-環(huán)序列。miR-191”是指具有SEQIDNO11所示核堿序列的成熟miRNA。miR-191莖-環(huán)序列”是指具有SEQIDNO3所示核堿序列的莖-環(huán)序列。miR-210”是指具有SEQIDNO12所示核堿序列的成熟miRNA。miR-210莖-環(huán)序列”是指具有SEQIDNO4所示核堿序列的莖-環(huán)序列。miR-222”是指具有SEQIDNO13所示核堿序列的成熟miRNA。miR-222莖-環(huán)序列”是指具有SEQIDNO:5所示核堿序列的莖-環(huán)序列。miR-378”是指具有SEQIDNO14所示核堿序列的成熟miRNA。miR-378莖-環(huán)序列”是指具有SEQIDNO:6所示核堿序列的莖-環(huán)序列。miR-423-3p”是指具有SEQIDNO15所示核堿序列的成熟miRNA。miR-423莖-環(huán)序列”是指具有SEQIDNO:7所示核堿序列的莖-環(huán)序列。miR-638”是指具有SEQIDNO16所示核堿序列的成熟miRNA。miR-638莖-環(huán)序列”是指具有SEQIDNO:8所示核堿序列的莖-環(huán)序列。miR-181a”是指具有SEQIDNO:31所示核堿序列的成熟miRNA。miR-181a*”是指具有SEQIDNO:32所示核堿序列的成熟miRNA。miR-181b”是指具有SEQIDNO:33所示核堿序列的成熟miRNA。miR-181a-l莖-環(huán)序列”是指具有SEQIDNO34所示核堿序列的莖-環(huán)序列。miR-181a-2莖-環(huán)序列”是指具有SEQIDNO:35所示核堿序列的莖-環(huán)序列。miR-181b-l莖-環(huán)序列”是指具有SEQIDNO:36所示核堿序列的莖-環(huán)序列。miR-181b-2莖-環(huán)序列”是指具有SEQIDNO:37所示核堿序列的莖-環(huán)序列?！甿iRNA”或“miR”是指長度介于18個和25個核堿之間的非編碼RNA，是pre_miRNA通過切酶切割的產(chǎn)物。成熟miRNA的實(shí)例參見稱為miRBase的miRNA數(shù)據(jù)庫(http://microrna.sanger.ac.uk/)。“Pre-miRNA”或“pre-miR”是指具有發(fā)夾結(jié)構(gòu)的非編碼RNA，是pri_miR通過稱為Drosha的雙鏈RNA特異性核糖核酸酶切割的產(chǎn)物。“莖-環(huán)序列”是指具有發(fā)夾結(jié)構(gòu)并含有成熟miRNA序列的RNA。Pre-miRNA序列19和莖_環(huán)序列可能重疊。莖_環(huán)序列的實(shí)例參見稱為miRBase的miRNA數(shù)據(jù)庫(http://microrna.sanger.ac.uk/)?！癙ri-miRNA”或“pri-miR”是指具有發(fā)夾結(jié)構(gòu)的非編碼RNA，其為雙鏈RNA特異性核糖核酸酶Drosha的底物。"miRNA前體”是指源自基因組DNA且包含含有一個或多個miRNA序列的非編碼結(jié)構(gòu)性RNA的轉(zhuǎn)錄物。例如，在某些實(shí)施方案中，miRNA前體是pre-miRNA。在某些實(shí)施方案中，miRNA前體是pri-miRNA?！皢雾樂醋愚D(zhuǎn)錄物”是指含有單個miRNA序列的miRNA前體?！岸囗樂醋愚D(zhuǎn)錄物”是指含有兩個或更多個miRNA序列的miRNA前體?！胺N子序列”是指得自成熟miRNA序列5’端的2_6位核苷酸或2_7位核苷酸?！肮丫刍衔铩笔侵富衔锖羞B接的單體亞基的聚合物。“寡核苷酸”是指連接核苷的聚合物，每個核苷可以彼此獨(dú)立地經(jīng)過修飾或未經(jīng)修飾?！疤烊淮嬖诘暮塑臻g鍵”是指核苷之間的3’-5’磷酸二酯鍵。“天然糖”是指存在于DNA(2’-H)或RNA(2’-0H)中的糖?！疤烊缓藟A”是指相對于其天然存在的形式是未修飾的核堿?！昂塑臻g鍵”是指相鄰核苷間的共價鍵。“連接核苷(Linkednucleoside)”是指通過共價鍵連接的核苷。“核堿”是指能夠與另一個核堿進(jìn)行非共價配對的雜環(huán)部分?！昂塑铡笔侵概c糖連接的核堿?！昂塑账帷笔侵妇哂信c核苷的糖部分共價連接的磷酸基團(tuán)的核苷?！靶揎椆押塑账帷笔侵赶鄬τ谔烊淮嬖诘哪┒恕⑻?、核堿和/或核苷間鍵具有一種或多種修飾的寡核苷酸。“單鏈修飾寡核苷酸”是指未與互補(bǔ)鏈雜交的修飾寡核苷酸?！靶揎椇塑臻g鍵”是指天然存在的核苷間鍵的任何改變?！傲虼姿狨ズ塑臻g鍵”是指核苷間的鍵，其中非橋接原子之一是硫原子。“修飾糖”是指天然糖的取代和/或任何改變?！靶揎椇藟A”是指天然核堿的任何取代和/或改變?！?-甲基胞嘧啶”是指被連接在5’位上的甲基修飾的胞嘧啶?！?’-0-甲基糖”或“2’-OMe糖”是指在2’位上具有0_甲基修飾的糖。“2’-0-甲氧基乙基糖”或“2’-MOE糖”是指在2’位上具有0_甲氧基乙基修飾的糖?！?’-0-氟”或“2-F”是指2’位具有氟修飾的糖?！半p環(huán)糖部分”是指被兩個非環(huán)的原子橋接所修飾的糖。“2’-0-甲氧基乙基核苷”是指具有2’-0-甲氧基乙基糖修飾的2’-修飾核苷?！?’-氟核苷”是指具有2’-氟糖修飾的2’-修飾核苷。“2’-0-甲基”核苷是指具有2’-0-甲基糖修飾的2’-修飾核苷?！半p環(huán)核苷”是指具有雙環(huán)糖部分的2’_修飾核苷?！盎颉笔侵腹押塑账嶂行揎椇?或未修飾的核堿、糖和/或核苷間鍵的樣式?！巴耆揎椆押塑账帷笔侵该總€核堿、每個糖和/或每個核苷間鍵都是修飾的?！耙恢滦揎椆押塑账帷笔侵冈谡麄€修飾寡核苷酸中，每個核堿、每個糖和/或每個核苷間鍵都具有相同的修飾。“gapmer”是指具有位于連接核苷的兩個外部區(qū)域(externalregion)間的連接核苷的內(nèi)部區(qū)域(internalregion)的修飾寡核苷酸，其中內(nèi)部區(qū)域的核苷包含的糖部分不同于各外部區(qū)域的核苷的糖部分。"gap區(qū)段”是位于外部區(qū)域之間的gapmer的內(nèi)部區(qū)域?！耙韰^(qū)段(wingsegment)”是位于內(nèi)部區(qū)域5’端或3’端的gapmer的外部區(qū)域?！皩ΨQgapmer”是指每個外部區(qū)域的每個核苷包含相同的糖修飾?！安粚ΨQgapmer”是指一個外部區(qū)域的每個核苷包含第一種糖修飾，另一個外部區(qū)域的每個核苷包含第二種糖修飾?！胺€(wěn)定性修飾”是指在核酸酶的存在下，相對于由通過磷酸二酯核苷間鍵連接的2’_脫氧核苷提供的穩(wěn)定性，為修飾寡核苷酸提供的增強(qiáng)的穩(wěn)定性的核苷修飾。例如，在某些實(shí)施方案中，穩(wěn)定性修飾是穩(wěn)定化核苷修飾。在某些實(shí)施方案中，穩(wěn)定性修飾是核苷間鍵修飾。“穩(wěn)定性核苷”是指相對于2’-脫氧核苷提供的穩(wěn)定性，為寡核苷酸提供提高的核酸酶穩(wěn)定性的核苷修飾。在一個實(shí)施方案中，穩(wěn)定性核苷是2’-修飾核苷?！胺€(wěn)定性核苷間鍵”是指相對于由磷酸二酯核苷間鍵提供的穩(wěn)定性，為寡核苷酸提供的提高核酸酶穩(wěn)定性的核苷間鍵。在一個實(shí)施方案中，穩(wěn)定性核苷間鍵是硫代磷酸酯核苷間鍵。概述肝癌是全球男性和女性癌癥死亡的一個常見原因。肝細(xì)胞癌(HCC)這種最常見的肝癌類型的發(fā)生率的上升與丙型肝炎病毒感染的發(fā)病率日益增加有關(guān)。某些HCC病例與慢性乙型肝炎感染、慢性丙型肝炎感染或肝硬化有關(guān)?；加蠬CC的對象的預(yù)后非常差，自診斷日起的典型生存期中位值介于7-8個月，5年生存率小于5%。對于HCC可獲得的治療有限?；荚缙诩膊〉膶ο罂赏ㄟ^肝切除術(shù)或肝臟移植術(shù)治療。然而，約85%的對象在診斷出疾病時對于肝切除術(shù)或移植術(shù)為時已晚?；贾衅诩膊〉膶ο罂梢允腔熕ㄈ暮蜻x者。然而，患晚期疾病的對象健康狀況不佳，限制了化療栓塞的使用。已報告相對于非癌細(xì)胞，在癌細(xì)胞(包括肝癌細(xì)胞例如HCC)中，在miRNA表達(dá)形式方面有某些改變。有研究描述了與癌癥有關(guān)的miRNA表達(dá)的增加和減少。據(jù)估計，人基因組中miRNA的總數(shù)的范圍介于約500至數(shù)千之間。鑒于這樣高的miRNA總數(shù)，對于通過抑制或增加miRNA的癌癥療法，為了鑒定可被靶向的miRNA，有必要鑒定出與特定癌癥類型有關(guān)聯(lián)的特定miRNA。因此，存在對鑒定用于肝癌(包括HCC)治療的可被抑制的miRNA的需要。還存在對用于肝癌(例如HCC)治療的抑制劑的需求。此外，存在對治療肝癌(例如HCC)的方法的需求，所述方法通過給予有需要的對象能夠抑制miRNA的藥物，所述miRNA被鑒定為與肝癌(例如HCC)有關(guān)的失調(diào)。因為癌癥是由于不受控制的細(xì)胞增殖以及細(xì)胞存活延長所引起的疾病，所以用于肝癌治療的藥物的理想特征包括減少細(xì)胞增殖和/或誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的能力，其進(jìn)而可減小腫瘤大小，減少腫瘤數(shù)，和/或防止或減慢肝癌細(xì)胞的轉(zhuǎn)移。在某些實(shí)施方案中，本文提供用于治療肝癌(例如HCC)方法。這些方法可在患有肝癌的對象中產(chǎn)生一種或多種臨床上令人滿意的結(jié)果，例如減少腫瘤數(shù)和/或減小腫瘤大小，減緩轉(zhuǎn)移進(jìn)程，延長生存時間，和/或延長無進(jìn)展生存時間。本文還提供可用于治療肝癌(例如HCC)的藥物，例如修飾寡核苷酸。如本文所述，采用含有設(shè)計成針對約700種miRNA的探針的微陣列，將得自HCC腫瘤的肝樣品與正常肝組織樣品進(jìn)行比較。在受測試的約700種miRNA中，發(fā)現(xiàn)相對于正常肝組織樣品，在HCC樣品中約90種上調(diào)。在HCC衍生的細(xì)胞系的下列體外實(shí)驗中，選出以下8種miRNA作為用于HCC療法的被靶向候選miRNA:miR-21、miR-125a-5p、miR-191、miR-210、miR-222、miR-378、miR-423-3p和miR-638。如本文所述，使用與所述miRNA互補(bǔ)的修飾寡核苷酸，在肝癌細(xì)胞系中抑制這8種miRNA后，觀察到細(xì)胞增殖減少。此外，抑制7種miRNA引起肝癌細(xì)胞的細(xì)胞凋亡增加。因此，與這8種miRNA的每一種互補(bǔ)的修飾寡核苷酸是用于治療肝癌(包括HCC)的藥物。如本文所述，在小鼠皮下腫瘤模型中，給予靶向被鑒定為在HCC中上調(diào)的微小RNA的修飾寡核苷酸引起腫瘤體積減小。因此，這類修飾寡核苷酸是用于治療肝癌(包括HCC)的藥物。某些治療在某些實(shí)施方案中，本發(fā)明提供用于治療癌癥的方法，所述方法包括給予有需要的對象與miRNA互補(bǔ)的修飾寡核苷酸。在給予醫(yī)學(xué)專業(yè)人員熟知的醫(yī)學(xué)檢驗后，可以診斷患有肝癌的對象。肝癌可以是肝細(xì)胞癌(HCC)。肝細(xì)胞癌的診斷通常通過肝成像檢測進(jìn)行，例如腹部超聲波、螺旋計算機(jī)體層攝影術(shù)(CT)掃描或三期CT掃描。這類成像檢測可與血液甲胎蛋白水平和/或血液脫_Y_羧基凝血酶原水平的測定結(jié)合起來進(jìn)行。在某些對象中，可以采用MRI代替CT掃描。肝成像檢測允許評價腫瘤大小、數(shù)目、位置、肝外轉(zhuǎn)移、由腫瘤引起的肝動脈和肝靜脈的開放和/或侵襲。這種評價有助于確定適當(dāng)?shù)闹委熜曰蛑螛?biāo)性干預(yù)的方式。最終的診斷通常通過穿刺活檢和組織病理學(xué)檢查來證實(shí)。因此，在某些實(shí)施方案中，肝癌是根據(jù)檢查腫瘤的計算機(jī)體層攝影術(shù)(CT)掃描檢查出來的。在某些實(shí)施方案中，肝癌是根據(jù)磁共振成像(MRI)檢查出來的。在某些實(shí)施方案中，HCC特征為單發(fā)性原發(fā)性腫瘤。在某些實(shí)施方案中，HCC特征為多發(fā)性原發(fā)性腫瘤。在某些實(shí)施方案中，HCC特征為具有浸潤性生長形式的邊界不清的原發(fā)性腫瘤。在某些實(shí)施方案中，HCC是具有血管侵襲的單發(fā)性原發(fā)性腫瘤。在某些實(shí)施方案中，HCC特征為具有血管侵襲的多發(fā)性原發(fā)性腫瘤。在某些實(shí)施方案中，HCC轉(zhuǎn)移到一個或多個淋巴結(jié)上。在某些這類的實(shí)施方案中，淋巴結(jié)是區(qū)域淋巴結(jié)。在某些實(shí)施方案中，HCC轉(zhuǎn)移到一個或多個遠(yuǎn)端組織上。在某些實(shí)施方案中，HCC已轉(zhuǎn)移到肝的其它區(qū)域、門靜脈、淋巴結(jié)、腎上腺、骨骼或肺上。在某些實(shí)施方案中，存在纖維變性。已利用多個系統(tǒng)預(yù)測HCC的預(yù)后，包括M系統(tǒng)、Okuda系統(tǒng)、ClinicLiverCancer(BCLC)和CLIP評分。這些系統(tǒng)的每一個都包括被視為是生存的重要決定因素的4個特征基礎(chǔ)肝病的嚴(yán)重程度、腫瘤的大小、腫瘤向附近結(jié)構(gòu)的延伸以及轉(zhuǎn)移的存在。m系統(tǒng)將HCC歸類為I期、II期、III期、IV期或V期。BCLC將HCC歸類為Al期、A2期、A3期、A4期、B期、C期和D期，且包括Child-Pugh評分的考慮因素。22在某些實(shí)施方案中，肝癌被歸類為1期、2期、3A期、3B期、3C期或4期。1期的特征在于癌的大小不大于2cm且未開始擴(kuò)散。在2期，癌癥累及肝中的血管，或者在肝中存在不只一個腫瘤。在3A期，癌的大小大于5cm，或者已擴(kuò)散到肝附近的血管。在3B期，癌已擴(kuò)散到附近器官，例如腸或胃，但尚未擴(kuò)散到淋巴結(jié)。在3C期，癌可以是任何大小，并且已擴(kuò)散到淋巴結(jié)附近。在4期，癌已擴(kuò)散到更遠(yuǎn)離肝的機(jī)體部分，例如肺。對象血液中的生物標(biāo)記可以用來提高肝癌的診斷質(zhì)量、給肝癌分期或開發(fā)生存的預(yù)后法。這類生物標(biāo)記包括血液腫瘤生物標(biāo)記，例如甲胎蛋白和脫Y羧基凝血酶原。在某些這類的實(shí)施方案中，對象的血液甲胎蛋白升高。在某些這類的實(shí)施方案中，對象的血液脫Y羧基凝血酶原升高?；加懈伟┑膶ο罂赡苓€患有肝功能異常。肝功能可通過肝功能化驗來評價，肝功能化驗包括測量血液肝轉(zhuǎn)氨酶水平。在某些實(shí)施方案中，患有肝功能異常的對象的血液肝轉(zhuǎn)氨酶升高。血液肝轉(zhuǎn)氨酶包括丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶(ALT)和天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶(AST)。在某些實(shí)施方案中，患有肝功能異常的對象的血液膽紅素升高。在某些實(shí)施方案中，對象的血液白蛋白水平異常。在某些實(shí)施方案中，對象的肝功能通過Child-Pugh分類系統(tǒng)進(jìn)行評價，該系統(tǒng)界定了肝功能的三種類型。在該分類系統(tǒng)中，為以下5個類別之一的測量值指定分?jǐn)?shù)膽紅素水平、白蛋白水平、凝血酶原時間、腹水和腦病。給下列存在的特征中的每一個指定一分血液膽紅素小于2.Omg/dl；血液白蛋白大于3.5mg/dl；凝血酶原時間小于1.7國際標(biāo)準(zhǔn)化比值(INR)；腹水不存在；或腦病不存在。給下列存在的特征的每一個指定2分血液膽紅素為2-3mg/dl；血液膽紅素為3.5-2.8mg/dl；凝血酶原時間1.7-2.3INR；腹水輕微至中等；或腦病輕微。給下列存在的特征的每一個指定3分膽紅素大于3.Omg/dl；血液白蛋白小于2.8mg/dl；凝血酶原時間大于2.3INR；腹水嚴(yán)重至不應(yīng)；或腦病嚴(yán)重。將分?jǐn)?shù)相加，5_6分的評分指定為A類,7-9分的評分指定為類B，10-15分的評分指定為類C。患有肝癌的對象可能患有慢性丙型肝炎感染、慢性乙型肝炎感染或肝硬化?；加杏杀透窝赘腥尽⒁倚透窝赘腥净蚋斡不璉起的肝癌的對象可以通過本文所述方法治療。對象對治療的反應(yīng)通過類似于用來診斷肝癌的檢查來評價，包括而不限于CT掃描、MRI和穿刺活檢。還可通過測定血液中的生物標(biāo)記，與治療前的生物標(biāo)記水平進(jìn)行比較，來評價對治療的反應(yīng)。給予患有肝癌的對象本發(fā)明的藥物組合物產(chǎn)生一種或多種臨床上令人滿意的結(jié)果。這類臨床上令人滿意的結(jié)果包括腫瘤數(shù)減少或腫瘤大小減小。另外的臨床上令人滿意的結(jié)果包括對象總體生存時間延長和/或?qū)ο蟮臒o進(jìn)展生存時間延長。在某些實(shí)施方案中，給予本發(fā)明的藥物組合物阻止腫瘤大小增大和/或腫瘤數(shù)增加。在某些實(shí)施方案中，給予本發(fā)明的藥物組合物阻止轉(zhuǎn)移進(jìn)程。在某些實(shí)施方案中，給予本發(fā)明的藥物組合物減慢或中止轉(zhuǎn)移進(jìn)程。在某些實(shí)施方案中，給予本發(fā)明的藥物組合物防止肝腫瘤的復(fù)發(fā)。在某些實(shí)施方案中，給予本發(fā)明的藥物組合物防止肝腫瘤轉(zhuǎn)移的復(fù)發(fā)。在某些實(shí)施方案中，給予本發(fā)明的藥物組合物防止HCC衍生的腫瘤的復(fù)發(fā)。在某些實(shí)施方案中，給予本發(fā)明的藥物組合物防止HCC衍生的腫瘤轉(zhuǎn)移的復(fù)發(fā)。向包括HCC細(xì)胞在內(nèi)的肝癌細(xì)胞給予本發(fā)明的藥物組合物，可引起令人滿意的表型效應(yīng)。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸可中止、減慢或減少肝癌細(xì)胞不受控制的增殖。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸可誘導(dǎo)肝癌細(xì)胞的凋亡。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸可縮短肝癌細(xì)胞存活期。miRNA與mRNA雜交調(diào)節(jié)mRNA及其蛋白質(zhì)產(chǎn)物的表達(dá)。一般來講，miRNA與其mRNA靶的雜交抑制mRNA的表達(dá)。因此，miRNA的抑制可引起miRNA核酸靶的表達(dá)增加。在某些實(shí)施方案中，miRNA的抑制引起由miRNA核酸靶編碼的蛋白質(zhì)的增加。例如，在某些實(shí)施方案中，miR-222的反義抑制引起p27kipl的增加。某些令人滿意的臨床結(jié)果可通過測量血液生物標(biāo)記來評價。在某些實(shí)施方案中，給予本發(fā)明的藥物組合物可引起血液甲胎蛋白和/或血液脫Y羧基凝血酶原降低。給予本發(fā)明的藥物組合物可進(jìn)一步引起肝功能的改善，正如血液ALT和/或AST水平降低所證實(shí)的一樣。某些化合物本文提供用于治療肝癌(例如HCC)的化合物。在某些實(shí)施方案中，所述化合物包含修飾寡核苷酸。在某些這類的實(shí)施方案中，所述化合物由修飾寡核苷酸組成。在某些這類的實(shí)施方案中，所述化合物包含與互補(bǔ)鏈雜交的修飾寡核苷酸，即所述化合物包含雙鏈寡聚化合物。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸與互補(bǔ)鏈雜交形成至少一個平端。在某些這類的實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸與互補(bǔ)鏈的雜交在雙鏈寡聚化合物的各末端形成平端。在某些實(shí)施方案中，與互補(bǔ)鏈的連接核苷數(shù)相比，修飾寡核苷酸的一端包含額外的一個或多個連接核苷數(shù)。在某些實(shí)施方案中，一個或多個額外的核苷位于修飾寡核苷酸的5’端。在某些實(shí)施方案中，一個或多個額外的核苷位于修飾寡核苷酸的3’端。在某些實(shí)施方案中，一個或多個額外核苷中的核苷的至少一個核堿與靶RNA互補(bǔ)。在某些實(shí)施方案中，一個或多個額外核苷中的每個核苷的每個核堿與靶RNA互補(bǔ)。在某些實(shí)施方案中，與修飾寡核苷酸的連接核苷數(shù)相比，互補(bǔ)鏈的一端包含一個或多個額外的連接核苷。在某些實(shí)施方案中，一個或多個額外的連接核苷位于互補(bǔ)鏈的3’端。在某些實(shí)施方案中，一個或多個額外的連接核苷位于互補(bǔ)鏈的5’端。在某些實(shí)施方案中，兩個額外的連接核苷與一端連接。在某些實(shí)施方案中，一個額外的核苷與一端連接。在某些實(shí)施方案中，所述化合物包含與一個或多個部分綴合的修飾寡核苷酸，該部分提高所得到的反義寡核苷酸的活性、細(xì)胞分布或細(xì)胞攝取。在某些這類的實(shí)施方案中，該部分是膽固醇部分或脂質(zhì)部分。用于綴合的其它部分包括糖、磷脂、生物素、吩嗪、葉酸、菲啶、蒽醌、吖啶、熒光素、羅丹明、香豆素和染料。在某些實(shí)施方案中，綴合基團(tuán)與修飾寡核苷酸直接連接。在某些實(shí)施方案中，綴合基團(tuán)通過選自以下的連接部分與修飾寡核苷酸連接氨基、羥基、羧酸、巰基、不飽和(例如雙鍵或三鍵)、8_氨基-3，6-二氧雜辛酸(ADO)、4-(N-馬來酰亞胺基甲基)環(huán)己烷-1-甲酸琥珀酰亞胺酯(SMCC)、6_氨基己酸(AHEX或AHA)、取代的Cl-ClO烷基、取代或未取代的C2-C10烯基和取代或未取代的C2-C10炔基。在某些這類的實(shí)施方案中，取代基選自羥基、氨基、烷氧基、羧基、芐基、苯基、硝基、巰基、硫代烷氧基(thioalkoxy)、鹵素、烷基、芳基、烯基和炔基。在某些這類的實(shí)施方案中，所述化合物包含具有一個或多個穩(wěn)定性基團(tuán)的修飾寡核苷酸，所述穩(wěn)定性基團(tuán)與修飾寡核苷酸的一端或兩端連接以提高諸如核酸酶穩(wěn)定性等性能。穩(wěn)定性基團(tuán)中包括帽結(jié)構(gòu)(capstructure)。這些末端修飾保護(hù)修飾寡核苷酸免于外切核酸酶降解，并有助于在細(xì)胞內(nèi)傳遞和/或定位。帽可存在于5’端(5’帽)或在于3’端(3’帽)，或者可以存在于兩端。帽結(jié)構(gòu)包括例如反向脫氧無堿基帽(inverteddeoxyabasiccap)。合適的帽結(jié)構(gòu)包括4'，5’_亞甲基核苷酸、l-(i3_D-赤型呋喃糖基)核苷酸、4'_硫代核苷酸、碳環(huán)核苷酸、1，5_失水己糖醇核苷酸、L-核苷酸、α-核苷酸、修飾堿基核苷酸、二硫代磷酸酯鍵、蘇型-五醇呋喃糖基(pentofuranosyl)核苷酸、無環(huán)的3’，4'-開環(huán)核苷酸、無環(huán)的3，4_二羥基丁基核苷酸、無環(huán)3，5_二羥基戊基核苷酸、3’-3’_反向核苷酸部分、‘-3'-反向無堿基部分、3’-2’-反向核苷酸部分、3’-2’-反向無堿基部分、1，4-丁二醇磷酸酯、3’-氨基磷酸酯、己基磷酸酯、氨基己基磷酸酯、3’-磷酸酯、3’-硫代磷酸酯、二硫代磷酸酯、橋接甲基磷酸酯部分和非橋接甲基磷酸酯部分、5’-氨基-烷基磷酸酯、1，3-二氨基-2-丙基磷酸酯、3-氨基丙基磷酸酯、6-氨基己基磷酸酯、1，2-氨基十二烷基磷酸酯、羥基丙基磷酸酯、5’-5’-反向核苷酸部分、5’-5’-反向無堿基部分、5’-氨基磷酸酯、5’-硫代磷酸酯、5’-氨基、橋接5’-氨基磷酸酯和/或非橋接5’-氨基磷酸酯、硫代磷酸酯和5’-巰基部分。某些核堿序列在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸具有與miRNA或其前體互補(bǔ)的序列。本文所述的成熟miRNA的核堿序列及其相應(yīng)的莖-環(huán)序列是存在于miRBase的序列，miRBase是有關(guān)miRNA序列和注釋的在線可搜索數(shù)據(jù)庫，可參見http//microrna.sanger.ac.uk/。miRBase序列數(shù)據(jù)庫中的條目表示預(yù)測的miRNA轉(zhuǎn)錄物的發(fā)夾部分(莖-環(huán))，以及有關(guān)在成熟miRNA序列中的位置和序列的信息。數(shù)據(jù)庫中的miRNA莖-環(huán)序列不完全是前體miRNA(pre-miRNA)，在一些情況下可包括pre_miRNA和推測的初級轉(zhuǎn)錄物的一些旁側(cè)序列。本文所述的miRNA核堿序列包括miRNA的任何形式，包括MiRBase序列數(shù)據(jù)庫10.0版所披露的序列和miRBase序列數(shù)據(jù)庫的任何早期版本所披露的序列。序列數(shù)據(jù)庫版本可能導(dǎo)致給某些miRNA重新命名。例如，本文所述的10.0版中的miR-378舊稱miR_422b。序列數(shù)據(jù)庫版本可能導(dǎo)致成熟miRNA序列的變化。例如，10.0版的miR-125a-5p存在于miR-125a莖-環(huán)序列(SEQIDNO2)的第15-38個核堿上。之前數(shù)據(jù)庫版本中miR_125a存在于miR-125a莖-環(huán)序列(SEQIDNO2)的第15-37個核堿上。本發(fā)明的組合物包括與本文所述miRNA的任何核堿序列形式互補(bǔ)的修飾寡核苷酸。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸具有與miRNA或其前體互補(bǔ)的核堿序列，這就意味著修飾寡核苷酸的核堿序列在8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、30、35、40、45、50、55、60、65、70、75、80、85、90、95、100個或更多個核堿的區(qū)域內(nèi)與miRNA或其前體的互補(bǔ)序列有至少60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%、95%、97%、98%或99%同一性，或者兩個序列在嚴(yán)格雜交條件下雜交。因此，在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸的核堿序列相對于其靶miRNA或前體序列可具有一個或多個錯配的堿基對，并且能夠與其靶序列雜交。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸具有與miRNA或其前體完全互補(bǔ)的核堿序列，這就意味著修飾寡核苷酸的核堿序列在8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、30、35、40、45、50、55、60、65、70、75、80、85、90、95、100個或更多個核堿的區(qū)域內(nèi)與miRNA或其前體的互補(bǔ)序列有100%同一性。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸具有與選自以下miRNA莖-環(huán)序列的核堿序列互補(bǔ)的序列miR-21莖-環(huán)序列(SEQIDNO:1)、miR_125a莖-環(huán)序列(SEQIDNO:2)、miR-191莖-環(huán)序列(SEQIDNO:3)、miR_210莖-環(huán)序列(SEQIDNO:4)、miR_222莖-環(huán)序歹丨J(SEQIDNO5)、miR-378莖-環(huán)序列(SEQIDNO6)、miR-423莖-環(huán)序列(SEQIDNO7)和miR-638莖-環(huán)序列(SEQIDNO8)。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸具有與miRNA的核堿序列互補(bǔ)的序列，其中miRNA的核堿序列選自SEQIDNO:9、10、11、12、13、14、15和16。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸具有與miR-21莖-環(huán)序列(SEQIDNO:1)的區(qū)域互補(bǔ)的核堿序列。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸具有與SEQIDNO:1的核堿8-29區(qū)域互補(bǔ)的核堿序列。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸具有與miR-21(SEQIDNO9)的核堿序列互補(bǔ)的核堿序列。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸具有與SEQIDN0:9的核堿1-22互補(bǔ)的核堿序列。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸具有的核堿序列包含核堿序列TCAACATCAGTCTGATAAGCTA(SEQIDNO17)。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸具有的核堿序列由核堿序列TCAACATCAGTCTGATAAGCTA(SEQIDNO:17)組成。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸具有與miR_125a莖-環(huán)序列(SEQIDNO2)的區(qū)域互補(bǔ)的核堿序列。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸具有與SEQIDN0:2的核堿15-37區(qū)域互補(bǔ)的核堿序列。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸具有與SEQIDNO:2的核堿15-38區(qū)域互補(bǔ)的核堿序列。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸具有與miR-125-5p(SEQIDNO10)的核堿序列互補(bǔ)的核堿序列。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸具有與SEQIDNO10的核堿1-23互補(bǔ)的核堿序列。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸具有與SEQIDNO10的核堿1-24互補(bǔ)的核堿序列。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸具有的核堿序列包含CACAGGTTAAAGGGTCTCAGGGA(SEQIDNO:18)的核堿序列。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸具有的核堿序列由核堿序列CACAGGTTAAAGGGTCTCAGGGA(SEQIDNO:18)組成。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸具有的核堿序列由核堿序列TCACAGGTTAAAGGGTCTCAGGGA(SEQIDNO19)組成。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸具有與miR-191莖-環(huán)序列(SEQIDNO3)的區(qū)域互補(bǔ)的核堿序列。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸具有與SEQIDNO:3的核堿16-37區(qū)域互補(bǔ)的核堿序列。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸具有與SEQIDNO:3的核堿16-38區(qū)域互補(bǔ)的核堿序列。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸具有與miR-191(SEQIDNO=Il)的核堿序列互補(bǔ)的核堿序列。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸具有的核堿序列包含核堿序列AGCTGCTTTTGGGATTCCGTTG(SEQIDNO:20)。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸具有的核堿序列由核堿序列AGCTGCTTTTGGGATTCCGTTG(SEQIDNO20)組成。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸具有的核堿序列由CAGCTGCTTTTGGGATTCCGTTG(SEQIDNO21)的核堿序列組成。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸具有與miR-210莖-環(huán)序列(SEQIDNO4)的區(qū)域互補(bǔ)的核堿序列。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸具有與SEQIDNO:4的核堿66-87區(qū)域互補(bǔ)的核堿序列。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸具有與miR-210(SEQIDNO12)的核堿序列互補(bǔ)的核堿序列。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸具有的核堿序列包含核堿序列TCAGCCGCTGTCACACGCACAG(SEQIDNO:22)。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸具有的核堿序列由核堿序列TCAGCCGCTGTCACACGCACAG(SEQIDNO22)組成。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸具有與miR-222莖-環(huán)序列(SEQIDNO5)的區(qū)域互補(bǔ)的核堿序列。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸具有與SEQIDNO:5的核堿69-89區(qū)域互補(bǔ)的核堿序列。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸具有與SEQIDNO:5的核堿69-91區(qū)域互補(bǔ)的核堿序列。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸具有與miR-222(SEQIDNO13)的核堿序列互補(bǔ)的核堿序列。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸具有的核堿序列包含核堿序列ACCCAGTAGCCAGATGTAGCT(SEQIDNO:24)。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸具有的核堿序列由核堿序列ACCCAGTAGCCAGATGTAGCT(SEQIDNO24)組成。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸具有的核堿序列由核堿序列GAGACCCAGTAGCCAGATGTAGCT(SEQIDNO23)組成。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸具有與miR-378莖-環(huán)序列(SEQIDNO6)的區(qū)域互補(bǔ)的核堿序列。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸具有與SEQIDNO:6的核堿43-63區(qū)域互補(bǔ)的核堿序列。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸具有與SEQIDNO:6的核堿44-65區(qū)域互補(bǔ)的核堿序列。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸具有與miR-378(SEQIDNO14)的核堿序列互補(bǔ)的核堿序列。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸具有的核堿序列包含核堿序列CCTTCTGACTCCAAGTCCAG(SEQIDNO:25)。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸具有的核堿序列由核堿序列GGCCTTCTGACTCCAAGTCCAG(SEQIDNO26)組成。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸具有的核堿序列由核堿序列CCTTCTGACTCCAAGTCCAGT(SEQIDNO27)組成。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸具有與miR-423莖-環(huán)序列(SEQIDNO7)的區(qū)域互補(bǔ)的核堿序列。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸具有與SEQIDNO:7的核堿53-75區(qū)域互補(bǔ)的核堿序列。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸具有與SEQIDNO:7的核堿53-74區(qū)域互補(bǔ)的核堿序列。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸具有與miR-423-3p(SEQIDNO15)的核堿序列互補(bǔ)的核堿序列。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸具有的核堿序列包含核堿序列CTGAGGGGCCTCAGACCGAGCT(SEQIDNO:28)。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸具有的核堿序列由核堿序列CTGAGGGGCCTCAGACCGAGCT(SEQIDNO28)組成。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸具有的核堿序列由核堿序列TCTGAGGGGCCTCAGACCGAGCT(SEQIDNO29)組成。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸具有與miR-638莖-環(huán)序列(SEQIDNO8)的區(qū)域互補(bǔ)的核堿序列。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸具有與SEQIDNO:8的核堿16-40區(qū)域互補(bǔ)的核堿序列。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸具有與miR-638(SEQIDNO16)的核堿序列互補(bǔ)的核堿序列。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸具有的核堿序列包含核堿序列AGGCCGCCACCCGCCCGCGATCCCT(SEQIDNO:30)。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸具有的核堿序列由核堿序列AGGCCGCCACCCGCCCGCGATCCCT(SEQIDNO30)組成。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸具有與miR-181a-l莖-環(huán)序列(SEQIDNO34)的區(qū)域互補(bǔ)的核堿序列。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸具有與SEQIDN0:34的核堿24-46區(qū)域互補(bǔ)的核堿序列。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸具有與miR-181a-2莖-環(huán)序列(SEQIDNO35)的區(qū)域互補(bǔ)的核堿序列。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸具有與SEQIDNO:35的核堿39-61區(qū)域互補(bǔ)的核堿序列。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸具有與miR-181a(SEQIDNO31)的核堿序列互補(bǔ)的核堿序列。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸具有的核堿序列包含核堿序列ACTCACCGACAGCGTTGAATGTT(SEQIDNO:38)。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸具有的核堿序列由核堿序列ACTCACCGACAGCGTTGAATGTT(SEQDDNO38)組成。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸具有與miR-181a-l莖-環(huán)序列(SEQIDNO34)的區(qū)域互補(bǔ)的核堿序列。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸具有與SEQIDN0:34的核堿64-85區(qū)域互補(bǔ)的核堿序列。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸具有與miR-181a-2莖-環(huán)序列(SEQIDNO35)的區(qū)域互補(bǔ)的核堿序列。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸具有與SEQIDNO:35的核堿77-98區(qū)域互補(bǔ)的核堿序列。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸具有與miR-181a*(SEQIDNO32)的核堿序列互補(bǔ)的核堿序列。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸具有的核堿序列包含核堿序列GGTACAATCAACGGTCGATGGT(SEQDDNO:39)。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸具有的核堿序列由核堿序列GGTACAATCAACGGTCGATGGT(SEQIDNO39)組成。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸具有與miR-181b_l莖-環(huán)序列(SEQDDNO36)的區(qū)域互補(bǔ)的核堿序列。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸具有與SEQIDN0:36的核堿36-58區(qū)域互補(bǔ)的核堿序列。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸具有與miR-181b-2莖-環(huán)序列(SEQIDNO37)的區(qū)域互補(bǔ)的核堿序列。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸具有與SEQIDNO:37的核堿16-38區(qū)域互補(bǔ)的核堿序列。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸具有與miR-181b(SEQDDNO33)的核堿序列互補(bǔ)的核堿序列。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸具有的核堿序列包含核堿序列ACCCACCGACAGCAATGAATGTT(SEQDDNO:40)。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸具有的核堿序列由核堿序列ACCCACCGACAGCAATGAATGTT(SEQDDNO40)組成。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸具有的核堿序列與包含選自以下成熟miRNA的pre-miR序列的核堿序列互補(bǔ)miR_21、miR-125a_5p、miR-191、miR-210、miR-222、miR-378、miR-423-3p和miR-638。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸具有的核堿序列與包含選自以下成熟miRNA的pri-miR序列的核堿序列互補(bǔ)miR_21、miR-125a_5p、miR-191、miR-210、miR-222、miR-378、miR-423-3p和miR-638。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸具有的核堿序列與包含選自以下成熟miRNA的pri-miR序列的核堿序列互補(bǔ)miR_181a、miR_181a*和miR_181b。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸具有的核堿序列與包含選自以下成熟miRNA的pre-miR序列的核堿序列互補(bǔ)miR-181a、miR_181a*和miR_181b。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸具有的核堿序列與同選自以下miR莖-環(huán)序列的核堿序列有至少80%同一性的核堿序列互補(bǔ)=SEQIDNO:1、2、3、4、5、6、7和8。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸具有的核堿序列與同選自以下miR莖-環(huán)序列的核堿序列有至少85%、至少90%、至少92%、至少94%、至少96%、至少98%同一性或100%同一性的核堿序列互補(bǔ)SEQIDNO:1、2、3、4、5、6、7和8。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸具有的核堿序列與同miRNA的核堿序列有至少80%同一性的核堿序列互補(bǔ)，所述miRNA具有選自SEQIDNO:9、10、11、12、13、14、15和16的核堿序列。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸具有的核堿序列與同選自以下miRNA核堿序列的核堿序列有至少85%、至少90%、至少92%、至少94%、至少96%、至少98%同一性或100%同一性的核堿序列互補(bǔ)=SEQIDNO:9、10、11、12、13、14、15和16。28在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸具有的核堿序列與同選自以下miR莖-環(huán)序列的核堿序列有至少80%同一性的核堿序列互補(bǔ)SEQIDN0:34、35、36和37。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸具有的核堿序列同與選自以下miR莖-環(huán)序列的核堿序列有至少85%、至少90%、至少92%、至少94%、至少96%、至少98%同一性或100%同一性的核堿序列互補(bǔ)=SEQIDNO:34、35、36和37。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸具有的核堿序列與同miRNA的核堿序列有至少80%同一性的核堿序列互補(bǔ)，所述miRNA具有選自SEQIDNO:31、32和33的核堿序列。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸具有的核堿序列與同選自以下miRNA核堿序列的核堿序列有至少85%、至少90%、至少92%、至少94%、至少96%、至少98%同一性或100%同一性的核堿序列互補(bǔ):SEQIDNO:31、32和33。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸的核堿序列與本文所列miRNA核堿序列或其前體完全互補(bǔ)。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸具有相對于成熟miRNA或其前體的核堿序列有一個錯配的核堿序列。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸具有相對于成熟miRNA或其前體的核堿序列有兩個錯配的核堿序列。在某些這類的實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸具有相對于成熟miRNA或其前體的核堿序列錯配不超過兩個的核堿序列。在某些這類的實(shí)施方案中，錯配的核堿是連續(xù)的。在某些這類的實(shí)施方案中，錯配的核堿是不連續(xù)的。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸由等于與之互補(bǔ)的成熟miR長度的連接核苷數(shù)組成。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸的連接核苷數(shù)小于與之互補(bǔ)的成熟miRNA的長度。在某些這類的實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸的連接核苷數(shù)比與之互補(bǔ)的成熟miRNA的長度少一個。在某些這類的實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸在5’端少一個核苷。在某些這類的實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸在3’端少一個核苷。在某些這類的實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸在5’端少2個核苷。在某些這類的實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸在3’端少2個核苷。修飾寡核苷酸的連接核苷數(shù)小于miRNA的長度，其中修飾寡核苷酸的每個核堿與在miRNA的相應(yīng)位置上的每個核堿互補(bǔ)，其被視為是具有與miRNA序列的一部分完全互補(bǔ)的核堿序列的修飾寡核苷酸。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸的連接核苷數(shù)大于與之互補(bǔ)的miRNA的長度。在某些這類的實(shí)施方案中，額外核苷的核堿與miRNA莖-環(huán)序列的核堿互補(bǔ)。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸的連接核苷數(shù)比與之互補(bǔ)的miRNA的長度多一個。在某些這類的實(shí)施方案中，額外核苷位于修飾寡核苷酸的5’端。在某些這類的實(shí)施方案中，額外核苷修飾寡核苷酸的3’端。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸的連接核苷數(shù)比與之互補(bǔ)的miRNA的長度多兩個。在某些這類的實(shí)施方案中，兩個額外核苷位于修飾寡核苷酸的5’端。在某些這類的實(shí)施方案中，兩個額外核苷位于修飾寡核苷酸的3’端。在某些這類的實(shí)施方案中，一個額外核苷位于修飾寡核苷酸的5’端，另一個額外核苷位于修飾寡核苷酸的3’端。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸的一部分核堿序列與miRNA的核堿序列完全互補(bǔ)，但是整個修飾寡核苷酸與miRNA不完全互補(bǔ)。在某些這類的實(shí)施方案中，具有完全互補(bǔ)部分的修飾寡核苷酸的核苷數(shù)比miRNA的長度長。例如，由24個連接核苷構(gòu)成的修飾寡核苷酸，其中核苷123的核堿各自與長為23個核堿的miRNA的相應(yīng)位置互補(bǔ)，具有與miRNA的核堿序列完全互補(bǔ)的23個核苷部分，且與miRNA的核堿序列的總體互補(bǔ)性為約96%。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸的核堿序列與miRNA的部分核堿序列完全互補(bǔ)。例如，由22個連接核苷組成的修飾寡核苷酸，其中核苷122的核堿各自與長為23個核堿的miRNA的相應(yīng)位置互補(bǔ)，與miRNA的核堿序列的22個核堿部分完全互補(bǔ)。這類修飾寡核苷酸與整個miRNA的核堿序列的總體互補(bǔ)性約為96%，且與miRNA的22個核堿部分有100%互補(bǔ)性。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸的一部分核堿序列與miRNA或其前體的一部分核堿序列完全互補(bǔ)。在某些這類的實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸的15個連續(xù)核堿各自與miRNA或其前體的15個連續(xù)核堿互補(bǔ)。在某些這類的實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸的16個連續(xù)核堿各自與miRNA或其前體的16個連續(xù)核堿互補(bǔ)。在某些這類的實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸的17個連續(xù)核堿各自與miRNA或其前體的17個連續(xù)核堿互補(bǔ)。在某些這類的實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸的18個連續(xù)核堿各自與miRNA或其前體的18個連續(xù)核堿互補(bǔ)。在某些這類的實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸的19個連續(xù)核堿各自與miRNA或其前體的19個連續(xù)核堿互補(bǔ)。在某些這類的實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸的20個連續(xù)核堿各自與miRNA或其前體的20個連續(xù)核堿互補(bǔ)。在某些這類的實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸的22個連續(xù)核堿各自與miRNA或其前體的22個連續(xù)核堿互補(bǔ)。在某些這類的實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸的23個連續(xù)核堿各自與miRNA或其前體的23個連續(xù)核堿互補(bǔ)。在某些這類的實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸的24個連續(xù)核堿各自與miRNA或其前體的24個連續(xù)核堿互補(bǔ)。本文所記載的核堿序列，包括但不限于見于實(shí)施例和序列表中的核堿序列，與核酸的任何修飾無關(guān)。因此，由SEQIDNO限定的核酸可獨(dú)立包含對一個或多個糖部分、對一個或多個核苷間鍵和/或?qū)σ粋€或多個核堿的一種或多種修飾。盡管本文檔隨附的序列表按需要將每個核堿序列標(biāo)為“RNA”或“DNA”，實(shí)際上，這些序列可以用化學(xué)修飾的任何組合進(jìn)行修飾。本領(lǐng)域技術(shù)人員將容易地認(rèn)識到，用“RNA”或“DNA”這種命名來描述修飾寡核苷酸有些武斷。例如，包含含有2’-OH糖部分和胸腺嘧啶堿基的核苷的寡核苷酸可被描述為具有修飾糖的DNA(相對于天然DNA2’-H為2’-0H)或具有修飾堿基的RNA(相對于RNA的天然尿嘧啶為胸腺嘧啶(甲基化尿嘧啶))。因此，本文提供的核酸序列，包括但不限于序列表的核酸序列，意在包括含有天然或修飾的RNA和/或DNA的任何組合的核酸，包括但不限于具有修飾核堿的這類核酸。作為示例而非限制性的方式，具有核堿序列“ATCGATCG”的寡聚化合物包括具有這類不論修飾還是未修飾的核堿序列的任何寡聚化合物，包括但不限于包含RNA堿基的這類化合物，例如具有序列“AUCGAUCG”的化合物，和具有一些DNA堿基和一些RNA堿基例如“AUCGATCG”的化合物，以及具有其它修飾堿基例如“ATmTGAUCG”的寡聚化合物，其中meC表示在5位包含甲基的胞嘧啶堿基。本文通過Isis編號(IsisNO.)所述的核酸包含核堿序列和某些已鑒定的修飾的組合。某些修飾寡核苷酸在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸由15-30個連接核苷組成。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸由19-24個連接核苷組成。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸由21-24個連接核苷組成。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸由15個連接核苷組成。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸由16個連接核苷組成。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸由17個連接核苷30組成。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸由18個連接核苷組成。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸由19個連接核苷組成。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸由20個連接核苷組成。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸由21個連接核苷組成。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸由22個連接核苷組成。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸由23個連接核苷組成。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸由24個連接核苷組成。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸由25個連接核苷組成。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸由26個連接核苷組成。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸由27個連接核苷組成。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸由28個連接核苷組成。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸由29個連接核苷組成。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸由30個連接核苷組成。某些修飾本發(fā)明的修飾寡核苷酸包含對核堿、糖和/或核苷間鍵的一種或多種修飾。由于所需要的性質(zhì)，例如細(xì)胞攝取增加、對其它寡核苷酸或核酸靶的親和力提高和在核酸酶的存在下穩(wěn)定性提高，可以選擇優(yōu)于未修飾形式的修飾的核堿、糖和/或核苷間鍵。在某些實(shí)施方案中，本發(fā)明的修飾寡核苷酸包含一個或多個修飾核苷。在某些這類的實(shí)施方案中，修飾核苷是穩(wěn)定性核苷。穩(wěn)定性核苷的實(shí)例是糖被修飾的核苷。在某些實(shí)施方案中，修飾核苷是糖被修飾的核苷。在某些這類的實(shí)施方案中，糖被修飾的核苷可還包含天然或修飾的雜環(huán)堿基部分和/或天然或修飾的核苷間鍵，并可另包括獨(dú)立于糖修飾的修飾。在某些實(shí)施方案中，糖被修飾的核苷是2’-修飾核苷，其中糖環(huán)在天然核糖或2’-脫氧-核糖的2’碳上被修飾。在某些實(shí)施方案中，2’_修飾核苷具有雙環(huán)糖部分。在某些這類的實(shí)施方案中，雙環(huán)糖部分是α構(gòu)型的D糖。在某些這類的實(shí)施方案中，雙環(huán)糖部分是β構(gòu)型的D糖。在某些這類的實(shí)施方案中，雙環(huán)糖部分是α構(gòu)型的L糖。在某些這類的實(shí)施方案中，雙環(huán)糖部分是β構(gòu)型的L糖。在某些實(shí)施方案中，雙環(huán)糖部分在2’碳原子和4'碳原子之間包含橋基(bridgegroup)。在某些這類的實(shí)施方案中，橋基包含1-8個連接的二價基團(tuán)。在某些實(shí)施方案中，雙環(huán)糖部分包含1-4個連接的二價基團(tuán)。在某些實(shí)施方案中，雙環(huán)糖部分包含2個或3個連接的二價基團(tuán)。在某些實(shí)施方案中，雙環(huán)糖部分包含2個連接的二價基團(tuán)。在某些實(shí)施方案中，連接的二價基團(tuán)選自-0-、-S-、-N(R1)-,-C(R1)(R2)-,-C(R1)=C(R1)-,-C(R1)=N-、-C(=NR1)-,-Si(R1)(R2)-,-S(O)2-,_S(=0)-、_C(=0)-和_C(=S)-；其中每個R1和R2獨(dú)立地為H、羥基、C1-C12烷基、取代的C1-C12烷基、C2-C12烯基、取代的C2-C12烯基、C2-C12炔基、取代的C2-C12炔基、C5-C2tl芳基、取代的C5-C2tl芳基、雜環(huán)基、取代雜環(huán)基、雜芳基、取代雜芳基、C5-C7脂環(huán)基、取代的C5-C7脂環(huán)基、商素、取代氧基(-0-)、氨基、取代氨基、疊氮基、羧基、取代羧基、酰基、取代?；N、巰基、取代巰基、磺?；?S(=0)2-H)、取代磺?；?、亞磺?；?S(=0)-H)或取代亞磺酰基；且每個取代基獨(dú)立地為鹵素、C1-C12烷基、取代的c「c12烷基、C2-C12烯基、取代的C2-C12烯基、C2-C12炔基、取代的C2-C12炔基、氨基、取代氨基、酰基、取代酰基、C1-C12氨基烷基、C1-C12氨基烷氧基、取代的C1-C12氨基烷基、取代的C1-C12氨基烷氧基或保護(hù)基。在一些實(shí)施方案中，雙環(huán)糖部分在2’和4’碳原子之間被選自以下的二價基團(tuán)橋接-0-(CH2)P-、-O-CH2-,-O-CH2CH2-,-O-CH(烷基)-、-NH-(CH2)P-、_N(烷基)_(CH2)P-、-O-CH(烷基)_、-(CH(烷基))-(CH2)p-、-NH-O-(CH2)P-、-N(烷基)-O-(CH2)P-或-O-N(烷基)-(CH2)P-，其中P為1、2、3、4或5，每個烷基可被進(jìn)一步取代。在某些實(shí)施方案中，P為1、2或3。在某些實(shí)施方案中，2’-修飾核苷包含選自以下的2’-取代基鹵素、烷基、氨基、疊氮基、SH、CN、OCN、CF3>OCF3>0_、S-或N(Rm)-烷基；0_、S-或N(Rm)-烯基；0_、S-或N(Rm)-炔基；0-亞烷基-0-烷基、炔基、烷芳基、芳烷基、0-烷芳基、0-芳烷基、0(CH2)2SCH3、0-(CH2)2-0-N(Rm)(Rn)或O-CH2-C(=0)-N(Rm)(Rn)，其中每個Rm和每個Rn獨(dú)立地為H、氨基保護(hù)基或者取代或未取代的C1-Cltl烷基。這些2’-取代基可被獨(dú)立選自以下的一個或多個取代基進(jìn)一步取代羥基、氨基、烷氧基、羧基、芐基、苯基、硝基(NO2)、巰基、硫代烷氧基(S-烷基)、鹵素、烷基、芳基、烯基和炔基。在某些實(shí)施方案中，2’-修飾核苷包含選自以下的2’_取代基F、NH2、N3、0CF3、O-CH3、0(CH2)3NH2、CH2-CH=CH2^O-CH2-CH=CH2、0CH2CH20CH3、0(CH2)2SCH3、0-(CH2)2-O-N(Rm)(Rn)、-0(CH2)20(CH2)2N(CH3)2和N-取代的乙酰胺(O-CH2-C(=0)-N(Rm)(Rn)，其中每個Rm和每個Rn獨(dú)立地為H、氨基保護(hù)基或者取代或未取代的C1-Cltl烷基。在某些實(shí)施方案中，2’-修飾核苷包含選自以下的2’-取代基F、0CF3、O-CH3>OCH2CH2OCH3^2'-O(CH2)2SCH3^O-(CH2)2-O-N(CH3)2^-O(CH2)2O(CH2)2N-(CH3)2和O-CH2-C(0)-N(H)CH3。在某些實(shí)施方案中，2’-修飾核苷包含選自以下的2’-取代基F、0_013和OCH2CH2OCH3。在某些實(shí)施方案中，糖被修飾的核苷是4’-硫代修飾核苷。在某些實(shí)施方案中，糖被修飾的核苷是4’-硫代_2’-修飾核苷。4’-硫代修飾核苷具有β-D-核糖核苷，其中4’-0被4’-S置換。4’-硫代_2’-修飾核苷是2’-OH被2’-取代基置換的4’-硫代修飾核苷。合適的2，-取代基包括2，-0CH3、2，-O-(CH2)2-OCH3和2’-F。在某些實(shí)施方案中，本發(fā)明的修飾寡核苷酸包含一個或多個核苷間酸間修飾。在某些這類的實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸的每個核苷間鍵都是修飾核苷間鍵。在某些實(shí)施方案中，修飾核苷間鍵包含磷原子。在某些實(shí)施方案中，本發(fā)明的修飾寡核苷酸包含至少一個硫代磷酸酯核苷間鍵。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸的每個核苷間鍵都是硫代磷酸酯核苷間鍵。在某些實(shí)施方案中，修飾核苷間鍵不含磷原子。在某些這類的實(shí)施方案中，核苷間鍵由短鏈烷基核苷間鍵構(gòu)成。在某些這類的實(shí)施方案中，核苷間鍵由環(huán)烷基核苷間鍵構(gòu)成。在某些這類的實(shí)施方案中，核苷間鍵由混合的雜原子和烷基核苷間鍵構(gòu)成。在某些這類的實(shí)施方案中，核苷間鍵由混合的雜原子和環(huán)烷基核苷間鍵構(gòu)成。在某些這類的實(shí)施方案中，核苷間鍵由一個或多個短鏈雜原子核苷間鍵構(gòu)成。在某些這類的實(shí)施方案中，核苷間鍵由一個或多個雜環(huán)核苷間鍵構(gòu)成。在某些這類的實(shí)施方案中，核苷間鍵具有酰胺主鏈。在某些這類的實(shí)施方案中，核苷間鍵具有混合的N、0、S和CH2組成部分。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸包含一個或多個修飾核堿。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸包含一個或多個5-甲基胞嘧啶。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸的每個胞嘧啶都包含5-甲基胞嘧啶。在某些實(shí)施方案中，修飾核堿選自5-羥甲基胞嘧啶、7-脫氮鳥嘌呤和7-脫氮腺32嘌呤。在某些實(shí)施方案中，修飾核堿選自7-脫氮-腺嘌呤、7-脫氮鳥嘌呤、2-氨基吡啶和2-吡啶酮。在某些實(shí)施方案中，修飾核堿選自5-取代嘧啶、6-氮雜嘧啶及N-2、N-6和0_6取代嘌呤，包括2-氨基丙基腺嘌呤、5-丙炔基尿嘧啶和5-丙炔基胞嘧啶。在某些實(shí)施方案中，修飾核堿包含多環(huán)雜環(huán)。在某些實(shí)施方案中，修飾核堿包含三環(huán)雜環(huán)。在某些實(shí)施方案中，修飾核堿包含吩噁嗪衍生物。在某些實(shí)施方案中，吩噁嗪可被進(jìn)一步修飾形成本領(lǐng)域稱為G封條(G-clamp)的核堿。某些寡核苷酸基序用于本發(fā)明的修飾寡核苷酸的合適基序包括但不限于完全修飾、一致修飾、位置修飾和gapmer?？稍O(shè)計具有完全修飾基序(包括一致修飾基序)的修飾寡核苷酸以靶向成熟miRNA?；蛘撸稍O(shè)計具有完全修飾基序(包括一致修飾基序)的修飾寡核苷酸以靶向pri-miRNA或pre_miRNA的某些位點(diǎn)，以阻斷miRNA前體加工成成熟miRNA。具有完全修飾基序或一致修飾基序的修飾寡核苷酸是miRNA活性的有效抑制劑。在某些實(shí)施方案中，完全修飾寡核苷酸包含每個核苷上的糖修飾。在某些這類的實(shí)施方案中，多個核苷是2’-0-甲氧基乙基核苷，其余核苷是2’-氟核苷。在某些這類的實(shí)施方案中，多個核苷中的每一個都是2’-0-甲氧基乙基核苷，且多個核苷中的每一個都是雙環(huán)核苷。在某些這類的實(shí)施方案中，完全修飾寡核苷酸還包含至少一個修飾核苷間鍵。在某些這類的實(shí)施方案中，糖完全修飾的寡核苷酸的每個核苷間鍵都是修飾核苷間鍵。在某些實(shí)施方案中，糖完全修飾的寡核苷酸還包含至少一個硫代磷酸酯核苷間鍵。在某些這類的實(shí)施方案中，糖完全修飾的寡核苷酸的每個核苷間鍵都是硫代磷酸酯核苷間鍵。在某些實(shí)施方案中，完全修飾寡核苷酸在每個核苷間鍵上被修飾。在某些這類的實(shí)施方案中，完全修飾寡核苷酸的每個核苷間鍵都是硫代磷酸酯核苷間鍵。在某些實(shí)施方案中，一致修飾寡核苷酸在每個核苷上都包括同樣的糖修飾。在某些這類的實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸的每個核苷都包含2’-0-甲氧基乙基糖修飾。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸的每個核苷都包含2’-0_甲基糖修飾。在某些實(shí)施方案中，修飾寡核苷酸的每個核苷都包含2’-氟糖修飾。在某些這類的實(shí)施方案中，一致修飾寡核苷酸還包含至少一個修飾核苷間鍵。在某些這類的實(shí)施方案中，糖一致修飾的寡核苷酸的每個核苷間鍵都是修飾核苷間鍵。在某些實(shí)施方案中，糖一致修飾的寡核苷酸還包含至少一個硫代磷酸酯核苷間鍵。在某些這類的實(shí)施方案中，糖一致修飾的寡核苷酸的每個核苷間鍵都是硫代磷酸酯核苷間鍵。在某些實(shí)施方案中，一致修飾寡核苷酸始終包含同樣的核苷間鍵修飾。在某些這類的實(shí)施方案中，一致修飾寡核苷酸的每個核苷間鍵都是硫代磷酸酯核苷間鍵。表1表示與本文所述的miRNA互補(bǔ)的某些一致修飾寡核苷酸。每個核苷都包含2’-0-甲氧基乙基糖，每個核苷間鍵都是硫代磷酸酯，每個胞嘧啶都是5-甲基胞嘧啶。權(quán)利要求一種用于治療肝癌的方法，所述方法包括給予有需要的對象包含由1530個連接核苷組成的修飾寡核苷酸的化合物，其中所述修飾寡核苷酸具有與選自SEQIDNO1、2、3、4、5、6、7和8的核堿序列互補(bǔ)的核堿序列；或與同其有至少約80％同一性的序列互補(bǔ)。2.權(quán)利要求1的方法，其中所述化合物由修飾寡核苷酸組成。3.權(quán)利要求1或2的方法，其中所述肝癌是肝細(xì)胞癌。4.權(quán)利要求1-3中任一項的方法，其中所述對象是人。5.權(quán)利要求1-4中任一項的方法，其中所述修飾寡核苷酸的核堿序列與選自SEQIDNO:1、2、3、4、5、6、7和8的核堿序列的錯配不超過兩個。6.權(quán)利要求1-4中任一項的方法，其中所述修飾寡核苷酸的核堿序列與選自SEQIDNO:1、2、3、4、5、6、7和8的核堿序列的錯配不超過一個。7.權(quán)利要求1-4中任一項的方法，其中所述修飾寡核苷酸的核堿序列與選自SEQIDNO:1、2、3、4、5、6、7和8的核堿序列有一個錯配。8.權(quán)利要求1-4中任一項的方法，其中所述修飾寡核苷酸的核堿序列與選自SEQIDNO:1、2、3、4、5、6、7和8的核堿序列沒有錯配。9.權(quán)利要求1-8中任一項的方法，其中至少一個核苷間鍵是修飾核苷間鍵。10.權(quán)利要求1-9中任一項的方法，其中每個核苷間鍵是修飾核苷間鍵。11.權(quán)利要求1-10中任一項的方法，其中至少一個核苷間鍵是硫代磷酸酯核苷間鍵。12.權(quán)利要求1-11中任一項的方法，其中每個核苷間鍵都是硫代磷酸酯核苷間鍵。13.權(quán)利要求1-12中任一項的方法，其中至少一個核苷包含修飾糖。14.權(quán)利要求1-13中任一項的方法，其中多個核苷中的每一個包含修飾糖。15.權(quán)利要求1-14中任一項的方法，其中每個核苷都包含修飾糖。16.權(quán)利要求1-15中任一項的方法，其中每個核苷都包含2’-0-甲氧基乙基糖。17.權(quán)利要求1-15中任一項的方法，其中多個核苷中的每一個都包含2’-0_甲氧基乙基糖，且多個核苷中的每一個都包含2’-氟糖修飾。18.權(quán)利要求15的方法，其中每個修飾糖獨(dú)立選自2’-0-甲氧基乙基糖、2’-氟糖、0-甲基糖或雙環(huán)糖部分。19.權(quán)利要求1-18中任--項的方法，其中所述修飾3S核苷酉I由15個連接核苷組成。20.權(quán)利要求1-18中任--項的方法，其中所述修飾3S核苷酉I由16個連接核苷組成。21.權(quán)利要求1-18中任--項的方法，其中所述修飾3S核苷酉I由17個連接核苷組成。22.權(quán)利要求1-18中任--項的方法，其中所述修飾3S核苷酉I由18個連接核苷組成。23.權(quán)利要求1-18中任--項的方法，其中所述修飾3S核苷酉δ由19個連接核苷組成。24.權(quán)利要求1-18中任--項的方法，其中所述修飾3S核苷酉I由20個連接核苷組成。25.權(quán)利要求1-18中任--項的方法，其中所述修飾3S核苷酉I由21個連接核苷組成。26.權(quán)利要求1-18中任--項的方法，其中所述修飾3S核苷酉I由22個連接核苷組成。27.權(quán)利要求1-18中任--項的方法，其中所述修飾3S核苷酉I由23個連接核苷組成。28.權(quán)利要求1-18中任--項的方法，其中所述修飾3S核苷酉I由24個連接核苷組成。29.權(quán)利要求1-28中任--項的方法，其中所述給藥包含靜脈內(nèi)給藥、皮下給藥、腫瘤內(nèi)給藥或化療栓塞。30.權(quán)利要求1-29中任一項的方法，還包括給予至少一種另外的療法。31.權(quán)利要求30的方法，其中至少一種另外的療法是化療藥物。32.權(quán)利要求31的方法，其中所述化療藥物選自5-氟尿嘧啶、吉西他濱、多柔比星、絲裂霉素C、索拉非尼、依托泊苷、卡鉬、表柔比星、伊立替康和奧沙利鉬。33.權(quán)利要求30-32中任一項的方法，其中至少一種另外的療法與所述修飾寡核苷酸同時給予。34.權(quán)利要求30-32中任一項的方法，其中給予至少一種另外的療法比給予所述修飾寡核苷酸較不頻繁。35.權(quán)利要求30-32中任一項的方法，其中給予至少一種另外的療法比給予所述修飾寡核苷酸更頻繁。36.權(quán)利要求1-35中任一項的方法，其中所述修飾寡核苷酸按選自以下的劑量給予50mg、75mg、lOOmg、125mg、150mg、175mg、200mg、225mg、250mg、275mg、300mg、325mg、350mg、375mg、400mg、425mg、450mg、475mg、500mg、525mg、550mg、575mg、600mg、625mg、650mg、675mg、700mg、725mg、750mg、775mg和800mg。37.權(quán)利要求1-36中任一項的方法，其中所述修飾寡核苷酸每天一次、每周一次、每兩周一次、每三周一次或每四周一次給予。38.權(quán)利要求1-37中任一項的方法，其中所述給藥導(dǎo)致腫瘤大小減小。39.權(quán)利要求1-38中任一項的方法，其中所述給藥引起腫瘤數(shù)減少。40.權(quán)利要求1-39中任一項的方法，其中所述給藥防止腫瘤大小增大。41.權(quán)利要求1-40中任一項的方法，其中所述給藥防止腫瘤數(shù)增加。42.權(quán)利要求1-41中任一項的方法，其中所述給藥阻止轉(zhuǎn)移進(jìn)程。43.權(quán)利要求1-42中任一項的方法，其中所述給藥減慢或中止轉(zhuǎn)移進(jìn)程。44.權(quán)利要求1-43中任一項的方法，其中所述給藥延長對象的總體生存時間。45.權(quán)利要求1-44中任一項的方法，其中所述給藥延長對象的無進(jìn)展生存期。46.權(quán)利要求1-45中任一項的方法，還包括選出患有肝病變的對象。47.權(quán)利要求1-46中任一項的方法，還包括選出患有血清甲胎蛋白升高或血清脫_Y_羧基凝血酶原升高的對象。48.權(quán)利要求1-47中任一項的方法，其中所述給藥降低血清甲胎蛋白或血清脫-γ-羧基凝血酶原。49.權(quán)利要求1-48中任一項的方法，還包括選出患有肝功能異常的對象。50.權(quán)利要求1-49中任一項的方法，其中所述給藥改善對象的肝功能。51.一種化合物，所述化合物包含由15-30個連接核苷組成的修飾寡核苷酸，具有與選自SEQIDNO:1、2、3、4、5、6、7和8的核堿序列互補(bǔ)的核堿序列；或與同其有至少約80%同一性的序列互補(bǔ)。52.權(quán)利要求51的化合物，其中所述化合物由修飾寡核苷酸組成。53.權(quán)利要求51或52的化合物，其中所述修飾寡核苷酸與選自SEQIDNO:1、2、3、4、5、6、7和8的序列的錯配不超過兩個。54.權(quán)利要求51或52的化合物，其中所述修飾寡核苷酸與選自SEQIDNO:1、2、3、4、5、6、7和8的序列的錯配不超過一個。55.權(quán)利要求51或52的化合物，其中所述修飾寡核苷酸與選自SEQIDNO:1、2、3、4、'5、6、7和8的序列有一個錯配。56.權(quán)利要求51或52的化合物，其中所述修飾寡核苷酸與選自SEQIDNO:1、2、3、4、5、6、7和8的序列沒有錯配。57.權(quán)利要求51-56中任一項的化合物，其中至少一個核苷間鍵是修飾核苷間鍵。58.權(quán)利要求51-57中任一項的化合物，其中每個核苷間鍵是修飾核苷間鍵。59.權(quán)利要求51-58中任一項的化合物，其中至少一個核苷間鍵是硫代磷酸酯核苷間鍵。60.權(quán)利要求51-59中任一項的化合物，其中每個核苷間鍵都是硫代磷酸酯核苷間鍵。61.權(quán)利要求51-60中任一項的化合物，其中至少一個核苷包含修飾糖。62.權(quán)利要求51-61中任一項的化合物，其中多個核苷中的每一個都包含修飾糖。63.權(quán)利要求51-62中任一項的化合物，其中每個核苷都包含修飾糖。64.權(quán)利要求51-63中任一項的化合物，其中每個核苷都包含2’-0-甲氧基乙基糖。65.權(quán)利要求51-63中任一項的化合物，其中多個核苷中的每一個都包含2’-0-甲氧基乙基糖，且多個核苷中的每一個都包含2’-氟糖。66.權(quán)利要求62或63的化合物，其中每個修飾糖都獨(dú)立選自2’-0-甲氧基乙基糖、2’_氟糖、2’-0-甲基糖或雙環(huán)糖部分。67.權(quán)利要求51-66中任一項的化合物，其中至少一個核苷包含修飾核堿。68.權(quán)利要求67的化合物，其中所述修飾核堿是5-甲基胞嘧啶。69.權(quán)利要求51-68中任一項的化合物，其中至少一個核苷包含胞嘧啶，其中所述胞嘧啶是5-甲基胞嘧啶。70.權(quán)利要求69的化合物，其中每個胞嘧啶都是5-甲基胞嘧啶。71.權(quán)利要求51-70中任一項的化合物，其中所述修飾寡核苷酸由15個連接核苷組成。72.權(quán)利要求51-70中任一項的化合物，其中所述修飾寡核苷酸由16個連接核苷組成。73.權(quán)利要求51-70中任一項的化合物，其中所述修飾寡核苷酸由17個連接核苷組成。74.權(quán)利要求51-70中任一項的化合物，其中所述修飾寡核苷酸由18個連接核苷組成。75.權(quán)利要求51-70中任一項的化合物，其中所述修飾寡核苷酸由19個連接核苷組成。76.權(quán)利要求51-70中任一項的化合物，其中所述修飾寡核苷酸由20個連接核苷組成。77.權(quán)利要求51-70中任一項的化合物，其中所述修飾寡核苷酸由21個連接核苷組成。78.權(quán)利要求51-70中任一項的化合物，其中所述修飾寡核苷酸由22個連接核苷組成。79.權(quán)利要求51-70中任一項的化合物，其中所述修飾寡核苷酸由23個連接核苷組成。80.權(quán)利要求51-70中任一項的化合物，其中所述修飾寡核苷酸由24個連接核苷組成。81.一種用于治療肝癌的方法，所述方法包括給予有需要的對象包含由15-30個連接核苷組成的修飾寡核苷酸的化合物，其中所述修飾寡核苷酸具有的核堿序列包含選自以下核堿序列中所記載的核堿序列的至少15個連續(xù)核堿SEQIDNO17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29和30。82.權(quán)利要求81的方法，其中所述化合物由修飾寡核苷酸組成。83.權(quán)利要求81或82的方法，其中所述肝癌是肝細(xì)胞癌。84.權(quán)利要求81-83中任一項的方法，其中所述對象是人。85.權(quán)利要求81-84中任一項的方法，其中所述修飾寡核苷酸具有的核堿序列包含選自以下核堿序列中所記載的核堿序列的至少16個連續(xù)核堿SEQIDNO17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29和30。86.權(quán)利要求81-84中任一項的方法，其中所述修飾寡核苷酸具有的核堿序列包含選自以下核堿序列中所記載的核堿序列的至少17個連續(xù)核堿SEQIDNO17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29和30。87.權(quán)利要求81-84中任一項的方法，其中所述修飾寡核苷酸具有的核堿序列包含選自以下核堿序列中所記載的核堿序列的至少18個連續(xù)核堿SEQIDNO17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29和30。88.權(quán)利要求81-84中任一項的方法，其中所述修飾寡核苷酸具有的核堿序列包含選自以下核堿序列中所記載的核堿序列的至少19個連續(xù)核堿SEQIDNO17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29和30。89.權(quán)利要求81-84中任一項的方法，其中所述修飾寡核苷酸具有的核堿序列包含選自以下核堿序列中所記載的核堿序列的至少20個連續(xù)核堿SEQIDNO17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29和30。90.權(quán)利要求81-84中任一項的方法，其中所述修飾寡核苷酸具有的核堿序列包含選自以下核堿序列中所記載的核堿序列的至少21個連續(xù)核堿SEQIDNO17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29和30。91.權(quán)利要求81-84中任一項的方法，其中所述修飾寡核苷酸具有的核堿序列包含選自以下核堿序列中所記載的核堿序列的至少22個連續(xù)核堿SEQIDNO17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29和30。92.權(quán)利要求81-84中任一項的方法，其中所述修飾寡核苷酸具有的核堿序列包含核堿序列選自以下核堿序列中所記載的至少23個連續(xù)核堿SEQIDNO17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29和30。93.權(quán)利要求81-84中任一項的方法，其中所述修飾寡核苷酸具有的核堿序列由選自SEQIDNO17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29和30中所記載的核堿序列的核堿序列組成。94.權(quán)利要求81-93中任一項的方法，其中所述化合物由修飾寡核苷酸組成。95.權(quán)利要求81-94中任一項的方法，其中至少一個核苷間鍵是修飾核苷間鍵。96.權(quán)利要求81-95中任一項的方法，其中每個核苷間鍵都是修飾核苷間鍵。97.權(quán)利要求81-96中任一項的方法，其中至少一個核苷間鍵是硫代磷酸酯核苷間鍵。98.權(quán)利要求81-97中任一項的方法，其中每個核苷間鍵都是硫代磷酸酯核苷間鍵。99.權(quán)利要求81-98中任一項的方法，其中至少一個核苷包含修飾糖。100.權(quán)利要求81-99中任一項的方法，其中多個核苷中的每一個都包含修飾糖。101.權(quán)利要求81-100中任一項的方法，其中每個核苷都包含修飾糖。102.權(quán)利要求81-101中任一項的方法，其中每個核苷都包含2’-0-甲氧基乙基糖。103.權(quán)利要求81-102中任一項的方法，其中多個核苷中的每一個都包含2’-0-甲氧基乙基糖，且多個核苷中的每一個都包含2’-氟糖。104.權(quán)利要求100或101的方法，其中每個修飾糖都獨(dú)立選自2’-0-甲氧基乙基糖、2’_氟糖、2’-0-甲基糖或雙環(huán)糖部分。105.權(quán)利要求81-104中任一項的方法，其中至少一個核苷包含修飾核堿。106.權(quán)利要求81-105中任一項的方法，其中所述修飾核堿是5-甲基胞嘧啶。107.權(quán)利要求81-106中任一項的方法，其中至少一個核苷包含胞嘧啶，其中所述胞嘧啶是5-甲基胞嘧啶。108.權(quán)利要求81-107中任一項的方法，其中每個胞嘧啶都是5-甲基胞嘧啶。109.權(quán)利要求81-108中任一項的方法，其中所述給藥包括靜脈內(nèi)給藥、皮下給藥、腫瘤內(nèi)給藥或栓塞。110.權(quán)利要求81-109中任一項的方法，其還包括給予至少一種另外的療法。111.權(quán)利要求110中的方法，其中至少一種另外的療法是化療藥物。112.權(quán)利要求111的方法，其中所述化療藥物選自5-氟尿嘧啶、吉西他濱、多柔比星、絲裂霉素C、索拉非尼、依托泊苷、卡鉬、表柔比星、伊立替康和奧沙利鉬。113.權(quán)利要求110-112中任一項的方法，其中至少一種另外的療法與所述寡核苷酸同時給予。114.權(quán)利要求110-112中任一項的方法，其中給予至少一種另外的療法比給予所述寡核苷酸較不頻繁。115.權(quán)利要求110-112中任一項的方法，其中給予至少一種另外的療法比給予所述寡核苷酸更頻繁。116.權(quán)利要求81-115中任一項的方法，其中所述修飾寡核苷酸按選自以下的劑量給予50mg、75mg、lOOmg、125mg、150mg、175mg、200mg、225mg、250mg、275mg、300mg、325mg、350mg、375mg、400mg、425mg、450mg、475mg、500mg、525mg、550mg、575mg、600mg、625mg、650mg、675mg、700mg、725mg、750mg、775mg禾口800mgo117.權(quán)利要求81-116中任一項的方法，其中所述修飾寡核苷酸每天一次、每周一次、每兩周一次、每三周一次或每四周一次給予。118.權(quán)利要求81-117中任一項的方法，其中所述給藥導(dǎo)致腫瘤大小減小。119.權(quán)利要求81-118中任一項的方法，其中所述給藥引起腫瘤數(shù)減少。120.權(quán)利要求81-119中任一項的方法，其中所述給藥防止腫瘤大小增大。121.權(quán)利要求81-120中任一項的方法，其中所述給藥防止腫瘤數(shù)增加。122.權(quán)利要求81-121中任一項的方法，其中所述給藥阻止轉(zhuǎn)移進(jìn)程。123.權(quán)利要求81-122中任一項的方法，其中所述給藥減慢轉(zhuǎn)移進(jìn)程。124.權(quán)利要求81-123中任一項的方法，其中給藥延長動物的總體生存時間。125.權(quán)利要求81-124中任一項的方法，其中給藥延長動物的無進(jìn)展生存期。126.權(quán)利要求81-125中任一項的方法，還包含選出患有肝病變的動物。127.權(quán)利要求81-126中任一項的方法，還包括選出患有血清甲胎蛋白升高或血清脫_Y_羧基凝血酶原升高的動物。128.權(quán)利要求81-127中任一項的方法，其中所述給藥降低血清甲胎蛋白或血清脫-Y-羧基凝血酶原。129.權(quán)利要求81-128中任一項的方法，還包括選出患有肝功能異常的動物。130.權(quán)利要求81-129中任一項的方法，其中給藥改善動物的肝功能。131.一種化合物，所述化合物包含由15-30個連接核苷組成的修飾寡核苷酸，并且具有的核堿序列包含選自以下核堿序列中所記載的核堿序列的至少15個連續(xù)核堿SEQIDNO17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29和30。132.權(quán)利要求131的化合物，其中所述修飾寡核苷酸具有的核堿序列包含選自以下核堿序列中所記載的核堿序列的至少16個連續(xù)核堿SEQIDNO17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29和30。133.權(quán)利要求131的化合物，其中所述修飾寡核苷酸具有的核堿序列包含選自以下核堿序列中所記載的核堿序列的至少17個連續(xù)核堿SEQIDNO17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29和30。134.權(quán)利要求131的化合物，其中所述修飾寡核苷酸具有的核堿序列包含選自以下核堿序列中所記載的核堿序列的至少18個連續(xù)核堿SEQIDNO17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29和30。135.權(quán)利要求131的化合物，其中所述修飾寡核苷酸具有的核堿序列包含選自以下核堿序列中所記載的核堿序列的至少19個連續(xù)核堿SEQIDNO17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29和30。136.權(quán)利要求131的化合物，其中所述修飾寡核苷酸具有的核堿序列包含選自以下核堿序列中所記載的核堿序列的至少20個連續(xù)核堿SEQIDNO17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29和30。137.權(quán)利要求131的化合物，其中所述修飾寡核苷酸具有的核堿序列包含選自以下核堿序列中所記載的核堿序列的至少21個連續(xù)核堿SEQIDNO17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29和30。138.權(quán)利要求131的化合物，其中所述修飾寡核苷酸具有的核堿序列包含選自以下核堿序列中所記載的核堿序列的至少22個連續(xù)核堿SEQIDNO17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29和30。139.權(quán)利要求131的化合物，其中所述修飾寡核苷酸具有的核堿序列包含選自以下核堿序列中所記載的核堿序列的至少23個連續(xù)核堿SEQIDNO17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29和30。140.權(quán)利要求131的化合物，其中所述修飾寡核苷酸具有的核堿序列由選自SEQIDNO17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29和30中所記載的核堿序列的核堿序列組成。141.權(quán)利要求131-140中任一項的化合物，其中所述化合物由修飾寡核苷酸組成。142.權(quán)利要求131-141中任一項的化合物，其中至少一個核苷間鍵是修飾核苷間鍵。143.權(quán)利要求131-142中任一項的化合物，其中每個核苷間鍵都是修飾核苷間鍵。144.權(quán)利要求131-143中任一項的化合物，其中至少一個核苷間鍵是硫代磷酸酯核苷間鍵。145.權(quán)利要求131-144中任一項的化合物，其中每個核苷間鍵都是硫代磷酸酯核苷間鍵。146.權(quán)利要求131-145中任一項的化合物，其中至少一個核苷包含修飾糖。147.權(quán)利要求131-146中任一項的化合物，其中多個核苷中的每一個都包含修飾糖。148.權(quán)利要求131-147中任一項的化合物，其中每個核苷都包含修飾糖。149.權(quán)利要求131-148中任一項的化合物，其中每個核苷都包含2，-0-甲氧基乙基糖。150.權(quán)利要求131-149中任一項的化合物，其中多個核苷中的每一個都包含2’-0_甲氧基乙基，多個核苷中的每一個都包含2’-氟糖。151.權(quán)利要求147或148的化合物，其中每個修飾糖都獨(dú)立選自2’-0-甲氧基乙基糖、2’_氟糖、2’-0-甲基糖或雙環(huán)糖部分。152.權(quán)利要求131-151中任一項的化合物，其中至少一個核苷包含修飾核堿。153.權(quán)利要求152中任一項的化合物，其中所述修飾核堿是5-甲基胞嘧啶。154.權(quán)利要求131-153中任一項的化合物，其中至少一個核苷包含胞嘧啶，其中所述胞嘧啶是5-甲基胞嘧啶。155.權(quán)利要求154的化合物，其中每個胞嘧啶都是5-甲基胞嘧啶。156.—種藥物組合物，所述藥物組合物包含權(quán)利要求51-80中任一項的化合物或其鹽和藥學(xué)上可接受的載體或稀釋劑。157.權(quán)利要求156的藥物組合物，其中所述化合物由修飾寡核苷酸組成。158.—種藥物組合物，所述藥物組合物包含權(quán)利要求131-155中任一項的化合物或其鹽和藥學(xué)上可接受的載體或稀釋劑。159.權(quán)利要求158的藥物組合物，其中所述化合物由修飾寡核苷酸組成。160.權(quán)利要求1-50中任一項的方法，其中所述修飾寡核苷酸具有的核堿序列與選自以下的核堿序列互補(bǔ)SEQIDNO:1的核堿8-29區(qū)域；SEQIDNO:2的核堿15-37區(qū)域；SEQIDNO2的核堿15-38區(qū)域；SEQIDNO3的核堿16-37區(qū)域；SEQIDNO4的核堿66-87區(qū)域；SEQIDNO5的核堿69-89區(qū)域；SEQIDNO5的核堿69-91區(qū)域；SEQIDNO6的核堿43-63區(qū)域；SEQIDNO6的核堿44-65區(qū)域；SEQIDNO7的核堿53-75區(qū)域；SEQIDNO7的核堿53-74區(qū)域；和SEQIDNO8的核堿16-40區(qū)域。161.權(quán)利要求1-50中任一項的方法，其中所述修飾寡核苷酸具有的核堿序列與選自以下核堿序列中所記載的核堿序列互補(bǔ)SEQIDNO9、10、11、12、13、14、15和16。162.權(quán)利要求51-80中任一項的化合物，其中所述修飾寡核苷酸具有的核堿序列與選自以下核堿序列互補(bǔ):SEQIDNO:1的核堿8-29區(qū)域；SEQIDNO2的核堿15-37區(qū)域；SEQIDNO2的核堿15-38區(qū)域；SEQIDNO3的核堿16-37區(qū)域；SEQIDNO4的核堿66-87區(qū)域；SEQIDNO5的核堿69-89區(qū)域；SEQIDNO5的核堿69-91區(qū)域；SEQIDNO6的核堿43-63區(qū)域；SEQIDNO6的核堿44-65區(qū)域；SEQIDNO7的核堿53-75區(qū)域；SEQIDNO7的核堿53-74區(qū)域；和SEQIDNO8的核堿16-40區(qū)域。163.權(quán)利要求51-80中任一項的化合物，其中所述修飾寡核苷酸具有的核堿序列與選自SEQIDNO9、10、11、12、13、14、15和16的核堿序列中所記載的核堿序列互補(bǔ)。164.一種用于治療二惡英誘發(fā)的肝癌的方法，所述方法包括給予有需要的對象包含由15-30個連接核苷組成的修飾寡核苷酸的化合物，其中所述修飾寡核苷酸具有的核堿序列與選自SEQIDNO:31、32、33、34、35、36、37、38、39或40的序列互補(bǔ)；或與同其有至少約80%同一性的序列互補(bǔ)。165.一種用于預(yù)防二惡英誘發(fā)的肝癌的方法，所述方法包括給予有需要的對象包含由15-30個連接核苷組成的修飾寡核苷酸的化合物，其中所述修飾寡核苷酸具有的核堿序列與選自SEQIDNO:31、32、33、34、35、36、37、38、39或40的序列互補(bǔ)；或與同其有至少約80%同一性的序列互補(bǔ)。166.一種用于預(yù)防二惡英誘發(fā)的肝癌的方法，所述方法包括給予有需要的對象包含由15-30個連接核苷組成的修飾寡核苷酸的化合物，其中所述修飾寡核苷酸具有的核堿序列包含選自SEQIDNO38、39和40的核堿序列所記載的核堿序列的至少15個連續(xù)核堿；或與之有至少約80%同一性。167.權(quán)利要求164-166中任一項的方法，其中所述二惡英誘發(fā)的肝癌是肝細(xì)胞癌。168.權(quán)利要求164-167中任一項的方法，其中所述對象是人。169.權(quán)利要求164-168中任一項的方法，其中所述給藥包括靜脈內(nèi)給藥、皮下給藥、腫瘤內(nèi)給藥或化療栓塞。全文摘要本文提供用于治療肝癌的方法。這些方法包括給予包含修飾寡核苷酸的化合物，其中所述修飾寡核苷酸靶向miRNA。本文還提供用于治療肝癌的組合物。這類組合物包括包含修飾寡核苷酸的化合物，其中所述修飾寡核苷酸靶向miRNA。某些miRNA被鑒定為在肝癌(例如肝細(xì)胞癌)中過量表達(dá)，因此被選擇為由修飾寡核苷酸靶向。此外，某些miRNA被鑒定為在暴露于二惡英的肝細(xì)胞癌細(xì)胞中過量表達(dá)，因此被選擇為由修飾寡核苷酸靶向。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)反義抑制這些miRNA中的某一些將抑制細(xì)胞增殖和誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。文檔編號C12N15/113GK101980712SQ200880121316公開日2011年2月23日申請日期2008年10月29日優(yōu)先權(quán)日2007年10月29日發(fā)明者A·查朱特,C·F·本內(nèi)特,C·埃索,E·G·馬庫森,N·耶魯沙爾米申請人:雷古拉斯治療公司;羅塞塔金諾米克斯有限公司