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      一種小麥抗條銹病相關(guān)的乙酰輔酶a合成酶基因的制作方法

      文檔序號:571890閱讀:316來源:國知局
      專利名稱:一種小麥抗條銹病相關(guān)的乙酰輔酶a合成酶基因的制作方法
      技術(shù)領(lǐng)域
      本發(fā)明屬于植物基因工程技術(shù)領(lǐng)域,特別涉及一種小麥抗條銹病相關(guān)的 乙酰輔酶A合成酶基因。
      背景技術(shù)
      小麥條銹病是小麥生產(chǎn)的主要病害之一,嚴(yán)重影響小麥高產(chǎn)穩(wěn)產(chǎn);盡管 在預(yù)測預(yù)報基礎(chǔ)上適時的化學(xué)防治可以有效控制條銹病的危害,但是化學(xué)防 治帶來的環(huán)境污染和生態(tài)破壞已引起廣泛關(guān)注。多年來的實踐證明利用抗銹 小麥品種是控制小麥條銹病,提高小麥產(chǎn)量最經(jīng)濟(jì)有效的方法。但是,小麥 條銹病菌種變異快,抗病品種常因病菌的適應(yīng)而喪失抗性,因而獲得可靠、 長效的小麥條銹病抗性是小麥育種和病理研究的核心。
      隨著分子生物學(xué)相關(guān)技術(shù)的發(fā)展,從分子水平上了解作物抗病的分子機(jī) 制,尋找新的抗病基因,構(gòu)建新的作物抗病策略已成為作物抗病性研究的重 要內(nèi)容。在小麥抗銹病方面,近年來在新的抗病基因資源的發(fā)現(xiàn)、鑒定抗性 基因的遺傳分析及分子標(biāo)記定位等方面開展了大量工作。如許多小麥的抗條 銹病基因被成功標(biāo)記,并已用于小麥抗條銹病品種的標(biāo)記輔助選育,這些研 究為揭示小麥抗條銹病的分子基礎(chǔ),利用遺傳工程手段改良小麥的抗條銹性, 建立一種新型的長期、有效、經(jīng)濟(jì)和安全的小麥條銹病控制策略和技術(shù)體系 奠定了良好的基礎(chǔ)。
      然而,小麥抗條銹病分子基礎(chǔ)研究仍然比較薄弱,至今抗病基因已得到 克隆只有YrlO和Yr36(NCBI;Fu等,2009,Science)。因此,小麥抗條銹病分 子抗病機(jī)制和基因表達(dá)的研究仍應(yīng)加強(qiáng)
      發(fā)明內(nèi)容
      本發(fā)明解決的問題在于提供一種小麥抗條銹病相關(guān)的乙酰輔酶A合成酶 基因。
      所述的小麥抗條銹病相關(guān)的乙酰輔酶A合成酶基因,該基因的cDNA序 列全長為1619bp,其核苷酸序列如SEQ.ID.NO.l所示,其中,1 136bp為5' 非翻譯區(qū),137 1432bp編碼431個氨基酸,1433 1619bp為3'非翻譯區(qū)。 所述的137 1432bp編碼的氨基酸序列如SEQ.ID.NO.2所示。 本發(fā)明公開的乙酰輔酶A合成酶基因是篩選自小麥抗條銹病種質(zhì)陜麥 139受條銹菌條中32誘導(dǎo)的cDNA文庫;對cDNA文庫中所獲ESTs標(biāo)簽進(jìn) 行了大量的隨機(jī)測序,篩選獲得了小麥抗條銹病乙酰輔酶A合成酶基因同源 基因S239的部分序列,進(jìn)而利用RT-PCR和電子克隆技術(shù)相結(jié)合,獲得該基 因的cDNA序列。
      本發(fā)明中對乙酰輔酶A合成酶基因的RT-PCR表達(dá)模式分析表明,該基 因在正常情況下幾乎不表達(dá),在條中32脅迫后24h即可誘導(dǎo)表達(dá),72h表達(dá) 量達(dá)到最大,隨后第4天表達(dá)急劇下降,7-13天再次上升至一定水平。
      本發(fā)明提供的乙酰輔酶A合成酶基因與小麥抗條銹病密切相關(guān),乙酰輔 酶A合成酶基因?qū)τ谛←溈箺l銹必不可少;鑒于乙酰輔酶A合成酶基因是調(diào) 節(jié)生物體基因表達(dá)的關(guān)鍵基因,其決定了基因翻譯的起始密碼子的識別,因 此,乙酰輔酶A合成酶基因是作為抗病性相關(guān)的必要的控制類基因,是小麥
      抗條銹病的保守的因素。
      本發(fā)明從抗條銹優(yōu)質(zhì)種質(zhì)陜麥139克隆到的小麥乙酰輔酶A合成酶基因
      為改良禾本科作物的抗條銹性提供了更好的選擇,便于應(yīng)用到植物抗條銹性 的改良,有效地提高植物的抗病性。


      圖1是擬南芥、水稻和小麥乙酰輔酶A合成酶基因氨基酸序列的進(jìn)化樹 圖;其中,進(jìn)化樹的排列由上到下依次為小麥、水稻、棉花、擬南芥和大麥;
      圖2是擬南芥、水稻和小麥乙酰輔酶A合成酶基因氨基酸序列的多重比 較圖3是抗條銹相關(guān)調(diào)控基因乙酰輔酶A合成酶基因在條中32侵染后不 同時期表達(dá)模式的RT-PCR分析圖4是利用大麥條斑病毒載體誘導(dǎo)抗條銹病小麥種質(zhì)陜麥139乙酰輔酶 A合成酶基因沉默后,RT-PCR檢測基因表達(dá)結(jié)果圖。
      具體實施例方式
      本發(fā)明通過對抗條銹病優(yōu)質(zhì)種質(zhì)陜麥139在生物脅迫條件下相關(guān)基因進(jìn) 行ESTs篩選,以獲得抗條銹病病程相關(guān)的基因。因為當(dāng)受到生物脅迫時, 與抗條銹病相關(guān)的基因的表達(dá)與脅迫前會存在較大的差異,主要表現(xiàn)在作物 感應(yīng)外界環(huán)境變化并且產(chǎn)生一系列的生理生化反應(yīng)以適應(yīng)生存條件的變化, 然而生物體的任何變化是在基因表達(dá)的基礎(chǔ)上完成的。因此,利用抑制減法 雜交(SSH)技術(shù)消減未脅迫狀態(tài)基因表達(dá)背景,從而可以篩選、克隆參與 脅迫后病程相關(guān)的基因。本發(fā)明所選用的陜麥B9 (任志龍、吉萬全、張宏, 2007年5期,中國種業(yè))為小麥抗條銹病種質(zhì),對目前流行的最新強(qiáng)毒性條 銹病生理小種條中32具有免疫抗性。
      下面對本發(fā)明做詳細(xì)的說明
      1、小麥抗條銹相關(guān)的乙酰輔酶A合成酶基因的克隆 a、小麥條銹菌脅迫cDNA文庫的構(gòu)建
      本發(fā)明通過抑制減法雜交(SSH)技術(shù)構(gòu)建了小麥抗條銹病種質(zhì)陜麥139 幼苗葉片受條銹菌條中32(萬安民等,植物保護(hù)學(xué)報,2003年4期;具體由 西北農(nóng)林科技大學(xué)植保學(xué)院提供)生理小種侵染誘導(dǎo)48小時后的cDNA文 庫;SSH技術(shù)構(gòu)建cDNA文庫的過程見張宏等,2008,西北植物學(xué)報,28: 0228-0232。b、 cDNA文庫序列篩選
      對上述cDNA文庫進(jìn)行大規(guī)模表達(dá)序列標(biāo)簽(ESTs)測定及分析,ESTs (Expressed Sequence tags )是從已建好的cDNA庫中隨機(jī)取出 一批(84個) 克隆,從5'末端或3'末端對插入的cDNA片段進(jìn)行一輪單向自動測序, 所獲得的約90-500bp的一批cDNA序列。
      分析上述cDNA文庫的ESTs測序結(jié)果,篩選獲得一條長度為216bp的 與乙酰輔酶A合成酶基因(克隆號S239, GenBank收錄號EL773064)同源 的EST,命名為EST-S239;所述EST-S239序列為SEQ.ID.NO.l所示全序列 當(dāng)中173 388bp的序列
      tattgatatccaatgcgagcattatctgtctcattgcaggtgtggaccgg cttcttaact ctgtaaacgagcggctggaggaaacagacg tttatatgtcttaccttcct cttgctcata tctttgaccgagttgtggaagagctgtttatgttccatggtgcatctatt ggattttggc gtggggatgt taagttactagttgaggata ttggt
      上述EST序列與水稻的長鏈脂肪酸輔酶A基因(BAD72330.1 , putative acyl-CoAsynthetase)編碼的氨基酸相比,具有95%的同源性,而同是麥類作 物,大麥和小麥的酰基輔酶A合成酶的相似性只有70Q/。,如圖l所示的不同 植物輔酶A基因編碼氨基酸序列的進(jìn)化樹分析圖。
      c、 小麥乙酰輔酶A合成酶基因的cDNA克隆
      根據(jù)小麥Unigene(http:〃www.ncbi.nlm.nih.gov/UniGene)基因簇Ta6915設(shè) 計引物,unigene是指很多具有一定同源關(guān)系的基因片段群,由于生物之間具 有一定得同源進(jìn)化關(guān)系,此關(guān)系可為研究提供參考和指示方向;在設(shè)計引物 對時,引物對之一來源于已知的S239序列,之二根據(jù)unigene的猜測體而設(shè) 計組成引物對;利用Primer3在線設(shè)計了以下分別用來擴(kuò)增小麥乙酰輔酶A 合成酶基因中EST-S239兩端序列的兩對引物
      S239I:正向引物gtgtggaccg gcttcttaac 20;反向弓I物ccactcgcag gtattcttcc 20;
      S239II:正向引物tctcacggaa acttgtgctg 20;反向弓l物tatgcgtgcc actacattgc 20;
      以上述兩對引物對,分別對小麥抗條銹病種質(zhì)陜麥139的cDNA進(jìn)行擴(kuò)增,基因擴(kuò)增所用20 nL反應(yīng)體系為cDNA模板1 pL, 10xPCRBuffer 2 pL,dNTP (2mmol/L)2nL,正向引物(10 mmol/L) 1 pL,反向引物(10 mmol/L)1 ^L, TaqDNA polymerase (5U/|iL) 0.2 pL, ddH20補(bǔ)齊至20 jiL。
      PCR反應(yīng)程序為94T:預(yù)變性3min,接著94。C變性40s, 58或56'C退火45s(S2391, 58°C; S239H, 56°C), 72。C延伸50s,共38個循環(huán);最后于72"C延伸10min,反應(yīng)后于4"C保溫。1%瓊脂糖凝膠電泳檢測擴(kuò)增產(chǎn)物。
      以第一對引物對S239I為引物,擴(kuò)增出一個463bp的片段;以第二對引物對S239II為引物,擴(kuò)增出913bp的片段;根據(jù)NCBI公開的Unigene數(shù)據(jù)庫對擴(kuò)增的兩條序列和EST-S239序列經(jīng)過序列軟件(駱志剛,2007,計算機(jī)工程與科學(xué),29: 127-132)進(jìn)行ESTs聚類和拼接,獲得小麥乙酰輔酶A合成酶基因-S239,其cDNA序列為1619bp,核苷酸序列如SEQ.ID.NO.l所示。
      d、小麥乙酰輔酶A合成酶基因結(jié)構(gòu)分析
      隨后再利用該序列在NCBI數(shù)據(jù)庫對其結(jié)構(gòu)分析表明,3'非翻譯區(qū)為187bp (1433 1619 bp), 5'非翻譯區(qū)為136bp (1 136 bp),編碼區(qū)長度分別為1296bp (137 1432bp),編碼431個氨基酸(如SEQ.ID.N0.2所示)。2、小麥抗條銹相關(guān)乙酰輔酶A合成酶基因編碼氨基酸序列的初步分析ExPASy軟件分析表明,小麥抗條銹相關(guān)乙酰輔酶A合成酶基因編碼的8£(^.10.>0.2所示的氨基酸蛋白等電點為5.67,分子量為47857.07;存在一個小的疏水性區(qū)域(16 30位的氨基酸),TMHMM分析表明該蛋白的跨膜轉(zhuǎn)移功能區(qū)(15 30位氨基酸)在蛋白起始位置,即為前引信號肽蛋白。該基因編碼氨基酸的結(jié)構(gòu)功能域分析顯示,該基因具有三個重要的長鏈脂肪酸
      輔酶A連接酶結(jié)構(gòu)功能域,分別為1 134、 159 345、 362 428位氨基酸,該基因?qū)儆诘湫偷腁MP結(jié)合家族蛋白。
      對來源于大麥(Hordeum vulgare)、水稻(Oryza sativa)擬南芥(Arabidopsisthaliana)及陸地棉(Gossypium hirsutum)等五種植物的AMP結(jié)合家族蛋白進(jìn)行了氨基酸的序列多重比較,如圖2所示,可以看出在這些物種具有較高的一致性。
      基于氨基酸序列的系統(tǒng)進(jìn)化樹分析表明,如圖1所示,不同植物的MYB基因遺傳分化較大,小麥的長鏈脂肪酸輔酶A連接酶與水稻的相似程度最高,達(dá)到95%,而同是麥類作物,大麥和小麥的?;o酶A合成酶的相似性只有70o/o。
      3、小麥抗條銹病相關(guān)乙酰輔酶A合成酶基因表達(dá)模式的RT-PCR分析
      以18S核糖體RNA編碼基因(看家基因,不受時空和環(huán)境因素影響的基因)作為乙酰輔酶A合成酶基因RT-PCR擴(kuò)增的內(nèi)參
      根據(jù)Thomas, 2000; J. Biochem. Biophys. Methods 46: 69—81合成如下的擴(kuò)增18S核糖體RNA編碼基因片段的引物對
      上游引物cttcttagag ggactatggc 20;
      下游引物tacggaaacc ttgttacgac 20;
      分別對條銹菌條中32接種后的抗病條銹陜麥139分別在0h、 24h、 48h、72h、 96h、 7d、 10d、 13d的葉片樣品提取的mRNA,并反轉(zhuǎn)錄cDNA進(jìn)行rt-pcr分析。以上材料首先以內(nèi)參引物進(jìn)行rt-pcr擴(kuò)增(擴(kuò)增體系20hL反應(yīng)體系中包括經(jīng)過內(nèi)參調(diào)整的以上8時期陜麥139cDNA模板,10xPCRBuffer2pL, dNTP (2mmol/L) 2 pL,正向引物(10mmol/L) 0.5 pL,反向引物(10醒ol/L) 0.5 nL, Taq DNA polymerase (5 U/piL) 0.2 (iL, ddH20補(bǔ)齊至20 ^L。PCR反應(yīng)程序為94t:預(yù)變性3min,接著進(jìn)行94°C 30 s, 55°C 45 s,72°C 50 s,共38個循環(huán);72。C延伸10min。反應(yīng)后于4。C保溫,1%瓊脂糖凝膠電泳檢測擴(kuò)增產(chǎn)物,內(nèi)參調(diào)整使得不同處理材料的擴(kuò)增條帶亮度一致(圖3a);
      在同樣的模版濃度下以S239I作為引物進(jìn)行RT-PCR擴(kuò)增,結(jié)果如圖3a、b所示,條中32侵染后不同時期,作為內(nèi)參的18S核糖體RNA編碼基因的RT-PCR結(jié)果保持一致,而該乙酰輔酶A合成酶基因在正常情況下幾乎不表達(dá),在條中32脅迫后24h即可誘導(dǎo)表達(dá),72h表達(dá)達(dá)到最大,隨后第4天表達(dá)急劇下降,7-13天再次上升至一定水平。
      以上的RT-PCR分析結(jié)果表明的是條中32脅迫前后小麥乙酰輔酶A合成酶基因的表達(dá)變化情況,乙酰輔酶A合成酶基因在抗條銹病的陜麥139植株中能夠被生物脅迫誘導(dǎo),初步表明乙酰輔酶A合成酶基因參與了小麥抗條銹病病程反應(yīng)。
      4、 RNA干擾沉默乙酰輔酶A合成酶基因在抗條銹病小麥中的表達(dá)
      a、 RNAi序列的設(shè)計
      利用primer5軟件設(shè)計,輸入序列并指定參數(shù),針對1619bp全序列,設(shè)計了RNAi載體構(gòu)建所需的編碼區(qū)一段序列(166-560bp)的引物;之后,在引物兩端加上構(gòu)建載體所需的BanHI識別位點序列(劃線部分),如下所示:
      正向引物 gg§^£gagt ggcaacctga tggaag 26;
      反向引物 ggatccggtc aaggtgcaca gctctt 26;
      b、 帶有RNAi序列載體的構(gòu)建
      用Bamffl分別酶切大麥條斑病毒載體和利用上述引物擴(kuò)增得到的小麥乙酰輔酶A合成酶基因因子片段,再將二者用T4DNA連接酶連接,即獲得RNAi-乙酰輔酶A合成酶基因病毒載體。
      c、 RNAi序列載體轉(zhuǎn)染抗條銹小麥以未轉(zhuǎn)染RNAi-乙酰輔酶A合成酶基因的陜麥139作為陰性對照,RNAi-乙酰輔酶A合成酶基因病毒載體經(jīng)過體外轉(zhuǎn)錄RNA后,涂抹于抗條銹病小麥陜麥139葉片表面,在20-25'C侵染5天;然后對陜麥139接種條中32條銹病生理小種。
      d、 RNA干擾結(jié)果分析
      接種條中32十五天之后,RT-PCR分析RNA干擾乙酰輔酶A合成酶基因?qū)﹃凔?39抗條銹病的影響,檢測了該基因(s239)和其他6個基因(sl8、s108、 s120、 s176、 s186, IR作為內(nèi)參)的表達(dá)。如圖4所示,圖4a為陜麥139在受到條中32脅迫的7個不同條銹病菌誘導(dǎo)表達(dá)基因圃上調(diào)抗病相關(guān)基因(包括乙酰輔酶A合成酶基因)和內(nèi)參基因的表達(dá)情況;圖4b為RNA干擾沉默乙酰輔酶A合成酶基因后,陜麥139在受到條中32脅迫的上述4a中基因的相應(yīng)表達(dá)情況。
      圖4b與圖4a相比,其結(jié)果表明RNA干擾乙酰輔酶A合成酶基因s239幾乎不表達(dá);該基因的沉默會致使抗病小麥葉片在條銹菌侵染誘導(dǎo)條件下應(yīng)答表達(dá)的sl8、 s108、 s120、 s176、 s186的表達(dá)受到不同的影響,使得S17、S120、 S176等基因表達(dá)量下降;而使假定蛋白S108的表達(dá)量上升,同時該基因的沉默誘導(dǎo)S186家族基因表現(xiàn)表達(dá)補(bǔ)償現(xiàn)象。
      以上結(jié)果說明了本發(fā)明提供的乙酰輔酶A合成酶基因與小麥抗條銹病密切相關(guān),乙酰輔酶A合成酶基因?qū)τ谛←溈箺l銹必不可少;該基因是S17、S120、 S176等基因的上游基因;對假定蛋白S108的表達(dá)具有負(fù)向調(diào)控作用,誘導(dǎo)S239家族基因的表達(dá)補(bǔ)償。因此,乙酰輔酶A合成酶基因是作為抗病性相關(guān)的必要的控制類基因,是小麥抗條銹病的保守的因素。
      本發(fā)明從抗條銹優(yōu)質(zhì)種質(zhì)陜麥139分離到的乙酰輔酶A合成酶基因為改良禾本科作物的抗條銹性提供了更好的選擇,便于應(yīng)用到植物抗條銹性的改良,有效地提高植物的抗病性。核苷酸序列表
      <110>西北農(nóng)林科技大學(xué)
      <120> —種小麥抗條銹病相關(guān)的乙酰輔酶A合成酶基因
      <160>2
      <210> 1
      <211> 1619
      <212> DNA
      <213>抗條銹病小麥(77#/t〃/77鄉(xiāng)f/畫)
      <400> 1
      gELCCC已CgCgttccgaacaaaaggaagaatttccaagtgtgggctctcactalactcatg60
      tgatgsgttcatstggttggcaggtgaccaag犯tttgatcttccagtgaatc犯aggac120
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      <210>2
      <211>431
      <212> PRT
      <213>抗條銹病小麥(7 "必t"/77 aesf/V〃/T7) <400> 2
      Met TyrThrSer GlyThr Thr Gly ASp Pro Lys Gly Val Leu lie Ser AsnAla Ser lie
      1510 1520
      lie CysLeulie AlaGly Val Asp Arg Leu Leu Asn Ser Val Asn Glu ArgLeu Glu Glu
      212530 3540
      Thr AspValTyr MetSer Tyr Leu Pro Leu Ala His lie Phe Asp Arg ValVal Glu Glu
      414550 5560
      Leu PheMetPhe HisGly Ala Ser lie Gly Phe Trp Arg Gly Asp Val LysLeu Leu Val
      616570 7580
      Glu AsplieGly ThrLeu Lys Pro Thr lie Leu Cly Ala VaJ Pro Arg Leu Asp Arg
      818590 95100
      lie PheSerGly LeuGin Ala Lys lie Ser Ala Gly Gly Phe lie Lys SerThr Met Phe
      101105110 115120
      Ser LeuAlaTyr LysPhe Lys Gin Phe Arg Met Met Arg Gly Ala Lys HisAsn Glu Ala
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      Ala AlalieCys AspLys Val Val Phe Ser Lys Val Lys Glu Gly Leu GlyGly Asn Val
      141145150 155160
      Arg VallieLeu SerGly Ala Ala Pro Leu Ala Thr His Val Glu Glu TyrLeu Arg Val
      161165170 175180
      1320 1380 1440 1500 1560 1619Val Thr Cys Ala His Val Leu Gin Gly Tyr Gly Leu Thr Glu Thr Cys Ala Gly Ser Phe 181 185 190 195 200
      Val Ser Leu Pro Asn Gin Met Ser Met lie Gly Thr Val Gly Pro Pro Val Pro Asn lie 201 205 210 215 220
      Asp Ala Arg Leu Glu Ser Val Pro Asp Met Asn Tyr Asp Ala Leu Ala Ser Thr Pro Arg 221 225 230 235 240
      Gly Glu lie Cys lie Lys Gly Glu Thr Leu Phe Ser Gly Tyr Tyr Arg Arg Glu Asp Leu 241 245 250 255 260
      Thr Glu Glu Val Leu Val Asp Gly Trp Phe His Thr Gly Asp lie Gly Glu Trp Gin Pro 261 265 270 275 280
      Asp Gly Ser Met Lys lie lie Asp Arg Lys Lys Asn lie Phe Lys Leu Ser Gin Gly Glu 281 285 290 295 300
      Tyr Val Ala Val Glu Asn Phe Glu Asp lie Tyr Gly Val Val Ser Ala lie Asp Ser lie 301 305 310 315 320
      Trp Val Tyr Gly Asn Ser Phe Glu Ser Phe Uu Val Ala Val Val Asn Pro Asn Lys Glu 321 325 330 335 340
      Ala Uu Glu Ser Trp Ala Glu Ala Asn Gly lie Ser Gly Asp Phe Glu Ala Leu Cys Glu 341 345 350 355 360
      Asn Pro Lys Ala Lys Glu Tyr lie Leu Gly Glu Leu Ser Lys Thr Gly lys Glu Lys Lys 361 365 370 375 380
      Leu Lys Gly Phe Glu Phe lie Arg Ala Val His Leu Asp Pro Val Pro Phe Asp Met Glu 381 385 390 395 400
      Arg Asp Leu lie Thr Pro Thr Tyr Lys Arg Lys Arg Pro Gin Leu Leu Lys Tyr Tyr Gin 401 405 410 415 420
      Gly Ala lie Asp Asn Met Tyr Lys Ser Ala Lys 421 425 43權(quán)利要求
      1、一種小麥抗條銹病相關(guān)的乙酰輔酶A合成酶基因,其特征在于,該基因的cDNA序列全長為1619bp,其核苷酸序列如SEQ.ID.NO.1所示,其中,1~136bp為5’非翻譯區(qū),137~1432bp編碼431個氨基酸,1433~1619bp為3’非翻譯區(qū)。
      2、 如權(quán)利要求1所述的小麥抗條銹病相關(guān)的乙酰輔酶A合成酶基因,其特征在于,所述的137 1432bp編碼的氨基酸序列如SEQ.ID.N0.2所示。
      全文摘要
      本發(fā)明公開了小麥抗條銹病相關(guān)基因相似乙酰輔酶A合成酶基因,該基因全長cDNA序列為1619bp。其中3’非翻譯區(qū)187bp,5’非翻譯區(qū)136bp,編碼區(qū)1269bp,共編碼431個氨基酸,該基因的RT-PCR表達(dá)分析表明,該基因在正常情況下有微量的表達(dá),在條中32菌系脅迫24h后誘導(dǎo)表達(dá)上調(diào),72h時表達(dá)量達(dá)到最大,隨后第4天急劇下降,第7-13天再次上升。該基因是S17、S120、S176等基因的上游基因;對假定蛋白S108的表達(dá)具有負(fù)向調(diào)控作用,誘導(dǎo)S239家族基因的表達(dá)補(bǔ)償。利用該基因轉(zhuǎn)化小麥、玉米等作物和其它植物,提高作物抗條銹反應(yīng)能力,具有很大的應(yīng)用潛力。
      文檔編號C12N15/52GK101643738SQ200910023868
      公開日2010年2月10日 申請日期2009年9月14日 優(yōu)先權(quán)日2009年9月14日
      發(fā)明者任志龍, 劉新倫, 吉萬全, 宏 張, 田增榮, 胡銀崗, 蔡東明 申請人:西北農(nóng)林科技大學(xué)
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