專利名稱：：從小麥胚芽中提取抗氧化活性小肽營(yíng)養(yǎng)粉的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種提取抗氧化活性小肽營(yíng)養(yǎng)粉的方法，具體涉及一種從小麥胚芽中提取抗氧化活性小肽營(yíng)養(yǎng)粉的方法。
背景技術(shù)：
：麥麩和小麥胚芽是面粉加工廠的主要副產(chǎn)物，過去一直作為飼料利用。現(xiàn)代研究表明，小麥胚芽是小麥籽粒中的精華部分，占小麥總量比例的35%，小麥胚芽中含多種營(yíng)養(yǎng)活性成分，如蛋白質(zhì)、氨基酸、維生素E、脂肪、礦物質(zhì)和膳食纖維素等，是重要的保健食品原料和重要的植物的蛋白營(yíng)養(yǎng)源，具有很好的開發(fā)和利用前景。隨著技術(shù)的進(jìn)步，小麥胚芽的應(yīng)用已多種多樣，例如將小麥胚芽做成小麥胚芽油。經(jīng)典營(yíng)養(yǎng)學(xué)認(rèn)為，蛋白質(zhì)在消化道中不能被直接吸收利用，消化終產(chǎn)物往往大部分是小肽而非游離氨基酸，小肽能完整地被吸收并以二、三肽形式進(jìn)入血液循環(huán)，小肽在蛋白質(zhì)營(yíng)養(yǎng)中有著重要的作用。因而，有些學(xué)者提出了完整蛋白質(zhì)或其降解產(chǎn)生的小肽也能被動(dòng)物直接吸收的觀點(diǎn)，小肽營(yíng)養(yǎng)的研究開始受到重視。隨后的研究表明，蛋白質(zhì)在消化道的降解產(chǎn)物大部分是小肽(主要是二肽和三肽)，它們以完整形式被吸收進(jìn)入循環(huán)系統(tǒng)而被組織利用。動(dòng)物為了達(dá)到最佳生產(chǎn)性能，必須需要一定數(shù)量的小肽，隨著蛋白質(zhì)和氨基酸營(yíng)養(yǎng)研究的深入，人們己逐漸認(rèn)識(shí)到肽營(yíng)養(yǎng)的重要性。Agar(1953)觀察到，腸道能夠完整轉(zhuǎn)運(yùn)雙甘肽。其后Naey(1959)和Smith(1960)首先提出肽可被完全轉(zhuǎn)運(yùn)的確切證據(jù)。但是最佳的小肽種類和來源是有限的，充分利用蛋白質(zhì)資源來生產(chǎn)小肽，為發(fā)展蛋白質(zhì)營(yíng)養(yǎng)理論開辟一條新途徑。典型的抗氧化活性小肽就是肌肽。肌肽是大量存在于動(dòng)物肌肉中的一種天然二肽。Chen等(1993)報(bào)道，肌肽可在體外抑制被鐵、血紅蛋白、脂質(zhì)氧化酶和單態(tài)氧催化的脂質(zhì)氧化作用。也有人曾把它作為貯存熟肉的一種氧化型酸敗抑制劑。另外有人在香菇、馬鈴薯、蜂蜜等食物中證明有若干可抑制多酚氧化酶(PP0)的低分子小肽，除了抑制PP0外，這些肽尚可以通過與PPO催化的釀式產(chǎn)物反應(yīng)而減少食物褐變(焦化反應(yīng))，從而防止聚合氧化產(chǎn)物的產(chǎn)生。己知某些肽和蛋白質(zhì)水解物可以起著重金屬清道夫和過氧化氫分解促進(jìn)劑的作用，因而可以降低自氧化速率和減少脂肪過氧化氫含量，從而發(fā)揮其抗氧化作用。目前，已有一系列提取小肽的工藝方法，例如從肝素渣中提取小肽、從油松花粉中提取小肽的方法(專利申請(qǐng)?zhí)?00710058028.0)，但這些方法的原料成本較高，產(chǎn)品小肽的成本高。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的是提供一種從小麥胚芽中提取抗氧化活性小肽營(yíng)養(yǎng)粉的方法，該方法的原料成本較低，且提取方法簡(jiǎn)單。為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用以下技術(shù)方案從小麥胚芽中提取抗氧化活性小肽營(yíng)養(yǎng)粉的方法，包括以下步驟(1)將小麥胚芽超微粉碎至400600目；(2)用有機(jī)酸做溶劑調(diào)PH值為3.54.5，再用去離子水調(diào)配成固含量為l10%的小麥胚芽懸濁液；(3)將小麥胚芽懸濁液中的非蛋白質(zhì)成分萃取除去；(4)將除去非蛋白質(zhì)后的小麥胚芽蛋白液放入帶有攪拌器的容器內(nèi)，用去離子水調(diào)節(jié)小麥胚芽蛋白液的固含量為110%，再用堿調(diào)整PH值為4.59，加入蛋白酶，控制溫度206(TC,攪拌124小時(shí)；(5)再加入肽酶，在206(TC下攪拌110小時(shí)，然后離心分離去除料渣，即得到小肽營(yíng)養(yǎng)液；(6)小肽營(yíng)養(yǎng)液在4080'C下濃縮蒸發(fā)至固含量為4080%;(7)最后在408(TC下干燥得到小肽營(yíng)養(yǎng)粉。所述有機(jī)酸為乳酸或檸檬酸。所述堿為氨水或季胺鹽。所述季胺鹽為氯化十二烷基二甲基芐基銨、溴十八烷或溴代十六烷。所述蛋白酶的用量為其加入前混合液總重量的0.0033%。所述蛋白酶為中性蛋白酶、酸性蛋白酶、堿性蛋白酶或復(fù)合蛋白酶。所述肽酶的用量為其加入前混合液總重量的0.0013%。所述肽酶為r轉(zhuǎn)肽酶。本發(fā)明從小麥胚芽中提取抗氧化活性小肽營(yíng)養(yǎng)粉，采用小麥胚芽作為原料，經(jīng)蛋白酶將蛋白質(zhì)分解，肽酶將蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)化為肽類，最終獲得含有豐富抗氧化活性小肽營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的小肽營(yíng)養(yǎng)粉，本發(fā)明采用的原料成本低，產(chǎn)品小肽營(yíng)養(yǎng)粉的成本較以往用其他原料制備成本低，有較大的開發(fā)價(jià)值。本發(fā)明制備的小肽營(yíng)養(yǎng)粉中的主要營(yíng)養(yǎng)成分是抗氧化活性小肽(肌肽)，其中二肽的含量分別為56.4%以上，小肽可在體外抑制被鐵、血紅蛋白、脂質(zhì)氧化酶和單態(tài)氧催化的脂質(zhì)氧化作用，可以降低自氧化速率和減少脂肪過氧化氫含量，從而發(fā)揮其抗氧化作用，是一種抗衰老、預(yù)防肥胖的佳品，主要用于保健食品、藥品添加劑。具體實(shí)施例方式實(shí)施例l:(1)將小麥胚芽超微粉碎至400目；(2)用乳酸做溶劑調(diào)PH值為3.5，再用去離子水調(diào)配成固含量為1%的小麥胚芽懸濁液；(3)將小麥胚芽懸濁液中的非蛋白質(zhì)成分萃取除去；(4)將除去非蛋白質(zhì)后的小麥胚芽蛋白液放入帶有攪拌器的容器內(nèi)，用去離子水調(diào)節(jié)小麥胚芽蛋白液的固含量為1%，再用氨水調(diào)整PH值為6.5，加入中性蛋白酶，中性蛋白酶的用量為其加入前混合液總重量的0.003%，控制溫度2(TC，攪拌24小時(shí)，中性蛋白酶酶活》20萬u/g;(5)再加入r轉(zhuǎn)肽酶，r轉(zhuǎn)肽酶的用量為其加入前混合液總重量的0.001%，在2(TC下攪拌10小時(shí)，然后離心分離去除料渣，即得到小肽營(yíng)養(yǎng)液；(6)小肽營(yíng)養(yǎng)液在4(TC下濃縮蒸發(fā)至固含量為80%;(7)最后在40'C下干燥得到小肽營(yíng)養(yǎng)粉。實(shí)施例2:(1)將小麥胚芽超微粉碎至500目；(2)用檸檬酸做溶劑調(diào)PH值為3.8，再用去離子水調(diào)配成固含量為4%的小麥胚芽懸濁液；(3)將小麥胚芽懸濁液中的非蛋白質(zhì)成分萃取除去；(4)將除去非蛋白質(zhì)后的小麥胚芽蛋白液放入帶有攪拌器的容器內(nèi)，用去離子水調(diào)節(jié)小麥胚芽蛋白液的固含量為4%，再用氯化十二烷基二甲基芐基銨調(diào)整PH值為4.5,加入酸性蛋白酶，酸性蛋白酶的用量為其加入前混合液總重量的0.5%，控制溫度4(TC，攪拌15小時(shí)，酸性蛋白酶酶活》20萬u/g;(5)再加入r轉(zhuǎn)肽酶，r轉(zhuǎn)肽酶的用量為其加入前混合液總重量的0.5%，在4(TC下攪拌7小時(shí)，然后離心分離去除料渣，即得到小肽營(yíng)養(yǎng)液；(6)小肽營(yíng)養(yǎng)液在5(TC下濃縮蒸發(fā)至固含量為70%;(7)最后在50'C下干燥得到小肽營(yíng)養(yǎng)粉。實(shí)施例3:(1)將小麥胚芽超微粉碎至600目；(2)用乳酸做溶劑調(diào)PH值為4.0，再用去離子水調(diào)配成固含量為8%的小麥胚芽懸濁液；(3)將小麥胚芽懸濁液中的非蛋白質(zhì)成分萃取除去；(4)將除去非蛋白質(zhì)后的小麥胚芽蛋白液放入帶有攪拌器的容器內(nèi)，用去離子水調(diào)節(jié)小麥胚芽蛋白液的固含量為8%，再用氨水調(diào)整PH值為7，加入復(fù)合蛋白酶，復(fù)合蛋白酶的用量為其加入前混合液總重量的2%，控制溫度5(TC，攪拌10小時(shí)，復(fù)合蛋白酶酶活^40萬u/g;(5)再加入r轉(zhuǎn)肽酶，r轉(zhuǎn)肽酶的用量為其加入前混合液總重量的2%,在50'C下攪拌4小時(shí)，然后離心分離去除料渣，即得到小肽營(yíng)養(yǎng)液；(6)小肽營(yíng)養(yǎng)液在60'C下濃縮蒸發(fā)至固含量為60%;(7)最后在6(TC下干燥得到小肽營(yíng)養(yǎng)粉。實(shí)施例4:(1)將小麥胚芽超微粉碎至400600目；(2)用檸檬酸做溶劑調(diào)PH值為4.5，再用去離子水調(diào)配成固含量為10%的小麥胚芽懸濁液；(3)將小麥胚芽懸濁液中的非蛋白質(zhì)成分萃取除去；(4)將除去非蛋白質(zhì)后的小麥胚芽蛋白液放入帶有攪拌器的容器內(nèi)，用去離子水調(diào)節(jié)小麥胚芽蛋白液的固含量為10%，再用溴十八烷調(diào)整PH值為9，加入堿性蛋白酶，堿性蛋白酶的用量為6其加入前混合液總重量的3%,控制溫度6(TC，攪拌1小時(shí)，堿性蛋白酶酶活》20萬u/g;(5)再加入r轉(zhuǎn)肽酶，1轉(zhuǎn)肽酶的用量為其加入前混合液總重量的3%，在60'C下攪拌1小時(shí)，然后離心分離去除料渣，即得到小肽營(yíng)養(yǎng)液；(6)小肽營(yíng)養(yǎng)液在8(TC下濃縮蒸發(fā)至固含量為40%;(7)最后在8(TC下干燥得到小肽營(yíng)養(yǎng)粉。小肽含量測(cè)定GB/T6682分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和實(shí)驗(yàn)方法，先將試樣中可溶性蛋白質(zhì)、游離氨基酸和氨在水中提取出來，部分提取液在110°C，6mo1/1鹽酸中水解24h成單個(gè)氨基酸，經(jīng)茚三酮顯色反應(yīng)在570nm處測(cè)定總氨基酸氮含量，以提取液直接與茚三酮顯色反應(yīng)在570nm處測(cè)定的游離氨基酸氮含量為空白，水溶性肽含量即是總氨基酸氮含量減去游離氨基酸氮含量后再乘以轉(zhuǎn)換系數(shù)。(本方法中樣品在酸水解過程產(chǎn)生的游離氨所帶來的誤差忽略。)測(cè)定結(jié)果見下表l:表1不同實(shí)施例中小肽含量升高情況<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>結(jié)論采用本發(fā)明的制備方法制備的小肽營(yíng)養(yǎng)粉中的蛋白含量降低49%左右，小肽含量升高109%左右，小肽的含量大大升高。本發(fā)明中使用的r轉(zhuǎn)肽酶由美國(guó)杰能科公司生產(chǎn)，所使用的中性蛋白酶、酸性蛋白酶、堿性蛋白酶和復(fù)合蛋白酶由美國(guó)杰能科公司生產(chǎn)。權(quán)利要求1、從小麥胚芽中提取抗氧化活性小肽營(yíng)養(yǎng)粉的方法，其特征在于包括以下步驟(1)將小麥胚芽超微粉碎至400～600目；(2)用有機(jī)酸做溶劑調(diào)PH值為3.5～4.5，再用去離子水調(diào)配成固含量為1～10％的小麥胚芽懸濁液；(3)將小麥胚芽懸濁液中的非蛋白質(zhì)成分萃取除去；(4)將除去非蛋白質(zhì)后的小麥胚芽蛋白液放入帶有攪拌器的容器內(nèi)，用去離子水調(diào)節(jié)小麥胚芽蛋白液的固含量為1～10％，再用堿調(diào)整PH值為4.5～9，加入蛋白酶，控制溫度20～60℃，攪拌1～24小時(shí)；(5)再加入肽酶，在20～60℃下攪拌1～10小時(shí)，然后離心分離去除料渣，即得到小肽營(yíng)養(yǎng)液；(6)小肽營(yíng)養(yǎng)液在40～80℃下濃縮蒸發(fā)至固含量為40～80％；(7)最后在40～80℃下干燥得到小肽營(yíng)養(yǎng)粉。2、如權(quán)利要求1所述的從小麥胚芽中提取抗氧化活性小肽營(yíng)養(yǎng)粉的方法，其特征在于所述有機(jī)酸為乳酸或檸檬酸。3、如權(quán)利要求1或2所述的從小麥胚芽中提取抗氧化活性小肽營(yíng)養(yǎng)粉的方法，其特征在于所述堿為氨水或季胺鹽。4、如權(quán)利要求3所述的從小麥胚芽中提取抗氧化活性小肽營(yíng)養(yǎng)粉的方法，其特征在于所述季胺鹽為氯化十二烷基二甲基芐基銨、溴十八垸或溴代十六烷。5、如權(quán)利要求1或2所述的從小麥胚芽中提取抗氧化活性小肽營(yíng)養(yǎng)粉的方法，其特征在于所述蛋白酶的用量為其加入前混合液總重量的0.0033%。6、如權(quán)利要求5所述的從小麥胚芽中提取抗氧化活性小肽營(yíng)養(yǎng)粉的方法，其特征在于所述蛋白酶為中性蛋白酶、酸性蛋白酶、堿性蛋白酶或復(fù)合蛋白酶。7、如權(quán)利要求1或2所述的從小麥胚芽中提取抗氧化活性小肽營(yíng)養(yǎng)粉的方法，其特征在于所述肽酶的用量為其加入前混合液總重量的0.0013%。8、如權(quán)利要求7所述的從小麥胚芽中提取抗氧化活性小肽營(yíng)養(yǎng)粉的方法，其特征在于所述肽酶為r轉(zhuǎn)肽酶。全文摘要本發(fā)明提供一種從小麥胚芽中提取抗氧化活性小肽營(yíng)養(yǎng)粉的方法，其步驟為小麥胚芽粉碎后經(jīng)萃取將其中的非蛋白除去，然后加入蛋白酶和肽酶后得到小肽營(yíng)養(yǎng)液，最后濃縮、干燥得到小肽營(yíng)養(yǎng)粉。本發(fā)明制備的小肽營(yíng)養(yǎng)粉中的主要營(yíng)養(yǎng)成分是抗氧化活性小肽(肌肽)，其中二肽的含量分別為56.4％以上，小肽可在體外抑制被鐵、血紅蛋白、脂質(zhì)氧化酶和單態(tài)氧催化的脂質(zhì)氧化作用，可以降低自氧化速率和減少脂肪過氧化氫含量，從而發(fā)揮其抗氧化作用，是一種抗衰老、預(yù)防肥胖的佳品，主要用于食品、藥品添加劑。文檔編號(hào)A23L1/28GK101513218SQ200910064359公開日2009年8月26日申請(qǐng)日期2009年3月10日優(yōu)先權(quán)日2009年3月10日發(fā)明者周靖波,楊公明,黃繼紅申請(qǐng)人:周靖波;黃繼紅