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      一種小麥酒精廢糟液生產(chǎn)真菌菌粉及真菌多糖的方法

      文檔序號:543190閱讀:321來源:國知局

      專利名稱::一種小麥酒精廢糟液生產(chǎn)真菌菌粉及真菌多糖的方法一種小麥酒精廢糟液生產(chǎn)真菌菌粉及真菌多糖的方法
      技術(shù)領(lǐng)域
      :本發(fā)明屬于一種小麥酒精廢糟液的再利用技術(shù),尤其是涉及一種利用小麥酒精廢糟液生產(chǎn)食用、藥用真菌菌粉及真菌多糖的方法。
      背景技術(shù)
      :公知的,酒精發(fā)酵主要采用玉米、薯干、廢糖蜜等為原料,由于養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展,勢必造成原料的緊張;有些地區(qū)會出現(xiàn)地域價格差,貨源供應(yīng)也相對不穩(wěn)定等。特別是近年來玉米價格上漲,使得現(xiàn)有酒精廠呈現(xiàn)虧損局面,由于上述原因和產(chǎn)地的限制,一些廠家便選用小麥作為生產(chǎn)酒精的原料。在我國小麥的主產(chǎn)區(qū)廣泛分布在長江以北的廣大地區(qū),所以小麥的供給也相對較為寬裕,很多酒精廠家以小麥為生產(chǎn)酒精的主要原料,在酒精行業(yè)普遍具備一定的優(yōu)越性,況且小麥具備如下對比優(yōu)勢1、以小麥作為原料所生產(chǎn)的酒精具有口感好、微甜,作為勾兌酒的原料有很大市場競爭力;2、以小麥作為原料在生產(chǎn)過程中產(chǎn)生有諸如谷朊粉的中間產(chǎn)品,近年來谷朊粉的國際市場很大,可以明顯提高產(chǎn)品的附加值,經(jīng)濟效益也相對得到提高;3、以小麥作為制造酒精的原料所生產(chǎn)的DDG飼料蛋白質(zhì)為26X"大約",脂肪為3%"大約",色澤好,動物較為喜歡食用,深受養(yǎng)殖戶歡迎。目前,很多酒精生產(chǎn)廠商以小麥為原料生產(chǎn)酒精,從目前的趨勢看,有進一步發(fā)展的可能性。制粒時的溫度高達85t:以上,溫度也較高,所以造粒后要降低水份,其含量為7_12%。蒸發(fā)器運行一段時間后會嚴(yán)重結(jié)垢,所以過一段時間要停機清洗,結(jié)垢是蛋白質(zhì)沉淀淤積于加熱管中,所以通常用13%的苛性鈉溶液加熱至9095t:進行沖洗。已知用小麥為原料生產(chǎn)酒精所產(chǎn)生的廢糟液,由于含有大量的纖維素和半纖維素,酒精糟水中可溶物較多,具有一定的利用價值;但是小麥廢糟液相對于其它原料,濃縮糖漿的濃度較高,粘度較大,蒸發(fā)器易結(jié)垢,清洗困難;所以回流水的再利用也受到一定的限制,長時間回流水中的有機物、纖維類物質(zhì)積累,將不利于酵母的生長,而縮短回水利用的周期,現(xiàn)有技術(shù)又難以解決。基于上述原因可知,小麥酒精廢糟液的處理,是一個有待解決的技術(shù)難題。此時我們聯(lián)想到,食用、藥用真菌絕大多數(shù)種類,它們可以分解吸收纖維素和半纖維素。申請人:在先申請的專利"
      專利名稱:、生產(chǎn)食用、藥用真菌菌粉和真菌多糖的方法;申請日、2000年12月8日;授權(quán)公告號、CN1236048C"由于當(dāng)時訴求用玉米酒精廢糟液為原料生產(chǎn)食用、藥用真菌菌粉和真菌多糖,雖取得成功,但比起小麥酒精廢糟液來,玉米酒精廢糟液則由于原料有限,所以應(yīng)用價值相應(yīng)降低;主要原因有二,1、小麥酒精廢糟液中含有豐富纖維素和半纖維素,對于食用、藥用真菌是難得的可以利用木質(zhì)素、纖維素、半纖維素的微生物類群;2、另外申請人還發(fā)現(xiàn),由于小麥酒精廢糟液有機物質(zhì)比玉米酒精廢糟液含量高,更適合于食用、藥用真菌類深層發(fā)酵。
      發(fā)明內(nèi)容為了實現(xiàn)所述發(fā)明目的,本發(fā)明公開了一種小麥酒精廢糟液生產(chǎn)真菌菌粉及真菌多糖的方法,本發(fā)明所述方法針對小麥酒精廢糟液難處理,容易出現(xiàn)環(huán)保超標(biāo),以及食用、藥用真菌能分解利用小麥酒精廢糟液中難以處理的纖維素、半纖維素和高濃度有機物質(zhì)的情況;本發(fā)明結(jié)合小麥酒精廢糟液富含纖維素和半纖維素,可溶性有機物含量高的特點,用其進行食用、藥用真菌菌粉及真菌多糖的生產(chǎn);本發(fā)明通過利用食用、藥用真菌分解、吸收廢糟液中的纖維素、半纖維素和其它有機物,解決小麥加工酒精后通常將廢糟液作為廢棄物排放,造成環(huán)保污染的資源浪費的問題,實現(xiàn)了小麥酒精廢糟液的綜合利用,變廢為寶目的,并可將廢糟液轉(zhuǎn)化成高產(chǎn)值的保健食品和貴重的藥品原料。本發(fā)明通過以下化學(xué)合成技術(shù)方案實現(xiàn)—種小麥酒精廢糟液生產(chǎn)真菌菌粉及真菌多糖的方法,所述小麥酒精廢糟液以小麥為原料,經(jīng)過液體深層發(fā)酵,釀造酒精,獲得酒精廢糟液,包括如下步驟a、獲得清液將所述小麥酒精廢糟液中的固體由液體分離分離出來,獲得清液;b、獲得菌種擴培培養(yǎng)基,進行菌種擴培;1)、斜面菌種培養(yǎng)基制備和斜面菌種擴培;斜面菌種培養(yǎng)基采用PDA綜合培養(yǎng)基接種于24-27"下培養(yǎng)10-15天。2)、搖瓶培養(yǎng)基,種子發(fā)酵罐的培養(yǎng)基制備及種子擴培搖瓶培養(yǎng)基和種子發(fā)酵罐培養(yǎng)基相同,即步驟a所獲得清液加入0-0.5%酵母膏;0_4%蔗糖,用NaOH和HC1調(diào)PH值至5.5-6.5;搖瓶培養(yǎng)取前述獲取物250毫升的三角瓶內(nèi),裝入70-90毫升的培養(yǎng)基,750毫升三角瓶,裝量為100-120毫升/瓶;滅菌后,冷卻至30°C時接入斜面菌種"PDA培養(yǎng)基上生長的,不超過10天的食用、藥用真菌的菌種"用接種剷剷下一小塊,大約lcm2左右純培養(yǎng)物,于24-27。C條件下,靜置24小時后置于搖床上160-180rpm于24-27。C左右,振蕩培養(yǎng)48-72小時;c、種子發(fā)酵罐培養(yǎng)在通用式機械攪拌發(fā)酵罐或者氣升式氣體攪拌式發(fā)酵罐中進行;常規(guī)滅菌后按5_10%接種量,接入搖瓶種子,其發(fā)酵條件為采用機械攪拌式發(fā)酵罐;0-12小時攪拌速度為80-100rpm,通氣量為0.5:lvvm;或12-72小時攪拌速度120rpm-140rpm通氣量為0.5:lvvm,采用氣升式空氣攪拌式發(fā)酵罐;或0-12小時時0.25:lvvm,12-72小時為0.5:lvvm;其中種子發(fā)酵罐培養(yǎng)溫度為24-27°C;發(fā)酵周期為48-72小時;獲得發(fā)酵培養(yǎng)基后,進行食用、藥用真菌液體深層發(fā)酵發(fā)酵培養(yǎng)基的成份與搖瓶、種子發(fā)酵罐的擴培培養(yǎng)基相同;即步驟a所獲得清液加入O-O.15%酵母膏,0_4%蔗糖,用NaOH和HC1調(diào)ra值至5.5-6.5;然后常規(guī)滅菌,滅菌后按5-10%的接種量,接入種子;其中發(fā)酵控制前72小時與種子發(fā)酵罐條件相同,用機械攪拌發(fā)酵罐;72-144小時,攪拌速度為160-200rpm,通氣為0.5:lvvm,氣升式生物反應(yīng)器空氣攪拌的條件;72-144小時為0.75:lvvm;發(fā)酵溫度為24-27t:,然后進入食用、藥用真菌菌粉的生產(chǎn),其中按本步驟發(fā)酵至144小時左右,還原糖下降變緩,即可終止發(fā)酵;d、將發(fā)酵液"內(nèi)含菌絲體"加入提取多糖時獲得的瀘餅,以調(diào)解含水量;通過膠體磨、研磨、均質(zhì),使其基質(zhì)顆粒小于5微米,通過離心式噴霧干燥機,噴霧干燥成食用、藥用真菌菌粉,其中水份為《10%;e、食用、藥用真菌多糖的生產(chǎn)按步驟c,發(fā)酵終止時將發(fā)酵罐內(nèi)溫度控制到9(TC,維持5小時,待冷卻在35t:左右進行板框過濾;然后收集濾液,真空濃縮至原體積的1/5左右;通過離心式噴霧干燥機,噴霧干燥,成為食用、藥用真菌多糖產(chǎn)品;所述濾餅,在生產(chǎn)菌粉時待用。所述的小麥酒精廢糟液生產(chǎn)真菌菌粉及真菌多糖的方法,所述PDA綜合培養(yǎng)基為馬鈴薯200克,蔗糖20克,磷酸二氫鉀3克,硫酸鎂1.5克,水1000毫升,瓊脂20克。所述的小麥酒精廢糟液生產(chǎn)真菌菌粉及真菌多糖的方法,所述PDA綜合培養(yǎng)基的加工為200克馬鈴薯,洗凈去皮切成小塊,加水1000ml煮沸半個小時或高壓蒸煮20分鐘,紗布過濾,再依次添加蔗糖20克,磷酸二氫鉀3克,硫酸鎂1.5克,水1000毫升和瓊脂20克,充分溶解后趁熱紗布過濾,分裝試管,每試管約5-10ml"視試管大小而定",15磅蒸氣"12rC"滅菌20分鐘左右后取出試管擺斜面,冷卻后貯存待用。所述的小麥酒精廢糟液生產(chǎn)真菌菌粉及真菌多糖的方法,所述步驟a的獲得清液過程為利用離心機對所述小麥酒精廢糟液離心方式獲得所述清液,或利用過濾方式獲得所述清液,或?qū)⑺鲭x心或過濾方式獲得的清液濃縮后再次加水稀釋獲得所述清液。所述的小麥酒精廢糟液生產(chǎn)真菌菌粉及真菌多糖的方法,將步驟b或c獲得搖瓶培養(yǎng)基種子發(fā)酵罐的培養(yǎng)基和發(fā)酵培養(yǎng)基;搖瓶、種子罐、發(fā)酵罐的培養(yǎng)基均用小麥酒精廢糟液由步驟a所獲得的清液為母體加入酵母膏0-0.5%,蔗糖0-4%,調(diào)HI值5.5_6.5而制成。所述的小麥酒精廢糟液生產(chǎn)真菌菌粉及真菌多糖的方法,步驟d,在發(fā)酵終止后,加入提取多糖時獲得的濾餅調(diào)含水量,先用膠體磨、研磨成<5微米基質(zhì)顆粒,不經(jīng)板框過濾,直接用離心式噴霧干燥機噴霧干燥,制成食用、藥用真菌菌粉。所述的小麥酒精廢糟液生產(chǎn)真菌菌粉及真菌多糖的方法,所述步驟e,發(fā)酵終止時,在發(fā)酵罐內(nèi),發(fā)酵液直接升溫至90°C,維持5小時,待冷卻至35t:左右,進行板框過濾,收集濾液,真空濃縮至原體積的1/5,通過離心式噴霧干燥機噴霧干燥,其中條件為進風(fēng)溫度調(diào)至200-23(TC,出風(fēng)溫度調(diào)至9(TC,噴液量為500-1000kg/h;制得食用、藥用真菌多糖產(chǎn)品;其中板框過濾獲得的濾餅,待生產(chǎn)菌粉時用。根據(jù)上述工藝步驟獲取的真菌菌粉或真菌多糖,可作為藥用、食用兩用的真菌,除了是高蛋白低脂肪的保健食品外,它們還有特定的藥效。由于藥用真菌生產(chǎn)的發(fā)展,帶動了制藥工業(yè)、食品工業(yè)的同步發(fā)展,具有新的產(chǎn)業(yè)鏈起始端作用,本發(fā)明獲取的藥用真菌可作為藥廠和加工廠的原料;用藥用真菌為原料制作的真菌藥物也將得到大力發(fā)展;下表為以藥用真菌為原料制作的真菌藥物6<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>需要說明的是,隨著藥用真菌的藥用價值被醫(yī)療臨床逐漸證實,需求量逐年增加。多數(shù)藥用真菌的生長需要木質(zhì)素、纖維素、半纖維素,所以對林木的需求量也逐年上升,在一些集中生產(chǎn)的地區(qū),對森林資源的毀壞已引起人們的關(guān)注。所以改變過去的單一椴木栽培,鋸未栽培的方法也勢在必行。根據(jù)化學(xué)成份的分析和藥理臨床觀察,某些藥用真菌的菌絲體與子實體有同樣的醫(yī)療和保健效果。40年來,隨著發(fā)酵工業(yè)的興起和發(fā)展,利用液體深層發(fā)酵生產(chǎn)藥用真菌菌絲體制藥路線有了很大發(fā)展。菌絲體的發(fā)酵培養(yǎng)周期短,適合于大規(guī)模工廠化生產(chǎn)。冬蟲夏草、猴頭菌絲體也都有生產(chǎn)廠家大規(guī)模生產(chǎn)。猴頭菌絲體僅上海市每年的生產(chǎn)能力可達到400多噸。利用冬蟲夏草菌絲體深層發(fā)酵生產(chǎn)的"金水寶"膠囊,成為中國第一個被批準(zhǔn)生產(chǎn)的中藥一類新藥;由此可見市場之大。本發(fā)明所述的小麥酒精廢糟液生產(chǎn)出的真菌菌粉或真菌多糖優(yōu)點在于1、變廢為寶小麥酒精廢糟液富含纖維素、半纖維素及其它有機物質(zhì),它作為酒精釀造來講雖屬廢物,但對于多數(shù)食用、藥用真菌來講,則是難得的天然培養(yǎng)基,稍加調(diào)配,便可成為某些食用、藥用真菌最佳培養(yǎng)基。2、成本低廉小麥酒精廢糟液(Vinasse)是發(fā)酵法生產(chǎn)酒精的副產(chǎn)品,是一種高濃度的有機廢水,用它來生產(chǎn)食用、藥用真菌菌粉和真菌多糖,大大降低了成本,提高了市場競爭力。3、提高產(chǎn)品質(zhì)量小麥酒精廢糟液沒有或有很少的固形物,而傳統(tǒng)的生產(chǎn)培養(yǎng)基含有大量的固形物,前者所生產(chǎn)的產(chǎn)品幾乎不含有除菌絲體及代謝產(chǎn)物以外的雜質(zhì),而后者則含有2/3以上的雜質(zhì)。因此,用小麥酒精廢糟液生產(chǎn)的菌粉和多糖產(chǎn)品質(zhì)量較好,其保健和藥效成份含量也相應(yīng)的優(yōu)于傳統(tǒng)產(chǎn)品。本發(fā)明的工藝具有如下特點1、環(huán)保、很少的排放物;整個生產(chǎn)工藝基本沒有或很少量的排放物,避免了環(huán)境的污染,使酒精生產(chǎn)成為綠色、安全的加工過程成為可能。2、產(chǎn)品質(zhì)優(yōu)效高;在傳統(tǒng)的菌粉生產(chǎn)過程,發(fā)酵終止后通過板框過濾、收集濾餅、干燥、粉碎,而濾過液棄去,但是發(fā)酵液內(nèi)的胞外產(chǎn)物很多是保健、藥效成份,棄之是巨大浪費。本發(fā)明所述工藝則是發(fā)酵終止后,通過膠體磨勻質(zhì),研磨成5微米的基質(zhì)顆粒,在此過程中則包含了真菌的破壁過程,使產(chǎn)品中保健,藥效成份大幅度增加,因此本發(fā)明獲取的產(chǎn)品是較好的,并克服所述產(chǎn)品缺陷。本發(fā)明所述的食用、藥用真菌多糖的生產(chǎn)工藝還具有如下特點本發(fā)明所述的小麥酒精廢糟液生產(chǎn)真菌菌粉及真菌多糖的方法,實現(xiàn)了如下效果;1.環(huán)保、零排放。真菌多糖的傳統(tǒng)工藝是提取真菌多糖采用發(fā)酵液過濾,濃縮,醇析、干燥、粉碎等步驟實現(xiàn)的。而我們的工藝,發(fā)酵終止,9(TC處理5小時,板框過濾,收集濾液,而濾鉼在制造菌粉時用于調(diào)正發(fā)酵液含水量。濾液則通過濃縮,噴霧干燥生產(chǎn)多糖,基本沒有排放物,和影響周圍環(huán)境。2.產(chǎn)品優(yōu)質(zhì)、高效?,F(xiàn)有經(jīng)醇析的多糖產(chǎn)品,由于現(xiàn)有生產(chǎn)工藝不科學(xué)、不合理,使其具有的保健功能或藥效成份大量流失,因此真菌多糖雖純度較高,但療效并非全面。而本發(fā)明的真菌多糖的生產(chǎn)工藝,既考慮了多糖的提取(9(TC維持5小時),又考慮到藥效成份的流失(除加熱,水提之外,不用醇析),多糖含量能達到30%以上,并且有很好的療效。3.本發(fā)明富含酵母發(fā)酵所產(chǎn)生的活性物質(zhì)。小麥酒精廢糟液,含有20種氨基酸,IO幾種維生素和多種礦物元素,這些對于人們的保健和疾病的治療將有極大的幫助。由于采用了上述技術(shù)方案,本發(fā)明具有如下有益效果;本發(fā)明所述的小麥酒精廢糟液生產(chǎn)真菌菌粉及真菌多糖的方法,利用小麥酒精廢糟液生產(chǎn)食用、藥用真菌菌粉及真菌多糖產(chǎn)品其優(yōu)點如下1.提供了一種利用小麥酒精廢糟液生產(chǎn)高附加值產(chǎn)品的新途徑。2.將小麥酒精廢糟液——這種高濃度的有機廢水作為一種資源加以再利用,生產(chǎn)廠家達到零排放,解決了小麥酒精發(fā)酵的污染問題。3.使食用、藥用真菌菌粉和真菌多糖的產(chǎn)品質(zhì)量有了進一步的提高。4.使食用、藥用真菌菌粉和真菌多糖的成本大幅度的降低。5.使用本發(fā)明的方法,利用小麥酒精廢糟液生產(chǎn)食用、藥用真菌菌粉及真菌多糖將獲得巨大的經(jīng)濟效益和明顯的社會效益。具體實施方式參考下面的實施例,可以更詳細(xì)地解釋本發(fā)明;但是應(yīng)當(dāng)指出的是本發(fā)明并不局限于下述實施例。本發(fā)明所述的小麥酒精廢糟液生產(chǎn)真菌菌粉及真菌多糖的方法,用小麥酒精廢糟液生產(chǎn)食用、藥用真菌菌粉及真菌多糖的方法的工藝;其中包括酒精發(fā)酵后獲得酒精廢糟液;利用酒精廢糟液通過離心、過濾或者清液濃縮液經(jīng)加水稀釋還原成清液。還包括,利用沉淀物制成全能干飼料。還包括,利用廢糟液的清液勾兌、調(diào)配搖瓶培養(yǎng)基、種子罐擴培的培養(yǎng)基和發(fā)酵罐的發(fā)酵培養(yǎng)基。即在清液中加入0-0.5%酵母膏、0-4%蔗糖,用NaOH和HC1調(diào)PH值至5.5-6.5。本發(fā)明使用的菌種為松茸(Trichotomamatsutake),來源于東北食(藥)真菌研究所;蝙蝠蛾擬青霉(Paecilomycesh印iali)來源于遼寧省微生物研究院;本發(fā)明也可使用類似或相同但為其它研究院所或廠家生產(chǎn)的松茸、蝙蝠蛾擬青霉。菌種保存的方法為生理鹽水低溫保存。菌種擴大培養(yǎng)的方法,采用常規(guī)逐級擴培的方法,包括如下步驟1.配制斜面培養(yǎng)基斜面培養(yǎng)基采用PDA培養(yǎng)基,按常規(guī)方法配制。2.配制液體培養(yǎng)基包括搖瓶培養(yǎng)基、種子罐擴培培養(yǎng)基,兩種培養(yǎng)基組成完全相同。(1)用酒精廢糟液離心或者過濾獲得的清液加入0-0.5%的酵母膏;0_4%蔗糖用NaOH和HC1調(diào)PH值至5.5_6.5。(2)用清液的濃縮液加水稀釋成至原體積的15-30倍溶液,加入0-0.5%酵母膏,0_4%蔗糖,用NaOH和HC1調(diào)PH值至5.5-6.5。3.斜面菌種的活化培養(yǎng)用接種劑,劑塊接種,在PDA培養(yǎng)基上25-27t:培養(yǎng)10-15天。4.搖瓶擴培取250毫升三角瓶蒸入70-90毫升搖瓶培養(yǎng)基,常規(guī)滅菌后,冷卻至3(TC時接入斜面菌種lcm7瓶。先于25-27t:下靜置24小時后于搖床上160-180rpm,24-27。C下振蕩培養(yǎng)48-72小時。5.種子罐擴培:種子罐擴培培養(yǎng)基常規(guī)裝罐、滅菌后,冷卻至25t:時,按5_10%的接種量,接入搖瓶種子。在接種前,可按接種量在無菌室內(nèi),嚴(yán)格無菌操作,將多瓶并成大三角瓶接種。通用機械攪拌發(fā)酵罐0-12小時,攪拌速度為80-100rpm,通氣為0.5:lvvm,12-72小時攪拌速度120-140rpm,通氣量為0.5:lvvm。氣升式生物反應(yīng)器,通氣攪拌的條件為0-12小時,0.25:lvvm,12_72小時通氣量為O.5:l兩。培養(yǎng)溫度為24-27t:,大約培養(yǎng)48-72小時。此后,發(fā)酵培養(yǎng)基配制及發(fā)酵生產(chǎn)食用、藥用真菌菌粉和真菌多糖。發(fā)酵培養(yǎng)基的配制與搖瓶和種子發(fā)酵罐培養(yǎng)基相同。常規(guī)裝罐、滅菌后,按5-10%的接種量接入種子罐的種子,0-72小時通氣量的控制與種子罐完全相同。72-144小時,通用攪拌式發(fā)酵罐,攪拌速度為160-200rpm通氣為0.5:lvvm。氣升式發(fā)酵罐0.75:lvvm。發(fā)酵溫度控制在24-27°C。生產(chǎn)食用、藥用真菌菌粉的方法前述步驟后,待發(fā)酵終止,發(fā)酵液(包含菌絲體)加入真菌多糖生產(chǎn)獲得的濾餅,以調(diào)正含水量。通過膠體磨研磨、均質(zhì)使其最大顆粒不超過5微米,用離心式噴霧干燥機噴霧干燥,噴霧干燥的工藝條件為進風(fēng)溫度23(TC,出風(fēng)溫度90°C;噴霧量為1000kg/h,產(chǎn)品量300kg/h,最后包裝成產(chǎn)品食用、藥用真菌菌粉。生產(chǎn)食用、藥用真菌多糖的方法或者,待發(fā)酵終止,將發(fā)酵液溫度升至90°C,并維持5小時。冷卻至35°C,通過板框過濾機過濾。收集濾餅,待生產(chǎn)真菌菌粉時加入到發(fā)酵液中調(diào)解水份含量之用。然后,收集濾過液,濃縮成1/5(5倍濃縮)由離心式噴霧干燥機噴霧干燥,噴霧干燥的工藝條件為進風(fēng)溫度230°C,出風(fēng)溫度9(TC;噴霧量為1000kg/h,產(chǎn)品量300kg/h,最后包裝成產(chǎn)品;食用、藥用真菌多糖。實施例1:以小麥酒精廢糟液生產(chǎn)桑黃菌粉和桑黃多糖;—、小麥酒精廢糟液清液的制備收集新鮮的小麥酒精廢糟,利用板框過濾機,過濾的方法,收集濾液;即為小麥酒精廢糟液的清液。二、桑黃液體深層發(fā)酵的工藝條件和發(fā)酵工藝1.桑黃發(fā)酵的工藝條件(1)斜面菌種擴培桑黃(Phelli皿signiarius)的保存菌種購自東北食(藥)真菌研究所。斜面培養(yǎng)基PDA綜合培養(yǎng)基(馬鈴薯200克,蔗糖20克,磷酸二氫鉀3克,硫酸鎂1.5克,瓊脂20克,水1000毫升)用25X250mm試管,用桑黃保存菌種接種,27t:培養(yǎng)10天,在o-4t:條件下,保存?zhèn)溆谩?2)搖瓶菌種擴培搖瓶培養(yǎng)基的配制搖瓶培養(yǎng)基為小麥酒精廢糟液,經(jīng)板框過濾機過濾,獲得清液,在清液中加入0.25%的酵母膏,1.5%的蔗糖,用NaOH調(diào)ffl值至6.0;250毫升三角瓶裝量為70毫升/瓶。而750毫升三角瓶裝量為100-120毫升。常規(guī)滅菌,冷卻至3(TC,接入斜面菌種,先于27t:靜止培養(yǎng)24小時后,置于搖瓶機上160-180rpm,27。C振蕩培養(yǎng)72小時。(3)種子罐擴培種子罐的培養(yǎng)基與搖瓶培養(yǎng)基相同,常規(guī)裝罐滅菌后,冷卻至27t:,按10%的接種量,接入搖瓶種子。采用通用式機械攪拌發(fā)酵罐。0-12小時轉(zhuǎn)數(shù)為80-100rpm,通氣量為0.5:lvvm;12-72小時攪拌轉(zhuǎn)數(shù)為120-140rpm,通氣量為0.5:lvvm,培養(yǎng)溫度為27°C。(4)發(fā)酵罐發(fā)酵發(fā)酵培養(yǎng)基與種子罐培養(yǎng)基和搖瓶培養(yǎng)基相同。采用機械攪拌式發(fā)酵罐,空消后,將培養(yǎng)基打入發(fā)酵罐,進罐體積為70%。常規(guī)滅菌后,冷卻至27t:,按10%接種量,接入種子罐的種子。發(fā)酵罐的控制72小時之前條件同種子罐,72-144小時時,攪拌速度為160-200rpm,通氣量為0.5:lvvm,發(fā)酵溫度控制在27°C。2.桑黃的發(fā)酵工藝路線斜面培養(yǎng)搖瓶培養(yǎng)種子罐培養(yǎng)桑黃保存菌種^斜面M^搖瓶菌種^27°C10天180rpm27。C3天27°C3天種子罐種子發(fā)酵罐培,發(fā)酵液27°C4天三、桑黃菌粉的生產(chǎn)待發(fā)酵終止后,將發(fā)酵液和提取多糖獲得的桑黃濾餅或者桑黃濾餅粉,按比例加入,其目的是調(diào)解桑黃發(fā)酵液含水量,以達到70-75%。采用膠體磨,研磨、均質(zhì),使其基質(zhì)顆粒小于5微米。采用離心式噴霧干燥機進行噴霧干燥,其工藝條件為進風(fēng)溫度23(TC,出風(fēng)溫度9(TC,噴霧量為500-1000kg/h,產(chǎn)品量為100-300kg/h。最后包裝成產(chǎn)品,即桑黃菌粉。四、桑黃真菌多糖的生產(chǎn)待發(fā)酵終止后(發(fā)酵過程,同菌粉生產(chǎn)),發(fā)酵液加溫至9(TC,維持5小時。待冷卻至35t:時,板框過濾,濾餅待生產(chǎn)菌粉時用。收集濾過液,真空濃縮至1/5原體積。用離心式噴霧干燥機噴霧干燥(其條件與菌粉的噴霧干燥條件相同),最后包裝成為產(chǎn)品,即桑黃真菌多糖。本發(fā)明所述桑黃系一種藥用真菌,其多糖和菌粉產(chǎn)品,對治療癌癥有特效。同時還有很多的保健功能。本發(fā)明未詳述部分為現(xiàn)有技術(shù)。為了公開本發(fā)明的目的而在本文中選用的實施例,當(dāng)前認(rèn)為是適宜的,但是應(yīng)了解的是,本發(fā)明旨在包括一切屬于本構(gòu)思和本發(fā)明范圍內(nèi)的實施例的所有變化和改進。實施例2:用小麥酒精廢糟液生產(chǎn)松茸菌粉—、小麥酒精廢糟液清液的制備收集新鮮的小麥酒精廢糟液清液的濃縮液,將其稀釋20倍即為小麥酒精廢糟液的清液(清液還原液)。二、松茸發(fā)酵的工藝條件和發(fā)酵工藝1.松茸發(fā)酵的工藝條件(1)斜面培養(yǎng)菌株松茸(Trichotomamatsutake)保存菌種。購自東北食(藥)真菌研究所。培養(yǎng)基PDA綜合培養(yǎng)基25X250mm試管接種,生產(chǎn)菌種24-27。C培養(yǎng)10天左右,o-4t:保存?zhèn)溆谩?2)搖瓶培養(yǎng)培養(yǎng)基為小麥酒精廢糟液清液蒸發(fā)機獲得的濃縮液,將其稀釋20倍,還原為清液,加入0.25%的酵母膏,1.5%的蔗糖,加入Na0H調(diào)ffl至6.0,250毫升三角瓶,裝量70毫升,而750毫升三角瓶裝量為100-120毫升。常規(guī)滅菌,冷卻至27t:,接入斜面菌種,先于24-27t:靜置24小時后置于搖瓶機上160-180rpm,27t:恒溫培養(yǎng)72小時(3)種子罐培養(yǎng)培養(yǎng)基同搖瓶,常規(guī)裝罐和滅菌后,冷卻至27t:,按5X的接種11量接入搖瓶種子。采用通用式機械攪拌發(fā)酵罐,0-12小時轉(zhuǎn)數(shù)為80-100rpm,通氣量為0.5:lvvm;12-72小時攪拌速度為120-140rpm通氣量為0.5:lvvm培養(yǎng)溫度為27°C。(4)發(fā)酵罐發(fā)酵培養(yǎng)基與種子發(fā)酵罐和搖瓶培養(yǎng)基完全相同。采用通用機械攪拌發(fā)酵罐,待發(fā)酵罐空消后將培養(yǎng)基打入發(fā)酵罐中,進罐體積為70%。常規(guī)滅菌后,冷卻至27t:,按10%的接種量接入種子罐中的菌種。72小時之前發(fā)酵控制條件與種子罐相同,72-144小時攪拌速度為160-200rpm,通氣量為0.5:lvvm,發(fā)酵溫度控制在27°C。2.松茸的發(fā)酵工藝路線斜面培養(yǎng)搖瓶培養(yǎng)種子罐培養(yǎng)松茸保存菌種*斜面^^搖瓶菌種^27°C10天160rpm27。C3天27°C3天種子罐種子發(fā)酵罐培f^發(fā)酵液27°C4天三、松茸菌粉的生產(chǎn)待發(fā)酵終止后,將發(fā)酵液中加入提取松茸多糖獲得的松茸濾餅或者濾餅粉。調(diào)整發(fā)酵液含水量至70_75%,采用膠體磨研磨、均質(zhì)使其基質(zhì)顆粒小于5微米。采用離心式噴霧干燥機進行噴霧干燥,其工藝條件為進風(fēng)溫度23(TC,出風(fēng)溫度9(TC,噴霧量為1000kg/h,產(chǎn)品量為300kg/h。最后,包裝成為產(chǎn)品,即松茸菌粉。注松茸系一種珍奇的食用真菌,其子實體,不能人工培養(yǎng),而菌絲體可以通過液體深層發(fā)酵法生產(chǎn)。實施例3:用小麥酒精廢糟液生產(chǎn)蟲草多糖—、小麥酒精廢糟液清液的制備收集新鮮小麥酒精廢糟液,通過離心方法獲得清液。二、冬蟲夏草的發(fā)酵工藝條件和發(fā)酵工藝1.冬蟲夏草的發(fā)酵工藝條件(1)菌株。蝙蝠蛾擬青霉(Paecilomycesh印iali)來源于遼寧省微生物研究院。培養(yǎng)基PDA綜合培養(yǎng)基25X250mm試管接種保存種子。24。C培養(yǎng)8-10天,0-4。C保存?zhèn)溆谩?2)搖瓶培養(yǎng),培養(yǎng)基為小麥酒糟廢糟液清液內(nèi)加入0.25%酵母膏,1.5%蔗糖,用NaOH調(diào)ra值至6.0。250毫升三角瓶裝量為70毫升;750毫升的三角瓶裝100-120毫升。常規(guī)滅菌,冷卻至24t:振蕩培養(yǎng)2.5天。(3)種子罐培養(yǎng),培養(yǎng)基同搖瓶培養(yǎng)基。常規(guī)滅菌,冷卻至24t:,按5X接種量接入搖瓶菌種,用通用機械攪拌發(fā)酵罐,0-12小時轉(zhuǎn)速為80-100rpm,通氣量為0.5:lvmm,12-72小時,攪拌轉(zhuǎn)速為120-140rpm,通氣量為0.5:lvvm,培養(yǎng)溫度為24°C,培養(yǎng)周期為72小時。(4)發(fā)酵罐發(fā)酵培養(yǎng)基與種子罐培養(yǎng)基相同。采用通用機械攪拌發(fā)酵罐,待發(fā)酵罐空消后,將培養(yǎng)基打入發(fā)酵罐中,進罐體積為70%。常規(guī)滅菌后,冷卻至241:按10%的接種量,接入種子罐中的菌種,發(fā)酵控制與種子罐的發(fā)酵控制條件相同。48-72小時攪拌速度為160-200rpm,通氣量為0.5:lvvm,發(fā)酵溫度控制在24"C,培養(yǎng)72小時。2.冬蟲夏草的發(fā)酵工藝路線<formula>formulaseeoriginaldocumentpage13</formula>三、蟲草多糖的生產(chǎn)待發(fā)酵終止,將發(fā)酵液溫度升至90°C,維持5小時。冷卻至35°C,用板框過濾機過濾收集濾過液,真空濃縮至原體積的1/5。用離心式噴霧干燥機噴霧干燥;工藝控制進氣口溫度為23(TC,出氣口溫度為9(TC,噴霧量1000kg/h,產(chǎn)品量為300kg/h。最后包裝成為產(chǎn)品,即蟲草多糖。收集的瀘餅,待菌粉生產(chǎn)時用。注蝙蝠蛾擬青霉(Paecilomycesh印iali)是冬蟲夏草的一個品種,它是一種藥用真菌,冬蟲夏蟲很難人工栽培成子實體,但是通過液體深層發(fā)酵可以得到菌絲體,用其可以生產(chǎn)菌粉和蟲草多糖。權(quán)利要求一種小麥酒精廢糟液生產(chǎn)真菌菌粉及真菌多糖的方法,其特征是所述小麥酒精廢糟液以小麥為原料,經(jīng)過液體深層發(fā)酵,釀造酒精,獲得酒精廢糟液,包括如下步驟a、獲得清液將所述小麥酒精廢糟液中的固體由液體分離分離出來,獲得清液;b、獲得菌種擴培培養(yǎng)基,進行菌種擴培;1)、斜面菌種培養(yǎng)基制備和斜面菌種擴培;斜面菌種培養(yǎng)基采用PDA綜合培養(yǎng)基接種于24-27℃下培養(yǎng)10-15天;2)、搖瓶培養(yǎng)基,種子發(fā)酵罐的培養(yǎng)基制備及種子擴培搖瓶培養(yǎng)基和種子發(fā)酵罐培養(yǎng)基相同,即步驟a所獲得清液加入0-0.5%酵母膏;0-4%蔗糖,用NaOH和HCl調(diào)PH值至5.5-6.5;搖瓶培養(yǎng)取前述獲取物250毫升的三角瓶內(nèi),裝入70-90毫升的培養(yǎng)基,750毫升三角瓶,裝量為100-120毫升/瓶;滅菌后,冷卻至30℃時接入斜面菌種“PDA培養(yǎng)基上生長的,不超過10天的食用、藥用真菌的菌種”用接種下一小塊,大約1cm2左右純培養(yǎng)物,于24-27℃條件下,靜置24小時后置于搖床上160-180rpm于24-27℃左右,振蕩培養(yǎng)48-72小時;c、種子發(fā)酵罐培養(yǎng)在通用式機械攪拌發(fā)酵罐或者氣升式氣體攪拌式發(fā)酵罐中進行;常規(guī)滅菌后按5-10%接種量,接入搖瓶種子,其發(fā)酵條件為采用機械攪拌式發(fā)酵罐;0-12小時攪拌速度為80-100rpm,通氣量為0.5∶1vvm;或12-72小時攪拌速度120rpm-140rpm通氣量為0.5∶1vvm,采用氣升式空氣攪拌式發(fā)酵罐;或0-12小時時0.25∶1vvm,12-72小時為0.5∶1vvm;其中種子發(fā)酵罐培養(yǎng)溫度為24-27℃;發(fā)酵周期為48-72小時;獲得發(fā)酵培養(yǎng)基后,進行食用、藥用真菌液體深層發(fā)酵發(fā)酵培養(yǎng)基的成份與搖瓶、種子發(fā)酵罐的擴培培養(yǎng)基相同;即步驟a所獲得清液加入0-0.15%酵母膏,0-4%蔗糖,用NaOH和HCl調(diào)PH值至5.5-6.5;然后常規(guī)滅菌,滅菌后按5-10%的接種量,接入種子;其中發(fā)酵控制前72小時與種子發(fā)酵罐條件相同,用機械攪拌發(fā)酵罐;72-144小時,攪拌速度為160-200rpm,通氣為0.5∶1vvm,氣升式生物反應(yīng)器空氣攪拌的條件;72-144小時為0.75∶1vvm;發(fā)酵溫度為24-27℃,然后進入食用、藥用真菌菌粉的生產(chǎn),其中按本步驟發(fā)酵至144小時左右,還原糖下降變緩,即可終止發(fā)酵;d、將發(fā)酵液“內(nèi)含菌絲體”加入提取多糖時獲得的瀘餅,以調(diào)解含水量;通過膠體磨、研磨、均質(zhì),使其基質(zhì)顆粒小于5微米,通過離心式噴霧干燥機,噴霧干燥成食用、藥用真菌菌粉,其中水份為≤10%;e、食用、藥用真菌多糖的生產(chǎn)按步驟c,發(fā)酵終止時將發(fā)酵罐內(nèi)溫度控制到90℃,維持5小時,待冷卻在35℃左右進行板框過濾;然后收集濾液,真空濃縮至原體積的1/5左右;通過離心式噴霧干燥機,噴霧干燥,成為食用、藥用真菌多糖產(chǎn)品;所述濾餅,在生產(chǎn)菌粉時待用。F2009100662171C00011.tif,F2009100662171C00012.tif2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的小麥酒精廢糟液生產(chǎn)真菌菌粉及真菌多糖的方法,其特征是所述PDA綜合培養(yǎng)基為馬鈴薯200克,蔗糖20克,磷酸二氫鉀3克,硫酸鎂1.5克,水1000毫升,瓊脂20克。3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的小麥酒精廢糟液生產(chǎn)真菌菌粉及真菌多糖的方法,其特征是所述PDA綜合培養(yǎng)基的加工為200克馬鈴薯,洗凈去皮切成小塊,加水1000ml煮沸半個小時或高壓蒸煮20分鐘,紗布過濾,再依次添加蔗糖20克,磷酸二氫鉀3克,硫酸鎂1.5克,水1000毫升和瓊脂20克,充分溶解后趁熱紗布過濾,分裝試管,每試管約5-10ml"視試管大小而定",15磅蒸氣"12rC"滅菌20分鐘左右后取出試管擺斜面,冷卻后貯存待用。4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的小麥酒精廢糟液生產(chǎn)真菌菌粉及真菌多糖的方法,其特征是所述步驟a的獲得清液過程為利用離心機對所述小麥酒精廢糟液離心方式獲得所述清液,或利用過濾方式獲得所述清液,或?qū)⑺鲭x心或過濾方式獲得的清液濃縮后再次加水稀釋獲得所述清液。5.根據(jù)權(quán)利要求1或4所述的小麥酒精廢糟液生產(chǎn)真菌菌粉及真菌多糖的方法,其特征是將步驟b或C獲得搖瓶培養(yǎng)基種子發(fā)酵罐的培養(yǎng)基和發(fā)酵培養(yǎng)基;搖瓶、種子罐、發(fā)酵罐的培養(yǎng)基均用小麥酒精廢糟液由步驟a所獲得的清液為母體加入酵母膏0-0.5%,蔗糖0-4%,調(diào)PH值5.5-6.5而制成。6.根據(jù)權(quán)利要求1或4所述的小麥酒精廢糟液生產(chǎn)真菌菌粉及真菌多糖的方法,其特征是步驟d,在發(fā)酵終止后,加入提取多糖時獲得的濾餅調(diào)含水量,先用膠體磨、研磨成<5微米基質(zhì)顆粒,不經(jīng)板框過濾,直接用離心式噴霧干燥機噴霧干燥,制成食用、藥用真菌菌粉。7.根據(jù)權(quán)利要求1或4所述的小麥酒精廢糟液生產(chǎn)真菌菌粉及真菌多糖的方法,其特征是所述步驟e,發(fā)酵終止時,在發(fā)酵罐內(nèi),發(fā)酵液直接升溫至90°C,維持5小時,待冷卻至35t:左右,進行板框過濾,收集濾液,真空濃縮至原體積的1/5,通過離心式噴霧干燥機噴霧干燥,其中條件為進風(fēng)溫度調(diào)至200-23(TC,出風(fēng)溫度調(diào)至9(rC,噴液量為500-1000kg/h;制得食用、藥用真菌多糖產(chǎn)品;其中板框過濾獲得的濾餅,待生產(chǎn)菌粉時用。全文摘要本發(fā)明公開一種小麥酒精廢糟液生產(chǎn)真菌菌粉及真菌多糖的方法,涉及小麥酒精廢糟液的再利用技術(shù),包括如下步驟a、獲得清液b、獲得菌種擴培培養(yǎng)基,進行菌種擴培;c、種子發(fā)酵罐培養(yǎng)d、將發(fā)酵液“內(nèi)含菌絲體”加入提取多糖時獲得的瀘餅,以調(diào)解含水量;獲得食用、藥用真菌菌粉;e、食用、藥用真菌多糖的生產(chǎn)按步驟c,獲得食用、藥用真菌多糖產(chǎn)品;本發(fā)明實現(xiàn)了小麥酒精廢糟液的綜合利用,變廢為寶目的,并可將廢糟液轉(zhuǎn)化成高產(chǎn)值的保健食品和貴重的藥品原料。文檔編號C12R1/79GK101709308SQ20091006621公開日2010年5月19日申請日期2009年10月22日優(yōu)先權(quán)日2009年10月22日公開號200910066217.發(fā)明者左麗萍,曹文偉,楊建武申請人:河南健古生物工程有限公司
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