專利名稱：用于細胞遷移研究及高通量藥物篩選的劃痕實驗裝置的制作方法
用于細胞遷移研究及高通量藥物篩選的劃痕實驗裝置 發(fā)明領(lǐng)域
本發(fā)明涉及一種簡便快速的劃痕實驗裝置，適用于細胞遷移研究以及以細胞 遷移為靶點的高通量藥物篩選。
背景技術(shù)：
細胞遷移在人體的正常生理活動和疾病發(fā)生中普遍存在，例如細胞的覓食、 傷口損傷愈合、胚胎發(fā)生、神經(jīng)系統(tǒng)形成、免疫反應、癌癥轉(zhuǎn)移等很多事件都涉 及到細胞遷移。細胞遷移是當甜生命科學研究的一個重要方向和熱點，科學家們 試圖通過對細胞遷移的研究，在血管損傷修復、阻止癌癥轉(zhuǎn)移、植皮等醫(yī)學應用 方面取得更大成果。
目前研究細胞遷移主要有兩種實驗方法劃痕實驗和transwell實驗。上皮 細胞、角質(zhì)細胞等在生理狀態(tài)下形成單層或者復層上皮，在創(chuàng)傷愈合等病理狀態(tài) 下，細胞發(fā)生遷移，以側(cè)向的運動為主。劃痕實驗很好地模擬了這種運動形式， 并且操作方便，細胞外圍環(huán)境容易控制，因此是研究細胞遷移的一個很好的模型。 在現(xiàn)行的劃痕實驗中， 一般采用無菌的塑料槍頭人工手劃，具有劃痕不直、劃痕 位置不確定、不便于拍照及后續(xù)的定量統(tǒng)計分析等缺陷。另外，現(xiàn)行的劃痕方法 不適用于以細胞遷移為耙點進行高通量藥物篩選。
針對以上實際問題，本領(lǐng)域很有必要發(fā)明一種操作快速方便、劃痕位置固定、 適用于細胞遷移研究及高通量藥物篩選的裝置。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種快速方便的劃痕實驗裝置，適用于細胞遷移研究及 高通量藥物篩選，且劃痕均一，位置固定，便于后續(xù)的拍照與定量分析。 本發(fā)明具有以下幾個特征
1. 側(cè)壁可以沿折痕折疊，當側(cè)壁1和側(cè)壁2折疊，側(cè)壁3和側(cè)壁4展開時， 該裝置可以沿著細胞培養(yǎng)板橫向移動，產(chǎn)生一道劃痕。類似地，當側(cè)壁 3和側(cè)壁4折疊，側(cè)壁1和側(cè)壁1展開時，該裝置可以沿著細胞培養(yǎng)板 縱向移動，產(chǎn)生一道垂直的劃痕。
2. 橡膠劃痕棒條形板可以拆分下來，它與板蓋通過螺絲固定。這樣，當樣 品數(shù)目較少時，可以只安裝上合適數(shù)量的橡膠劃痕棒條形板，充分利用 細胞培養(yǎng)板的每個孔。
3. 可適用于高通量篩選系統(tǒng)，通過計算機控制的自動化工作站代替人工進 行加樣、劃痕、清洗、培養(yǎng)基更換、拍照統(tǒng)計等操作，使操作過程程序 化，減少人工操作造成的誤差，結(jié)果更準確可靠。


圖1是本發(fā)明的整體結(jié)構(gòu)示意圖。
圖2是本發(fā)明的橡膠劃痕棒條形板的結(jié)構(gòu)示意圖。
具體實施例方式
根據(jù)實驗的需要，選擇適當數(shù)量的橡膠劃痕棒條形板，用螺絲固定在相應的 位置上。實驗前用紫外線照射安裝好的裝置，進行滅菌。
在細胞培養(yǎng)板中鋪好細胞，劃痕實驗時拿開細胞培養(yǎng)板的板蓋，把本發(fā)明套 在細胞培養(yǎng)板上，側(cè)壁1和側(cè)壁2折疊下來，側(cè)壁3和側(cè)壁4伸展開，使橡膠劃 痕棒位于細胞培養(yǎng)板的孔的最左邊，輕輕向右推動，劃出一道劃痕；接著側(cè)壁3 和側(cè)壁4折疊下來，側(cè)壁1和側(cè)壁2伸展開，使橡膠劃痕棒位于細胞培養(yǎng)板的孔 的最上邊，輕輕向下推動，劃出一道劃痕。這樣， 一道十字交叉的劃痕就產(chǎn)生了。 然后，洗去劃掉的細胞，換成新鮮的細胞培養(yǎng)基。觀察，拍照。拍照時以十字交 叉處為參照點，這樣一個孔就可以拍4個視野。
權(quán)利要求
1、一種用于細胞遷移研究和高通量藥物篩選的劃痕實驗裝置，其特征如下(a)與細胞培養(yǎng)板尺寸精確吻合的劃痕裝置板身。(b)板身上有螺絲小孔，可以固定鑲有橡膠劃痕棒的條形板。(c)條形板上鑲有一定數(shù)量的橡膠劃痕棒。
2、 根據(jù)權(quán)利要求l所述的板身，其四側(cè)壁均可以沿折痕折疊與展開，折疊時正好與細胞培 養(yǎng)板套牢，并可以平行地自由滑動。
3、 根據(jù)權(quán)利要求1所述的鑲有橡膠劃痕棒條形板，其兩側(cè)有蠊絲孔正好可以用螺絲與板身 固定在一起，也可以拆下來。
4、 根據(jù)權(quán)利要求1所述的橡膠劃痕棒，其位置正好位于每個細胞培養(yǎng)板的孔的正中央處。
5、 根據(jù)權(quán)利要求1所述的梭膠劃痕梓，其髙度比培養(yǎng)板的商度略髙，且與細胞接觸端的直 徑為5毫米。
6、 劃痕實驗中該裝置的使用方法(a) 前一天晚上接種細胞丁-細胞培養(yǎng)板中。(b) 實驗時，將該裝置的兩側(cè)伸展開，另兩側(cè)折疊下來套在細胞培養(yǎng)板上，按住自左向右 輕輕推動該裝置。(c) 類似地，將該裝置折疊T"來的兩側(cè)展開，將伸展的兩側(cè)折疊下來套住細胞培養(yǎng)板，按 住自上而下輕輕推動該裝置。(d) 清洗劃痕，洗去劃i的細胞。(e) 換成新鮮的含有血淸的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞，毎隔一段時間觀察和拍照。
7、 根據(jù)權(quán)利要求6所述的劃痕實驗，實驗前細胞先用無血清的培養(yǎng)基培養(yǎng)一個晚上。
8、 根據(jù)權(quán)利要求6所述的劃痕實驗，劃痕后可以加入抑制或促進細胞遷移的藥物。
9、 根據(jù)權(quán)利要求6所述的劃痕實驗，拍照時每次拍照位置要一致。
10、 根據(jù)權(quán)利耍求9所述的拍照位置，可以取十字交叉的劃痕為標記，每次拍十字交叉處的 4個視野。
11、 根據(jù)權(quán)利要求9所述的劃痕實驗，通過測量劃痕區(qū)域的像素定量分析細胞遷移的速度。
12、 該裝置可適用于髙通量藥物篩選系統(tǒng)，通過計算機控制的自動化工作站代替人工進行加 樣、劃痕、清洗、培養(yǎng)基更換、拍照統(tǒng)計等操作。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種簡便快速的劃痕實驗裝置，適用于細胞遷移研究以及以細胞遷移為靶點的高通量藥物篩選。本發(fā)明帶有可拆卸的橡膠劃頭，以含有多個孔的細胞培養(yǎng)板(6、12、24、96、384孔板等)為實驗對象，能精確地套在細胞培養(yǎng)板上，只需輕輕一推，就可以產(chǎn)生整齊均一的劃痕，且劃痕位置固定，便于拍照及后續(xù)的統(tǒng)計分析。本裝置也適用于高通量篩選系統(tǒng)的自動化工作平臺，用于快速篩選以細胞遷移為靶點的藥物。另外，本發(fā)明可重復使用，所帶的橡膠劃頭具有可拆卸功能，經(jīng)酒精噴灑，紫外線照射后即可使用。本發(fā)明為劃痕實驗提供了一種簡便快速的辦法，具有很大的市場前景。
文檔編號C12Q1/02GK101508954SQ200910068158
公開日2009年8月19日 申請日期2009年3月18日 優(yōu)先權(quán)日2009年3月18日
發(fā)明者軍 周, 謝松波, 高金珉 申請人:南開大學