專利名稱：：一種促進手術(shù)后傷口愈合的食品或藥品的制作方法
技術(shù)領域：
：本發(fā)明涉及醫(yī)藥
技術(shù)領域：
，特別是涉及海洋膠原肽和大豆肽在促進手術(shù)后傷口愈合的保健食品或藥品。
背景技術(shù)：
：王正國主編《創(chuàng)傷愈合與修復》，山東科學技術(shù)出版社1998年第1版中論述了傷口愈合是組織生長、再生的一種特殊生物學過程，所涉及的炎癥反應細胞增殖、新生血管和淋巴管形成，以及細胞外基質(zhì)合成，是一個連續(xù)動態(tài)過程，不能截然分開。因此，凡是能促進或抑制某一個環(huán)節(jié)的因素，均可影響傷口愈合的整個過程。傷口愈合過程中的某些環(huán)節(jié)可受一些營養(yǎng)代謝因素的影響，如某些氨基酸缺乏或失衡會嚴重影響傷口蛋白質(zhì)合成和傷口愈合，碳水化合物和脂肪代謝紊亂對傷口愈合有直接和間接雙重作用，維生素C、微量元素是體內(nèi)許多金屬酶的基本輔助成分，參與蛋白質(zhì)合成過程中多聚體形成。朱兆明《皮膚儲存與應用》，人民軍醫(yī)出版社2002第1版中論述了，膠原蛋白(也稱膠原，Collagen)是細胞外基質(zhì)的主要成分，是一種白色、不透明、無支鏈的纖維蛋白質(zhì)。膠原是參與創(chuàng)傷愈合的主要結(jié)構(gòu)蛋白。同時膠原蛋白可促進肉芽組織生成，加速創(chuàng)面的愈合。膠原分子對成纖維細胞的趨化反應，使膠原在傷口愈合過程中起重要作用。關于促進傷口愈合的藥物，申請?zhí)?8804333.5、97180607.1、97180613.6、98813966.9、97180606.3專利文獻中分別公開了N—羥基一2—(烷基、芳基或雜芳基硫烷基、亞磺?；蚧酋；?一3—取代的垸基、芳基或雜芳基酰胺、鄰-亞磺酰氨基雜芳基異羥月虧酸、鄰亞磺酰氨基芳基異羥肟酸、N—羥基一2—(烷基、芳基或雜芳基硫烷基、亞磺?；蚧酋；?一3取代的烷基、芳基或雜基酰胺、e-亞磺酰氨基異羥肟酸等用于組織潰瘍、異常的傷口愈合，其機理為金屬蛋白酶抑制劑。關于低分子肽類的藥物，申請?zhí)?00410022266.2專利文獻中公開了c-ski基因及其多肽促進損傷愈合又減輕瘢痕；申請?zhí)?1109400.1專利文獻中公開了基因重組成纖維細胞生長因子一8a多肽具有上調(diào)細胞連接蛋白(Connexin43)表達，活化上皮功能，加速傷口愈合，以及促進軟骨分化等生物活性；申請?zhí)?00610152684.2專利文獻中公開了具有促進血管形成、組織再生及傷口愈合作用的多肽組合制劑；申請?zhí)?00410098483.X專利文獻中公開了一組具有促進新血管形成、組織再生及傷口愈合作用的活性小分子多肽胸腺素fU6及其藥物組合物；申請?zhí)?00410015853.9專利文獻中公開了促進皮膚、結(jié)締組織、骨生長的多肽組合物；申請?zhí)?1820299.3專利文獻中公開了新的一類多肽成纖維細胞生長因子具有促進傷口愈合等作用；申請?zhí)?00610112159.8專利文獻中公開了涉及用于加速傷口愈合的組合物，該組合物中包含有血栓調(diào)節(jié)蛋白的EGF樣區(qū)域之氨基酸序列的多肽或其中保守性變異體；申請?zhí)?0116910.6專利文獻中公開了一種新的多肽一上皮形成素9.9和編碼這種多肽的多核苷酸用于促進傷口愈合等；申請?zhí)?9816184.5專利文獻中公丌了取代的雜環(huán)酰基一三肽在傷口愈合和防止血小板凝聚中的用途。海洋膠原肽是以海洋魚皮作主要原料，用酶解法生產(chǎn)的、相對分子質(zhì)量低于1000的低聚肽(短肽)為主要成分的粉末狀產(chǎn)品。彭宏斌《海洋膠原肽輔助降血糖和免疫營養(yǎng)功能的效果研究》，CHKD博碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫2008年博士論文中報導海洋膠原肽具有輔助降血糖功能，可改善糖尿病患者胰島素敏感性和改善胰島素分泌功能，縮短糖尿病患者的血糖調(diào)整期，降低夜間低血糖的發(fā)生率。海洋膠原肽短期干預手術(shù)后患者可以改善營養(yǎng)狀況、提高免疫能力、縮短平均住院日。劉桂琴等《海洋膠原肽對2型糖尿病大鼠過氧化應激標志物表達的影響》，中國組織工程研究與臨床康復，2008，12(23)中報導體外實驗證實海洋膠原肽具有抗氧化等生物活性。海洋膠原肽可能具有一定的抗炎癥效應。關于海洋膠原肽的用途，申請?zhí)?00710157641.8專利文獻中公開了海洋膠原肽作為制備降血糖藥物、保健食品或食品的用途，申請?zhí)?00710157643.7專利文獻中海洋膠原肽作為制備抗氧化藥物、保健食品、食品或化妝品的用途，申請?zhí)?00610086812.8專利文獻中公開了海洋膠原肽在制備免疫調(diào)節(jié)藥物或食品中的用途。大豆肽是以大豆、豆粕或大豆蛋白為主要原料，用酶解法或微生物發(fā)酵法生產(chǎn)的，主要成分為肽，且分子量分布在10000Dalton以下的粉末狀產(chǎn)品。大豆肽含有的八種必需氨基酸，除蛋氨酸為限制氨基酸以外，甘氨酸、脯氨酸等其它氨基酸均超過或接近世界衛(wèi)生組織(wro)的推薦標準，因此具有較高的營養(yǎng)價值。分子量小于1000的肽吸收率高達90°/。以上。優(yōu)質(zhì)大豆肽的分子量分布以小于1000的為主，分子量主要在300700范圍內(nèi)。大豆肽能促進礦物質(zhì)吸收、降低血壓，大豆肽能促進脂肪代謝，大豆肽還有免疫功能，抗氧化功能，降低血糖作用。關于大豆肽的用途，申請?zhí)?00510077612.1專利文獻中公開了具有解酒護肝功能的產(chǎn)品及制備方法和用途，申請?zhí)?00610026655.1專利文獻中公開了一種促進肥牛肌腱發(fā)育的多肽及微生物制劑及制備方法，以上專利均未述及肽用于促進手術(shù)后傷口愈合的用途?，F(xiàn)有天然來源的短肽類產(chǎn)品中有同仁堂牌短肽特殊營養(yǎng)食品，分別有供產(chǎn)后人群食用、腎病患者、瘤患者、肝病患者、糖尿病患者、骨傷患者、術(shù)后患者食用的相應產(chǎn)品。其中術(shù)后患者食用的短肽特殊營養(yǎng)食品配方為海洋膠原肽、海洋骨原肽、乳清蛋白肽、卵白蛋白肽、山藥提取物、大棗提取物、桑椹提取物、低聚異麥芽糖、復合維生素、復合礦物質(zhì)，產(chǎn)品特征在于短肽分子量小于1000D，適用于各種外科手術(shù)圍手術(shù)期、燒傷病人、營養(yǎng)不良以及體弱者。李英杰等《枸杞多糖免疫調(diào)節(jié)作用機制研究進展》中國新藥雜志，2004，13(10))研究表明枸杞多糖能人體增強免疫力；楊海軍，功能性食品配料——水溶性膳食纖維，中國食物與營養(yǎng)，2003，(9)報導水溶性膳食纖維能增強胃腸蠕動；黃祥元，酪蛋白磷酸肽及其促進礦物質(zhì)吸收的因素，食品與機械，2008，(3)報導酪蛋白磷酸肽能增強鈣、鐵等微量元素的吸收。綜上所述，目前還沒有關于分子量在10000以下的天然來源的肽與葡萄糖酸鋅、維生素C組成的應用于促進手術(shù)后傷口愈合方面藥品或食品的報道，也沒有在其中加入枸杞多糖、水溶性膳食纖維、酪蛋白磷酸肽的藥品或食品的報道。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的提供一種促進手術(shù)后傷口愈合的保健食品或藥品及其制備方法。本發(fā)明的技術(shù)方案是該促進手術(shù)后傷口愈合的食品或藥品，它的活性成分主要由下列重量份的原料制成的口服制劑大豆肽l-100g、海洋膠原肽1-100g。優(yōu)選的技術(shù)方案可以是上述的主要活性成份中加入下述重量份的葡萄糖酸鋅o.01-0.5g、維生素CO.1-lg、枸杞多糖0.1-10g、水溶性膳食纖維l-100g、酪蛋白磷酸肽0.1-10g中的一種或多種原料。較優(yōu)選的方案是由大豆肽20-60g、海洋膠原肽20-60g、葡萄糖酸鋅O.1-0.3g、維生素CO.2-0.8g組成。更較優(yōu)選的方案是由大豆肽30g、海洋膠原肽30g、葡萄糖酸鋅0.3g、維生素C0.4g組成。本發(fā)明中枸杞多糖可以增強免疫力；加入水溶性膳食纖維增強胃腸蠕動；加入酪蛋白磷酸肽可增強鈣、鐵等微量元素的吸收。本發(fā)明可采用保健食品或藥品上可接受的制備工藝和輔料制成的包括但不限于顆粒劑、口服液等常規(guī)口服制劑。本產(chǎn)品具有成本低，療效好，天然來源無毒副作用特點。具體實施例方式下面通過實施例對本發(fā)明進一步說明實施例l:取海洋膠原肽300g、大豆肽300g、水溶性膳食纖維100g、糖粉258.4g、酪蛋白磷酸肽5g、葡萄糖酸鋅3g、維生素C4g、枸杞多糖10g、檸檬酸10g、阿斯巴甜2g、固體香精5g,將所有原輔料分別過100目篩，用等比遞增的方法混合均勻。將混勻的物料用聚維酮K30的10%水溶液作粘合劑進行沸騰制粒，控制霧化壓力為0.15MPa,物料溫度為45'C，進風溫度為75'C;所得顆粒用20目篩整粒。用紙鋁包裝，每袋10克。實施例2:取海洋膠原肽300g、大豆肽300g、糖粉400g，將原輔料分別過100目篩，混合均勻。將混勻的物料用聚維酮K30的10%水溶液作粘合劑進行沸騰制粒，控制霧化壓力為0.15MPa，物料溫度為45'C，進風溫度為75。C;所得顆粒用20目篩整粒。用紙鋁包裝，每袋10克。實施例3:取海洋膠原肽400g、大豆肽200g、糖粉400g，將原輔料分別過100目篩，混合均勻。將混勻的物料用聚維酮K30的10%水溶液作粘合劑進行沸騰制粒，控制霧化壓力為0.15MPa，物料溫度為45。C，進風溫度為75。C;所得顆粒用20目篩整粒。用紙鋁包裝，每袋10克。實施例4:取海洋膠原肽200g、大豆肽400g、糖粉400g，將原輔料分別過100目篩，混合均勻。將混勻的物料用聚維酮K30的10%水溶液作粘合劑進行沸騰制粒，控制霧化壓力為0.15MPa，物料溫度為45。C，進風溫度為75。C;所得顆粒用20目篩整粒。用紙鋁包裝，每袋10克。實施例5:取海洋膠原肽30g、大豆肽30g、水溶性膳食纖維30g、酪蛋白磷酸肽0.5g、葡萄糖酸鋅0.3g、維生素C0.4g、枸杞多糖lg、檸檬酸2g、三氯蔗糖O.lg、麥芽糖醇150g、乙二胺四乙酸二鈉0.2g、香精(MANEW0826602)0.51g，在配制罐中加入500ml純化水，依次加入海洋膠原肽、大豆肽、乙二胺四乙酸二鈉、枸杞多糖、檸檬酸和水溶性膳食纖維，攪拌使溶解。用板框過濾器過濾，得到濾液。將三氯蔗糖、維生素C、酪蛋白磷酸肽、葡萄糖酸鋅用適量純化水溶解后，加入到濾液中，再加入麥芽糖醇，加水至1000ml,攪拌15分鐘，加入香精，再攪拌10分鐘，用2um濾芯過濾。灌裝，每瓶100ml，105'C滅菌30分鐘，即得。實施例6:取海洋膠原肽30g、大豆肽30g、葡萄糖酸鋅0.3g、維生素C0.4g，在配制罐屮加入500ml純化水，依次加入海洋膠原肽、大豆肽，攪拌使溶解。用板框過濾器過濾，得到濾液。將維生素C、葡萄糖酸鋅用適量純化水溶解后，加入到濾液中，加水至1000ml，攪拌15分鐘，用2"m濾芯過濾。灌裝，每瓶100ml，105。C滅菌30分鐘，即得。實施例7:取海洋膠原肽lg、大豆肽99g,在配制罐中加入500ml純化水，依次加入海洋膠原肽、大豆肽，攪拌使溶解。用板框過濾器過濾，得到濾液，加水至1000ml，攪拌15分鐘，用2um濾芯過濾。灌裝，每瓶100ml，105。C滅菌30分鐘，即得。實施例8:取海洋膠原肽99g、大豆肽lg，在配制罐中加入500ml純化水，依次加入海洋膠原肽、大豆肽，攪拌使溶解。用板框過濾器過濾，得到濾液，加水至1000ml，攪拌15分鐘，用2ym濾芯過濾。灌裝，每瓶100ml，105'C滅菌30分鐘，即得。一、促進手術(shù)后大鼠傷口愈合的功效研究1.材料與方法1.1原料實施例l-4樣品、海洋膠原肽粉。1.2實驗動物健康雄性二級SD大鼠，體重230250克。1.3實驗條件清潔級動物室，溫度范圍21-23'C，相對濕度50%—60%。1.4實驗方法1.4.1動物模型建立方法大鼠經(jīng)1%戊巴比妥鈉麻醉后，剃去背部皮膚，常規(guī)皮膚消毒，背部兩側(cè)分別切一個2cm長的縱行切口，同時切開肌肉，深達腹腔，然后逐層縫合肌肉和皮膚。整個過程模擬臨床手術(shù)過程，同時手術(shù)當天計為術(shù)后第O天(PODO)，以此類推。1.4.2實驗動物分組取144只體重為230-250g的大鼠，隨即分為6組，每組24只，分別為空白組、實施例樣品1-4(0.667g/kg.bw)、海洋膠原肽粉(0.667g/kg.bw)。手術(shù)當天開始，每日灌胃。分別于第3、7、14天處死大鼠，每個時間點各8只動物。1.4.3傷口愈合觀察1.4.3.1肉眼觀察每隔日用放大鏡觀察切口變化情況。各組于術(shù)后第3天觀察傷口及其周圍組織的創(chuàng)傷反應，第7、14天觀察傷口的恢復情況。術(shù)后創(chuàng)傷反應及傷口恢復情況統(tǒng)一按本實驗室自制標準評定。1.4.3丄i傷口及其周圍組織的創(chuàng)傷反應評定①i期反應。傷口有輕度腫脹。②n期反應。傷口及周圍組織輕度水腫，皮下有散在淤血斑。(DIII期反應。切口有少量血痂附著，傷口及周圍組織明顯水腫。L4.3丄2傷口恢復情況評定①優(yōu)。傷口組織無腫脹，皮膚青紫現(xiàn)象消失。②良。傷口組織輕度腫脹，皮下淤血斑消失，青紫現(xiàn)象逐漸消退。③差。傷口及周圍組織腫脹。1.4.3.2切口愈合的組織病理學觀察各組大鼠分別于術(shù)后第3、7、14天于傷口處距切口邊緣約0.5cm取全層皮膚組織。左側(cè)傷口所取組織的一半用4%多聚甲醛固定，保存待做石蠟切片及HE、Masson染色，另一半用于抗拉力檢測，右側(cè)傷口皮膚用于羥脯氨酸測定和其他指標的檢測。1.4.3.3膠原纖維染色(Masson染色)組織切片脫蠟至蒸餾水，蘇木素染色510分鐘，鹽酸酒精分化，流水藍化，蒸餾水洗，麗春紅酸性品紅液中染58分鐘，蒸餾水，1%磷鉬酸中染13分鐘，直接入苯胺藍液或亮綠液5分鐘，水速洗，置6(TC溫箱中烘干，二甲苯透明，封固。結(jié)果膠原纖維綠色，肌纖維、纖維素紅色。1.4.3.4切口的抗張強度檢測術(shù)后第7、14天，沿切口垂直方向切取以切口為中線，寬為0.5cm長為中線雙側(cè)各0.5cm，并包含切口在內(nèi)的皮膚試件組織，去除皮下脂肪組織，于長方形短邊以絲線縫合作為牽引線，將皮條置于帶有張力感受器的裝置中間，張力感受器另一端連接于多功能生物信號采集系統(tǒng)，采用帶有游標卡尺的微調(diào)裝置手動逐漸拉伸皮條，記錄皮條被拉斷時的張力。測微尺測量皮膚的厚度，每平方毫米面積的張力即為切口的抗張強度。1.4.3.5羥脯氨酸測定切取大鼠切口周圍2-3毫米的皮膚用于測定羥脯氨酸，方法依據(jù)南京建成生物工程公司的羥脯氨酸檢測試劑盒進行操作。1.4.4統(tǒng)計方法采用SPSS軟件進行單因素方差分析。2.結(jié)果2.1大鼠術(shù)后傷口愈合的肉眼觀察結(jié)果肉眼觀察表現(xiàn)，術(shù)后第3天，各組創(chuàng)傷反應比較好，但是沒有統(tǒng)計學意義(表1)。術(shù)后第7和14天，各組大鼠傷口愈合好，并無統(tǒng)計學意義(表2)。表I各組傷口創(chuàng)傷反應情況比較例(％)組別例數(shù)I期II期in期<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>實施例3組249(37.5)8(25)7(29,2)實施例4組247(29.2)9(37.5)8(33.3)表2各組傷口恢復情況比較例(％)第7天(共16只)第14天(共8只)優(yōu)良差優(yōu)良差空白組3(18.75)6(37.5)7(43.75)4(50)2(25)2(25)膠原肽組6(37.5)(31.25)5(31.25)(62.5)2(25)1(12.5)實施例1組6(37.5)6(37.5)4(25)(62.5)(37.5)0實施例2組6(37.5)(31.25)5(31.25)(62.5)(37.5)0實施例3組6(18.75)(37.5)3(43.75)(62.5)2(25)1(12.5)實施例4組5(31.25)6(37.5)4(25)5(62.5)2(25)1(12.5)2.2肽對大鼠術(shù)后傷口皮膚愈合的組織學觀察結(jié)果組織學結(jié)果發(fā)現(xiàn)，術(shù)后第7天組織切片觀察各組傷口表皮、瘢痕組織、炎性細胞浸潤、成纖維細胞和毛細血管相當，與海洋膠原肽組無顯著差異。術(shù)后第14天組織切片觀察顯示，各組傷口表皮完整，瘢痕組織明顯少于對照組，炎性細胞明顯減少，與海洋膠原肽組無顯著差異。2.3Masson染色光鏡組織學觀察Masson染色將結(jié)締組織和膠原纖維染成綠色，平滑肌染成紅色，細胞核染成褐色。術(shù)后第7天結(jié)果發(fā)現(xiàn)，各組大鼠切口膠原纖維數(shù)量相當，與海洋膠原肽組無顯著差異。術(shù)后第14天同樣發(fā)現(xiàn)各組膠原纖維數(shù)量相當，與海洋膠原肽組無顯著差異。2.4術(shù)后不同時間傷口抗張力比較術(shù)后第7、14天各組傷口抗張力值見表3。從表3可見，第7天和第14天各組之間傷口的抗張力強度與海洋膠原肽組無統(tǒng)計學差異(P>0.05)。表3術(shù)后各組傷口抗張力值(g/mm2,、X0SD)時間空白組海洋膠原肽實施例l實施例2實施例3實施例4術(shù)后第15.49CB.2319.75d3.62*20.87d5.03*19.33口3.85*19.98口4.03*18.6804.42*7曰術(shù)后第47.15Q5.8353.59D6.28*54.47口5.43*54.8705.33*54.21口5,52*53.21Q4.59*14曰注*表示與對照組比較，尸<^052.5切口肉芽組織羥脯氨酸結(jié)果術(shù)后第7、14天各組傷口羥脯氨酸檢測結(jié)果見表4。從表4可見，第7天和第14天各組之間傷口的羥脯氨酸表達無差異(P>0.05)。表4術(shù)后各組羥脯氨酸結(jié)果(Mg/mg，XDSD)<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>注*表示與對照組比較，尸<0.053.結(jié)論本研究發(fā)現(xiàn)經(jīng)口給予術(shù)后大鼠相同濃度的本發(fā)明樣品后，能提高術(shù)后傷口的抗張力值、膠原纖維數(shù)量、羥脯氨酸的表達水平、傷口恢復的效果，各給藥組無顯著性差異，都具有臨床實際應用價值。二、低聚肽含量測定1.方法提要低分子量的蛋白質(zhì)水解物(包含肽類及游離氨基酸)可溶于三氯乙酸溶液；高分子量的蛋白質(zhì)在三氯乙酸溶液中易沉淀。樣品經(jīng)三氯乙酸溶液溶解后，離心分離出沉淀蛋白質(zhì)物質(zhì)，測定出離心清液中的酸溶蛋白質(zhì)含量，清液中的酸溶蛋白質(zhì)含量減去游離氨基酸含量即為低聚肽的含量。2.分析歩驟2.1酸溶蛋白質(zhì)含量的測定稱取2g(精確至lmg)樣品，加入10mL15。/。三氯乙酸溶液，混合均勻，靜置10min。將樣品溶液在4000rpm下離心10min后，取全部清液，按GB/T5009.5規(guī)定的方法測定清液中的酸溶蛋白質(zhì)，蛋白質(zhì)換算系數(shù)為6.25。檢驗結(jié)果根據(jù)樣品的干燥失重，折算為干基。2.2游離氨基酸含量的測定樣品前處理稱取2030mg樣品，精確到0.0001g，用3%磺基水楊酸溶液溶解均勻。將樣品溶液轉(zhuǎn)移至50ml容量瓶中，定容。將樣品溶液在轉(zhuǎn)速為4000r/min離心機上離心5min得清液，再用0.45iim微孔濾膜過濾清液，將濾液轉(zhuǎn)移至50ml容量瓶中，定容后作為儀器檢測用樣品。其余操作同GB12292水果、蔬菜汁游離氨基酸含量的測定規(guī)定的方法。2.3結(jié)果的表述低聚肽的含量尸2按式(1)計算尸2□《□爿(1)式中-尸2——樣品中低聚肽含量(以干基計)，％;S——樣品中酸溶蛋白質(zhì)含量(以干基計)，％;j——樣品中游離氨基酸含量(以干基計)，％。2.4測定結(jié)果實施例1-5測定低聚肽含量，結(jié)果見表5。表5、低聚肽含量測定結(jié)果樣品實施例1實施例2實施例3實施例4實施例5低聚肽含量49.7%59.8%50.3%49.2%4.9%3.相對分子質(zhì)量小于1000的肽所占比例(高效凝膠過濾色譜法)3.1方法提要采用高效凝膠過濾色譜法測定。即以多孔性填料為固定相，依據(jù)樣品組分分子體積大小的差別進行分離，在肽鍵的紫外吸收波長220nm條件下檢測，使用凝膠色譜測定相對分子質(zhì)量分布的專用數(shù)據(jù)處理軟件(即GPC軟件)，對色譜圖及其數(shù)據(jù)進行處理，計算得到低聚肽的相對分子質(zhì)量大小及分布范圍。3.2試劑乙腈色譜純；三氟醋酸分析純；水超純水或二次蒸餾水。相對分子質(zhì)量校正曲線所用標準品細胞色素C(cyyochrorae，MW12500);抑酞酶(aproUnin,麗6500);桿菌酶(bacitracin,匿1450);乙氨酸一乙氨酸一酪氨酸一精氨酸(MW451);乙氨酸一乙氨酸一乙氮酸(MW189)3.3儀器和設備高效液相色譜儀配有紫外檢測器和含有GPC數(shù)據(jù)處理軟件的色譜工作站或積分儀；流動相真空抽濾脫氣裝置；超聲波振蕩器；分析天平感量O.0001g。3.4色譜條件與系統(tǒng)適應性實驗色譜柱TSKgelG2000SWXL300mmX7.8咖或性能與此相近的同類型其他適用于測定蛋白質(zhì)和多肽的凝膠柱；流動相乙腈水三氟乙酸，45:55:0.1(體積比)檢測波長UV220nm;流速0.5ml/min;柱溫3(TC;進樣體積10wl。為使色譜系統(tǒng)符合檢測要求，規(guī)定在上述色譜條件下，凝膠色譜柱的柱效即理論塔板數(shù)(N)按三肽標準品(乙氨酸一乙氨酸一乙氨酸)峰計算不低于5000，低聚肽的分配系數(shù)(Kd)應在01之間。3.5相對分子質(zhì)量校正曲線制作分別用流動相配制成0.1%(W/V)的上述不同相對分子質(zhì)量的肽標準品溶液，用孔徑為0.2-0.5tim聚四氟乙烯或尼龍過濾膜過濾后分別進樣，得到系列標準品的色譜圖。以相對分子質(zhì)量的對數(shù)(lgMW)對保留時間作圖或作線性回歸得到相對分子質(zhì)量校正曲線及其方程。3.6樣品制備稱取樣品20.0mg于10mL容量瓶中，用流動相定容至刻度，超聲振蕩10min，使樣品充分溶解混勻，用孔徑為0.2-0.5ym聚四氟乙烯或尼龍過濾膜過濾后，上機進樣。3.7相對分子質(zhì)量的計算將3.6制備的樣品溶液在上述色譜條件下分析。然后用GPC數(shù)據(jù)處理軟件，將樣品的色譜數(shù)據(jù)代入校正曲線方程中進行計算，即可得到樣品中肽的相對分子質(zhì)量及其分布范圍。用峰面積歸一化法計算相對分子質(zhì)量范圍在1000以下的肽的峰面積相對百分比之和。3.8測定結(jié)果取實施例1-5樣品測定分子量分布范圍，測定結(jié)果見表6-10。表6、實施例1<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>表7、實施例2分子量范圍開始時間min結(jié)束時間rain重均分子量峰面積％(入220nm)1000-1000013.96618.99515029.3846500-100018.99520.50967726.7128140-50020.50923.28931758.544570-14023.28924.8021064.2667表8、實施例3分子量范圍開始時間min結(jié)束時間min重均分子量峰面積％(入220nm)1000-1000013,96618.995166810.6283500-100018.99520.50967826.3129140-50020.50923.28931757.649070-14023.28924.8021064.2885表9、實施例4分子量范圍開始時間min結(jié)束時間min重均分子量峰面積％(入220nm)1000-1000013.96618.99515789.8223500-100018.99520.50967526.3309140-50020.50923.28931759.388370-14023.28924.8021064.4585表10、實施例5分子量范圍開始時間min結(jié)束時間min重均分子量峰面積％(A220nm)1000-1000013.96618.99516088.7142500-100018.99520.50967722.7149140-50020.50923.28931864.860970-14023.28924.8021053.7100以上結(jié)果表明，本發(fā)明制備的保健食品主要成分的分子量主要集中在140-1000，占10000分子量以下物質(zhì)中的80%以上。權(quán)利要求1.一種促進手術(shù)后傷口愈合的食品或藥品，其特征在于它的活性成分主要由下列重量份的原料制成的口服制劑大豆肽1-100g、海洋膠原肽1-100g組成。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的保健食品或藥品，其特征在于原料中還包括下述重量份的葡萄糖酸鋅0.01-0.5g、維生素CO.l-lg、枸杞多糖0.l-10g、水溶性膳食纖維l-100g、酪蛋白磷酸肽0.1-10g中的一種或多種原料。3.根據(jù)權(quán)利要求1-2任一所述的保健食品或藥品，其特征在于它是由大豆肽20-60g、海洋膠原肽20-60g、葡萄糖酸鋅0.1-0.3g、維生素C0.2-0.8g組成。4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的保健食品或藥品，其特征在于它是由大豆肽30g、海洋膠原肽30g、葡萄糖酸鋅0.3g、維生素C0.4g組成。5.根據(jù)權(quán)利要求1-4任一所述的保健食品或藥品的制備方法，其特征在于可采用食品或藥品上常規(guī)的制備工藝和輔料制成的常規(guī)口服制劑。全文摘要本發(fā)明涉及一種促進手術(shù)后傷口愈合的食品或藥品，其特征在于它的活性成分主要由下列重量份的原料制成大豆肽1-100g、海洋膠原肽1-100g。原料中還包括下述重量份的葡萄糖酸鋅0.01-0.5g、維生素C0.1-1g、枸杞多糖0.1-10g、水溶性膳食纖維1-100g、酪蛋白磷酸肽0.1-10g中的一種或多種；本發(fā)明可采用保健食品或藥品上可接受的制備工藝和輔料制成的包括但不限于顆粒劑、口服液等常規(guī)口服制劑。文檔編號A23L1/305GK101455405SQ20091011480公開日2009年6月17日申請日期2009年1月4日優(yōu)先權(quán)日2009年1月4日發(fā)明者付玉梅,盧建中,呂毅斌,萍喻,堯梅香,群廖,易敏之,勇李,李詒光申請人:江中藥業(yè)股份有限公司