專(zhuān)利名稱(chēng)：血漿多肽的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及生物工程技術(shù)領(lǐng)域，尤其是以動(dòng)物血液為原料制備血漿多肽 的方法。
背景技術(shù)：
動(dòng)物血液是一種寶貴蛋白資源，具有很高的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值，其用途廣泛，適 用于飼料、食品、保健品等，巿場(chǎng)需求量大，前景廣闊，產(chǎn)品價(jià)值高。目前 國(guó)外內(nèi)對(duì)血粉的研究較多，血粉的傳統(tǒng)利用方法有蒸煮法、熱變性處理法及 噴霧干燥法等，較為現(xiàn)代的方法有酸水解法、發(fā)酵法和酶解法。酸水解法是 利用酸來(lái)水解畜血蛋白，提高了血粉的消化率，但是卻破壞了血粉中的一種
必需氨基酸一一色氨酸；發(fā)酵法是將特定的微生物菌種接入血粉與透氣性好 的輔料(如米糠、豆餅粉、菜粕等)組成的混合原料中，讓菌種在堆積原料中 自然發(fā)酵產(chǎn)酶而達(dá)到水解血粉的目的。但是這種方法發(fā)酵降解血粉原料不完 全。如何更好地開(kāi)發(fā)動(dòng)物血漿資源，使其豐富的營(yíng)養(yǎng)得到更充分的利用，同 時(shí)最大限度地減少對(duì)環(huán)境的污染，是國(guó)內(nèi)眾多專(zhuān)家關(guān)注的焦點(diǎn)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種成本低廉、產(chǎn)品收率 高、多肽含量高的血漿多肽的制備方法。
本發(fā)明血漿多肽的制備方法包括以下幾個(gè)步驟
(a) 將冷凍結(jié)塊的動(dòng)物血液緩化，用離心機(jī)分離成血漿和血球；
(b) 將血球原料液用大功率超聲波破碎機(jī)進(jìn)行細(xì)胞破壁；漿血球混合溶液；
(d) 將血漿血球混合溶液加熱到80~10(TC,保溫20 - 50分鐘滅菌；
(e) 將經(jīng)過(guò)滅菌的血漿血球混合溶液溫度降到37 4(TC,加入胰蛋白酶， 保溫酶解2-4小時(shí)；
(f )將經(jīng)過(guò)胰蛋白酶酶解后的血漿血球混合溶液加熱到45 ~ 50°C，加入 堿式蛋白酶，保溫酶解4 6小時(shí)；
(g )將經(jīng)過(guò)堿式蛋白酶酶解后的血漿血球混合溶液加熱到55 ~ 65°C ，加 入木瓜蛋白酶，保溫酶解7 9小時(shí)；
(h) 將經(jīng)過(guò)三種酶解完成后的血漿血球混合溶液加熱到80~10(TC,保 溫10 40分鐘，使酶失活；
(i) 將經(jīng)過(guò)使酶失活處理后得到的血漿血球混合溶液通過(guò)分子膜過(guò)濾器 過(guò)濾，得到血漿多肽濃縮液；
(j)將血漿多肽濃縮液在18(TC ~ 20(TC下進(jìn)行噴霧干燥，得到血漿多肽粉劑。
步驟(i)所述的通過(guò)分子膜過(guò)濾器過(guò)濾，它包括兩次過(guò)濾，第一次經(jīng)過(guò) 1000G道爾頓的分子膜過(guò)濾，第二次經(jīng)過(guò)1000道爾頓的分子膜過(guò)濾。
本發(fā)明所述的動(dòng)物血液可以是豬血、牛血、羊血、鴨血和雞血中的一種 或幾種。
本發(fā)明噴霧干燥時(shí)的進(jìn)風(fēng)溫度為180~ 220°C，出風(fēng)溫度為70~80°C,而 且血漿多肽濃縮液在待干燥過(guò)程中保持?jǐn)嚢琛?br> 本發(fā)明具有如下優(yōu)點(diǎn)l、本發(fā)明提供的制備方法在常溫常壓下進(jìn)行；2、
血漿多肽的提取效率高酶解液通過(guò)截留分子量為IOOO道爾頓的分子膜進(jìn)行 分子篩分從而保證產(chǎn)品的肽含量達(dá)到80%以上。3、搡作簡(jiǎn)單，易實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化控制。4、本發(fā)明環(huán)保。工藝徹底摒棄了以往的有機(jī)溶劑提純方法，操作過(guò)程 中對(duì)人員和周?chē)h(huán)境不產(chǎn)生危害。5、本工藝大大加強(qiáng)了動(dòng)物蛋白的消化和轉(zhuǎn) 化率。
具體實(shí)施例方式
實(shí)施例l: 一種血漿多肽的制備方法，包括以下幾個(gè)步驟(a)將冷凍結(jié) 塊的雞血液緩化，用離心機(jī)分離成血漿和血球；(b)將血球原料液用大功率 超聲波破碎機(jī)進(jìn)行細(xì)胞破壁；(c)將血漿與破壁血球混合后加水溶解，形成 血漿血球混合溶液；(d)將血漿血球混合溶液加熱到85°C，保溫30分鐘滅菌； (e)將經(jīng)過(guò)滅菌的血漿血球混合溶液溫度降到38°C，加入胰蛋白酶，保溫酶 解3小時(shí)；(f )將經(jīng)過(guò)胰蛋白酶酶解后的血漿血球混合溶液加熱到48°C，加 入堿式蛋白酶，保溫酶解5小時(shí);(g)將經(jīng)過(guò)堿式蛋白酶酶解后的血漿血球 混合溶液加熱到6(TC，加入木瓜蛋白酶，保溫酶解8小時(shí)；(h)將經(jīng)過(guò)三種 酶解完成后的血漿血球混合溶液加熱到9(TC,保溫20分鐘使酶失活；(i)將 經(jīng)過(guò)使酶失活處理后得到的血漿血球混合溶液通過(guò)分子膜過(guò)濾器過(guò)濾，第一 次經(jīng)過(guò)10000道爾頓的分子膜過(guò)濾，第二次經(jīng)過(guò)1000道爾頓的分子膜過(guò)濾， 得到血漿多肽濃縮液；(j)將血漿多肽濃縮液在19(TC下進(jìn)行噴霧千燥，得到 血漿多肽粉劑。
實(shí)施例2: —種血漿多肽的制備方法，包括以下幾個(gè)步驟(a)將冷凍結(jié) 塊的豬血液緩化，用離心機(jī)分離成血漿和血球；(b)將血球原料液用大功率 超聲波破碎機(jī)進(jìn)行細(xì)胞破壁；(c)將血漿與破壁血球混合后加水溶解，形成 血漿血球混合溶液；(d)將血漿血球混合溶液加熱到9(TC，保溫20分鐘滅菌； (e)將經(jīng)過(guò)滅菌的血漿血球混合溶液溫度降到39°C，加入胰蛋 酶，保溫酶 解3. 5小時(shí)；(f)將經(jīng)過(guò)胰蛋白酶酶解后的血漿血球混合溶液加熱到5(TC，加入堿式蛋白酶，保溫酶解4小時(shí)；(g)將經(jīng)過(guò)堿式蛋白酶酶解后的血漿血 球混合溶液加熱到62°C,加入木瓜蛋白酶，保溫酶解7小時(shí)；(h)將經(jīng)過(guò)三 種酶解完成后的血漿血球混合溶液加熱到85°C，保溫30分鐘使酶失活；(i) 將經(jīng)過(guò)使酶失活處理后得到的血漿血球混合溶液通過(guò)分子膜過(guò)濾器過(guò)濾，第 一次經(jīng)過(guò)10000道爾頓的分子膜過(guò)濾，第二次經(jīng)過(guò)1000道爾頓的分子膜過(guò)濾， 得到血漿多肽濃縮液；U)將血漿多肽濃縮液在20(TC下進(jìn)行噴霧干燥，得到 血漿多肽粉劑。
權(quán)利要求
1、一種血漿多肽的制備方法，其特征在于，該方法包括以下幾個(gè)步驟(a)將冷凍結(jié)塊的動(dòng)物血液緩化，用離心機(jī)分離成血漿和血球；(b)將血球原料液用大功率超聲波破碎機(jī)進(jìn)行細(xì)胞破壁；(c)將血漿與破壁血球混合后加水溶解，形成血漿血球混合溶液；(d)將血漿血球混合溶液加熱到80～100℃，保溫20～50分鐘滅菌；(e)將經(jīng)過(guò)滅菌的血漿血球混合溶液溫度降到37～40℃，加入胰蛋白酶，保溫酶解2～4小時(shí)；(f)將經(jīng)過(guò)胰蛋白酶酶解后的血漿血球混合溶液加熱到45～50℃，加入堿式蛋白酶，保溫酶解4～6小時(shí)；(g)將經(jīng)過(guò)堿式蛋白酶酶解后的血漿血球混合溶液加熱到55～65℃，加入木瓜蛋白酶，保溫酶解7～9小時(shí)；(h)將經(jīng)過(guò)三種酶解完成后的血漿血球混合溶液加熱到80～100℃，保溫10～40分鐘，使酶失活；(i)將經(jīng)過(guò)使酶失活處理后得到的血漿血球混合溶液通過(guò)分子膜過(guò)濾器過(guò)濾，得到血漿多肽濃縮液；(j)將血漿多肽濃縮液在180℃～200℃下進(jìn)行噴霧干燥，得到血漿多肽粉劑。
2、 按照權(quán)利要求l所述的血漿多肽的制備方法，其特征在于步驟(i) 所述的通過(guò)分子膜過(guò)濾器過(guò)濾，它包括兩次過(guò)濾，第一次經(jīng)過(guò)10000道爾頓的分子膜過(guò)濾，第二次經(jīng)過(guò)iooo道爾頓的分子膜過(guò)濾。
3、 按照權(quán)利要求1或2所述的血漿多肽的制備方法，其其特征在于所述的動(dòng)物血液是豬血、牛血、羊血、鴨血和雞血中的一種或幾種。
4、按照權(quán)利要求1或2所述的血漿多肽的制備方法，其特征在于所述 噴霧干燥時(shí)的進(jìn)風(fēng)溫度為180~ 220°C，出風(fēng)溫度為70~8(TC,而且血漿多肽 濃縮液在待干燥過(guò)程中保持?jǐn)嚢琛?br> 全文摘要
本發(fā)明涉及一種血漿多肽的制備方法它是將動(dòng)物血液經(jīng)過(guò)細(xì)胞破壁，混合溶解，滅菌，胰蛋白酶、堿式蛋白酶和木瓜蛋白酶三種酶酶解和酶失活后，再通過(guò)分子膜過(guò)濾器過(guò)濾和噴霧干燥，得到血漿多肽粉劑。該制備方法操作簡(jiǎn)單，可在常溫常壓下進(jìn)行，節(jié)能環(huán)保，成本低廉，血漿多肽的提取效率高，產(chǎn)品多肽含量高，極大地提高了動(dòng)物蛋白的消化和轉(zhuǎn)化率。
文檔編號(hào)C12P21/06GK101613734SQ20091016264
公開(kāi)日2009年12月30日 申請(qǐng)日期2009年8月17日 優(yōu)先權(quán)日2009年8月17日
發(fā)明者張吉越 申請(qǐng)人:張吉越