專(zhuān)利名稱(chēng)：：一種制備葵花籽粕蛋白水解肽的新方法及用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及生物工程領(lǐng)域，具體涉及保健食品生產(chǎn)和生物制藥技術(shù)，特指以葵花籽粕蛋白為原料，利用酶解技術(shù)制備水解多肽的制備方法及用途。
背景技術(shù)：
：葵花籽油是是繼棕櫚油、大豆油和菜籽油之后的第四大食用油，葵花籽粕是葵花籽制油時(shí)的副產(chǎn)物，其中含有29%-43%的優(yōu)質(zhì)蛋白質(zhì)。但目前葵花籽粕一般僅用作飼料，沒(méi)有對(duì)其中的蛋白質(zhì)作深加工利用?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究證明，血管緊張素轉(zhuǎn)換酶(AngiotensinI-convertingenzyme,ACE)在體內(nèi)血壓調(diào)節(jié)過(guò)程起重要作用。它使血管緊張素I轉(zhuǎn)化為有升壓作用的血管緊張素II并使有降壓作用的舒緩^:肽分解，從而使血壓升高。近年來(lái)人們從食品蛋白質(zhì)開(kāi)發(fā)出一類(lèi)血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制肽(ACE抑制肽)，給高血壓患者服用后可以抑制體內(nèi)ACE的活性，達(dá)到降血壓的目的。在制備ACE抑制肽時(shí)，由于食品蛋白質(zhì)在酶解為多肽的過(guò)程中產(chǎn)生大量的氫離子，但是要保證酶的活性必須保持反應(yīng)體系中的pH值相對(duì)穩(wěn)定，因此需要不斷加入鹽酸溶液或氫氧化鈉溶液來(lái)維持體系的pH值恒定；如果酶解是在堿性或酸性的條件進(jìn)行的，在酶解結(jié)束后還需要加入大量的氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)酶解液到中性。因此，在酶解后得到ACE抑制肽的粗提物中存在一定量的鈉鹽成分(主要為氯化鈉，一般含10n/。w/w左右)。高血壓與年齡、食鹽的攝取、體重、遺傳、性別、職業(yè)等多種因素有關(guān)。目前認(rèn)為發(fā)生高血壓的外在條件是高鈉鹽的攝取，內(nèi)在因素是腎臟功能的損傷。還有研究發(fā)現(xiàn)對(duì)食鹽的攝取是動(dòng)脈血壓隨年齡而升高的條件。為此，一般高血壓患者都需要防止鈉鹽的過(guò)量攝入。所以作為給高血壓患者服用的ACE抑制肽，在制備過(guò)程中必須進(jìn)行脫鹽處理。ACE抑制肽常用的脫鹽方法有活性碳吸附法、J3-環(huán)糊精包埋法、大孔樹(shù)脂吸附法和膜分離法等，不過(guò)處理起來(lái)都不僅很耗時(shí)，還大大增加了成本，而且活性多肽成分的損耗也很大。國(guó)內(nèi)外關(guān)于從葵花粕中制備多肽僅有白羽等在《食品與機(jī)械》雜志報(bào)道過(guò)，但該論文主要研究了酶解參數(shù)的篩選，沒(méi)有對(duì)多肽制備的脫鹽、干燥等重要過(guò)程進(jìn)行研究，而且對(duì)水解物也沒(méi)有進(jìn)行功能定位。關(guān)于制備低鹽多肽的報(bào)道也很少，中國(guó)發(fā)明專(zhuān)利"低含鹽量的多肽生產(chǎn)方法"(申請(qǐng)?zhí)?00610150150.6)采用三種蛋白酶順次水解牛羊鮮骨的方法，反應(yīng)起始時(shí)用氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH到堿性，過(guò)程中不加堿液，使得水解物中鹽含量較低；但這種方法仍然加入了一定量的鈉鹽，而且由于水解過(guò)程不控制pH值可能導(dǎo)致酶解反應(yīng)效率下降。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的克服現(xiàn)有多肽制備技術(shù)因脫鹽而造成工藝耗時(shí)長(zhǎng)、成本高、多肽成分損耗大等不足，提供一種使用Ca(OH)2代替NaOH堿溶酸沉法提取蛋白及在葵花籽粕蛋白酶解過(guò)程調(diào)節(jié)pH值、酶解結(jié)束中和酶解液中的酸，從而不需脫鹽就得到低鈉鹽葵花籽粕蛋白水解肽的方法。本發(fā)明上述目的是通過(guò)以下技術(shù)手段實(shí)現(xiàn)的:采用堿溶酸沉法(以HC1溶液和Ca(OH)2溶液調(diào)節(jié)pH值)制備得到葵花籽粕蛋白，再將葵花籽粕蛋白按一定比例溶解于水，再用HC1溶液和Ca(OH)2溶液調(diào)節(jié)pH值到蛋白酶最適作用值，加入一定量蛋白酶在其最適作用條件下酶解適當(dāng)時(shí)間，酶解結(jié)束后升溫到9(TC滅酶，再用Ca(OH)2溶液調(diào)節(jié)pH值到中性，通過(guò)過(guò)濾、濃縮和噴霧干燥得到粉狀的葵花籽粕蛋白水解肽產(chǎn)品。上述方法中所說(shuō)的堿溶酸沉法制備葵花籽粕蛋白的方法為將葵花籽粕按料液比1:8-1:15(w/v)加入水，升溫至40-60。C，攪拌均勻，加入lmol/L的Ca(OH)2溶液調(diào)節(jié)溶液pH保持在8.0-9.5，攪拌提取蛋白l-3h，用布袋離心機(jī)離心過(guò)濾，用lmol/L的HC1溶液調(diào)節(jié)濾液pH值到4.2，靜置過(guò)夜，離心，將沉淀物噴霧干燥得到葵花籽粕蛋白。上述方法中所說(shuō)的酶解底物葵花籽粕蛋白的濃度為2%-10%(w/v)。上述方法中所說(shuō)的酶解過(guò)程調(diào)節(jié)pH值的Ca(OH)2溶液濃度為0.5mol/L-lmol/L。上述方法中所說(shuō)的酶解用蛋白酶為胰蛋白酶、中性蛋白酶、堿性蛋白酶或胃蛋白酶等常見(jiàn)的商品蛋白酶的一種或者其中兩種及兩種以上蛋白酶的組合。蛋白酶的用量以質(zhì)量計(jì)為底物蛋白質(zhì)量的1/60-1/20(w/w)，酶解的溫度37-60°C，pH為1.8-9.0，酶解反應(yīng)時(shí)間為50-180min。上述方法中所說(shuō)的酶解反應(yīng)時(shí)間為50min到180min。上述方法中所說(shuō)的對(duì)酶解液的滅酶過(guò)濾、濃縮和噴霧干燥方法，是將酶解液加熱到90'C保持30s滅酶，再自然冷卻到室溫，用布袋式離心機(jī)過(guò)濾酶解液并把濾液真空濃縮到干物質(zhì)濃度為30%(w/w)，再?lài)婌F干燥得到葵花籽粕蛋白水解肽產(chǎn)品。本發(fā)明所具有的優(yōu)點(diǎn)是采用Ca(OH)2溶液代替常用的NaOH溶液用于堿溶酸沉法提取蛋白、在蛋白酶解過(guò)程中調(diào)節(jié)pH值和酶解結(jié)束中和酶解液中的酸，避免加入對(duì)高血壓患者有害的Na+，使制備過(guò)程不需要脫鹽，既保留了絕大部分活性成分，又簡(jiǎn)化了工藝、降低了成本。圖1是本發(fā)明制備葵花籽粕蛋白水解肽的工藝流程圖。具體實(shí)施例方式下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步闡述，但本發(fā)明不限于下述實(shí)施例，對(duì)于本領(lǐng)域一般技術(shù)人員而言，在不背離本發(fā)明原理的前提下對(duì)它所做的任何顯而易見(jiàn)的改動(dòng)，都屬于本發(fā)明的構(gòu)思和所附權(quán)利要求的保護(hù)范圍。實(shí)施例l將葵花籽粕按料液比1:8(w/v)加入水，升溫至60'C,攪拌均勻，加入lmol/L的Ca(OH)2溶液調(diào)節(jié)溶液pH保持在9.5,攪拌提取蛋白3h，用布袋式離心機(jī)離心過(guò)濾，用lmol/L的HCI溶液調(diào)節(jié)濾液pH值到4.2，靜置過(guò)夜，離心，將沉淀物噴霧干燥得到葵花籽粕蛋白。將40g葵花籽蛋白加入lOOOmL去離子水中混合均勻，形成4%(w/v)的蛋白溶液，升溫到50'C，再用lmol/L的HC1溶液和0.5mol/L的Ca(OH)2混懸液保持pH值8.0,先加入lg胰蛋白酶酶解50min，酶解結(jié)束后升溫到90'C保持30s滅酶，再用lmoI/L的HC1溶液和0.5mol/L的Ca(OH)2溶液調(diào)節(jié)pH值到7.0，冷卻到室溫，取樣測(cè)定水解度和水解液對(duì)ACE抑制率。水解度表明蛋白質(zhì)在酶的作用下水解程度，其測(cè)定采用中性甲醛滴定法(參照吳謀成編著《食品分析與感官評(píng)定》.北京:中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社,2002,pp.333.)，水解液多肽對(duì)ACE的抑制率表示其抑制ACE活性能力的大小，抑制率越高，其活性越大，一般在體內(nèi)降血壓的能力也就越強(qiáng)。對(duì)ACE抑制率具體測(cè)定方法如下:先將5pL的ACE加入10pL已經(jīng)用水稀釋20倍的酶解液樣品在37'C下恒溫5min，然后加入50jiL的6.5mmol/LHip-His-Leu(用100mmol/L的硼酸鹽緩沖液配制，含300mmol/L的NaCl，pH為8.3),在37'C下恒溫反應(yīng)30min后加入85pL的lmol/LHC1溶液終止反應(yīng)。用HPLC進(jìn)行分析，記錄對(duì)應(yīng)組分峰面積，同時(shí)用10pL100mmol/L、pH為8.3的硼酸鹽緩沖液作空白試驗(yàn)。水解肽對(duì)ACE的抑制率可用下式計(jì)算式中i——水解液多肽對(duì)ACE的抑制率；」——空白對(duì)照組Hip的峰面積；S——多肽組Hip的峰面積。酶解液用布袋式離心機(jī)過(guò)濾后真空濃縮，再采用噴霧干燥得到葵花籽粕蛋白水解肽產(chǎn)n口Bo同時(shí)按照上述工藝條件進(jìn)行對(duì)照的酶解反應(yīng)制備葵花籽粕蛋白水解肽固體產(chǎn)品，僅把5調(diào)節(jié)pH用的0.5mol/L的Ca(OH)2改為lmo!/L的NaOH溶液。按照上述方法取樣測(cè)定酶解液的水解度和ACE抑制率。兩種方法制備葵花籽粕蛋白水解肽的結(jié)果對(duì)比如表1所示。表1Ca(OH)2與NaOH分別調(diào)節(jié)pH制備葵花籽粕蛋白水解肽的比較指標(biāo)調(diào)節(jié)pH值的堿液0.5mol/LCa(OH》lmol/LNaOH水解度(％)16.419.8酶解液ACE抑制率(％)68,843.7可見(jiàn)，采用Ca(OH)2調(diào)節(jié)pH值的葵花籽蛋白酶解液水解度略低，酶解液ACE抑制率明顯提高。因此，采用Ca(OH)2取代NaOH調(diào)節(jié)pH進(jìn)行葵花籽蛋白葵花籽粕蛋白水解肽的制備是可行的，而且免脫鹽操作可以簡(jiǎn)化工藝、節(jié)約成本。實(shí)施例2將葵花籽粕按料液比1:10(w/v)加入水，升溫至50'C，攪拌均勻，加入lmol/L的Ca(OH)2溶液調(diào)節(jié)溶液pH保持在9.0，攪拌提取蛋白2h，用布袋式離心機(jī)離心過(guò)濾，用lmol/L的HCl溶液調(diào)節(jié)濾液pH值到4.2,靜置過(guò)夜，離心，將沉淀物噴霧干燥得到葵花籽粕蛋白。將100g葵花籽蛋白加入1000mL去離子水中混合均勻，形成10%(w/v)的蛋白溶液，升溫到50'C，再用lmol/L的HC1溶液和lmol/L的Ca(OH)2混懸液保持pH值8.0，加入2.5g胰蛋白酶酶解60min，再用lmol/L的HC1溶液和lmol/LCa(OH)2混懸液調(diào)節(jié)pH到7.0,升溫到60'C加入2.5g中性蛋白酶酶解120min。酶解結(jié)束后升溫到90'C保持30s滅酶，再用lmol/L的HC1溶液和lmol/L的Ca(OH)2溶液調(diào)節(jié)pH值到7.0,冷卻到室溫，取樣按照實(shí)施例1中的方法測(cè)定水解度和水解液對(duì)ACE抑制率。酶解液用布袋式離心機(jī)過(guò)濾后真空濃縮，再采用噴霧干燥得到葵花籽粕蛋白水解肽產(chǎn)品。同時(shí)按照上述工藝條件進(jìn)行對(duì)照的酶解反應(yīng)制備葵花籽粕蛋白水解肽固體產(chǎn)品，僅把調(diào)節(jié)pH用的lmol/L的Ca(OH)2改為2mol/L的NaOH溶液。按照上述方法取樣測(cè)定酶解液的水解度和ACE抑制率。兩種方法制備葵花籽粕蛋白水解肽的結(jié)果對(duì)比如表2所示。表2Ca(OH)2與NaOH分別調(diào)節(jié)pH制備葵花籽粕蛋白水解肽的比較指標(biāo)調(diào)節(jié)pH值的堿液lmol/LCa(OH)22mol/LNaOH水解度(％)21.823.1酶解液ACE抑制率(％)82.773.4可見(jiàn)，采用Ca(OH)2調(diào)節(jié)pH值的葵花籽蛋白酶解液水解度略低，酶解液的ACE抑制率較高。所以可以采用Ca(OH)2取代NaOH調(diào)節(jié)pH進(jìn)行葵花籽粕蛋白ACE抑制肽制備，而且采用Ca(OH)2調(diào)節(jié)pH值可以免除脫鹽操作，從而簡(jiǎn)化工藝、節(jié)約成本。實(shí)施例3將葵花籽粕按料液比1:12(w/v)加入水，升溫至40°C，攪拌均勻，加入lmoi/L的Ca(OH)2溶液調(diào)節(jié)溶液pH保持在8.5,攪拌提取蛋白1.5h，用布袋式離心機(jī)離心過(guò)濾，用lmoI/L的HC1溶液調(diào)節(jié)濾液pH值到4.2，靜置過(guò)夜，離心，將沉淀物噴霧干燥得到葵花籽粕蛋白。將20g葵花籽粕蛋白加入1000mL去離子水中混合均勻，形成2%(w/v)的蛋白溶液，升溫到50°C,再用lmol/L的HC1溶液和0.5mol/L的Ca(OH)2混懸液調(diào)節(jié)pH值9.0，加入0.34g堿性蛋白酶酶解90min。酶解結(jié)束后升溫到90'C保持30s滅酶，再用lmol/L的HC1溶液和0.5mol/L的Ca(OH)2溶液調(diào)節(jié)pH值到7.0,冷卻到室溫，取樣按照實(shí)施例1中的方法測(cè)定水解度和水解液對(duì)ACE抑制率。酶解液用布袋式離心機(jī)過(guò)濾后真空濃縮，再采用噴霧干燥得到葵花籽粕蛋白水解肽產(chǎn)品。同時(shí)按照上述工藝條件進(jìn)行對(duì)照的酶解反應(yīng)制備葵花籽粕蛋白水解肽固體產(chǎn)品，僅把調(diào)節(jié)pH用的0.5mol/LCa(OH)2改為lmol/L的NaOH溶液。按照上述方法取樣測(cè)定酶解液的水解度和ACE抑制率。兩種方法制備葵花籽粕蛋白水解肽的結(jié)果對(duì)比如表3所示。表3Ca(OH)2與NaOH分別調(diào)節(jié)pH制備葵花籽粕蛋白水解肽的比較<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>可見(jiàn)，兩種堿液調(diào)節(jié)pH值的葵花籽粕蛋白酶解液水解度和ACE抑制率相似，采用Ca(OH)2取代NaOH調(diào)節(jié)pH進(jìn)行葵花籽粕蛋白水解肽的制備可行，而且不用產(chǎn)品脫鹽，可簡(jiǎn)化工藝、節(jié)約成本。實(shí)施例4將葵花籽粕按料液比1:15(w/v)加入水，升溫至50'C,攪拌均勻，加入lmol/L的Ca(OH)2溶液調(diào)節(jié)溶液pH保持在8.0，攪拌提取蛋白lh，用布袋式離心機(jī)離心過(guò)濾，用lmol/L的HCl溶液調(diào)節(jié)濾液pH值到4.2，靜置過(guò)夜，離心，將沉淀物噴霧干燥得到葵花籽粕蛋白。將50g葵花籽粕蛋白加入1000mL去離子水中混合均勻，形成5%(w/v)的蛋白溶液，升溫到60°C，再用lmol/L的HC1溶液和0.75mol/L的Ca(OH)2混懸液調(diào)節(jié)并保持pH值6.0，加入lg木瓜蛋白酶酶解120min。酶解結(jié)束后升溫到90'C保持30s滅酶，冷卻到室溫，取樣按照實(shí)施例1中的方法測(cè)定水解度和水解液對(duì)ACE抑制率。酶解液用布袋式離心機(jī)過(guò)濾后真空濃縮，再采用噴霧干燥得到葵花籽粕蛋白水解肽產(chǎn)品。同時(shí)按照上述工藝條件進(jìn)行對(duì)照的酶解反應(yīng)制備葵花籽粕蛋白水解肽固體產(chǎn)品，僅把調(diào)節(jié)pH用的0.75mol/LCa(OH)2改為1.5mol/L的NaOH溶液。按照上述方法取樣測(cè)定酶解液的水解度和ACE抑制率。兩種方法制備葵花籽粕蛋白水解肽的結(jié)果對(duì)比如表4所示。表4Ca(OH)2與NaOH分別調(diào)節(jié)pH制備葵花籽粕蛋白水解肽的比較<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>可見(jiàn)，兩種堿液調(diào)節(jié)pH值的葵花籽粕蛋白酶解液水解度和ACE抑制率相似，采用Ca(OH)2取代NaOH調(diào)節(jié)pH進(jìn)行葵花籽粕蛋白ACE抑制肽的制備不僅可行，而且因不用脫鹽，可簡(jiǎn)化工藝、節(jié)約成本。實(shí)施例5將葵花籽粕按料液比1:10(w/v)加入水，升溫至45°C，攪拌均勻，加入lmol/L的Ca(0—H)2溶液調(diào)節(jié)溶液pH保持在9.0,攪拌提取蛋白2h，用布袋式離心機(jī)離心過(guò)濾，用lmol/L的HCl溶液調(diào)節(jié)濾液pH值到4.2，靜置過(guò)夜，離心，將沉淀物噴霧干燥得到葵花籽粕蛋白。將30g葵花籽粕蛋白加入lOOOmL去離子水中混合均勻，形成3%(w/v)的蛋白溶液，升溫到37'C，再用lmol/L的HC1溶液和0.5mol/L的Ca(OH)2混懸液調(diào)節(jié)并保持pH值1.8，加入lg胃蛋白酶酶解120min。酶解結(jié)束后升溫到90'C保持30s滅酶，再用lmol/L的HC1溶液和0.5mol/L的Ca(OH)2溶液調(diào)節(jié)pH值到7.0,冷卻到室溫，取樣按照實(shí)施例1中的方法測(cè)定水解度和水解液對(duì)ACE抑制率。酶解液用布袋式離心機(jī)過(guò)濾后真空濃縮，再采用噴霧干燥得到葵花籽粕蛋白水解肽產(chǎn)品。同時(shí)按照上述工藝條件進(jìn)行對(duì)照的酶解反應(yīng)制備葵花籽粕蛋白水解肽固體產(chǎn)品，僅把調(diào)節(jié)pH用的0.5mol/LCa(OH)2改為lmol/L的NaOH溶液。按照上述方法取樣測(cè)定酶解液的水解度和ACE抑制率。兩種方法制備葵花籽粕蛋白水解肽的結(jié)果對(duì)比如表5所示。表5Ca(OH)2與NaOH分別調(diào)節(jié)pH制備葵花籽粕蛋白水解肽的比較<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>可見(jiàn)，兩種堿液調(diào)節(jié)pH值的葵花籽粕蛋白酶解液水解度和ACE抑制率相似，采用Ca(OH)2取代NaOH調(diào)節(jié)pH進(jìn)行葵花籽粕蛋白ACE抑制肽的制備不僅可行，而且因不用脫鹽，可簡(jiǎn)化工藝、節(jié)約成本。實(shí)施例6將葵花籽粕按料液比1:12(w/v)加入水，升溫至50°C，攪拌均勻，加入lmol/L的Ca(OH)2溶液調(diào)節(jié)溶液pH保持在8.5，攪拌提取蛋白1.5h，用布袋式離心機(jī)離心過(guò)濾，用lmol/L的HC1溶液調(diào)節(jié)濾液pH值到4.2,靜置過(guò)夜，離心，將沉淀物噴霧干燥得到葵花籽粕蛋白。將50g葵花籽粕蛋白加入1000mL去離子水中混合均勻，形成5%(w/v)的蛋白溶液，升溫到50°C,再用lmol/L的HC1溶液和0.5mol/L的Ca(OH》混懸液調(diào)節(jié)并保持pH值9.0，加入lg堿性蛋白酶酶解60min，再調(diào)節(jié)到pH值8.0，加入0.5g胰蛋白酶酶解60min，再用lmol/LCa(OH)2混懸液調(diào)節(jié)pH到7.0，升溫到60'C加入0.5g中性蛋白酶酶解60min。酶解結(jié)束后升溫到90'C保持30s滅酶，再用lmol/L的HC1溶液和0.5mol/L的Ca(OH)2溶液調(diào)節(jié)pH值到7.0，冷卻到室溫，取樣按照實(shí)施例1中的方法測(cè)定水解度和水解液對(duì)ACE抑制率。酶解液用布袋式離心機(jī)過(guò)濾后真空濃縮，再采用噴霧干燥得到葵花籽粕蛋白水解肽產(chǎn)品。同時(shí)按照上述工藝條件進(jìn)行對(duì)照的酶解反應(yīng)制備ACE抑制肽固體產(chǎn)品，僅把調(diào)節(jié)pH用的0.5mol/LCa(OH)2改為lmol/L的NaOH溶液。按照上述方法取樣測(cè)定酶解^t的水解度和ACE抑制率。兩種方法制備ACE抑制肽的結(jié)果對(duì)比如表6所示。表6Ca(OH)2與NaOH分別調(diào)節(jié)pH制備葵花籽粕蛋白水解肽的比較<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>由表6可見(jiàn)，兩種堿液調(diào)節(jié)pH值的葵花籽粕蛋白酶解液水解度相近，采用Ca(OH)2調(diào)節(jié)的ACE抑制率略高，采用Ca(OH)2取代NaOH調(diào)節(jié)pH進(jìn)行葵花籽粕蛋白ACE抑制肽的制備不僅可行，而且由于不用脫鹽，可簡(jiǎn)化工藝、節(jié)約成本。權(quán)利要求1.一種制備葵花籽粕蛋白水解肽的新方法，其特征在于按照下述步驟進(jìn)行采用堿溶酸沉法制備得到葵花籽粕蛋白，將葵花籽粕蛋白以一定的濃度溶解于水，再用HCl溶液和Ca(OH)2溶液調(diào)節(jié)pH值到蛋白酶最適作用值，加入一定量蛋白酶在其最適作用條件下酶解適當(dāng)時(shí)間，酶解結(jié)束后升溫到90℃滅酶，再用Ca(OH)2溶液調(diào)節(jié)pH值到中性，再自然冷卻到室溫，用布袋式離心機(jī)過(guò)濾酶解液并把濾液真空濃縮到干物質(zhì)濃度以質(zhì)量計(jì)為30％，再?lài)婌F干燥得到葵花籽粕蛋白水解肽產(chǎn)品；其中所述堿溶酸沉法制備得到葵花籽粕蛋白步驟如下將葵花籽粕按料液比1∶8-1∶15(w/v)加入水，升溫至40-60℃，攪拌均勻，加入1mol/L的Ca(OH)2溶液調(diào)節(jié)溶液pH保持在8.0-9.5，攪拌提取蛋白1-3h，用布袋離心機(jī)離心過(guò)濾，用1mol/L的HCl溶液調(diào)節(jié)濾液pH值到4.2，靜置過(guò)夜，離心，將沉淀物噴霧干燥得到葵花籽粕蛋白。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種制備葵花籽粕蛋白水解肽的新方法，其特征在于酶解底物葵花籽粕蛋白的濃度為以質(zhì)量與體積比計(jì)2%40%。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種制備葵花籽粕蛋白水解肽的新方法，其特征在于酶解過(guò)程調(diào)節(jié)pH用的Ca(OH)2溶液濃度為0.5moI/L-lmoI/L。4.根據(jù)權(quán)利要求l所述的一種制備葵花籽粕蛋白水解肽的新方法，其特征在于酶解用酶為胰蛋白酶、中性蛋白酶、堿性蛋白酶或胃蛋白酶中的一種或者其中兩種及兩種以上蛋白酶的組合，蛋白酶的用量以質(zhì)量計(jì)為底物蛋白質(zhì)量的1/60-1/20,酶解的溫度37-60。C，pH為1.8-9.0,酶解反應(yīng)時(shí)間為50-180min。5.—種葵花籽粕蛋白水解肽的用途，其特征在于可用于制備抑制體內(nèi)血管緊張素轉(zhuǎn)換酶的活性藥物。6.—種葵花籽粕蛋白水解肽的用途，其特征在于可用于制備抑制體內(nèi)血管緊張素轉(zhuǎn)換酶的活性的保健食品。全文摘要一種制備葵花籽粕蛋白水解肽的新方法及用途，涉及生物工程領(lǐng)域。按照下述步驟進(jìn)行采用堿溶酸沉法(以HCl溶液和Ca(OH)₂溶液調(diào)節(jié)pH值)制備得到葵花籽粕蛋白，將葵花籽粕蛋白以一定的濃度溶于水，再用HCl溶液和Ca(OH)₂溶液調(diào)節(jié)pH值到蛋白酶最適作用值，加入一定量蛋白酶在其最適作用條件下酶解適當(dāng)時(shí)間，酶解結(jié)束后升溫到90℃滅酶，再用Ca(OH)₂溶液調(diào)節(jié)pH值到中性，通過(guò)過(guò)濾、濃縮和噴霧干燥得到葵花籽粕蛋白水解肽產(chǎn)品。本發(fā)明采用Ca(OH)₂溶液代替常用的NaOH溶液，避免加入對(duì)高血壓患者有害的Na⁺，使制備過(guò)程不需要脫鹽，保留了大部分活性成分，簡(jiǎn)化了工藝、降低了成本。利用該方法制得的葵花籽粕蛋白水解肽可以用于制備抑制體內(nèi)血管緊張素轉(zhuǎn)換酶活性的藥物或者保健食品。文檔編號(hào)C12P21/06GK101633947SQ20091018459公開(kāi)日2010年1月27日申請(qǐng)日期2009年8月31日優(yōu)先權(quán)日2009年8月31日發(fā)明者何榮海,婷王,馬海樂(lè)申請(qǐng)人:江蘇大學(xué)