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      一種基于卵黃抗體的免疫磁性微粒、其制備方法及其用途的制作方法

      文檔序號:576132閱讀:218來源:國知局
      專利名稱:一種基于卵黃抗體的免疫磁性微粒、其制備方法及其用途的制作方法
      技術(shù)領(lǐng)域
      本發(fā)明涉及一種基于卵黃抗體的免疫磁性微粒、其制備方法及其用途。
      背景技術(shù)
      在現(xiàn)有技術(shù)中對生物大分子特異性親和分離最常用的方法是以瓊脂糖或樹脂為 載體,以哺乳動物來源的抗體IgG為親和配基的免疫親和層析法。然而這種層析方法有兩 方面的限制因素一是以層析柱的形式進行生物大分子分離,需要復(fù)雜的前處理過程,且需 要較大反應(yīng)體積,對樣品稀釋度大,不適合處理小體積樣品;二是哺乳動物來源的抗體特異 性不高,并且會與類風濕因子等結(jié)合,導致分離特異性不好。

      發(fā)明內(nèi)容
      本發(fā)明的目的在于提供一種基于卵黃抗體的免疫磁性微粒、其制備方法及其用 途,解決了生物大分子親和分離操作復(fù)雜,分離特異性低、效率低的技術(shù)問題。本發(fā)明的技術(shù)解決方案是一種基于卵黃抗體的免疫磁性微粒,該免疫磁性微粒由磁性微粒和經(jīng)共價反應(yīng)或 非共價作用結(jié)合在磁性微粒表面的卵黃抗體組成;所述磁性微粒為具有與蛋白質(zhì)/抗體有 較強結(jié)合能力的金磁微粒,或者末端具有與蛋白質(zhì)反應(yīng)的功能基團的磁性微粒;所述基團 包括具有反應(yīng)活性的氨基、羧基、巰基以及苯異硫氰酸根;所述磁性微粒具有超順磁性的微 粒;粒徑為1ηπι-200μπι。所述卵黃抗體為具有免疫親和反應(yīng)活性,可以與待分離生物大分 子、細胞特異性結(jié)合的生物分子;所述待分離生物大分子指蛋白,核酸,及其復(fù)合物以及細 胞等。一種基于卵黃抗體的免疫磁性微粒的制備方法,該方法包括以下步驟1)磁性微粒的平衡用偶聯(lián)緩沖液平衡,使磁性微粒處于適宜反應(yīng)的緩沖液中;所述磁性微粒的平衡步驟包括a)將偶聯(lián)緩沖液放入離心管,使磁性微粒分散于偶聯(lián)緩沖液中;b)用磁性分離器進行磁性分離,棄上清;c)對步驟a)、b)重復(fù)一次或多次,以三次為宜;2)平衡后的磁性微粒與卵黃抗體的結(jié)合平衡后的磁性微粒與卵黃抗體的結(jié)合包括以下條件a)卵黃抗體以偶聯(lián)緩沖液配制,用偶聯(lián)緩沖液調(diào)節(jié)反應(yīng)體積,使磁性微粒和卵黃 抗體處于合適的反應(yīng)濃度,其體積為使所取磁性微粒濃度為0. 5-3mg/mL的體積;卵黃抗體 的濃度為磁粒濃度的0. 05-5倍。b)采用恒溫振蕩器進行振蕩反應(yīng),溫度為4°C至37°C ;反應(yīng)時間為20-30分鐘;3)獲得的免疫磁性微粒的清洗除去非特異性吸附在免疫磁性微粒表面的卵黃 抗體;所述對免疫磁性微粒的清洗包括以下步驟a)、將清洗緩沖液放入離心管,使磁性微粒分散于清洗緩沖液中;
      b)、用磁性分離器進行磁性分離,棄上清;c)、對步驟a)、b)重復(fù)一次或多次,以三次為宜。上述方法還包括對免疫磁性微粒的封閉;所述免疫磁性微粒的封閉符合以下條 件1)加入封閉劑,其體積為使免疫磁性微粒濃度為0. 5-2mg/mL的體積,振蕩反應(yīng);2)具 體可采用恒溫振蕩器,溫度為4°C至37°C ;3)反應(yīng)時間為20-120分鐘。上述方法還包括對免疫磁性微粒的清洗,即除去非特異性吸附在免疫磁性微粒表 面的卵黃抗體或封閉劑。上述方法還包括對免疫磁性微粒的保存步驟即將免疫磁性微粒懸于保存含 0. 疊氮鈉和0. 1% BSA的PBS緩沖液中,在溫度為2 8°C中保存?zhèn)溆谩I鲜鲈诓襟E1)和2)中的偶聯(lián)緩沖液使用0.02-0. 2M三羥甲基氨基甲烷-鹽酸 緩沖液(Tris-HCl),pH = 7. 0-7. 6 ;或 0. 02-0. 2M 磷酸緩沖液(PBS),pH = 7. 0-7. 6 ;或 0. 02-0. 2M的N-2-羥乙基哌嗪-N-2-乙磺酸緩沖液,pH = 7. 0-7. 6 ;所述偶聯(lián)緩沖液中加 入0. 1-1. OM的NaCl的為宜。上述步驟3)中的清洗緩沖液為含0.05% (ν/ν)吐溫20 (Tween 20)的偶聯(lián)緩沖 液,或含有IOmM乙二胺四乙酸二鈉鹽(EDTA)和0. 15M的NaCl的0. 02M三羥甲基氨基甲 烷-鹽酸緩沖液,PH = 7. 0-7. 6 ;所述清洗所用清洗緩沖液體積以使磁性微粒的濃度為 0. 5-4mg/mL的體積為宜。上述封閉劑采用含1-10%的脫脂奶粉,或1-5%牛血清白蛋白BSA,或1-5%賴氨 酸,或0.2-2.0%的明膠,或1-5%的聚乙二醇的偶聯(lián)緩沖液.以含5%脫脂奶粉的偶聯(lián)緩沖 液為宜。一種基于卵黃抗體免疫磁性微粒的用途所述基于卵黃抗體免疫磁性微粒用于從 血漿、腹水、組織培養(yǎng)上清等樣本中蛋白的分離;所述免疫磁性微粒用于從血漿、腹水、組織 培養(yǎng)上清等樣本中核酸的分離;所述免疫磁性微粒用于免疫沉淀試驗;所述免疫磁性微粒 用于細胞分選。上述免疫磁性微粒與從血漿、腹水、組織培養(yǎng)上清的反應(yīng)應(yīng)符合以下條件a 樣品以反應(yīng)緩沖液配制,其體積為使所取磁性微粒濃度為0. 5-20mg/mL的體 積,以lOmg/mL為宜;b 采用恒溫振蕩器進行振蕩反應(yīng)的溫度為4°C至37°C,以37°C為宜;反應(yīng)時間為 20-30分鐘,以20分鐘為宜;c 反應(yīng)緩沖液使用0. 02-0. 2M三羥甲基氨基甲烷-鹽酸緩沖液(Tris-HCl),pH = 6. 0-8. 5 ;或 0. 02-0. 2M 磷酸緩沖液(PBS),pH = 6. 0-8. 5 ;或 0. 02-0. 2M 的 N-2-羥乙基哌 嗪-N-2-乙磺酸緩沖液,pH = 6. 0-8. 5 ;所述反應(yīng)緩沖液中加入0. 1-1. OM的NaCl的為宜。上述免疫磁性微粒的再生符合以下條件a 以再生緩沖液再生反應(yīng)后免疫磁性微粒,再生緩沖液體積為使磁性微粒濃度為 0. 5-20mg/mL 的體積,以 10mg/mL 為宜;b 采用恒溫振蕩器進行振蕩反應(yīng)的溫度為4°C至37°C,以37°C為宜;反應(yīng)時間為 1-10分鐘,以3分鐘為宜;c 再生緩沖液使用0. 02-2M尿素,0. 01-0. 05M的十二烷基磺酸鈉或0. 01-0. 05M, PH2. 5-4. 5 的 Gly-HCl 緩沖液。
      本發(fā)明的優(yōu)點是1、生物大分子分離效率高。因為磁性微粒具有較大的比表面積,所以具有固定化 容量高的優(yōu)點。比如金磁微粒對卵黃抗體的固定,Img的金磁微粒能夠固定0. 3mg以上的卵 黃抗體。由于磁性微粒對生物分子的固定化容量很高,使得利用此種固定了目的生物大分 子卵黃抗體的磁性微粒對目的生物大分子、細胞的分離效率很高。2、抗體特異性強,生物大分子分離效果更好。由于禽類與哺乳動物親緣關(guān)系較遠, 生成的抗體特異性較哺乳動物更強。而且,禽類的IgY不激活補體,不與哺乳動物的類風濕 因子結(jié)合,也不與哺乳動物球蛋白發(fā)生血清學交叉反應(yīng),不與葡萄球菌A蛋白、鏈球菌G蛋 白等反應(yīng),避免在分離過程中非特異性生物分子的損失。3、分離過程便捷。本發(fā)明方法不需要對生物樣品進行前處理,直接對生物樣品進 行適度倍數(shù)的稀釋即可進行相應(yīng)生物大分子、細胞的分離步驟;而且本發(fā)明方法不需要對 卵黃抗體所用的載體基質(zhì)即磁性微粒進行使用前的活化處理及離心操作,可直接使用,操 作方便快捷,縮短了去除所需時間,也無需使用昂貴的實驗儀器。亦可根據(jù)實驗需要調(diào)整反 應(yīng)體積,適合于對小體積生物樣品的處理。4、以磁性微粒作為載體,卵黃抗體(IgY)取代哺乳動物抗體作為親和配基,這種 親和方法同時結(jié)合了磁性微粒和卵黃抗體的優(yōu)點,可以廣泛應(yīng)用于在生物大分子(如蛋 白、核酸)的分離領(lǐng)域。并且以磁性微粒作為載體的親和分離方法還可擴大到在細胞分離 領(lǐng)域的應(yīng)用。


      圖1為金磁微粒對血清中白蛋白,抗體分離后樣品所做的SDS-PAGE考馬斯亮藍染 色電泳圖,其中泳道1為白蛋白標準品的電泳圖,泳道2和3為血清樣品分離去除白蛋白 后的電泳圖,泳道4為血清樣品的電泳圖,泳道5為抗體標準樣品的電泳圖,泳道6和7為 血清樣品分離去除抗體后的電泳圖泳道,8為蛋白分子量標準(14 97KD)電泳圖。
      具體實施例方式下面以具體實施例來對本發(fā)明進行詳細說明,但并不是對本發(fā)明的具體限制。實施例1 是基于抗人抗體的卵黃抗體(IgY)和金磁微粒的免疫磁性微粒的制備 過程,及免疫磁性微粒應(yīng)用于從血清/漿等生物樣品中分離去除抗體的具體過程1]免疫磁性微粒的制備a.抗人抗體的卵黃抗體在金磁微粒表面的固定取Iml金磁微粒懸液加入到一個 2ml容量的離心管中,輕搖重懸。置于磁性分離器上,磁性分離,棄上清。加入Iml偶聯(lián)緩 沖液(0. 2M的pH8. 0的Tris-HCl緩沖液),輕搖重懸。置于磁性分離器上,磁性分離,棄上 清。重復(fù)操作一次。將卵黃抗體配置成濃度為lmg/ml的溶液,取100 200 μ 1加入金磁 微粒中,在搖床中37°C,180r/min反應(yīng)30min。反應(yīng)完畢,磁性分離,棄上清。加入Iml清洗 緩沖液(含0. 1 %吐溫的pH6. 0的PBS緩沖液),輕搖重懸磁粒。磁性分離,棄上清。b.金磁微粒的封閉在上一步的磁粒中加入Iml的封閉劑(含牛血清白蛋白 和賴氨酸的偶聯(lián)緩沖液),在搖床中37°C,180r/min反應(yīng)池。用2ml的上述清洗緩沖 液清洗3次,最后懸于Iml保存緩沖液(含0. 1 %疊氮鈉和0. 1 % BSA的PBS緩沖液)中,2 8°C保存?zhèn)溆谩?]血清/漿等生物樣品中抗體的分離去除a.血清/漿等生物樣品的稀釋取5μ1血清/漿等生物樣品,用去除緩中液 (pH6. 0的1 XPBS緩沖液)稀釋至50 μ 1。b.將1]步驟中的金磁微粒磁性分離,棄上清。加入Iml的去除緩沖液(pH6. 0的 IXPBS緩沖液),輕搖重懸金磁微粒,磁性分離,棄上清。加入a步驟中的血清/漿等生物 樣品,在搖床中37°C,180r/min反應(yīng)lOmin??贵w就被結(jié)合到免疫磁性微粒上,再經(jīng)磁場中 磁性分離,從而實現(xiàn)抗體從血清/漿等生物樣品中的分離去除。移取磁性分離后的上清,即 為分離去除了抗體的樣品。3]金磁微粒的再生和保存加入Iml再生緩沖液(0. 05M,pH3. 5的Gly-HCl緩沖 液)到上步驟中的金磁微粒中,在搖床中37°C,180r/min反應(yīng)2min,將吸附到金磁微粒上的 抗體從金磁微粒上洗脫下來,磁性分離,棄上清。加入Iml的上述清洗緩沖液,輕搖重懸金 磁微粒,磁性分離,上清即為分離得到的人抗體。加入Iml的上述保存緩沖液2 8°C保存實施例2是基于抗人血清白蛋白的IgY(卵黃抗體)和金磁微粒的免疫磁性微粒 的制備過程,及這種免疫磁性微粒應(yīng)用于從血清/漿等生物樣品中分離除去人血清白蛋白 的過程,具體如下1]免疫磁性微粒的制備a.抗人血清白蛋白卵黃抗體在金磁微粒表面的固定取金磁微粒到一個5ml 容量的離心管中,輕搖重懸。置于磁性分離器上,磁性分離,棄上清。加入細1偶聯(lián)緩沖液, 輕搖重懸。置于磁性分離器上,磁性分離,棄上清。重復(fù)操作一次。將抗人血清白蛋白的卵 黃抗體配置成濃度為lmg/ml的溶液,取1. 5ml加入金磁微粒中,在搖床中37°C,180r/min 反應(yīng)30min。反應(yīng)完畢,磁性分離,棄上清。加入細1清洗緩沖液,輕搖重懸磁粒。磁性分 離,棄上清。b.金磁微粒的封閉在上一步的磁粒中加入的封閉劑,在搖床中37°C,180r/ min反應(yīng)池。用細1的清洗緩沖液清洗3次,最后懸于2ml保存緩沖液中,2 8°C保存?zhèn)溆谩?]血清/漿等生物樣品中白蛋白的分離去除a.血清/漿等生物樣品稀釋取1 μ 1血清/漿等生物樣品,用去除緩沖液稀釋至 100 μ 1。b.將1]步驟中的金磁微粒磁性分離,棄上清。加入的去除緩沖液,輕搖重懸 金磁微粒,磁性分離,棄上清。加入a步驟中的血清/漿等生物樣品,在搖床中37°C,180r/ min反應(yīng)30min。白蛋白就被結(jié)合到免疫磁性微粒上,再經(jīng)磁場中磁性分離,從而實現(xiàn)白蛋 白從血清/漿等生物樣品中的分離去除。移取磁性分離后的上清,即為分離去除了白蛋白 的樣品。3]金磁微粒的再生和保存加入3ml再生緩沖液(0. 05M,pH3. 5的Gly-HCl緩沖 液)到上步驟金磁微粒中,在搖床中37°C,180r/min反應(yīng)2min,將吸附到金磁微粒上的白 蛋白從金磁微粒上洗脫下來,磁性分離,上清即為分離得到的白蛋白。加入細1的清洗緩沖 液,輕搖重懸金磁微粒,磁性分離,棄上清。加入2ml的保存緩沖液2 8°C保存?zhèn)溆谩?br> 從附圖可以看出,泳道2和泳道3中,已無明顯的白蛋白條帶出現(xiàn),說明白蛋白分 離去除的較為徹底。從附圖可以看出,泳道5和泳道6中已無明顯的抗體條帶出現(xiàn),說明抗 體分離去除的較為徹底。本申請以磁性微粒為載體,某生物大分子的特異性卵黃抗體為親和配基,制備出 一種免疫磁性微粒。這種免疫磁性微??捎糜趶纳飿悠分羞M行某生物大分子及細胞的特 異性親和分離。磁性微粒是指粒徑在lnm-200 μ m,具有超順磁性和高比表面積的復(fù)合微粒。 卵黃抗體是指從雞,鴨等禽類動物卵黃中提取出的抗體。生物大分子指蛋白,核酸,及其免 疫沉淀復(fù)合物。本發(fā)明將生物大分子的特異性卵黃抗體與磁性微粒共同反應(yīng)一段時間后,制備出 具有特異性的免疫磁性微粒。將稀釋好的生物樣品與免疫磁性微粒共同反應(yīng)一段時間后, 即可實現(xiàn)生物大分子親和吸附到免疫磁性微粒表面。經(jīng)磁性分離后,即可實現(xiàn)將生物大分 子、細胞從生物樣品中分離出去的目的。
      權(quán)利要求
      1.一種基于卵黃抗體的免疫磁性微粒,其特征在于該免疫磁性微粒由磁性微粒和經(jīng) 共價反應(yīng)或非共價作用結(jié)合在磁性微粒表面的卵黃抗體組成;所述磁性微粒為具有與蛋白 質(zhì)/抗體較強親和結(jié)合的金磁微粒,或者末端具有與蛋白質(zhì)反應(yīng)功能基團的磁性微粒;所 述基團包括具有反應(yīng)活性的氨基、羧基、巰基以及苯異硫氰酸根;所述磁性微粒具有超順磁 性的微粒;粒徑為lnm-200ym ;所述卵黃抗體為具有免疫親和反應(yīng)活性,可以及與待分離 生物大分子、細胞特異性結(jié)合的生物分子;所述待分離生物大分子指蛋白,核酸,及其復(fù)合 物。
      2.一種基于卵黃抗體的免疫磁性微粒的制備方法,其特征在于該方法包括以下步驟1)磁性微粒的平衡用偶聯(lián)緩沖液平衡,使磁性微粒處于適宜反應(yīng)的緩沖液中; 所述磁性微粒的平衡步驟包括a)將偶聯(lián)緩沖液放入離心管,使磁性微粒分散于偶聯(lián)緩沖液中;b)用磁性分離器進行磁性分離,棄上清;c)對步驟a)、b)重復(fù)一次或多次,以三次為宜;2)平衡后的磁性微粒與卵黃抗體的結(jié)合平衡后的磁性微粒與卵黃抗體的結(jié)合包括以下條件a)卵黃抗體以偶聯(lián)緩沖液配制,用偶聯(lián)緩沖液調(diào)節(jié)反應(yīng)體積,使磁性微粒和卵黃抗體 處于合適的反應(yīng)濃度,其體積為使所取磁性微粒濃度為0. 5-3mg/mL的體積,以1. 5mg/mL為 宜;其濃度為磁粒濃度的0. 05-5倍,以1倍為宜;b)采用恒溫振蕩器進行振蕩反應(yīng),溫度為4°C至37°C,以37°C為宜;反應(yīng)時間為20-30 分鐘,以20分鐘為宜;3)獲得的免疫磁性微粒的清洗除去非特異性吸附在免疫磁性微粒表面的卵黃抗體; 所述對免疫磁性微粒的清洗包括以下步驟a)將清洗緩沖液放入離心管,使磁性微粒分散于清洗緩沖液中;b)用磁性分離器進行磁性分離,棄上清;c)對步驟a)、b)重復(fù)一次或多次,以三次為宜。
      3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的基于卵黃抗體的免疫磁性微粒的制備方法,其特征在于所 述方法還包括對免疫磁性微粒的封閉;所述免疫磁性微粒的封閉符合以下條件1)加入封閉劑,其體積為使免疫磁性微粒濃度為0.5-2mg/mL的體積,振蕩反應(yīng);2)具體可采用恒溫振蕩器,溫度為4°C至37°C,以37°C為宜;3)反應(yīng)時間為20-120分鐘,以120分鐘為宜。
      4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的基于卵黃抗體的免疫磁性微粒的制備方法,其特征在于所 述方法還包括對免疫磁性微粒的清洗,即除去非特異性吸附在免疫磁性微粒表面的卵黃抗 體或封閉劑。
      5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的基于卵黃抗體的免疫磁性微粒的制備方法,其特征在于所 述方法還包括對免疫磁性微粒的保存步驟即將免疫磁性微粒懸于保存含0. 疊氮鈉和 0. 1 % BSA的PBS緩沖液中,在溫度為2 8°C中保存?zhèn)溆谩?br> 6.根據(jù)權(quán)利要求2或5所述的基于卵黃抗體的免疫磁性微粒的制備方法,其特征在于所述在步驟1)和幻中的偶聯(lián)緩沖液使用0. 02-0. 2M三羥甲基氨基甲烷-鹽酸緩沖液 (Tris-HCl),pH = 7. 0-7. 6 ;或 0. 02-0. 2M 磷酸緩沖液(PBS),pH = 7. 0-7. 6 ;或 0. 02-0. 2M 的N-2-羥乙基哌嗪-N-2-乙磺酸緩沖液,pH = 7. 0-7. 6 ;所述偶聯(lián)緩沖液中加入0. 1-1. OM m NaCl的為宜。
      7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的基于卵黃抗體的免疫磁性微粒的制備方法,其特征在于所述步驟3)中的清洗緩沖液為含0.05% (ν/ν)吐溫20(Tween 20)的偶聯(lián)緩沖液,或 含有IOmM乙二胺四乙酸二鈉鹽(EDTA)和0. 15M的NaCl的0. 02M三羥甲基氨基甲烷-鹽 酸緩沖液,PH = 7. 0-7. 6 ;所述清洗所用清洗緩沖液體積以使磁性微粒的濃度為0. 5-4mg/ mL的體積為宜。
      8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的基于卵黃抗體的免疫磁性微粒的制備方法,其特征在于所述封閉劑采用含1-10%的脫脂奶粉,以含5%脫脂奶粉的偶聯(lián)緩沖液為宜;或1-5%牛血清白蛋白BSA,或1-5%賴氨酸,或0. 2-2.0%的明膠,或1-5%的聚乙二醇的偶聯(lián)緩沖 液。
      9.一種權(quán)利要求1所述的基于卵黃抗體免疫磁性微粒的用途其特征在于所述基于卵黃抗體免疫磁性微粒用于從血漿、腹水、組織培養(yǎng)上清等樣本中蛋白的分 離;所述免疫磁性微粒用于從血漿、腹水、組織培養(yǎng)上清等樣本中核酸的分離;所述免疫磁 性微粒用于免疫沉淀試驗;所述免疫磁性微粒用于細胞分選。
      10.一種權(quán)利要求1所述的基于卵黃抗體免疫磁性微粒的用途其特征在于1)所述與從血漿、腹水、組織培養(yǎng)上清的反應(yīng)符合以下條件a 樣品以反應(yīng)緩沖液配制,其體積為使所取磁性微粒濃度為0. 5-20mg/mL的體積,以 10mg/mL 為宜;b 采用恒溫振蕩器進行振蕩反應(yīng)的溫度為4°C至37°C,以37°C為宜;反應(yīng)時間為 20-30分鐘,以20分鐘為宜;c 反應(yīng)緩沖液使用0. 02-0. 2M三羥甲基氨基甲烷-鹽酸緩沖液(Tris-HCl),pH = 6. 0-8. 5 ;或 0. 02-0. 2M 磷酸緩沖液(PBS),pH = 6. 0-8. 5 ;或 0. 02-0. 2M 的 N-2-羥乙基哌 嗪-N-2-乙磺酸緩沖液,pH = 6. 0-8. 5 ;所述反應(yīng)緩沖液中加入0. 1-1. OM的NaCl的為宜;2).所述免疫磁性微粒上的再生符合以下條件a 以再生緩沖液再生反應(yīng)后免疫磁性微粒,再生緩沖液體積為使磁性微粒濃度為 0. 5-20mg/mL 的體積,以 10mg/mL 為宜;b 采用恒溫振蕩器進行振蕩反應(yīng)的溫度為4°C至37°C,以37°C為宜;反應(yīng)時間為1_10 分鐘,以3分鐘為宜;c 洗脫緩沖液使用0. 02-2M尿素,0.01-0. 05M的十二烷基磺酸鈉或0. 01-0. 05M, ρΗ2· 5-4. 5 的 Gly-HCl 緩沖液;以 0. 05Μ, ρΗ3· 5 的 Gly-HCl 緩沖液為宜。
      全文摘要
      本發(fā)明涉及基于卵黃抗體(IgY)和磁性微粒的免疫磁性微粒的制備方法及其應(yīng)用。卵黃抗體(IgY)是指從禽類,如雞、鴨、鵝的卵黃中分離得到的抗體。磁性微粒是指粒徑在1nm-200μm,具有超順磁性和高比表面積的磁性復(fù)合微粒。免疫磁性微粒的應(yīng)用包括生物樣本中蛋白、核酸等生物大分子分離,細胞的分離,免疫沉淀試驗。本發(fā)明方法是通過將卵黃抗體(IgY)固定到磁性微粒表面制備出一種基于卵黃抗體(IgY)免疫磁性微粒。利用生物大分子與其相應(yīng)卵黃抗體的親和作用以及免疫磁性微粒的超順磁性從而達到在磁場中將生物大分子、細胞從生物樣品中分離的目的。
      文檔編號C12N5/00GK102086225SQ20091021928
      公開日2011年6月8日 申請日期2009年12月3日 優(yōu)先權(quán)日2009年12月3日
      發(fā)明者崔亞麗, 胡佳, 陳超 申請人:陜西北美基因股份有限公司
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