專利名稱：延長保質(zhì)期的益生菌食品的制作方法
延長保質(zhì)期的益生菌食品本發(fā)明涉及含有益生菌的食品，尤其是保質(zhì)期長的食品。更具體地，本發(fā)明涉及液 體乳制品(像含乳飲料、乳源食品和乳制品配料)或果汁。益生菌定義為活體微生物，當(dāng)宿主被給予充足量的益生菌時，有益于宿主的健康 (FA0/WH0)。根據(jù)定義，所有益生菌具有已證明的非致病性特征。通常，這些保健作用與改 善人或動物胃腸道中微生物群落的平衡有關(guān)。長久以來人們就已經(jīng)知道胃腸道中的微生物群落對人的健康十分重要。例如， 1970年，美國臨床營養(yǎng)學(xué)雜志(The American Journal of Clinical Nutrition)出版的題 為“人的正常糞便菌叢”的綜述文章(卷23:1457-1465頁)開篇明義中開頭便道腸道中 的正常群落的平衡對宿主的健康和康樂的影響已是連篇累牘。據(jù)報道，腸細(xì)菌與以下成份 的代謝有關(guān)碳水化合物(例如益生元、糖類)、蛋白質(zhì)、脂肪、膽固醇、核苷酸、激素、維生素 和礦物質(zhì)。人微生物群落生態(tài)會影響自然抵抗力、免疫力、骨質(zhì)疏松、癌癥和骨疽的發(fā)病率 等。大量出版物給出了機理解釋，而臨床研究證明了效力_出現(xiàn)在胃腸道中的微生物群落 對于感染抵抗力具有重要的影響。同時，腸微生物群落(和臨時移居的益生菌種類)會影 響腸健康(例如上皮功能、粘液生長、上皮屏障功能、粘膜免疫、排便模式、腸通過)、特應(yīng) 性疾病、陰道感染、皮膚疾病、人健康和人情緒等。實際上，可以說，微生物群落在人體內(nèi)或 人體上任何地方都在發(fā)揮著作用。本發(fā)明涉及食品，具體地，具有乳制品和/或果實(汁)來源的食品。這些產(chǎn)品尤 其指通常屬于日常消費的類型，并且意在對人或動物健康具有積極作用和/或?qū)θ嘶騽游?的不便有改善作用。據(jù)信，預(yù)期的作用涉及恢復(fù)、再生、平衡或加強天然存在于人體或動物 體內(nèi)或體表的微生物生態(tài)學(xué)。眾所周知，可以提供包含通常選自乳桿菌屬和雙岐桿菌屬的益生菌微生物的乳制 品，例如類干酷乳桿菌(Lactobacillus paracasei)、干酷乳桿菌(Lactobacillus casei)、 瑞士乳桿菌(Lactobacillus helveticus)、鼠李糖乳桿菌(Lactobacillus rhamnosus)、 和約氏乳桿菌(Lactobacillus johnsonii)、嗜酸乳桿菌(Lactobacillus acidophilus)、 唾液乳桿菌(Lactobacillus salivarius)、其它乳桿菌(Lactobacillus)等，例如動物雙 歧桿菌(Bifidobacterium animalis)、乳雙歧桿菌(Bifidobacterium lactis)、兩歧雙 歧桿菌(Bifidobacterium bifidum)、短雙歧桿菌(Bifidobacterium Breve)、長雙歧桿 菌(Bifidobacterium longum)、乳雙歧桿菌(Bifidobacterium lactis)、嬰兒雙歧桿菌 (Bifidobacterium infantis)等。其它菌株也用作益生菌。Alfred Nissle在1917年分離出了一種來自一位士兵 的糞便的大腸埃希氏菌(Escherichia coli)，這位士兵參加了第一次世界大戰(zhàn)，他在志賀 氏菌病嚴(yán)重暴發(fā)期間并未罹患小腸結(jié)腸炎。由于抗生素尚未發(fā)現(xiàn)，故該菌株被成功地用于 治療傳染性腸疾病的急性病例(沙門氏菌病和志賀氏菌病)。另一個著名的例子是德氏乳 桿Tifi呆力口禾1J亞亞禾中(Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus)，一禾中不 舌動且不 形成孢子的菌株，它是用于生產(chǎn)酸乳的幾種細(xì)菌之一。一位俄羅斯生物學(xué)家Ilya Ilyich Mechnikov信服了他的假說，定期使用酸乳使保加利亞農(nóng)民保持長壽、健康。有人提出，這是因為酸乳中存在的益生菌德氏乳桿菌保加利亞亞種(Lactobacillus bulgaricus)。 0. Adolfsson 等人在美國臨床營養(yǎng)學(xué)雜志(the American Journal of Clinical Nutrition) (2004，卷80，245-256頁)中描述，酸乳本身還具有特別是針對各種胃腸疾病的 醫(yī)藥用途，而Ripudaman S. Beniwal等人在消化系統(tǒng)疾病和科學(xué)(Digestive Diseases and Sciences)(卷48，2077-2082頁)中報道了酸乳在預(yù)防抗生素相關(guān)腹瀉中的有益作用。不 希望受理論的約束，發(fā)明人確信，所描述的有益作用與這些酸乳中存在的乳酸菌有關(guān)。 某些益生菌菌株能產(chǎn)生有生物活性的成分，這些有生物活性的成分積聚起益生菌 菌株所能產(chǎn)生直接的或在某些情況下所能傳遞的效應(yīng)。益生菌菌株的這種附 加益處的一 個很好的例子是枯草芽孢桿菌納豆變種(Bacillus subtilis var. natto)，它產(chǎn)生幫助預(yù) 防骨退化的維生素K2。另一個例子是Mortiella亞種(常用spp.代表亞種)，它產(chǎn)生大量 LCPUFA(長鏈多不飽和脂肪酸)，其中，花生四烯酸能調(diào)節(jié)上皮細(xì)胞的細(xì)胞骨架功能并以此 調(diào)節(jié)上皮屏障功能。另一個例子是枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)，它能產(chǎn)生能調(diào)節(jié)胃 腸微生物群落的抗生素。在儲藏期有限的乳制品中應(yīng)用益生菌是眾所周知的。在果汁或其它種類的汁中應(yīng) 用益生菌很大程度上是基本未開發(fā)的領(lǐng)域。以上產(chǎn)品通常是儲藏期有限的新鮮產(chǎn)品并且通常需要冷藏。許多乳制品和果汁被 制成可以無需凍藏的延長保質(zhì)期的產(chǎn)品。問題是，無法在引入益生菌后不對這些產(chǎn)品的儲 藏期產(chǎn)生不利影響或者妨礙。由于儲藏期的縮短將喪失諸如長保質(zhì)期乳制品和果汁存在的 理由，所以益生菌微生物不能被有效地用在這些產(chǎn)品中。因此，希望提供一種方式，藉由這 種方式，長保質(zhì)期食品也能具有與益生菌微生物有關(guān)的效果。術(shù)語“長保質(zhì)期食品，，一般是指或者因其成分本身或者因特殊處理亦或兩者兼而 有之而變得可以保存的產(chǎn)品，這種產(chǎn)品可以長的時間儲藏，優(yōu)選在環(huán)境條件即非冷藏的條 件下儲藏(例如兩周或更長、優(yōu)選數(shù)月、更優(yōu)選數(shù)年，如以下進一步規(guī)定的)。為了更好地實現(xiàn)以上愿望，在一個實施方式中，本發(fā)明提供包含休眠狀態(tài)的益生 菌微生物的長保質(zhì)期食品。這是指真菌、酵母菌或細(xì)菌孢子或休眠細(xì)胞。在另一個實施方式 中，本發(fā)明提供選自含乳飲料、果汁、和它們的濃縮物的巴氏殺菌的液體食品，所述產(chǎn)品包 含益生菌真菌、酵母菌和/或細(xì)菌孢子或休眠細(xì)胞。在另一個實施方式中，本發(fā)明涉及益生 菌真菌、酵母菌和/或細(xì)菌孢子或休眠細(xì)胞作為長保質(zhì)期食品尤其是選自含乳飲料、果汁、 和它們的濃縮物的巴氏殺菌的液體食品中的益生菌成分的應(yīng)用。在再一個實施方式中，本 發(fā)明提供食品配料形式的食品，這種食品配料衍生自含有益生菌孢子或休眠益生菌細(xì)胞的 乳(例如由菲仕蘭食品公司(Friesland Foods D0M0)生產(chǎn)的Deminal 90和/或GOS和/ 或乳糖，和/或可用于食品目的的任意其它乳源成分)、發(fā)酵乳。在又一個實施方式中，本發(fā) 明涉及針對保留延長保質(zhì)期的益生菌食品的保存期目的的所述應(yīng)用。即，這可以以長保質(zhì) 期食品為基礎(chǔ)獲得益生菌食品，而且還能以與未添加益生菌時同樣的方式儲存該食品。保 留保存期不一定意味著保存期完全相同，因為可能受到引入益生菌孢子或休眠營養(yǎng)細(xì)胞的 影響(無論通過何種方式)。這至少表示該產(chǎn)品仍可以被認(rèn)做是長保質(zhì)期食品，不如在上文 中被提到的以及將在下文中進一步定義的。除了在儲藏過程中減少或沒有微生物生長的優(yōu)點之外，對于較酸性的食品尤其是 飲料諸如果汁和酸乳或酸乳飲料的情況，還可獲得另一個優(yōu)點，其中，休眠益生菌微生物比活益生菌能存活更長的時間。我們注意到，W02004/080200涉及向食品，特別是動物飼料中添加益生菌孢子。該 文獻解決了益生菌細(xì)菌的穩(wěn)定性。該文獻不涉及益生菌細(xì)菌、酵母和/或真菌孢子或休眠 細(xì)菌、真菌或酵母細(xì)胞、或它們的組合用于延長保質(zhì)期的益生菌食品的用途。關(guān)于細(xì)菌孢子 的其它文獻包括W02007/066108 ；WO 03/039260 ；Wolken等人在《生物技術(shù)方向》(Trends in Biotechnology)上的論文，第21卷，第8期，2003年8月1日，338-345頁；Hong等人 在《歐洲微生物學(xué)會微生物學(xué)綜述》(FEMS Microbiology Reviews)上的論文，第29卷，第 4期，2005年9月1日，813-835頁；Casula等人在《應(yīng)用和環(huán)境微生物學(xué)》(Applied and Environmental Microbiology)上的論文，第 68 卷，第 5 期，2002 年 5 月，2344-2352 頁。無 一涉及長保質(zhì)期食品。本發(fā)明獨一無二地提供這種可能性，即許多寄居于我們的胃腸道中和/或長久以 來用于供人食用或用于人類食物生產(chǎn)的細(xì)菌和/或真菌中的一種或多種被用于延長保質(zhì) 期的益生菌食品中。可以在該背景下使用的菌類優(yōu)選地選自存在于(人)胃腸道中的那 些，更優(yōu)地來自以下各屬乳桿菌屬(Lactobacillus)、雙岐桿菌屬(Bifidobacterium)、 韋榮氏球菌屬(Veillonella)、德庫菌屬(Desemzia)、糞球菌屬(Coprococcus)、柯 林斯菌屬(Collinsella)、檸檬酸桿菌屬(Citrobacter)、Turicibacter、薩特氏菌屬 (Sutterella)、Subdoligranulum、鏈球菌屬(Streptococcus)lifM (Sporobacter)、 Sporacetigenium、瘤胃球菌屬(Ruminococcus)、羅其JH白禾丨J 氏菌屬(Roseburia)、變形 胃屬(Proteus) > 胃胃 ^夭氏胃屬(Prevotella) > Parabacteroides> Papillibacter> 顫螺菌屬(Oscillospira)、蜜蜂球菌屬(Melisococcus)、Dorea、戴阿利斯特桿菌屬 (Dialister) > It^M (Clostridium) > MJ&M^M (Cedecea) > Catenibacterium> TSI^iH lifM (Butyrivibrio)、布丘氏菌屬(Buttiauxella) > Bulleidia> BfII lifM (Bilophila) > 擬桿菌屬(Bacteroides)、Anaerovorax> Anaerostopes、厭氧細(xì)桿菌屬(Anaerofilum)、腸 木干胃禾斗(Enterobacteriaceae) > MH^ffl (Fermicutes) > Hfti^ K^M (Atopobium)、 Alistipes> Akkermans ia> M (Acinetobacter)、Slackie、志賀桿菌(Shigella)、 希瓦氏菌屬(Shewanella)、沙雷氏菌屬(Serratia)、Mahella、毛螺菌屬(Lachnospira)、克 雷伯氏菌屬(Klebsiella)、Idiomarina、梭桿菌屬(Fusobacterium)、Faecal ibacterium、 真桿菌屬(Eubacterium)、腸球菌屬(Enterococcus)、腸桿菌屬(Enterobacter)、埃格特 菌屬(Eggerthella)。所述菌種還可以源自真菌類，像酵母菌、子囊菌類、接合菌亞綱和半 知菌綱，最優(yōu)地來自以下屬的真菌類曲霉屬(Aspergillus)、球擬酵母屬(Torulopsis)、 接合酵母屬(Zygosaccharomyces)、漢森氏酵母屬(Hansenula)、念珠菌屬(Candida)、 酵母屬(Saccharomyces) > til M (Clavispora)、酒香酵母屬(Bretanomyces)、畢赤酵 母屬(Pichia)、淀粉菌(Amylomyces)、接合酵母屬(Zygosaccharomyces)、內(nèi)真菌屬 (Endomycess)、生絲畢赤酵母屬(Hyphopichia)、接合酵母屬(Zygosaccharomyces) > 魯維酵母菌屬(Kluyveromyces)、毛霉屬(Mucor)、酒曲菌屬(Rhizopus)、亞羅酵母屬 (Yarrowia)、內(nèi)孢霉屬(Endomyces)禾口 / 或青霉菌屬(Penicillium)。根據(jù)本發(fā)明，來自如上所述的種屬或類的物種可以以休眠的形式(即作為孢子或 /和作為非活性的形式，它們在細(xì)胞的環(huán)境中不存在適合營養(yǎng)生長的條件時出現(xiàn)，因此，細(xì) 胞將處于休息或休眠狀態(tài))用于延長保質(zhì)期的益生菌食品中。本領(lǐng)域技術(shù)人員將清楚，包含休眠形式的益生菌的食品不排除還包含不再有生存力的益生菌(它們對本發(fā)明既無幫 助也無妨礙)。在一個替代性實施方式中，根據(jù)食品、其期望儲藏期和其保存環(huán)境，根據(jù)本發(fā) 明使用的休眠益生菌可以與常規(guī)的、未經(jīng)改變的益生菌組合。優(yōu)選地，產(chǎn)品中至少一半的益 生菌處于休眠狀態(tài)，更優(yōu)地，該比例約為50 50(即60 40至40 60)。然而，考慮到食 品中的益生菌的用量范圍很大，可以按90 10至10 90或甚至99 1至1 99的數(shù) 量比率混合未經(jīng)改變的益生菌和休眠益生菌(諸如孢子)。 來自上述種屬或類的真菌、酵母或細(xì)菌種類可以作為本文所述的孢子或非孢子產(chǎn) 品用作延長保質(zhì)期的產(chǎn)品中的益生菌，根據(jù)定義，它們是非致病性的。因此可以相信，能保 持休眠或孢子形式狀態(tài)的真菌、酵母和細(xì)菌源的基本上所有非致病性微生物種類都能用于 延長保質(zhì)期的益生菌產(chǎn)品。細(xì)菌孢子(也稱為內(nèi)生孢子)是一些類型細(xì)菌顯示的休止階段。內(nèi)生孢子形成于 營養(yǎng)細(xì)胞(孢子囊)內(nèi)，是對環(huán)境中的不利變化的響應(yīng)。原始細(xì)菌細(xì)胞復(fù)制其遺傳物質(zhì)， 遺傳物質(zhì)的一份復(fù)制物被堅硬的包衣包圍。然后，外部細(xì)胞瓦解，因此釋放孢子，所述包衣 很好地保護著孢子，為其抵御各種影響，諸如熱、冷、輻射或必需物諸如營養(yǎng)、水或空氣的缺 乏。孢子本質(zhì)上能發(fā)芽并因此提供迄今為止孢子化的細(xì)菌的生長。真菌孢子是酵母和真菌細(xì)胞在某些環(huán)境條件下說顯示出的休止期，許多真菌和酵 母細(xì)胞都顯示出休止期。在其天然環(huán)境中，通過營養(yǎng)孢子或通過菌絲體分裂進行的無性繁 殖相比于有性繁殖，可使真菌更快速地傳播。例如，烤箱的酵母菌釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)的孢子生成是對營養(yǎng)缺乏的一種響應(yīng)。孢子的構(gòu)建可以分為兩個階段。第一 個階段是在細(xì)胞質(zhì)中產(chǎn)生新的膜室，它形成孢子的原生質(zhì)膜。在第二個階段，通過被多層的 孢子壁包圍，孢子成熟，孢子壁提供對環(huán)境壓力的抵抗性。無性的孢子根據(jù)環(huán)境條件例如水 活度、光、營養(yǎng)和/或防腐劑(天然的或合成的成分，被加入食物中以便通過限制營養(yǎng)生長 來防止由微生物生長引起的腐敗)，在發(fā)芽后在新的環(huán)境中建群。因此，本發(fā)明的長保質(zhì)期食品中存在的益生菌酵母、真菌和/或細(xì)菌孢子實際上 是出于“休眠”狀態(tài)的益生菌酵母、真菌、或細(xì)菌、或它們的組合。本發(fā)明的一種優(yōu)選的形式 是孢子形式的酵母、真菌和/或細(xì)菌，但還存在著保持細(xì)胞處于這種休眠階段的環(huán)境條件。 而且，并非處于孢子形式的真菌、酵母或細(xì)菌源益生菌細(xì)胞是本發(fā)明的延長保質(zhì)期的益生 菌食品的一部分。在食品被食用后，孢子在腸子中發(fā)芽，或者，環(huán)境條件將改變真菌、細(xì)菌或 酵母細(xì)胞的“休眠”狀態(tài)，因此在需要時釋放其的保健作用，效果可與食用酵母、真菌或細(xì)菌 本身相媲美。孢子或休眠細(xì)胞在胃腸道中仍處于休眠或孢子階段而未變成有滋養(yǎng)力時也可 能是有效的(例如，通過細(xì)胞壁蛋白質(zhì)、糖蛋白或結(jié)構(gòu)競爭性地排除病原體結(jié)合位點或刺 激免疫系統(tǒng))。雖然益生菌細(xì)菌、真菌或酵母孢子能夠進入各種長保質(zhì)期食品中，但是，本發(fā)明 最優(yōu)地涉及酸性食品。食品的酸性將使細(xì)菌孢子保持在休眠階段。被食用后，該階段將 通過胃(這里顯然是酸性環(huán)境)保持。在腸道中PH升高后，孢子會發(fā)芽。這方面的參考 文獻是Gabriella Casula和Simon M. Cutting的《應(yīng)用和環(huán)境微生物學(xué)》(Applied and Environmental Microbiology)，2002年5月，2344-2352頁。本發(fā)明還涉及具有其它特定 環(huán)境條件像低水活度(例如在煉乳中)的產(chǎn)品、不含有針對所用孢子形式或休眠狀態(tài)的益 生菌種類的特定營養(yǎng)要求以及缺乏/存在光和/或氧的產(chǎn)品。細(xì)菌、酵母或真菌孢子和/或休眠細(xì)胞將根據(jù)菌株和所用的條件保持其休眠狀態(tài)，但如果打開包裝袋并食用，細(xì)胞會 開始發(fā)芽并且變得有滋養(yǎng)力。 本發(fā)明的產(chǎn)品按一定的方式進行儲藏，在這種方式下，孢子和/或休眠細(xì)胞不會 發(fā)芽，或者，在這種方式下，細(xì)胞保持休眠，例如，低水活度的環(huán)境；優(yōu)選地，防止孢子發(fā)芽或 使細(xì)胞保持休眠的產(chǎn)品，諸如酸性產(chǎn)品；限制營養(yǎng)條件，加防腐劑的產(chǎn)品；和/或黑暗環(huán)境； 或上述條件中的兩種或多種的組合(例如限制營養(yǎng)結(jié)合PH和防腐劑)。優(yōu)選的產(chǎn)品選自 含乳飲料、衍生自乳制品的產(chǎn)品例如酸乳、和粉末形式的乳制品配料(例如含乳糖、乳漿和 /或酪蛋白的產(chǎn)品)、果汁、和它們的濃縮物。這些產(chǎn)品的PH范圍通常在2-7 (果汁的pH處 于下限，酸乳是4，全脂乳是6-7)。本發(fā)明還可應(yīng)用于希望制成延長保質(zhì)期(并最終被巴氏 殺菌)形式的其它酸性食品，諸如奶油干酪(PH 4. 88)或村舍式干酪(pH 5)、不同成熟期的 硬乳酪、已發(fā)酵的或在接觸細(xì)菌或真菌(在乳酪的內(nèi)部或外部)后獲得其典型味道的乳酪、 或水果制品。還可以將本發(fā)明應(yīng)用于有糖或無糖的低水活度煉乳。另一種應(yīng)用可以涉及使 產(chǎn)品處于黑暗中的包裝材料。如上所述，本發(fā)明涉及長保質(zhì)期食品。這些是可以無需冷藏的產(chǎn)品，尤其是適合非 冷藏的果汁、水果飲料和乳制品?！?儲)藏”是指對產(chǎn)品，尤其是含乳飲料或果汁或含果汁 飲料進行防干擾包裝到為食用產(chǎn)品而打開防干擾包裝之間的時間。該保存期限通常可通過 參考包裝上的“最佳食用日期”(或以不同語言表述的類似措詞)來辨認(rèn)。關(guān)于乳制品例如含乳飲料諸如牛奶、巧克力牛奶、酸乳飲料，延長保質(zhì)期的產(chǎn)品的 保存期(非冷藏)可以超過12天。具體地，這是指保存期(非冷藏保存期限)超過45天、 尤其是45天至6個月、優(yōu)選地6-12個月、更優(yōu)地12-24個月。甜煉乳的保存期可以是5_10 年。對于果汁，延長保質(zhì)期的產(chǎn)品一般保存期(非冷藏保存期限)是13-26周。含果汁飲 料的保存期(非冷藏保存期限)是3-6個月或更長。非冷藏是指在環(huán)境條件下保藏，在每 種氣候區(qū)中，保存期限也許各異。當(dāng)然，有的時候，環(huán)境溫度恰巧與冰箱溫度相同，譬如至多 7°C或更低，例如0°C，也可能在冰箱外儲藏。雖然因此不能排除長保質(zhì)期食品被保藏在此類 低溫下的情況，但是，本領(lǐng)域技術(shù)人員將完全理解，術(shù)語“延長保質(zhì)期的”表示在高于冰箱溫 度的溫度下儲藏，這種溫度通常高于8°C，尤其是至少10°C，一般最高達(dá)50°C，尤其是最高 達(dá)40°C。請注意，此類儲藏將是在商店的貨架上，例如在15-25°C。存在各種賦予食品“長保質(zhì)期”的方法。范圍從溫度處理諸如巴氏殺菌和消毒直 到添加防腐劑。在本發(fā)明的范圍內(nèi)，而且與術(shù)語的正常意義等同，消毒處理是指殺死包括孢 子在內(nèi)的所有生命形式的高溫處理。顯然，本發(fā)明不適用于在進行此類過程諸如消毒以期 殺死所有微生物生命之前添加休眠細(xì)胞或孢子。本領(lǐng)域技術(shù)人員將很容易理解，如果是經(jīng) 受此類過程的延長保質(zhì)期的產(chǎn)品，休眠的益生菌可以在這些產(chǎn)品已經(jīng)經(jīng)過了高溫處理加工 后再應(yīng)用到長保質(zhì)期食品中，這種高溫處理加工的范圍可以是從巴氏殺菌直到消毒。延長保質(zhì)期的乳制品和水果制品通常通過巴氏殺菌來獲得。巴氏殺菌指各種形式 的加溫處理，溫度和處理時間決定結(jié)果。因此，經(jīng)過常規(guī)巴氏殺菌的“鮮”乳(如果冷藏，可 儲藏數(shù)周)是通過所謂的HTST法(“高溫/短時”)來處理的。這種常規(guī)巴氏殺菌法通常 指在約72°C加熱15-20秒。本發(fā)明不是應(yīng)用于此類“鮮”乳，而是特別地應(yīng)用于經(jīng)巴氏殺菌 以適于非冷藏(在本發(fā)明的范圍內(nèi)，其被稱為“延長保質(zhì)期的巴氏殺菌法”)的產(chǎn)品。食品 適合長期保藏的其它理由是食品中的低PH和/或低水活度和/或營養(yǎng)限制和/或防腐劑的存在和/或光的缺乏。巴氏殺菌通常以多個繼發(fā)的熱處理或以單次熱處理、一般于60至110°C的溫度下 進行。巴氏殺菌熱處理過程不僅取決于被處理的物質(zhì)，還取決于其它保藏參數(shù)像PH、倉庫存 儲藏溫度以及水活度。熱處理的一個具體例子是UHT處理(超高溫)。這一般可以稱為超 巴氏殺菌(ultra-pasteurization)。優(yōu)選的處理是利樂乳品加工手冊(Tetra Pak Dairy Processing Handbook)(用于乳制品)和Steven Nagy的《果汁加工技術(shù)》(Fruit Juice Processing Technology)中提到的方法。特別適合的UHT處理是在135_150°C加熱15_4 秒(乳品)，而對于果汁，在95-90°C加熱15-60秒。另一種優(yōu)選的處理(特別對于乳制品) 是在138°C或143°C的溫度下加熱幾分之一秒。另一種“延長保質(zhì)期的巴氏殺菌”處理，即產(chǎn)生延長保質(zhì)期的產(chǎn)品的巴氏殺菌處 理，是HHST (更高溫加熱/更短時間)，該方法在時間和溫度方面處于HTST和UHT之間。不 考慮為延長保質(zhì)期所選的確切處理方法，本發(fā)明優(yōu)選地涉及可以在冰箱外保藏的產(chǎn)品，尤 其是經(jīng)過溫度處理而達(dá)到這種狀態(tài)的產(chǎn)品。這特別涉及細(xì)菌。然而，本發(fā)明不限于此?？梢允褂盟心苄纬涉咦踊蛟谛菝咂?休眠的真菌和酵母的孢子。益生菌細(xì)菌是本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的，不需要在此闡述。關(guān)于 能夠形成孢子的(絲狀)真菌和細(xì)菌的知識也是本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的。優(yōu)選的示例包 括酵母以及真菌米曲霉(Apergillus oryzae)、醬油曲霉(Aspergillus soyae)、易變球擬 I^fiJ (Torulopsis versatilis) > Zygosaccharomyces soIaeKf^fiJliiM (Hansenula spp.)(例如異常漢森酵母)、球擬酵母菌屬(Torulopsis spp)、Candida etchellsii、 皺狀假絲酵母(Candida versatilus)、酵母屬(Saccharomyces spp.)(釀酒酵母、布拉 酵母菌、葡萄汁酵母菌、S.elegans、貝酵母)、克魯斯氏念珠菌(Candida krusei)、盧西 jfl^!^ (Clavispora lusitaniae) > M^f^^M (Bretanomyces spp. ) > Pichia saitoi> i^i)·^ ' (Amylomyces rouxii) >(Zygosaccharomyces major)、內(nèi)貞胃 屬(Endomycess spp·)、Hyphopichia burtonii、魯氏接合酵母(Zygosaccharomyces rouxii)、胃·會M (Kluyveromyces spp.) > (Mucor indicus)
(Rhizopus oligosporus)、中華根霉(Rhizopus chinensis)、米根霉(Rhizopus oryzae) > 解脂耶氏酵母(Yarrowia lipolytica)、扣囊內(nèi)孢霉(Endomyces fibuliger)、婁地青 霉菌(PeniciIlium roqueforti)、沙門柏干酪青霉菌(Penicillium camemberti)、白 青 M (Penicillium candidum) > 干酷青霄(Penicillium caseicolum) > Penicillium album、納地青霉(Penicillium nalgiovenese)、產(chǎn)黃青霉(Penicillium chrysogenum), 以及細(xì)菌像枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)、納豆枯草芽孢桿菌、蘇云金芽孢桿 菌(Bacillus thuringiensis)、地衣芽孢桿菌(B. Iicheniformis)、賭狀芽孢桿菌 (B. cereus)、巨大芽孢桿菌(B. megaterium)、多粘類芽孢桿菌(Paenibacillus polymyxa)、 短小芽孢桿菌(B. pumilus)、B. polyfermenticus、克勞氏芽孢桿菌(B. cluasii)、側(cè)孢 短芽 包桿菌(B· lactosporus)、{ J 包短芽 包桿菌(Brevibacillus lactosporus)、生 包 乳桿菌(Lactobacillus sporogenes)、凝結(jié)芽孢桿菌(B. coagulans)、多粘類芽孢桿菌 (Paenibacillus polymyxa)、側(cè)芽雙歧桿菌(B. Iaterosporus)。最優(yōu)選的是芽孢桿菌屬的 細(xì)菌，其中最優(yōu)選的包括枯草芽孢桿菌、納豆枯草芽孢桿菌、短小芽孢桿菌、地衣芽孢桿菌 和凝結(jié)芽孢桿菌。
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益生菌細(xì)菌孢子可以通過各種方法來獲得。首先，可以購買，例如市場上有不同品 名，像 AlCaretm、Bactisubtil、Bidisubtilus、Bioplus 2B、Biosubtyl、Biosporin 和許多其 它的含有不同的上述形成孢子種類的。其次，一般可以通過使細(xì)菌在合適的培養(yǎng)基上生長、 然后使生長的培養(yǎng)物接觸誘導(dǎo)孢子形成的環(huán)境來產(chǎn)生益生菌細(xì)菌孢子。后者可以包括向細(xì) 菌發(fā)出某種沖擊的各種方法，例如通過升高溫度、改變包含細(xì)菌的培養(yǎng)基中的鹽濃度、改變 PH等。所述培養(yǎng)介質(zhì)可以是固態(tài)或液態(tài)。在de Vries博士的題為“蠟狀芽孢桿菌孢子形成、 結(jié)構(gòu)和發(fā)芽”(瓦格寧根大學(xué)(Wageningen University)論文集，2006年)的論文中可找到 細(xì)菌模型微生物蠟狀芽孢桿菌(Bacillus cereus)的孢子形成過程的例子。真菌孢子形成 過程的例子可以在Neiman博士的題為“釀酒酵母中子囊孢子形成”(微生物分子生物學(xué)評 論(Microbiol Mol Biol Rev.) 2005,69 :565_584)的論文中找到。真菌和/或酵母孢子和 /或處于休眠期的真菌、酵母或細(xì)菌細(xì)胞可以從產(chǎn)品的供應(yīng)商處購買，或者從皇家荷蘭生物 科技研究所培養(yǎng)物保藏中心(Centraalbureau voor Schimmelcultures (CBS))、發(fā)酵研究 所(大阪市)和美國模式培養(yǎng)物集存庫(American Type Culture Collection(ATCC))無 任意限制獲得后進行生產(chǎn)。生產(chǎn)或購買后，可能希望純化孢子培養(yǎng)物或細(xì)胞培養(yǎng)物，除去不需要的酶、細(xì)胞碎 片、細(xì)胞培養(yǎng)基和非孢子細(xì)胞。這一點可以利用與營養(yǎng)細(xì)胞和細(xì)胞碎片相比孢子的較高密 度來實現(xiàn)。在孢子培養(yǎng)物的情況下，優(yōu)選使用基本上純的(例如用相差顯微術(shù)測定，大于 90%的相為明亮孢子)孢子制備物。在本發(fā)明的產(chǎn)品中，可以包括的孢子的量范圍很大，通常足夠每天食用 IO6-IO9CFU (菌落形成單位)。因此，本發(fā)明的食品的每日量通常包含IO6至IO9CFU的益生 菌孢子，優(yōu)選地IO7至108CFU。優(yōu)選地，該范圍的量在一整天之內(nèi)消費(例如四次IO7CFU的 劑量以達(dá)到一天4X IO7CFU的總劑量)，但是，也可以一次性地通過水果或乳基產(chǎn)品消費一 日劑量的孢子。單位量的產(chǎn)品中的菌落形成單位的數(shù)量將取決于每日份額的大小。在這一 點上，各種產(chǎn)品和各類消費者各不相同。通常，含乳飲料和食品飲料的正常攝入量是100至 800ml/天，以此為基礎(chǔ)，本發(fā)明的產(chǎn)品優(yōu)選地包含IO3至109CFU/ml、104至108CFU/ml、或IO5 至 107CFU/ml。孢子可以在巴氏殺菌之前引入食品中。也可以先對孢子進行獨立的巴氏殺菌，然 后將其加入食品中。益生菌孢子用于預(yù)防、治療人病毒、細(xì)菌、真菌或寄生源的感染或改善對這些感染 的抵抗力等等。胃腸道的感染包括胃腸炎(其特征是胃和腸粘膜的感染和/或發(fā)炎)和 急性和慢性腹瀉。胃腸癥狀也被理解為表示特定的疾病，諸如幽門螺桿菌(Helicobacter pylori)感染。呼吸道疾病包括與小呼吸道的發(fā)炎(支氣管炎)有關(guān)的感染，這種感染尤其 是由細(xì)菌或病毒(尤其是普通的感冒和流感病毒)感染或它們的組合造成。這也被理解成 意味著流感-傳染性病毒傳染病，它經(jīng)常作為流行病出現(xiàn)。其它例子是由于各種微生物引 起的肺組織的嚴(yán)重發(fā)炎和肺炎，術(shù)語“肺炎”通常用于溫和性肺炎的情況。而且還包括普通 感冒，它實際上是鼻腔的粘液和咽喉和/或頭部鼻旁竇(上頜竇和竇腔)的發(fā)炎，具體地由 小RNA病毒造成；以及涉及CNSLD (慢性非特異性肺病)的疾病諸如哮喘、慢性支氣管炎和 肺氣腫。實際上，以上這些意味著所有體內(nèi)或體表的位置時，自然存在的無害微生物群落
10可能發(fā)生失調(diào)。這種失調(diào)可能是由天然存在的微生物菌落的變化引起的，或者因感染來自 體外的傳染病而引起。這通常涉及身體需要進行免疫抵制以恢復(fù)健康或不再發(fā)生感染或失 調(diào)的疾病。 用于本發(fā)明的延長保質(zhì)期處理的產(chǎn)品中的益生菌孢子可以具有不同的來源。而 且，各種孢子可以在延長保質(zhì)期的益生菌食品中組合。例如，一株孢子形式的芽孢桿菌屬菌 株可以與另一株孢子形式的益生菌菌株在同一延長保質(zhì)期的產(chǎn)品中相組合。也可以在延 長保質(zhì)期的益生菌產(chǎn)品中組合兩種以上孢子形式的益生菌菌株(例如一個產(chǎn)品中包括3、 4、5或大于5種不同的孢子形式的益生菌菌株)。在本發(fā)明的產(chǎn)品中，通過添加生物前物 質(zhì)(prebiotic substances)可進一步擴大益生菌(以孢子的形式提供)的優(yōu)點。生物前 物質(zhì)是不可消化的食物成分，它們通過選擇性地刺激腸道(特別地結(jié)腸)中的一種或有限 種類的細(xì)菌的生長和/或活性來有利地影響宿主并因此改善宿主健康。最著名的生物前物 質(zhì)是不可消化的低聚糖。合適的生物前物質(zhì)的例子是具有短鏈或長鏈的果糖和/或乳_低 聚糖、菊粉、含巖藻糖的低聚糖、β葡聚糖、酸豆粉、樹膠、果膠、唾液酸寡糖、唾液乳糖、短鏈 或長鏈半乳聚糖和核苷酸。這些物質(zhì)的正常量是本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的，優(yōu)選地是約最多 0. 1-10克/天、優(yōu)選地1-5克/天、或2-3克/天，取決于是哪種生物前物質(zhì)。本發(fā)明的乳制品可以按關(guān)于這些產(chǎn)品已知的方式來生產(chǎn)(即從牛、山羊或其它奶 場動物獲得奶、對這些奶實施常規(guī)處理以獲得奶或其它含乳飲料諸如酸乳飲料、巧克力奶 等)。通常，這些產(chǎn)品可以包含或不包含諸如蛋白質(zhì)來源、脂質(zhì)來源、碳水化合物來源的成 分。所述產(chǎn)品可以是無糖產(chǎn)品或不是，卡路里含量優(yōu)選地是每IOOml產(chǎn)品0至500卡。這 一點(加以必要的變更)適用于本發(fā)明的水果制品。乳制品和水果制品，優(yōu)選地飲料或濃 縮物的一般組成是本領(lǐng)域中完全已知的。奶可以來自例如牛、水牛、山羊、綿羊或駱駝。這些產(chǎn)品或飲料還可以以乳品替代 物諸如大豆為基礎(chǔ)。
實施例實施例1對500L脫脂乳進行標(biāo)準(zhǔn)化以得到蛋白質(zhì)含量為例如35. 8%蛋白質(zhì)/非脂乳固體 的具有乳糖或乳清滲透物的液體乳。分別地，一邊混合一邊將6. 5kg來自ADM的Cardio Aid 植物固醇(含有> 56%總植物固醇；40-58% β-谷甾醇；0-5% β-二氫谷甾醇；20-30% 菜油甾醇；< 5%菜油甾烷醇；14-22%豆甾醇；< 3%菜籽甾醇；< 3%其它甾醇或stands) 加入包含棕櫚油的脂肪部分。如以下所述，通過脂肪注射將該脂肪/固醇混合物加入奶中。通過已知的技術(shù)將液體奶加熱至120°C，隨后持續(xù)加熱3分鐘。然后將熱的奶轉(zhuǎn) 移至降膜蒸發(fā)器的一效中并蒸發(fā)至固體含量約為24%。在二效的下流管下方，以恒定流量 加入固醇與脂肪的混合物，在80%所需的蒸發(fā)時間內(nèi)使其均勻分布。以同樣的方式引入包 含奶鞘脂的極性脂質(zhì)部分。在兩步勻漿器中攪勻奶與脂肪、固醇和鞘脂，使脂肪顆粒粒徑為 0. 36微米至0. 47微米(用犁刀頭LS13320測量)以得到具有降低膽固醇作用的濃縮奶。 根據(jù)蒸發(fā)物的穩(wěn)定性，加入磷酸鹽和/或檸檬酸鹽和/或碳酸鹽。將添加休眠培養(yǎng)物(例 如枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis))后的奶運輸300km的距離并且標(biāo)準(zhǔn)化為干物質(zhì)含 量為12. 5%的奶飲料。
實施例2在標(biāo)準(zhǔn)條件下通過發(fā)酵過程制備酸乳，其中涉及乳酸桿菌培養(yǎng)物的選擇。以2X106CFU/ml的濃度向該酸乳中加入Pichia pastoris的培養(yǎng)物。在15°C下保藏4周的 時期內(nèi)，酵母平板計數(shù)(CFU/ml)保持穩(wěn)定。實施例3菌種短短芽孢桿菌(Brevibacillus brevis)和短芽孢桿菌(Bacillus brevis) 在無維生素的特定氨基酸混合物的存在下將發(fā)芽。制備以橙子為基礎(chǔ)的果汁，其含有天 然存在的維生素并含有低濃度的氨基酸。在果汁中濃度低的氨基酸的例子是酪氨酸。 該果汁的PH為2. 5至4. 5。以5 X 106CFU/ml的濃度向該果汁中加入純短短芽孢桿菌 (Brevibacillus brevis)和短芽孢桿菌(Bacillus brevis)孢子，然后使用溫和巴氏殺菌 過程。超過50%的全部孢子在巴氏殺菌過程后存活。該飲料在5-50°C的不同溫度下保藏 1年后，通過味道和保存期限試驗顯示，該產(chǎn)品明顯未受影響。在一些保藏條件下，CFU/ml 約為5X105，該值通過計數(shù)平板計數(shù)乳瓊脂上的菌落形成單位來確定。實施例4由濃縮的橙汁粉制備以橙子為基礎(chǔ)的果汁，這是果汁生產(chǎn)商經(jīng)常從事的行為。對 果汁進行溫和巴氏殺菌并向該水果飲料中加入米曲霉(Aspergillus oryzae)孢子。以 106CFU/ml的濃度向果汁中加入純真菌孢子。該飲料在5、10和20°C等不同溫度和黑暗(意 味著包裝材料未讓任何光線透過)中保藏3個月后，味覺和保存期限試驗顯示該產(chǎn)品未受 影響。類似地，預(yù)期1和2年的黑暗保存期限試驗后，味覺和保存期限試驗將證明該產(chǎn)品不 受影響。實施例5用不同的滅菌法例如在75_85°C下間歇式巴氏滅菌10分鐘對無味的、pH約為 4的天然飲用酸乳進行巴氏殺菌。根據(jù)特征性的加熱和冷卻方案實施所述間歇式巴氏滅 菌。另一種滅菌方法是連續(xù)的，其中使用幾種方法，它們的時間范圍是2至30秒、溫度 范圍是110°C至65°C。之后，向該飲用酸乳中加入不同的孢子枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)、短小芽孢桿菌(Bacillus pumilus)和伸展芽孢桿菌(Bacillus flexus)，濃度 為10E7CFU/ml。所有這些孢子純度大于99%，通過相差顯微術(shù)測定。含不同孢子的飲料在 5-40°C的溫度下黑暗保藏約2年和2. 5年。平板計數(shù)乳瓊脂顯示酸乳中存在的孢子數(shù)略微 下降，味覺試驗未顯示任何顯著的差異。實施例6向商品名為 Coolbest Acai powerfruit、Appelsient je (sinaasappel met vruchtvlees mild)禾口 Appelsientje appel (troebel，mild)、pH 范圍是 3. 0 至 4. 5 的 3 種 不同水果飲料中加入枯草芽孢桿菌孢子，直到濃度達(dá)到4X 106CFU/ml，并在95°C進行1秒 鐘巴氏殺菌。將該飲料保藏在7°C和20°C，22個月后測定孢子存活率。菌落計數(shù)后顯示， 4X106CFU/ml的超過1 %在這些保藏條件下存活。實施例7由固相法(通過用水洗滌表面收獲孢子)和液體培養(yǎng)法(在液體培養(yǎng)基中生產(chǎn)孢 子)分離出無營養(yǎng)細(xì)胞、酶活性和來自生長培養(yǎng)基的殘留物的純細(xì)菌孢子。孢子的純度對 于實施例(例如實施例5)中所述的一些應(yīng)用是必需的。所生產(chǎn)的孢子制備物的純度應(yīng)該大于99%，在一些情況下，根據(jù)載體可以使用75-90%的純度，甚至可以使用純度為50-75% 的制備物，所述純度用相差顯微術(shù)測定。這些制備物用基于分離的方法進行制備，所述分離 以原始孢子培養(yǎng)基中存在的單一成分的密度(=質(zhì)量和體積)為基礎(chǔ)。一般情況下，孢子 應(yīng)該用蒸餾水洗滌至少4-10次，隨后，基于各類細(xì)胞的密度進行分離(例如用離心力技術(shù) 或過濾技術(shù))，以達(dá)到所需的孢子懸浮液的純度。實施例8通過已知的和標(biāo)準(zhǔn)化的生產(chǎn)程序pH約為6-7的低脂肪和高脂肪乳品制備濃縮 乳制品。通過步進式方法蒸發(fā)該乳(衍生)制品，在所述方法中，溫度經(jīng)過某些時間段從 130°C逐漸下降至75°C (或相反)，直到獲得希望的乳濃縮物。向該蒸發(fā)后的無糖乳制品 中加入糖(可以為0%)直到達(dá)到飽和濃度以產(chǎn)生具有長保存期限的甜味濃縮乳。該產(chǎn) 品具有極低的水活度，這使得孢子或休眠細(xì)胞處于它們生命周期的休眠期。對不同的甜 n^^iflLSft SIMSI # (Saccharomyces cerevisiae) >(Aspergillus oryzae) > 黑曲霉(Aspergillus niger)、醬油曲霉(Aspergillus soyae)、枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)、巨大芽孢桿菌(Bacillus megaterium)、短小芽孢桿菌(Bacillus pumilus)、 短芽孢桿菌(Bacillus brevis)和/或休眠細(xì)胞。在環(huán)境溫度下保藏后，顯示所有濃度的 CFU/ml至少16個月保持穩(wěn)定。實施例9以107CFU/g粉末的濃度混合布拉酵母菌(Saccharomyces boulardi)、釀酒酵 母(Saccharomyces cerevisiae)、米曲霉(Aspergillus oryzae)、黑曲霉(Aspergilus niger)、醬油曲霉(Aspergillus soyae)、枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)、蘇云金芽 孢桿菌(Bacillus thuringiensis)、地衣芽孢桿菌(B. Iicheniformis)、賭狀芽孢桿菌 (B. cereus)、巨大芽孢桿菌(B. megaterium)、多粘類芽孢桿菌(Paenibacillus polymyxa)、 短小芽孢桿菌(B. pumilus)、B. polyfermenticus、克勞氏芽孢桿菌(B. cluasii)、側(cè)孢 短芽 包桿菌(B· lactosporus)、{ J 包短芽 包桿菌(Brevobacillus lactosporus)、生 包 乳桿菌(Lactobacillus sporogenes)、凝結(jié)芽孢桿菌(B. coagulans)、多粘芽孢桿菌 (B. polymyxa)、側(cè)芽雙歧桿菌(B. Iaterosporus)的孢子與具有乳雙糖、Vivinal GOS和不 同的蛋白質(zhì)制備物例如名為Demina190和Hiprotal 90的那些的不同品牌的產(chǎn)品。在1年 的時間內(nèi)，每4個月測量計數(shù)(CFU/g)，這些保藏在20°C的產(chǎn)品的菌落形成單位保持恒定 (都大于 106CFU/g)。
權(quán)利要求
1.一種長保質(zhì)期食品，其包含處于休眠狀態(tài)的益生菌微生物。
2.如權(quán)利要求1所述的長保質(zhì)期食品，其特征在于，所述益生菌微生物選自能形成孢 子的真菌、酵母和細(xì)菌。
3.如權(quán)利要求1所述的長保質(zhì)期食品，其包含休眠的真菌、酵母或細(xì)菌細(xì)胞。
4.如以上權(quán)利要求中任一項所述的長保質(zhì)期食品，所述食品選自乳制品尤其是含乳飲 料、果汁、它們的液態(tài)或粉末形式的濃縮物、它們的液態(tài)或粉末形式的脫水物、它們的液態(tài) 或粉末形式的發(fā)酵產(chǎn)物、和上述產(chǎn)品的混合物。
5.如以上權(quán)利要求中任一項所述的長保質(zhì)期食品，其特征在于，所述休眠狀態(tài)的 微生物選自梭菌屬(Clostridia)和/或芽孢桿菌屬(Bacillus)，優(yōu)選枯草芽孢桿菌 (B. subtilis)、納豆枯草芽孢桿菌(B. subtilis(natto))、短小芽孢桿菌(B. pumilus)、地 衣芽孢桿菌(B. Iicheniformis)禾口凝結(jié)芽孢桿菌(B. coagulans)。
6.如權(quán)利要求1-4中任意一項所述的長保質(zhì)期食品，其特征在于，所述休眠狀態(tài)的微 生物選自米曲霉(Apergillus oryzae)、醬油曲霉(Aspergillus soyae)、漢森氏酵母菌 屬(Hansenula spp.)、球擬酵母屬(Torulopsis spp)、念珠菌屬(Candida spp.)、酵母屬 (Saccharomyces spp. )、|昆孢屬(Clavispora spp.)、酒香酵母屬(Bretanomyces spp·)、畢M (Pichia spp.)、內(nèi)貞胃M (Endomycess spp.)、胃 會佳—胃M (Kluyveromyces spp.)、酒曲菌屬(Rhizopus spp.)、解脂耶氏酵母(Yarrowia lipolytica)、扣囊內(nèi)孢霉 (Endomyces fibuliger)、青霉屬(Penicillium spp.)、它們的混合物、和它們與梭菌屬和/ 或芽孢桿菌屬的亞種的混合物。
7.如以上權(quán)利要求中任一項所述的長保質(zhì)期食品，其包含益生菌孢子或休眠期的益 生菌，所述益生菌或孢子的細(xì)胞在離開休眠期或孢子期后能產(chǎn)生至少一種促進健康的成分 (諸如維生素K2、抗生素或長鏈多不飽和脂肪酸)。
8.如以上權(quán)利要求中任一項所述的長保質(zhì)期食品，其包含益生菌孢子和細(xì)胞，所述細(xì) 胞選自活細(xì)胞、無活力細(xì)胞、和它們的混合物。
9.如以上權(quán)利要求中任一項所述的長保質(zhì)期食品，其特征在于，所述產(chǎn)品具體地通過 HHST或UHT接受延長保質(zhì)期的巴氏殺菌處理。
10.如以上權(quán)利要求中任一項所述的長保質(zhì)期食品，所述食品的每日量包含 IO4-IOiciCFU (菌落形成單位)、優(yōu)選地105-101QCFU、更優(yōu)地106-109CFU、最優(yōu)地IO8-IO9CFU的 益生菌孢子。
11.如權(quán)利要求10所述的長保質(zhì)期食品，其特征在于，所述產(chǎn)品是包含105-108CFU/ml、 典型地 12，500-50, 000, 000CFU/ml、優(yōu)選地 105_106CFU/ml 的液體。
12.如以上權(quán)利要求中任一項所述的長保質(zhì)期食品，包含至少一種益生物質(zhì)，所述益 生物質(zhì)優(yōu)選地選自果糖_低聚糖、乳_低聚糖、果糖-乳-低聚糖、菊粉、含巖藻糖低聚糖、 β -葡聚糖、酸豆粉、樹膠、果膠、唾液酸寡糖、唾液乳糖、半乳聚糖和核苷酸。
13.如以上權(quán)利要求中任一項所述的長保質(zhì)期食品，其特征在于，益生菌微生物的滋養(yǎng) 生長所必需的一種或多種維生素受到限制。
14.如以上權(quán)利要求中任一項所述的長保質(zhì)期食品，其特征在于，益生菌的滋養(yǎng)生長所 必需的一種或多種礦物質(zhì)受到限制。
15.如以上權(quán)利要求中任一項所述的長保質(zhì)期食品，其特征在于，益生菌的滋養(yǎng)生長所必需的一種或多種氨基酸受到限制。
16.如以上權(quán)利要求中任一項所述的長保質(zhì)期食品，其特征在于，益生菌的滋養(yǎng)生長所 必需的一種或多種碳水化合物受到限制。
17.如以上權(quán)利要求中任一項所述的長保質(zhì)期食品，其特征在于，益生菌的滋養(yǎng)生長所 必需的光受到限制。
18.如以上權(quán)利要求中任一項所述的長保質(zhì)期食品，其特征在于，存在限制益生菌的滋 養(yǎng)生長的防腐劑。
19.如以上權(quán)利要求中任一項所述的長保質(zhì)期食品，其特征在于，所述pH限制益生菌 的滋養(yǎng)生長。
20.如以上權(quán)利要求中任一項所述的長保質(zhì)期食品，其特征在于，所述溫度限制益生菌 的滋養(yǎng)生長。
21.如以上權(quán)利要求中任一項所述的長保質(zhì)期食品，其特征在于，如權(quán)利要求13-20中 所述的任意條件的任意類型的組合限制益生菌的生長。
22.選自細(xì)菌孢子、酵母菌孢子、真菌孢子的益生菌孢子和/或休眠的細(xì)菌、真菌和/或 酵母細(xì)胞、和/或它們的混合物作為長保質(zhì)期食品中的益生元的應(yīng)用。
23.如權(quán)利要求22所述的應(yīng)用，用于保持長保質(zhì)期食品的保存期的同時使所述食品成 為益生菌食品。
全文摘要
本發(fā)明公開為消費者提供益生菌活性的延長保質(zhì)期(即可以非冷藏保藏較長的時間)的食品諸如乳制品或水果制品。所述提供益生菌活性是通過包含益生菌細(xì)菌的孢子來實現(xiàn)的。所述產(chǎn)品具體地選自乳制品(像含乳飲料、乳源食品和乳制品配料)、水果飲料、或它們的濃縮物。
文檔編號A23L1/30GK102006787SQ200980114491
公開日2011年4月6日 申請日期2009年3月18日 優(yōu)先權(quán)日2008年3月18日
發(fā)明者別瑟伯克 R·特, 弗里斯 Y·P·德 申請人:菲仕蘭品牌有限公司