專利名稱：在酸性條件下穩(wěn)定的蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物組合物的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及在酸性PH水平穩(wěn)定的蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物組合物，在酸性pH水平穩(wěn)定的蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物組合物的制備方法，以及包含在酸性PH水平穩(wěn)定的蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物組合物的食物產(chǎn)品。
背景技術：
在美國和世界范圍內(nèi)，肥胖癥及肥胖癥相關疾病的發(fā)病率處于上升狀態(tài)。雖然肥胖癥并非由單獨某個潛在因素誘發(fā)，一種致病因素可能是許多人的快節(jié)奏的、匆忙的生活方式以及同時增加的快速食品消費。大多數(shù)快速食品趨于為高脂肪和/或高糖的。因此， 需要一種能夠在忙碌時食用或飲用的有營養(yǎng)的方便的食物產(chǎn)品。該食物產(chǎn)品應該不但美味而且營養(yǎng)合理；即，該食物應為低脂肪、高蛋白、高維生素和高抗氧化劑。雖然大豆是一種優(yōu)異的蛋白來源，但是其趨于具有“青草味”或“豆腥味”，一些人討厭這種味道或者認為其不可口。因此需要一種減少了 “大豆”風味和苦味或收斂性的大豆分離蛋白產(chǎn)品。此外，如果所期望的食物產(chǎn)品是液體飲料，則理想條件下將被加到液體飲料中的分離蛋白產(chǎn)品應比原料更加清澈透明，即，分離蛋白產(chǎn)品應具有高溶解度。此外，大豆分離蛋白產(chǎn)品在所需液體飲料的PH條件下應該是穩(wěn)定的。發(fā)明_既述本發(fā)明的一個方面提供蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物組合物。所述蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物組合物包含具有小于約10，000道爾頓的的平均分子量的低聚肽混合物。此外所述蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物組合物具有至少約2. 5 %，一般至少約5. 0 %，優(yōu)選至少約7. 5 %，最優(yōu)選至少約10 %的水解度，以及在PH值小于約7. 0時至少約60%的固體可溶性指數(shù)。本發(fā)明的另一方面涵蓋用于制備蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物組合物的方法，該方法包括使蛋白材料與至少一種肽鏈內(nèi)切酶接觸，該肽鏈內(nèi)切酶裂解蛋白材料的肽鍵以形成具有小于約 10，000道爾頓的平均分子量的低聚肽混合物，其中所述低聚肽混合物包含蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物組合物。該方法還包括將蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物組合物的PH值降低到小于約PH 7.0，其中所述蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物組合物具有至少約60%的固體可溶性指數(shù)以及至少約2. 5%，一般至少約 5. 0%，優(yōu)選至少約7. 5 %，最優(yōu)選至少約10%的水解度。本發(fā)明的另一方面提供包含蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物的食物或飲料產(chǎn)品。所述蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物組合物包含具有小于約10，000道爾頓的平均分子量的低聚肽混合物，并且所述組合物具有至少約2. 5 %，一般至少約5. 0%，優(yōu)選至少約7. 5 %，最優(yōu)選至少約10%的水解度， 以及在小于約7. 0的pH下至少約60%的固體可溶性指數(shù)。本發(fā)明的其他方面將在下文中部分顯現(xiàn)和部分指出。附圖描述

圖1是可溶性固體百分比對應于用絲氨酸蛋白酶1(SP1，圓圈表示)或 ALCALASE (ALC，方塊表示)消化生成的水解產(chǎn)物的水解度(％ )函數(shù)曲線圖。圖2顯示不同水解產(chǎn)物的可溶性固體對應于pH的函數(shù)。該圖顯示5% ALC水解產(chǎn)物(菱形表示)、10% ALC水解產(chǎn)物(方塊表示)和5% ALC水解產(chǎn)物(三角形表示)的可溶性固體百分比對應于PH的函數(shù)。圖3示出了 SPi或ALCALASE (ALC)水解產(chǎn)物的不同感官特性的診斷評分。 圖A示出指示的水解產(chǎn)物與對照物(即，SPl樣本)的差異，所述水解產(chǎn)物以在中性pH條件下的2. 5%固體漿液形式提供給評估員。圖B示出指示的水解產(chǎn)物與對照物(即，HXP212) 的差異，所述水解產(chǎn)物以2. 5%漿液形式提供給評估員。圖C示出指示的水解產(chǎn)物與對照物(即，HXP212)的差異，所述水解產(chǎn)物以pH 3. 0、1. 6%蛋白的橙運動飲料形式提供給評估員。圖D示出指示的水解產(chǎn)物與對照物(S卩，HXP212)的差異，所述水解產(chǎn)物以pH 3.8、 1. 6%蛋白的橙運動飲料形式提供給評估員。圖4示出SPI (淺灰色柱)和ALCALASE (ALC)(暗灰色柱)水解產(chǎn)物中的肽片段的分子量分布。發(fā)明詳述已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，用某些肽鏈內(nèi)切酶裂解蛋白材料可產(chǎn)生包含低聚肽混合物的蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物組合物，其中所述低聚肽在酸性PH水平是可溶的。這些蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物組合物相對于蛋白質(zhì)原料還具有改善的風味特性和感官特性。具有這些特性的蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物組合物在酸性PH水平是穩(wěn)定的，并可用作即飲型飲料和其他食物產(chǎn)品的補充劑。I.制備蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物組合物的方法本發(fā)明的一個方面提供了制備包含具有小于約10，000道爾頓的平均分子量的低聚肽混合物的蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物組合物的方法，其中所述組合物具有至少2. 5%，一般至少約 5.0%,優(yōu)選至少約7.5%，最優(yōu)選至少約10 %的水解度，以及在小于約7. OpH下至少60 %的固體可溶性指數(shù)。所述方法包括使蛋白材料與至少一種肽鏈內(nèi)切酶接觸，其中所述蛋白材料經(jīng)水解以形成低聚肽混合物。所述方法還包括將水解產(chǎn)物的PH降低到小于約pH7. 0。a.水解裂解所述方法的第一步包括將蛋白材料裂解成較小分子量的低聚肽片段的混合物。一般來講，蛋白材料與至少一種肽鏈內(nèi)切酶接觸以形成低聚肽的混合物。蛋白材料和適用肽鏈內(nèi)切酶的合適實例在下文中詳述。 .蛋白材料在一些實施方案中，蛋白材料可為大豆蛋白材料?？稍诒景l(fā)明方法中使用多種大豆蛋白以生成大豆蛋白水解產(chǎn)物。一般來講，大豆蛋白材料可根據(jù)本領域已知的方法源自于全大豆。全大豆可為標準大豆(即，非轉(zhuǎn)基因大豆)、轉(zhuǎn)基因大豆(如具有經(jīng)修飾的脂肪的大豆、具有經(jīng)修飾的碳水化合物的大豆、具有經(jīng)修飾的蛋白亞基的大豆，等等)、以及它們的組合。大豆蛋白材料的合適實例包括大豆提取物、豆奶、豆奶粉、豆腐、大豆粉、大豆分離蛋白、大豆?jié)饪s蛋白、以及它們的混合物。在一個替代實施方案中，該方法中使用的大豆蛋白材料可為大豆分離蛋白(也稱為分離大豆蛋白或ISP)。一般來講，大豆分離蛋白基于無水基具有至少約90%大豆蛋白的蛋白含量。大豆分離蛋白可包括完整的大豆蛋白或部分水解的大豆蛋白。大豆分離蛋白可具有高含量的貯藏蛋白亞基如7S、11S、2S等?？捎米鞅景l(fā)明原料的大豆分離蛋白的非限制性實例可商購獲得，例如從Solae，LLC (St. Louis, MO)商購獲得，并且它們中包括 SUPRO 500E, SUPRO 620, SUPRO 670, SUPRO EX 33, SUPRO PLUS 2600FIP、SUPRO PLUS 2640DS、SUPRO PLUS 2800、SUPRO PLUS 3000、以及它們的組合。在另一個實施方案中，大豆蛋白材料可為大豆?jié)饪s蛋白，其具有按無水基計約65%至小于約90%的蛋白質(zhì)含量。可用于本發(fā)明中的適宜大豆?jié)饪s蛋白的實例包括 PROCON 產(chǎn)品系列、ALPHA 12和ALPHA 5800，所有這些產(chǎn)品可從klae，LLC商購獲得。作為另外一種選擇，大豆?jié)饪s蛋白可與大豆分離蛋白共混以作為大豆蛋白材料的來源取代部分大豆分離蛋白。通常，如果用大豆?jié)饪s蛋白替代一部分大豆分離蛋白，則大豆?jié)饪s蛋白最多可替代按重量計最多約40%的大豆分離蛋白，并且更優(yōu)選可替代按重量計最多約30%的大豆分離蛋白。在另一個實施方案中，所述大豆蛋白質(zhì)材料可為大豆粉，它具有按無水基計約 49%至約65%的蛋白質(zhì)含量。大豆粉可為脫脂大豆粉、部分脫脂大豆粉、或全脂大豆粉。大豆粉可以與大豆分離蛋白或大豆?jié)饪s蛋白共混。在另一個實施方案中，大豆蛋白材料可為基于離心機中的沉淀已被分成四種主要貯藏蛋白片段或亞基(15S、11S、7S和2 的材料。一般來講，IlS片段高度富集了大豆球蛋白，而7S片段高度富集了 β-大豆伴球蛋白。在其他實施方案中，蛋白材料可來源于非大豆的植物。作為非限制性實例，合適的植物包括莧屬植物、竹芋、大麥、蕎麥、低芥酸菜籽、木薯、桃豆(鷹嘴豆)、豆類、兵豆、羽扇豆、玉米、小米、燕麥、豌豆、馬鈴薯、大米、裸麥、高粱、向日葵、木薯、黑小麥、小麥、以及它們的混合物。尤其優(yōu)選植物蛋白包括大麥、低芥酸菜籽、羽扇豆、玉米、燕麥、豌豆、馬鈴薯、 大米、小麥、以及它們的組合。在一個實施方案中，植物蛋白材料可為低芥酸菜籽粗粉、低芥酸菜籽分離蛋白、低芥酸菜籽濃縮蛋白、以及它們的組合。在另一個實施方案中，植物蛋白材料可為玉米或谷物蛋白粉、玉米或谷物濃縮蛋白、玉米或谷物分離蛋白、玉米或谷物胚芽、玉米或谷物谷蛋白、玉米或谷物谷蛋白粗粉、玉米或谷物面粉、玉米蛋白、以及它們的組合。在另一個實施方案中，植物蛋白材料可為大麥粉、大麥濃縮蛋白、大麥分離蛋白、大麥粗粉、大麥面粉、以及它們的組合。在另一個實施方案中，植物蛋白材料可為羽扇豆粉、羽扇豆分離蛋白、羽扇豆?jié)饪s蛋白、以及它們的組合。在另一個實施方案中，植物蛋白材料可為燕麥片、燕麥粉、燕麥蛋白粉、燕麥分離蛋白、燕麥濃縮蛋白、以及它們的組合。在另一個實施方案中，植物蛋白材料可為豌豆粉、豌豆分離蛋白、豌豆?jié)饪s蛋白、以及它們的組合。在另一個實施方案中，植物蛋白材料可為馬鈴薯蛋白粉、馬鈴薯分離蛋白、馬鈴薯濃縮蛋白、馬鈴薯粉、以及它們的組合。在另一個實施方案中，植物蛋白材料可為米粉、大米粗粉、大米蛋白粉、大米分離蛋白、大米濃縮蛋白、以及它們的組合。在另一個實施方案中，植物蛋白材料可為小麥蛋白粉、小麥谷朊粉、麥芽精、面粉、小麥分離蛋白、小麥濃縮蛋白、可溶性小麥蛋白、 以及它們的組合。在另一個實施方案中，蛋白材料可來源于動物。在一個實施方案中，動物蛋白材料可來源于蛋類。合適的蛋類蛋白的非限制性實例包括蛋粉、干燥蛋固體、干燥蛋清蛋白、液體蛋清蛋白、蛋清蛋白粉、分離卵清蛋白、以及它們的組合。蛋類蛋白可來源于雞蛋、鴨蛋、 鵝蛋、鵪鶉蛋、或其他鳥類的蛋。在另一個實施方案中，蛋白材料可來源于乳品。合適的乳蛋白包括脫脂奶粉、分離乳蛋白、濃縮乳蛋白、酸酪蛋白、酪蛋白酸鹽(例如酪蛋白酸鈉、酪蛋白酸鈣等)、乳清分離蛋白、乳清濃縮蛋白、以及它們的組合。乳蛋白材料可以來源于母牛、山羊、綿羊、驢子、駱駝、羊駝、牦牛、水牛等。在另一個實施方案中，蛋白可來源于陸棲動物或水棲動物的肌肉、器官、結(jié)締組織、或骨骼。例如動物蛋白可為明膠，它通過部分水解膠原制備，膠原提取自?；蚱渌麆游锏墓恰⒔Y(jié)締組織、器官等等。在本發(fā)明的方法中也設想到使用大豆蛋白材料和至少一種其他蛋白材料的組合。 即，可由大豆蛋白材料和至少一種其他蛋白材料的組合來制備蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物組合物。在一個實施方案中，蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物組合物可由大豆蛋白材料和至少一種其他蛋白材料的組合制備，其他蛋白材料選自植物蛋白材料、動物蛋白質(zhì)材料、乳品蛋白材料、卵蛋白材料、以及它們的組合。植物蛋白材料可包括大麥、低芥酸菜籽、羽扇豆、玉米、燕麥、豌豆、馬鈴薯、 大米、小麥、任何本領域已知的其他植物蛋白、以及它們的組合。組合使用的大豆蛋白材料和至少一種其他蛋白材料的濃度可能并且將會不同。組合中使用的大豆蛋白材料的量可以在約至約99%總蛋白的范圍內(nèi)。在一個實施方案中，組合中使用的大豆蛋白材料的量可以在約至約20%總蛋白的范圍內(nèi)。在另一個實施方案中，組合中使用的大豆蛋白材料的量可以在約20%至約40%總蛋白的范圍內(nèi)。在另一個實施方案中，組合中使用的大豆蛋白材料的量可以在約40%至約80%總蛋白的范圍內(nèi)。在另一個實施方案中，組合中使用的大豆蛋白材料的量可以在約80%至約99%總蛋白的范圍內(nèi)。同樣地，組合中使用的至少一種其他蛋白材料的量可以在約至約99%總蛋白的范圍內(nèi)。在一個實施方案中，組合中使用的至少一種其他蛋白材料的量可以在約1 %至約20%總蛋白的范圍內(nèi)。在另一個實施方案中，組合中使用的至少一種其他蛋白材料的量可以在約20%至約40%總蛋白的范圍內(nèi)。在另一個實施方案中，組合中使用的至少一種其他蛋白材料的量可以在約40%至約80%總蛋白的范圍內(nèi)。在另一個實施方案中，組合中使用的至少一種其他蛋白材料的量可以在約80%至約99%總蛋白的范圍內(nèi)。在本發(fā)明的方法中，通常將蛋白材料混合或分散在水中以形成按重量計包括約至約20%蛋白(基于“按原樣”)的漿液。在一個實施方案中，所述漿液可包括按重量計
約至約5%的蛋白(按原樣)。在另一個實施方案中，所述漿液可包括按重量計約6% 至約10%的蛋白(按原樣)。在另一個實施方案中，所述漿液可包括按重量計約11%至約 15%的蛋白(按原樣)。在另一個實施方案中，所述漿液可包括按重量計約16%至約20% 的蛋白(按原樣)。在將蛋白材料分散到水中后，可將蛋白材料的漿液加熱到約70°C至約90°C約2分鐘至約20分鐘以失活推定的內(nèi)源蛋白酶抑制劑。通常，對蛋白漿液的pH和溫度進行調(diào)節(jié)以優(yōu)化水解反應，特別是確保水解反應中使用的肽鏈內(nèi)切酶的功能接近其最佳活性水平。蛋白漿液的PH可根據(jù)本領域一般已知的方法進行調(diào)節(jié)及監(jiān)控?？蓪⒌鞍诐{液的pH值調(diào)節(jié)至并保持在約PH 7.0至約pH 11.0。在一個實施方案中，可將蛋白漿液的pH調(diào)節(jié)至并保持在約pH 7.0至約pH 8.0。在另一個實施方案中，可將蛋白漿液的pH調(diào)節(jié)至并保持在約pH 8.0至約pH 9.0。在另一個實施方案中，可將蛋白漿液的pH調(diào)節(jié)至并保持在約pH 9. 0至約pH 10.0。在一個優(yōu)選的實施方案中，可將蛋白漿液的pH調(diào)節(jié)至并保持在約pH 8.0至約 pH 8. 5。根據(jù)本領域已知的方法，在水解反應期間可將蛋白漿液的溫度優(yōu)選地調(diào)節(jié)至并保持在約30°C，優(yōu)選至少約50°C至約80°C。一般來講，高于這一范圍的溫度可滅活肽鏈內(nèi)切酶。低于這一范圍的溫度趨于降低肽鏈內(nèi)切酶的活性。在一個實施方案中，在水解反應期間可將蛋白漿液的溫度調(diào)節(jié)至并保持在約50°C至約60°C。在另一個實施方案中，在水解反應期間可將蛋白漿液的溫度調(diào)節(jié)至并保持在約60°C至約70°C。在另一個實施方案中，在水解反應期間可將蛋白漿液的溫度調(diào)節(jié)至并保持在約70°C至約80°C。ii.肽鏈內(nèi)切酶水解反應一般由將肽鏈內(nèi)切酶加入到蛋白材料漿液中以形成反應混合物而引發(fā)。 肽鏈內(nèi)切酶催化蛋白材料蛋白內(nèi)的肽鍵裂解以形成較小分子量的低聚肽的混合物。肽鏈內(nèi)切酶是一般裂解多肽鏈內(nèi)部肽鍵的酶。幾種肽鏈內(nèi)切酶在本發(fā)明的方法中適用。一般來講，肽鏈內(nèi)切酶將具有廣譜活性 (即，將水解基本上任意兩個氨基酸殘基的肽鍵)。肽鏈內(nèi)切酶通常可為食品級酶，在約7. 0 至約11. 0的pH和約30°C，優(yōu)選至少約50°C至約80°C具有最佳活性。肽鏈內(nèi)切酶優(yōu)選地將為微生物來源的酶。使用微生物酶而不是動物或植物酶是有利的，因為微生物酶表現(xiàn)出廣譜特性(最適PH，溫度等)并且可以相當大的量持續(xù)獲取。一般來講，肽鏈內(nèi)切酶將為絲氨酸肽酶家族的一員(參見 MEROPS Peptidase Database, release 8. OOA ；http//merops. Sanger, ac. uk)。在一個實施方案中，肽鏈內(nèi)切酶可為枯草桿菌蛋白酶或其變體，它來源于地衣芽孢桿菌(Bacillus lichniformis) (MER0PS登錄號MER000309)，可以商品名ALCALASE
購自Novozymes (Bagsvaerd，Denmark)。在另一個實施方案中，肽鏈內(nèi)切酶可為枯草桿菌蛋白酶或其變體，它來源于另一種微生物。在一個優(yōu)選的實施方案中，肽鏈內(nèi)切酶可為絲氨酸蛋白酶(SPl)，它來源于蔥綠擬諾卡氏菌(Nocardiopsisprasina)(國際專利申請 W002005035747，該專利申請全文以引用方式并入本文)。SPl的氨基酸序列為ADIIGGLAYT MGGRCSVGFAATNAAGQPGF VTAGHCGRVG TQVTIGNGRG VFEQSVFPGNDAAFVRGTSN FTLTNLVSRY NTGGYATVAG HNQAPIGSSVCRSGSTTGWH CGTIQARGQS VSYPEGTVTN MTRTTVCAEP⑶SGGSYISG TQAQGVTSGG SGNCRTGGTT FYQEVTPMVNSffGVRLRT(SEQ ID NO :1)。在另一個實施方案中，肽鏈內(nèi)切酶可為絲氨酸蛋白酶，該酶的氨基酸序列與SEQ ID NO :1或其片段具有至少80%，81%，82%，83%，84%，或85%的同一性。在另一個實施方案中，肽鏈內(nèi)切酶可為絲氨酸蛋白酶，該酶的氨基酸序列與SEQ ID NO :1或其片段具有至少86%，87%，88%，89%，90%，91%，或92%的同一性。在另一個實施方案中，肽鏈內(nèi)切酶可為絲氨酸蛋白酶，該酶的氨基酸序列與SEQ ID NO :1或其片段具有至少93%，94%， 95%，96%，97%，98%或 99% 的同一性。對于本發(fā)明而言，可使用Needle程序測定兩個氨基酸序列的比對結(jié)果，該程序來自 EMBOSS 軟件包(Rice，P.，Longden, I.和 Bleasby，Α. (2000)EMBOSS :The European Molecular Biology Open Software Suite. Trends in Genetics 16, (6)第 276-277 頁；http: //emboss, org) 2. 8. 0版。Needle程序執(zhí)行全序列比對算法，該算法描述于 Needleman, S. B.和 Wunsch，C. D. (1970) J. Mol. Biol. 48，443-453。使用的取代矩陣為 BL0SUM62，空位開放罰分為10，空位延伸罰分為0.5。一般來講，通過在比較窗口上比較兩個最佳比對序列來測定序列同一性百分比，其中比較窗口中的氨基酸序列部分與參比序列 (不包括添加或刪除)相比可包括添加或刪除(即間隙)以達到最佳的兩序列比對效果。百分比通過以下方法進行計算測定兩序列中具有相同氨基酸以產(chǎn)生匹配位置的位置數(shù)目， 將該匹配位置的數(shù)目除以比較窗口兩序列中最短序列的位置總數(shù)，并且所得結(jié)果乘以100 來獲得序列同一性的百分比。
技術人員將理解一個氨基酸殘基可被另一個具有相似側(cè)鏈、不影響多肽功能的氨基酸殘基取代。例如，具有脂族側(cè)鏈的一組氨基酸為甘氨酸、丙氨酸、纈氨酸、亮氨酸和異亮氨酸；具有脂族-羥基側(cè)鏈的一組氨基酸為絲氨酸和蘇氨酸；具有含酰胺側(cè)鏈的一組氨基酸為天冬酰胺和谷氨酰胺；具有芳族側(cè)鏈的一組氨基酸為苯基丙氨酸、酪氨酸和色氨酸； 具有堿性側(cè)鏈的一組氨基酸為賴氨酸、精氨酸和組氨酸；具有含硫側(cè)鏈的一組氨基酸為半胱氨酸和甲硫氨酸。優(yōu)選的保守氨基酸取代基包括纈氨酸-亮氨酸-異亮氨酸、苯基丙氨酸-酪氨酸、賴氨酸-精氨酸、丙氨酸-纈氨酸和天冬酰胺-谷氨酰胺。因此肽鏈內(nèi)切酶可具有至少一個針對SEQ ID NO :1的保守氨基酸取代。在一個實施方案中，肽鏈內(nèi)切酶可具有約45個針對SEQ ID NO :1的保守氨基酸取代。在另一個實施方案中，肽鏈內(nèi)切酶可具有約35個針對SEQ ID NO 1的保守氨基酸取代。在另一個實施方案中，肽鏈內(nèi)切酶可具有約 25個針對SEQ ID NO 1的保守氨基酸取代。在另一個實施方案中，肽鏈內(nèi)切酶可具有約15 個針對SEQ ID NO 1的保守氨基酸取代。在另一個實施方案中，肽鏈內(nèi)切酶可具有約10個針對SEQ IDNO 1的保守氨基酸取代。在另一個實施方案中，肽鏈內(nèi)切酶可具有約5個針對 SEQ ID NO 1的保守氨基酸取代。在另一個實施方案中，肽鏈內(nèi)切酶可具有約一個針對SEQ ID NO 1的保守氨基酸取代。還可預想在本發(fā)明的方法中利用肽鏈內(nèi)切酶的組合。例如蛋白材料可以與 ALCALASE 和SPl的混合物接觸。作為另外一種選擇，蛋白材料可以與SPl和肽鏈內(nèi)切酶的混合物接觸，所述肽鏈內(nèi)切酶與SEQ ID No :1具有至少80%的同一性。同樣地，廣譜絲氨酸蛋白酶的其他組合可在不脫離本發(fā)明范圍的情況下使用。示例性的蛋白材料和肽鏈內(nèi)切酶的組合在表A中給出。表A 優(yōu)選的組合。
權利要求
1.包含低聚肽混合物的蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物組合物，所述低聚肽具有小于約10，000道爾頓的平均分子量，其中所述組合物具有至少約2. 5%的水解度和在小于約7. 0的PH下至少約60%的固體可溶性指數(shù)。
2.權利要求1的蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物組合物，其中所述pH小于約5.0。
3.權利要求1的蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物組合物，其中所述固體可溶性指數(shù)為約70%至約 90%。
4.權利要求1的蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物組合物，其中所述水解度為約10%至約35%。
5.權利要求1的蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物組合物，其中所述蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物組合物來源于選自大豆、植物、動物、蛋類、以及它們的組合的蛋白。
6.權利要求1的蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物組合物，其中所述蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物組合物來源于大豆與至少一種蛋白的組合，所述蛋白選自植物、動物、乳品和蛋類。
7.權利要求1的蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物組合物，其中所述蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物組合物來源于大豆。
8.權利要求7的蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物組合物，其中所述固體可溶性指數(shù)為約70%至約 90%，并且所述水解度為約10%至約35%。
9.權利要求8的蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物組合物，其中所述pH小于約pH5.0。
10.權利要求6的蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物組合物，其中所述組合物包含選自SEQID NO :2-38 的至少2個多肽片段或SEQ ID NO 2-38的至少1個多肽片段以及SEQ ID NO 39-45的至少1個多肽片段的多肽片段。
11.權利要求7的蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物組合物，其中所述組合物包含選自SEQID NO :2-38 的至少2個多肽片段或SEQ ID NO 2-38的至少1個多肽片段以及SEQ ID NO :39-45的至少1個多肽片段的多肽片段。
12.用于制備蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物組合物的方法，所述方法包括a.使蛋白材料與至少一種肽鏈內(nèi)切酶接觸，所述肽鏈內(nèi)切酶裂解所述蛋白材料的肽鍵以形成具有小于約10，000道爾頓的平均分子量的低聚肽混合物，所述低聚肽混合物包含所述蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物組合物；以及b.將所述蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物組合物的pH值降低到小于約pH7.0，其中所述蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物組合物具有至少約60%的固體可溶性指數(shù)和至少約2. 5%的水解度。
13.權利要求12的方法，其中所述肽鏈內(nèi)切酶是微生物起源的食品級蛋白酶。
14.權利要求13的方法，其中所述肽鏈內(nèi)切酶選自來自蔥綠擬諾卡氏菌 (Nocardiopsis prasina)的絲氨酸蛋白酶(SPl)、來自地衣芽孢桿菌(Bacillus licheniformis)的枯草桿菌蛋白酶、以及它們的組合。
15.權利要求14的方法，其中所述肽鏈內(nèi)切酶是SP1。
16.權利要求12的方法，其中所述肽鏈內(nèi)切酶包含與SEQID NO :1具有至少80%同一性的氨基酸序列。
17.權利要求16的方法，其中所述肽鏈內(nèi)切酶包含與SEQID NO :1具有至少90%同一性的氨基酸序列。
18.權利要求17的方法，其中所述肽鏈內(nèi)切酶包含與SEQID NO :1具有至少95%同一性的氨基酸序列。
19.權利要求18的方法，其中所述肽鏈內(nèi)切酶包含與SEQID NO :1具有至少99%同一性的氨基酸序列。
20.權利要求12的方法，其中所述肽鏈內(nèi)切酶在約7.0至約11. 0的pH和約50°C至約 80。C的溫度下具有最佳的蛋白分解活性。
21.權利要求20的方法，其中所述肽鏈內(nèi)切酶在約8.0至約9. 0的pH和約60°C至約 70。C的溫度下具有最佳的蛋白分解活性。
22.權利要求12的方法，其中約20mg至約5000mg的所述肽鏈內(nèi)切酶與每千克蛋白材料組合使用。
23.權利要求12的方法，其中通過加入選自檸檬酸、甲酸、富馬酸、乳酸、鹽酸、蘋果酸、 磷酸、以及它們的組合的酸來降低所述蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物組合物的PH。
24.權利要求12的方法，其中所述蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物組合物的pH小于約pH5.0。
25.權利要求12的方法，其中所述蛋白材料選自大豆、大麥、低芥酸菜籽、羽扇豆、玉米、燕麥、豌豆、馬鈴薯、大米、小麥、動物、蛋類、以及它們的組合。
26.權利要求12的方法，其中所述蛋白材料是大豆和至少一種蛋白的組合，所述蛋白選自大麥、低芥酸菜籽、羽扇豆、玉米、燕麥、豌豆、馬鈴薯、大米、小麥、動物、乳品和蛋類。
27.權利要求12的方法，其中所述蛋白材料是大豆，并且所述肽鏈內(nèi)切酶是SP1。
28.權利要求27的方法，其中所述大豆蛋白材料選自大豆提取物、豆奶、豆奶粉、豆腐、 脫脂大豆粉、部分脫脂大豆粉、全脂大豆粉、大豆分離蛋白、大豆?jié)饪s蛋白、以及它們的組I=I ο
29.權利要求觀的方法，其中所述大豆蛋白水解產(chǎn)物組合物的固體可溶性指數(shù)為約 70%至約90%，并且所述大豆蛋白水解產(chǎn)物組合物的水解度為約10%至約35%。
30.權利要求四的方法，其中所述大豆蛋白水解產(chǎn)物組合物的pH小于約pH5.0。
31.權利要求沈的方法，其中所述蛋白水解產(chǎn)物組合物包含選自SEQIDNO :2-38的至少2個多肽片段或SEQ ID NO 2-38的至少1個多肽片段以及SEQ ID NO 39-45的至少1 個多肽片段的多肽片段。
32.權利要求27的方法，其中所述蛋白水解產(chǎn)物組合物包含選自SEQIDNO :2_38的至少2個多肽片段或SEQ ID NO 2-38的至少1個多肽片段以及SEQ ID NO 39-45的至少1 個多肽片段的多肽片段。
33.食物產(chǎn)品，所述食物產(chǎn)品包含a.可食用材料；和b.蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物組合物，所述組合物包含具有小于約10，000道爾頓的平均分子量的低聚肽的混合物，其中所述組合物具有至少約2. 5%的水解度和在小于約7. 0的pH下至少約60 %的固體可溶性指數(shù)。
34.權利要求33的食物產(chǎn)品，其中所述蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物組合物來源于選自大豆、大麥、 低芥酸菜籽、羽扇豆、玉米、燕麥、豌豆、馬鈴薯、大米、小麥、動物、蛋類、以及它們的組合的蛋白質(zhì)。
35.權利要求33的食物產(chǎn)品，其中所述蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物組合物來源于大豆和至少一種選自大麥、低芥酸菜籽、羽扇豆、玉米、燕麥、豌豆、馬鈴薯、大米、小麥、動物、乳品和蛋類的蛋白的組合。
36.權利要求33的食物產(chǎn)品，其中所述蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物組合物來源于大豆，并且所述水解度為約10%至約35%。
37.權利要求33的食物產(chǎn)品，其中所述食物產(chǎn)品是飲料。
38.權利要求37的食物產(chǎn)品，其中所述飲料是選自果汁飲料、果味飲料、碳酸飲料、運動飲料、營養(yǎng)補充飲料、體重控制飲料和醇基果汁飲料的基本上清澈的飲料。
39.權利要求37的食物產(chǎn)品，其中所述飲料是即飲型飲料。
40.權利要求37的食物產(chǎn)品，其中所述飲料具有小于約5.0的pH。
41.權利要求37的食物產(chǎn)品，其中所述飲料具有小于約pH4. 0的pH。
42.權利要求37的食物產(chǎn)品，其中所述飲料是選自代餐飲料、蛋白質(zhì)混合飲料、咖啡基飲料、營養(yǎng)補充飲料和體重控制飲料的基本上渾濁的飲料。
43.權利要求37的食物產(chǎn)品，其中所述可食用材料選自果汁、糖、乳、脫脂奶粉、酪蛋白酸鹽、大豆?jié)饪s蛋白、大豆分離蛋白、乳清濃縮蛋白、乳清分離蛋白、巧克力、可可粉、咖啡、 以及它們的組合。
44.權利要求37的食物產(chǎn)品，其中所述食物產(chǎn)品還包括選自下列的成分甜味劑、乳化齊U、增稠劑、穩(wěn)定劑、脂質(zhì)材料、防腐劑、抗氧化劑、調(diào)味劑、著色劑、維生素、礦物質(zhì)、以及它們的組合。
全文摘要
本發(fā)明提供蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物組合物、用于生產(chǎn)蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物組合物的方法、以及包括蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物組合物的食物產(chǎn)品。所述蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物組合物一般包含低聚肽的混合物，所述低聚肽具有小于約10,000道爾頓的平均分子量，其中至少約60％的低聚肽在pH小于約7.0的條件下是可溶的。
文檔編號A23J3/16GK102387710SQ200980123346
公開日2012年3月21日 申請日期2009年6月19日 優(yōu)先權日2008年6月20日
發(fā)明者G·B·林格萊夫, J·F·隆巴迪, 克里斯滕森 L·Lh, P·R·厄斯特加德, P·S·克爾, P·S·高希, T·M·王, T·霍夫 申請人:索萊有限責任公司, 諾沃茲美斯公司