專利名稱：通過反義寡核苷酸來調(diào)制Toll樣受體4表達的制作方法
通過反義寡核苷酸來調(diào)制Tol I樣受體4表達本申請要求2008年11月4日遞交的美國臨時專利申請序列號61/111，148的優(yōu)先權，茲明確將該申請的公開內(nèi)容以提述方式并入本文。
背景技術：
發(fā)明領域本發(fā)明涉及Toll樣受體4 (TLR4)。具體而言，本發(fā)明涉及與編碼TLR4的核酸特異性雜交，從而調(diào)制TLR4表達和活性的反義寡核苷酸及其在治療或預防與TLR4有關的或者可受益于調(diào)制TLR4表達的疾病中的用途。相關技術的概述Toll樣受體(TLR)存在于免疫系統(tǒng)的許多細胞上，而且已經(jīng)被證明涉及先天性免疫應答(Hornung, V.等，(2002) J. Immunol. 168 :4531-4537)。TLR 是哺乳動物識別外來分子并發(fā)動對外來分子的免疫應答的關鍵手段，而且還提供了聯(lián)系先天性和適應性免疫應答的(Akira,S^ (2001) Nature Immunol. 2 :675-680 ；Medzhitov, R. (2001) Nature Rev. Immunol. 1 :135-145)。在脊椎動物中，此家族由稱作TLRl至TLRll的至少11種蛋白質(zhì)組成，已知所述蛋白質(zhì)識別來自細菌、真菌、寄生物和病毒的病原體相關分子樣式(PAMP)，并誘導由許多轉錄因子介導的免疫應答。一些TLR位于細胞表面上以檢測胞外病原體并啟動對胞外病原體的應答，而其它 TLR位于細胞內(nèi)部以檢測胞內(nèi)病原體并啟動對胞內(nèi)病原體的應答。表1列出了 TLR、其已知的激動劑和已知含有TLR的細胞類型(Diebold，S. S.等(2004) Science 303 :1529-1531 ； Liew, F.等(2005)Nature 5 :446-458 ；Hemmi H 等(2002)Nat Immunol 3:196-200; Jurk M 等，O002)Nat Immunol3 499 ；Lee J 等(2003) Proc. Natl. Acad. ki. USA 100 6646-6651) ； (Alexopoulou, L. (2001) Nature 413:732-738)。表 權利要求
1.與TLR4mRNA(SEQID NO 282)互補的長度為20至50個核苷酸的合成的反義寡核苷酸，其中所述反義寡核苷酸具有包含SEQ ID NO :7、8、17、M、30、49、86、100、102、115、121、 126、136、146、184或256的序列，且其中所述寡核苷酸與人TLR4特異性雜交，并且抑制人 TLR4的表達。
2.一種組合物，包含依照權利要求1的合成反義寡核苷酸和生理學上可接受的載體。
3.一種用于抑制TLR4表達的方法，該方法包括施用依照權利要求1的合成反義寡核苷酸。
4.一種用于抑制TLR4表達的方法，該方法包括施用依照權利要求2的組合物。
5.一種用于抑制哺乳動物中TLR4表達的方法，該方法包括對所述哺乳動物施用依照權利要求1的合成反義寡核苷酸。
6.一種用于抑制哺乳動物中TLR4表達的方法，該方法包括對所述哺乳動物施用依照權利要求2的組合物。
7.一種用于抑制哺乳動物中TLR4介導的免疫應答的方法，該方法包括以藥學有效量對所述哺乳動物施用依照權利要求1的合成反義寡核苷酸。
8.一種用于抑制哺乳動物中TLR4介導的免疫應答的方法，該方法包括以藥學有效量對所述哺乳動物施用依照權利要求2的組合物。
9.一種用于治療性處理患有一種或多種由TLR4介導的疾病或病癥的哺乳動物的方法，該方法包括以藥學有效量對所述哺乳動物施用依照權利要求1的合成反義寡核苷酸。
10.一種用于治療性處理患有一種或多種由TLR4介導的疾病或病癥的哺乳動物的方法，該方法包括以藥學有效量對所述哺乳動物施用依照權利要求2的組合物。
11.一種用于在哺乳動物中預防一種或多種由TLR4介導的疾病或病癥的方法，該方法包括以預防有效量對所述哺乳動物施用依照權利要求1的合成反義寡核苷酸。
12.一種用于在哺乳動物中預防一種或多種由TLR4介導的疾病或病癥的方法，該方法包括以預防有效量對所述哺乳動物施用依照權利要求2的組合物。
13.依照權利要求5-12中任一項的方法，其中所述哺乳動物是人。
14.依照權利要求9-12中任一項的方法，其中所述一種或多種疾病或病癥選自下組 癌癥、自身免疫疾病或病癥、氣道炎癥、炎性疾病或病癥、感染性疾病、瘧疾、萊姆病、眼部感染、結膜炎、皮膚病癥、銀屑病、硬皮病、心血管疾病、動脈粥樣硬化、慢性疲乏綜合征、結節(jié)病、移植排斥、變態(tài)反應、哮喘和由病原體引起的疾病。
15.依照權利要求14的方法，其中所述自身免疫性病癥選自下組紅斑狼瘡、多發(fā)性硬化、I型糖尿病、腸易激綜合征、克羅恩氏病、類風濕性關節(jié)炎、感染性休克、普禿、急性播散性腦脊髓炎、阿狄森氏綜合征、強直性脊柱炎、抗磷脂抗體綜合征、自身免疫性溶血性貧血、自身免疫性肝炎、大皰性類天皰瘡、查加斯病、慢性阻塞性肺病、腹部疾病、皮肌炎、子宮內(nèi)膜異位癥、肺出血腎炎綜合征、格雷夫斯氏病、格-巴二氏綜合征、橋本氏病、化膿性汗腺炎、特發(fā)性血小板減少性紫癜、間質(zhì)性膀胱炎、硬斑病、重癥肌無力、發(fā)作性睡病、神經(jīng)性肌強直、天皰瘡、惡性貧血、多肌炎、原發(fā)性膽汁性肝硬化、精神分裂癥、斯耶格倫氏綜合征、顳動脈炎(“巨細胞動脈炎”)、血管炎、白癜風、外陰痛和韋格納氏肉芽腫病。
16.依照權利要求14的方法，其中所述炎性疾病或病癥選自下組氣道炎癥、哮喘、自身免疫性疾病或疾患、慢性炎癥、慢性前列腺炎、腎小球腎炎、貝切特氏病、超敏感性、炎性腸病、再灌注損傷、類風濕性關節(jié)炎、移植排斥、潰瘍性結腸炎、葡萄膜炎、結膜炎和血管炎。
17.依照權利要求3-12中任一項的方法，其中施用路徑選自下組胃腸外、肌肉內(nèi)、皮下、腹膜內(nèi)、靜脈內(nèi)、粘膜投遞、口服、舌下、經(jīng)皮、局部、吸入、鼻內(nèi)、氣霧劑、眼內(nèi)、氣管內(nèi)、直腸內(nèi)、陰道、基因槍、皮膚貼片、滴眼劑和漱口劑。
18.依照權利要求3-12中任一項的方法，包括進一步施用一種或多種疫苗、抗原、抗體、細胞毒劑、變應原、抗生素、反義寡核苷酸、TLR激動劑、TLR拮抗劑、siRNA、miRNA、適體、 蛋白質(zhì)、基因治療載體、DNA疫苗、佐劑、共刺激分子、激酶抑制劑或其組合。
19.一種抑制哺乳動物中TLR4表達和活性的方法，包括對所述哺乳動物施用與 TLR4mRNA互補的反義寡核苷酸和TLR4蛋白的拮抗劑。
20.依照權利要求19的方法，其中所述TLR4拮抗劑選自下組抗TLR4抗體或其結合片段或肽模擬物、基于RNA的化合物、基于寡核苷酸的化合物、和TLR4活性的小分子抑制劑。
全文摘要
提供了用于下調(diào)TLR4表達的反義寡核苷酸化合物、組合物和方法。所述組合物包含靶向編碼TLR4的核酸的反義寡核苷酸。所述組合物還可以包含與其它治療性和/或預防性化合物和/或組合物組合的靶向編碼TLR4的核酸的反義寡核苷酸。提供了使用這些化合物和組合物來下調(diào)TLR4表達以及預防或治療可受益于調(diào)制TLR4表達的疾病的方法。
文檔編號C12N5/00GK102271686SQ200980153640
公開日2011年12月7日 申請日期2009年11月4日 優(yōu)先權日2008年11月4日
發(fā)明者?？舶?坎迪馬拉, 拉克什米.巴加特, 王大慶, 薩德西爾.阿格拉沃爾, 郁東, 馬里卡朱納.普塔 申請人:艾德拉藥物股份有限公司