專(zhuān)利名稱(chēng)：一種生產(chǎn)高活性真菌α-淀粉酶的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及廢棄資源再生利用技術(shù)領(lǐng)域，具體是一種利用花生四烯酸工業(yè)廢棄菌 絲體生產(chǎn)高活性真菌a-淀粉酶的方法。
背景技術(shù)：
真菌a _淀粉酶是一種廣泛地應(yīng)用于淀粉糖漿、低聚糖、啤酒、烘焙食品、面制品 工業(yè)生產(chǎn)的重要酶制劑，銷(xiāo)售額占酶制劑市場(chǎng)的20%以上。目前，真菌a-淀粉酶的生產(chǎn)
技術(shù)為少數(shù)幾個(gè)國(guó)際大公司所壟斷，我國(guó)自主生產(chǎn)能力較弱，每年都要大量進(jìn)口 ，且價(jià)格昂
蟲(chóng) 貝° 而目前國(guó)內(nèi)真菌a-淀粉酶研發(fā)生產(chǎn)的瓶頸是高產(chǎn)菌株的獲得和昂貴的工業(yè)化 生產(chǎn)成本。國(guó)內(nèi)報(bào)道的真菌a-淀粉酶的酶活水平僅為200 600y/g，而世界上處于領(lǐng)先 地位的幾家酶制劑公司真菌a-淀粉酶的酶活水平已達(dá)到1500 2000ii/g。并且由于真 菌a-淀粉酶固體發(fā)酵過(guò)程中所必須添加的氮源多為價(jià)值較高的蛋白胨，酵母粉等，限制 了工業(yè)化生產(chǎn)。 因此，研制開(kāi)發(fā)生產(chǎn)高活性真菌a -淀粉，降低產(chǎn)業(yè)成本，盡快實(shí)現(xiàn)大規(guī)模國(guó)產(chǎn)化 生產(chǎn)，對(duì)于滿(mǎn)足市場(chǎng)需求，調(diào)整我國(guó)酶制劑工業(yè)的產(chǎn)業(yè)結(jié)構(gòu)，節(jié)約外匯支出等都具有十分重 要的意義。 食品工業(yè)廢棄物是一類(lèi)特殊垃圾，含有大量的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，但因?yàn)槠錉I(yíng)養(yǎng)豐富，容易 成為各種病菌的溫床，并且容易腐爛變質(zhì)造成環(huán)境污染。如果不對(duì)這些廢棄物進(jìn)行綜合利 用，勢(shì)必造成資源的浪費(fèi)和環(huán)境的嚴(yán)重污染。 花生四烯酸是人體必備不飽和脂肪酸，但由于人體不能自身合成，主要依賴(lài)于從 飲食中攝取。在食品市場(chǎng)上有很大的需求量。而工業(yè)化發(fā)酵生產(chǎn)花生四烯酸的同時(shí)，也造 成了大量的發(fā)酵廢棄物的產(chǎn)生。對(duì)這些廢棄發(fā)酵菌絲體進(jìn)行妥善處理、開(kāi)發(fā)和再生利用，不 但可以消除環(huán)境污染，還可以減少蛋白胨，酵母膏的用量，降低生產(chǎn)成本。因此，加強(qiáng)對(duì)廢棄 發(fā)酵菌絲體的開(kāi)發(fā)、利用，具有很大的經(jīng)濟(jì)效益和社會(huì)效益。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明提供了一種利用花生四烯酸工業(yè)廢棄菌絲體生產(chǎn)高活性真菌a -淀粉酶
的方法，降低了生產(chǎn)成本，且操作簡(jiǎn)單易行，生產(chǎn)條件溫和，能耗低，無(wú)二次污染。 本發(fā)明的技術(shù)方案為 —種利用花生四烯酸工業(yè)廢棄菌絲體生產(chǎn)高活性真菌a -淀粉酶的方法，是將發(fā) 酵生產(chǎn)花生四烯酸后的廢棄發(fā)酵菌絲體作為發(fā)酵培養(yǎng)基基質(zhì)生產(chǎn)高活性真菌a-淀粉酶， 其特征在于具體包括以下步驟 (1)、對(duì)發(fā)酵生產(chǎn)花生四烯酸后的廢棄發(fā)酵菌絲體進(jìn)行干燥處理，得到菌絲體粉；
(2)、以菌絲體粉為氮源，按1 : 0.5-10的重量份比與麩皮混合得混合料，然后將
混合料按i : l-3的重量份比與表面活性劑溶液充分混勻得培養(yǎng)基，然后在i20-i25t:滅菌25-35分鐘； (3)、將真菌a-淀粉酶的米曲霉菌株接種于滅菌后的培養(yǎng)基上，接種量為 10-50% ，發(fā)酵溫度28-34°C ，發(fā)酵時(shí)間3-6天，然后浸提a -淀粉酶，得到粗酶液；
(4)、將粗酶液經(jīng)醇提、過(guò)濾、冷凍干燥得酶餅。 所述的利用花生四烯酸工業(yè)廢棄菌絲體生產(chǎn)高活性真菌a -淀粉酶的方法，其特 征在于所述的表面活性劑溶液選用吐溫-SO，質(zhì)量濃度為0. 5-1. 5% ;所述的醇提是將粗 酶液按酶與乙醇的重量份比為1 : 1. 5-2. 5的比例進(jìn)行醇提。 本發(fā)明所述的菌絲粉中含有粗蛋白含量15-45%，水分含量5-10%，總糖含量
20_40%，氨基氮含量1-5%，并且還富含氮、磷、鉀、鈣以及各種微量元素，且均為天然營(yíng)養(yǎng)
物，較易被微生物吸收利用，具有營(yíng)養(yǎng)元素齊全、再利用價(jià)值高的特點(diǎn)。 本發(fā)明不僅成功解決了花生四烯酸工業(yè)廢棄物的處理問(wèn)題，降低了生產(chǎn)成本和環(huán)
境污染，而且成功地利用花生四烯酸工業(yè)廢棄菌絲體粉，代替了造價(jià)昂貴的工業(yè)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)
作為生產(chǎn)高活性真菌a-淀粉酶的原料，利用高活性米曲霉菌株生產(chǎn)出真菌a-淀粉酶。 本發(fā)明利用米曲霉菌株，生產(chǎn)出高活性的真菌a-淀粉酶，已達(dá)到國(guó)際先進(jìn)水平，
而且成功實(shí)現(xiàn)了生產(chǎn)成本的降低，為我國(guó)淀粉酶工業(yè)化生產(chǎn)奠定了基礎(chǔ)。具有很大的經(jīng)濟(jì)
效益和社會(huì)效益。 本發(fā)明操作簡(jiǎn)單易行，生產(chǎn)條件溫和，能耗低，無(wú)二次污染，實(shí)現(xiàn)了工業(yè)廢棄物的 無(wú)害化、減量化、資源再生利用化。


圖1是本發(fā)明的工藝流程圖。
具體實(shí)施例方式
本發(fā)明所用花生四烯酸工業(yè)廢棄菌絲體粉為武漢烯王生物工程有限公司提供。
—種利用花生四烯酸工業(yè)廢棄菌絲體生產(chǎn)高活性真菌a —淀粉酶的方法
(1)、對(duì)發(fā)酵生產(chǎn)花生四烯酸后的廢棄發(fā)酵菌絲體進(jìn)行干燥處理，得到菌絲體粉；
(2)、以菌絲體粉為氮源，按1 : 0.5-10的重量份比與麩皮混合得混合料，然后將 混合料按l : 1-3的重量份比與質(zhì)量濃度為1%的表面活性劑溶液(吐溫_80)充分混勻得 培養(yǎng)基，然后在12rC滅菌30分鐘； (3)、將真菌a-淀粉酶的米曲霉菌株接種于滅菌后的培養(yǎng)基上，接種量為 10-30% ，發(fā)酵溫度28-34°C ，發(fā)酵時(shí)間3-6天，然后浸提a -淀粉酶，得到粗酶液；
(4)、將粗酶液按酶與乙醇的重量份比為1 : 2的比例進(jìn)行醇提、過(guò)濾、冷凍干燥得 酶餅。
權(quán)利要求
一種利用花生四烯酸工業(yè)廢棄菌絲體生產(chǎn)高活性真菌α-淀粉酶的方法，是將發(fā)酵生產(chǎn)花生四烯酸后的廢棄發(fā)酵菌絲體作為發(fā)酵培養(yǎng)基基質(zhì)生產(chǎn)高活性真菌α-淀粉酶，其特征在于具體包括以下步驟(1)、對(duì)發(fā)酵生產(chǎn)花生四烯酸后的廢棄發(fā)酵菌絲體進(jìn)行干燥處理，得到菌絲體粉；(2)、以菌絲體粉為氮源，按1∶0.5-10的重量份比與麩皮混合得混合料，然后將混合料按1∶1-3的重量份比與表面活性劑溶液充分混勻得培養(yǎng)基，然后在120-125℃滅菌25-35分鐘；(3)、將真菌α-淀粉酶的米曲霉菌株接種于滅菌后的培養(yǎng)基上，接種量為10-50％，發(fā)酵溫度28-34℃，發(fā)酵時(shí)間3-6天，然后浸提α-淀粉酶，得到粗酶液；(4)、將粗酶液經(jīng)醇提、過(guò)濾、冷凍干燥得酶餅。
2. 根據(jù)權(quán)利要求l所述的利用花生四烯酸工業(yè)廢棄菌絲體生產(chǎn)高活性真菌a-淀粉酶 的方法，其特征在于所述的表面活性劑溶液選用吐溫-SO，質(zhì)量濃度為0. 5-1. 5% ;所述的 醇提是將粗酶液按酶與乙醇的重量份比為1 : 1.5-2.5的比例進(jìn)行醇提。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種利用花生四烯酸工業(yè)廢棄菌絲體生產(chǎn)高活性真菌α-淀粉酶的方法，是以花生四烯酸工業(yè)廢棄菌絲粉代替價(jià)格昂貴的蛋白胨等氮源作為培養(yǎng)基基質(zhì)，利用米曲霉菌株固態(tài)發(fā)酵生產(chǎn)高活性真菌α-淀粉酶。本發(fā)明操作簡(jiǎn)單易行，生產(chǎn)條件溫和，能耗低，無(wú)二次污染，實(shí)現(xiàn)了工業(yè)廢棄物的無(wú)害化、減量化、資源再生利用化。
文檔編號(hào)C12N9/30GK101748106SQ201010101850
公開(kāi)日2010年6月23日 申請(qǐng)日期2010年1月26日 優(yōu)先權(quán)日2010年1月26日
發(fā)明者吳金勇, 姚建銘, 李俊, 王姍姍, 陳祥松 申請(qǐng)人:中國(guó)科學(xué)院等離子體物理研究所