專利名稱：一種異秦皮定的提取方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種異秦皮定的提取方法，尤其是一種生物酶解和重結(jié)晶提取異秦皮 定的方法。
背景技術(shù)：
異秦皮定又叫異嗪皮啶、異秦皮啶，香豆素類化合物。 分子式=C11HltlO5 分子結(jié)構(gòu)式
HjCC
cr^o
OCHj
cr^o
OCH3 異秦皮啶
刺五加苷B1溶于甲醇、乙醇、丙酮、氯仿、沸水、堿性水溶液，微溶于乙醚，難溶于石油醚、冷水。 異秦皮定具有安神鎮(zhèn)靜作用，能縮短入睡時(shí)間，改善睡眠質(zhì)量，還有抗炎、抗腫瘤作用。刺五加中游離態(tài)的異秦皮定含量不高僅有0.3%左右，有一部分是化合態(tài)的異秦 皮定即刺五加苷，從刺五加中提取更多量的異秦皮定，要把刺五加苷水解。現(xiàn)有提取異秦皮定的工藝有孫華芳等發(fā)表的“刺五加中異秦皮定甙水解的最優(yōu)條件研究”，該文獻(xiàn)采用加5% 硫酸100°C水解5小時(shí)。楊磊等發(fā)表的“水解原位萃取分離刺五加異秦皮啶”，該文獻(xiàn)采用加入鹽酸85°C水 解同時(shí)二氯甲烷萃取方法。王冰嵐發(fā)表的“腫節(jié)風(fēng)化學(xué)成分及指紋圖譜的研究”，該文獻(xiàn)從腫節(jié)風(fēng)中乙醇提 取，乙酸乙酯萃取，硅膠柱反復(fù)分離制的高含量異秦皮定，還采用高速逆流色譜制備了高含 量異秦皮定。專利(申請(qǐng)?zhí)?2109475) “用刺五加生產(chǎn)異嗪皮定、刺五加甙、刺五加多糖的方 法”，該專利所公開的方法是刺五加根莖粉碎烘干一超臨界二氧化碳萃取一得異嗪皮定一 乙醇常溫浸提超臨界二氧化碳萃取后廢渣一濃縮浸提液一大孔樹脂柱層析一洗脫一濃縮 洗脫液凍干處理得刺五加甙一樹脂吸附過的濃縮浸提液經(jīng)脫色、濃縮、凍干處理得刺五加多糖。如上述所，現(xiàn)有工藝存在著提取收率低、操作過程反應(yīng)劇烈、生產(chǎn)量小和重現(xiàn)性差 的問題。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是提供一種異秦皮定的提取方法，該方法能夠提高異秦 皮定收率，降低生產(chǎn)成本。為了解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明提取技術(shù)方案如下一種異秦皮定的提取方法，其特征在于包含以下步驟1)粉碎酶解將刺五加藥材粉碎40-80目，加入10-20%水，拌勻再加生物酶，自然 酶解3-10天；2)提取取上述酶解原料加入6-15BV80_90%%甲醇回流提取1_3小時(shí)，提取1_3 次，合并得提取液；3)脫色除雜上述提取液加壓回收甲醇，濃縮液中加入4-9BV乙酸乙酯加熱 溶解去除水層，加入活性炭氧化鋁混合柱脫色，收集下注液減壓回收乙酸乙酯至原體積 1/3-1/8，加入少量石油醚攪拌有沉淀析出止，放置結(jié)晶；4)重結(jié)晶濾出粗結(jié)晶物，依次用氯仿、丙酮結(jié)晶，真空低壓干燥即得異秦皮定。所述步驟1)粉碎酶解條件為酶可選纖維素酶、β “葡聚糖酶或柚苷酶一種或多 種，酶添加量1-5%。。優(yōu)選β-葡聚糖酶。5.所述步驟3)中活性炭氧化鋁混合柱中活性碳氧化鋁比例為1 3-6。氧化鋁 為100-200目中性氧化鋁，活性炭為顆粒活性碳。優(yōu)選比例1 4。所述步驟4)重結(jié)晶為回流溶解冷藏結(jié)晶，冷藏溫度0_4°C。本發(fā)明存在以下優(yōu)點(diǎn)1)產(chǎn)品收率高，工藝簡(jiǎn)單易操作，易于工業(yè)化。2)生物酶解過程溫和，污染程度遠(yuǎn)遠(yuǎn)小于酸水解。3)氧化鋁活性炭混合柱脫色除雜效果好。下面將結(jié)合具體實(shí)施方式
進(jìn)一步說明本發(fā)明，但本發(fā)明要求保護(hù)的范圍并不局限 于下列實(shí)施方式。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例1 刺五加去雜粉碎40目，取1kg，加入200ml水，拌勻再加5g纖維素酶，自然酶解5 天，取出投入燒瓶中加入6L80%甲醇回流提取1小時(shí)提取3次，提取液旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀回收甲 醇，濃縮液中加入4BV乙酸乙酯加熱溶解去除水層，加入活性炭氧化鋁(1 4)柱脫色，收 集下注液減壓回收乙酸乙酯至原體積1/8，加入少量石油醚攪拌有沉淀析出止，放置結(jié)晶； 濾出粗結(jié)晶，依次用氯仿、丙酮回流溶解冷藏于0-4°C環(huán)境中結(jié)晶，真空低壓干燥即得異秦 皮定3. 4g，含量95%。實(shí)施例2 刺五加去雜粉碎80目，取5kg，加入800ml水，拌勻再加5g β-葡聚糖酶，自然酶 解10天，取出投入多功能提取罐中加入50L90%甲醇回流提取2小時(shí)提取2次，合并提取液 回收甲醇，濃縮液中加入9BV乙酸乙酯加熱溶解去除水層，加入活性炭氧化鋁(1 6)柱脫 色，收集下注液減壓回收乙酸乙酯至原體積1/3，加入少量石油醚攪拌有沉淀析出止，放置 結(jié)晶；濾出粗結(jié)晶，依次用氯仿、丙酮回流溶解冷藏于0-4°C環(huán)境中結(jié)晶，真空低壓干燥即得異秦皮定20g，含量98%。實(shí)施例3 刺五加去雜粉碎60目，取5kg，加入IOOOml水，拌勻再加15g柚苷酶，自然酶解7 天，取出投入多功能提取罐中加入75L85%甲醇回流提取3小時(shí)提取1次，合并提取液回收 甲醇，濃縮液中加入6BV乙酸乙酯加熱溶解去除水層，加入活性炭氧化鋁(1 3)柱脫色， 收集下注液減壓回收乙酸乙酯至原體積1/5，加入少量石油醚攪拌有沉淀析出止，放置結(jié) 晶；濾出粗結(jié)晶，依次用氯仿、丙酮回流溶解冷藏于0-4°C環(huán)境中結(jié)晶，真空低壓干燥即得 異秦皮定14g，含量97%。實(shí)施例4 刺五加去雜粉碎40目，取10kg，加入2L水，拌勻再加15gi3-葡聚糖酶，自然酶解 5天，取出投入多功能提取罐中加入60L90%甲醇回流提取1小時(shí)提取3次，合并提取液回 收甲醇，濃縮液中加入8BV乙酸乙酯加熱溶解去除水層，加入活性炭氧化鋁(1 64)柱脫 色，收集下注液減壓回收乙酸乙酯至原體積1/6，加入少量石油醚攪拌有沉淀析出止，放置 結(jié)晶；濾出粗結(jié)晶，依次用氯仿、丙酮回流溶解冷藏于0-4°C環(huán)境中結(jié)晶，真空低壓干燥即 得異秦皮定38g，含量99%。
權(quán)利要求
一種異秦皮定的提取方法，其特征在于包含以下步驟1)粉碎酶解將刺五加藥材粉碎40 80目，加入10 20％水，拌勻再加生物酶，自然酶解3 10天；2)提取取上述酶解原料加入6 15BV80 90％甲醇回流提取1 3小時(shí)，提取1 3次，合并得提取液；3)脫色除雜上述提取液加壓回收甲醇，濃縮液中加入其體積4 9BV乙酸乙酯加熱溶解去除水層，加入活性炭氧化鋁混合柱脫色，收集下注液減壓回收乙酸乙酯至原體積1/3 1/8，加入少量石油醚攪拌有沉淀析出止，放置結(jié)晶；4)重結(jié)晶濾出粗結(jié)晶物，依次用氯仿、丙酮結(jié)晶，真空低壓干燥即得異秦皮定。
2.如權(quán)利要求1所異秦皮定的提取方法，其特征在于所述步驟1)粉碎酶解條件為酶 可選纖維素酶、β-葡聚糖酶或柚苷酶一種或多種，酶添加量1-5%。。
3.如權(quán)利要求1所述異秦皮定的提取方法，其特征在于所述步驟3)中活性炭氧化鋁混 合柱中活性碳氧化鋁比例為1 3-6，氧化鋁為100-200目中性氧化鋁，活性炭為顆?；钚?碳。
4.如權(quán)利要求1所述異秦皮定的提取方法，其特征在于所述步驟4)重結(jié)晶為回流溶解 冷臧結(jié)晶，冷臧溫度0-4°C。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種異秦皮定的提取方法，方法是以刺五加為原料，粉碎加10-20％水潤(rùn)濕，再加生物酶常態(tài)酶解3-10天，酶解后80-90％甲醇回流提取，提取液減壓濃縮，加入乙酸乙酯溶解去水層，過活性炭氧化鋁混合柱脫色除雜，濃縮結(jié)晶，再氯仿、丙酮回流重結(jié)晶，低溫干燥結(jié)晶物即得產(chǎn)品。采用本方法生產(chǎn)異秦皮定，產(chǎn)品收率高，操作簡(jiǎn)單。本方法重現(xiàn)性好，易于放大生產(chǎn)。
文檔編號(hào)C12P17/06GK101967504SQ20101021070
公開日2011年2月9日 申請(qǐng)日期2010年6月28日 優(yōu)先權(quán)日2010年6月28日
發(fā)明者蘇劉花 申請(qǐng)人:南京澤朗農(nóng)業(yè)發(fā)展有限公司