專利名稱：一種包埋維生素a醋酸酯的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種包埋維生素A醋酸酯的方法，屬于食品工程技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
維生素A易受光、氧的影響，易發(fā)生氧化降解。維生素A分子中有不飽和鍵，化學(xué) 性質(zhì)活潑，在空氣中易被氧化，或受紫外線照射而破壞，失去生理作用。維生素A特別是它 的游離醇，對氧、酸和紫外線都很敏感。因此有效的對維生素A醋酸酯進(jìn)行包埋并添加在食 品中成為人們的研究內(nèi)容，乳脂肪球膜磷脂不同的構(gòu)成(特別是鞘磷脂類)可能會導(dǎo)致脂 質(zhì)體性能的不同，為消費(fèi)者(嬰兒)提供不同的營養(yǎng)學(xué)作用，也具有保護(hù)新生兒免受多種細(xì) 菌和病毒感染的作用。國內(nèi)尚未有應(yīng)用乳脂肪球膜磷脂包埋維生素A醋酸酯的技術(shù)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供了一種包埋維生素A醋酸酯的方法。為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明提供如下技術(shù)方案將乳脂肪球膜磷脂、膽固醇、維 生素E和維生素A醋酸酯混合后加入無水乙醇，使用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀處理上述混合液得到水化 薄膜，再使用高速剪切器處理水化薄膜得到混懸液，最后使用高壓均質(zhì)機(jī)處理混懸液得到 維生素A醋酸酯脂質(zhì)體。所述乳脂肪球膜磷脂、膽固醇、維生素E和維生素A醋酸酯混合后得到的混合物與 無水乙醇的質(zhì)量體積比為0. 01-0. 5g/mL ；其中，主要輔料維生素A醋酸酯與乳脂肪球膜磷 脂比例為1 20-1 100。所述旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀處理過程，一般在400-700MPa的條件下將乙醇溶液用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā) 儀處理20-30min直至乙醇蒸發(fā)完畢，加入pH為7. 0的咪唑緩沖液，震蕩10-20min，得到水 化薄膜；咪唑緩沖液每IOOOmL溶液由20mM咪唑、氯化鈉50mM、0. 02%的疊氮鈉以及IM鹽 酸和IM氫氧化鈉組成。所述高速剪切器處理過程，將水化薄膜在25°C、轉(zhuǎn)速為150-180r/min的高速剪切 器中高速剪切30-50s，得到混懸液。所述高壓均質(zhì)機(jī)處理過程，高壓均質(zhì)機(jī)在90-103MPa下處理混懸液，循環(huán)3_5次得 到維生素A醋酸酯脂質(zhì)體。所述包埋維生素A醋酸酯的優(yōu)選方法為一、將乳脂肪球膜磷脂、膽固醇、維生素E和維生素A醋酸酯混合，其中乳脂肪球膜 磷脂84%、膽固醇12. 8%、維生素E 0. 7%、維生素A醋酸酯2. 5 % ；將混合物加入無水乙醇 中，其中混合物與無水乙醇的質(zhì)量體積比為0. lg/mL ；二、在550MPa的條件下將步驟一得到的混合溶液用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)20min， 直至乙醇蒸發(fā)完畢，然后加入PH為7.0的咪唑緩沖液，震蕩15min，得到水化薄膜；三、將水化薄膜在溫度為25°C、轉(zhuǎn)數(shù)為150r/min的高速剪切器條件下高速剪切 40s，得到混懸液；
四、將混懸液通過高壓均質(zhì)機(jī)在103MPa下循環(huán)3次即得維生素A醋酸酯脂質(zhì)體。


圖1為維生素A醋酸酯標(biāo)準(zhǔn)品的色譜圖；維生素A醋酸酯標(biāo)準(zhǔn)品的色譜峰分離較 好，峰尖明顯，維生素A醋酸酯在4. 5min內(nèi)出峰，分析時間不超過20min。圖2為不同濃度的維生素A醋酸酯標(biāo)準(zhǔn)品溶液組成的標(biāo)準(zhǔn)曲線，以此標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì) 算維生素α醋酸酯脂質(zhì)體的包埋率。在用標(biāo)準(zhǔn)品濃度(χ)與所對應(yīng)測定的峰面積ω做出 標(biāo)準(zhǔn)曲線，得到回歸方程:y = 1641014. 2742x+36080. 3750，其相關(guān)系數(shù)R2 = 0. 9989，η = 5。維生素A醋酸酯濃度在0.02-0. 8yg/mL范圍內(nèi)與峰面積線性關(guān)系良好。以信躁比3 1 計(jì)算，維生素A醋酸酯的最低檢測濃度為3 μ g/mL。圖3是本發(fā)明優(yōu)選方法所得維生素A醋酸酯脂質(zhì)體中游離的維生素A醋酸酯的色 譜圖，以維生素A醋酸酯標(biāo)準(zhǔn)品的保留時間作定性，以峰面積作定量。根據(jù)以下公式計(jì)算維 生素A醋酸酯的包埋率包埋率(％ )=(維生素A醋酸酯的總量-游離維生素A醋酸酯 的量)X100% /維生素A醋酸酯的總量。由上述公式得出維生素A醋酸酯脂質(zhì)體的包埋率 為 88%。
具體實(shí)施例方式本發(fā)明技術(shù)方案不局限于以下所列舉具體實(shí)施方式
，還包括各具體實(shí)施方式
間的 任意組合。實(shí)施例一本實(shí)施方式中采用高效液相色譜法測定所得包埋后的維生素A醋酸酯脂質(zhì)體的 包埋率；所用高效液相色譜儀為美國Waters公司生產(chǎn)的型號為WaterS2695的高效液相色 譜儀，步驟如下1、標(biāo)準(zhǔn)溶液的配置不同濃度的維生素A醋酸酯標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備準(zhǔn)確稱取維生素A適量，用甲醇溶 解、稀釋和定容，分別配置 0. 05 μ g/mL、0. 1 μ g/mL、0. 2 μ g/mL、0. 4 μ g/mL、0. 8 μ g/mL 的維 生素A標(biāo)準(zhǔn)溶液，外標(biāo)法定量。2、高效液相色譜分析的條件Waters2695高效液相色譜儀；Waters2487UV檢測器；Empower色譜數(shù)據(jù)工作站； 色譜柱為資生堂CAPCELL PAK C18柱(150_Χ4. 6_Χ5μ )；流動相為甲醇；流速lmL/min ； 檢測波長328nm ；進(jìn)樣量10 μ L，外標(biāo)法以峰面積定量。3、方法分別配制0. 05 μ g/mL、0. 1 μ g/mL、0. 2 μ g/mL、0. 4 μ g/mL 禾口 0. 8 μ g/mL 濃度的維 生素A標(biāo)準(zhǔn)液，通過高效液相色譜(HPLC)分析，計(jì)算峰面積。在1天內(nèi)每個濃度測定5次， 計(jì)算日內(nèi)精密度；連續(xù)測定5天，計(jì)算日間精密度。采用在空白樣品中添加標(biāo)準(zhǔn)溶液的方法。取空白脂質(zhì)體0. 5mL，置25mL容量瓶中， 精確量取標(biāo)準(zhǔn)液(0. lg/mL)各0. 15mL、0. ImL和0. 05mL，搖勻，按照樣品分析方法測定每個 樣品中的維生素A含量，計(jì)算加標(biāo)回收率。圖1為維生素A醋酸酯標(biāo)準(zhǔn)品的色譜圖；維生素A醋酸酯標(biāo)準(zhǔn)品的色譜峰分離較CN 101884416 A
說明書
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好，峰尖明顯，維生素A醋酸酯在4. 5min內(nèi)出峰，分析時間不超過20min。圖2為不同濃度的維生素A醋酸酯標(biāo)準(zhǔn)品溶液組成的標(biāo)準(zhǔn)曲線，以此標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì) 算維生素α醋酸酯脂質(zhì)體的包埋率。在用標(biāo)準(zhǔn)品濃度(χ)與所對應(yīng)測定的峰面積ω做出 標(biāo)準(zhǔn)曲線，得到回歸方程:y = 1641014. 2742x+36080. 3750，其相關(guān)系數(shù)R2 = 0. 9989，η = 5。維生素A醋酸酯濃度在0.02-0. 8yg/mL范圍內(nèi)與峰面積線性關(guān)系良好。以信躁比3 1 計(jì)算，維生素A醋酸酯的最低檢測濃度為3 μ g/mL。實(shí)施例二 一、將乳脂肪球膜磷脂、膽固醇、維生素E和維生素A醋酸酯混合，其中維生素A醋 酸酯與乳脂肪球膜磷脂比例為1 33，混合物中乳脂肪球膜磷脂84%、膽固醇12.8%、維生 素E 0. 7%、維生素A醋酸酯2. 5%;將混合物加入無水乙醇中，其中混合物與無水乙醇的質(zhì) 量體積比為0. lg/mL ；二、在550MPa的條件下將步驟一得到的混合溶液用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)20min， 直至乙醇蒸發(fā)完畢，然后加入PH為7.0的咪唑緩沖液，震蕩15min，得到水化薄膜；三、將水化薄膜在溫度為25°C、轉(zhuǎn)數(shù)為150r/min的高速剪切器條件下高速剪切 40s，得到混懸液；四、將混懸液通過高壓均質(zhì)機(jī)在103MP下循環(huán)3次即得維生素A醋酸酯脂質(zhì)體。本發(fā)明所用的旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀型號為ZFQ-85B，由上海醫(yī)械專機(jī)廠生產(chǎn)；高速分散所 用的儀器為寧波新芝生物科技股份有限公司生產(chǎn)的高速分散器；高壓均質(zhì)所用的儀器為意 大利NiroSoavi公司生產(chǎn)的型號為NS1001L型高壓微射流均質(zhì)機(jī)。由附圖3得出結(jié)論，采用本實(shí)施方式維生素A醋酸酯脂質(zhì)體的包埋率為88%，且包 埋后的維生素A醋酸酯脂質(zhì)體溶于水后無異味產(chǎn)生，不破壞液態(tài)乳的性狀。實(shí)施例三本實(shí)施例與實(shí)施例二不同之處在于維生素A醋酸酯與乳脂肪球膜磷脂比例為 1 20，混合物中乳脂肪球膜磷脂83%、膽固醇12.5%、維生素E 0.5%、維生素A醋酸酯 4%。本實(shí)施例方法包埋維生素A醋酸酯脂質(zhì)體的包埋率為80%。實(shí)施例四本實(shí)施例與實(shí)施例二不同之處在于維生素A醋酸酯與乳脂肪球膜磷脂比例為 1 100，混合物中乳脂肪球膜磷脂85.3%、膽固醇13%、維生素E 0.7%、維生素A醋酸酯1%。本實(shí)施例方法包埋維生素A醋酸酯脂質(zhì)體的包埋率為85%。實(shí)施例五本實(shí)施例與實(shí)施例二不同之處在于乳脂肪球膜磷脂、膽固醇、維生素E和維生素 A醋酸酯的混合物與無水乙醇的質(zhì)量體積比為0. 01g/mL ；在700MPa的條件下旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀旋 轉(zhuǎn)蒸發(fā)30min直至無水乙醇蒸發(fā)完畢。本實(shí)施例方法包埋維生素A醋酸酯脂質(zhì)體的包埋率為70%。實(shí)施例六本實(shí)施例與實(shí)施例二不同之處在于乳脂肪球膜磷脂、膽固醇、維生素E和維生素 A醋酸酯的混合物與無水乙醇的質(zhì)量體積比為0. 5g/mL ；在400MPa的條件下旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)20min直至無水乙醇蒸發(fā)完畢。 本實(shí)施例方法包埋維生素A醋酸酯脂質(zhì)體的包埋率為65%。
權(quán)利要求
一種包埋維生素A醋酸酯的方法，其特征在于，將乳脂肪球膜磷脂、膽固醇、維生素E和維生素A醋酸酯混合后加入無水乙醇，分別使用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀、高速剪切器、高壓均質(zhì)機(jī)處理得到維生素A醋酸酯脂質(zhì)體。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述包埋維生素A醋酸酯的方法，其特征在于，維生素A醋酸酯與乳 脂肪球膜磷脂比例為1 20-1 100。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述包埋維生素A醋酸酯的方法，其特征在于，混合后乳脂肪球膜磷 脂、膽固醇、維生素E和維生素A醋酸酯的混合物與無水乙醇的質(zhì)量體積比為0. 001-0. 5g/mLo
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述包埋維生素A醋酸酯的方法，其特征在于，在400-700MPa的條 件下將乙醇混合溶液用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀處理至乙醇蒸發(fā)完畢，加入PH為7. 0的咪唑緩沖液，震 蕩10min-20min，得到水化薄膜。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述包埋維生素A醋酸酯的方法，其特征在于，將水化薄膜在高速剪 切器中高速剪切30-50s，得到混懸液。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述包埋維生素A醋酸酯的方法，其特征在于，將混懸液通過高壓均 質(zhì)機(jī)在90-103MPa下循環(huán)3_5次得到包埋后的維生素A醋酸酯脂質(zhì)體。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述包埋維生素A醋酸酯的方法，其特征在于，具體方法為一)將乳脂肪球膜磷脂、膽固醇、維生素E和維生素A醋酸酯混合，其中乳脂肪球膜磷 脂84%、膽固醇12.8%、維生素E 0.7%、維生素A醋酸酯2. 5% ；將混合物加入無水乙醇 中，其中混合物與無水乙醇的質(zhì)量體積比為0. lg/mL ；二)在550MPa的條件下將乙醇溶液用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀處理至乙醇蒸發(fā)完畢，加入pH為7.0 的咪唑緩沖液，震蕩15min，得到水化薄膜；三)將水化薄膜在高速剪切器中高速剪切40s，得到混懸液；四)將混懸液通過高壓均質(zhì)機(jī)在103MPa下循環(huán)3次得到維生素A醋酸酯脂質(zhì)體。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種包埋維生素A醋酸酯的方法，它涉及一種應(yīng)用乳脂肪球膜磷脂包埋維生素A醋酸酯的方法。本發(fā)明將乳脂肪球膜磷脂、膽固醇、維生素A醋酸酯和維生素E加入到有機(jī)溶劑中，然后旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)去除有機(jī)溶劑，加入咪唑緩沖液，然后上樣高速剪切器，得到脂質(zhì)體粗懸液，將得到的樣品通過高壓均質(zhì)機(jī)處理。采用本發(fā)明制備的維生素A醋酸酯脂質(zhì)體最高包埋率為88％，填補(bǔ)了現(xiàn)有技術(shù)的空白。
文檔編號A23L1/303GK101884416SQ20101022125
公開日2010年11月17日 申請日期2010年7月8日 優(yōu)先權(quán)日2010年7月8日
發(fā)明者劉寧, 郭晨峰 申請人:東北農(nóng)業(yè)大學(xué)