專利名稱：一種漆酶法制備2-(6′-甲氧基-2′-萘基)烯丙醇的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種漆酶法制備2-(6'-甲氧基-2' _萘基)烯丙醇的技術(shù)。 背景技術(shù)：
2-(6' _甲氧基-2' _萘基)烯丙醇是制備非留體抗炎、解熱和鎮(zhèn)痛藥物萘普生 (Naproxen)的中藥中間體，在國內(nèi)外具有廣闊的需求市場(chǎng)。目前該化合物的合成方法只有 兩種。美國專利US 5286902報(bào)道的合成路線中，由2-甲氧基-6-異丙基萘出發(fā)，在高溫管 式反應(yīng)器中，用脫氫催化劑脫氫生成烯丙基萘化合物后，經(jīng)二氧化硒氧化制得。用此合成方 法操作復(fù)雜，反應(yīng)條件苛刻，所用二氧化硒氧化劑毒性大，并且合成2-甲氧基-6-異丙基萘 的原料來源困難，合成路線較長(zhǎng)，收率低，難以進(jìn)行大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)。裴文等利用Heck反 應(yīng)，研究了金屬鈀或鎳催化下，在離子液體、堿和膦配體反應(yīng)體系中，由鹵代萘和烯丙醇反 應(yīng)，合成了 2-取代萘烯丙醇化合物。但是，在工業(yè)化生產(chǎn)中，化學(xué)合成工藝過程由于需用回 收使用的反應(yīng)介質(zhì)、有機(jī)堿和催化劑，涉及環(huán)境污染問題。因此，開發(fā)環(huán)境友好的生物合成 技術(shù)是綠色化學(xué)研究的重要內(nèi)容，且利用生物技術(shù)合成該類化合物的研究尚未見報(bào)道。漆酶(Laccase)是一類可降解木質(zhì)素的含銅多酚氧化酶。早在1883年，日本學(xué)者 Yoshida從漆樹(Rhus vernicifern)中發(fā)現(xiàn)了一種蛋白質(zhì)，它可使油漆迅速固化。1894年 Bertrand將這種蛋白質(zhì)命名為漆酶。漆酶的分布十分廣泛，除了植物，它還分布于昆蟲、細(xì) 菌和高等真菌中。由于受到來源、培養(yǎng)條件等方面的限制，在實(shí)際工業(yè)化生產(chǎn)漆酶時(shí)都以高 等真菌為主，如彩絨革蓋菌(Coriolus versicolor)、貝殼狀革耳菌(Panus conchatus)。 除分解木質(zhì)素外，漆酶還可催化氧化大量與木質(zhì)素先體結(jié)構(gòu)類似的酚類化合物和芳香胺， 尤其在氧化還原介質(zhì)的協(xié)同作用下，漆酶作用的底物范圍可進(jìn)一步擴(kuò)大。與其他過氧化物 酶相比，漆酶具有更大的實(shí)際應(yīng)用價(jià)值。首先，木質(zhì)素過氧化物酶(LiP)和錳過氧化物酶 (MnP)是在限碳、限氮條件下產(chǎn)生的嚴(yán)格次級(jí)代謝產(chǎn)物，在工業(yè)廢水處理過程中，碳、氮源營(yíng) 養(yǎng)物質(zhì)的大量存在限制了細(xì)胞對(duì)酶的分泌。其次，由于木質(zhì)素過氧化物酶和錳過氧化物酶 在降解有機(jī)污染物時(shí)，需要大量的H2O2作為輔助劑，這限制了其在實(shí)際生產(chǎn)中的應(yīng)用。而漆 酶可在沒有H2O2的存在下，直接對(duì)底物催化氧化。近年來漆酶在紙漿漂白、紡織物染整、有 機(jī)污染物處理、生物傳感器、痕量物質(zhì)的分析、食品性質(zhì)的改良等領(lǐng)域得到了廣泛的研究與 應(yīng)用。尤其重要的是漆酶在一些小分子氧化還原介體的協(xié)助下具有更強(qiáng)的催化氧化能力， 有利于開發(fā)該酶的應(yīng)用新領(lǐng)域。因此，漆酶-氧化還原介質(zhì)系統(tǒng)作為一種具有很大的潛在 應(yīng)用價(jià)值的體系越來越受到國內(nèi)外的關(guān)注。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明目的在于提供一種制備工藝簡(jiǎn)單、催化效果好，利用漆酶生物合成技術(shù)高 選擇性地制備2-(6'-甲氧基-2' _萘基)烯丙醇的方法。本發(fā)明采用的技術(shù)方案是一種2_(6' _甲氧基-2' _萘基)烯丙醇的制備方法，其特征在于包括以下步
(1)將稱量好的2_(6' _甲氧基-2' _萘基)丙烯溶于一定量的乙醇里，每毫摩 爾2_(6'-甲氧基-2' _萘基)丙烯，乙醇用量1 10毫升；(2)用pH值為4.5的緩沖溶液稀釋步驟(1)的丙烯乙醇溶液，每毫摩爾 2-(6'-甲氧基-2'-萘基)丙烯，緩沖溶液用量1 10毫升；(3)將步驟⑵稀釋后溶液的升溫到40_50°C ；(4)將反應(yīng)介質(zhì)和漆酶的水溶液加入到步驟(3)升溫后溶液里，保證每毫摩爾 2-(6'-甲氧基-2'-萘基)丙烯，反應(yīng)介質(zhì)用量為1 10毫升，漆酶用量100 300IU;(5)向反應(yīng)體系中通入微弱的空氣并不斷攪拌20 30小時(shí)；(6)反應(yīng)完畢后，用甲苯10_15ml萃取三次；(7)合并萃取液并干燥，濃縮；(8)最后用柱層析法分離得2-(6‘ _甲氧基-2' _萘基)烯丙醇產(chǎn)物，反應(yīng)式如下
權(quán)利要求
一種2 (6′ 甲氧基 2′ 萘基)烯丙醇的制備方法，其特征在于以2 (6′ 甲氧基 2′ 萘基)丙烯為原料，利用緩沖溶液與反應(yīng)介質(zhì)聯(lián)用體系，在漆酶的作用下，以空氣為氧化劑使烯丙位的甲基氧化為羥基目標(biāo)物，具體步驟如下(1)將稱量好的2 (6′ 甲氧基 2′ 萘基)丙烯溶于一定量的乙醇里，每毫摩爾2 (6′ 甲氧基 2′ 萘基)丙烯，乙醇用量1～10毫升；(2)用pH值為4.5的緩沖溶液稀釋步驟(1)所述丙烯乙醇溶液，每毫摩爾2 (6′ 甲氧基 2′ 萘基)丙烯，緩沖溶液用量1～10毫升；(3)將步驟(2)稀釋后溶液的升溫到40 50℃；(4)將反應(yīng)介質(zhì)和漆酶的水溶液加入到步驟(3)升溫后溶液里，保證每毫摩爾2 (6′ 甲氧基 2′ 萘基)丙烯，反應(yīng)介質(zhì)用量為1～10毫升，漆酶用量100～300IU；(5)向反應(yīng)體系中通入微弱的空氣并不斷攪拌20～30小時(shí)；(6)反應(yīng)完畢后，用甲苯10 15ml萃取三次；(7)合并萃取液并干燥，濃縮；(8)最后用柱層析法分離得2 (6′ 甲氧基 2′ 萘基)烯丙醇產(chǎn)物，反應(yīng)式如下FSA00000194987500011.tif
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的2-(6‘-甲氧基-2' _萘基)烯丙醇的制備方法，其特征在于所述的緩沖溶液體系選自檸檬酸/磷酸緩沖液體系、醋酸鹽緩沖液體系中的一種，優(yōu) 選為檬酸/磷酸鹽緩沖液體系；所述的反應(yīng)介質(zhì)選自2，2’ -聯(lián)氮-雙(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二銨鹽ABTS、 1-羥基苯并三唑H0BT、2，2，6，6-四甲基哌啶-氮-氧化物(TEMPO)、氯丙嗪(CPZ)、N_羥基 鄰苯二甲酰亞胺和1-亞硝基-2-萘酚-3，6 二磺酸鈉(NNDS)中的一種； 所述的反應(yīng)溫度為40 50°C，優(yōu)選為45°C ； 所述的反應(yīng)時(shí)間為20 30小時(shí)，優(yōu)選為24小時(shí)。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種漆酶法制備2-(6′-甲氧基-2′-萘基)烯丙醇的方法，以2-(6′-甲氧基-2′-萘基)丙烯為原料，利用緩沖溶液與反應(yīng)介質(zhì)聯(lián)用體系，在漆酶的作用下，以空氣為氧化劑使烯丙位的甲基氧化為羥基目標(biāo)物。具體方法為將2-(6′-甲氧基-2′-萘基)丙烯溶于乙醇，用pH值為4.5的緩沖溶液稀釋后，升溫到45℃，加入反應(yīng)介質(zhì)和漆酶的水溶液。向反應(yīng)體系中通入微弱的空氣并不斷攪拌20～30小時(shí)，反應(yīng)結(jié)束后，用甲苯萃取，萃取液干燥，濃縮，柱層析分離得2-(6′-甲氧基-2′-萘基)烯丙醇產(chǎn)物。本發(fā)明所述的制備方法，制備工藝簡(jiǎn)單，易操作，可規(guī)?；苽?，對(duì)環(huán)境污染小。
文檔編號(hào)C12P7/02GK101967497SQ20101022970
公開日2011年2月9日 申請(qǐng)日期2010年7月15日 優(yōu)先權(quán)日2010年7月15日
發(fā)明者丁永亮, 何理達(dá), 蘭亞玲, 陳方 申請(qǐng)人:池州方達(dá)科技有限公司;陳方