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      利用不足量血制備懸浮紅細胞的方法

      文檔序號:585299閱讀:807來源:國知局
      專利名稱:利用不足量血制備懸浮紅細胞的方法
      技術領域
      本發(fā)明涉及醫(yī)學領域,特別是涉及采供血領域由ACD-B抗凝的不足量血制備MAP 懸浮紅細胞的技術指標、工藝路線和具體方法。
      背景技術
      不足量血由于紅細胞與保養(yǎng)液的比例失調,導致紅細胞的胞外pH值低于正常標準,該低pH的儲存環(huán)境和儲存時間可影響紅細胞的能量代謝和生理功能,難以確保儲存期內的血液質量。目前國內外普遍使用ACD (pH 5. 03),CPD (pH 5. 60)和CPDA(pH 5. 60)保養(yǎng)液采集全血,由于ACD保養(yǎng)液的pH值最低,因此對不足量血的紅細胞影響更甚。國內對不足量血的研究資料目前還是一個空白,而國外對不足量血紅細胞的理化和功能指標的資料主要來源于CPD和CPDA保養(yǎng)液抗凝的不足量全血。國外相關體內外研究結果表明采血量在一定范圍內(50-90%標示量)的不足量血,其保存期末的紅細胞理化和功能指標與同期正常全血存在差異,在縮短不足量全血的保存期,預防其抗凝劑過量的副作用的前提下,不足量血紅細胞的功能指標可達到正常紅細胞的標準。但迄今為止,國內外鮮有利用不足量全血制備成懸浮紅細胞的技術資料。因此,我們在研究紅細胞所處的酸堿度環(huán)境對其理化指標和功能產生影響,探討不足量血紅細胞的百分比含量以及儲存時間與MAP懸浮紅細胞質量的關系的基礎上,利用多聯(lián)袋技術,將滿足特定條件的不足量全血中的紅細胞從可損傷紅細胞和產生輸血不良反應的低PH液相環(huán)境(血漿和過量的抗凝劑)中分離,利用不足量全血中的紅細胞制備MAP懸浮紅細胞,建立可用于制備MAP懸浮紅細胞的不足量血的技術指標、工藝路線和具體方法,此舉對綜合利用不足量血、節(jié)約寶貴的血液資源意義重大。

      發(fā)明內容
      本發(fā)明的目的是建立由A⑶-B抗凝的不足量血制備MAP懸浮紅細胞的技術指標、 工藝路線和具體方法,利用A⑶-B抗凝的不足量血制備MAP懸浮紅細胞。本發(fā)明的方法包括以下步驟建立可用于制備MAP懸浮紅細胞的不足量血的技術指標以及制備MAP懸浮紅細胞工藝路線,將符合特定標準的不足量血,利用多聯(lián)袋技術制備MAP懸浮紅細胞。本發(fā)明所說的“全血”是指采入血袋內含適量抗凝劑和各種血液成分的血液。本發(fā)明所說的“不足量血”是指采供血工作中因獻血反應、血流不暢和采血異常等原因致使采集血液的實際容量少于90%標示量的全血,或者是在自體輸血和兒科輸血中由于標準血袋中的保養(yǎng)液容量與實際采集血量不匹配的全血。本發(fā)明所說的“懸浮紅細胞”是指全血將血漿分離出后加入適量添加液的紅細胞成分。本發(fā)明所說的“MAP懸浮紅細胞”是指用氯化鈉-腺嘌呤-葡萄糖-甘露醇-磷酸鹽保存液制備的紅細胞懸液。本發(fā)明所說的“ACD-B液”是指血液抗凝和保存用復方枸櫞酸鈉液。
      本發(fā)明所說的“全密封的多聯(lián)袋系統(tǒng)”是指由采血針、采血導管和含適量抗凝劑的溶劑所組成的采血袋以及由導管和若干個塑料容器所組成的轉移袋共同形成的用于采血和血液成分的分離制備保存的全密封塑料容器系統(tǒng)。本發(fā)明所說的“多聯(lián)袋技術”是指利用全密封的多聯(lián)袋系統(tǒng),依據不同的離心轉速、時間和溫度,在適宜的條件下進行血液成分的制備。現針對本發(fā)明的技術指標、工藝路線和制備步驟,分別詳述如下1.可用于制備MAP懸浮紅細胞的不足量血的技術指標可用于制備MAP懸浮紅細胞的不足量血的技術指標必須同時滿足以下特定標準方可進行相關血液成分的制備。(1).實際采血量彡66%采血標示量;(2).分離袋內容物的pH值彡6.1 ;(3).儲存溫度須在血液采集后立即置于2-6°C環(huán)境中儲存;(4).制備時間須在血液采集后4小時之內分離;2.不足量血制備MAP懸浮紅細胞的工藝路線見附圖
      ,附圖是“不足量血制備MAP懸浮紅細胞的工藝路線圖”。3.不足量血制備MAP懸浮紅細胞的制備步驟
      具體實施例方式本發(fā)明使用中遵照《中國輸血技術操作規(guī)程》(血站部分)、中華人民共和國國家標準GB18469-2001以及《全血與成分血質量要求》進行分離和制備,操作如下取用三聯(lián)袋或四聯(lián)袋采集的A⑶-B抗凝、實際采血量> 66%采血標示量、血液采集后立即置2-6°C儲存小于4小時的原料全血,在溫度為2-6°C的離心機中,以3500g的離心力,離心15分鐘,將白膜層以及其上的液體成分擠到轉移袋中,用高頻熱合機熱合封口并與母袋分離,檢測轉移袋內容物的PH值;如轉移袋內容物?!1值> 6. 1,則稱重母袋中的紅細胞,并按紅細胞和紅細胞添加液為2 1的比例添加MAP紅細胞添加液,制備MAP懸浮紅細胞。鑒于在制備過程中無需利用白細胞濾器去除白細胞,當全密封的多聯(lián)袋系統(tǒng)帶有白細胞濾器時,應在進行制備前關閉濾器兩端連接軟管上的調節(jié)夾,或者用高頻熱合機熱合封口后去除濾器。實施例1采供血機構的A⑶-B抗凝的不足量血制備MAP懸浮紅細胞原料血為使用規(guī)格為300ml標示量、實際采血量為230ml的A⑶-B抗凝的四聯(lián)袋全血。制備前先確認該不足量血是否符合可用于制備MAP懸浮紅細胞的技術指標,待確認符合后,按以下步驟進行相關制備。將全血四聯(lián)袋檢查、配平后放入離心機后以相對離心力3500g,4°C離心15min ;離心機停穩(wěn)后打開離心機門,取出離心杯,輕輕從離心杯中取出血袋,并做離心后的外觀檢查,并觀察分層情況,用分漿夾將上層血漿和白膜層(約10-15ml)分離至轉移袋;檢測轉移袋內容物PH值,如內容物?!1值> 6. 1則繼續(xù)進行相關制備,否則停止制備;利用電子天平稱重母袋中的紅細胞(母袋+紅細胞的重量-母袋凈重);打開母袋與內容MAP紅細胞添加液子袋間的調節(jié)夾,按紅細胞和紅細胞添加液為2 1的比例使用電子天平將MAP紅細胞添加液擠入母袋中,充分混勻并熱和封口后即為MAP懸浮紅細胞。實施例2兒童自體輸血中A⑶-B抗凝的不足量血制備MAP懸浮紅細胞一體重為3^g、12歲兒童的擇期手術備血。鑒于患兒心血管和肺部情況穩(wěn)定、Hb 濃度> llg/dl和血清鐵正常,于術前Iw進行自體血的預儲存,使用規(guī)格為200ml標示量的全密封的三聯(lián)袋系統(tǒng)采集150mlA⑶-B抗凝的全血。以無菌技術采集采集患兒150mlA⑶-B抗凝的全血,采集后即刻將全血三聯(lián)袋檢查、配平后放入離心機后以相對離心力3500g,4°C離心15min ;離心機停穩(wěn)后打開離心機門,取出離心杯,輕輕從離心杯中取出血袋,并做離心后的外觀檢查,并觀察分層情況,用分漿夾將上層血漿分離至轉移袋;檢測轉移袋內容物PH值,如內容物pH值>6. 1則繼續(xù)進行相關制備,否則停止制備;利用電子天平稱重母袋中的紅細胞(母袋+紅細胞的重量-母袋凈重);打開母袋與內容MAP紅細胞添加液子袋間的調節(jié)夾,按紅細胞和紅細胞添加液為 2 1的比例使用電子天平將MAP紅細胞添加液擠入母袋中,充分混勻并熱和后封口,制備 MAP懸浮紅細胞備用。
      權利要求
      1.一種利用不足量血制備MAP懸浮紅細胞的方法,其特征在于該方法包括以下步驟(1)建立了可用于制備MAP懸浮紅細胞的不足量血的技術指標;(2)確立了不足量血制備MAP懸浮紅細胞的工藝路線;(3)建立了利用不足量血制備MAP懸浮紅細胞的具體方法。
      2.根據權利要求1所述的利用不足量血制備MAP懸浮紅細胞的方法,其特征在于所述的可用于制備MAP懸浮紅細胞的不足量血的技術指標為實際采血量> 66%采血標示量、血液采集后立即置2-6°C儲存小于4小時的原料全血和轉移袋內容物pH值> 6. 1。
      3.根據權利要求1所述的利用不足量血制備MAP懸浮紅細胞的方法,其特征在于所述的不足量血制備MAP懸浮紅細胞的工藝路線為確認用于制備MAP懸浮紅細胞的不足量血的技術指標、分離不足量全血紅細胞和添加MAP紅細胞添加液。
      4.根據權利要求1所述的利用不足量血制備MAP懸浮紅細胞的方法,其特征在于所述的利用不足量血制備MAP懸浮紅細胞的具體方法為將符合條件的原料全血,在2-6°C的離心機中,以3000-3500g的離心力,離心15-20min,用分漿夾將上層血漿和/或白膜層分離至轉移袋中,如轉移袋內容物口11值> 6. 1,則稱重母袋中的紅細胞,并按紅細胞和紅細胞添加液為2 1的比例添加MAP紅細胞添加液,充分混勻并熱和封口。
      全文摘要
      本發(fā)明涉及利用ACD-B抗凝的不足量血制備MAP懸浮紅細胞的技術指標、工藝路線和具體方法。該方法通過建立可用于制備MAP懸浮紅細胞的不足量血的相關技術指標,如實際采血量、轉移袋內容物的pH值、儲存溫度和制備時間,確立了不足量血制備MAP懸浮紅細胞的工藝路線和制備參數。其具體方法是使用全密封的多聯(lián)袋系統(tǒng)采集ACD-B抗凝、實際采血量≥66%采血標示量、血液采集后立即置2-6℃儲存小于4小時的原料全血,在2-6℃的離心機中,以3000-3500g的離心力,離心15-20min,用分漿夾將上層血漿和/或白膜層分離至轉移袋中,如轉移袋內容物pH值≥6.1,則稱重母袋中的紅細胞,并按紅細胞和紅細胞添加液為2∶1的比例添加MAP紅細胞添加液,制備MAP懸浮紅細胞。
      文檔編號C12N5/078GK102373178SQ20101025629
      公開日2012年3月14日 申請日期2010年8月18日 優(yōu)先權日2010年8月18日
      發(fā)明者劉毅, 劉衍春, 葉小凡, 吳敏慧, 唐榮才, 李政剛, 梁文飚, 王泰瑞, 紀云鵬, 蔡莉, 薛敏, 鄭凌, 郭銘華, 馬玲, 魏鵬, 黃兵 申請人:江蘇省血液中心
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