專利名稱：與植物抗鹽性相關的蛋白及其編碼基因與應用的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及生物技術領域中與植物抗鹽性相關的蛋白及其編碼基因與應用。
背景技術：
鹽脅迫破壞植物體內(nèi)的離子平衡，造成滲透脅迫，進而引起植物體內(nèi)發(fā)生一系列的生理和代謝反應，影響植物的生長發(fā)育。今天全世界20%的農(nóng)田受到高鹽脅迫的影響， 高鹽脅迫使作物產(chǎn)量降低，極大地影響了農(nóng)業(yè)生產(chǎn)。由于植物的耐鹽的復雜性，由多基因控制，利用傳統(tǒng)育種的方法來提高作物的抗鹽能力十分困難。利用基因工程手段改良作物的耐高鹽能力，是我國以及世界農(nóng)業(yè)急需解決的重大課題，也是當前生物和現(xiàn)代農(nóng)業(yè)技術領域的研究熱點。近些年來，人們在生理、生化、分子和遺傳等層面上對植物耐鹽機理做了大量工作。當前的研究認為，要達到離子平衡，植物必須要進行三方面的相互聯(lián)系的調(diào)節(jié)。首先必須防止植物受到毒害，其次植物在逆境下要重建一個平衡的體內(nèi)環(huán)境，最后生長必須可以恢復。因此，挖掘與這三方面相關的基因資源，篩選出有顯著作用的基因，通過轉(zhuǎn)基因來提高作物的抗鹽能力，成為我們工作的重點。由于植物的抗鹽能力是由多基因控制，單個功能基因的作用是十分有限的。轉(zhuǎn)錄因子能夠調(diào)控下游一系列基因的表達，通過導入轉(zhuǎn)錄因子可以使作物的綜合性狀得到改
良ο

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的一個目的是提供與植物抗鹽性相關的蛋白及其編碼基因。本發(fā)明所提供的與植物抗鹽性相關的蛋白，名稱為LcDREB21，來源于羊草(Leymus chinensis)，是如下(a)或(b)的蛋白質(zhì)(a)由序列表中序列1所示的氨基酸序列組成的蛋白質(zhì)；(b)將序列表中序列1的氨基酸殘基序列經(jīng)過一個或幾個氨基酸殘基的取代和/ 或缺失和/或添加且與抗逆性相關的由(a)衍生的蛋白質(zhì)。所述與植物抗鹽性相關蛋白的編碼基因也屬于本發(fā)明的保護范圍。所述與植物抗鹽性相關蛋白的編碼基因為如下1)-4)中任一所述的基因1)序列表中序列2自5’末端起第47位到第883位核苷酸所示的DNA分子；
2)序列表中序列2所示的DNA分子；3)在嚴格條件下與1)或2)所示的DNA分子雜交且編碼所述蛋白的基因；4)與1)或2)或3)的基因具有90%以上的同源性且編碼所述蛋白的基因。上述嚴格條件可為用6XSSC，0. 5% SDS的溶液，在65°C下雜交，然后用2XSSC， 0. 1 % SDS 和 1 X SSC, 0. 1 % SDS 各洗膜一次。序列表中的序列2由949個堿基組成，其開放閱讀框架(ORF)為自5'末端第47 位-第880位堿基，編碼氨基酸序列是序列表中序列1所示的蛋白。含有所述與植物抗鹽性相關蛋白的編碼基因的表達盒、重組表達載體、轉(zhuǎn)基因細胞系或重組菌也屬于本發(fā)明的保護范圍。所述重組表達載體是在P3301-121載體的多克隆位點間插入所述與植物抗鹽性相關蛋白的編碼基因得到的重組表達載體；所述p3301-121載體是通過包括如下步驟的方法得到的(1)將pCAMBIA3301載體經(jīng)過HindIII和EcoRI雙酶切，回收載體大片段；(2)將pBI121載體經(jīng)過HindIII和EcoRI雙酶切，回收包含⑶S基因的片段；(3)將步驟⑴中回收的載體大片段與步驟(2)中回收的包含⑶S基因的片段連接，得到重組載體P3301-121。所述pCAMBIA3301載體購自CAMBIA公司；所述pBI121載體購自Clontech公司。所述重組菌為重組酵母菌。擴增所述與植物抗鹽性相關蛋白的編碼基因全長或其任一片段的引物對也屬于本發(fā)明的保護范圍。所述引物對中，一條引物序列如序列表中序列3所示，另一條引物序列如序列表中序列4所示。本發(fā)明的另一個目的是提供一種培育轉(zhuǎn)基因植物的方法。本發(fā)明所提供的培育轉(zhuǎn)基因植物的方法，是將所述與植物抗鹽性相關蛋白的編碼基因?qū)肽康闹参镏?，得到抗鹽性增強的轉(zhuǎn)基因植物。所述與植物抗鹽性相關蛋白的編碼基因是通過所述重組表達載體導入目的植物中。所述目的植物為雙子葉植物或單子葉植物；所述雙子葉植物為擬南芥?？捎矛F(xiàn)有的植物表達載體構建含有LcDREB21基因的重組表達載體。所述植物表達載體包括雙元農(nóng)桿菌載體和可用于植物微彈轟擊的載體等，如pCAMBIA1302、pBinl9、 pCAMBIA2301、pCAMBIA1301-UbiN或其它衍生植物表達載體。攜帶有本發(fā)明的與植物抗鹽性相關蛋白的編碼基因LcDREB21的植物表達載體可通過Ti質(zhì)粒、Ri質(zhì)粒、植物病毒載體、直接DNA轉(zhuǎn)化、顯微注射、電導、農(nóng)桿菌介導等常規(guī)生物學方法轉(zhuǎn)化到植物細胞或組織中。被轉(zhuǎn)化的植物宿主既可以是小麥、水稻、玉米、短柄草等單子葉植物，也可以是擬南芥、煙草、 大豆、黃瓜、番茄、棉花、楊樹、苜宿等雙子葉植物。本發(fā)明所提供的與植物抗鹽性相關蛋白的編碼基因LcDREB21受高鹽誘導，具有激活下游基因的能力，可作為植物抗鹽基因工程的候選基因，用來改良植物的抗鹽能力，對于培育抗逆性提高的羊草及其他植物新品種具有重要的理論和實際意義，可用于農(nóng)牧業(yè)和生態(tài)環(huán)境治理所需的抗性植物品種的培育與鑒定，具有較高的實際應用價值，在農(nóng)業(yè)、畜牧業(yè)領域具有廣闊的應用前景。


圖1為經(jīng)400mM NaCl處理的羊草幼苗總RNA的瓊脂糖凝膠電泳檢測結果。圖2為5' RACE產(chǎn)物的瓊脂糖凝膠電泳檢測結果。圖3為LcDREB21基因的組織特異性表達分析結果。圖4為LcDREB21基因在400mM NaCl處理不同時間下的表達結果。圖 5 為 pBridge-BD_LcDREB21 的 PCR 鑒定結果。
圖6為pBridge-BD_LcDREB21的雙酶切鑒定結果。圖7為轉(zhuǎn)LcDREB21基因的酵母菌株及轉(zhuǎn)空載體對照酵母菌株在不含His和Trp 的SD培養(yǎng)基上的生長情況。圖8重組表達載體p3301-121_LcDREB21的構建過程圖。圖9為鹽脅迫處理條件下轉(zhuǎn)LcDREB21基因擬南芥抗鹽性分析。圖10為p3301-121載體的構建過程。
具體實施例方式下述實施例中所使用的實驗方法如無特殊說明，均為常規(guī)方法。下述實施例中所用的材料、試劑等，如無特殊說明，均可從商業(yè)途徑得到。實施例1、與植物抗鹽性相關的蛋白及其編碼基因的獲得和功能驗證一、與植物抗鹽性相關的蛋白及其編碼基因的獲得1、植物材料處理及總RNA的提取以羊草(吉生一號，購自吉林省吉生羊草良種站)幼苗為材料，400mMNaCl處理10 小時后提取其總RNA，進行瓊脂糖凝膠電泳檢測，結果如圖1所示。結果表明，所提取的 RNA有兩條明顯的電泳條帶，從上到下依次為^S RNA和18S RNA，表明獲得了純度較高、較完整的總RNA。2、利用妨4技術對羊草轉(zhuǎn)錄組進行測序首先利用MACS mRNA分離試劑盒(購自美天旎公司)處理上述步驟1提取的 RNA得到mRNA，然后反轉(zhuǎn)錄得到cDNA，將得到的cDNA插入λ -FLC-III載體然后包裝，得到 1. IX 106個噬菌斑。噬菌體經(jīng)過離體處理得到的質(zhì)體轉(zhuǎn)化大腸桿菌感受態(tài)細胞DHlOB (購自杰美公司)，然后用包裝機器(Genetix公司)包裝。包裝完畢后轉(zhuǎn)移到384微孔板，DNA 測序模板用RCA方法，使用TempliWii DNA擴增試劑盒(通用生物公司)得到。最后測序用BigDye Terminator v3. ICycle Sequencing Kit，在 ABI 3700 (應用生物系統(tǒng)公司) 測序儀上完成。得到的序列經(jīng)拼接后用BLAST程序分析，發(fā)現(xiàn)經(jīng)拼接后的DNA片段所在基因可能屬于DREB轉(zhuǎn)錄因子。3、LcDREB21基因5'端序列的克隆根據(jù)步驟2中4M測序得到的序列設計引物，具體的引物序列如下LcDREB21R 5' -TGAAGTTATCCCTATTGCTCCGCATGAC-3‘。以步驟1提取的經(jīng)400mM NaCl處理的羊草幼苗的總RNA為模板，采用Clontech 公司的5RACE試劑盒并參照試劑盒說明書，反轉(zhuǎn)錄合成其第一鏈cDNA。反應體系為 1 μ L RNA, 1 μ L 5 ‘ -CDS primerA, 1 μ L SMART II A oligo, 1 μ L DTT(20mM)，1 μ L dNTPMix(10mM),luL MMLV ReverseTranscriptase, 2 μ L 5X First-Strand Buffer,2y L SterileH2O0 反應條件為70°C 2min，冰上 2min，42°C 1. 5h，72°C 7min。以獲得的第一鏈cDNA為模板，引物LcDREB21R與引物UPM(Clontech公司，序列 5 ‘ -CTAATACGACTCACTATAGGGCAAGCAGTGGTATCAACGCAGAGT-3 ‘)配對進行 PCR 擴增；PCR 反應體系為5' -Race-Ready cDNA 0. 5 μ L, 10XUPM 1 μ L，10 μ M 的 LcDREB21R 0. 2μ 1, Master Mix 8. 3 μ L· 反應條件為先 94 °C 30s、72 °C 3min，5 個循環(huán)；然后 94 °C 30s、 70°C 30s,72°C 3min，5 個循環(huán)；最后 94°C 30s,68°C 30s,72°C 3min，25 個循環(huán)。
反應結束后，對PCR擴增產(chǎn)物進行瓊脂糖凝膠電泳檢測，結果如圖2所示。其中，泳道M ^i*DL2000Plus DNA Marker (北京全式金生物技術有限公司)的DNA分子量標準，泳道1為5' RACE PCR擴增產(chǎn)物，結果表明，經(jīng)PCR擴增獲得了長度約為IOOObp的目的片段?；厥詹⒓兓?' RACE產(chǎn)物，將其連接到PMD-18T載體(購自TaKaRa公司)上，連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化大腸桿菌DH5ci感受態(tài)細胞(北京全式金生物技術有限公司)，篩選陽性克隆進行菌液PCR鑒定，提取陽性克隆的質(zhì)粒進行測序。結果表明，該片段的長度為949bp，其脫氧核糖核苷酸序列如序列表中序列2所示。3、LcDREB21基因全長cDNA序列的獲得及PCR檢測利用DNAMAN和OMIGA軟件對步驟2獲得的DNA片段進行生物信息學分析，該片段序列全長949bp，自5'末端第47位到第880位為0RF，編碼序列如序列表中序列1所示的蛋白質(zhì)，該蛋白質(zhì)由278個氨基酸殘基組成，將該蛋白命名為LcDREB21。二、LcDREB21基因的組織特異性表達分析分別提取步驟一中經(jīng)400mM NaCl處理的羊草(吉生一號，吉林省吉生羊草良種站)幼苗的葉鞘、莖、葉、根、根莖芽、穗和根莖七種組織的總RNA。設計了 LcDREB21的 RT-PCR 一對引物 LcDREB21RTl 和 LcDREB21RT2，序列如下LcDREB21RT 1:5' -GTCCAGAGAATTCAAACTGC-3‘禾口
LcDREB21RT2 5‘ -TGAGAAAAGACTAAACCCGT-3‘。利用LcDREB21RTl和LcDREB21RT2進行RT-PCR分析，同時以Actin基因作為內(nèi)標。反應結束后，對PCR產(chǎn)物進行瓊脂糖凝膠電泳檢測，結果如圖3所示。電泳結果表明LcDREB21在葉中表達最強，在根莖和穗中表達較弱。三、LcDREB21在高鹽脅迫條件下的表達模式分析將正常生長8周的羊草(吉生一號，吉林省吉生羊草良種站)幼苗浸泡在高鹽 (400mM NaCl)溶液中，分別在0、1、3、8、12和M小時取材。分別提取上述不同處理時間的羊草幼苗的總RNA，并進行RT-PCR分析，結果如圖4所示。結果表明，400mMNaCl處理后， LcDREB21基因在1、3和8小時的轉(zhuǎn)錄水平明顯得到提高，說明LcDREB21表達受到高鹽誘導。四、LcDREB21轉(zhuǎn)錄激活功能驗證根據(jù)上述實施例1擴增得到的LcDREB21基因設計引物，加入Mil和I3StI酶切位點，引物序列如下引物 1 GTCGACTGATGGAGACCGGGGGTAGCAA(下劃線部分為 SalI 酶切位點)，引物2 CTGCAGCTAATATGAGAAAAGACTAA(下劃線部分為 PstI 酶切位點)，以人工合成的序列表中序列2所示的LcDREB21基因為模板，進行PCR擴增，將擴增產(chǎn)物經(jīng)Mil和I3StI酶切，回收酶切后的LCDREB21基因片段；同時，用Mil和I3StI 酶切酵母表達載體PBridge(購自CAMBIA公司)，回收載體大片段；將回收的載體大片段與回收的酶切后的LcDREB21基因片段連接，得到目的質(zhì)粒。用引物LcDREB21RTl和 LcDREB21RT2對目的質(zhì)粒進行PCR鑒定，結果如圖5所示，泳道2為DL2000DNA分子量標準 (北京全式金生物技術有限公司)。泳道1為PCR產(chǎn)物，長度約為830bp的擴增片段。用 SalI和I^stI對目的質(zhì)粒進行雙酶切鑒定，結果如圖6所示，其中，泳道1為15K DNA分子量標準(北京全式金生物技術有限公司)，泳道2為酶切產(chǎn)物的PCR擴增結果，獲得了長度分別為6500bp和834bp的酶切產(chǎn)物。表明重組載體構建正確，將得到的重組載體命名為 pBridge-BD-LcDREB21。將重組載體 pBridge-BD_LcDREB21 導入到含有 His3 和 LacZ 報道子的酵母AH109株系(購自美國Clontech公司，商品目錄號K1612-1)中，同時將酵母表達載體pBridge轉(zhuǎn)入酵母AH109株系作為空載體對照，將pGAL4(購自美國Clontech公司)轉(zhuǎn)入酵母AH109株系作為正對照。將三種轉(zhuǎn)基因酵母菌在不含His和Trp的SD培養(yǎng)基(SD/-His-Trp)上進行培養(yǎng)，結果分別如圖7中a和b所示。圖7中a表示上述三種轉(zhuǎn)基因酵母在SD培養(yǎng)基(SD/-His-Trp)上的生長情況，圖7中b為將圖7中a的酵母用含有 X-gal的Z-buffer顯色后的情況。在圖7中a和圖7中b中，1為轉(zhuǎn)LcDREB21基因的酵母菌株，2為轉(zhuǎn)入pGAL4作為正對照的酵母菌株，3為轉(zhuǎn)空載體對照酵母菌株。結果表明，轉(zhuǎn)空載體對照酵母菌株在不含His和Trp的SD培養(yǎng)基上不能生長，而轉(zhuǎn)LcDREB21基因的酵母菌株和轉(zhuǎn)入PGAL4作為正對照的酵母菌株能夠在不含His和Trp的SD培養(yǎng)基上生長并顯藍色。結果表明，LcDREB21基因具有轉(zhuǎn)錄激活活性。實施例2、轉(zhuǎn)LcDREB21基因擬南芥植株的抗逆性分析一、獲得轉(zhuǎn)LcDREB21基因擬南芥植株根據(jù)上述實施例1擴增得到的LcDREB21基因設計引物，加入BamHI和)(baI酶切位點，引物序列如下引物 3 :ATGGATCCATGGAGACCGGGGGTAGCAAGC (下劃線部分為 BamHI 位點)(序列表中序列3)，引物 4 :GTCTAGACTAATATGAGAAAAGACTAAACCCG (下劃線部分為 XbaI 位點)(序列表中序列4)，以人工合成的序列表中序列2所示的LcDREB21基因為模板，用引物3和引物4進行PCR擴增，將擴增得到的含BamHI和)(bal酶切位點PCR產(chǎn)物克隆入pMD18Simple_T載體(TaKaRa 公司)，命名為 pMD18_LcDREB21。將 pMD18_LcDREB21 利用 BamHI 和 XbaI 進行雙酶切，回收約840bp的LcDREB21基因片段，同時用BamHI和XbaI雙酶切p3301_121載體，回收約14200bp的載體大片段，將回收的載體大片段與回收的約840bp的LcDREB21基因片段連接，得到目的質(zhì)粒。將目的質(zhì)粒轉(zhuǎn)入大腸桿菌中，抗性篩選，挑取陽性克隆，將陽性克隆進行液體培養(yǎng)，提取陽性克隆質(zhì)粒進行測序驗證，測序結果表明在載體P3301-121的 BamHI和)(bal酶切位點間插入了序列表中序列2第47bp到883bp所示的LcDREB21基因片段，證明質(zhì)粒構建正確。將獲得含有LcDREB21完整閱讀框的植物雙元表達載體命名為 p3301-121-LcDREB21，構建過程如圖8所示。構建好的植物表達載體p3301-121_LcDREB21 通過凍融法轉(zhuǎn)入農(nóng)桿菌EHA105 (購自北京拜爾迪生物技術有限公司)，進行除草劑抗性篩選，挑取陽性克隆，將陽性克隆進行液體培養(yǎng)，用陽性克隆菌液浸染擬南芥花序的方法進行擬南芥轉(zhuǎn)化，轉(zhuǎn)化后暗培養(yǎng)2天，進行第二次浸染，然后正常培養(yǎng)到收獲種子。收獲的種子在含除草劑抗性的平板(l/2MS+10mg/L草胺磷)上進行抗性篩選，篩選為陽性的苗，收獲種子(Tl)，收獲的種子在含除草劑的平板(l/2MS+10mg/L草胺磷)上種植，篩選后代分離比為 3 1的株系，收獲其種子(T2)，用其小苗(T3)來做抗逆實驗。按照獲得轉(zhuǎn)LcDREB21基因擬南芥的方法，將空載體P3301-121轉(zhuǎn)化擬南芥植株，得到轉(zhuǎn)空載體對照擬南芥植株。所述p3301-121載體是通過包括如下步驟的方法得到的(1)將 pCAMBIA3301 載體(購自 CAMBIA 公司)經(jīng)過 Hind III 和 EcoR I 雙酶切，回收llM6bp的載體大片段；(2)將pBI121載體(購自Clontech公司)(含35S啟動子，GUS報告基因，Tnos) 也經(jīng)過Hind III和EcoR I雙酶切，回收包含⑶S基因的^42bp的片段；(3)將步驟⑴中回收的載體大片段與步驟(2)中回收的包含⑶S基因的片段經(jīng) T4DNA酶連接，得到重組載體p3301-121 (圖10)。二、轉(zhuǎn)LcDREB21基因擬南芥植株的抗逆性分析將上述步驟一獲得的轉(zhuǎn)LcDREB21基因擬南芥植株的種子、轉(zhuǎn)空載體對照擬南芥植株的種子和野生型擬南芥種子分別種于含除草劑培養(yǎng)基(l/2MS+10mg/L草胺磷)上，萌發(fā)生長(萌發(fā)生長條件為溫度為22-24°C，16小時光照-8小時黑暗的光周期，空氣濕度為 60% -80% ) 一周后，移栽到土中，在培養(yǎng)室培養(yǎng)(培養(yǎng)室培養(yǎng)的條件溫度為22-24°C，16 小時光照8小時黑暗的光周期，空氣濕度為50-60% ) 一周后進行400mM的NaCl脅迫處理 (將擬南芥苗浸入400mM的NaCl溶液中)。。脅迫處理12小時觀察表型，觀察到脅迫處理第7天。結果顯示，轉(zhuǎn)LcDREB21基因擬南芥苗在脅迫處理第7天有96%的植株沒有明顯的表型變化，而轉(zhuǎn)空載體對照擬南芥苗全都出現(xiàn)了萎蔫變黃的鹽害癥狀(圖9，圖中A為轉(zhuǎn)空載體對照擬南芥苗，B為轉(zhuǎn)LcDREB21基因擬南芥苗)。野生型擬南芥苗的表型與轉(zhuǎn)空載體對照擬南芥苗表型一致。該實驗結果表明本發(fā)明的LcDREB21基因可以增強轉(zhuǎn)基因植物的抗鹽能力。
權利要求
1.一種蛋白，是如下(a)或(b)的蛋白質(zhì)(a)由序列表中序列1所示的氨基酸序列組成的蛋白質(zhì)；(b)將序列表中序列1的氨基酸殘基序列經(jīng)過一個或幾個氨基酸殘基的取代和/或缺失和/或添加且與植物抗鹽性相關的由(a)衍生的蛋白質(zhì)。
2.權利要求1所述蛋白的編碼基因。
3.根據(jù)權利要求2所述的編碼基因，其特征在于所述蛋白的編碼基因為如下1)-4) 中任一所述的基因.1)序列表中序列2自5’末端起第47位到第883位核苷酸所示的DNA分子；.2)序列表中序列2所示的DNA分子；.3)在嚴格條件下與1)或2)所示的DNA分子雜交且編碼所述蛋白的基因；.4)與1)或2)或3)的基因具有90%以上的同源性且編碼所述蛋白的基因。
4.含有權利要求2或3所述編碼基因的表達盒、重組表達載體、轉(zhuǎn)基因細胞系或重組菌。
5.根據(jù)權利要求4所述的重組表達載體，其特征在于所述重組表達載體是在 P3301-121載體的多克隆位點間插入所述編碼基因得到的重組表達載體；所述P3301-121載體是通過包括如下步驟的方法得到的.(1)將pCAMBIA3301載體經(jīng)過HindIII和EcoRI雙酶切，回收載體大片段；.(2)將pBI121載體經(jīng)過HindIII和EcoRI雙酶切，回收包含⑶S基因的片段；.(3)將步驟(1)中回收的載體大片段與步驟(2)中回收的包含GUS基因的片段連接，得到重組載體P3301-121。
6.根據(jù)權利要求4所述的重組菌，其特征在于所述重組菌為重組酵母菌。
7.擴增權利要求2或3所述編碼基因全長或其任一片段的引物對，所述引物對中，一條引物序列如序列表中序列3所示，另一條引物序列如序列表中序列4所示。
8.一種培育轉(zhuǎn)基因植物的方法，是將權利要求2或3所述的編碼基因?qū)肽康闹参镏校?得到抗鹽性高于所述目的植物的轉(zhuǎn)基因植物。
9.根據(jù)權利要求8所述的方法，其特征在于權利要求2或3所述的編碼基因是通過權利要求4或5所述的重組表達載體導入目的植物中。
10.根據(jù)權利要求8或9中所述的方法，其特征在于所述目的植物為雙子葉植物或單子葉植物；所述雙子葉植物為擬南芥。
全文摘要
本發(fā)明公開了與植物抗鹽性相關的蛋白及其編碼基因與應用。本發(fā)明所提供的與植物抗鹽性相關的蛋白是如下(a)或(b)的蛋白質(zhì)(a)由序列表中序列1所示的氨基酸序列組成的蛋白質(zhì)；(b)將序列表中序列1的氨基酸殘基序列經(jīng)過一個或幾個氨基酸殘基的取代和/或缺失和/或添加且與植物抗鹽性相關的由(a)衍生的蛋白質(zhì)。本發(fā)明所提供的與植物抗鹽性相關蛋白的編碼基因LcDREB21受高鹽誘導，具有激活下游基因的能力，可作為植物抗鹽基因工程的候選基因，用來改良植物的抗鹽能力，對于培育抗逆性提高的羊草及其他植物新品種具有重要的理論和實際意義。
文檔編號C12N15/63GK102464709SQ20101054866
公開日2012年5月23日 申請日期2010年11月17日 優(yōu)先權日2010年11月17日
發(fā)明者劉公社, 彭獻軍, 李曉峰, 程麗琴, 馬興勇, 齊冬梅 申請人:中國科學院植物研究所