專利名稱：一種天然紅色素的生產(chǎn)方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種發(fā)酵生產(chǎn)目標(biāo)物，特別是一種天然紅色素的生產(chǎn)方法。
背景技術(shù)：
色素廣泛應(yīng)用于食品、化妝等領(lǐng)域。包括人工合成和天然色素兩種，人工合成的色 素由于存在不同程度的毒性，已被禁止或限制使用，而天然色素越來(lái)越受到人們的重視。目 前生產(chǎn)天然色素的方法有兩種，一是從植物中提取，但成本高；二是用微生物法生產(chǎn)，其優(yōu) 點(diǎn)是工藝簡(jiǎn)單，生產(chǎn)不受場(chǎng)地、季節(jié)限制，所用設(shè)備簡(jiǎn)單。目前國(guó)內(nèi)外均有利用細(xì)菌和紅酵 母發(fā)酵生產(chǎn)紅色素的報(bào)道，但由于所選用菌種的產(chǎn)量低，提取成本高難以工業(yè)化生產(chǎn)。在青 霉屬中Penicillium var. armeniaca產(chǎn)生的深紅色色素已由捷克的Ascolor Biotech公司 進(jìn)行了商業(yè)化開(kāi)發(fā)生產(chǎn)，但至今尚未見(jiàn)到有關(guān)利用青霉菌和酵母二元發(fā)酵生產(chǎn)紅色素的報(bào) 道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明目的是提供一種工藝簡(jiǎn)單、產(chǎn)量高且成本低的一種天然紅色素的生產(chǎn)方 法。本發(fā)明的技術(shù)方案是，一種天然紅色素的生產(chǎn)方法，包括新西蘭青霉和熱帶假絲酵 母，菌株活化和培養(yǎng)基培養(yǎng)，其特征在于新西蘭青霉與熱帶假絲酵母菌懸液的體積比為 1-3 3-1，培養(yǎng)溫度為沈-36°C。本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)比較具有工藝簡(jiǎn)單、成本低和產(chǎn)量高的 顯著優(yōu)點(diǎn)。
具體實(shí)施例方式本發(fā)明所用的菌株一為熱帶假絲酵母(Candida tropicalis)，此菌株保藏 在河南師范大學(xué)AEM研究室，保存編號(hào)HSD07A;另一菌株為新西蘭青霉(Penicillium novae-zeelandiae)，保藏在河南師范大學(xué)AEM研究室，保存編號(hào)HSD07B。本發(fā)明有以下步驟1.菌株活化將青霉HSD07B和熱帶假絲酵母分別在PDA平板上活化培養(yǎng)，培養(yǎng)溫 度分別為和30°C。為使發(fā)酵效果更好，凍存的菌種一般需活化2-3次。2.將活化后的青霉HSD07B和熱帶假絲酵母分別接種至液體發(fā)酵培養(yǎng)基中，搖床 培養(yǎng)，溫度30°C，轉(zhuǎn)速150rpm，培養(yǎng)1天。所述發(fā)酵培養(yǎng)基配方為土豆200g，加水煮至土 豆酥而不爛，8層紗布過(guò)濾，加葡萄糖15g，磷酸二氫鉀2g，補(bǔ)水至IOOOml，pH值自然。3.將不同接種比例的(3 1 ;2 1 ;1 1 ;1 2 ;1 3)新西蘭青霉和熱帶假 絲酵母菌懸液接種至151發(fā)酵罐中，接種量為10%，通氣培養(yǎng)，攪拌器轉(zhuǎn)速600rpm，溫度控 制在^-36°C，pH 6，48小時(shí)后放罐，得深紅色發(fā)酵液。為使發(fā)酵效果更好，亦可先接種青霉HSD07B菌絲懸液，6小時(shí)后，再接種熱帶假絲 酵母菌懸液。發(fā)酵罐溶解氧00)的控制策略為發(fā)酵初期盡量增大D0，后期適當(dāng)較小D0。 溫度控制在30°C為最好。利用分光光度計(jì)檢測(cè)發(fā)酵液中紅色素的含量，當(dāng)色素色度(510nm處光吸收)不再增加，即可放罐。4.發(fā)酵液經(jīng)8層紗布過(guò)濾，5000rpm離心后，上清為深紅色色素水溶液，50°C旋轉(zhuǎn) 蒸發(fā)或冷凍真空干燥后，即可得到紅色素粗品。粗品中含有菌體蛋白等一些雜質(zhì)，經(jīng)乙醇或 丙酮提取后，45 °C旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)干燥后，即可得到黑色粉狀紅色素產(chǎn)品。本發(fā)明有以下二個(gè)實(shí)施例實(shí)施例1新西蘭青霉和熱帶假絲酵母不同接種比例對(duì)紅色素產(chǎn)生的影響新西蘭青霉和熱帶假絲酵母按上面所述“菌株活化”步驟進(jìn)行活化后，分別接種 到液體發(fā)酵培養(yǎng)基中，30°C，150rpm，搖床培養(yǎng)1天，制備菌懸液。而后，以不同接種比例 (3 1 ；2 1 ；1 1 ；1 2 ；1 3)將二者菌懸液接種至151發(fā)酵罐中，總接種量為10%， 通氣培養(yǎng)，攪拌器轉(zhuǎn)速600rpm左右，溫度控制在30°C，pH控制在6左右，48小時(shí)后放罐，色 素產(chǎn)量見(jiàn)下表1 表1不同接種比例對(duì)色素產(chǎn)量的影響
青霉與酵母接 色素產(chǎn)量
種比例(v/v)_(g/1)
3:14.3
_6]2:15.6
1:17.9
1:26.5
1:34.1實(shí)施例2不同培養(yǎng)溫度對(duì)紅色素產(chǎn)生的影響新西蘭青霉和熱帶假絲酵母按上面所述“菌株活化”步驟進(jìn)行活化后，分別接種到 液體發(fā)酵培養(yǎng)基中，30°C，150rpm，搖床培養(yǎng)1天，制備菌懸液。而后，將等體積的二菌菌懸 液接種至151發(fā)酵罐中，總接種量為10%，通氣培養(yǎng)，攪拌器轉(zhuǎn)速600rpm左右，溫度分別控 制在,28°C, 30°C，32°C，34°C，36°C，pH控制在6左右，48小時(shí)后放罐，色素產(chǎn)量見(jiàn)下表 2 表2不同溫度對(duì)色素產(chǎn)量的影響
度3)680246 溫(°(223333
色素產(chǎn)量 (g/1) 4~6
7.2 7.9 7.4
6.3 5.權(quán)利要求
1. 一種天然紅色素的生產(chǎn)方法，包括新西蘭青霉和熱帶假絲酵母，菌株活化和培養(yǎng)基 培養(yǎng)，其特征在于新西蘭青霉與熱帶假絲酵母菌懸液的體積比為1-3 3-1，培養(yǎng)溫度為 26-36 "C。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種天然紅色素的生產(chǎn)方法。本發(fā)明涉及一種發(fā)酵生產(chǎn)目標(biāo)物。本發(fā)明目的是提供一種工藝簡(jiǎn)單、產(chǎn)量高且成本低的一種天然紅色素的生產(chǎn)方法。本發(fā)明的技術(shù)方案是，一種天然紅色素的生產(chǎn)方法，包括新西蘭青霉和熱帶假絲酵母，菌株活化和培養(yǎng)基培養(yǎng)，新西蘭青霉與熱帶假絲酵母菌懸液的體積比為1-3∶3-1，培養(yǎng)溫度為26-36℃。本發(fā)明用于天然紅色素的生產(chǎn)方法。
文檔編號(hào)C12P7/26GK102140481SQ20101055379
公開(kāi)日2011年8月3日 申請(qǐng)日期2010年11月16日 優(yōu)先權(quán)日2010年11月16日
發(fā)明者王海磊 申請(qǐng)人:河南師范大學(xué)