專利名稱：模擬失重下多細胞聯合培養(yǎng)裝置的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種模擬失重環(huán)境下的多細胞聯合培養(yǎng)裝置。
背景技術：
在體情況下，機體生理功能的調控并非由單一種類的細胞孤立地完成，而是由多種細胞組成復雜的調控網絡共同實現。同時，受細胞分泌的細胞因子及相鄰細胞間通訊的相互作用，不同組織細胞之間的功能也有相互影響。因此，單純對于一種細胞的孤立性研究所得出的結果，不能完全反映細胞的在體功能狀態(tài)，甚至得出與細胞在體情況下相矛盾的結果。然而，目前對于多細胞的聯合培養(yǎng)技術全部是基于常規(guī)培養(yǎng)條件設計的，而缺乏模擬失重環(huán)境下的多細胞聯合培養(yǎng)裝置。當前，由于裝置的限制，對于細胞水平的模擬失重研究還僅僅停留在單一種類細胞的研究階段，迫切需要發(fā)明一種聯合培養(yǎng)裝置開展失重水平的多細胞聯合研究，以取得準確的研究結果。因此，研制一種模擬失重環(huán)境下的大樣本、操作簡便的多細胞聯合培養(yǎng)裝置十分必要。

發(fā)明內容
現有細胞水平的模擬失重研究限于硬件條件的限制，僅能開展單一種類的細胞研究，無法真實反映細胞的在體功能狀態(tài)。為了克服單一種類細胞研究的不足，本發(fā)明提供一種大樣本、操作簡便的多細胞聯合培養(yǎng)模擬失重裝置。本發(fā)明解決其技術問題所采用的技術方案是模擬失重下多細胞聯合培養(yǎng)裝置由培養(yǎng)瓶體、培養(yǎng)瓶旋蓋、半透膜、夾持片和十字形支架五部分組成，半透膜、夾持片及十字形支架用于培養(yǎng)細胞，培養(yǎng)瓶體、培養(yǎng)瓶旋蓋組成多細胞聯合培養(yǎng)瓶，并實現與細胞模擬失重裝置的對接。本發(fā)明的有益效果是根據研究目的的不同，本裝置既可以進行單一種類的細胞學研究，也可以進行兩種或兩種以上的多細胞研究，從而實現細胞收率高、操作簡便、可重復使用、并準確反映細胞在體功能狀態(tài)的目的。下面結合附圖對本發(fā)明進一步說明。

圖1示模擬失重下多細胞聯合培養(yǎng)裝置的基本結構。圖1中1.培養(yǎng)瓶旋蓋，2.培養(yǎng)瓶體，3.夾持片，4.半透膜，5.十字形支架。圖2示模擬失重下多細胞聯合培養(yǎng)裝置內部組件圖。圖2中A.半透膜，B.夾持片，C.十字形支架俯視圖，D.十字形支架側位圖。
具體實施例方式在圖1及圖2中，夾持片(3)為剛性材料，分為上下兩個頁，呈中空“口”字形并以軸相連接，兩頁可以一定阻尼上下開合，其作用為將半透膜(4)固定于兩頁之間。十字形支架(5)為剛性結構，十字形支架( 的四個末端各有兩個滑槽，固定有半透膜(4)的夾持片 (3)可垂直插入十字形支架( 的滑槽中并固定組成樣本架，每個十字形支架( 可最多插入四個夾持片C3)，以實現細胞的大批量培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶旋蓋(1)和培養(yǎng)瓶體( 均為透明聚苯乙烯注塑，培養(yǎng)瓶體( 呈中空圓柱形，圓柱形上端開口并有外螺紋，下端密閉，培養(yǎng)瓶旋蓋(1)具有內螺紋，可與培養(yǎng)瓶體( 上的外螺紋連接組成密閉完整的培養(yǎng)瓶結構。樣本架可放入培養(yǎng)瓶體O)中，當培養(yǎng)瓶旋蓋(1)擰緊后可通過擠壓作用將十字形支架(5) 固定在培養(yǎng)瓶體內部。培養(yǎng)瓶體( 可夾持固定在細胞模擬失重裝置上實現細胞水平的模擬失重。為研究模擬失重環(huán)境下細胞接觸及近距離細胞通訊對兩種不同種類貼壁細胞間的相互影響，使用時，將半透膜(4)裁剪至適宜尺寸，固定于夾持片(3)的上下兩個半頁之間，根據實驗目的，獲取并傳代兩種不同種類的貼壁細胞。穩(wěn)定培養(yǎng)后，在實驗前以0.5% 的胰蛋白酶消化一種細胞，用含血清培養(yǎng)液終止消化并制成細胞懸液，以lX105/ml的密度接種于半透膜的A面，細胞貼壁后，制作另一種細胞的懸液，翻轉半透膜(4)至B面向上，再以相同密度接種另一種目的細胞，待細胞貼壁完全后備用，各面做好標記。將消毒好的十字形支架( 置于培養(yǎng)瓶體O)中，加滿37°C預熱的細胞培養(yǎng)液，將上述制備好的夾持片( 分別插入十字形支架(5)的末端滑槽中，每個十字形支架( 最多可插四個夾持片(3)。吹打培養(yǎng)液以消除培養(yǎng)瓶中粘附的氣泡，擰緊培養(yǎng)瓶旋蓋(1)，并仔細觀察細胞培養(yǎng)體系，以培養(yǎng)瓶體O)內無氣泡為合格。將培養(yǎng)瓶體O)固定于細胞模擬失重裝置上完成后續(xù)研究工作。如為研究細胞因子等遠距離通信對兩種不同貼壁細胞間的相互影響，則可將不同種類的細胞單面貼壁于不同的半透膜(4)上，做好標記插在十字形支架( 上，每個十字形支架( 上各插入兩片含相同種類細胞的夾持片(3)，擰緊培養(yǎng)瓶旋蓋(1)后連接在細胞模擬失重裝置上，完成后續(xù)試驗。如為研究多細胞間的相互影響，則將各種類的細胞分別接種于不同的半透膜上，做好標記插于十字形支架( 上，其余步驟同上述。
權利要求
1. 一種模擬失重下多細胞聯合培養(yǎng)裝置，可用于細胞水平的模擬失重研究，由培養(yǎng)瓶旋蓋(1)、培養(yǎng)瓶體O)、夾持片(3)、半透膜(4)和十字形支架( 五部分組成，其特征為 半透膜(4)固定在夾持片C3)上后，雙面可各接種一種不同的細胞，將接種細胞后的夾持片 (3)插入十字形支架( ，并轉入培養(yǎng)瓶體( 中，充滿細胞培養(yǎng)液，旋緊培養(yǎng)瓶旋蓋(1)，形成一個密閉完整的多細胞聯合培養(yǎng)體系。本裝置可與細胞模擬失重裝置對接，實現多細胞的模擬失重效應。
全文摘要
本發(fā)明提供一種可用于模擬失重研究的多細胞聯合培養(yǎng)裝置，由培養(yǎng)瓶體、培養(yǎng)瓶旋蓋、半透膜、夾持片和十字形支架五部分組成，半透膜、夾持片及十字形支架用于培養(yǎng)細胞，培養(yǎng)瓶體、培養(yǎng)瓶旋蓋組成多細胞聯合培養(yǎng)瓶并實現與細胞模擬失重裝置的對接。本裝置既可用于模擬失重下單一種類細胞的培養(yǎng)，又可用于模擬失重下兩種或多種細胞的聯合培養(yǎng)，并充分考慮到細胞間的接觸及細胞通訊影響，可最大程度地滿足模擬失重環(huán)境下多細胞聯合培養(yǎng)的要求，解決了現有模擬失重裝置僅能培養(yǎng)單一細胞的不足，而且操作簡便，可反復使用。
文檔編號C12M3/00GK102485878SQ201010574419
公開日2012年6月6日 申請日期2010年12月1日 優(yōu)先權日2010年12月1日
發(fā)明者孫喜慶, 張舒, 王永春 申請人:中國人民解放軍第四軍醫(yī)大學