專利名稱：多菌種復(fù)合發(fā)酵制備水香薷煙用香料的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于煙草技術(shù)領(lǐng)域，涉及煙用香料的制備方法，具體地說是以水香薷為原料生產(chǎn)特色煙用香料的方法。
背景技術(shù)：
在煙草制品中，煙草的香氣和吸味是至關(guān)重要的，向消費者提供香氣和吸味滿意的卷煙制品是煙草行業(yè)產(chǎn)品設(shè)計者追求的目標(biāo)。目前，我國煙草中添加的煙用香料大多是采用傳統(tǒng)的方法萃取得到再加以配制的，即以多種天然提取物單體和合成單體混合調(diào)配而成，這樣所制得的煙用香料雖然生產(chǎn)操作簡單，但仍存在一些問題，例如在配制時單體種類混合較多后會帶來不協(xié)調(diào)，單體種類混合較少又存在香氣單調(diào)、對煙草改善性不足，容易被模仿，而且改善卷煙抽吸品質(zhì)效果不明顯等缺點。水香薷又名濕地香薷，地方又叫豬菜草、水薄荷、安南木。廣泛分布于廣東、廣西、 四川、云南、江西、湖南等省。常見于海拔1200-2800米的河邊、林下、路旁陰濕地，溝谷或水中。柔弱平鋪草本，莖平臥，被柔毛，常在下部節(jié)上生不定根。葉卵形，先端急尖或鈍，基部寬楔形，邊緣在基部以上具圓齒，葉面除中肋被微柔毛外余被分散疏柔毛，背面被極疏散的小疏柔毛及密布的腺點；葉柄有稀疏小疏柔毛。水香薷為食藥兼用品種，少數(shù)民族把水香薷當(dāng)菜食用。目前水香薷的相關(guān)研究報告不多，而關(guān)于水香薷開發(fā)香料的有關(guān)報道極為鮮見。 水香薷作為一種潛在的香料資源，極具開發(fā)利用價值。目前的天然煙用香料多為原料的直接萃取物，而以水香薷為原料利用微生物發(fā)酵技術(shù)生產(chǎn)特色煙用香料的方法未見報道。尤其是一直未見有關(guān)以云南和廣西水香薷為原料，制作水香薷發(fā)酵物并應(yīng)用于卷煙加香加料中，以改善卷煙吸味及香氣品質(zhì)的方法。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是彌補(bǔ)現(xiàn)有技術(shù)的空白，提供以水香薷為原料利用微生物發(fā)酵技術(shù)多菌種復(fù)合發(fā)酵生產(chǎn)特色煙用香料的方法。本發(fā)明的目的是通過以下技術(shù)方案實現(xiàn)的多菌種復(fù)合發(fā)酵制備水香薷煙用香料的方法，采用兩次發(fā)酵后再濃縮精制，制備得到水香薷煙用香料；第一次發(fā)酵方法步驟如下①菌種活化取微生物分離純化技術(shù)手段保種得到的水果酵母接種于準(zhǔn)備好的 PDA培養(yǎng)基上，在20°C 35°C恒溫環(huán)境中培養(yǎng)12 36小時，得到活化菌種；②種子液配制取活化好的菌種，接種于PDA液體培養(yǎng)基、110°C 125°C滅菌 20 40分鐘得到的一級種子培養(yǎng)液，置于搖床在20°C 35°C、150轉(zhuǎn)條件下培養(yǎng)1 2天， 得到一級種子液；③原料處理選取新鮮水香薷原料，按重量比水香薷原料溶劑=1 2 5加入溶劑打漿后，再按重量比水香薷原料溶劑=1 5 10加入溶劑，在70°C 180°C條件下熱回流提取1 3小時，過濾提取液，將濾液分裝、包裝滅菌得到無菌水香薷提取液；④發(fā)酵將培養(yǎng)好的一級種子液接種于無菌水香薷提取液中并充分混合均勻，接種重量比例為一級種子液無菌水香薷提取液=1 10 100，再將接種好的水香薷提取液置于20°c 35°C、150轉(zhuǎn)的搖床封閉發(fā)酵3 10天，得到一級發(fā)酵液；⑤滅活將一級發(fā)酵液放入110°C 125°C環(huán)境20 60分鐘，取出室溫放置至完全冷卻；第二次發(fā)酵方法步驟如下①菌種活化取微生物分離純化技術(shù)手段保種得到的煙葉細(xì)菌接種于提前準(zhǔn)備好的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上，在20°C 35°C恒溫環(huán)境中培養(yǎng)12 36小時，得到活化菌種；②種子液配制取活化菌種，接種于牛肉膏蛋白胨液體培養(yǎng)基、110°C 125°C滅菌20 40分鐘得到的二級種子培養(yǎng)液，置于20°C 35°C、150轉(zhuǎn)的搖床培養(yǎng)1 2天，得到二級種子液；③發(fā)酵將培養(yǎng)好的二級種子液接種于滅活后的一級發(fā)酵液中并充分混合均勻， 接種重量比例為二級種子液一級發(fā)酵物=1 10 100，再將接種好的一級發(fā)酵液置于 20°C 35°C，150轉(zhuǎn)的搖床封閉發(fā)酵3 10天，得到二級發(fā)酵液；提取精制步驟如下①濃縮取二級發(fā)酵液，減壓濃縮成浸膏；②精制向浸膏加入溶劑，重量比為膏體溶劑=1 1 6，待膏體充分回溶后， 在4°C _20°C環(huán)境靜置冷凍1 3天沉降除雜，過濾，減壓濃縮，即得到水香薷煙用香料。本發(fā)明所用的菌種為兩類，一類為水果酵母，另一類為煙葉細(xì)菌。所述活化菌種可以為菌曲或菌液形式。本發(fā)明所用的微生物培養(yǎng)基為牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基或PDA 培養(yǎng)基。所述一級種子液和二級種子液的成分為磷酸二氫鉀(K2H2PO4)、氯化鈉(NaCl)、 氯化鉀(KCl)、硫酸銨((NH4)2SO4)、硫酸鐵(FeSO4)、檸檬酸鈉(C6H5Na3O7 · 2H20)、硫酸鎂 (MgSO4 ·2Η20)、葡萄糖、蔗糖等中的一種或幾種。所述溶劑為水或醇類或水與醇類的復(fù)合溶劑。本發(fā)明方法具有以下優(yōu)點本發(fā)明采用了多菌種復(fù)合發(fā)酵，在原有的原料特征香氣保持的同時增加了果甜香，煙草本香。發(fā)酵之后產(chǎn)品酯類和內(nèi)酯類物質(zhì)明顯增多。與煙香協(xié)調(diào)性好，還具有降低刺激，柔和煙氣，改善余味的作用，該方法制取的香料對卷煙的香氣和吸味品質(zhì)改善作用效果明顯，使煙草清香、甜香突出，飽滿度和豐富性提升。本發(fā)明方法生產(chǎn)的香料產(chǎn)品可溶性好，應(yīng)用方便，可直接用于卷煙加香加料。所用在云南大部分地區(qū)均有分布，原料不僅獨特且應(yīng)用成本較低。生產(chǎn)過程使用的設(shè)備簡單，工藝易行，便于推廣應(yīng)用。下面結(jié)合實施例進(jìn)一步闡述本發(fā)明內(nèi)容。
具體實施例方式實施例1多菌種復(fù)合發(fā)酵制備水香薷煙用香料的方法，采用兩次發(fā)酵后再提取精制，制備得到水香薷煙用香料；第一次發(fā)酵方法步驟如下
①菌種活化取通過常規(guī)的微生物分離純化手段保種得到的車?yán)遄咏湍附臃N于提前準(zhǔn)備好的PDA培養(yǎng)基上，在20°C 35°C恒溫環(huán)境中培養(yǎng)12 36小時，得到活化菌種；②種子液配制取活化好的菌種，接種于PDA液體培養(yǎng)基、110°C 125°C滅菌 20 40分鐘得到的一級種子培養(yǎng)液，置于20°C 35°C、150轉(zhuǎn)的搖床培養(yǎng)1 2天，得到一級種子液；③原料處理選取新鮮的云南水香薷原料，按重量比水香薷原料水=1 2 5 打漿后，再按重量比水香薷原料水=1 5 10加入水，在70°C 180°C條件下熱回流提取1 3小時，然后過濾提取液，將濾液按100 300ml/瓶分裝，再在110°C 125°C、20 60分鐘條件下包裝滅菌，得到無菌水香薷提取液；④發(fā)酵將培養(yǎng)好的一級種子液接種于無菌水香薷提取液中，接種重量比例為一級種子液無菌水香薷提取液=1 10 100，使一級種子液和水香薷提取液充分混合均勻，將接種好的水香薷提取液置于20°c 35°C、150轉(zhuǎn)的搖床封閉發(fā)酵3 10天，得到一級發(fā)酵液；⑤滅活將一級發(fā)酵液放入110°C 125°C環(huán)境20 60分鐘，取出室溫放置至完全冷卻；第二次發(fā)酵方法步驟如下①菌種活化取通過常規(guī)的微生物分離純化技術(shù)手段保種得到的紅花大金元煙葉細(xì)菌接種于提前準(zhǔn)備好的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上，在20°C 35°C恒溫環(huán)境中培養(yǎng)12 36 小時，得到活化菌種；②種子液配制取活化好的菌種，接種于牛肉膏蛋白胨液體培養(yǎng)基110°C 125°C 滅菌20 40分鐘所得的二級種子培養(yǎng)液，置于20°C 35°C、150轉(zhuǎn)的搖床培養(yǎng)1 2天， 得到二級種子液；③發(fā)酵將培養(yǎng)好的二級種子液接種于滅活后的一級發(fā)酵液中，接種重量比例為二級種子液一級發(fā)酵物=1 10 100，使二級種子液和一級發(fā)酵液充分混合均勻。將接種好的一級發(fā)酵液置于20°c 35°C、150轉(zhuǎn)的搖床，封閉發(fā)酵3 10天，得到二級發(fā)酵液。濃縮精制步驟如下①濃縮取二級發(fā)酵液，采用常規(guī)的減壓濃縮方法將二級發(fā)酵液減壓濃縮成浸膏；②精制向浸膏中加入95%乙醇，加入重量比為膏體乙醇=1 1 6，使膏體充分回溶，再在4°C -20°C環(huán)境靜置冷凍1 3天沉降除雜，過濾，減壓濃縮，即得到水香薷煙用香料。實施例2 首先按如下步驟進(jìn)行第一次發(fā)酵①菌種活化取通過常規(guī)的微生物分離純化手段保種得到的西瓜酵母接種于提前準(zhǔn)備好的PDA培養(yǎng)基上，在20°C恒溫環(huán)境中培養(yǎng)36h，得到活化菌種；②種子液配制取活化好的菌種，接種于PDA液體培養(yǎng)基、120°C左右滅菌30min得到的一級種子培養(yǎng)液，置于30°C、150轉(zhuǎn)的搖床培養(yǎng)1 2d，得到一級種子液；③原料處理選取新鮮的廣西水香薷原料，按重量比水香薷原料水=1 2 (W/W)的打漿后，再按水香薷原料水=1 8(ff/ff)加入水，在100°C 120°C條件下熱回流提取2小時，然后過濾提取液，將濾液按100 300ml/瓶分裝，再在110°C 125°C、20 60min條件下包裝滅菌，得到無菌水香薷提取液；④發(fā)酵將培養(yǎng)好的一級種子液接種于無菌水香薷提取液中，接種比例為一級種子液無菌水香薷提取液=1 30 (W/W)，使一級種子液和水香薷提取液充分混合均勻，將接種好的水香薷提取液置于30°C、150轉(zhuǎn)的搖床封閉發(fā)酵5d，得到一級發(fā)酵液；⑤滅活將一級發(fā)酵液放入110°C 125°C環(huán)境50分鐘，取出室溫放置至完全冷卻；然后，按如下步驟進(jìn)行第二次發(fā)酵①菌種活化取通過常規(guī)的微生物分離純化技術(shù)手段保種得到的津巴布韋煙葉細(xì)菌接種于提前準(zhǔn)備好的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上，在25°C恒溫環(huán)境中培養(yǎng)25h，得到活化菌種；②種子液配制取活化好的菌種，接種于牛肉膏蛋白胨液體培養(yǎng)基，110°C 125°C滅菌30min所得的二級種子培養(yǎng)液，置于20°C 35°C、150轉(zhuǎn)的搖床培養(yǎng)2d，得到二級種子液；③發(fā)酵將培養(yǎng)好的二級種子液接種于滅活后的一級發(fā)酵液中，接種比例為二級種子液一級發(fā)酵物=1 40 (W/W)，使二級種子液和一級發(fā)酵液充分混合均勻。將接種好的-級發(fā)酵液置于20°C 35°C、150的轉(zhuǎn)搖床封閉發(fā)酵6d，得到二級發(fā)酵液。最后，按如下步驟進(jìn)行濃縮精制①濃縮取二級發(fā)酵液，采用常規(guī)的減壓濃縮方法將二級發(fā)酵液減壓濃縮成浸膏；②精制向浸膏中加入95%乙醇，加入比例為膏體乙醇=1 4(W/W)，使膏體充分回溶，再在-10°C環(huán)境靜置冷凍2d沉降除雜，過濾，減壓濃縮，即得到水香薷煙用香料。實施例3 第一次發(fā)酵方法步驟如下①菌種活化取通過常規(guī)的微生物分離純化手段保種得到的羊奶果酵母接種于提前準(zhǔn)備好的PDA培養(yǎng)基上，在35°C恒溫環(huán)境中培養(yǎng)12h，得到活化菌種；②種子液配制取活化好的菌種，接種于PDA液體培養(yǎng)基，125°C滅菌20min所得的一級種子培養(yǎng)液，置于20°C、150轉(zhuǎn)的搖床培養(yǎng)2d，得到一級種子液；③原料處理選取新鮮的云南水香薷原料，按水香薷原料乙醇=1 3(ff/ff)的打漿后，再按水香薷原料水=1 5(W/W)加入乙醇，在180°C熱回流提取lh，過濾，將濾液分裝，再在110°C 125°C，20 60min包裝滅菌，得到無菌水香薷提取液；④發(fā)酵將培養(yǎng)好的一級種子液接種于無菌水香薷提取液中，接種比例為一級種子液無菌水香薷提取液=1 10 (W/W)，使一級種子液和水香薷提取液充分混合均勻，將接種好的水香薷提取液置于35°C，150轉(zhuǎn)的搖床封閉發(fā)酵3d，得到一級發(fā)酵液；⑤滅活將一級發(fā)酵液放入110°C環(huán)境60min，取出室溫放置至完全冷卻；
第二次發(fā)酵方法步驟如下 ①菌種活化取通過常規(guī)的微生物分離純化技術(shù)手段保種得到的土耳其香料煙葉細(xì)菌接種于提前準(zhǔn)備好的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上，在35°C恒溫環(huán)境中培養(yǎng)12h，得到活化菌種；②種子液配制取活化好的菌種，接種于牛肉膏蛋白胨液體培養(yǎng)基，120°C滅菌 40min所得的二級種子培養(yǎng)液，置于20°C、150轉(zhuǎn)搖床培養(yǎng)ld，得到二級種子液；③發(fā)酵將培養(yǎng)好的二級種子液接種于滅活后的一級發(fā)酵液中，接種比例為二級種子液一級發(fā)酵物=1 10 (W/W)，使二級種子液和一級發(fā)酵液充分混合均勻。將接種好的一級發(fā)酵液置于20°C、150轉(zhuǎn)的搖床封閉發(fā)酵10d，得到二級發(fā)酵液；濃縮精制方法步驟如下①濃縮取二級發(fā)酵液，采用常規(guī)的減壓濃縮方法將二級發(fā)酵液減壓濃縮成浸膏；②精制向浸膏中加入95%乙醇，加入比例為膏體乙醇=1 6(W/W)，使膏體充分回溶，再在-20°C環(huán)境靜置冷凍3d沉降除雜，過濾，減壓濃縮，即得到水香薷煙用香料。實施例4第一次發(fā)酵方法步驟如下①菌種活化取通過常規(guī)的微生物分離純化手段保種得到的蘋果酵母接種于提前準(zhǔn)備好的PDA培養(yǎng)基上，在30°C恒溫環(huán)境中培養(yǎng)Mh，得到活化菌種。②種子液配制取活化好的菌種，接種于PDA液體培養(yǎng)基，110°C滅菌40min所得一級種子培養(yǎng)液，置于35°C、150轉(zhuǎn)搖床培養(yǎng)ld，得到一級種子液；③原料處理選取新鮮的廣西水香薷原料，按水香薷原料水=1 5(ff/ff)打漿后，再按水香薷原料水=1 10(W/W)加入水，在70°C熱回流提取池，然后過濾提取液， 將濾液分裝(100 300ml/瓶)，再在110°C 125°C包裝滅菌50min，得到無菌水香薷提取液；④發(fā)酵將培養(yǎng)好的一級種子液接種于無菌水香薷提取液中，接種比例為一級種子液無菌水香薷提取液=1 100 (W/W)，使一級種子液和水香薷提取液充分混合均勻， 將接種好的水香薷提取液置于20°C、150轉(zhuǎn)搖床封閉發(fā)酵10d，得到一級發(fā)酵液；⑤滅活將一級發(fā)酵液放入125°C環(huán)境20min，取出室溫放置至完全冷卻；第二次發(fā)酵方法步驟如下①菌種活化取通過常規(guī)的微生物分離純化技術(shù)手段保種得到的土耳其香料煙葉細(xì)菌接種于提前準(zhǔn)備好的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上，在20°C恒溫環(huán)境中培養(yǎng)36h，得到活化菌種；②種子液配制取活化好的菌種，接種于牛肉膏蛋白胨液體培養(yǎng)基，125°C滅菌 20min所得的二級種子培養(yǎng)液，置于25°C、150轉(zhuǎn)搖床培養(yǎng)1 2d，得到二級種子液；③發(fā)酵將培養(yǎng)好的二級種子液接種于滅活后的一級發(fā)酵液中，接種比例為二級種子液一級發(fā)酵物=1 50 (W/W)，使二級種子液和一級發(fā)酵液充分混合均勻，將接種好的一級發(fā)酵液置于30°C、150轉(zhuǎn)的搖床封閉發(fā)酵6d，得到二級發(fā)酵液；濃縮精制方法步驟如下①濃縮取二級發(fā)酵液，采用常規(guī)的減壓濃縮方法將二級發(fā)酵液減壓濃縮成浸膏；②精制向浸膏中加入95%乙醇，加入比例為膏體乙醇=1 1(W/W)，使膏體充分回溶，再在4°C環(huán)境靜置冷凍Id沉降除雜，過濾，減壓濃縮，即得到水香薷煙用香料。
實施例5 第一次發(fā)酵方法如下①菌種活化取通過常規(guī)的微生物分離純化手段保種得到的西瓜酵母接種于提前準(zhǔn)備好的PDA培養(yǎng)基上，在20°C 35°C恒溫環(huán)境中培養(yǎng)12 36h，得到活化菌種。②種子液配制取活化好的菌種，接種于一級種子培養(yǎng)液(PDA液體培養(yǎng)基， 110°C 125°C滅菌20 40min，置于20°C !35°C、150轉(zhuǎn)搖床培養(yǎng)1 2d，得到一級種子液；③原料處理選取新鮮的云南水香薷原料，按水香薷原料水=1 2 5_) 打漿后，再加入按水香薷原料溶劑=1 7加入溶劑。所用溶劑為水與丙二醇的復(fù)合溶劑，其水與丙二醇的重量比為1 1。加入溶劑后在160°C 180°C熱回流提取1 池，過濾提取液，將濾液分裝(100 300ml/瓶)，在110°C 125°C包裝滅菌30min，得到無菌水香薷提取液；④發(fā)酵將培養(yǎng)好的一級種子液接種于無菌水香薷提取液中，接種比例為一級種子液無菌水香薷提取液=1 80 100 (W/W)，使一級種子液和水香薷提取液充分混合均勻，將接種好的水香薷提取液置于20°C 35°C，150轉(zhuǎn)搖床封閉發(fā)酵8 10d，得到一級發(fā)酵液；⑤滅活將一級發(fā)酵液放入110°C 125°C環(huán)境30min，取出室溫放置至完全冷卻；第二次發(fā)酵方法及濃縮精制方法同實施例1。本發(fā)明所用的菌種為兩類，一類為通過常規(guī)的分離純化技術(shù)手段保種得到的水果酵母，如西瓜、刺梨、車?yán)遄?、荔枝、蘋果、山竹、羊奶果等水果酵母，另一類為煙葉細(xì)菌，如津巴布韋煙葉、紅花大金元煙葉、土耳其煙葉等煙葉細(xì)菌中的一種或幾種，菌種可以為菌曲或菌液形式。本發(fā)明所用的微生物培養(yǎng)基為牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基、PDA培養(yǎng)基、牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基、PDA培養(yǎng)基。一級種子液和二級種子液的成分為磷酸二氫鉀(Κ2Η2Ρ04)、氯化鈉 (NaCl)、氯化鉀(KCl)、硫酸銨((NH4)2SO4)、硫酸鐵(FeSO4)、檸檬酸鈉(C6H5Na3O7 · 2H20)、硫酸鎂(MgSO4 · 2H20)、葡萄糖、蔗糖等中的一種或幾種。
權(quán)利要求
1.多菌種復(fù)合發(fā)酵制備水香薷煙用香料的方法，其特征在于，采用兩次發(fā)酵后再濃縮精制，制備得到水香薷煙用香料；第一次發(fā)酵方法步驟如下①菌種活化取微生物分離純化技術(shù)手段保種得到的水果酵母接種于準(zhǔn)備好的PDA培養(yǎng)基上，在20°C 35°C恒溫環(huán)境中培養(yǎng)12 36小時，得到活化菌種；②種子液配制取活化好的菌種，接種于PDA液體培養(yǎng)基、110°C 125°C滅菌20 40 分鐘得到的一級種子培養(yǎng)液，置于搖床在20°C 35°C、150轉(zhuǎn)條件下培養(yǎng)1 2天，得到一級種子液；③原料處理選取新鮮水香薷原料，按重量比水香薷原料溶劑=1 2 5加入溶劑打漿后，再按重量比水香薷原料溶劑=1 5 10加入溶劑，在70°C 180°C條件下熱回流提取1 3小時，過濾提取液，將濾液分裝、包裝滅菌得到無菌水香薷提取液；④發(fā)酵將培養(yǎng)好的一級種子液接種于無菌水香薷提取液中并充分混合均勻，接種重量比例為一級種子液無菌水香薷提取液=1 10 100，再將接種好的水香薷提取液置于20°C 35°C、150轉(zhuǎn)的搖床封閉發(fā)酵3 10天，得到一級發(fā)酵液；⑤滅活將一級發(fā)酵液放入110°C 125°C環(huán)境20 60分鐘，取出室溫放置至完全冷卻；第二次發(fā)酵方法步驟如下①菌種活化取微生物分離純化技術(shù)手段保種得到的煙葉細(xì)菌接種于提前準(zhǔn)備好的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上，在20°C 35°C恒溫環(huán)境中培養(yǎng)12 36小時，得到活化菌種；②種子液配制取活化菌種，接種于牛肉膏蛋白胨液體培養(yǎng)基、110°C 125°C滅菌 20 40分鐘得到的二級種子培養(yǎng)液，置于20°C 35°C、150轉(zhuǎn)的搖床培養(yǎng)1 2天，得到二級種子液；③發(fā)酵將培養(yǎng)好的二級種子液接種于滅活后的一級發(fā)酵液中并充分混合均勻，接種重量比例為二級種子液一級發(fā)酵物=1 10 100，再將接種好的一級發(fā)酵液置于 20°C 35°C，150轉(zhuǎn)的搖床封閉發(fā)酵3 10天，得到二級發(fā)酵液；提取精制步驟如下①濃縮取二級發(fā)酵液，減壓濃縮成浸膏；②精制向浸膏加入溶劑，重量比為膏體溶劑=1 1 6，待膏體充分回溶后，在 4°C _20°C環(huán)境靜置冷凍1 3天沉降除雜，過濾，減壓濃縮，即得到水香薷煙用香料。
2.如權(quán)利要求1所述的多菌種復(fù)合發(fā)酵制備水香薷煙用香料的方法，其特征在于，本發(fā)明所用的菌種為兩類，一類為水果酵母，另一類為煙葉細(xì)菌。
3.如權(quán)利要求1或2所述的多菌種復(fù)合發(fā)酵制備水香薷煙用香料的方法，其特征在于， 所述活化菌種可以為菌曲或菌液形式。
4.如權(quán)利要求1所述的多菌種復(fù)合發(fā)酵制備水香薷煙用香料的方法，其特征在于，本發(fā)明所用的微生物培養(yǎng)基為牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基或PDA培養(yǎng)基。
5.如權(quán)利要求1所述的多菌種復(fù)合發(fā)酵制備水香薷煙用香料的方法，其特征在于，所述一級種子液和二級種子液的成分為磷酸二氫鉀(K2H2PO4)、氯化鈉(NaCl)、氯化鉀(KCl)、 硫酸銨((NH4)2SO4)、硫酸鐵(FeSO4)、檸檬酸鈉(C6H5Na3O7 · 2H20)、硫酸鎂(MgSO4 · 2H20)、葡萄糖、蔗糖等中的一種或幾種。
6.如權(quán)利要求1所述的多菌種復(fù)合發(fā)酵制備水香薷煙用香料的方法，其特征在于，所述溶劑為水或醇類或水與醇類的復(fù)合溶劑。
全文摘要
多菌種復(fù)合發(fā)酵制備水香薷煙用香料的方法，是采用兩次發(fā)酵后再濃縮精制，制備得到水香薷煙用香料；第一次發(fā)酵是經(jīng)菌種活化、種子液配制、原料處理、發(fā)酵得到一級發(fā)酵液后滅活；第二次發(fā)酵是經(jīng)菌種活化、種子液配制得到的二級種子液接種于一級發(fā)酵液中并充分混合均勻，再將接種好的一級發(fā)酵經(jīng)發(fā)酵得到二級發(fā)酵液；然后將二級發(fā)酵液，減壓濃縮成浸膏，再精制即得到水香薷煙用香料。本發(fā)明制備的煙用香料與煙香協(xié)調(diào)性好，還具有降低刺激、柔和煙氣、改善余味的作用，對卷煙的香氣和吸味品質(zhì)改善作用效果明顯，使煙草清香、甜香突出，飽滿度和豐富性提升。
文檔編號C12P1/02GK102154370SQ20101058457
公開日2011年8月17日 申請日期2010年12月13日 優(yōu)先權(quán)日2010年12月13日
發(fā)明者劉煜宇, 吳長偉, 尹開云, 李仙, 王松峰, 端李祥, 鄭琳 申請人:云南瑞升煙草技術(shù)(集團(tuán))有限公司